Journal Reading

PENULARAN TRANSPLASENTAL DARI INFEKSI SARS-COV-2

Oleh:
Rahayu Mayni, S.Ked

Perseptor :
dr.Fonda Sharif, Sp.OG

BAGIAN OBSTETRI DAN GINEKOLOGI

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS MALAHAYATI
RUMAH SAKIT PERTAMINA BINTANG AMIN
KOTA BANDAR LAMPUNG
2020
 LEMBAR PENGESAHAN

Judul Journal Reading :

PENULARAN TRANSPLASENTAL DARI INFEKSI SARS-COV-2

Penyaji, Perseptor,

Rahayu Mayni S,Ked dr. Fonda Sharif, Sp.OG

BAGIAN OBSTETRI DAN GINEKOLOGI

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS MALAHAYATI
RUMAH SAKIT PERTAMINA BINTANG AMIN
KOTA BANDAR LAMPUNG
2020
Penularan Transplasental Dari Infeksi Sars-Cov-2

Alexandre J Vivanti 1,8, Christelle Vauloup-Fellous 2,8, Sophie Prevot 3, Veronique Zupan 4, Cecile Suffee
5,Jeremy Do Cao 6, Alexandra Benachi 1 & Daniele De Luca 4,7 Ror

Wabah SARS-CoV-2 adalah Pandemi pertama abad ini. Infeksi SARS-CoV-2 ditularkan melalui
droplet; rute transmisi lainnya dihipotesiskan tetapi tidak dikonfirmasi. Sejauh ini belum jelas
apakah dan bagaimana SARS-CoV-2 dapat ditularkan dari ibu ke janinnya. Kami
mendemonstrasikan transmisi transplasental dari SARS-CoV-2 pada neonatus yang lahir dari ibu
yang terinfeksi pada trimester terakhir dan menunjukkan gangguan neurologis. Transmisi
dikonfirmasi oleh investigasi virologi dan patologis yang komprehensif. Secara rinci, SARS-
CoV-2 menyebabkan: (1) viremia ibu, (2) infeksi plasenta yang ditunjukkan oleh
imunohistokimia dan viral load yang sangat tinggi; peradangan plasenta , seperti yang
ditunjukkan oleh pemeriksaan histologis dan imunohistokimia, dan (3) viremia neonatal setelah
infeksi plasenta. Neonatus dipelajari secara klinis, melalui pencitraan, dan ditindaklanjuti.
Neonatus disajikan dengan manifestasi neurologis, mirip dengan yang dijelaskan pada pasien
dewasa.

1. Divisi Obstetri dan Ginekologi, Rumah Sakit Antoine Béclère, Rumah Sakit Universitas Paris Saclay, APHP
157 rue de la Porte de Trivaux, 92140 Clamart, Prancis. 2 Divisi Virologi, Rumah Sakit Paul Brousse, Rumah
Sakit Universitas Paris Saclay, APHP 12 Avenue Paul Vaillant Couturier, 94800 Villejuif, Prancis. 3 Divisi
Patologi, Rumah Sakit Bicetre, Rumah Sakit Universitas Paris Saclay, APHP, Le Kremlin-Bicêtre, Prancis. 4
Divisi Perawatan Kritis Anak dan Neonatal, Rumah Sakit Antoine Béclère, Rumah Sakit Universitas Paris
Saclay, APHP 157 rue de la Porte de Trivaux, 92140 Clamart, Prancis. 5 Divisi Radiologi, Rumah Sakit
Antoine Béclère, Rumah Sakit Universitas Paris Saclay, APHP 157 rue de la Porte de Trivaux, 92140 Clamart,
Prancis. 6 Divisi Pediatri Umum, Rumah Sakit Antoine Béclère, Rumah Sakit Universitas Paris Saclay,
APHP 157 rue de la Porte de Trivaux, 92140 Clamart, Prancis. 7 Unit Inovasi Fisiopatologi dan Terapi-
INSERM U999, Universitas Paris Saclay, 63 Rue Gabriel Péri, 94270 Le Kremlin-Bicêtre, Prancis. 8 Para
penulis ini memberikan kontribusi yang sama: Alexandre J. Vivanti, Christelle Vauloup-Fellous. Ror surel:
dm.deluca@icloud.com
 Infeksi SARS-CoV-2 menyebabkan penyakit virus corona baru Beberapa kasus penularan
perinatal telah dijelaskan 1 - 6 , tetapi tidak jelas apakah ini terjadi melalui jalur transplasenta atau
transerviks atau melalui paparan lingkungan. Penting untuk mengklarifikasi apakah dan bagaimana
SARS-CoV-2 mencapai janin, untuk mencegah infeksi neonatal, mengoptimalkan manajemen
kehamilan dan pada akhirnya lebih memahami biologi SARS-CoV-2. Di sini kami menyajikan studi
kasus komprehensif yang menunjukkan penularan transplasental SARS-CoV-2 dengan manifestasi
klinis pada neonatus, sesuai dengan tanda dan gejala neurologis COVID-19.

