Laporan Praktikum Mikrobiologi Dasar

ISOLASI MIKROORGANISME DARI UDARA

Aditya Rizky Ramadhan, Ratna Lestyana Dewi, Ria Suci Anisa, Udi Rafiudin, Wuliani Amalia
Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta
Fakultas Sains dan Teknologi
Program Studi Biologi
Desember 2015

Abstrak
Microorganism like bacterias and molds are living around us, whether at the air, water, soil, foods or
even feces. It’s important to know the advantages of them. The first step is to isolate them from their habitat. The
isolation was used a Potato Dextrose Agar (PDA) to isolate the molds, and Nutrient Agar (NA) to isolate
bacterias. Every bacteria has a diffrent responses to chemical reaction and environmental factors so we did a
biochemical tests and environmental fluences test to the bacterias that had been catched and then we identified
them. The results showed that we had catched the bacterias from genus Micrococcus spp., Streptococcus spp.,
Escherichia coli., and Bacillus spp. We hadn’t identified them to reach the species’s stage because we need to do
a molecular test.

Keywords: bacterias, molds,biochemical tests, environmental fluences test, isolation

Pendahuluan
Mikroorganisme merupakan makhluk hidup
yang berukuran sangat kecil yaitu dalam skala
micrometer atau micron (μ) atau sepersejuta meter
dan tidak dapat dilihat dengan mata telanjang.
Dalam percakapan sehari-hari atau untuk
kepentingan praktis mikroorganisme sering disebut
sebagai mikroba atau kuman. Untuk
mempelajarinya diperlukan cara tertentu yaitu
observasi mikroskopik dan biakan atau pure culture.
Termasuk dalam golongan mikroorganisme adalah
bakteri (eubactera, archaebacteria), fungi (yeasts,
molds), protozoa, microscopic algae dan virus serta
beberapa macam cacing (helmints). Ilmu yang
mempelajari mikroorganisme disebut mikrobiologi.
Ilmu mikrobiologi kedokteran mempelajari
mikroorganisme sebagai penyebab penyakit infeksi,
cara mendiagnosis, pengobatan, pencegahan dan
pengendalian infeksi.
Pertumbuhan mikroba pada umumnya
sangat tergantung dan dipengaruhi oleh faktor
lingkungan, perubahan faktor lingkungan dapat
mengakibatkan perubahan sifat morfologi dan
fisiologi. Hal ini dikarenakan, mikroba selain
menyediakan nutrient yang sesuai untuk
kultivasinya, juga diperlukan faktor lingkungan
yang memungkinkan pertumbuhan mikroba secara
optimum. Mikroba tidak hanya bervariasi dalam
persyaratan nutrisinya, tetapi menunjukkan respon
yang menunjukkan respon yang berbeda-beda.
Untuk berhasilnya kultivasi berbagai tipe mikroba
diperlukan suatu kombinasi nutrient serta faktor
lingkungan yang sesuai (Pelczar & Chan, 1986).
Kehidupan bakteri tidak hanya dipengaruhi
oleh faktor-faktor lingkungan, akan tetapi juga
mempengaruhi keadaan lingkungan. Bakteri dapat
mengubah pH dari medium tempat ia hidup,
perubahan ini disebut perubahan secara kimia.
Adapun faktor-faktor lingkungan dapat
dibagi atas faktor-faktor biotik dan faktor-faktor
abiotik. Di mana, faktor-faktor biotik terdiri atas
makhluk-makhluk hidup, yaitu mencakup adanya
asosiasi atau kehidupan bersama antara
mikroorganisme, dapat dalam bentuk simbiose,
sinergisme, antibiose dan sintropisme. Sedangkan
faktor-faktor abiotik terdiri atas faktor fisika (misal:
suhu, atmosfer gas, pH, tekanan osmotik,
kelembaban, sinar gelombang dan pengeringan)
serta faktor kimia (misal: adanya senyawa toksik
atau senyawa kimia lainnya (Hadioetomo, 1993),
dikarenakan semua proses pertumbuhan bergantung
pada reaksi kimiawi dan karena laju reaksi-reaksi
ini dipengaruhi oleh temperatur, maka pola
pertumbuhan bakteri dapat sangat dipengaruhi oleh
temperatur. Temperatur juga mempengaruhi laju
pertumbuhan dan jumlah total pertumbuhan
organisme. Keragaman temperatur dapat juga
mengubah proses-proses metabolik tertentu serta
morfologi sel (Pelczar & Chan, 1986).
