LAPORAN AKHIR

PENELITIAN DOSEN

IDENTIFIKASI CEMARAN BAKTERI Escherichia coli

PADA ES BATU DI PUSAT HIBURAN MALAM
JALAN LALOVE PALU

Oleh Tim Peneliti :

Apt. Athia Kurnia Kasim, S.Farm. M.Si

Nopri Babidaa

AKADEMI FARMASI
BINA FARMASI
2022
 HALAMAN PENGESAHAN
PENELITIAN PERGURUAN TINGGI

Judul Kegiatan : Identifikasi Cemaran Bakteri Escherichia coli

Bidang Keilmuan PT
Ketua Peneliti
A. Nama Lengkap
B. NIDN
C. Jabatan Fungsional
D. Prodi
E. Nomor HP
F. E-mail
Anggota Peneliti
A. Nama Lengkap
B. Perguruan Tinggi
Biaya Penelitian
Pada Es Batu Di Pusat Hiburan Malam Jalan
Lalove Palu
: Ilmu Farmasi
: Athia Kurnia Kasim, S.Farm.M.Si.,Apt.
: 0905058702
: -
: DIII Farmasi
: 085341149970
: athiakurnia5587@gmail.com
: Nopri Babidaa
: Akademi Farmasi Bina Farmasi
: Dana Internal PT Rp. 4.500.000,-

Mengetahui Palu, 08 November 2021

Direktur
AKFAR Bina Farmasi Ketua Peneliti,

Apt. Nani Astria P. S.Farm., M.Si Apt. Athia Kurnia Kasim, S.Farm., M.Si
NIDN. 0929118702 NIDN. 0905058702

Menyetujui,
Ketua LPPM AKFAR Bina Farmasi

Apt. Meiske Langkamuda,S.Farm

ii
 ABSTRAK

Air minum merupakan kebutuhan pokok manusia yang harus dipenuhi setiap hari.
Dengan terpenuhinya kebutuhan ini, maka seluruh proses metabolisme dalam tubuh manusia
bisa berlangsung dengan lancar. Air minum yang dikonsumsi harus air minum yang
memenuhi persyaratan bakteriologi, radioaktif, fisik dan kimia. Kualitas air minum harus
bebas dari cemaran bakteri Escherichia coli. Adanya cemaran bakteri Escherichia coli dapat
menimbulkan beberapa gangguan kesehatan. Salah satu pengolahan air minum yang banyak
diminati masyarakat saat ini di Kota Palu yaitu es batu. Namun sebagian besar masyarakat
tidak menyadari es batu yang diolah menggunakan air yang tidak layak dikonsumsi.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ada atau tidaknya kontaminasi bakteri Escherichia
coli pada es batu di pusat hiburan malam Jalan Lalove Palu dan apakah telah sesuai
persyaratan bakteriologis air minum menurut Permenkes RI No.
492/MENKES/PER/IV/2010. Metode yang digunakan adalah metode Most Probable Number
(MPN). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa sampel A dinyatakan positif terkontaminasi
bakteri Escherichia coli, sedangkan pada sampel B dinyatakan negatif terkontaminasi bakteri
Escherichia coli. Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa sampel A tidak sesuai
dengan ketentuan persyaratan bakteriologis air minum sedangkan pada sampel B telah
memenuhi persyaratan kualitas air minum berdasarkan Permenkes RI
492/MENKES/PER/IV/2010, bahwa dalam jumlah per 100 ml sampel air minum adalah 0
bakteri Escherichia coli.

Kata Kunci : es batu, bakteri, escherichia coli, cemaran bakteri

iii
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur saya panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa Telah melimpahkan
karunia dan rahmat-Nya, karena berkat karunia dan rahmat-Nya, kami dapat menyelesaikan
kegiatan penelitian ini. Penelitian yang disusun ini dapat dimanfaatkan untuk kepentingan
metodologi pembelajaran di bidang kefarmasian ditingkat perguruan tinggi dan merupakan
bentuk pengalaman Tridharma dari Perguruan Tinggi. Berkenaan hal tersebut maka kami
menyampaikan dengan tulus penghargaan dan terima kasih kepada:
1. dr. PASH Panggabean, MPH., DR (HC) Ketua Yayasan Karya Wacana Palu.
2. Apt. Nani Astria P. S.Farm., M.Si Direktur AKFAR Bina Farmasi
3. Ketua Lembaga Penelitian dan Pengabdian Kepada Masyarakat AKFAR Bina Farmasi
4. Wakil Direktur 1 Bidang Akademik
5. Semua pihak yang telah membantu kegiatan ini.
Kami menyadari sepenuhnya bahwa kegiatan penelitian ini banyak kekurangannya,
oleh karena itu kritik dan saran dari semua pihak sangat kami harapkan, sehingga
pelaksanaan penelitian yang akan datang dapat lebih baik.

Palu, 10 September 2022

Tim Peneliti

iv
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ................................................................................................................i

HALAMAN PENGESAHAN..................................................................................................ii

ABSTRAK...............................................................................................................................iii

KATA PENGANTAR..............................................................................................................iv

DAFTAR ISI ............................................................................................................................v

DAFTAR TABEL .................................................................................................................viii

DAFTAR GAMBAR ..............................................................................................................ix

DAFTAR LAMPIRAN............................................................................................................x

BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................................1

1.1 Latar Belakang....................................................................................................1

1.2 Rumusan Masalah...............................................................................................3

1.3 Tujuan Penelitian................................................................................................3

1.4 Manfaat Penelitian..............................................................................................3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA...........................................................................................5

2.1 Mikrobiologi.......................................................................................................5

2.2 Bakteri................................................................................................................ 5

2.2.1 Bakteri Coliform........................................................................................5

2.2.2 Bakteri Escherichia coli............................................................................6

2.2.2.1. Klasifikasi Bakteri Escherichia coli............................................6

2.3 Es Batu................................................................................................................7

2.3.1 Persyaratan Kualitas Air Minum...............................................................8

2.4 Metode Identifikasi Bakteri..............................................................................11

2.4.1 Uji Pendugaan (Presumptive Test)...........................................................11

2.4.2 Uji Konfirmasi (Confirmed Text)............................................................12

v
 2.4.3 Uji Kepastian (Complete Text)................................................................12

2.5 Medium.............................................................................................................13

2.5.1. Jenis-jenis Medium.................................................................................13

2.5.2. Medium Yang Digunakan.......................................................................14

2.6 Kerangka Konsep.............................................................................................15

BAB III METODE PENELITIAN....................................................................................16

3.1 Jenis Penelitian.................................................................................................16

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian...........................................................................16

3.2.1 Waktu Penelitian.....................................................................................16

3.2.2 Tempat Penelitian...................................................................................16

3.3 Alat dan Bahan.................................................................................................16

3.3.1 Alat Yang Digunakan..............................................................................16

3.3.2 Bahan Yang Digunakan...........................................................................17

3.4 Cara Kerja.........................................................................................................17