Hasil
Studi kasus. Seorang berusia 23 tahun, gravida 1, para 0 dirawat di rumah sakit universitas kami pada
Maret 2020 di 35+2 minggu kehamilan dengan demam (38,6 ° C) dan batuk parah dan ekspektasi
berlebihan sejak 2 hari sebelum rawat inap. Reaksi rantai polimerase waktu-nyata (RT-PCR)
dilakukan seperti yang dijelaskan dalam “ Metode ” di bawah ini: baik gen E dan S dari SARS-CoV-2
terdeteksi dalam darah, dan pada usap nasofaring dan vagina. Kehamilan berjalan lancar dan semua
pemeriksaan USG serta tes rutin normal hingga diagnosis COVID-19 terdiagnosis. Trombositopenia
(54 × 10 9 / L), limfopenia (0,54 × 10 9 / L), APTT lama (60 detik), transaminitis (Ara. 1 ) diamati
dan karena itu seksio sesarea kategori II (yaitu, gangguan janin; tidak segera mengancam nyawa,
https: // www.rcog.org.uk/globalassets/documents/guidelines/goodpractice 11classi fi
cationofurgency.pd ) dilakukan, dengan selaput ketuban utuh, dalam isolasi penuh dan dengan
anestesi umum karena gejala pernapasan ibu. Ketuban bersih fl Cairan dikumpulkan sebelum ketuban
pecah, selama operasi caesar dan dinyatakan positif untuk gen E dan S dari SARS-CoV-2. Penjepitan
tali pusat yang tertunda tidak dilakukan karena efeknya pada penularan SARS-CoV-2 tidak diketahui.
Wanita itu tetap dirawat di rumah sakit untuk pengawasan kondisi klinisnya dan fi Akhirnya dia
dipulangkan dalam kondisi baik, 6 hari setelah melahirkan.
Seorang neonatus laki-laki dilahirkan (usia kehamilan 35+ 5 minggu;berat lahir 2540 g).
Skor Apgar adalah 4 (detail: detak jantung = 1, pernafasan = 1, warna kulit = 1, otot tonus = 1, sisa
item diberi kode nol), 2 (detail: warna kulit = 1, otot tonus = 1, sisa item diberi kode nol) dan 7
(detail : detak jantung = 2, aktivitas pernapasan = 2, warna kulit = 2, tonus otot = 1) masing-
masing pada 1, 5 dan 10 menit. Resusitasi neonatal diberikan menurut pedoman internasional
saat ini 8 ( ventilasi non-invasif yang diberikan masker wajah sejak lahir sampai 5 menit
kehidupan dan kemudian intubasi dan invasif
Gbr. 1 Potret ilustratif pelacakan detak jantung janin. Takikardia, tidak adanya variabilitas dasar, tidak adanya
akselerasi dengan deselerasi berkepanjangan dan lambat berulang. Ini fi Temuan sangat mengarah pada
pelacakan detak jantung janin kategori III patologis 7 , yang sangat terkait dengan hasil akhir neonatal yang
merugikan. Foto jantung ini direkam 26 menit sebelum operasi caesar.

ventilasi dengan fraksi oksigen inspirasi yang dititrasi hingga 0,30; pemantauan termasuk
EKG, aliran samping arus akhir CO 2 pengukuran, saturasi oksigen perifer dan indeks perfusi).
Itu neonatus akhirnya dipindahkan dalam isolasi penuh ke unit perawatan intensif neonatal
(NICU) di ruang bertekanan negatif. Analisis gas darah tali pusat menunjukkan pH dan laktat
normal. Neonatus tidak menerima obat penenang atau analgesik apa pun dan dipantau
sesuai dengan protokol NICU rutin kami untuk perawatan pasca-resusitasi: skor Sarnat,
ekokardiografi titik perawatan, dan USG paru 9 normalsetelah masuk NICU. Parameter
vital selalu normal dan bayi diekstubasi setelah ~ 6. Sebelum ekstubasi, darah diambil untuk
analisis gas darah kapiler (pada 1,5 jam kehidupan) dan tes darah rutin, yang menghasilkan nilai
normal. Apalagi sebelum ekstubasi, lavage darah dan bronchoalveolar nonbronchoscopic fl cairan
dikumpulkan untuk RT-PCR dan keduanya positif untuk gen E dan S dari SARSCoV-2. Lavage
dilakukan dengan menggunakan prosedur standar 10
 seperti yang dijelaskan di bawah ini. Kultur darah negatif untuk bakteri atau jamur. Usap
nasofaring dan rektal fi pertama kali dikumpulkan setelah dibersihkan bayi pada 1 jam kehidupan, dan
kemudian diulangi pada 3 dan 18 hari usia pascakelahiran: mereka diuji dengan RT-PCR dan
semuanya positif untuk dua gen SARS-CoV-2. Pemeriksaan darah rutin (meliputi troponin, fungsi hati
dan ginjal) diulangi pada hari kedua kehidupan dan hasilnya normal. Pemberian pakan secara
eksklusif menggunakan susu formula.