Medium harus mempunyai pH yang tepat,
yaitu tidak terlalu asam atau basa. Kebanyakan
bakteri tidak tumbuh dalam kondisi terlalu basa,
dengan pengecualian basil kolera (Vibrio cholerae).
Pada dasarnya tak satupun yang dapat tumbuh baik
pada pH lebih dari 8. Kebanyakan patogen, tumbuh
paling baik pada pH netral (pH7) atau pH yang
sedikit basa (pH 7,4). Beberapa bakteri tumbuh
pada pH 6;tidak jarang dijumpai organisme yang
tumbuh baik pada pH 4 atau 5. Sangat jarang suatu
organisme dapat bertahan dengan baik pada pH 4;
bakteri autotrof tertentu merupakan pengecualian,
dikarenakan banyak bakteri menghasilkan produk
metabolisme yang bersifat asam atau basa
(Volk&Wheeler,1993).
Bakteri jarang menemui zat-zat kimia yang
menyebabkan ia sampai mati, hanya manusia di
dalam usahanya untuk membebaskan diri dari
kegiatan bakteri meramu zat-zat yang dapat
meracuni bakteri, akan tetapi tidak meracuni diri
sendiri atau meracuni zat makanan yang
diperlukannya. Zat-zat yang hanya menghambat
pembiakan bakteri dengan tidak membunuhnya
disebut zat antiseptik atau zat bakteriostatik
(Dwidjoseputro,1994). Desinfektan adalah bahan
kimia yang dapat digunakan untuk menghambat
pertumbuhan mikroorganisme. Faktor utama yang
menentukan bagaimana desinfektan bekerja adalah
kadar dan suhu desinfektan, waktu yang diberikan
kepada desinfektan untuk bekerja, jumlah dan tipe
mikroorganisme yang ada dan keadaan bahan yang
didesinfeksi. Jadi terlihat sejumlah faktor harus
diperhatikan untuk melaksanakan tugas sebaik
mungkin dalam perangkat suasana yang ada.
Desinfeksi adalah proses penting dalam
pengendalian penyakit, karena tujuannya adalah
perusakan agen – agen patogen. Berbagai istilah
digunakan sehubungan dengan agen – agen kimia
sesuai dengan kerjanya atau organisme khas yang
terkena. Mekanisme kerja desinfektan mungkin
beraneka dari satu desinfektan ke desinfektan
lainnya. Akibatnya mungkin disebabkan oleh
kerusakan pada membran sel atau oleh tindakan
pada protein sel atau pada gen yang khas yang
berakibat kematian atau mutasi (Volk dan Wheeler,
1993).
Pengamatan ini akan mengidentifikasi
bakteri dan kapang. Identifikasi genus dari suatu
bakteri memerlukan karakter-karakter utama dari
bakteri yaitu morfologi sel (bentuk sel dan susunan
sel), uji biokimia dan tipe fermentasi (Suryani et al.,
2010). Pada pengamatan ( Cut Yulvizar, 2013),
menemukan tiga genus isolat yang ditemukan pada
lambung dan usus ikan kembung (Rastrelliger sp.)
yaitu :
1. Genus Micrococcus: merupakan bakteri
yang mendekati genus ini memiliki ciri-ciri yaitu :
gram positif, bentuk sel bulat dan non motil. Bentuk
koloni bundar, tepian koloni licin, elevansi koloni
cembung dan timbul, Katalase positif, indol negatif,
uji MR negatif, uji sitrat negatif dan TSIA memiliki
warna permukaan merah dan bawah kuning.
Menurut Holt et al. (1994) bakteri Micrococcus sp.
merupakan bakteri gram positif, jarang motil dan
kebanyakan non motil, koloni berwarna kekuningan
sampai merah, tumbuh pada media yang sederhana,
katalase positif, indol negatif, pada uji TSIA ada
yang mampu memfermentasi glukosa dan ada yang
mampu memfermentasi laktosa dan sukrosa,
tumbuh optimum pada suhu 25ºC-37ºC.
