EFEK ISOLAT DARI FRAKSI ETIL ASETAT DAUN PANDAN WANGI (Pandanus ama

ryllifolius ROXB.) TERHADAP PENURUNAN KADAR GLUKOSA DARAH MENGGUN

AKAN METODE ALFA GLUKOSIDASE

Usulan Penelitian untuk Skripsi

Diajukan oleh :

nama

nim

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN TELOGOREJO

SEMARANG

2023
 HALAMAN PENGESAHAN

EFEK ISOLAT DARI FRAKSI ETIL ASETAT DAUN PANDAN WANGI (Pan
danus amaryllifolius ROXB.) TERHADAP PENURUNAN KADAR GLUKOSA
DARAH MENGGUNAKAN METODE ALFA GLUKOSIDASE

Diajukan oleh:

nama

nim

Telah disetujui oleh :

Pembimbing I

…………………………………. Tanggal ………………

Pembimbing II

…………………………………. Tanggal ………………

 DAFTAR ISI
HALAMAN PENGESAHAN........................................................................................i

DAFTAR ISI.................................................................................................................ii

DAFTAR SINGKATAN...............................................................................................v

DAFTAR TABEL........................................................................................................vi

DAFTAR GAMBAR..................................................................................................vii

BAB 1 PENDAHULUAN.............................................................................................8

1.1 Latar Belakang.....................................................................................................8

1.2 Rumusan Masalah..............................................................................................11

1.3 Tujuan Masalah..................................................................................................11

1.3.1 Tujuan Umum.............................................................................................11

1.3.2 Tujuan Khusus.............................................................................................11

1.4 Manfaat Penelitian.............................................................................................11

1.4.1 Manfaat Teoritis..........................................................................................11

1.4.2 Manfaat Praktis...........................................................................................12

BAB II TINJAUAN PUSTAKA.................................................................................13

2.1 Tanaman Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.)..............................13

2.1.1 Pandan wangi..............................................................................................13

2.1.2 Klasifikasi Pandan Wangi...........................................................................13

2.1.3 Morfologi Pandan Wangi............................................................................14

2.1.4 Uji fitokimia Pandan Wangi........................................................................14

2.2 Ekstraksi.............................................................................................................15

2.3 Fraksinasi...........................................................................................................15

2.4 Isolasi.................................................................................................................16
 2.5 Diabetes mellitus................................................................................................17

2.6 Metode Alfa Glukosidase..................................................................................17

2.7 Spektrofotometri UV-Vis...................................................................................18

2.8 Hubungan Metode Alfa Glukosidase Dengan Penurunan Kadar Glukosa secara
In Vitro.....................................................................................................................19

2.9 Kerangka Teori..................................................................................................20

2.10 Kerangka Konsep.............................................................................................21

2.11 Hipotesis..........................................................................................................21

BAB III METODE PENELITIAN..............................................................................22

3.1 Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian........................................................22

3.2 Variabel..............................................................................................................22

3.2.1 Variabel Bebas............................................................................................22

3.2.2 Variabel Tergantung....................................................................................22

3.3 Definisi Operasional..........................................................................................22

3.3.1 Isolat dari fraksi etil asetat daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius
Roxb.)...................................................................................................................22

3.3.2 Isolat daun pandan wangi............................................................................23

3.3.3 Aktivitas penurunan kadar glukosa.............................................................23

3.4 Populasi dan Sampel..........................................................................................24

3.4.1 Populasi Penelitian......................................................................................24

3.4.2 Sampel Penelitian........................................................................................24

3.5 Instrumen dan Bahan Penelitian........................................................................24

3.5.1 Instrumen.....................................................................................................24

3.5.2 Bahan...........................................................................................................24

3.6 Prosedur Penelitian............................................................................................25

 3.6.1 Determinasi tanaman...................................................................................25

3.6.2 Pembuatan ekstrak etil asetat daun Pandan Wangi.....................................25

3.6.3 Fraksinasi....................................................................................................25

3.6.4 Skrining fitokimia Daun Pandan Wangi.....................................................26

3.6.5 Identifikasi Ekstrak dan Fraksi Etil Asetat Daun Pandan Wangi................27

3.6.6 Penentuan kadar flavonoid dalam ekstrak etil asetat, fraksi etil asetat Daun
Pandan Wangi......................................................................................................28

3.6.1 Isolasi dari fraksi.........................................................................................30

3.6.2 Uji Kemurnian Isolat...................................................................................31

3.6.3 Uji Aktivitas Penurunan Kadar Glukosa Daun Pandan Wangi Dengan Meto
de Alfa Glukosidase.............................................................................................32

3.7 Tempat dan Waktu.............................................................................................36

3.7.1 Tempat.........................................................................................................36

3.7.2 Waktu Penelitian.........................................................................................36

3.8 Analisis Hasil.....................................................................................................37

DAFTAR PUSTAKA..................................................................................................38
 DAFTAR SINGKATAN

KLT = Kromatografi Lapis Tipis

DMT2 = Diabetes Melitus Tipe 2
Ppm = Part Per Milion/Bagian Per Juta
DM = Diabetes Melitus
G = Gram
Mg = Miligram
C = Celsius
Nm = Nanometer
Mm = Milimeter
Cm = Centimeter
Ml = Mililiter
 DAFTAR TABEL
Tabel 3.1: Waktu penelitian........................................................................................27
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1: Tanaman pandan wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb)........................5

Gambar 2.2: Kerangka teori........................................................................................12
Gambar 2.3: Kerangka konsep....................................................................................12
 8

BAB 1

PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang

Diabetes mellitus adalah penyakit degenerative. Diabetes mellitus menja

di salah satu masalah kesehatan global yang tumbuh paling cepat. Menurut

analisa data IDF di tahun 2021, Indonesia merupakan negara urutan ke-5 dari

8 negara dengan penderita diabetes terbanyak 19.5 juta jiwa dengan rentang

usia variatif pada usia 20 hingga 70 tahun. IDF memiliki prediksi berupa proy

eksi penderita diabetes pada tahun 2021 berada pada angka 537 juta jiwa

dengan korban meninggal dunia mencapat 6,7 juta jiwa (“IDF Diabetes Atlas

10th Edition,” 2021)

Diabetes mellitus yang tidak terkontrol diartikan sebagai suatu kenaikan

kadar glukosa dalam darah dan hemoglobin glikosilasi yang mampu menetap

sebanyak 6,5% dalam jangka panjang. Peristiwa ini diketahui memiliki

implikasi pada timbulnya komplikasi seperti disfungsi dan kegagalan pada ma

ta, ginjal, saraf, jantung, dan pembuluh darah (Safruddin & Yuliati, 2022).

Target capaian terapi dari penyakit ini terfokus pada penurunan kadar glukosa

dalam darah baik menggunakan insulin maupun obat antihiperglikemik.

Beberapa kasus DMT2 kebanyakan tidak memerlukan adanya asupan insulin

secara eksternal sehingga dapat disubstitusikan dengan pemberian secara oral

seperti inhibitor alfa glikosidase (Hardianto, 2021). Namun, penggunaan oba

 9

t-obatan ini sering kali muncul efek samping yang tidak diharapkan (Lolok et

al., 2019).