3.4.1 Teknik Pengambilan Sampel...................................................................17

3.4.2 Sterilisasi Alat.........................................................................................17

3.4.3 Pembuatan Medium................................................................................18

3.5 Perlakuan .........................................................................................................19

3.6 Pengujian .........................................................................................................19

3.6.1 Uji Perkiraan (Presumptive Test)............................................................19

3.6.2 Uji Konfirmasi (Confirmed Test)............................................................20

3.6.3 Uji Kepastian (Complete Test)................................................................21

3.7 Analisis Data.....................................................................................................21

BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN......................................................22

4.1 Hasil Penelitian..................................................................................................22

4.2 Pembahasan........................................................................................................26

vi
BAB V PENUTUP..................................................................................................................30

5.1 Kesimpulan.........................................................................................................30

5.2 Saran...................................................................................................................30

DAFTAR PUSTAKA..............................................................................................................31

LAMPIRAN............................................................................................................................33

PERSYARATAN KEASLIAN TULISAN............................................................................52

DAFTAR RIWAYAT HIDUP.................................................................................................53

vii
 DAFTAR TABEL

Tabel Teks Halaman

2.1 Daftar Parameter Kualitas Air Minum.............................................. 9

4.1 Hasil Tes Perkiraan Menggunakan Medium LB Sampel A.............. 22

4.2 Hasil Tes Perkiraan Menggunakan Medium LB Sampel B.............. 23

4.3 Hasil Tes Konfirmasi Menggunakan Medium BGLB...................... 24

4.4 Hasil Tes Kepastian Menggunakan Medium EMB.......................... 25

viii
 DAFTAR GAMBAR

Gambar Teks Halaman

2.1 Bakteri Escherichia coli...........................................................................7

DAFTAR LAMPIRAN

ix
Lampiran Teks Halaman

1. Alur penelitian..........................................................................................33

2. Skema kerja metode MPN........................................................................35

3. Rumus pengenceran..................................................................................36

4. Sampel es batu..........................................................................................38

5. Medium yang digunakan..........................................................................39

6. Pembuatan medium...................................................................................40

7. Alat yang digunakan.................................................................................41

8. Pengenceran sampel..................................................................................42

9. Uji perkiraan.............................................................................................43

10. Uji konfirmasi...........................................................................................46

11. Uji kepastian.............................................................................................50

x
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Air minum merupakan kebutuhan pokok manusia yang harus dipenuhi setiap hari.

Dengan terpenuhinya kebutuhan ini, maka seluruh proses metabolisme dalam tubuh

manusia bisa berlangsung dengan lancar. Berdasarkan PERMENKES RI

No:492/MENKES/PER/IV/2010 syarat-syarat dan pengawasan kualitas air bersih yang

meliputi persyaratan fisik yaitu tidak berbau, tidak berwarna dan tidak berasa. Salah satu

pengolahan air minum yang banyak diminati masyarakat saat ini di Kota Palu yaitu es

batu, karena Kota Palu merupakan salah satu daerah tropis. Es batu yang kemudian

diolah menjadi minuman olahan dan mempunyai banyak variasi sehingga diperjual

belikan di pinggiran jalan, di cafe, dan di kantin.

Menurut persyaratan minimum yang sangat ketat dari (BPOM, 2019) tentang

kriteria mikrobiologi untuk es dan minuman maka proses penyiapan dan penyajian

minuman es seharusnya memenuhi cara pengolahan pangan yang baik (CPPB).

Penelitian yang dilakukan oleh (Nurjanah dkk, 2021) tentang titik kritis bahaya selama

proses dan penyiapan berbagai jenis minuman es yang populer dilakukan dengan

observasi terhadap tahapan proses, peralatan, dan kondisi lingkungan pada skala usaha

rendah, menengah dan atas menunjukan bahwa jumlah titik kritis semakin banyak

dengan semakin kompleks cara penyiapan, semakin rendahnya skala usaha dan semakin

buruknya fasilitas.

Pada penelitian keberadaan dan perilaku Salmonella dalam es batu yang dilakukan

oleh (Dewanti, 2006) tidak ditemukan Salmonella pada lima sampel es batu yang

dianalisis, akan tetapi diperoleh dua isolat Esherichia coli, Enterobacter sp, E.cloacae,

1
 Pseudomonas dll. Pada penelitian (Nur & Winarsih, 2018) tentang Identifikasi bakteri

Esherichia coli pada es batu di wilayah Bojong Raya, Cengkareng Jakarta Barat

diperoleh 8 sampel positif teridentifikasi bakteri Escherichia coli dengan persentase 80%

dan 2 sampel tidak teridentifikasi bakteri, dengan persentase 20%.

Pada penelitian (Narwati dkk, 2013) Tentang uji mikrobiologis di kantin sekitar

lingkungan Fakultas Kedokteran UNIKA ATMA JAYA didapatkan hasil penelitian

setelah melalui beberapa tahap mulai dari uji penduga, uji penguat, dan uji lengkap

didapatkan bahwa semua sampel es batu konsumsi yang diambil menunjukan hasil

positif adanya cemaran bakteri Escherichia coli. Penelitian yang dilakukan oleh (Rozanti

dkk, 2017) tentang identifikasi bakteri Coliform dan Escherichia coli pada jajanan

minuman yang menggunakan es batu di Lembah UGM didapatkan 32 sampel penelitian

yang memenuhi kriteria inklusi yaitu 16 sampel jajanan minuman dan 16 sampel es batu.

Sampel jajanan minuman yang diuji, 100% positif bakteri Coliform dan 100% positif

Escherichia coli. Sedangkan pada sampel es batu, 93,75% positif bakteri Coliform dan

25% positif Escherichia coli.

Berdasarkan latar belakang di atas maka peneliti tertarik untuk melakukan

penelitian tentang Identifikasi Bakteri Escherichia coli pada es batu di pusat hiburan

malam Jalan Lalove Palu. Dikarenakan tempat tersebut merupakan pusat hiburan

masyarakat yang dipenuhi pedagang jajanan minuman olahan yang menggunakan es

batu.

1.2 Rumusan Masalah

1. Apakah terdapat kontaminasi bakteri Escherichia coli pada es batu di pusat hiburan

malam jalan Lalove Palu?

2. Apakah telah sesuai dengan ketentuan persyaratan bakteriologis air minum yang

tercantum dalam keputusan permenkes RI No:492/MENKES/PER/IV/2010

2
1.3 Tujuan Penelitian

1. Untuk mengetahui apakah terdapat cemaran bakteri Escherichia coli pada es batu di

pusat hiburan malam jalan Lalove Palu.

2. Untuk mengetahui apakah telah sesuai dengan ketentuan persyaratan bakteriologis air

minum yang tercantum dalam permenkes RI No:492/MENKES/PER/IV/2010.

1.4 Manfaat Penelitian

1. Bagi Masyarakat

Memberikan informasi dan pengetahuan tentang es batu yang layak untuk

dikonsumsi.