2. Genus Staphylococcus: merupakan bakteri
yang mendekati genus ini memiliki ciriciri
morfologi yaitu gram positif, bentuk sel bulat dan
motil. Bentuk koloni bundar, tepian koloni licin,
elevasi koloni timbul dan warna koloni putih susu.
Katalase positif, indol negatif, uji MR negatif, uji
sitrat positif dan TSIA memiliki warna permukaan
dan bawah kuning. Menurut Holt et al. (1994)
bakteri Staphylococcus sp. gram positif, motilitas
berubah-ubah, kebanyakan motil, koloni biasanya
buram, warna koloni putih susu atau krem. Bakteri
ini memiliki katalase positif dan oksidase negatif,
sering mengubah nitrit menjadi nitrat, mampu
memfermentasi laktosa dan sukrosa, tumbuh
optimum pada temperatur 37ºC. Beberapa spesies
ada yang patogen pada manusia dan hewan.
3. Genus Bacillus: merupakan bakteri yang
mendekati genus ini memilki ciri-ciri morfologi
yaitu gram positif, bentuk sel bulat, batang dan
motil. Bentuk koloni bundar, tepian koloni
berombak, elevasi koloni cembung dan warna
koloni kuning atau krem. Katalase positif, indol
negatif, uji MR negatif, uji sitrat negatif dan TSIA
memiliki warna permukaan dan bawah kuning.
Menurut Holt et al. (1994) bakteri Bacillus sp.
merupakan bakteri gram positif, motil dengan flagel
peritrik. Endospora oval, kadang-kadang bundar
atau silinder dan sangat resisten pada kondisi yang
tidak menguntungkan. Warna koloni putih susu
sampai kekuningan dengan tepian berombak.
Bakteri ini bersifat aerobik. Katalase dan oksidase
positif. Indol negatif dan mampu memfermentasi
glukosa serta laktosa dan sukrosa. Tersebar luas
pada bermacam-macam habitat dan sedikit spesies
yang patogen. Suhu tumbuh optimum pada 28ºC-
35ºC.
Selain bakteri, kapang dan khamir juga
termasuk kedalam mikroorganisme. Kapang dan
khamir merupakan kelompok mikroorganisme yang
termasuk filum Fungi. Kehadiran mikroorganisme
di lingkungan terutama di perairan dapat bersifat
menguntungkan, karena kemampuannya dalam
merombak senyawa organik komplek menjadi
senyawa sederhana yang sangat dibutuhkan
tanaman sebagai sumber nutriennya. Fungsi lain
dari fungi adalah menghasilkan berbagai jenis
enzim, vitamin, hormon tumbuh, asam-asam
organik dan antibiotik. Sementara itu dari segi
merugikan, kehadiran fungi ini dapat menimbulkan
berbagai jenis penyakit yang membahayakan bagi
organisme lain terutama manusia (Noverita, 2009).
Beberapa contoh kapang dan khamir
penyebab penyakit yang dapat ditemukan di
perairan, baik pada kolam, sungai, danau maupun
laut adalah; Aspergillus spp, Penicillium spp.,
Pythiopsis, Saprolegnia parasitica, Isoachlya,
Leptolegnia, Candida spp, dan Rhodotorulla spp.
(Suryawirya, 1993). Koloni Aspergillus niger pada
saat muda berwarna putih, dan akan berubah
menjadi berwarna hitam setelah terbentuk
koniospora. Kepala konidia (Conidialhead)
berwarna hitam, berbentuk bulat (radiate). Kodiofor
berdinding halus, hialin sampai kecoklatan.
Vesikula berbentuk bulat sampai semi bulat. Fialid
duduk pada metule, konidia berbentuk bulat sampai
semi bulat, berwarna coklat tua – hitam, dan
berornamen. Menurut Samson dkk. (1981), Koloni
A. niger pada media Czapek Agar suhu 250C umur
7 hari mencapai diameter 4 – 7 cm, terdiri dari masa
koloni yang kompak berwarna putih dan kuning
pada permungkaan bawah koloni, yang akan
berobah warna menjadi coklat gelap sampai hitam
setelah terbentuk konidiospora (konidia). Kepala
konidia radiat. Tangkai konidia (konidiofor)
berdinding halus, hialin, tetapi sering berwarna
coklat. Vesikel bulat sampai semi bulat, berdiameter
50 – 100 μm. Fialid duduk pada metule, berukuran
7,0 – 9,5 x 3 – 4 μm. Metule hialin sampai coklat,
sering bersekat, berukuran 15 – 25 x 4,5 – 6,0 μm.
konidia bulat sampai semi bulat, diameter 3,5 -
5μm, coklat, dengan ornamen.