Mekanisme inhibisi enzim Alfa-Glucosidase dapat diaplikasikan untuk

menurunkan kadar glukosa hiperglikemia postprandial dengan jalan

menghambat penyerapan glukosa pada usus melalui mekanisme menghambat

enzim Alfa Glucosidase yang kemudian berimplikasi pada inhibisi sintesis

karbohidrat sehingga menurukan kadar glukosa darah . Mekanisme ini

diketahui sangat berguna dalam proses manajemen diabetes mellitus tipe 2.

Mekanisme inhibisi enzim Alfa Glukooksidase dapat menjadi terapi namun

perlu diketahui bahwa efek yang tidak diinginkan seperti gangguan saluran

cerna yang meliputi mual, muntah, nyeri pada bagian perut dan kembung

harus diminimalisir. (Yuniarto & Selfiana, 2018) Oleh karena itu diperlukan a

gen terapeutik baru melalui penggunaan sediaan herbal yang efektif, relative

murah, serta rendah efek samping dan toksisitasnya (Minarti et al., 2021).

Pandan Wangi telah dikenal masyarakat penggunaannya untuk pengobat

an dengan cara diseduh bagian daunnya dengan air kemudian diminum. Hasil

uji fitokimia Prameswari & Simon (2014) menyebutkan bahwa daun Pandan

Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) positif mengandung alkaloid, tannin,

flavonoid, dan polifenol (Prameswari & Widjanarko, 2014). Penelitian

sukandar dkk pada tahun 2012 telah membuktikan bahwa fraksi etil asetat dau

n Pandan Wangi (Pandanus amaryllfolius Roxb.) berpotensi sebagai antidiabe

tes secara in-vitro dalam menghambat enzim Alfa-Glukosidase (Sukandar et

al., 2012). Aktivitas terbesar pada fraksi 2 dengan IC50 relatif 77,57 ppm. Seda
 1
0

ngkan penelitian Balamurugan et al (2020) menyatakan bahwa penggunaan pe

larut etil asetat terhadap Pandanus canaranus Warb memiliki aktivitas pengha

mbatan alfa glukosidase tertinggi sebesar 90,08% (Balamurugan et al., 2019).

Penelitian Yuniarto & Selifiana (2018) memaparkan salah satu metode yang

dapat digunakan dalam menganalisa aktivitas inhibisi enzim Alfa-

glukooksidase secara In-Vitro dianalisa dengan pendekatan IC50 untuk

mengetahui konsenterasi minimum untuk menghambat 50% enzim alfa-

glukosidase pada seri konsenterasi 20,40,60,80 dan 100 ppm yang kemudian

diadopsi dalam penelitian ini sehingga diperoleh konsenterasi hambat

minimum yang mampu menginhibisi kerja enzim alfa glucosidase.

Berdasarkan penjelasan diatas penelitian ini dilakukan dalam rangka

mengatahui efektivitas terapi dengan media fraksi dan isolat daun pandan

wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) terhadap penurunan kadar glukosa sec

ara in vitro dengan pendekatan mekanisme Alfa Glukosidase. Adapun

diferensiasi penelitian ini merupakan lanjutan dari analisa fraksi etil asetat

pada daun pandan wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.). Isolasi ini

dilakukan sebagai suatu tindakan untuk memperoleh senyawa yang lebih

murni dan spesifik (Wati et al., 2017) sehingga nantinya dapat dijadikan acuan

dalam rangka modifikasi struktur kimia sehingga dapat meningkatkan

efektivitas farmakologi.
 1
1

I.2 Rumusan Masalah

Bagaimana efek isolat dari fraksi etil asetat daun Pandan Wangi

(Pandanus amaryllifolius Roxb.) terhadap penurunan kadar glukosa darah me

nggunakan metode Alfa-Glukosidase?

I.3 Tujuan Masalah

I.3.1 Tujuan Umum

Untuk mengetahui efek isolat dari fraksi etil asetat daun Pandan

Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) terhadap penurunan kadar gluk

osa darah menggunakan metode Alfa-Glukosidase.

I.3.2 Tujuan Khusus

Mengetahui efek dari isolat daun Pandan Wangi (Pandanus ama

ryllifolius Roxb.) terhadap penurunan kadar glukosa menggunakan meto

de alfa-Glukosidase pada konsentrasi 20, 40, 60, 80 dan 100 ppm yang

dinyatakan dengan IC50.

I.4 Manfaat Penelitian

I.4.1 Manfaat Teoritis

Mampu memberikan data ilmiah terkait efektivitas ekstrak, fraks

i, dan isolat daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) terhad

ap penurunan kadar glukosa menggunakan metode Alfa-Glukosidase.

 1
2

I.4.2 Manfaat Praktis

Dapat dijadikan referensi penelitian uji praklinis untuk menggali

terkait kemampuan aktivitas ekstrak, fraksi, dan isolate daun Pandan Wa

ngi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) sebagai penurun kadar glukosa me

nggunakan metode Alfa-Glukosidase.

 13

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Tanaman Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.)

II.1.1 Pandan wangi

Gambar 2.1: Tanaman pandan wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb)

II.1.2 Klasifikasi Pandan Wangi

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Kelas : Monocotyledoneae

Ordo : Pandanales

Famili : Pandanaceae

Genus : Pandanus

Spesies : Pandanus amaryllifolius Roxb

(Mursyida et al., 2021)

 14

II.1.3 Morfologi Pandan Wangi

Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) didiferesiasikan

menjadi dua kelompok besar yakni meliputi kelompok pandan besar da

n pandan kecil. Pandan kecil diketahui berbentuk herba, dengan

morfologi berupa batang ramping dengan tinggi 1-1,6 m dan diameter b

atang 2-5 cm, batang berbaring atau memanjat dan akar-akar muncul di

batang. Daun berbentuk oblongus dengan ukuran 25-75 cm x 2-5 cm, be

rwarna hijau muda, kadang-kadang kurus dan lemah. Bunga dan buah ti

dak banyak diketauhi. Bentuk liar tanaman pandan wangi tidak pernah d

itemukan, namun diduga berasal dari Kepulauan Maluku, karena hanya

di situ ditemukan specimen yang memiliki bunga. Walaupun demikian t

anaman pandan banyak ditemukan dan dikultivasi di berbagai daerah se

perti Malaysia, Vietnam, Indonesia, dan Papua (Silalahi, 2018).

II.1.4 Uji fitokimia Pandan Wangi

Hasil penapisan fitokimia atau biasa dikenal dengan skrining

fitoimia pada tanaman Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.)

memberikan petunjuk kandungan metabolit sekunder berupa flavonoid,

alkaloid, saponin, tannin, polifenol, dan zat warna yang memiliki fungsi

sebagai antibakteri. Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang didap

atkan sebagai metabolit sekunder pada tanaman. Berbagai macam aktivit

as farmakologi telah di uji terhadap golongan senyawa flavonoid seperti

 15

antioksidan, antiinflamasi, dan antikanker serta memberikan kontribusi

untuk aktivitas lain seperti antidiabetes (Prameswari & Widjanarko, 201

4).

