Machine Translated by Google

DOI: 10.7860/JCDR/2016/15837.7460
Mengulas artikel

Kultur Sel, Teknologi:

Mikrobiologi
Bagian

Meningkatkan Budaya dari

Mendiagnosis Penyakit Manusia
Shuaibu Abdullahi Hudu1 , Ahmed Subeh Alshri2 , Ahmad Syahida3 , Zamberi Sekawi4

ABSTRAK Kultur
sel melibatkan proses isolasi sel yang kompleks dari lingkungan alaminya (in vivo) dan pertumbuhan selanjutnya dalam kondisi lingkungan buatan yang
terkontrol (in vitro). Sel-sel dari jaringan atau organ tertentu dibiakkan sebagai lini sel jangka pendek atau mapan yang banyak digunakan untuk penelitian
dan diagnosis, terutama dalam aspek infeksi virus, karena isolasi virus patogen bergantung pada ketersediaan kultur sel yang diizinkan. Kultur sel
menyediakan pengaturan yang diperlukan untuk deteksi dan identifikasi banyak patogen manusia, yang dicapai melalui isolasi virus dalam kultur sel
sebagai "standar emas" untuk penemuan virus. Dalam ulasan ini, kami merangkum pandangan para peneliti tentang peran teknologi kultur sel saat ini
dalam diagnosis penyakit manusia. Kemajuan teknologi beberapa tahun terakhir, dimulai dengan pengembangan antibodi monoklonal hingga teknik
molekuler, memberikan pendekatan penting untuk mendeteksi keberadaan infeksi virus. Mereka juga digunakan sebagai dasar untuk menetapkan tes
cepat untuk patogen yang baru ditemukan. Kombinasi isolasi virus dalam kultur sel dan metode molekuler masih sangat penting dalam mengidentifikasi
virus yang sebelumnya tidak dikenal.
Oleh karena itu, kultur sel harus dianggap sebagai prosedur mendasar dalam mengidentifikasi agen virus yang dicurigai menular.

Kata kunci: Penemuan patogen, Protein rekombinan, cell line transgenik, Isolasi virus

Pendahuluan Teknik laboratorium jika agen virus menular dicurigai. Teknik ini digunakan untuk
kultur sel pertama kali dikembangkan pada awal abad ke-20 sebagai menemukan virus Ebola pada pasien yang diduga demam kuning dan
metode mempelajari perilaku sel hewan secara in vitro [1]. Prinsip kultur sebaliknya dalam beberapa penelitian [14-17].
sel terbentuk ketika Roux, seorang ahli embriologi, menggunakan garam Kemajuan terbaru dalam metagenomik dengan teknik pengurutan yang
hangat untuk memelihara embrio ayam selama beberapa hari, sehingga dalam telah memungkinkan untuk menganalisis genom mikroorganisme
muncullah prinsip kultur jaringan [2]. Oleh karena itu, kultur sel didefinisikan tanpa mengisolasi virus melalui kultur sel. Hal ini dilakukan melalui
sebagai penghilangan sel hewan dan perbanyakannya serta budidaya in sekuensing throughput tinggi menggunakan produk DNA yang diamplifikasi
vitro dalam lingkungan buatan yang cocok untuk pertumbuhannya [3,4]. secara acak dan perbandingan sekuens dengan bank sekuens ekstensif
Hal ini biasanya dimulai dengan biakan primer yang bertujuan untuk yang tersedia untuk identifikasi akhir dari agen yang terdeteksi.
mencapai pertemuan, yaitu pembentukan satu lapisan sel dalam labu Ini dimungkinkan karena primer acak dapat secara khusus memperkuat
biakan yang dilengkapi nutrisi dan faktor pertumbuhan yang diperlukan. template untuk pengurutan tanpa memiliki pengetahuan sebelumnya
Dengan pencapaian pertemuan, sel-sel kemudian dilewatkan atau tentang agen yang dicurigai [18-20]. Teknik ini mudah maju dalam aspek
disubkultur dari primer ke sekunder dan selanjutnya ke tersier, sampai penemuan patogen. Telah digunakan selamanya untuk menemukan virus
garis sel kontinu terbentuk. Isolasi virus dalam kultur sel adalah tenaga seperti virus Lioviu [21], virus Schmallenberg [22] dan virus Bas-Congo
kerja [23]. Dalam kasus pasien yang sakit parah atau wabah penyakit menular,
intensif, dan memakan waktu [5,6]. Banyak virus yang penting secara penting untuk mengidentifikasi agen penyebab infeksi. Oleh karena itu
klinis masih sulit tumbuh atau tidak tumbuh sama sekali dalam kultur tinjauan ini bertujuan untuk menjelaskan beberapa peristiwa di mana virus
jaringan sementara yang lain mungkin memerlukan sistem kultur canggih diisolasi untuk mengidentifikasi agen penyebab dan pengenalan penyakit
yang mungkin tidak cocok untuk penggunaan laboratorium diagnostik atau yang muncul, dengan uji diagnosis laboratorium tambahan seperti
tidak tersedia sama sekali. Ini mungkin mengurangi dampak kultur jaringan Mikroskop Elektron (EM), teknik serologis dan molekuler.
dalam diagnosis klinis, sehingga membuatnya kurang menarik dalam
mendiagnosis penyakit manusia [5,7] sementara, beberapa ilmuwan Inokulasi spesimen klinis dari pasien ke sel kultur memungkinkan
menemukan kultur jaringan sebagai relatif tidak memihak, yang amplifikasi biologis virus ke tingkat di mana virus dapat dideteksi atau
keterbatasannya hanya pada kemampuan virus untuk tumbuh. pada baris dilihat di bawah EM dan selanjutnya dikonfirmasi dengan teknik lain seperti
sel yang dipilih [8,9]. Namun, sel Vero E6 dianggap sebagai yang paling serologi, imunohistokimia serta uji antibodi fluoresensi dan uji molekuler.
permisif dari semua garis sel dengan menyediakan media serbaguna metode yang mengarah ke karakterisasi lebih lanjut dari spesies dan strain
untuk pemulihan patogen yang tidak diketahui, bersama dengan Mikroskopi virus [24-26]. Oleh karena itu, sistem berbasis kultur untuk isolasi virus
Elektron (EM) untuk deteksi dan klasifikasi agen yang tidak diketahui [10,11].
telah menjadi “standar emas” untuk diagnosis infeksi virus dalam virologi
Pengamatan kultur sel melalui EM dapat memberikan petunjuk awal klinis dan telah melayani laboratorium dengan baik selama beberapa
tentang agen etiologi dan selanjutnya memandu penyelidikan laboratorium dekade [27]. Namun, penggunaan dan kepentingan relatif dari kultur virus
dan epidemiologi. Hal ini sangat penting secara klinis khususnya, selama telah menurun karena perkembangan teknik molekuler yang cepat dan
wabah penyakit karena mengetahui agen etiologi akan membantu pejabat akurat [28-30]. Oleh karena itu, tujuan dari ulasan ini adalah untuk
kesehatan masyarakat untuk melembagakan tanggapan tepat waktu dan meringkas secara kritis pandangan para peneliti tentang peran teknologi
mencegah atau membatasi penyebaran lebih lanjut dari agen penyebab [12,13].
kultur sel dalam diagnosis penyakit manusia.
Oleh karena itu, penggunaan teknik klasik isolasi virus dalam kultur
jaringan dan pemeriksaan dengan EM dikatakan penting dalam mendeteksi
virus yang sebelumnya tidak dikenal. Berlawanan dengan pandangan metodologi
sebelumnya, kultur sel adalah teknik dasar yang dapat dilakukan dalam Pencarian untuk artikel jurnal peer-review dilakukan menggunakan
diagnostik dan mikrobiologi rumah sakit database langganan online Universitas Putra Malaysia di

