Anti HBS

FATYA SHOFWANA (G1C019062)

NUR RAHMATIA ABDULLAH (G1C019063)
RISKAWATI RUSLAN (G1C019064)
PENGERTIAN Anti -HBS
Anti-HBS adalah pertanda adanya
antibody terhadap virus hepatitis B
pada seseorang. Antibodi yang
terbentuk bisa di sebabkan infeksi
virus hepatits B atau berasal dari
vaksinasi hepatitis B.
PENGERTIAN HEPATITIS B

Hepatitis B adalah suatu sindroma

klinis atau patologis yang di tandai
oleh berbagai tingkat peradangan dan
nekronis pada hepas, di sebabkan oleh
virus Hepatitis B.
 Prinsip

• Sampel serum atau plasma pasien ditambahkan ke microwell bersama dengan HBsAg kedua yang
terkonjugasi ke Horseradish Peroxidase (HRP-Conjugate). Dalam kasus adanya anti-HBs dalam
sampel, antigen pra-dilapisi dan terkonjugasi akan terikat pada dua domain variabel antibodi dan
selama inkubasi, imunokompleks spesifik yang terbentuk ditangkap pada fase padat. Setelah dicuci
untuk menghilangkan sampel dan HRP-Konjugat yang tidak terikat, larutan Chromogen yang
mengandung Tetramethylbenzidine (TMB) dan urea peroksida ditambahkan ke dalam sumur. Dengan
adanya kompleks “sandwich” antigen-antibody-antigen(HRP), Kromogen yang tidak berwarna
dihidrolisis oleh HRP-Conjugate yang terikat menjadi produk berwarna biru. Warna biru berubah
menjadi kuning setelah menghentikan reaksi dengan asam sulfat. Jumlahnya intensitas warna dapat
diukur dan sebanding dengan jumlah antibodi yang ditangkap di sumur, dan sampel masing-masing.
 PENULARAN HEPATITIS B
Virus Hepatitis B dapat ditularkan melalui 2 cara

Penularan Penularan Virus

secara Hepatitis B
horizontal secara vertikal
 Jenis Pemeriksaan

• Untuk mendeteksi anti-HBs menggunakan metode ELISA antigen

‘’Sandwich’’ dengan menggunakan strip microwell polysurene.
 Alat, Bahan dan Cara menyiapkan alat dan bahan
• Sumuran/Micro • Stop solution
Well plate yang
berisi HBsAg
• Air suling Simpan specimen pada 2-8 C, specimen
0

rekombinan • Sarung tangan yang tidak diperlukan untuk pengujian

dalam waktu 1 minggu harus di simpan
• Standar kurva • Wadah limbah dalam keadaan beku -20 C. Untuk
0

melindungi kinerja maksimum WANTAI

kalibrasi • Pipet anti HBS-ELISA (kuantitatif), selama
• HRP conjugate • Tissue/ handuk penyimpanan lindungi reagen dari
kontaminasi mikroorganisme atau bahan
• Wash buffer • Penangas kimia

• Chromogen 37+1oC
solution A • ELISA dengan
• Chromogen panjang
solution B gelombang
450nm/630nm

• Step 1 : Persiapan: Tandai 6 kalibrasi •
kurva-standarkurva (misalnya B1-G1)
dan 1 blangko (misalnya A1. baik
sampel atau HRP-Conjugate harus
ditambahkan ke dalam reagen blank).
• Step 5 : Cuci : Pada akhir inkubasi,
• Step 2 : Tambahkan sampel :
Tambahkan 50l standar kurva
kalibrasi dan specimen ke sumur
masing-masing kecuali blangko.
• Step 6 : Warna : Tambahkan 50 l
• Step 3 : Menambahkan HRP-
Conjugate : Tambahkan 50l dari
HRP-Conjugate ke setiap sumur
kecuali sumuran blangko. Campurkan
dengan mengetuk plate dengan
lembut.
Cara kerja
Step 4 : Inkubasi : Tutupi plate
dengan tutup plate dan inkubasi
selama 60 menit di suhu 37C
• Step 7 : Hentikan reaksi :
Menggunakan pipet multichannel atau
manual, tambahkan 50l stop
lepas dan buang penutup plate. Cuci solution kedalam sumuran dan
setiap sumur 5X dengan wash buffer homogenkan secara perlahan. Jika
encer. Setiap kali, sumur mikro caira warna biru berubah menjadi
direndam selama 30-60 detik. kuning hentikan reaksi.
• Step 8 : Mengukur absorbansi :
dari chromogen A dan 50l Kalibrasi plate reader dengan blanko
chromogen B solution ke dalam lalu baca absorbansi pada 450nm
setiap sumuran dan blank. inkubasi dalam waktu 10 menit setelah reaksi
plate pada 37C inkubasi selama 15 di hentikan.
menit. dan menghindari cahaya.
• Alat ini digunakan sebagai penyaring
ganda, menyetel panjang gelombang
rujukan pada 630nm.Evaluasi hasil.
 Interpretasi hasil

• Nilai hitung dari blangko, yang hanya mengandung chromogen

solution dan stop solution adalah < 0.0800 pada 450 nm.
• Nilai OD standar OmIU/mL harus < 0,100 pada 450-630 nm atau 450
nm setelah blanko
• Nilai OD dari standar 160mIU/mL standar harus > 1500 di 450/630 nm
atau 450 setelah blanko
• TERIMA KASIH