II.2 Ekstraksi

Ekstraksi merupakan suatu mekanisme pemisahan kimia untuk memi

sahkan atau menarik satu maupun beberapa kandungan metabolit sekunder

(analit) dari suatu sampel dengan menggunakan pelarut tertentu yang sesuai.

Mekanisme pemisahan analit dari sampel padat ke dalam pelarut dikenal

sebagai ekstraksi padat-cair. Ekstraksi dari sampel padat dapat dilakukan jik

a analit yang diinginkan larut dalam pelarut ekstraksi. Prinsip yang digunaka

n adalah pemisahan berdasarkan pada kemampuan atau kelarutan analit atau

dikenal dengan prinsi like dissolve like dalam pelarut tertentu. Berdasarkan

prinsip ini maka pemilihan pelarut menjadi suatu hal yang cukup signifikan

dalam mengekstrak komponen metabolit sekunder secara optimal (Leba, 20

17).

II.3 Fraksinasi

Fraksinasi dikenal sebagai suatu proses lanjutan dari ekstraksi awal

dimana pada hasil ekstraksi awal umumnya berisi campuran dari berbagai

senyawa.. Ekstraksi awal merupakan suatu metode yang sulit diterapkan

untuk memperoleh senyawa yang spesifik. Hal ini yang mendasari perlu dila

kukan pemisahan ekstrak awal ke dalam fraksi yang mempunyai polaritas da

n ukuran molekul yang sama. Fraksinasi dapat dilakukan dengan metode eks
 16

traksi cair-cair atau dengan kromatografi vacuum (KCV), kromatografi kolo

m (KK), size-exclution chromatography (SEC), solid-phase extraction (SP

E) (Mukhriani, 2014).

II.4 Isolasi

Proses isolasi dilakukan untuk mendapatkan senyawa murni dari suat

u fraksi menggunakan instrumen kromatografi kolom yang telah dipilih

kondisi pelarut baik dari segi perbandingan maupun jenis pelarut

menggunakan metode (KLT) (Wati et al., 2017). Sifat ekstrak dan hasil

fraksi merupakan salah satu prinsip yang harus diperhatikan sebelum

melakukan isolasi senyawa. Sifat umum molekul diketahui dapat membantu

proses isolasi seperti kelarutan baik tinjauan dari segi hidrofilisitas ataupun

hidrofobilitas, sifat asam-basa, muatan, stabilitas serta ukuran molekul (Muk

hriani, 2014). Kromatografi lapis tipis preparative atau disingkat sebagai

KLTP diketahui mampu memisahkan bahan dalam jumlah gram namun

sebagian besar aplikasinya digunakan dalam jumlah milligram atau cuplikan

kecil pada kisaran 50 mg hingga 1 gram dari senyawa yang kurang atsiri.

(Wulandari, 2011) Kelebihan dari metode KLTP adalah aplikasi metode

yang lebih mudah dilakukan, diamati dan waktu pemisahan yang lebih

efisien. (Wijaya, Milanda, & Supriyatna, 2015). Beberapa factor yang

memberikan pengaruh signifikan dalam metode ini adalah ketebalan

penyerap (adsorben), pelarut yang digunakan pada pelat KLTP (Zakiyah,

Agustin, Fauziah, Maharani, & Mukti, 2021)

 17

II.5 Diabetes mellitus

Diabetes mellitus merupakan suatu kondisi yang ditandai dengan hip

erglikemia karena tidak adanya insulin atau resistensi insulin. Secara luas D

M dibagi menjadi tipe 1 dan tipe 2. Diabetes mellitus tipe 1 terjadi hiperglike

mia disebabkan oleh insulin yang tidak dapat mendistribusikan glukosa dara

h ke dalam sel karena adanya resistensi insulin terhadap reseptornya. Pada di

abetes mellitus tipe 2 ini tidak diturunkan secara genetic melainkan muncul k

arena didukung oleh factor lain meliputi usia, ras, riwayat keluarga, pola ma

kan, pola hidup, dan bebrapa penyakit metabolic lain (Sinulingga et al., 202

0).

Meskipun merupakan salah satu penyakit yang tidak menular penderi

ta DM membutuhkan perhatian dalam penanganannya, baik tingkat kepatuha

n minum obat, mempertahankan gaya hidup, maupun biaya yang dibutuhkan

cukup tinggi. Penderita diabetes mellitus tipe 2 prevalensinya mencapai 90-9

5% dari seluruh penderita DM. Konsumsi obat antidiabetic oral merupakan s

uatu keharusan bagi penderita DM. salah satu terapi farmakologis untuk pen

gobatan diabetes mellitus tipe 2 dengan mengonsumsi obat hipoglikemik ora

l golongan alfa-glukosidase inhibitor (Riyanti et al., 2018).

II.6 Metode Alfa Glukosidase

Alfa-Glukosidase merupakan enzim yang bekerja di usus halus untuk

mengkatalisis pemecahan gugus polisakarida untuk diserap ke dalam monos

akarida. Inhibitor Alfa Glukosidase memiliki mekanisme kerja yang efektif u

 18

ntuk menurunkan karbohidrat kompleks dan penyerapannya sehingga dapat

menurunkan kadar glukosa pada penderita diabetes mellitus (Riyanti et al., 2

018). Penghambatan aktivitas enzim Alfa Glukosidase ini dijadikan salah sat

u pendekatan terapeutik untuk mengobati diabetes mellitus tipe 2 melalui pe

nyerapan glukosa ke dalam darah tertunda. Hal ini telah direkomendasikan

oleh American Association of Clinical Endocrinologists pengambatan alfa-gl

ukosidase sebagai lini pertama terapi diabetes mellitus (Kusumawati et al., 2

021). Prinsip pengujian aktivitas penghambatan enzim Alfa Glikosidase adal

ah enzim Alfa Glikosidase akan menghidrolisis substrat p-nitrofenol--D-gl

ukopiranosida menjadi p-nitrofenol dan glukosa berwarna kuning. Alfa-Glik

osidase efektif dihambat oleh gugus fenolik dan flavonoid. Selain kedua met

abolit sekunder yang telah disebutkan alfa glikosidase juga efektif dihambat

oleh flavonol, luteolin, myricetin, dan kuersetin. Aktivitas dari inhibitor Alf

a-Glukosidase ini dinyatakan dengan nilai IC50 (Riyanti et al., 2018).

II.7 Spektrofotometri UV-Vis

Sumber radiasi spektrofotometer UV-Vis merupakan suatu isntrumen

yang memanfaatkan sinar dengan Panjang gelombang 180-380 nm pada daer

ah UV dan 380-780 nm untuk sinar tampak atau yang disebut daerah visible.

