Peralatan HPLC secara prinsip terdiri dari :

 Tempat pelarut
 Pompa
 Tempat injeksi sampel
 Kolom
 Detektor
 Rekorder
1. Fasa mobile (pelarut)
pelarut yang digunakan harus dilakukan degassing untuk mengeluarkan
gas terlarut yang tidak diinginkan.
2. Sistem pompa
ada dua jenis pompa, yang mendasari pemakaiannya yaitu : tekanan
tetap dan volume tetap.
3. Flow controller (pengendali aliran)
untuk menstabilkan aliran fasa mobile akibat adanya perubahan tekanan
gas, temperatur dan viskositas.
4. Kolom
Tidak memerlukan temperatur yang tinggi, karena sifat ikatan kimia
terhadap fasa stasioner sangat sensitif terhadap temperatur yang tinggi.
5. Detektor
karakteristik detektor untuk HPLC
- sensivitasnya tinggi
- respon yang menyeluruh terhadap sampel
- tidak merusak sampel
- tidak sensitif terhadap perubahan temperatur dan kecepatan aliran
fasa mobile
- dapat beroperasi secara terus menerus.

6. Rekorder
Mengeluarkan output berupa kromatogram.
 Cepat
 Resolusi
 Sensitivitas detektor
 Kolom yang dapat digunakan kembali
 Ideal untuk zat bermolekul besar dan berionik
 Mudah rekoveri sampel
 Pengenalan suatu komponen secara
kualitatif didasarkan pada waktu yang
diperlukan suatu puncak untuk keluar
dari ujung kolom. Data kuantitatif dapat
diperoleh dengan menentukan luas
puncaknya.

Contoh soal :
 Data luas puncak berikut diperoleh dari
kromatogram campuran butil alkohol
(faktor koreksi detekton diperoleh darti
percobaan lain dengan jumlah alkohol
murni diketahui). Tentukan persentase
masing-masing butil alkohol.
 Alkohol Luas Puncak Faktor koreksi Luas puncak
(Cm) detektor sebenarnya
n- butil 2,74 0,603 1,652
i- butil 7,61 0,530 4,033
s- butil 3,19 0,667 2,178
t- butil 1,66 0,681 1,130
Jumlah luas puncak = 8,943
Penyelesaian :
1,652
% n- butil = ⎯⎯⎯⎯ x 100 % = 18,3 %
8,943

4,033
% i- butil = ⎯⎯⎯⎯ x 100 = 45,1
8,943

2,718
% s- butil = ⎯⎯⎯⎯ x 100 = 23,8
8,943
1,130
% t- butil = ⎯⎯⎯⎯ x 100 = 12,6
8,943
SYUKRON
 Fase diam pada HPLC
 Perbedaan adsorpsi dari spektroskopi
dengan kromatografi