2. Bagi Akademik

Sebagai sumber acuan bagi peneliti lain untuk melakukan penelitian lebih lanjut

mengenai bakteri Escherichia coli pada es batu.

3. Bagi Peneliti

Hasil penelitian ini berfungsi untuk menambah pengetahuan dan keterampilan

tentang cara penilaian dan pemeriksaan kualitas es batu secara mikrobiologis.

3
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Mikrobiologi

Mikrobiologi ialah sebuah cabang ilmu biologi yang mempelajari mikroorganisme

atau jasad renik, yang tidak dapat dilihat jelas dengan mata tanpa menggunakan

mikroskop, khususnya, bakteri, fungi, alga, protozoa, dan mikroskopik. Dalam bidang

mikrobiologi dan peranannya dalam kesehatan beberapa diantaranya bermanfaat dan

merugikan. Yang terlibat dalam kegiatan manusia sehari-hari seperti misalnya

pembuatan anggur, keju, yougurt, dan produksi penisilin (Becker dkk, 2015)

2.2 Bakteri

Bakteri merupakan sel prokariotik yang khas, dan termasuk organisme bersel

satu. berbentuk bola seperti batang atau spiral, memilili diameter 0.5 sampai dengan 1.0

um. Panjang 1.5 um sampai 2.5 um. Sistem reproduksi utama yaitu membela biner

sederhana yaitu proses seksual. Beberapa jenis bakteri tumbuh pada suhu 0°C, ada juga

bakteri yang tumbuh dengan baik di air panas pada suhu 90°C, bahkan lebih. Banyak

bakteri yang bisa tumbuh pada suhu diantara keduanya (Becker dkk, 2015)

2.2.1 Bakteri Coliform

Bakteri Coliform merupakan bakteri bersifat gram negatif memiliki bentuk

batang tidak ada spora yang habibat alaminya di saluran cerna manusia.

Penggolongan bakteri Coliform dan sifatnya dibagi menjadi dua, bakteri Coliform

fekal yaitu Escherichia coli yang berasal dari kontaminasi tinja manusia, Coliform

non fektal yaitu Enterobacter aerogenes bakteri ini berasal dari hewan dan

tanaman sudah mati. Family Enterobacteriaceae memiliki kerakteristik yaitu

bakteri gram negatif. bersifat motil dan flagel, peritrik atau nonmotil. tumbuh pada

5
 media pepton atau ekstrak daging tanpa penambahan natrium atau suplemen lain,

dan memfermentasikan laktosa sehingga. menghasilkan kekeruhan dan produksi

gas pada suhu 37°C dalam waktu 48 jam (Pasaribu, 2019).

2.2.2 Bakteri Escherichia coli

Escherichia coli adalah jenis bakteri Coliform tinja yang biasanya ditemukan

di usus manusia. Berbentuk batang pendek, dengan ukuran panjang 2,6 - 6 mikro

dan diameter 1,1-1,5 mikro suhu optimal pertumbuhan pada 37℃ . Bakteri

Escherichia coli yang berada di usus besar manusia yang berfungsi membantu

menekan pertumbuhan bakteri jahat, selain itu membantu dalam proses pencernaan

termasuk dalam pembusukan sisa-sisa makanan dalam usus besar (Pasaribu, 2019).

2.2.2.1. Klasifikasi Bakteri Escherichia coli (Apriliyani, 2017).

Kingdom : Bacteria

Filum : Proteobacteria

Kelas : Gamma Proteobacteria

Ordo : Enterobacteriales

Family : Enterobacteriaceae

Genus : Escherichia

Spesies : Escherichia coli

Gambar 2.1 Bakteri Escherichia coli. https://www.fieldfisher.com

6
2.3 Es Batu

Es batu merupakan salah satu jenis produk pangan yang yang terbuat dari air yang

dibekukan. Es batu merupakan hasil pembekuan air minum mencapai 0 ℃ sehingga

menjadi massa yang padat dan berbentuk seperti kristal. Terbentuknya massa yang padat

dikarenakan salah satu molekul air yaitu hidrogen akan bergerak lambat pada suhu 0 ℃

sehingga molekul hidrogen yang satu tidak mampu memutuskan ikatannya dengan

molekul hidrogen lainnya. Kerapatan ikatan antar molekul hidrogen tersebut

mengakibatkan air berubah wujud menjadi padat, dan karena air berwarna jernih

sehingga gambaran warnanya seperti kristal (Rifta dkk, 2016)

Umumnya es batu memiliki berbagai macam manfaat, salah satu manfaatnya yaitu

sebagai pelengkap yang dsajikan bersamaan dengan air minum, oleh sebab itu es batu

termasuk jenis produk pangan pelengkap. Tujuan ditambahkannya es batu dalam

minuman yaitu untuk menimbulkan sensasi dingin dan segar (Rifta dkk, 2016)

Es batu memiliki suhu yang rendah sehingga aktivitas bakteri termasuk bakteri

patogen dapat menurun atau berhenti. Hal tersebut disebabkan karena metabolisme

bakteri membutuhkan bantuan enzim dimana aktivitas kerja enzim sangat dipengaruhi

oleh suhu. Karena hal tersebut es batu dianggap relatif aman, tetapi pada beberapa

penelitian terdahulu mengenai es batu, masih terdapat bakteri patogen pada es batu yang

beredar dipasaran (Rifta dkk, 2016)

2.3.1 Persyaratan Kualitas Air Minum

Dari PERMENKES RI NO:492/MENKES/PER/IV/2010 mengenai

persyaratan Kualitas air minum, menyatakan bahwa air minum yang layak dan

aman bagi kesehatan harus memenuhi persyaratan kualitas air minum meliputi:

7
 a. Parameter Wajib

1. Syarat Fisik

Air yang berkualitas aman dan layak dikonsumsi wajib memenuhi

kriteria persyaratan fisik yaitu, tidak berasa, tidak berwarna, tidak berbau,

tidak keruh dan suhu udara maksimum ±3°C.

2. Syarat Mikrobiologi

Syarat dari mutu air minum sangat dipengaruhi oleh kontaminasi

bakteri Escherichia coli dan bakteri Coliform, karena keberadaan bakteri

Escherichia coli disebut sebagai indikator penyebab pencemaran tinja

dalam air. Kandungan bakteri Escherichia coli dan bakteri Coliform dalam

air minum standar yang ditetapkan 0 per 100 ml sampel.

b. Parameter Tambahan.

1. Persyaratan Kimia

Air minum untuk dikonsumsi tidak boleh tercemar atau

mengandung bahan-bahan kimia, seperti organik, anorganik, pestisida

dan desinfektan.