Spektrofotometer UV-Vis adalah lampu hydrogen atau deuterium dan lampu

filamen. Adapun fungsi lampu hydrogen untuk mendapatkan radiasi di daera

h ultraviolet hingga 350 ran. Sedangkan lampu filamen untuk daerah sinar ta

mpak sampai inframerah dekat dengan Panjang gelombang 350 nm sampai k

 19

isaran 250 nm. Pada spetrofotometer UV-Vis zat yang diidentifikasi dalam b

entuk larutan. Analit yang dapat diukur menggunakan spektrofotometer tamp

ak adalah analit berwarna atau analit yang dapat dibuat berwarna. Definisi an

alit berwarna ialah analit yang dapat menyerap cahaya secara alami. Berbeda

dengan analit yang dibuat berwarna adalah analit yang tidak berwarna sehing

ga harus direaksikan dengan zat tertentu untuk mendapatkan senyawa yang

mampu menyerap cahaya pada gelombang tertentu. Proses pewarnaan untuk

zat atau senyawa yang tidak berwarna dapat dilakukan dengan cara pembent

ukan atau oksidasi sehingga menghasilkan warna pada analit (Warono & Sya

msudin, 2013).

II.8 Hubungan Metode Alfa Glukosidase Dengan Penurunan Kadar Glukosa

secara In Vitro

Tanaman Pandan Wangi menunjukkan bahwa positif mengandung al

kaloid, flavonoid, poliferol, dan tannin (Patala et al., 2022). Flavonoid teruta

ma kuersetin telah dilaporkan memiliki aktivitas antidiabetes yang bekerja m

enghambat alfa-glukosidase dengan menghalangi pengangkutan glukosa dan

fruktosa dalam transport GLUT-2 (Ismawan, 2013). Data yang didapatkan ol

eh Gurmeet & Parle (2015) disebutkan bahwa pada daun Pandanus amarylli

folius mengandung flavonoid dan tannin yang berpotensi sebagai antidiabeti

c. Beberapa penelitian menyebutkan senyawa flavonoid diduga memiliki per

an sebagai penghambat aktivitas Alfa Glukosidase. Kuersetin yang merupak

 20

an turunan dari flavonoid mampu memperlambat aktivitas Alfa-Glucosidase

karena adanya reaksi glikosilasi pada gugus hidroksil C-3 di cincin C dari fla

vonol. Terjadinya glikosilasi akibat adanya substitusi bagian gula (glikan) ke

gugus hidroksil dari flavonol, sehingga akan membentuk suatu glikosida yan

g mempunyai kesesuaian struktur dengan substrat p-nitrofenil--D-glukopira

nosida yang juga merupakan suatu glikosida. Senyawa penghambat Alfa-Gl

ukosidase memiliki sifat kompetitif reversible karena senyawa flavonoid dan

polifenol memiliki struktur kimia yang mirip dengan substrat glucosidase ala

mi. Selain itu yang memiliki peran penting dalam menghambat aktivitas enzi

m Alfa-Glikosidase ditunjukkan dengan adanya hubungan struktur dengan a

ktivitasnya pada gugus polihidroksi dalam kerangka flavonoid (Sumarlin et a

l., 2019).

II.9 Kerangka Teori

Ekstrak etanol daun Pandan Wangi

Fraksi etil asetat

Senyawa Tanin dan Flavonoid yang memiliki aktivitas sebagai antidiabetes

Isolat daun Pandan Wangi

Terhambatnya aktivitas alfa glukosidase melalui reaksi

glikosilasi gugus hidroksil C-3 pada cincin C dari flavonol
Aktivitas dilihat dari presentase
penurunan kadar glukosa
 21

Gambar 2.2: Kerangka teori

II.10 Kerangka Konsep

Isolat dari fraksi etil asetat Aktivitas penurunan kadar

daun Pandan Wangi (P. glukosa
amaryllifolius Roxb.)

Gambar 2.3: Kerangka konsep

II.11 Hipotesis

Isolat dari fraksi etil asetat daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllif

olius Roxb.) memiliki efek terhadap penurunan kadar glukosa yang dinyatak

an dengan presentase penurunan kadar glukosa secara in vitro menggunakan

metode Alfa-Glukosidase.
 22

BAB III
METODE PENELITIAN
III.1 Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian

Penelitian eksperimental laboratorium menggunakan desain post-test

only control group design.

III.2 Variabel

III.2.1 Variabel Bebas

Variabel bebas pada penelitian ini adalah isolat dari fraksi etil

asetat daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) pada

konsentrasi 20, 40, 60, 80 dan 100 ppm

III.2.2 Variabel Tergantung

Variabel tergantung pada penelitian ini adalah aktivitas penuruna

n kadar glukosa.

III.3 Definisi Operasional

III.3.1 Isolat dari fraksi etil asetat daun Pandan Wangi (Pandanus

amaryllifolius Roxb.)

Ekstrak dan fraksi etil asetat yang digunakan pada penelitian ini m

enggunakan bahan dasar daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius

Roxb.) yang berasal dari daerah Lamongan, Jawa Timur. Ekstrak daun P

andan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) diperoleh dengan dengan

jalan maserasi selama 3x24 jam memakai pelarut etil asetat dengan perb

andingan 1:10 yang dilanjutkan penguapan pelarut dengan rotary evapor

 23

ator. Maserat yang diperoleh kemudian dilakukan Fraksinasi dengan plat

silika gel Merck Kieselgel F254 (20x20 cm; tebal 0,2 mm) menggunaka

n eluen n-heksan:etil asetat (3:1) dan pemberian asam glasial sebanyak 3

tetes.

Skala : Rasio

III.3.2 Isolat daun pandan wangi

Isolasi dilakukan dengan menggunakan Kromatografi Lapis Tipi

s Preparatif (KLTP). Fraksi daun pandan wangi timbang sebanyak 0,5 gr

am kemudian dilarutkan dengan kloroform:methanol (1:1). Lakukan pen

otolan pada plat dan dielusi menggunakan n-heksan:etil asetat (5:1). Dil

anjutkan penyemprotan menggunakan CeSO4 dimana setelah perlakuan i

ni akan muncul noda yang dilakukan pengerokan sehingga diperoleh iso

late kering dengan cara diuapkan.

Skala : Rasio

III.3.3 Aktivitas penurunan kadar glukosa

Aktivitas penurunan kadar glukosa adalah kemampuan isolat

dalam menurunkan kadar glukosa secara in vitro dengan pendekatan alfa

glukosidase dengan jalan mengambil sebanyak 8 mg sample isolat dan d

ibuat dengan variasi konsenterasi 20, 40, 60, 80 dan 100 ppm.

Penurunan kadar glukosa diukur menggunakan metode spektrofotometri

dengan satuan …

Skala : Rasio
 24

III.4 Populasi dan Sampel

III.4.1 Populasi Penelitian

Populasi pada penelitian ini berupa isolat yang diperoleh dari

fraksi etil asetat daun pandan wangi.

III.4.2 Sampel Penelitian

Sampel pada penelitian ini meliputi isolat dari fraksi etil asetat

daun pandan wangi pada konsenterasi yang dibuat 6 seri konsenterasi ya

kni 20, 40, 60, 80 dan 100 ppm.