Jurnal Penelitian Klinis dan Diagnostik. 2016 Mar, Vol-10(3): DE01-DE05 1

Machine Translated by Google
Shuaibu Abdullahi Hudu et al., Peran Kultur Sel dalam Diagnosis Laboratorium
bidang Ilmu Kesehatan dan Kedokteran melalui database seperti; Mesin
pencari Medline, SCOPUS dan Google Scholar. Semua pencarian dibatasi
untuk publikasi dari tahun 2000 hingga 2015 kecuali jika diperlukan,
publikasi yang lebih lama dapat dipertimbangkan. Semua publikasi dalam
bahasa Inggris dan duplikatnya telah dihapus. Artikel terakhir yang dicari
adalah artikel yang diterbitkan hingga 31 Mei 2015. Serch database online
menghasilkan 2473 artikel yang disaring berdasarkan judul dan relevansi
abstrak, tidak termasuk abstrak konferensi, komentar dan komunikasi
singkat mempertahankan 260 artikel untuk studi ulasan teks lengkap
Kultur sel dan mikroskop elektron dalam diagnosis Mikroskopi
Elektron (EM) dan isolasi kultur sel berperan dalam menemukan agen
penyebab dalam manifestasi klinis yang tidak biasa.
Salah satu penelitian melaporkan isolasi virus Bunya pada pasien dengan
riwayat gigitan kutu [31]. Awalnya, ada kecurigaan Ehrlichiasp, oleh karena
itu, leukosit dari pasien yang dicurigai diinokulasi ke dalam sel DH82 (garis
sel monosit anjing) dan menunjukkan beberapa perubahan sitologis [Tabel /
Gambar-1]. Sel-sel tersebut kemudian diproses untuk diperiksa dengan EM
setelah virus Bunya diamati daripada bakteri yang dicurigai. Pada sel yang
terinfeksi virus Bunya, partikel virus ditemukan sebagai kuncup pada vesikel
dan ekstraseluler [Tabel/Gambar-2]. Amplop virus berbentuk bulat dengan
beberapa proyeksi di permukaan partikel virus dan virus memiliki inti
granular.
Kultur Sel dan RT-PCR Kultur sel
dan real time reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR)
telah digunakan secara luas dalam pengaturan klinis untuk mengidentifikasi
virus influenza [32,33]. Meskipun, memakan waktu dan padat karya serta
membutuhkan personel berketerampilan tinggi dengan peralatan dan
kondisi laboratorium khusus, sehingga tidak cocok untuk pengaturan
perawatan kesehatan primer dan negara berpenghasilan rendah.
Namun demikian, kultur sel tetap penting dalam memastikan agen penyebab
infeksi pada wabah. Kasus infeksi influenza H7 N9 yang dilaporkan saat ini
dikonfirmasi oleh kultur sel dan RT PCR [34].
[Tabel/Gambar-1]: a) Virus yang terlihat menginduksi efek sitopatik pada sel DH82 8 hari
setelah infeksi dengan virus Bunya. Sel yang terinfeksi menunjukkan partikel granular yang
terlihat dan berdiferensiasi menjadi makrofag dengan pseudopodia memanjang. b) Virus Bunya
tumbuh dalam sel vero, terdeteksi pada immunofluorescenceassay [31].
[Tabel/Gambar-2]: a) Noda negatif Virus Bunya dimurnikan dari sel Vero yang terinfeksi. b)
Mikroskop elektron transmisi sel yang terinfeksi virus (DH82) ditunjukkan oleh panah hitam [31].
2 Jurnal Penelitian Klinis dan Diagnostik. 2016 Mar, Vol-10(3): DE01-DE05
www.jcdr.net
Kultur Sel - Metabolomik Metabolomik
kultur sel dapat digunakan untuk mengidentifikasi biomarker dari kondisi
patologis serta cara jalur metabolisme yang menghasilkan biomarker
tersebut. Metabolit memainkan peran penting dalam diagnosis kanker,
kekambuhan dan prognosis dengan mengidentifikasi biomarker kanker
baru. Perubahan kecil dalam metabolisme dapat dideteksi pada produk
proses seluler yang mengarah pada pengembangan model prognostik yang
akan berguna untuk deteksi dini kanker.
Beberapa penelitian meneliti kemampuan sel kanker manusia untuk
mengeluarkan senyawa organik yang mudah menguap [35,36], beberapa
di antaranya mampu mendeteksi pelepasan asetaldehida dari jalur sel
kanker paru-paru CALU-1 dan SK-MES [37,38].
Kultur Sel Deteksi Cepat Dengan
adanya garis sel yang diproduksi secara komersial, dibudidayakan yang
digunakan untuk deteksi cepat berbagai virus seperti R-Mix (Diagnostic
hybrid, Inc) yang merupakan campuran sel monolayer yang dipilih
berdasarkan kemampuannya mengisolasi virus yang berbeda yang
menyebabkan infeksi saluran pernapasan. R-Mix mengandung jaringan
dari paru-paru (MV1LU) dan sel A549 sebagai sel segar yang siap
digunakan, atau suspensi sel beku yang dapat dicairkan oleh laboratorium
atau sebagai lapisan tunggal beku dalam vial cangkang yang siap
digunakan. Oleh karena itu, campuran R telah dilaporkan menawarkan