Tabel 2.1 Daftar Parameter Wajib Kualitas Air Minum (Kemenkes, 2010).
Kadar
Maksimum
No Parameter Satuan
Yang
Ditetapkan
Parameter yang berhubungan langsung
1
bagi kesehatan
a. Parameter Mikrobiologi
Jumlah per 100 mL
1. E-Coli 0
sampel
Jumlah per 100 mL
2. Total Bakteri Coliform 0
sampel
b. Kimia An-Organik
1. Arsen mg/L 0,01
2. Fluoride mg/L 1,5
3. Total Kromium mg/L 0,05
4. Kadmium mg/L 0,003

8
 5. Nitrit mg/L 3
6. Nitrat mg/L 50
7. Sianida mg/L 0,07
8. Selenium mg/L 0,01
2. Parameter Yang Kurang Berhubungan
Langsung di Kesehatan
a. Parameter Fisik
1. Bau Tidak Berbau
2. Warna TCU 15
3. Total Zat Padat Terlarut mg/L 500
4. Kekeruhan NTU 5
5. Rasa Tidak berasa
6. Suhu ℃ Suhu udara ± 3
b. Parameter Kimia
1. Aluminium mg/L 0,2
2. Besi mg/L 0,3
3. Kesadahan mg/L 500
4. Khlorida mg/L 250
5. Mangan mg/L 0,4
6. Ph mg/L 6,5-8,5
7. Seng mg/L 3
8. Sulfat mg/L 250
9. Tembaga mg/L 2
10. Amonia mg/L 1,5

2.4 Metode Identifikasi Bakteri

Metode identifikasi bakteri yang dipakai adalah metode MPN (Most Probable

Number) merupakan teknik yang digunakan untuk menghitung populasi Coliform,

pengujian ini terdiri dari uji pendugaan (Presumptive Test), uji penegasan (Confirmed

Test) dan uji kepastian (Completed Test) (Putri, 2015)

2.4.1 Uji Pendugaan (Presumptive Test)

Uji pendugaan merupakan uji kuantitatif Escherichia coli menggunakan

media Lactose Broth, tes ini berfungsi untuk mengetahui besarnya angka bakteri

Coliform dalam sampel, dan menunjukkan adanya bakteri Coliform berdasarkan

terbentuknnya asam dan gas yang disebabkan oleh fermentasi laktosa bakteri

golongan coli. Tingkat dari kekeruhan pada media laktosa yang menunjukkan

9
 adanya gas yang dihasilkan oleh bakteri. Tabung yang dinyatakan positif apabila

terdapat produksi gas dalam tabung durham. Terbentuknnya gas dapat diamati

dengan mata telanjang. Kandungan dari hasil bakteri Escherichia coli bisa

diamati dari menghitung tabung durham yang menunjukkan hasil reaksi positif

yaitu terbentuk gas dan asam. Inkubasi 1 x 24 jam jika hasilnya negatif, maka

diteruskan proses inkubasi untuk 2 x 24 jam suhu 37°C. Dari inkubasi 2 x 24 jam

belum ditemukan gas dari dalam tabung durham menujukkan hasil negatif (Putri,

2015).

2.4.2 Uji Konfirmasi (Confirmed Test)

Tabung yang dinyatakan positif dari uji konfirmasi dilanjutkan dengan uji

konfirmasi, sampel diinokulasi pada media Brilliant Green lactose Broth pada

suhu 37°C selama 2 x 24 jam. Apabila sampel menghasilkan gas, maka uji

konfirmasi dinyatakan positif. Pernyataan hasil dari ini adalah jumlah tabung

yang positif gas yang dicatat dalam tabel. Angka yang diperoleh menyatakan

jumlah bakteri Escherichia coli dalam setiap gram/tiap ml sampel yang diuji.

2.4.3 Uji Kesempurnaan (Completed Test)

Uji Kesempurnaan dilakukan dengan cara menginokulasikan koloni

bakteri pada medium agar dengan cara menggoreskan dan inkubasi pada waktu 1

x 24 jam suhu 37°C. Media yang digunakan adalah EMB. Pembenihan pada

media agar ini menyebabkan media menjadi merah menyala dikarenakan

pertumbuhan bakteri Escherichia coli. Jika positif akan diperoleh hasil hijau

metalik (Putri, 2015).

2.1 Medium

10
 Medium merupakan substansi yang terdiri dari gabungan zat-zat makanan

(Nutrisi) yang berfungsi untuk pemeliharaan serta menunjang pertumbuhan

mikroorganisme. Mikroorganisme adalah makhluk hidup, untuk memeliharanya

diperlukan medium yang wajib mengandung semua zat yang dibutuhkan untuk

pertumbuhannya, antara lain senyawa-senyawa organik (protein, karbohidrat, mineral,

lemak dan vitamin). Medium berfungsi untuk melihat gerakan dari suatu mikroorganisme

apakah bersifat motil dan non motil, medium ini ditambahkan sebagai bahan pemadat

(Putri, 2015).

2.5.1. Jenis-Jenis Medium

Jenis medium berdasarkan komposisinya terbagi menjadi empat. yaitu

medium umum, medium selektif, medium diperkaya, dan medium diferensial.

1. Medium Umum

Merupakan medium alami yang terdapat nutrisi umum untuk

mikroorganisme, contoh: Nutrient Broth, Nutrient Agar merupakan medium

umum diperuntukan untuk bakteri dan Potato Dekstrase Agar berfungsi

sebagai kultur dari macam-macam jenis fungi maupun jamur.

2. Medium Selektif

Merupakan medium sintetik yang ditambahkan suatu zat kimia tertentu

sehingga dapat mencegah pertumbuhan dari sekelompok jenis bakteri tidak

diharapkan tumbuh tanpa menghalangi pertumbuhan bakteri yang diinginkan.

Contoh: Brilliant Green Lactose Bile Broth yang digunakan dalam penentu

bakteri Coli tinja, jenis medium ini dapat menghambat pertumbuhan bakteri

permentasi selain bakteri Coliform.

3. Medium Diperkaya

Merupakan medium sintetik yang didalamnya terdapat banyak

11
 komponen-komponen yang berasal dari makhluk hidup.

4. Medium Diferensial

Merupakan medium yang terdiri dari beberapa senyawa kimia tertentu

dan dapat membedakan dari sifat mikroorganisme tertentu dalam suatu cultur

campuran dan jenis mikroorganisme lainnya disebabkan adanya perbedaan

antara respon terhadap senyawa kimia. Contoh: Eosin Methylene Blue

digunakan dalam uji konfirmasi bakteri Escherichia coli dalam uji Mast

Problem Number untuk memperlihatkan jenis koloni berwarna hijau metalik.

Namun untuk bakteri Enterobacter menunjukkan warna merah mudah tanpa

unsur metalik (Putri, 2015).

