DIAGRAM ALIR

A. Penentuan Panjang gelombang Maksimum

Spektofotometer dihidupkan

Diatur

= 580 nm

Dimasukan larutan blanko (dalam kuvet) berupa aquades

Dikalibrasi dengan menekan tombol CAL
Diganti dan dimasukan larutan Luria tanpa kultur (dalam kuvet)
Dicatat nilai absorbansi atau O.D.nya
Dilakukan tahapan di atas pada = 580, 590, 600, 610, 620 nm
Dicari absorbansi tertinggi sebagai maksimum

Panjang

Panjang gelombang diatur pada mak + 5 mm

Diambil panjang gelombang dengan Absorbansi terbesar

Panjang maksimum 2

B. Kurva Pertumbuhan
Kultur E. coli 2,5 ml
Diambil dengan pipet ukur steril
Dimasukan pada erlenmeyer 250 ml yang berisi 97,5 ml Luria Broth
Dimasukan pada shaker waterbath 37oC, 105 rpm, 630 menit
Suspensi mikroba
Diambil sampel batas kuvet
Dimasukan ke dalam spektro

Diambil 1 ml dengan mikropipet

Dimasukan tabung reaksi yang berisi pepton

Diatur maksimum = 580 nm

Dilakukan pengenceran sesuai seri prngenceran

Dicatat nilai absorbansi (O.D.)

Diambil 0,1 ml dengan mikropipet dari 3 tabung

Pengenceran terakhir

Hasil

Diplatting pada cawan dengan metode spread

Diinkubasi 37oC, 24 jam
Dihitung nilai SPCnya
Hasil