III.5 Instrumen dan Bahan Penelitian

III.5.1 Instrumen

Instrument yang digunakan pada penelitian ini antara lain

spektrofotometri Uv Vis, kuvet, lampu UV 254/366, oven, rotary

evaporator, corong pisah, cawan porselin, waterbath, plat KLTP,

chamber, botol vial, spatula, tabung reaksi, gelas beker, gelas ukur,

pipet volume, Erlenmeyer, labu takar, dan corong kaca.

III.5.2 Bahan

Bahan yang digunakan meliputi serbuk isolat dari fraksi etil

asetat daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.), aquadest,

etanol, etil asetat, n-heksan, methanol, FeCl3, reagen (skrinning fito),

methanol p.a, silica gel, dan enzim alfaglukosidase.

 25

III.6 Prosedur Penelitian

III.6.1 Determinasi tanaman

Determinasi tanaman dilakukan di Laboratorium Biologi FMIPA

Universitas Negeri Semarang. Determinasi dilakukan dengan mengamat

i beberapa karakter morfologi maupun anatomi yang kemudian disesuai

kan dengan acuan suatu sistem klasifikasi tanaman. Sehingga menghasil

kan identitas dan tatanama suatu spesies tanaman.

III.6.2 Pembuatan ekstrak etil asetat daun Pandan Wangi

Tanaman Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) bagian

daun segar dibersihkan dengan cara dicuci dengan air bersih lalu ditirisk

an. Diangin-angin hingga kering kemudian keringkan menggunakan ove

n dengan suhu 50 C sampai membentuk simplisia (Setiawan dkk, 2015)

Daun pandan dianggap kering apabila sudah rapuh (diremas akan hancu

r). Pembuatan ekstrak etil asetat daun Pandan Wangi dengan metode m

aserasi selama 3 x 24 jam menggunakan pelarut etil asetat, Setelah disari

ng ekstrak dipekatkan menggunakan rotary evaporator pada suhu 70 C

(Sukandar et al., 2012).

III.6.3 Fraksinasi

Ekstrak kental daun pandan wangi dimasukan kedalam corong

pisah, tambahkan pelaut N-heksan 25 ml dan etil asetat sejumlah 25 ml.

Kocok sampai larut dan didiamkan hingga memisah (Islamiyati & Pujia
 26

stuti, 2020). Adapun fraksinasi menggunakan pelarut N-heksan diulangi

hingga warna larutan lebih jernih (Runtuwene et al., 2021).

III.6.4 Skrining fitokimia Daun Pandan Wangi

III.6.4.1 Identifikasi flavonoid

Ekstrak daun pandan sebnyak 2 mL dilarutkan dalam 2m

L HCl 2 N dan ditambahkan serbuk Zn. Kemudian homogenkan.

Hasil menunjukkan positif flavonoid apabila terbentuk perubaha

n warna menjadi orange (Kayadoe et al., 2015).

III.6.4.2 Identifikasi saponin

Masukkan 1 ml ekstrak atau fraksi kental daun pandan w

angi ke dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan 10 ml air pa

nas dan didihkan selama 5 menit. Setelah itu disaring dan filtratn

ya digunakan sebagai larutan uji. Masukkan filtrat ke dalam tabu

ng reaksi lalu kocok selama 10 detik. Diamkan selama 10 menit

dan ditambahkan HCl 2 M sebanyak 1 ml. hasil menunjukkan po

sitif saponin apabila terbentuknya buih yang stabil (Nugrahani et

al., 2016).

III.6.4.3 Identifikasi tannin

Ekstrak daun pandan sebanyak 0,5 g didihkan dengan 10

mL air di tabung reaksi lalu lakukan penyaringan. Teteskan FeCl

3 0,1% sedikit. Amati perubahan warna. Hasil menunjukkan posi

 27

tif tanin apabila terbentuk warna hijau kecoklatan atau hitam biru

(Kayadoe et al., 2015).

III.6.4.4 Identifikasi terpenoid

Sejumlah 0,5 g ekstrak beri 2 mL kloroform. Tambahka

n secara hati-hati 3 mL H2SO4 pekat hingga membentuk sebuah

lapisan. Hasil menunjukkan positif terpenoid apabila timbul wa

rna coklat kemerahan (Kayadoe et al., 2015).

III.6.4.5 Identifikasi polifenol

Ekstrak sejumlah 0,10 g tambahkan dengan 5 ml akuade

s dan didihkan selama 5 menit. Selanjutnya dilakukan penyarin

gan sehingga diperolah filtrat. Disaring panas-panas kemudian

didinginkan. Fitrat kemudian ditambahkan 0,20 g serbuk Mg da

n 3 tetes HCl. Hasil menunjukkan positif senyawa polifenol apa

bila terjadi perubahan warna menjadi hijau biru sampai hitam

(Prameswari & Widjanarko, 2014).

III.6.5 Identifikasi Ekstrak dan Fraksi Etil Asetat Daun Pandan Wangi

Identifikasi flavonoid pada ekstrak dan fraksi etil asetat daun p

andan wangi dilakukan dengan pendekatan kromatografi lapis tipis. Ek

strak dan Fraksi etil asetat dilarutkan dengan etil asetat teknis dan divo

rtex. Setelah divortex identifikasi dilanjutkan dengan proses penotolan

pada plat dengan pipet mikro pada kisaran 1 cm dari garis atas dan ba

wah. Elusi menggunaan eluen n-butanol : asam asetat : air (BAA) den
 28

gan perbandingan (4:1:5). Setelah dielusikan bercal disemprot dengan

AlCl3 dan dipanaskan hingga muncul noda berwarna hijau kekuningan.

Bercak noda yang terbentuk kemudian diperiksa pada panjang gelomb

ang 245 nm dan 366 nm kemudian dilakukan pengamatan secara visua

l dan dilakukan kalkulasi besaran Rf pada noda yang tampak (Karima

et al., 2019).

III.6.6 Penentuan kadar flavonoid dalam ekstrak etil asetat, fraksi etil asetat D

aun Pandan Wangi

III.6.6.1 Penentuan Operating Time

Timbang baku kuersetin dengan tingkat konsenterasi 1 m

g/ml dengan jalan pelarutan 10 mg kuersetin dalam aquadest hin

gga 10 ml. Kemudian dilakukan penentuan operating time denga

n jalan menganalisa baku pada waktu secara berturut turut pada

menit ke-0, 5, 10, 15, 29, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 dan 60 menit

(interval analisa setiap 5 menit) pada panjang gelombang 510 nm

(Fadillah et al., 2017).

III.6.6.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

Penentuan panjang gelombang maksimum memanfaatk

an salah satu seri kadar pada baku kuersetin yakni pada konsen

terasi 1mg/ml. Larutan uji didiamkan sesuai dengan waktu opti

mal yang telah diperoleh pada operating time setelah dilakuka

n penambahan aquadest hingga volume 10 ml, larutan kemudia

 29

n diukur pada rentang panjang gelombang antara 500 hingga 6

00 nm (Fadillah et al., 2017).