2.5.2. Medium Yang Digunakan

1. Media Lactose Broth (LB)

Komposisi :

Lab-lemco powder : 3 gram

Peptone : 5 gram

Lactose : 5 gram

Air suling : 1000 mL

2. Brillian Green Lactose Broth (BGLB)

Komposisi :

Peptone : 10 gram

Lactose : 10 gram

Oxgall : 20 gram

Brilliant Green : 0.0133 gram

12
 3. Media Basin Methylene Blue (EMB)

Komposisi:

Gelatin : 10 gram

Laktosa : 10 gram

Dipotasium fosfat : 2 gram

Eosin Y : 0.4 gram

Methylene Blue : 0.065 gram

Agar : 15 gram

2.6 Kerangka Konsep

Variable Bebas Variabel Terikat

Es Batu bakteri Escherichia coli

13
 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian

Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah eksperimental yang

meliputi pengambilan sampel, sterilisasi alat, pembuatan media dan identifikasi bakteri

Escherichia coli untuk mengetahui adanya cemaran bakteri yang ada pada es batu dalam

minuman olahan yang dijual di pinggiran jalan.

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian

3.2.1 Waktu Penelitian

Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan Agustus 2022.

3.2.2 Tempat Penelitian

Penelitian ini telah dilakukan di Laboratorium Terpadu Akademi Farmasi

Bina Farmasi.

3.3 Alat dan Bahan

3.3.1 Alat Yang Digunakan

Gelas kimia 250 mL, magnetic stirrer, Erlenmeyer 500 mL, incubator,

neraca analitik, lemari pendingin, tabung durham, lampu spiritus, kawat ose,

oven, hot plate, autoklaf, rak tabung reaksi, tabung reaksi, pipet tetes, batang

pengaduk, cawan petri 100mm x 15mm, gelas ukur 100 mL, dan wadah steril.

3.3.2 Bahan Yang Digunakan

Media Brilliant green Lactose Broth (BGLB), media Lactose Broth (LB),

Media Eosin Methylene blue (EMB), Aquades, alkohol, tissu, kapas, aluminium

foil.

14
3.4 Cara Kerja

3.4.1 Teknik Pengambilan Sampel

a. Pengambilan Sampel

Sampel penelitian ini menggunakan es batu pada pedagang minuman

di Pusat Hiburan Malam Jalan Lalove Palu, berjumlah 2 sampel.

b. Teknik Pengambilan Sampel

Sampel es batu diambil dari pedagang jajanan minuman. Sampel

penelitian ini diambil secara accidental sampling.

3.4.2 Sterilisasi

Alat-alat yang digunakan pada penelitian terlebih dahulu dicuci bersih

dengan air mengalir. Kemudian dikeringkan dengan menggunakan kertas tisu atau

kain agar mempercepat proses pengeringan, setelah kering alat-alat yang

mempunyai mulut seperti tabung reaksi, erlenmeyer, dan gelas ukur disumbat

dengan kapas lalu dibungkus dengan kertas. Alat-alat seperti cawan petri, cawan

porselin pipet tetes, tabung reaksi, tabung durham dan batang pengaduk

disterilisasikan dalam oven pada suhu 180°C selama 1 jam, dan alat alat seperti

gelas kimia, gelas ukur, dan Erlenmeyer disterilisasikan dalam autoklaf dengan

121°C dalam 15 menit.

3.4.3 Pembuatan Medium

a. Media Lactose Broth (LB)

Cara pembuatan :

1. Timbang LB sebanyak 2,6 gram dimasukkan ke dalam Erlenmeyer lalu

dilarutkan ke dalam 200 mL aquades.

2. Kemudian dipanaskan di atas hot plate sampai tercampur dengan

sempurna.

15
 3. Disterilkan di dalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 121°C.

b. Media Brillian Green Lactose Broth (BGLB)

Cara pembuatan :

1. Timbang BGLB Sebanyak 8 gram dimasukkan ke dalam erlenmeyer lalu

dilarutkan ke dalam 200 mL aquades.

2. Kemudian dipanaskan di atas hot plate sampai tercampur dengan

sempurna.

3. Disterilkan di dalam autoklaf dalam waktu 15 menit pada suhu 121°C.

c. Media Eosin Methylene Blue (EMB)

Cara pembuatan :

1. Menimbang EMB Sebanyak 7,5 gram dimasukkan ke dalam erlenmeyer

lalu dilarutkan ke dalam 200 ml aquades.

2. Kemudian panaskan di atas hot plate sampai homogen.

3. Disterilkan di autoklaf dalam 15 menit suhu 121°C.

4. Tuangkan ke dalam cawan petri steril.

3.5 Perlakuan

a. Pengambilan sampel

Sampel es batu diambil menggunakan wadah steril sebanyak 400 mL

kemudian diolah di Laboratorium Akademi Farmasi Bina Farmasi.

b. Pengenceran sampel

1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2. Siapkan 3 tabung reaksi untuk sampel air minum A tiap-tiap tabung berisi 9 ml

aquadest.

3. Masukkan sampel I mL di tabung reaksi yang berisi 9 mL aquades lalu aduk

hingga homogen. Diperoleh pengenceran 10-1.

16
 4. Pengenceran 10-1 dituang 1 ml ke dalam tabung reaksi 2, yang berisi 9 ml

aquadest. Diperoleh pengenceran 10-2.

5. Pengenceran 10-2, diambil 1 ml lalu dimasukkan ke dalam tabung reaksi 3,

diperoleh pengenceran 10-3. Pengerjaan yang sama dilakukan untuk pengenceran

sampel air minum B.

3.6 Pengujian

a. Uji Pendugaan (Presumptive Test)

1. Siapkan semua alat dan bahan yang akan digunakan selama penelitian.

2. Ambil sebanyak 9 mL larutan Lactose Broth (LB) dimasukkan dalam tabung

reaksi.

3. Tambahkan sampel sebanyak 1 mL dari masing-masing pengenceran (10-1), (10-

2
), (10-3) ke dalam tabung reaksi.

4. Kemudian masukkan tabung durham ke dalam tabung reaksi dalam keadaan

terbalik, kocok perlahan sampai tabung durham terisi penuh.

5. Selanjutnya inkubasi untuk semua tabung dalam inkubator pada suhu 37 °C

selama 1 x 24 jam.

6. Amati jika terdapat gelembung atau gas dalam tabung durham dan terdapat

kekeruhan artinya positif. Namun bila tidak terdapat sama sekali gelembung dan

kekeruhan pada medium maka dilanjutkan inkubasi selama lagi 2 x 24 jam suhu

37°C.

7. Pengerjaan ini dilakukan secara triplo.

b. Uji Konfirmasi (Confirmed Test)

1. Sampel yang digunakan dari tabung yang positif pada pengujian LB

2. Ambilah larutan BGLB sebanyak 9 mL dimasukkan dalam tabung reaksi.

3. Tambahkan sampel sebanyak 1 mL dari masing-masing pengenceran (10-1), (10-

17
 2
). (10-3) ke dalam tabung reaksi.

4. Kemudian masukkan tabung durham ke dalam tabung reaksi dalam keadaan

terbalik, kocok perlahan sampai tabung durham terisi penuh.