teknik yang cepat dan sensitif waktu untuk mengidentifikasi virus yang
biasanya terlibat dalam menyebabkan infeksi pernapasan tanpa keterampilan
khusus yang diperlukan [39, 40].
Garis Sel Transgenik dan Deteksi Virus Teknologi
transgenik dalam kultur sel melibatkan penggabungan bahan genomik yang
stabil ke dalam sel sehingga begitu virus tertentu memasuki sel, hal itu
memicu, produksi enzim spesifik virus yang mudah diukur [41,42]. Materi
genetik dapat berasal dari virus, bakteri atau seluler dan disebut sebagai
segmen gen reporter yang diinduksi virus [43,44]. Di laboratorium diagnostik
sel transgenik hanya dapat berguna jika mereka memiliki promotor yang
diinginkan yang cukup dalam sel yang terinfeksi tetapi secara signifikan
diregulasi melalui protein trans-aktivator virus dengan cara yang spesifik,
tetapi tidak memungkinkan protein transaktivasi virus heterolog untuk
merangsang promotor. Agar sistem transgenik bekerja, virus yang akan
dideteksi harus mampu menempel pada dinding sel dan memulai siklus
replikasinya tanpa mencapai titik akhir tetapi cukup untuk mengaktifkan gen
melalui promotor. Hal ini memungkinkan penggunaan garis sel yang
ditingkatkan secara genetik dalam meningkatkan pertumbuhan virus,
dengan demikian, memfasilitasi deteksi sel yang terinfeksi virus sehingga,
menyediakan sistem deteksi yang spesifik, sensitif, dan sangat sederhana
untuk dilakukan [45,46]. Teknologi ini berhasil diterapkan dalam
mengidentifikasi virus polio melalui penggunaan sel transformasi sel HeLa
yang rentan [47]. Namun, identifikasinya adalah dengan pewarnaan dengan
antibodi monoklonal dan dapat dideteksi dalam waktu inokulasi 16 sampai
24 jam [48,49]. Sebaliknya, sistem transgenik yang lebih cepat yang mampu
mendeteksi HSV dengan mudah dalam 24 tahun dikembangkan sedemikian
rupa sehingga tidak memerlukan keahlian medis atau antibodi monoklonal
yang mahal. Ini melibatkan penggunaan promotor HSV turunan UL39 yang
mengkode sub unit pendidikan ulang ribo nukleotida besar [50,51].
Ekspresi protein rekombinan untuk deteksi antibodi virus
influenza Teknologi protein rekombinan penting dalam memenuhi
permintaan untuk uji yang mudah digunakan, cepat dan andal di laboratorium
diagnostik dan telah berguna untuk survei serologis infeksi [52]. Protein
rekombinan dapat diekspresikan dan digunakan untuk deteksi antibodi
virus influenza. Misalnya, gen NSI berhasil dimurnikan dan dikloning
menjadi vektor [pCR2.1 TOPO TA kloning (3,9 kb], dan kemudian diubah
menjadi sel kompeten (TOPOIO F'E .coli strain) yang disebarkan pada LB
agar dan diinkubasi pada suhu 37° c sepanjang malam Koloni positif
mengandung gen NSI
Machine Translated by Google
www.jcdr.net
dilakukan skrining menggunakan PCR. Hasilnya menunjukkan pita yang diharapkan
sebesar 690bp pada gel agarosa [Tabel/Gambar 3] [53]. Itu diurutkan dan dipastikan
berada dalam bingkai dengan terminal-N, bersama dengan orientasi yang tepat.
Plasmid rekombinan kemudian diubah menjadi strain sel inang B12 (DE3) pLysS
untuk diekspresikan. Proses transformasi dicapai dengan menggunakan metode kejut
panas. Ekspresi protein yang diekspresikan dianalisis dengan SDS-PAGE [Tabel/
Gambar-4] yang selanjutnya dikonfirmasi oleh western-blotting dengan protein 13
KDa yang diharapkan menjadi imunokreatif oleh antibodi anti-NS poliklonal [Tabel/
Gambar-5] [54]. Ini menegaskan bahwa antigen dapat digunakan untuk mendeteksi
antibodi spesifik terhadap virus influenza menggunakan Elisa, yang memiliki
keuntungan besar dibandingkan teknik lain untuk mendeteksi antibodi spesifik.
Masalah yang timbul dari ulasan ini
Standardisasi
Tidak seperti teknik molekuler, hasil kultur sel dapat sangat berbeda, tergantung
pada pengumpulan, pengangkutan, dan penanganan
[Tabel/Gambar-3]: Hasil ligasi koloni rekombinan positif yang berhasil. Jalur 1: Tangga DNA
1kb; Jalur 2-13: koloni positif dengan NS1; Jalur 4, 7, 8 dan 12: koloni negatif tanpa NS1
dimasukkan [53].
[Tabel/Gambar-4]: Profil SDS-PAGE dari protein NS1 (13KDa) yang tidak dimurnikan dan
plasmid yang tidak diinduksi. Jalur 1: tangga protein; Jalur 2 - 4: plasmid rekombinan yang
tidak diinduksi pada jam nol; Jalur 5 dan 6: protein NS1 (13KDa) rekombinan yang tidak
dimurnikan [54].
[Tabel/Gambar-5]: Hasil analisis western blot dari protein murni dari E. coli yang mengandung