Pada hari ketiga kehidupan, neonatus tiba-tiba mengalami iritabilitas, makan yang buruk,
hipertonia aksial dan opisthotonos: serebrospinal. fl Cairan (CSF) negatif untuk SARS-CoV-2,
bakteri, fungi, enteroviruses, herpes simpleks virus 1 dan 2, menunjukkan glikorikia normal meskipun
dengan 300 leukosit / mm 3 dan protein sedikit meningkat (1,49 g / L). Darah diambil pada saat yang
sama dan biakan itu steril. USG otak dan EEG juga normal. Tidak ada tanda-tanda penyakit metabolik
yang dicurigai. Gejala membaik perlahan selama 3 hari dan sampel CSF kedua normal pada fi hari
ke-5 kehidupan, tetapi hipotonia ringan dan kesulitan makan fi kesulitan bertahan. Laboratorium
utama fi temuan dilanjutkan dalam Tabel 1 . Pencitraan resonansi magnetik pada 11 hari kehidupan
menunjukkan gliosis bilateral dari materi periventrikel dan subkortikal putih tua, dengan dominasi
sedikit ke kiri (Gambar. 2 ). Neonatus tidak menerima antivirus atau jenis lain fi c pengobatan, secara
bertahap pulih dan fi akhirnya keluar dari rumah sakit setelah 18 hari. Tindak lanjut pada hampir 2
bulan kehidupan menunjukkan pemeriksaan neurologis yang lebih baik (peningkatan hipertonia,
motrisitas normal) dan pencitraan resonansi magnetik (cedera materi putih berkurang); pertumbuhan
dan sisa pemeriksaan klinis normal.

Virologi dan patologi. RT-PCR pada plasenta positif untuk kedua gen SARS-CoV-2. Angka
3 menunjukkan semua hasil RT-PCR yang diperoleh dalam spesimen ibu dan bayi yang berbeda:
viral load jauh lebih tinggi di jaringan plasenta, daripada di amnion fl cairan dan darah ibu atau
bayi.
Pemeriksaan histologis plasenta dilakukan seperti yang dijelaskan pada “ Metode ” di bawah dan
mengungkapkan peri-vili menyebar fi deposisi brin dengan infark dan intervillositis akut dan kronis.
Sebuah kepositifan sitoplasma yang intens dari sel trofoblas peri-vili diamati secara difus melakukan
imunostaining dengan antibodi terhadap protein SARS-CoV-2 N. Tidak ada agen patogen lain yang
terdeteksi pada pewarnaan khusus dan imunohistokimia. Angka 4 dan 5 menggambarkan hasil
pemeriksaan bruto dan mikroskopis plasenta, serta imunohistokimia.

Diskusi

Kami melaporkan kasus penularan SARS-amnion transplasental yang terbukti fl cairan atau darah ibu:
ini menunjukkan adanya CoV-2 dari wanita hamil yang terkena COVID-19 selama virus di sel
plasenta, yang sesuai dengan fi temuan kehamilan terlambat untuk keturunannya.
 Tabel 1 Laboratorium Utama fi temuan di neonatus.

DOL1 DOL2 DOL3 DOL5

Jumlah sel darah

WBC / L. 10,32 × 10 9 6,97 × 10 9
RBC / L. 4,54 × 10 12 4,84 × 10 12
Hb (g / dL) 13.9 14,7
Hematokrit (%) 41.6 41.4
Trombosit / L. 339 × 10 9 319 × 10 9
Limfosit / L. 4,39 × 10 9 3,05 × 10 9
Neutrofil / L. 3,97 × 10 9 2,78 × 10 9
Retikulosit (%) 3.04 3.39
Analisis gas darah
pH 7.27 7.38 7.34
pCO 2 ( mmHg) 41 41 47
pO 2 ( mmHg) 41 40 30
BE (mmol / L) - 7.8 - 1.4 -1
Laktat (mmol / L) 7 1.3 1.5
Na (mmol / L) 135 141 141
K (mmol / L) 6.3 5.2 4.3
Cl (mmol / L) 109 110 110
Ca ++ (mmol / L) 1.08 1.33 1.38
Biokimia darah
CRP (mg / L) <5 <5
PCT ( µ g / L) 0.95 0.61
Kabel PCT ( µ g / L) 0.19
Total serum bilirubin ( µ mol / L) Bilirubin 106
terkonjugasi ( µ perempuan jalang) 0
Alkali fosfatase (IU / L) 133
AST (IU / L) 38
ALT (IU / L) 9
γ- GT (IU / L) 290
Troponine I (ng / L) 43
Analisis CSF
Protein CSF (g / L) 1.49 1.24
Leukosit CSF / mm 3 300 11