5. Inkubasi semua tabung dalam inkubator pada suhu 37°C selama 1 x 24 jam.

6. Amati Tabung reaksi apakah terjadi kekeruhan dan gas yang terbentuk dalam

tabung durham pada media BGLB, namun bila tidak terdapat sama sekali

gelembung dan kekeruhan pada medium maka dilanjutkan inkubasi selama lagi

2 x 24 jam pada suhu 37°C

7. Pengerjaan ini dilakukan secara triplo

c. Uji Kesempurnaan (Completed Test)

1. Ambilan sampel yang positif dari media BGLB sebanyak 1 atau 2 ose.

2. Kemudian tanam pada media EMB secara zig-zag

3. Inkubasi plate cawan petri pada suhu 37 °C selama 2 x 24 jam dalam posisi

terbalik.

4. Mengamati bakteri yang tumbuh pada media EMB membentuk koloni berwarna

hijau metalik.

5. Pengerjaan ini dilakukan secara triplo.

3.7 Analisis Data

Teknik pengumpulan data dilakukan dengan melakukan pengamatan dari masing-

masing kelompok bahan uji, kemudian hasil tersebut disajikan dalam bentuk tabel,

selanjutnya hasil tersebut dipaparkan.

18
 BAB IV

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian

Dari hasil penelitian identifikasi cemaran bakteri Escherichia coli pada es batu di

Pusat Hiburan Malam jalan Lalove Palu yang dilakukan di Laboratorium Terpadu

Akademi Farmasi Bina Farmasi, diperoleh hasil sebagai berikut :

Tabel 4.1 Hasil Tes Perkiraan Menggunakan Medium LB pada sampel A

Pengen
Sampel Replikasi Gambar Ket.
ceran
A1 A2 A3
Ada Warna Warna A1= +
gas, keruh keruh
warna A2= +
10-1
keruh
A3 = +

A4 A5 A6
Ada Warna Ada A4 = +
Sampel gas, keruh gas
A warna A5 = +
10-2 keruh
A6 = +

A7 A8 A9
Ada Ada Ada
gas, gas, gas A7 = +
warna Warna
10-3 A8 = +
keruh keruh

A9 = +

Keterangan:
+ : Ada bakteri (Positif)
- : Tidak ada bakteri (Negatif)

19
Tabel 4.2 Hasil Tes Perkiraan Menggunakan Medium LB pada sampel B
Pengenc
Sampel eran Replikasi Gambar Ket.

B1 B2 B3
Tidak Tidak Tidak
ada gas, ada gas, ada gas,
warna warna warna
jernih jernih jernih
B1 = -
-1
10
B2 = -

B3 = -
B4 B5 B6

10-2 B4 = -
Tidak Tidak Tidak B5 = -
Sampel B Ada gas, ada gas, ada gas,
warna warna warna
jernih jernih jernih B6 = -

B7 B8 B9
Tidak Tidak Tidak
ada gas, ada gas, ada gas, B7 = -
10 -3
Warna Warna Warna
jernih jernih jernih
B8 = -

B9 = -

Keterangan:
+ : Ada bakteri (Positif)
- : Tidak ada bakteri (Negatif)

20
Tabel 4.3 Hasil Tes Konfirmasi Menggunakan Medium BGLB
Pengencer
Sampel Replikasi Gambar Ket.
an
A1 A2 A3
Ada gas, Ada gas,
warna warna Warna A1 = +
10-1 keruh Keruh keruh

A2 = +

A3 = +

A4 A5 A6
Ada gas, Ada gas, Warna
Sampel warna warna keruh A4 = +
A keruh Keruh
10-2
A5 = +

A6 = +

A7 A8 A9

Ada gas, Ada gas, Ada gas

warna Warna warna A7 = +
10 -3
keruh Keruh keruh

A8 = +

A9 = +

Keterangan:

+ : Ada bakteri (Positif)

- : Tidak ada bakteri (Negatif)

Tabel 4.4 Hasil Tes Kepastian Menggunakan Medium EMB

21
 Pengen
Sampel Replikasi Gambar Ket.
ceran
A1 A2 A3

A1 = +
-1
10
Terdapa Terdapat Terdapat
t warna warna warna A2 = +
hijau hijau hijau
metalik metalik metalik
A3 = +

A4 A5 A6
Terdapa Terdapat Terdapat
Sampel
t warna warna warna A4 = +
A
hijau hijau hijau
10-2
metalik metalik metalik
A5 = +

A6 = +

A7 A8 A9
Terdapa Terdapat Terdapat
t warna warna warna
hijau hijau hijau A7 = +
10-3
metalik metalik metalik

A8 = +

A9 = +

Keterangan :

+ : Ada bakteri (Positif)

- : Tidak ada bakteri (Negatif)

4.2 Pembahasan

22
 Penelitian ini menggunakan sampel es batu yang berasal dari Pusat Hiburan

Malam jalan Lalove Palu. Menggunakan metode MPN (Most Porbable Number) yang

terdiri dari uji pendugaan, uji kepastian, dan uji kelengkapan. Pada pengujian ini

menggunakan pengujian secara triplo.

Pengambilan sampel es batu ini bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya bakteri

Escherichia coli berdasarkan peraturan Menteri Kesehatan No. 492/Menkes/Per/IV/2010

mengenai syarat kualitas air minum pada Escerichia coli jumlah sampel pada per 100 ml

wajib 0.

Uji perkiraan pada penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi adanya Coliform dan

Escerichia coli dalam air berdasarkan produksi asam dan gas yang dapat disebabkan oleh

fermentasi laktosa dalam bakteri Coliform, yang menggunakan medium Lactose Broth.

Uji perkiraan dinyatakan positif bila terbentuk gas atau gelembung dalam tabung durham

dan warna menjadi kuning keruh. Pada uji ini setiap pengenceran dari kedua sampel di

inkubasi dalam oven selama 1 x 24 jam pada suhu 37oC.

Dari hasil pemeriksaan uji perkiraan pada sampel A diperoleh hasil positif yang

ditandai dengan adanya produksi gas atau gelembung dalam tabung durham. Hal tersebut

disebabkan karena es batu yang dibuat menggunakan air mentah atau belum mengalami

proses pengolahan dan belum terjaga kualitas kebersihannya. Pada sampel B dinyatakan

negatif karena hasil yang diperoleh tidak menunjukan adanya produksi gas atau

gelembung dan kekeruhan warna. Hal ini dikarenakan kualitas es batu yang dibuat

menggunakan air yang sudah dimasak dan telah didukung kondisi sanitasi serta

kebersihannya telah diperhatikan secara optimal.

Tabung yang menunjukkan hasil positif diuji lebih lanjut dengan uji konfirmasi

menggunakan media selektif Brillian Green Laktose Broth (BGLB). Uji konfirmasi

bertujuan agar menghambat bakteri gram positif dan mempercepat pertumbuhan bakteri

23
Coliform (gram negatif). Ada atau tidaknya bakteri Coliform ditandai dengan

terbentuknya produksi asam dan gas yang disebabkan oleh permentasi laktosa dari

bakteri golongan coli. Tabung yang dinyatakan positif bila dalam tabung durham terdapat

gas atau gelembung dan terjadi perubahan warna menjadi hijau pekat dan keruh.