Koloni Aspergillus flavus pada saat muda
berwarna putih, dan akan berubah menjadi berwarna
hijau kekuningan setelah membentuk konidia.
Kepala konidia berwarna hijau kekuningan hingga
hijau tua kekuninggan, berbentuk bulat, konidiofor
berdinding kasar, hialin.. Vesikula berbentuk bulat
hingga semi bulat. Fialid langsung duduk pada
vesikula atau pada metule, konidia berbentuk bulat
hingga semi bulat, berwarna hijau pucat. Menurut
Samson dkk, (1999), koloni kapang A. flavus
berwarna hijau kekuningan. Kepala konidia khas
berbentuk bulat, kemudian merekah menjadi
beberapa kolom, dan berwarna hijau kekuningan
hingga hijau tua kekuningan. Konidiofor berwarna
hialin, kasar. Vesikula berbentuk bulat hingga semi
bulat, berdiameter 25 – 45 μm. Fialid duduk
lansung pada vesikel atau metule, berukuran 6 – 10
x 4,5 – 5,5 μm.
Koloni Aspergillus fumigates pada saat
muda berwar putih dan dengan cepat berubah
menjadi hijau seiring dengan terbentuknya konidia.
Kepala konidia berbentuk kolumnar, koniofor
pendek, berdinding halus, berwarna hijau. Vesikula
berbentuk gada, berwarna hijau. Konidia bulat
sampai semi bulat, berwarna hijau, berdinding
kasar. Menurut Samson dkk (1999), kapang
A.fumigatus mempunyai koloni berwarna hijau tua
karena lebatnya konidiofor yang terbentuk dari
miselia yang ada di agar dan juga dari miselium
aerial. Kepala konidia berbentuk kolumnar.
Konidiofor pendek, berdinding halus, dan berwarna
hijau (khusus pada bagian atas). Vesikula berbentuk
gada yang lebar, diameter 20 – 30 μm. Fialid
terbentuk langsung pada vesikula, seringkali
berwarna hijau, berukuran 6 – 8 x 2 – 3 μm.
Konidia berbentuk bulat hingga semi bulat, dimeter
2,5 – 3 μm, berwarna hijau, dan berdinding kasar
hingga berduri.
Menurut Samson dkk (1999), kapang
Aspergillus fumigatus mempunyai koloni berwarna
hijau tua karena lebatnya konidiofor yang terbentuk
dari miselia yang ada di agar dan juga dari miselium
aerial. Kepala konidia berbentuk kolumnar.
Konidiofor pendek, berdinding halus, dan berwarna
hijau (khusus pada bagian atas). Vesikula berbentuk
gada yang lebar, diameter 20 – 30 μm. Fialid
terbentuk langsung pada vesikula, seringkali
berwarna hijau, berukuran 6 – 8 x 2 – 3 μm.
Konidia berbentuk bulat hingga semi bulat, dimeter
2,5 – 3 μm, berwarna hijau, dan berdinding kasar
hingga berduri.
Menurut Lodder (1970), pertumburan
khamir Candida albicans pada media Sabaroud
dextrose agar atau glucose-yeast extract- peptone
water berbentuk bulat atau oval dengan ukuran (3,5-
6) x (6-10) μm. Koloni berwarna krem, agak
mengkilat dan halus. Pada media cornmeal agar
dapat membentuk clamydospora dan lebih mudah
dibedakan melalui bentuk pseudomycelium. Pada
pseudomycelium terdapat kumpulan
blastospora,terdapat pada bagian terminal atau
interkalar. Menurut Samson dkk.(1981),
pertumbuhan koloni kapang yang termasuk marga
Penicillium lambat, diameter koloni dapat mencapai
52 mm setelah sepuluh hari inokubasi. Koloni datar,
dengan lapisan tepung, permukaan hijau kebiru-
biruan yang dikelilingi oleh pinggiran berwarna
putih. Selanjutnya Barnett dan Hunter (1998),
konidiofor muncul dari miselium satu persatu atau
kadang-kadang dalam synnemata, bercabang pada
bagian ujung, penicillate, yang akhirnya terkumpul
dalam bentuk fialid. Konidia (phialospora) hialin
atau dalam masa sel yang berwarna, satu sel,
umunya bulat atau oval, membentuk rantai
basipetal.