Glukosa CSF (mmol / L) 2.9 2.4

Semua sampel telah diperoleh dengan tusukan vena, kecuali analisis gas darah yang telah dilakukan pada sampel darah kapiler
arterialisasi yang diperoleh dengan tusukan tumit yang dihangatkan. Semua pengukuran telah dilakukan dengan certi fi Metode mikro
analitik yang didedikasikan untuk NICU dan tunduk pada kontrol kualitas berkala. Semua hasil normal untuk rentang referensi neonatal,
diharapkan protein CSF dan leukosit pada DOL3; glycorrhachia selalu mirip dengan glukosa darah yang diukur pada waktu yang sama.

γ- GT, gamma-glutamyl transferase; ALT, alanine aminotransferase; AST, transaminase aspartat; BE, base excess; CRP, protein
C-reaktif; CSF, serebro-spinal fl uid; DOL, hari kehidupan; PCT, prokalsitonin; RBC, sel darah merah; WBC, sel darah putih.

Kasus lain dari penularan perinatal potensial baru-baru ini telah dijelaskan, tetapi
menyajikan beberapa masalah yang belum terselesaikan. Misalnya, beberapa gagal
mendeteksi SARSCoV-2 pada neonatus atau hanya melaporkan keberadaan spesi fi c
antibodi 1 , 2 , 4 ; yang lain menemukan virus pada sampel bayi baru lahir tetapi jalur
penularannya tidak jelas seperti plasenta, ketuban fl Cairan dan darah ibu atau bayi baru lahir
tidak diuji secara sistematis pada setiap pasangan
ibu-bayi 3 , 5 , 6 , 11 , 12 .
Sebuah kelas fi kation untuk kasus de fi Status infeksi SARS-CoV-2 pada wanita hamil,
janin dan neonatus baru-baru ini telah dirilis dan kami menyarankan untuk mengikutinya untuk
mengetahui kasus-kasus potensi penularan SARS-CoV-2 perinatal. Menurut kelas ini fi Sistem
kation, infeksi kongenital neonatal dianggap terbukti jika virus terdeteksi di ketuban fl Cairan
dikumpulkan sebelum pecah ketuban atau diambil darah di awal kehidupan, jadi kasus kami
sepenuhnya memenuhi syarat fi adalah infeksi SARS-CoV-2 yang ditularkan secara bawaan,
sedangkan kasus yang disebutkan di atas akan diklasifikasikan fi hanya mungkin atau bahkan tidak
mungkin 13 .
 Laporan terbaru lainnya menjelaskan kasus dengan plasenta serupa fi menemukan, tetapi
telah berkelas fi hanya sebagai kemungkinan kasus infeksi SARS-CoV-2 bawaan, karena tali
pusat dan darah bayi baru lahir belum dapat diuji. 14.
Kedua “ E ” dan “ S ” gen SARS-CoV-2 ditemukan setiap spesimen, oleh karena itu
semuanya dianggap positif, menurut rekomendasi European Center for isease Control (
https://www.ecdc.europa eu/en/all-topics-z/coronavirus/threats- and-wabahs / covid-19 /
laboratorium -dukungan / pertanyaan ). Sebagai catatan, viral load jauh lebih tinggi dijaringan
plasenta daripada di flammation terlihat pada pemeriksaan histologist.

