TEKNIK PEMBUATAN

PREPARAT
(Sitohistoteknologi)

Kelompok 5 : Anisa R (P27903117005)
Griselda E. D (P27903117018)
Meisy B. A (P27903117031)
Rina W. N (P27903117044)
Ada 5 Method

Oles

Irisan Spread

Supravital Squash
 1. Oles (Smear Methods)
 


 Bahan yang digunakan :
• Darah
• Nanah
• Jaringan tertentu
• Larutan Giemsa
 
 Prosedur Kerja :
• Menyediakan alat dan bahan
• Pengambilan sampel (darah)
• Pengapusan darah di gelas objek
• Fiksasi
• Pewarnaan
• Penutupan dengan gelas penutup
Jenis Pewarnaan :
1. Pewarnaan Giemsa
2. Pewarnaan May
Grunwald
3. Pewarnaan Pappenheim
4. Pewarnaan Wrigh
 2. Rentang (Spread)
 
• Bahan yang digunakan : 
-Subkutis (jaringan ikat atau jaringan lemak)
-Methyl alkohol 3%
-Alkohol
-Eosin
-Toluol
• Prosedur Kerja :
1. Mengambil jaringan segar dengan menggunakan benda tajam
seperti jarum preparat, pisau skalpel atau pisau runcing.
2. Merentangkan sayatan jaringan segar pada objek glass kering.
3. Difiksasi menggunakan methyl alkohol 3% selama 1-3 menit.
4. Dilanjutkan dengan langkah berikut :
 Alkohol absolut 1-3 menit
Alkohol 96% 1-3 menit
Alkohol 90% 1-3 menit
Alkohol 80% 1-3 menit
Alkohol 70% 1-3 menit
Eosin 1-3 menit
Alkohol 70% 1-3 menit
Alkohol 80% 1-3 menit
Alkohol 90% 1-3 menit
Alkohol 96% 1-3 menit
Alkohol absolut 1-3 menit
Toluol 1-3 menit
Xylol 1-3 menit
5. Ditutup preparat menggunakan deck glass
6. Diamati dibawah mikroskop
Jenis Pewarnaan :
1. Mallory Acid
Fuchsin
2. Hematoksilin
3. Azure II-Eosin

Contoh preparat rentang dari Mus musculus

(Mencit)
 3. Pencet (Squash)

 Bahan yang digunakan :
• Lien
• Sumsum Tulang
• Tumor Seluler
 Prosedur Kerja :
1. Kelenjar ludah drosophila dikeluarkan menggunakan dua buah jarum diseksi
2. Diletakkan pada kaca preparat yang telah dibuahi larutan garam fisiologi
3. Pisahkan kelenjar ludah dari jaringan lemak yang ada
4. Pindahkan kelenjar ludah tersebut pada kaca preparat lain yang telah ditetesi
pewarna acetocamin, aceto-orcein.
5. Tutup menggunkan cover glass lalu dipanaskan diatas lampu alkohol, tekan
hingga dinding sel membebaskan kromosom
 4. Supravital

 Bahan yang digunakan :
• Yanus green
• Neutral Red
 Prosedur Kerja :
1. Bersihkan tangkai scalpel didalam alkohol 70% dan
dikeruk selapput lendir mulut dengan hati-hati,
2. Teteskan sediaan yang telah diambil dalam sediaan objeck
glass
3. Ditetesi 1 tetes dengan zat warna atau campuran dari
keduanya
4. Tutup dengan cover glass dan amati dengan mikroskop
 5. Irisan
• Bahan : 1. Alkohol, 2. Xylol, 3. Safranin
• Prosedur Kerja :
1. Fiksasi : bahan difiksasi selama 24 jam dalam larutan FAA
2. Pencucian : larutan fiksatif dibuang dan dicuci dengan etanol 70%
sebanyak 2X dengan waktu penggantian masing-masing selama ½ 
jam.
3. Dehidrasi : dilakukan secara bertahap dengan merendam bahan
dalam seri larutan
4. Dealkoholisasi (penjernihan) : dilakukan secara bertahap pula
melalui seri larutan alkohol – xilol dengan waktu penggantian
berturut-turut sebagai berikut :
Alkohol/xilol 3 : 1 ……………………….  ½ jam
Alkohol/xilol 1 : 1 ……………………….  ½ jam
Alkohol/xilol 1 : 3 ……………………….  ½ jam
Xilol I  …………………………………… ½ jam
Xilol II …………………………………… ½ jam
Campuran xilol/parafin 1 : 9 dlm temperatur 58°C selama 24 jam
 5. Infiltrasi
 6. Penyelubungan (embedding)
 7.  Pengirisan : blok sampel diiris menggunakan
mikrotom dengan tebal 10 µm.
 8. Perekatan
 9. Pewarnaan
 10. Penutupan : irisan pada kaca objek ditutup
dengan kaca penutup setelah sebelumnya diberi
Canada balsam atau entellan. Preparat selanjutnya
dikeringkan dalam oven atau slide warmer
sampai entellan kering.
 11. Pemberian label
 SYUKRON !!!


Ada yang ingin
bertanya ???