pRSET B/NS1. Jalur 1: tangga protein; Jalur 2 dan 3: protein NS1 rekombinan murni [54].
Jurnal Penelitian Klinis dan Diagnostik. 2016 Mar, Vol-10(3): DE01-DE05
Shuaibu Abdullahi Hudu et al., Peran Kultur Sel dalam Diagnosis Laboratorium
spesimen untuk mempertahankan viabilitas virus dan sel sehat yang diinokulasi [55].
Para peneliti mendukung dan menentang pentingnya kultur sel di laboratorium klinis.
Sementara beberapa percaya itu
akan ada situasi yang menjamin penggunaan kultur jaringan
di laboratorium virologi diagnostik, yang lain berpikir bahwa itu mungkin benar untuk
beberapa tingkat tetapi tidak pada titik perawatan, oleh karena itu, mengubah
signifikansi kultur sel dalam diagnostik [56,57]. Namun, uji kuantitatif molekuler masih
sangat bervariasi sehingga diperlukan standardisasi [58,59]. Isolasi virus dapat
dilakukan bila diperlukan untuk tujuan tertentu oleh daerah setempat yang dipilih
serta laboratorium nasional yang memiliki keahlian yang dibutuhkan dan
mempertahankan sistem kultur sel [60].
Kultur sel yang memakan
waktu dengan cepat kehilangan tempatnya dan signifikansi relatifnya dalam diagnosis
penyakit manusia di era ini menginginkan diagnosis klinis yang cepat dan akurat
yang diperlukan untuk intervensi dini dan efektif. Di sisi lain, teknik molekuler
memberikan metode diagnostik yang akurat dan tak lekang oleh waktu. Oleh karena
itu, teknik molekuler menjadi “standar emas” baru dan dengan cepat menggantikan
kultur sel tradisional, metode diagnostik dini dan akurat yang berdampak signifikan
pada perawatan pasien dalam membatasi perluasan penyakit melalui pengobatan
tepat waktu, sehingga mengurangi rawat inap yang tidak perlu, antimikroba
penggunaan dan biaya yang terkait [61].
Padat Karya Kultur sel
membutuhkan keahlian dan teknolog terlatih serta peralatan canggih. Oleh karena
itu, penting untuk menggunakan teknologi yang tersedia berdasarkan situasi tertentu
yang akan menghasilkan hasil yang lebih bermanfaat. Dengan penggunaan teknologi
transgenik identifikasi patogen ditemukan berhasil, namun relatif padat karya dan
membutuhkan keahlian. Dengan berkembangnya teknik kultur sel cepat yang
menggunakan pewarnaan fluoresensi, di mana perubahan warna digunakan untuk
mengidentifikasi patogen, kebutuhan tenaga kerja intensif berkurang karena teknolog
tidak harus ahli dalam mempertahankan CPE dalam sel [62]. Oleh karena itu,
laboratorium harus mengevaluasi sumber daya, fasilitas, tingkat pelatihan dan
keahlian yang dibutuhkan.
Kepekaan
Jelas dari ulasan ini bahwa beberapa peneliti berpandangan
bahwa kultur sel kurang sensitif dibandingkan dengan metode molekuler seperti PCR,
dengan pembatasan spektrum virus yang besar. Dengan demikian, membuat kultur
sel kurang berguna untuk virus “non culturable”, membatasi kepekaannya untuk
digunakan dalam diagnosis [63-65]. Di sisi lain beberapa kekhawatiran atas metode
molekuler seperti PCR adalah negatif palsu karena penghambat PCR dan keragaman
genetik virus serta positif palsu sebagai akibat kontaminasi infeksi laten dan koinfeksi
virus. Oleh karena itu, penting untuk menggunakan kultur sel dalam memantau dan
mengevaluasi sensitivitas dan spesifisitas metode molekuler.
Gambaran umum
Para penulis yang mendukung dan menentang penggunaan kultur sel dalam diagnosis
penyakit manusia melakukan penelitian mereka dengan baik dan hasilnya demikian
disajikan dengan baik kecuali untuk diskusi tentang hasil yang menunjukkan dengan
jelas sifat rabun yang digunakan oleh mereka yang menentang dan untuk kultur sel
melihatnya. Oleh karena itu, kritik saya didasarkan pada poin-poin berikut: Penting
untuk dicatat bahwa, deteksi patogen menggunakan teknik pengurutan molekuler
atau generasi berikutnya hanyalah langkah pertama; ada kebutuhan untuk
menentukan apakah patogen yang teridentifikasi terkait dengan penyakit yang hanya
dapat dicapai melalui kultur sel; Jelas dari ulasan ini bahwa tidak ada pendekatan
tunggal yang optimal untuk deteksi virus dalam semua keadaan klinis. Oleh karena
itu, penting untuk menggabungkan teknik kultur sel dan molekuler, dalam
mengoptimalkan diagnosis infeksi virus untuk mencapai pengujian virus yang hemat
biaya, hemat tenaga kerja, dan penting secara medis.
3
Machine Translated by Google
Shuaibu Abdullahi Hudu et al., Peran Kultur Sel dalam Diagnosis Laboratorium www.jcdr.net