Gambar. 2 MRI serebral dilakukan pada 11 hari kehidupan. a, b dan c, d T1 dan urutan
pembobotan difusi, masing-masing. Gambar diambil pada dua tingkat yang berbeda dan
menunjukkan hiperintensitas dari materi putih periventrikel dan subkortikal frontal atau

parietal (panah). Akhirnya, kurva RT-PCR dari usap nasofaring neonatal pada hari ke-3

dan ke-18 kehidupan lebih tinggi daripada di fi Hari pertama (saat bayi berada dalam
isolasi penuh di ruang bertekanan negatif): ini juga tipuan lain fi rmasi bahwa kami
mengamati infeksi neonatal yang sebenarnya, bukan kontaminasi.
Jadi, ini fi temuan menunjukkan bahwa: (1) terjadi viremia maternal dan virus mencapai plasenta
seperti yang ditunjukkan oleh imunohistokimia; (2) virus menyebabkan tanda fi tidak bisa masuk fl
reaksi inflamasi seperti yang ditunjukkan oleh viral load yang sangat tinggi, pemeriksaan histologis
dan imunohistokimia; (3) viremia neonatal terjadi setelah infeksi plasenta. Kami fi Temuan juga
konsisten dengan studi kasus yang menggambarkan keberadaan virion di jaringan plasenta,
meskipun ini tidak melaporkan fl ammation, atau infeksi janin / neonatal 15 .
Plasenta menunjukkan tanda intervillous akut dan kronis fl ammation konsisten dengan
maternal sistemik yang parah di fl status inflamasi yang dipicu oleh infeksi SARS-CoV-2.
Karena RTPCR pada jaringan plasenta positif untuk SARS-CoV-2, dan sampel darah ibu dan
bayi juga positif, penularan jelas terjadi melalui plasenta. Menariknya, plasenta dari wanita
yang terkena SARS-CoV-1 memiliki gejala patologis yang serupa fi temuan intervillositis,
dengan intervillous fi deposisi brin 16 . Enzim pengubah angiotensin 2 (ACE2) dikenal
sebagai reseptor SARS-CoV-2 dan sangat diekspresikan di jaringan plasenta. 17 . Data hewan

menunjukkan ekspresi ACE2 perubahan pada jaringan janin / neonatal dari waktu ke

waktu dan mencapai puncaknya antara akhir gestasi dan fi hari pertama kehidupan
pascakelahiran 17 . Kombinasi dari data ini dan fi menemukan con fi rms bahwa penularan
transplasenta memang mungkin terjadi pada minggu-minggu terakhir kehamilan, meskipun
kami tidak dapat mengecualikan kemungkinan penularan dan konsekuensi janin lebih awal
selama kehamilan, karena tidak ada de fi Data literatur nite belum tersedia.
Menariknya, kami menggambarkan kasus infeksi bawaan yang terkait dengan
manifestasi neurologis setelah viremia neonatal. Infeksi SARS-CoV-2 neonatal yang dicurigai
disajikan dengan non-spesifik fi c gejala 4 atau pneumonia 3 , sedangkan gejala neurologis
umumnya terlihat pada pasien dewasa, terutama akibat penyakit dalam fl respon ammatory 18
, 19 . Manifestasi neurologis awal juga diamati pada neonatus lain yang lahir dari ibu positif
SARSCoV-2, meskipun penularan vertical tidak sepenuhnya diselidiki. 12 . Sebaliknya,
setelah viremia, kasus kami dengan jelas menunjukkan gejala neurologis dan masuk
ammatory fi temuan di CSF. Tidak ada infeksi virus atau bakteri lain dan semua kelainan
neonatal yang berpotensi menyebabkan manifestasi klinis ini dikeluarkan. Pencitraan saraf
secara konsisten menunjukkan cedera materi putih, yang dapat disebabkan oleh pembuluh
darah di fl peradangan yang disebabkan oleh infeksi SARS-CoV-2, karena gambar serupa
telah ditemukan secara anekdot pada pasien dewasa 20 , 21 .
 Sebagai kesimpulan, kami telah menunjukkan bahwa penularan transplasental dari
infeksi SARS-CoV-2 dimungkinkan selama minggu-minggu terakhir kehamilan. Penularan
transplasenta dapat menyebabkan plasenta di fl ammation dan viremia neonatal. Gejala
neurologis akibat vaskulitis serebral juga dapat dikaitkan.