Mikroorganisme terdapat disekitar kita,
seperti di udara, tanah maupun air. Oleh karena itu
untuk mengetahui keanekaragamannya dilakukan
isolasi mikroorganisme dari udara, serta dilakukan
pengamatan uji aktivitas biokimia yaitu uji
hidrolisis lemak, polisakarida, dan protein, uji indol,
uji KIA, uji MR, uji VP, uji asetat, uji katalase dan
uji OF serta dilakukan pengaruh faktor lingkungan
terhadap kultivasi mikroorganisme untuk
mengidentifikasi jenis dari suatu mikroorganisme
seperti bakteri dan kapang pada pengamatan ini.
Metodologi
Alat dan bahan
Alat yang digunakan pada praktikum
isoloasi mikroorganisme dari udara antara lain
cawan petri , pipet tetes, rak tabung reaksi,
inkubator, jarum ose, pembakar bunsen, Laminar
Air Flow (LAF), pinset, tabung reaksi, penangas air,
gelas objek, autoklaf, dan cover glass.
Bahan yang digunakan pada praktikum
isolasi mikroorganisme dari udara antara lain biakan
bakteri uji hasil isolasi mikroorganisme, alkohol
70%, spiritus, minyak emersi, NaCL 0,5%, NaCL
5%, NaCL 10%, NaCL 15%, Glukosa 0,5%,
Glukosa 5%, Glukosa 10%, Glukosa 15%, media
Malt Extract Agar (MEA), medium Nutrient Agar
(NA), medium Potato Dextrose Agar (PDA),
Paraffin Oil, larutan H202 3% , medium Kligler Iron
Agar (KIA), medium cair Triptopan 1%, reagen
Kovac, Larutan Iodine, medium Starch Agar (SA),
medium Tributyrin Agar (TA), Skim Milk Agar
(SKM), medium Methyl Red-Voges Proskauer
(MR-VP), medium Simmon Citrate Agar (SCA),
medium Hugh & Leifson’s (OF), Metil-Red, Barrit
A, Barrit B dan Alumunium Foil .
Isolasi Mikroorganisme dari Udara
Cawan petri berisi Nutrient Agar (NA)
diletakkan dalam keadaan terbuka (tanpa tutup)
selama 5 (lima) menit di Laboratorium Biologi
Lantai 4 Pusat Laboratotium Terpadu Universitas
Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta, kemudian
cawan petri ditutup kembali, dan diinkubasi selama
24-48jam.
Pemurnian Bakteri Simbion
Isolat bakteri yang diperoleh dari hasil
isolasi selanjutnya dimurnikan dengan cara
diinokalisikan dengan ose ke dalam medium
Nutrient Agar (NA) untuk bakteri, dan medium
Potato Dextrose Agar (PDA) untuk kapang atau
khamir hingga didapat koloni murni yang terpisah.
Pengamatan Morfologi
Pengamatan morfologi koloni bakteri
dilakukan dengan melihat warna koloni, bentuk
koloni, bentuk tepi koloni, elevasi (penonjolan),
tekstur, dan bentuk sel. Selanjutnya pengamatan
morfologi kapang atau khamir dilakukan dengan
melihat warna koloni, ada atau tidaknya hifa.