Dengan kemunculan dan kemunculan kembali strain virus baru
yang tidak dapat dideteksi dengan metode molekuler yang tersedia
saat ini, penting untuk menekankan kultur sel sebagai standar
emas dalam penemuan dan penyebab penyakit.
Kesimpulan dan rekomendasi Sebagai kesimpulan, kultur
sel adalah alat yang sangat diperlukan dalam kedokteran modern
dan penerapannya tak terhitung dalam diagnosis infeksi manusia.
[24] Gardner PS, McQuillin J. Diagnosis virus cepat: Penerapan imunofluoresensi: Butterworth-
Heinemann; 2014.
[25] Straus D. Deteksi sel dan virus yang cepat dan sensitif. Paten Google;
2011.
[26] Kango N. Buku Teks Mikrobiologi: IK International Pvt Ltd; 2010.
[27] De Serres G, Skowronski D, Wu X, Ambrose C. Rancangan tes-negatif: validitas, akurasi, dan
presisi estimasi kemanjuran vaksin dibandingkan dengan standar emas uji klinis terkontrol
plasebo acak. Pengawasan Euro. 2013;18(37).
[28] Emerson SU, Purcell RH. virus hepatitis E. Ulasan di Virologi Medis. 2003;13(3):145-54.

Metode kultur sel tidak memihak sampai batas tertentu dan hanya
[29] Yang S, Rothman RE. Diagnostik berbasis PCR untuk penyakit menular: penggunaan,
dibatasi oleh kemampuan virus untuk tumbuh dalam garis sel tertentu. keterbatasan, dan aplikasi masa depan dalam pengaturan perawatan akut. Penyakit
Namun, hal ini telah diatasi dengan munculnya teknologi kultur sel menular Lancet. 2004;4(6):337-48.