Gbr. 3 Hasil reaksi berantai polimerase waktu nyata. a, b Gen E dan S dari SARS-CoV-2, masing-masing, untuk sampel
ibu dan bayi ( X dan Y sumbu mewakili jumlah ampli fi ed RNA dan jumlah siklus, masing-masing; semakin awal
sinyal terdeteksi, semakin rendah jumlah siklusnya dan semakin tinggi viral loadnya). c Viral load untuk setiap sampel
(dinyatakan sebagai salinan Log / juta sel untuk plasenta dan sebagai salinan Log / mL untuk semua spesimen lainnya).
Semua sampel ibu diperoleh tepat sebelum persalinan atau selama operasi caesar; sampel bayi baru lahir dicantumkan
secara kronologis dan diperoleh dari fi hari pertama sampai ketiga kehidupan, kecuali usap nasofaring terakhir
(diperoleh pada usia 18 hari pascakelahiran). Garis berwarna mewakili hasil uji RT-PCR untuk setiap sampel. Garis
oranye tua melambangkan kendali positif, yaitu supernatan kultur SARS-CoV-2 (lebih detail ada di“ Metode ”). Usap
nasofaring pada 1, 3 dan 18 hari kehidupan diwakili oleh kurva oranye terang, abu-abu dan hijau, masing-masing. Viral
load di BAL fl uidis tidak ditampilkan. DOL hari kehidupan, M sampel ibu, Nb sampel bayi baru lahi
 Metode
Pengambilan sampel pasien. Sampel biologis yang akan diuji dengan RT-PCR diperoleh dan
disiapkan sebagai berikut. Usap nasofaring dan vagina diambil sebagai berikut. Pedoman
Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit AS. Sampel jaringan plasenta diambil dari
sisi korionik dan dihancurkan dalam 400 mL air bebas RNAaseDNAase; 1 mL darah dan
usap ditempatkan di Virocult ® media transportasi virus (Sigma, St. Louis, MI, USA).
Bilas bronchoalveolar (BAL) non-bronkoskopi dilakukan mengikuti teknik standar yang
terkenal 10 :

Gambar 4 Pemeriksaan kasar dan mikroskopis pada plasenta. Sebuah Lesi makroskopik perivillous fi deposisi brin dengan
infark, sebagai untaian tak beraturan dari indurasi kuning-putih pucat (panah). b Lesi mikroskopis pada intervillositis yang
ditandai dengan in fi Ketinggian ruang intervillous terbuat dari neutrofil dan histiosit (panah) (pewarnaan HES, magni asli
fi kation × 400). c Intervillositis dengan beberapa histiosit CD68-positif (panah); neutrofil negatif dengan antibodi anti-
makrofag ini (imunohistokimia anti-CD68, magni asli fi kation × 400).

Gbr. 5 imunostaining plasenta untuk SARS-CoV-2 N-protein (imunohistokimia anti-N, magni asli fi kation × 800). Sebuah
Kepositifan sitoplasma coklat yang intens dari sel trofoblas peri-vili di plasenta kasus kami (panah). b, c Dua kontrol negatif
(antibodi primer, dua plasenta negatif SARS-CoV2).