III.6.6.3 Pembuatan Kurva Baku Kuersetin

10 mg baku kuersetin ditimbang dan dilarutkan dengan a

quades hingga 10 ml sehingga diperoleh lautan dengan kadar 1

000 ppm. Deret baku dibuat dengan jalan pengenceran baku ind

uk sehingga diperoleh beberapa konsenterasi dengan konsenter

asi berturut turut sebesar 100 ppm, 80 ppm, 60 ppm, 40 ppm da

n 20 ppm dengan jalan pemipetan larutan secara berturut turut

sebanyak 1 ml, 0,8 ml, 0,6 ml, 0,4 ml dan 0,2 ml. Masing masi

ng larutan yang telah dipipet kemudian dimasukan dalam labu t

akar 10 ml dan dilakukan penambahan NaNO2 5% sebanyak 0,3

ml kemudian biarkan selama 5 menit. 0,3 ml AlCl 3 10% ditamb

ahkan dan kembali didamkan 5 menit. Baku yang telah didiamk

an kemudian dimasukan 2 ml NaOH 1 M dan dicukupkan deng

an aquadest hingga 10 ml. Larutan yang telah terbentuk kembal

i didiamkan sesuai dengan operating time dan diukur pada panj

ang gelombang maksimum yang diperoleh (Fadillah et al., 201

7).
 30

III.6.6.4 Penentuan Kadar Flavonoid dalam Ekstrak Etil Asetat dan Fra

ksi Etil Asetat Daun Pandan Wangi

Ekstrak etil asetat daun pandan wangi dilarutkan dalam

aquadest. Sebanyak 1 ml dipipet dan dimasukan dalam labu tak

ar 10 ml. Tambahkan pelarut hingga 10 ml. Perlakuan selanjutn

ya diperlakukan sama seperti pada baku kuersetin dengan satua

n perolehan kandungan flavonoid diketahui sebagai Mg ekuival

en kuersetin dalam setiap g ekstrak maupun fraksi (Fadillah et a

l., 2017).

III.6.1 Isolasi dari fraksi

3.5.7.1 Pembuatan Plat KLTP

Timbang kurang lebih sejumlah 15 gram silika gel GF254

untuk menghasilkan 2 buah plat kaca. Tambahkan akuades secuk

upnya dengan perbandingan 1:2 kemudian aduk hingga rata. Tua

ng silika gel yang telah merata ke cetakan lalu berikan dorongan

hingga membentuk plat kaca sesuai yang diharapkan, usahakan p

ermukaan silika diratakan. Plat yang telah dicetak dimasukkan ke

dalam oven dengan suhu 50 C kurang lebih selama 15 menit da

n dikeringkan Kembali (Ningsih et al., 2013).

3.5.7.2 Cara Isolasi

Timbang fraksi daun Pandan Wangi sebanyak 0,5 gram. L

arutkan fraksi tersebut menggunakan kloroform dan metanol den

 31

gan perbandingan (1:1). Isolasi menggunakan kromatografi lapis

tipis preparatif, fase diam silika gel 60 GF254 kemudian dielusi

menggunakan n-heksana dan etil asetat dengan perbandingan (5:

1) sebagai fase gerak. Fraksi terlarut dioleskan perlahan dan mer

ata di sepanjang tepi bawah pelat KLTP. Lakukan 3 kali replikasi

Masukkan pelat ke dalam bejana yang berisi fase gerak yang tela

h dijenuhkan kemudian tutup. Pada proses KLTP, deteksi noda d

ilakukan dengan penyemprotan serium sulfat. Setelah dipanaskan,

akan terbentuk warna ungu kemerah-merahan. Di bagian muncu

l bercak lakukan pengerokan dan penyaringan isolat yang tidak b

erwarna (jernih). Lakukan penguapan hingga didapatkan isolat k

ering (Suprijono et al., 2018).

III.6.2 Uji Kemurnian Isolat

Identifikasi flavonoid pada ekstrak dan fraksi etil asetat daun pan

dan wangi dilakukan dengan pendekatan kromatografi lapis tipis. Ekstra

k dan Fraksi etil asetat dilarutkan dengan etil asetat teknis dan divortex.

Setelah divortex identifikasi dilanjutkan dengan proses penotolanpada pl

at dengan pipet mikro pada kisaran 1 cm dari garis atas dan bawah. Elus

i menggunaan eluen n-butanol : asam asetat : air (BAA) dengan perband

ingan (4:1:5). Setelah dielusikan bercal disemprot dengan AlCl 3 dan dip

anaskan hingga muncul noda berwarna hijau kekuningan. Bercak noda y

ang terbentuk kemudian diperiksa pada panjang gelombang 245 nm dan

 32

366 nm jika noda terbentuk maka hal ini mengindikasikan bahwa dalam

sample terdapa flavonoid (Karima et al., 2019)

III.6.3 Uji Aktivitas Penurunan Kadar Glukosa Daun Pandan Wangi Dengan

Metode Alfa Glukosidase

3.5.9.1 Pembuatan larutan baku glukosa 40 ppm

Ditimbang 50 mg D-glukosa anhidrat kemudian dilarutka

n dalam 50 ml aquades hingga diperoleh konsenterasi 1000 ppm.

Kemudian pipet sebanyak 4 ml larutan dan masukan dalam labu

takar 100 ml kemudian tambahkan aquadest hingga tanda batas s

ehingga diperoleh larutan baku D glukosa 40 ppm (Kurniawan, 2

013)

3.5.9.2 Penentuan Panjang gelombang

Penentuan panjang gelombang dilakukan dengan jalan

mengambil 5 mikroliter larutan baku 40 ppm kemudian tambahk

an 495 miktoliter buffer fosfar pH 7 dan 250 mikroliter PNP Alf

a-D-Glukopiranosodase 20 mM. Larutan kemudian dihomogenis

asi dan lakukan preinkubasi selama 5 menit pada suhu 37 oC. Sete

lah preinkubasi, tambahkan 250 mikroliter enzim alfa glukopiran

osidase dan diinkubasi selama kurang lebih 15 menit. Reaksi dih

entikan dengan penambahan 1 ml Natrium karbonat 0,1 M. hasil

yang diperoleh kemudian dibaca menggunakan spektrofotometer

UV-Vis (Sumarlin et al., 2019).

 33

3.5.9.3 Penentuan operating time

Penentuan operating time dilakukan dengan jalan meng

ambil 5 mikroliter larutan baku 40 ppm kemudian tambahkan 49

5 miktoliter buffer fosfar pH 7 dan 250 mikroliter PNP Alfa-D-G

lukopiranosodase 20 mM. Larutan kemudian dihomogenisasi dan

lakukan preinkubasi selama 5 menit pada suhu 37oC. Setelah prei

nkubasi, tambahkan 250 mikroliter enzim alfa glukopiranosidase

dan diinkubasi selama kurang lebih 15 menit. Reaksi dihentikan

dengan penambahan 1 ml Natrium karbonat 0,1 M. Jumlah p-nitr

oferol yang dihasilkan kemudian diukur pada panjang gelomban

g maksimum yang telah diperoleh sehingga didapat waktu optim

um yang stabil (Sumarlin et al., 2019).