transgenik. Oleh karena itu, kami merekomendasikan: Kultur sel [30] Niester HG. Virologi klinis secara real time. Jurnal Virologi Klinis. 2002;25:3-12.
[31] Yu XJ, Liang MF, Zhang SY, Liu Y, Li JD, Sun YL, dkk. Demam dengan trombositopenia
harus digunakan dalam pemantauan spesifisitas dan sensitivitas terkait dengan bunyavirus baru di Cina. Jurnal Kedokteran New England. 2011;364(16):1523-32.
tes cepat berdasarkan uji antigen setiap tahun dan dokter harus
diberitahu tentang hasilnya; Kultur sel juga harus didorong untuk [32] Templeton KE, Scheltinga SA, Beersma MF, Kroes AC, Claas EC. Metode cepat dan sensitif
menggunakan multiplex real-time PCR untuk diagnosis infeksi virus influenza A dan
hasil tes cepat negatif yang diperoleh dari infeksi fitur pasien
influenza B, virus pernapasan syncytial, dan virus parainfluenza 1, 2, 3, dan 4. Journal of
selama prevalensi tinggi atau wabah serta untuk hasil positif selama Clinical Microbiology . 2004;42(4):1564-69.
prevalensi rendah: Kultur sel juga dapat digunakan dalam kombinasi [33] Rahman M, Vandermause MF, Kieke BA, Belongia EA. Kinerja Binax SEKARANG Flu A dan
dengan uji serologis PCR, histopatologi dan histokimia imun untuk B dan uji fluoresen langsung dibandingkan dengan gabungan kultur virus atau reaksi
berantai transkripsi polimerase terbalik untuk mendeteksi infeksi influenza selama musim
diagnosis dari virus yang tidak dikenal. Mereka juga digunakan 2006 hingga 2007. Mikrobiologi Diagnostik dan Penyakit Menular. 2008;62(2):162-66.
dalam membuat tes cepat untuk patogen yang baru ditemukan.
[34] Xia J, Liu L, Wang L, Zhang Y, Zeng H, Liu P, dkk. Infeksi eksperimental kelinci hamil dengan
virus hepatitis E menunjukkan kematian yang tinggi dan transmisi vertikal. Jurnal Virus
Referensi [1] Thorpe TA.
Hepatitis. 2015.
Sejarah kultur jaringan tanaman. Bioteknologi Molekuler. 2007;37(2):169-80.
[35] Zhao WD, Chen J, LIU FG, Wang M, LI JM. Poster Abstrak–Hati. Jurnal Penyakit Pencernaan
Cina. 2005;6:A31-A51.
[2] Fung S, Wong F, Hussain M, Lok A. Tanggapan berkelanjutan setelah 2 tahun pengobatan
[36] Beebe K, editor Mempekerjakan metabolomik dalam kultur sel dan bioproses untuk memperoleh
lamivudine hepatitis B e antigen-negatif hepatitis B kronis.
prediktabilitas, kontrol, dan kualitas yang lebih baik. Pertemuan Tahunan dan Pameran.
Jurnal Virus Hepatitis. 2004;11(5):432-38.
2014 (20-24 Juli 2014); 2014: Simb.
[3] Ganem D, Schneider RJ. Hepadnaviridae: virus dan replikasinya. Bidang
[37] Smith D, Wang T, Sulé-Suso J, Španel P, Haj AE. Kuantifikasi asetaldehida yang dilepaskan
Ilmu pengetahuan virus. 2001;2:2923-69.
oleh sel kanker paru secara invitro menggunakan spektrometri massa tabung aliran ion
[4] Willmer EN. Sel dan jaringan dalam kultur: metode, Biologi dan Fisiologi:
terpilih. Komunikasi cepat dalam spektrometri massa. 2003;17(8):845- 50.
Elsevier; 2013.
[5] Leland DS, Ginocchio CC. Peran kultur sel untuk deteksi virus di era teknologi. Tinjauan
[38] Kalluri U, Naiker M, Myers M. Metabolomik kultur sel dalam diagnosis kanker paru-paru—
Mikrobiologi Klinis. 2007;20(1):49-78.
pengaruh kondisi kultur sel. Jurnal penelitian nafas. 2014;8(2):027109.
[6] Oberste MS, Nix WA, Maher K, Pallansch MA. Identifikasi molekuler enterovirus yang
ditingkatkan dengan RT-PCR dan pengurutan amplikon. Jurnal Virologi Klinis.
[39] Tatematsu K, Tanaka Y, Kurbanov F, Sugauchi F, Mano S, Maeshiro T, dkk.
2003;26(3):375-77.
Varian genetik virus hepatitis B yang berbeda dari genotipe manusia dan kera yang diketahui
[7] Griffith LG, Naughton G. Tissue engineering--tantangan saat ini dan peluang yang berkembang.
diisolasi dari pasien Jepang dan untuk sementara ditugaskan ke genotipe baru J. Journal of
Sains. 2002;295(5557):1009-14.
Virology. 2009;83(20):10538-47.
[8] Khademhosseini A, Vacanti JP, Langer R. Kemajuan dalam rekayasa jaringan.
[40] Huang YT. sel paru cerpelai transgenik (yang mengekspresikan furin manusia) yang
Orang Amerika Ilmiah. 2009;300(5):64-71.
menunjukkan kepekaan yang meningkat terhadap infeksi atau mampu meningkatkan
[9] Ransohoff RM, Perry VH. Fisiologi mikroglial: rangsangan unik, respons khusus. Tinjauan
produktivitas virion infeksius; skrining obat; kit; vaksin. Paten Google; 2006.
Tahunan Imunologi. 2009;27:119-45.
[41] Deisseroth K, Airan RD. Garis sel, sistem dan metode untuk kontrol optik
[10] Abiko C, Mizuta K, Itagaki T, Katsushima N, Ito S, Matsuzaki Y, dkk. Wabah metapneumovirus
utusan sekunder. Paten Google; 2014.
manusia terdeteksi dengan menggunakan garis sel Vero E6 pada isolat yang dikumpulkan
[42] Dimitrov DS. Entri virus: mekanisme molekuler dan aplikasi biomedis.
di Yamagata, Jepang, pada tahun 2004 dan 2005. Journal of Clinical Microbiology.
Tinjauan Alam Mikrobiologi. 2004;2(2):109-22.
2007;45(6):1912-19.
[43] Lutz A, Dyall J, Olivo PD, Pekosz A. Gen reporter yang diinduksi virus sebagai alat untuk
[11] Weidmann M, Sanchez-Seco MP, Sall AA, Ly PO, Thiongane Y, Lô MM, dkk. Deteksi cepat
mendeteksi dan mengukur replikasi virus influenza A. Jurnal Metode Virologi.
Phlebovirus patogen manusia yang penting. Jurnal Virologi Klinis. 2008;41(2):138-42.
2005;126(1):13-20.
[44] Li Y, Larrimer A, Curtiss T, Kim J, Jones A, Baird-Tomlinson H, dkk. Tes virus influenza
[12] Goldsmith CS, Ksiazek TG, Rollin PE, Comer JA, Nicholson WL, Peret TC, dkk. Kultur sel dan
berdasarkan garis sel reporter yang diinduksi virus. Influenza dan Virus Pernafasan Lainnya.
mikroskop elektron untuk mengidentifikasi virus pada penyakit yang tidak diketahui
2009;3(5):241-51.
penyebabnya. Penyakit Menular yang Muncul. 2013;19(6):864.
[45] Palmer AE, Jin C, Reed JC, Tsien RY. Perubahan yang dimediasi Bcl-2 dalam retikulum
[13] Alberts B, Bray D, Hopkin K, Johnson A, Lewis J, Raff M, dkk. Biologi sel esensial: Ilmu
endoplasma Ca2+ dianalisis dengan sensor fluoresen yang dikodekan secara genetis.
Karangan Bunga; 2013.
Prosiding National Academy of Sciences Amerika Serikat. 2004;101(50):17404-09.
[14] Kann M, Bischof A, Gerlich WH. Model invitro untuk transpor nuklir genom hepadnavirus.
Jurnal Virologi. 1997;71(2):1310-16.
[46] Kang S, Ren D, Xiao G, Daris K, Buck L, Enyenihi AA, dkk. Pembuatan profil garis sel untuk
[15] McMullan LK, Frace M, Sammons SA, Shoemaker T, Balinandi S, Wamala JF, dkk.
meningkatkan produksi antibodi monoklonal. Bioteknologi dan Bioteknologi.
Menggunakan pengurutan generasi berikutnya untuk mengidentifikasi virus demam kuning di Uganda.
2014;111(4):748-60.
Ilmu pengetahuan virus. 2012;422(1):1-5.
[47] Mowafi F. Kemokin dan reseptor kemokin selama infeksi virus pada manusia: Institutionen for
[16] Muyembe-Tamfum JJ, Mulangu S, Masumu J, Kayembe J, Kemp A, Paweska JT. Wabah virus
mikrobiologi, tumör-och cellbiologi/Departemen Mikrobiologi, Tumor dan Biologi Sel; 2007.
Ebola di Afrika: dulu dan sekarang. Jurnal Penelitian Veteriner Onderstepoort.
2012;79(2):06-13.
[48] Anderson NW, Buchan BW, Ledeboer NA. Mikroskop cahaya, kultur, molekuler, dan metode
[17] Virus Demam Kuning Kuno G.23. Manual Mikroba Peka Keamanan dan
Racun. 2014:265. serologi untuk mendeteksi virus herpes simpleks. Jurnal Mikrobiologi Klinik. 2014;52(1):2-8.