Secara rinci, neonatus diletakkan terlentang dengan kepala menghadap ke kanan

sehingga paru-paru kiri akan menjadi sampel utama. Saline normal (1 mL / kg, 37 ° C)
dimasukkan ke dalam tabung endotrakeal melalui Y-piece. Setelah tiga siklus ventilator, kateter
isap dengan hati-hati dimasukkan 0,5 cm di luar ujung tabung, dan jalan napas fl cairan disedot ke
perangkap spesimen steril (BALF Trap; Vigon, Ecouen, Prancis) dengan tekanan negatif 50 mmHg.
Prosedur ini diulangi dengan kepala menghadap ke kiri, sehingga paru-paru kanan akan menjadi
sampel utama. Prosedur ini menghormati nasihat European Respiratory Society untuk BAL pediatrik
dan neonatal 22 .
Selama prosedur, pasien tidak pernah dilepaskan dari ventilator, fraksi oksigen inspirasi 0,25
dan tidak ada desaturasi atau bradikardia. Semua spesimen disimpan pada suhu +4 ° C dan diuji dalam
24 jam.Reaksi berantai polimerase waktu nyata (RT-PCR). Viral RNA diekstraksi dari 200 µL
sampel klinis dengan NucliSENS ® easyMag ® ( BioMérieux, Craponne, Prancis) dan dielusi
dalam 100 µL. RealStar ® SARS-Cov-2. RT-PCR Kit 1.0 (Altona Diagnostics GmbH, Hamburg,
Jerman) menargetkan gen E (spesifik fi c untuk virus B-betacorona garis keturunan) dan gen S
(spesi fi c untuk SARS-CoV-2) digunakan mengikuti produsen ' s rekomendasi. Uji tersebut
mencakup ampli heterolog fi sistem kation (kontrol positif internal) untuk mengidentifikasi
kemungkinan penghambatan RT-PCR dan kon fi rm integritas reagen kit. Kontrol positif adalah
supernatan kultur SARS-CoV-2 yang disediakan oleh produsen kit. Siklus termal dilakukan pada
55 ° C selama 20 menit untuk transkripsi balik, diikuti oleh 95 ° C selama 2 menit dan kemudian
45 siklus 95 ° C selama 15 detik, 55 ° C selama 45 detik, 72 ° C selama 15 detik dengan
Instrumen ViiA7 Biosystems Terapan (Applied Biosystems, Thermo Fisher, Waltham, MA,
USA). Nilai ambang batas siklus kurang dari 40 diinterpretasikan sebagai positif untuk SARS-
CoV-2 RNA. Teknik kami menghasilkan batas deteksi yang sangat rendah (LOD = 1200 cp / mL
(12 cp / rxn)). Reprodusibilitas dan kesepakatan antar-assay adalah 100% untuk tes negatif dan
positif, dibandingkan dengan dua teknik umum lainnya 23 .
Pemeriksaan plasenta. Pengambilan sampel plasenta, pemeriksaan bruto dan mikroskopis
dilakukan sesuai dengan pernyataan Konsensus Amsterdam 24 . Plasenta itu fi Diperbaiki dalam
4% buffered formalin dan sampelnya paraf fi n tertanam. Metode pewarnaan dilakukan pada 3 -
Potongan setebal 5 µm adalah haemalun eosin saffran, periodic acid schiff dan pewarnaan
Gomori-Grocott. Imunohistokimia dengan deteksi peroksidase dan pewarnaan hemalun dilakukan
di automat Leica Bond III menggunakan Bond Polymer Re. fi ne Kit deteksi (Leica DS9800)
setelah perlakuan awal panas pada pH6 atau 9 tergantung pada antibodi monoklonal yang diuji:
CD68 (Dako PG-M1, 1: 200), CD163 (Leica 10D6, 1: 200), CD20 (Dako L26, 1: 400), CD3
(Dako F7.2.38, 1:50), CD5 (Novocastra 4C7, 1:50), CMV (Dako CCH2 + DDG9, : 1), virus Parvo
(AbcVs, Abc10-P038), SARS-CoV -2 (Abclonal, kelinci pAB, 2019nCoV N Protein, 1: 2400).
Kontrol negatif untuk SARS-CoV-2 imunohistokimia dilakukan: pengendalian antibodi primer
kelinci poliklonal, spesimen plasenta negatif SARS-CoV-2 dengan kondisi pra-analitik serupa formalin
fi xation.
Deklarasi etika. Persetujuan tertulis diperoleh dari wanita tersebut untuk publikasi laporan ini.
Menurut peraturan Prancis, persetujuan dewan peninjau institusional (IRB) tidak diperlukan untuk
laporan kasus, asalkan pasien 'persetujuan tertulis diperoleh. Komite Etika Prancis untuk Penelitian
Obstetri dan Ginekologi meninjau pekerjaan dan penipuan fi rmed bahwa persetujuan IRB tidak
diperlukan. Studi kasus dilakukan sesuai dengan prinsip Deklarasi Helsinki dan pedoman CARE 25

Ringkasan pelaporan. Informasi lebih lanjut tentang desain penelitian tersedia di Ringkasan
Pelaporan Penelitian adam yang ditautkan ke artikel ini.
Ketersediaan data
Semua data yang dihasilkan atau dianalisis selama studi ini dimasukkan dalam artikel yang
diterbitkan ini.
Diterima: 23 April 2020; Diterima: 29 Juni2020;
Referensi

1. Zeng, H. dkk. Antibodi pada bayi yang lahir dari ibu penderita pneumonia COVID-19. JAMA 323 , 1848 – 1849
(2020).
2. Dong, L. et al. Kemungkinan penularan vertikal SARS-CoV-2 dari ibu yang terinfeksi ke bayinya. JAMA 323,
1846 - 1848 (2020).
3. Zeng, L. dkk. Infeksi awal neonatal dengan SARS-CoV-2 pada 33 neonatus yang lahir dari ibu dengan COVID-19
di Wuhan,Cina. JAMA Pediatr. https: // doi. org / 10.1001 / jamapediatrics.2020.0878 (2020).
4. Zhu, H. et al. Analisis klinis dari 10 neonatus yang lahir dari ibu dengan pneumonia 2019nCoV. Terjemahan.
Pediatr. 9, 51 – 60 (2020).
5. Yu, N. dkk. Gambaran klinis dan hasil kebidanan dan neonatal pasien hamil dengan COVID-19 di Wuhan, Cina: studi
deskriptif retrospektif, pusat tunggal. Lancet Infect. Dis. 20, 559- 564 (2020).

6. Alzamora, MC dkk. COVID-19 parah selama Kehamilan dan kemungkinan penularan vertikal. Saya.
7. J. Perinatol. https://doi.org/10.1055/s-0040-1710050 (2020). American College of Obstetricians and
Gynecologists. Praktik buletin no. 106: pemantauan detak jantung janin intrapartum: tata nama, interpretasi, dan
prinsip-prinsip manajemen umum. Obstet. Gynecol. 114, 192 - 202 (2009).