Penelitian dilanjutkan dengan uji konfirmasi menggunakan sampel yang positif

pada pengujian uji perkiraan yaitu sampel A. Dari pengujian yang telah dilakukan

diperoleh hasil positif yang ditandai dengan adanya produksi gas atau gelembung pada

tabung durham serta perubahan warna menjadi lebih pekat pada medium. Gelembung

udara yang dihasilkan pada tabung durham disebabkan oleh adanya aktivitas respirasi

mikroorganisme, yang berupa gelembung gas (Nuria dkk, 2009).

Tahap terakhir menggunakan uji kepastian yang bertujuan untuk menghitung

jumlah koloni dan membantu mempertajam perbedaan warna. Pada penelitian ini

menggunakan media Eosin Methylene Blue (EMB). Medium ini memperoleh hasil warna

hijau metalik. Sampel yang digunakan adalah hasil yang dinyatakan positif pada

pengujian uji konfirmasi. Pada pengujian ini 9 cawan petri yang digunakan masing-

masing diisi medium EMB sebanyak 15 ml. Sampel yang dinyatakan positif diambil

sebanyak 2 ose lalu diinokulasikan ke dalam cawan petri dengan cara zig-zag kemudian

di inkubasi dalam keadaan terbalik pada suhu 37◦C selama 2 x 24 jam. Dari hasil

pengamatan diperoleh hasil positif karena terdapat pertumbuhan koloni bakteri yang

ditandai adanya warna hijau metalik pada medium dikarenakan kemampuan bakteri

untuk memfermentasikan laktosa dan Methylen Blue setelah di inkubasi selama 2 x 24

jam pada suhu 37◦C. Hal ini menunjukkan adanya pertumbuhan cemaran bakteri

Escherichia coli pada sampel A.

24
 Dari hasil pengamatan yang diperoleh pada sampel A dinyatakan positif

terkontaminasi cemaran bakteri Escherichia coli pada es batu yang ada di Pusat Hiburan

Malam jalan Lalove Palu. Es batu dapat tercemar oleh bakteri Escherichia coli jika

tangan pedagang kurang bersih atau wadah penyimpanan dan cara penyajian es batu

yang kurang higienis seperti air yang tercemar dan lingkungan pembuatan es batu,

pengetahuan serta kurangnya kesadaran tentang kebersihan akan menyebabkan es batu

terkontaminasi oleh mikroorganisme.

Pada pengujian dari sampel B diperoleh hasil negatif atau dengan kata lain tidak

terdapat kontaminasi bakteri Escherichia coli pada es batu. Hasil ini dapat dibuktikan

dengan warna medium LB pada tabung reaksi tetap jernih tidak terjadi kekeruhan warna

dan tidak ada produksi gas pada tabung durham setelah diinkubasi selama 2 x 24 jam.

Dari hasil penelitian sampel B dinyatakan negatif, hal ini didukung oleh proses penyajian

es batu yang higienis dan berasal dari sumber air yang terstandarisasi serta masuk dalam

standar kelayakan konsumsi maka dari itu dapat meminimalisir adanya mikroorganisme.

Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Nur. J & Asri Winarsih dengan judul

Identifikasi Bakteri Escherichia coli pada es batu di wilayah bojong raya, Cengkareng

Jakarta pada tahun 2018 menyatakan bahwa, hasil uji MPN pada 8 dari 10 sampel es batu

positif ditemukan bakteri E-coli. Adanya bakteri pada sampel es batu tersebut

dimungkinkan penggunaan air mentah sebagai bahan dasar pembuatan es batu, selain itu

kurang diperhatikannya kebersihan wadah untuk membuat es batu.

Dari hasil pengujian kedua sampel es batu, diketahui bahwa sampel B yang layak

untuk dikonsumsi karena telah sesuai dengan ketentuan persyaratan bakteriologis air

minum yang tercantum dalam peraturan Menteri Kesehatan No.

492/Menkes/Per/IV/2010 tentang syarat maksimum kualitas air minum bahwa dalam

jumlah per 100 ml sampel adalah 0 Escerichia coli dan Coliform.

25
 BAB V

PENUTUP

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa :

1. Diketahui sampel A dinyatakan terkontaminasi bakteri Escherichia coli, sedangkan

pada sampel B tidak terdapat kontaminasi bakteri Escerichia coli.

2. Sampel A tidak sesuai dengan persyaratan bakteriologis air minum sedangkan sampel

B dinyatakan sesuai persyaratan peraturan Menteri Kesehatan

No.492/MenKes/Per/IV/2010 tentang syarat bakteriologis air minum dalam jumlah

per 100 mL sampel adalah 0 Escherichia coli.

5.2 Saran

1. Disarankan untuk peneliti mikrobiologi dilakukan penelitian lebih lanjut seperti tes

Mac Conkey Agar dan pengujian biokimia lanjutan.

2. Untuk kedepannya agar lebih memperhatikan proses pengolahan dan penyajian es

batu dan memberikan penyuluhan kepada masyarakat tentang air minum yang layak

dikonsumsi.

DAFTAR PUSTAKA

26
08_Permenkes_No__492_tahun_2010_ttg_Persyaratan_Kualitas_Air_Minum.PDF. (n.d.).
Apriliyani, D. A. (2017). Identifikasi Molekuler Escherichia coli pada Minuman Olahan Di
Kecamatan Gunung Pati Semarang. Skripsi, 1–30.
Becker, F. G., Cleary, M., Team, R. M., Holtermann, H., The, D., Agenda, N (2015).
Mikrobiologi Kesehatan. Syria Studies, 7(1), 37–72. Retrieved from
https://www.researchgate.net/publication/269107473_What_is_governance/link/
548173090cf22525dcb61443/download%0Ahttp://www.econ.upf.edu/~reynal/Civil
wars_12December2010.pdf%0Ahttps://think-asia.org/handle/11540/8282%0Ahttps://
www.jstor.org/stable/41857625
Dewanti, R. (2006). Kemandirian Pangan untuk Membangun Kemandirian Pangan.
Elfidasari, D. (2011). i Jumlah Escherichia coli Terlarut by Dewi Elfidasari. Jurnal AL-
AZHAR Indonesia Seri SAINS dan Teknologi, 1, 18–23.
Gadjah, U., Ugm, M., Rozanti, N. M., Indriani, C., & Nugroho, A. (2017).Identifikasi Bakteri
Coliform dan Escherichia coli Pada Jajanan Minuman Yang Menggunakan Es Batu di
Lembah Universitas Gadjah Mada (UGM) Nisrina Maulida Rozanti, dr. Citra Indriani,
MPH; Agung Nugroho, MPH;
Gel, P., Batang, G., Dengan, P., & Poly, P. G. A. (2010). ADLN - Perpustakaan Universitas
Airlangga 1. 1–14.
Narwati, Y. T., Rika, I., Putra, D. A., & Wiraputranto, M. C. (2013). Uji Mikrobiologis Es
Batu Konsumsi di Kantin Sekitar Lingkungan Fakultas Kedokteran Unika Atma Jaya.
Damianus Journal of Medicine, 12(1), 8–15.
Nur, J., & Asri Winarsih, D. (2018). Identifikasi Bakteri Escherichia Coli Pada Es Batu Di
Wilayah Bojong Raya, Cengkareng Jakarta Identification of Bacteria Escherichia Coli
on Ice Cubes in the Region Bojong Raya, Cengkareng Jakarta Barat. Jurnal Wiyata:
Penelitian Sains Dan Kesehatan, 4(2), 151–156. Retrieved from
https://ojs.iik.ac.id/index.php/wiyata/article/view/187
Nurjanah, S., Wafiyah, Q., Rahayu, W. P., & Nurwitri, C. C. (2022). Titik Kritis Keamanan
Pangan pada Tahap Pengolahan dan Penyajian Beberapa Jenis Minuman Es. Jurnal
Mutu Pangan : Indonesian Journal of Food Quality, 8(2), 80–87.
https://doi.org/10.29244/jmpi.2021.8.2.80
Pasaribu, A. P. S. (2019). Identifikasi Bakteri Escherichia coli pada Air Minum Isi Ulang di
Kabupaten Dairi pada Tahun 2019. Skripsi, Institut Kesehatan Helvetia.