[18] Mokili JL, Rohwer F, Dutih BE. Metagenomik dan perspektif masa depan dalam penemuan
[49] Atmar RL. Deteksi dan Karakterisasi Imunologis. Infeksi Virus Manusia: Springer; 2014. hlm.
virus. Pendapat saat ini dalam virologi. 2012;2(1):63-77.
47-62.
[19] Willner D, Hugenholtz P. Dari pengurutan dalam hingga penandaan virus: kemajuan terkini
[50] Ma JZ, Russell TA, Spelman T, Carbone FR, Tscharke DC. Ekspresi gen litik sering terjadi
dalam metagenomik virus. Bioesai. 2013;35(5):436-42.
pada infeksi laten HSV-1 dan berkorelasi dengan keterlibatan respons transkripsi intrinsik
[20] Lagier JC, Edouard S, Pagnier I, Mediannikov O, Drancourt M, Raoult D.
sel. patogen PLoS. 2014;10(7):e1004237.
Strategi saat ini dan masa lalu untuk kultur bakteri dalam mikrobiologi klinis. Tinjauan
[51] Fan F, Hari S, Lu X, Tang YW. Diagnosis laboratorium infeksi virus HSV dan varicella zoster.
mikrobiologi klinis. 2015;28(1):208-36.
Virologi Masa Depan. 2014;9(8):721-31.
[21] Pengeditan RNA virus Mehedi M. Ebola: Karakterisasi mekanisme dan produk gen. 2011.
[52] Tanda LV. Kunci dan Kunci Pengobatan: Antibodi Monoklonal dan Transformasi Perawatan
Kesehatan: Yale University Press; 2015.
[22] Liew FY, Pitman NI, McInnes IB. Fungsi terkait penyakit IL-33: anak baru dalam keluarga IL-1.
[53] Portela A, Melero JA, Martínez C, Domingo E, Ortín J. Sistem vektor primer yang memungkinkan
Ulasan Alam Imunologi. 2010;10(2):103-10.
amplifikasi dan ekspresi gen bergantung suhu dalam sel mamalia: regulasi ekspresi gen
[23] Deshmane SL, Kremlev S, Amini S, Sawaya BE. Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1):
NSI virus influenza. Penelitian asam nukleat. 1985;13(22):7959-77.
gambaran umum. Jurnal Penelitian Interferon & Sitokin. 2009;29(6):313-26.