8. Perlman, JM dkk. Bagian 7: Resusitasi Neonatal: 2015 Konsensus Internasional tentang Resusitasi Kardiopulmoner
dan Ilmu Perawatan Kardiovaskular Darurat Dengan Rekomendasi Perawatan (Cetak Ulang). Pediatri 136,S120 -
S166 (2015).

9. Singh, Y. dkk. Panduan berbasis bukti internasional tentang titik perawatan ultrasound (POCUS) untuk neonatus dan
anak-anak yang sakit kritis yang dikeluarkan oleh Kelompok Kerja POCUS dari European Society of Pediatric and
Neonatal Intensive Care (ESPNIC). Crit. peduli 24, 65 (2020)

10. De Luca, D. dkk. Peran fosfolipase A2 yang berbeda dan modulatornya dalam sindrom aspirasi mekonium pada
neonatus manusia. Intensiv. Perawatan Med. 37,1158 - 1165 (2011).

11. Zamaniyan, M. et al. Kelahiran prematur pada wanita hamil dengan COVID kritis - 19 pneumonia dan transmisi
vertikal. Prenat. Diag. https: // doi. org / 10.1002 / hlm. 5713 (2020).

12. Lorenz, N. dkk. Infeksi awal neonatal dengan SARS-CoV-2 pada bayi baru lahir dengan gejala ensefalitik. Anak.
Menulari. Dis. J. 1, https://doi.org/10.1097/INF.0000000000002735 (2020).

13. Shah, PS, Diambomba, Y., Acharya, G., Morris, SK & Bitnun, A. Classi fi sistem kation dan kasus de fi penyakit
infeksi SARS-CoV-2 pada wanita hamil, janin, dan neonatus. Acta Obstet. Gynecol. Skand. 99,565 - 568 (2020).

14. Kirtsman, M. et al. Kemungkinan infeksi SARS-CoV-2 bawaan pada neonatus yang lahir dari wanita dengan
infeksi SARS-CoV-2 aktif. CMAJ https://doi.org/10.1503 / cmaj.200821 (2020)

15. Algarroba, GN dkk. Visualisasi virus SARS-CoV-2 menyerang plasenta manusia menggunakan mikroskop
elektron. Saya. J. Obstet. Gynecol. https://doi.org/10.1016 / j.ajog.2020.05.023 (2020).
16. Ng, WF dkk. Plasenta pasien dengan sindrom pernapasan akut berat: evaluasi patofisiologis. Patologi 38, 210 - 218
(2006).

17. Li, M., Chen, L., Zhang, J., Xiong, C. & Li, X. Ekspresi ACE2 reseptor SARS-CoV-2 dari antarmuka ibu-janin dan
organ janin dengan studi transkriptom sel tunggal. PLoS ONE 15, e0230295 (2020).

18. Mao, L. dkk. Manifestasi neurologis pasien rawat inap penyakit coronavirus 2019 di Wuhan, China. JAMA Neurol. 77,
1 - 9 (2020). Needham, EJ, Chou, SH-Y., Coles, AJ & Menon, DK Implikasi neurologis infeksi COVID-19. Neurokrit.
peduli 32, 667 - 671 (2020). Poyiadji, N. dkk. COVID-19 - terkait ensefalopati nekrotikans hemoragik akut: gambaran
CT dan MRI. Radiologi 201187, https://doi.org/10.1148 / radiol. 2020201187 (2020).

19. Moriguchi, T. et al. SEBUAH fi kasus pertama meningitis / ensefalitis yang terkait dengan SARS-Coronavirus-2.
Int. J. Infeksi. Dis. 94, 55 - 58 (2020).

20. De Blic, J. dkk. Bilas bronchoalveolar pada anak-anak. Gugus Tugas ERS pada lavage bronchoalveolar pada anak-
anak. European Respiratory Society. Eur. Resp. J.15, 217 - 231 (2000).

21. Uhteg, K. et al. Membandingkan kinerja analitis dari tiga uji diagnostik molekuler SARS-CoV-2. J. Clin. Virol. 127,
104384 (2020). Khong, TY dkk. Sampling dan de fi definisi lesi plasenta: Pernyataan Konsensus Grup Lokakarya
Plasenta Amsterdam. Lengkungan. Pathol.Laboratorium. Med.140, 698 - 713 (2016).

22. Pernyataan Konsensus Grup Lokakarya Plasenta Amsterdam. Lengkungan. Pathol. Laboratorium. Med.140, 698 - 713
(2016).

23. Riley, DS dkk. Panduan CARE untuk laporan kasus: penjelasan dan dokumen elaborasi. J. Clin. Epidemiol. 89, 218 -
235 (2017).