3.5.9.4 Pembuatan kurva baku

Pipet larutan baku secara berturut turut sejumlah 0,1 ; 0,

2 ; 0,3 ; 0,4 dan 0,5 ml. Larutan yang telah dipipet kemudian dim

asukan dalam labu ukur 10 ml dan dicukupkan dengan aquadest

hingga tanda batas. Kemudian sebanyak 5 mikroliter dari setiap l

arutan tambahkan 495 miktoliter buffer fosfar pH 7 dan 250 mikr

oliter PNP Alfa-D-Glukopiranosodase 20 mM. Larutan kemudia

n dihomogenisasi dan lakukan preinkubasi selama 5 menit pada s

uhu 37oC. Setelah preinkubasi, tambahkan 250 mikroliter enzim

alfa glukopiranosidase dan diinkubasi selama kurang lebih 15 me

 34

nit. Reaksi dihentikan dengan penambahan 1 ml Natrium karbon

at 0,1 M (Sumarlin et al., 2019).

3.5.9.5 Pengujian aktivitas penurunan kadar glukosa

Isolat dari fraksi etil asetat daun pandan wangi dibuat d

engan variasi konsenterasi 20, 40, 60, 80 dan 100 ppm. Sampel d

iambil sebanayak 5 mikroliter tambahkan 495 mikroliter buffer f

osfar pH 7 dan 250 mikroliter PNP Alfa-D-Glukopiranosodase 2

0 mM. Larutan kemudian dihomogenisasi dan lakukan preinkuba

si selama 5 menit pada suhu 37oC. Setelah preinkubasi, tambahka

n 250 mikroliter enzim alfa glukopiranosidase dan diinkubasi sel

ama kurang lebih 15 menit. Reaksi dihentikan dengan penambah

an 1 ml Natrium karbonat 0,1 M. larutan kemudian didiamkan se

suai dengan operating time yang diperoleh. Analisa sampel deng

an instrumen spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang

maksimum yang diperoleh (Sumarlin et al., 2019).

3.5.9.6 Cara pengukuran efek penurunan kadar glukosa

Pengukuran efek isolat dari fraksi etil asetat daun pand

an wangi terhadap penurunan kadar glukosa akan dibandingkan d

engan kontrol negatif dan positif. Kalkulasi dimulai dengan perse

ntase inhibisi 50% enzim alfa glukosidase terhadap isolat daun

pandan wangi pada masing masing konsenterasi dengan rumus y

ang dapat dijabarkan sebagai berikut:

 35

Absorbansi Baku−Absorbansi Sampel

A= x 100 %
Absorbansi Baku

Keterangan

A = %Inhibisi enzim alfaglukosidase

(Yuniarto & Selifiana, 2018)

Sementara besaran sampel yang berperan dalam menur

unkan kadar glukosa dinyatakan dengan besaran EC50. Besaran in

i dihitung menggunakan pendekatan regresi linear dimana konse

nterasi sampel sebagai sumbu (x) dan persentase inhibisi enzim

alfa glukosidase sebagai sumbu (y). adapun perhitungan EC50 din

yatakan sebagai berikut :

50−a
EC50 =
b

EC50 = Efficient Concentration (µg/ml)

(Suprijono et al., 2018)

III.7 Tempat dan Waktu

III.7.1 Tempat

Tempat penelitian dilakukan di Biologi Farmasi Sekolah Tinggi

Ilmu Kesehatan Telogorejo Semarang.

III.7.2 Waktu Penelitian

Tabel 3.1: Waktu penelitian
 36

Waktu
Jenis Kegi
No 5 20 6 20 7 20 8 20 9 20 10 2 11 2 12 2 1 20 2 20
atan
22 22 22 22 22 022 022 022 23 23
Pembuatan
1
Proposal
Pencarian
Bahan dan
2
Pentiapan
Sampel
Identifikas
3 i Ekstrak d
an Fraksi
Pembuatan
4
plat KLTP
Proses Isol
5 asi & Uji
Kemurnian
Pembuatan
6 larutan Uji
Glukosa
Pengujian
Aktivitas P
7 enurunan
Kadar Glu
kosa
Analisis D
8
ata
Proposal A
9
khir

III.8 Analisis Hasil

 37

Data hasil penelitian penurunan kadar glukosa dianalisa menggunakan pendeka

tan statistik. Data dari semua kelompok dilakukan uji normalitas menggunakan saphi

ro wilk dan uji homogenitas menggunakan Levene-Test dengan nulai signifikan (p>0,

05). Jika data terdistribusi secara normal dan homogen maka dilanjutkan dengan uji p

arametik one way ANOVA. Jika terdapat perbedaan antar kelompok, maka uji lanjutan

yaitu post hoc LSD. Namun apabila data dinyatakan tidak normal atau tidak homogen

dengan nilai signifikan (p<0,05) maka persyaratan uji parametrik one way ANOVA tid

ak terpenuhi. Dilanjutkan analisis uji non parametrik kruskal wallis dan dilanjutkan d

engan uji Mann whitney.

 38

DAFTAR PUSTAKA
Balamurugan, V., Raja, K., Selvakumar, S., & Vasanth, K. (2019). Phytochemical
screening, antioxidant, anti-diabetic and cytotoxic activity of leaves of Pandanus
canaranus Warb. Materials Today: Proceedings, 48(xxxx), 322–329.
https://doi.org/10.1016/j.matpr.2020.07.603
Fadillah, A., Rahmadani, A., & Rijai, L. (2017). ANALISIS KADAR TOTAL
FLAVONOID DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAUN
KELUBUT (Passiflora foetida L.). March.
https://doi.org/10.25026/mpc.v5i1.217
Hardianto, D. (2021). Telaah Komprehensif Diabetes Melitus: Klasifikasi, Gejala,
Diagnosis, Pencegahan, Dan Pengobatan. Jurnal Bioteknologi & Biosains
Indonesia (JBBI), 7(2), 304–317. https://doi.org/10.29122/jbbi.v7i2.4209
IDF Diabetes Atlas 10th edition. (2021). In E. J. Boyko, D. J. Magliano, S.
Karuranga, L. Piemonte, P. Riley, P. Saeedi, & H. Sun (Eds.), Diabetes
Research and Clinical Practice (10th ed., Vol. 102, Issue 2).
https://doi.org/10.1016/j.diabres.2013.10.013
Islamiyati, R., & Pujiastuti, E. (2020). Perbandingan Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi
N- Heksan, Etil Asetat dan Air Ekstrak Etanol Kulit Buah Salak Menggunakan
Metode Peredaman Radikal Bebas DPPH. Cendekia Journal of Pharmacy, 4(2),
169–174.
Ismawan, B. (2013). 100 Plus Herbal Indonesia Bukti Ilmiah dan Racikan. PT
Trubus Swasdaya.
Karima, N., Pratiwi, L., & Pratiwi, A. (2019). Identifikasi Senyawa Kuersetin Ekstrak
Etil Asetat Daun Senggani (Melastoma malabathricum L.) dengan Metode
Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Jurnal Ilmiah Farmasi Fakultas Kedokteran
UNTAN, 4(4), 1–5.
Kayadoe, V., Fadli, M., Hasim, R., & Tomasoa, M. (2015). Ekstrak Daun Pandan
(Pandanus amaryllifous Roxb) sebagai Inhibitor Korosi Baja SS-304 dalam
Larutan H2SO4 The Extract of Pandan Leaf (Pandanus amaryllifous Roxb) as
Corrosion Inhibitors of SS-304 in H2SO4 Solution. Molekul, 10(2), 88–96.
 39