4 Jurnal Penelitian Klinis dan Diagnostik. 2016 Mar, Vol-10(3): DE01-DE05

Machine Translated by Google
www.jcdr.net Shuaibu Abdullahi Hudu et al., Peran Kultur Sel dalam Diagnosis Laboratorium

[54] Schägger H. Tricine–SDS-PAGE. Protokol Alam. 2006; 1:16-22.
[55] Kao JH, Chen PJ, Lai MY, Chen DS. Genotipe hepatitis B berkorelasi dengan hasil klinis pada
pasien dengan hepatitis B kronis. Gastroenterologi. 2000;118(3):554-59.
[56] Karung G. Reproduksi imunologi: relevansi penelitian laboratorium untuk
praktik klinis (dan sebaliknya). Reproduksi Manusia. 2014:deu325.
[57] Viswanathan S, Keating A, Dekan R, Hematti P, Prockop D, Stroncek DF, dkk. Meminta strategi
untuk mengembangkan bahan referensi berbasis sel untuk memajukan penelitian sel stroma
mesenkimal dan terjemahan klinis. Sel punca dan perkembangannya. 2014;23(11):1157-67.
[58] Nagy A, Jirinec T, Cerníková L, Jirincová H, Havlícková M. Penyelarasan Urutan Nukleotida Skala
Besar dan Penilaian Variabilitas Urutan untuk Mengidentifikasi Daerah yang Sangat Konservasi
Secara Evolusioner untuk Skrining Universal Desain Uji PCR: Contoh Virus Influenza A. Desain
Primer PCR. 2015:57-72.
[59] Barnett D, Louzao R, Gambell P, De J, Oldaker T, Hanson CA. Validasi uji fluoresensi berbasis
sel: Panduan praktik dari ICSH dan ICCS– bagian IV–pertimbangan pascaanalitik. Sitometri
Bagian B: Sitometri Klinis. 2013;84(5):309-14.
[60] Stacey GN. Tantangan Standardisasi dalam Penelitian dan Pengembangan Stem Cell. Perbankan
Stem Cell: Springer; 2014. hlm. 11-8.
[61] Franco E, Bagnato B, Marino MG, Meleleo C, Serino L, Zaratti L. Hepatitis B: Epidemiologi dan
pencegahan di negara berkembang. Jurnal Hepatologi Dunia. 2012;4(3):74.
[62] Yu MW, Yeh SH, Chen PJ, Liaw YF, Lin CL, Liu CJ, dkk. Genotipe virus hepatitis B dan tingkat
DNA dan karsinoma hepatoseluler: studi prospektif pada pria. Jurnal Institut Kanker Nasional.
2005;97(4):265-72.
[63] Kao JH, Wu NH, Chen PJ, Lai MY, Chen DS. Genotipe hepatitis B dan respons terhadap terapi
interferon. Jurnal Hepatologi. 2000;33(6):998-1002.
[64] Koo ES, Yoo CH, Na Y, Park SY, Lyoo HR, Jeong YS. Keandalan pemantauan virus yang tidak
dapat dibiakkan dengan metode deteksi berbasis PCR di perairan lingkungan yang mengandung
berbagai konsentrasi RNA target. Jurnal Mikrobiologi. 2012;50(5):726-34.
[65] Doerr H. Penggantian biologis dengan teknik molekuler dalam virologi diagnostik: Tiga puluh
tahun setelah munculnya teknologi PCR—apakah kita masih memerlukan metode konvensional?
Med Microbiol Immunol. 2013;202(6):391-92.

KHUSUS KONTRIBUTOR: 1.
Fakultas, Departemen Mikrobiologi Medis dan Parasitologi, Fakultas Ilmu Kedokteran Dasar, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan, Universitas Usmanu
Danfodiyo, Sokoto, Negara Bagian Sokoto, Nigeria. 2.
Fakultas, Departemen Ilmu Kesehatan Dasar, Fakultas Farmasi, Universitas Perbatasan Utara, Rafha, Arab Saudi.
3. Profesor, Departemen Biokimia, Fakultas Bioteknologi & Ilmu Biomolekuler, Universiti Putra Malaysia.
UPM Serdang, Selangor Darul Ehsan, Malaysia.
4. Profesor, Departemen Mikrobiologi Medis dan Parasitologi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universiti Putra Malaysia.
UPM Serdang, Selangor Darul Ehsan, Malaysia.

NAMA, ALAMAT, ID E-MAIL PENULIS KORESPONDEN: Dr Shuaibu Abdullahi Hudu,

Laboratorium Virologi Klinis dan Molekuler, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan,
Universiti Putra Malaysia-43400, UPM Serdang, Selangor Darul Ehsan, Malaysia.
Tanggal Penyerahan: 22 Juli 2015
Email: drhudu@yahoo.com Tanggal Peer Review: 06 Okt 2015
Tanggal Penerimaan: 16 Des 2015
KEPENTINGAN KEUANGAN ATAU LAIN YANG BERSAING: Tidak ada. Tanggal Penerbitan: 01 Maret 2016

Jurnal Penelitian Klinis dan Diagnostik. 2016 Mar, Vol-10(3): DE01-DE05 5