Putri, N. D. (2015). Identifikasi Bakteri Eschericia coli Pada Es Batu Yang Dijual Warung
Nasi di Kelurahan Pisangan Tahun 2015. In Skripsi.
Rahayu, W. P., Nurjanah, S., & Komalasari, E. (2018). Escherichia coli:
Patogenitas,Analisis, dan Kajian Risiko. Journal of Chemical Information and
Modeling, 53(9), 5.

27
Rifta, R., Budiyono, & Darundiati, Y. H. (2016). Studi Identifikasi Keberadaan Escherichia
Coli Pada Es Batu Yang Digunakan Oleh Pedagang Warung Makan Di Tembalang.
Jurnal Kesehatan Masyarakat (E-Journal), 4(2), 176–185.
Sa’diyah, A., S. Latuhamina, F., Anita, Sutrisno, Cristy Birahy, D., Yusal, M. S., Meiyasa, F.
(2019). Dasar-Dasar Mikrobiologi dan Penerapannya.
Wulandari, P. (2018). Uji Bakteri Pada Air Minum Isi Ulang Yang Beredar Di Jalan Taruma
Kecamatan Medan Petisah. In Karya Tulis Ilmiah.

28
28
 LAMPIRAN
Lampiran 1

ALUR PENELITIAN

PENGAMBILAN SAMPEL ES
BATU

PENGOLAHAN SAMPEL

PENGENCERAN

10-1 10-2 10-3

Pengujian Mikrobiologi Bakteri

Escherchia coli

29
 Presumptive Test

Confirmed Test

Completed Test

Pengamatan dan Pengumpulan

Data

Pembahasan

Kesimpulan

Lampiran 2

SKEMA KERJA METODE MPN

Pengujian Mikrobiologi Bakteri Escherichia

coli

Uji Penduga
Presumptive Test

Inkubasi 1 x 24 jam
Hasil + Hasil -

Negatif
tidak ada
pengujian
Uji Selanjutnya
Ke tahap 2x24
jam
Positif+

30
 Uji konfirmasi

Tidak dilanjutkan ke Hasil - Hasil +

tahap berikutnya

Inkubasi ke
Media EMB

Hasil

Lampiran 3

Rumus pengenceran :

V1 = V2
W1 W2

Keterangan :

V1 : Volume standar pengenceran

W1 : Berat standar pengenceran media

V2 : Volume yang diinginkan/dibuat

W2 : Berat standar yang dibutuhkan.

Standar pengenceran media

LB : 13 gr/1000 mL

BGLB : 40,01 gr/mL

31
EMB : 37,5 gr/mL

1. Media LB : V1 = V2
W 1 W2

: 1000 mL = 200 mL
13 gr W2

: 1000 mL x W2 = 200 mL x 13 gr

W2 = 2600 gr/mL
1000 mL

W2 = 2,6 gr

2. Media BGLB : V1 = V2
W 1 W2

: 1000 mL = 200 mL
40,01 gr W2

: 1000 mL x W2 = 200 mL x 40,01 gr

W2 = 8.002 gr/mL
1000 mL

W2 = 8,002 gr

3. Media EMB : V1 = V2
W 1 W2

: 1000 mL = 200 mL
37,5 gr W2

: 1000 mL x W2 = 200 mL x 37,5 gr

W2 = 8.002 gr/mL
1000 mL

W2 = 7,5 gr.

32
Lampiran 4

Sampel es batu sebelum diencerkan

33
 Sampel es batu yang sudah diencerkan

Lampiran 5

Medium yang digunakan

34
Lampiran 6

35
 LB BGLB

EMB

Pembuatan Medium

Lampiran 7

36
 Timbangan Analitik Ikubator

Laminar Air Flow Autoklaf

Alat yang digunakan

Lampiran 8

37
 A B

Pengenceran Sampel

Lampiran 9

38
Uji perkiraan sebelum inkubasi sampel A

39
Perlakuan pada pengujian uji perkiraan menggunakan media LB

40
 Sampel A setelah inkubasi

Sampel B setelah Inkubasi

Lampiran 10

Uji konfirmasi Sampel A menggunakan media BGLB sebelum inkubasi

41
Perlakuan pada pengujian uji konfirmasi menggunakan media BGLB

42
 Uji konfirmasi Sampel A menggunakan media BGLB setelah inkubasi 2 x 24 jam

Lampiran 11

43
A1 A2

A3

44
A4 A5

A6

45
 A8 A7

A9

Hasil uji kepastian setelah inkubasi selama 2 x 24 jam

Lampiran 12
PERNYATAAN KEASLIAN TULISAN

Yang bertanda tangan di bawah ini :

I. Nama : Athia Kurnia Kasim, S.Farm.,M.Si.,Apt

46
 NIDN : 0905058702
Program Studi : Diploma III Farmasi
Nama PT : Akademi Farmasi “Bina Farmasi” Palu

II. Nama : Nopri Babidaa

No. Stambuk : F 019 013
Program Studi : Diploma III Farmasi
Nama PT : Akademi Farmasi “Bina Farmasi” Palu

Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa Penelitian ini yang di susun ini

benar-benar hasil Karya Tulis Tim Peneliti, bukan merupakan pengambilan tulisan atau
pikiran orang lain. Apabila dikemudian hari terbukti atau dibuktikan bahwa hasil karya tulis
ini hasil ciplakan orang lain, maka Tim Peneliti siap menerima sanksi atas perbuatan
tersebut.

Palu, November 2022

Yang Membuat Pernyataan:

Ketua Peneliti, Anggota,

Athia Kurnia Kasim, S.Farm,M.Si., Apt Nopri Babidaa

NIDN : 0905058702 F 019 013

47