Kusumawati, N., Haryoto, & Indrayudha, P. (2021). Penghambatan Enzim Alpha-

Glukosidase oleh Daun Mimba (Azadirachta indica) dan Rimpang Temu
Mangga (Curcuma mangga). Jurnal Kefarmasian Indonesia, 11(1), 56–64.
https://doi.org/10.22435/jki.v11i1.3950
Leba, M. A. U. (2017). Buku Ajar Ekstraksi dan Real Kromatografi (1st ed.).
DEEPUBLISH (Grup Penerbitan CV BUDI UTAMA).
Lolok, N., Mashar, H. M., Annah, I., Saleh, A., Yuliastri, W. O., & Isrul, M. (2019).
Antidiabetic effect of the combination of garlic peel extract (Allium sativum)
and onion peel (allium cepa) in rats with oral-glucose tolerance method.
Research Journal of Pharmacy and Technology, 12(5), 2153–2156.
https://doi.org/10.5958/0974-360X.2019.00357.3
Minarti, Megawati, & Fajriah, S. (2021). Total Phenolic, Total Flavonoid Content,
and α-Glucosidase Inhibitory Activity of Centella asiatica (L.) Urb. Advances in
Health Sciences Research, 40, 222–226.
Mukhriani. (2014). Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif.
Jurnal Kesehatan, VII(2), 361–367.
Mursyida, F., Febriani, H., & Rasyidah. (2021). Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak
Daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) Terhadap Pertumbuhan
Bakteri Staphylococcus epidermidis. KLOROFIL, 5(2), 102–110.
Ningsih, V., Nugraheni, E. R., & Astirin, O. P. (2013). Uji toksisitas fraksi aktif
ekstrak etanol daun ginje (Thevetia peruviana) dengan metode Brine Shrimp
Test dan profil kandungan kimia fraksi teraktif. Biofarmasi Journal of Natural
Product Biochemistry, 11(2), 48–57. https://doi.org/10.13057/biofar/f110204
Nugrahani, R., Andayani, Y., & Hakim, A. (2016). Skrinning Fitokimia Dari Ekstrak
Buah Buncis (Phaseolus vulgaris L) Dalam Sediaan Serbuk. Jurnal Penelitian
Pendidikan IPA, 2(1), 96–103. http://jurnal.unram.ac.id/index.php/jpp-ipa
Patala, R., Mandang, M. A., & Tandi, J. (2022). Uji Efek Ekstrak Etanol Daun
Pandan Wangi Terhadap Histopatologi Ginjal Tikus Putih Diinduksi
Streptozotocin. Farmakologika Jurnal Farmasi, XIX(1), 67–77.
Prameswari, M. O., & Widjanarko, S. B. (2014). Uji Efek Ekstrak Air Daun Pandan
 40

Wangi Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Dan Histopatologi Tikus

Diabetes Mellitus (The Effect of Water Extract of Pandan Wangi Leaf to
Decrease Blood Glucose Levels and Pancreas Histopathology at Diabetes
Mellitus Rats). Jurnal Pangan Dan Agroindustri, 2(2), 16–27.
Riyanti, S., Ratnawati, J., & Aprilianti, S. (2018). Potensi Buah Okra (Abelmoschus
esculentus (L.) Moench) sebagai inhibitor alfa-glukosidase. Kartika : Jurnal
Ilmiah Farmasi, 6(1), 6–10. https://doi.org/10.26874/kjif.v6i1.122
Runtuwene, M. R. J., Kamu, V. S., & Rotty, M. (2021). AKTIVITAS
ANTIOKSIDAN FRAKSI ETIL ASETAT DAN FRAKSI HEKSANA DAUN
SOYOGIK (Saurauia bracteosa DC) TERHADAP OKSIDASI ASAM
LINOLEAT. Chemistry Progress, 14(2), 138.
https://doi.org/10.35799/cp.14.2.2021.37559
Safruddin, & Yuliati. (2022). Analisis Self Care Behavior Terhadap Kadar Gula
Darah Pasien Diabetes Melitus Di Puskesmas Antang Kota Makassar. Jurnal
Ilmiah Kesehatan Pencerah, 11(1), 10–24.
Silalahi, M. (2018). Pandanus amaryllifolius Roxb (PEMANFAATAN DAN
POTENSINYA SEBAGAI PENGAWET MAKANAN). Jurnal Pro-Life, 5(3),
626–636.
Sinulingga, S., Subandrate, & Safyudin. (2020). Uji Fitokimia dan Potensi
Antidiabetes Fraksi Etanol Air Daun Benalu Kersen (Dendrophtoe petandra (L)
Miq). Jurnal Kedokteran Dan Kesehatan , 16(1), 76–83.
https://jurnal.umj.ac.id/index.php/JKK
Sukandar, D., Sumarlin, L. O., Zahroh, H., & Amelia, E. R. (2012). Uji Aktivitas
Antidiabetes Fraksi Etil Asetat Daun Pandan Wangi (P. amaryllifolius Roxb.)
Dengan Metode Α-Glukosidase. Jurnal Riset Sains Dan Kimia Terapan, 2(1),
124–129.
Sumarlin, L. O., Sukandar, D., & Pratiwi, D. L. (2019). Aktivitas Penghambatan α-
Glukosidase Campuran Ekstrak Daun Namnam (Cynometra Cauliflora L.) dan
Madu Kaliandra. Al-Kimiya, 6(2), 87–94.
Suprijono, A., Kusumaningrum, D. A., & Kusmita, L. (2018). Pengaruh Pemberian
 41

Ekstrak Etanol Dan Isolat Flavonoid Teh Oolong (Camellia sinensis [L.] O. K)
Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Secara In Vitro Influence Of Ethanol
Extract And Flavonoids Isolates Of Oolong Tea (Camellia sinensis [L.] O. K) To
The Decrease Of Glucose Concentration In Vitro. Prosiding Seminar Nasional
Unimus, 1, 206–215. http://prosiding.unimus.ac.id
Warono, D., & Syamsudin. (2013). Unjuk Kerja Spektrofotometer Untuk Analisa Zat
Aktif Ketoprofen. KONVERSI, 2(2), 57–65.
Wati, M., Erwin, & Tarigan, D. (2017). Isolasi dan Identifikasi Senyawa Metabolit
Sekunder dari Fraksi Etil Asetat pada Daun Berwarna Merah Pucuk Merah
(Syzygium myrtifilium Walp.) Isolation and Identification of Secondary
Metabolites Compounds from Ethyl Acetate Fraction on Red Colored Pucuk
Merah (Syzygium Myrtifilium Walp.). Jurnal Kimia Mulawarman, 14(2), 100–
107.
42