Uji Aktivitas Biokimia dari Mikroorganisme
a. Uji Hidrolisis Polisakarida, Protein, dan
Lemak
Diinokulasi biakan bakteri hasil isolasi kedalam tiga
tabung berisi medium Starch Agar (SA) untuk uji
polisakarida, medium Skim Milk Agar (SKM)
untuk uji protein, medium Tributyrin Agar (TA)
untuk uji lemak, selanjutnya diinkubasi pada suhu
30oC-35oC selama 48 jam. Ditambahkan larutan
iodine pada tabung berisi medium Starch Agar (SA)
dan biakan bakteri hasil isolasi untuk uji
polisakarida, kemudian diamati zona bening pada
ketiga tabung.
b. Uji Produksi H2S
Bakteri diinokulasikan ke dalam 1 (satu) buah
tabung yang berisi media tegak Kliger Iron Agar
(KIA). Diinokulasikan dengan cara digoreskan
kemudian ditusukkan dengan Jarum Ose Lurus,
selanjutnya diinkubasikan selama 7 (tujuh) hari
dalam suhu 30 oC - 35 oC. Diperhatikan munculnya
warna kekuningan diatas permukaan medium dan
dipermukaan bawah medium berwarna hitam
mendadakan hasil yang positif.
c. Uji Produksi Indol
Bakteri diinokulasikan ke dalam 1( satu) buah
tabung reaksi berisi Triptopan 1%. Diinkubasikan
selama 2 (dua) hari pada suhu 30 oC - 35 oC.
Ditambahkan 1 mL reagen Kovac ke dalam setiap
tabung dan dikocok perlahan agar reagen terkumpul
di permukaan. Terbentuknya Indol ditandai dengan
adanya cincin warna merah pada permukaan
medium.
d. Uji Methyl Red-Voges Proskauer (MR-
VP)
Bakteri diinokulasikan ke dalam medium Methyl
Red (MR) dan dinkubasikan selama 48 jam dalam
suhu 30 oC, kemudian ditambahkan 5 (lima) tetes
Metil-Red. Untuk uji Voges Proskauer (VP), bakteri
diinokulasikan ke dalam medium VP dan diinkubasi
selama 48 jam dalam suhu 30 oC, kemudian
ditambahkan 15 tetes Barrit A dan Barrit B. Hasil
positif ditunjukkan dengan adanya warna merah dan
negatif berwarna kuning.
e. Uji Oksidasi dan Fermentasi (Uji OF)
Bakteri diinokulasikan ke dalam 1 (satu) buah seri
medium OF, kemudain diinokulasikan dengan cara
ditusukkan menggunakan ose dan ditambahkan
Parrafin Oil setinggi 1 cm. Diinkubasikan dalam
suhu 37 oC selama 7 hari. hasil positif ditunjukkan
dengan adanya warna hijau kekuningan pada
tabung dan negatif ditunjukkan dengan adanya
warna biru.
f. Uji Hidrolisis Asam Sitrat
Bakteri diinokulasikan dengan ose ke dalam
medium Simmon Citrate Agar, kemudian
diinokulasikan dengan cara digoreskan dan
ditusukkan kedalam medium, selanjutnya
diinkubasikan selama 3 (tiga) hingga 5 (lima) hari.
Warna biru menunjukkan reaksi positif dan warna
hijau menunjukkan reaksi negatif.
g. Uji Katalase
Biakan bakteri diambil dari stok kultur bakteri
diambill sebanyak satu ose (ose bulat). Kemudian
ditambahkan 2-3 tetes reagen H2O2 pada preparat.
Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuk
gelembung gas, dan hasil negatif tidak terbentuk
gelembung gas.
Uji Pengaruh Lingkungan Terhadap Kultivasi
Mikroorganisme
a. Uji Pengaruh Tekanan Osmosa
Dibuat 2 (dua) buah medium NaCl (Natrium
Klorida) agar dengan ketentuan berupa : cawan
petri 1 berisi 0,5% NaCl, cawan petri 2 berisi 5%
NaCl, cawan petri 3 berisi 10% NaCl, dan cawan
petri 4 berisi 15% NaCl. Dibuat pula 2 (dua) buah
medium Glukosa agar dengan ketentuan berupa :
cawan petri 1 berisi 0,5% Glukosa, cawan petri 2
berisi Glukosa 5%, cawan petri 3 berisi Glukosa
10% dan cawan petri 4 berisi Glukosa 15%. Setelah
padat, dibagi agar cawan menjadi 4 (empat) bagian
sama besar dengan spidol. Bakteri dan kapang atau
khamir dari stok kultur diinokulasikan sebanyak
satu ose kedalam masing-masing agar cawan,
kemudian diinkubasikan selama 2 hari pada suhu
30oC.
b. Uji Pengaruh pH
Disiapkan 3 (tiga) buah agar cawan yang
dibuat dari Malt Extract Agar (MEA) dengan pH
masing-masing yaitu 5, 7 dan 9. Cawan dibagi
menjadi 6 (enam) sektor. Pada sektor 1,2,3 bakteri
diinokulasikan dan sektor 4,5,6 kapang
diinokulasikan, selanjutnya diinkubasi selama 2
hingga 3 hari pada suhu 37 oC.
HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN
Hasil Isolasi Bakteri
Morfologi Bentuk Diameter
Nama
Grup Lokasi Koloni
Bakteri Warna Bentuk Tepi Elevasi Tekstur Sel
(cm)
1 Laboratorium Sp.1 Kuning Irregular Lobate Umbonate Kasar Coccus 0,5
Mikrobiologi Sp.2 Kuning Circular Entire Convex Licin Coccus 0,2
2 Laboratorium Sp.1 Kuning Circular Entire Convex Licin Coccus 0,2
Fisiologi Sp.2 Putih Irregular Lobate Umbonate Licin Basil 1,4
3 Laboratorium Sp.1 Putih Circular Undulate Raised Licin Basil 0,2
Biologi Dasar (tidak ditemukan)
4 Laboratorium Sp.1 Kuning Circular Entire Convex Halus Coccus 0,8
Ekologi Dasar Sp.2 Putih Circular Entire Flat Halus Basil 0,2
Lobby Lantai
Sp.1 Kuning Circular Entire Convex Halus Coccus 0,4
5 4
PLT Sp.2 Putih Irregular Undulate Flat Halus Coccus 0,2
Mushalla
Sp.1 Putih Irregular Undulate Umbonate Kasar Coccus 0,1
6 Lantai 4
PLT Sp.2 Putih Circular Entire Raised Kasar Basil 0,4
Tabel 1. Hasil isolasi bakteri di Laboratorium Biologi, Pusat Laboratorium Terpadu, UIN Jakarta

Identifikasi dilakukan untuk mengetahui Teknik isolasi dengan membiarkan media

spesies bakteri wild tipe yang diperoleh untuk
selanjutnya digunakan untuk berbagai keperluan.
Selain itu, proses tersebut juga berfungsi untuk
mengecek ulang (uji konfirmasi) isolat yang telah
diketahui spesies dan karakternya, sehingga dapat
memperkecil kesalahan pada hasil uji yang
dilakukan. Identifikasi dan klasifikasi
mikroorganisme haruslah diketahui terlebih dahulu
karakteristik atau ciri-ciri mikroorganisme (Mulyati
2013). Dengan kata lain, setiap kemungkinan dapat
terjadi. Dengan melakukan pendekatan secara
konvensional mau pun modern, kita dapat
memastikan spesies yang didapatkan.
Proses identifikasi bakteri didasarkan pada
berbagai macam sifat bakteri seperti sifat biokimia,
morfologi koloni, dan morfologi selnya.
Pengamatan dan pencatatan ciri morfologi serta ciri
lainnya merupakan tahap pendahuluan yang penting
sebelum identifikasi (Mulyati, 2013). Salah satu
tanda suatu kultur dapat dikatakan murni atau tidak
adalah dengan dilihat keragaman koloni yang ada.
Suatu kultur biakkan bakteri dikatakan murni
apabila bentuk koloni, warna koloni, morfologi
bakteri, hingga hasil uji biokimianya adalah sama.
Namun, pada percobaan ini tidak diperlukan koreksi
apakah kultur yang didapat berupa kultur murni atau
tidak.
terbuka di udara bebas memungkinkan bakteri dan
kapang menempel pada media tersebut. Dari sekian
banyak koloni bakteri dan kapang yang menempel,
dipilih 2 (dua) jenis koloni yang berukuran paling
besar dan 1 (jenis) untuk kapang dengan tingkat
pertumbuhan terbesar pada media, sehingga
didapatkan 11 (sebelas) koloni bakteri dan 5 (lima)
jenis kapang dan 1 (satu) jenis khamir yang masuk
ke tahap identifikasi spesies.
Dari data yang didapat, diketahui bahwa
warna-warna koloni yang muncul hanya dua, yaitu
kuning dan putih. Untuk koloni berwarna kuning,
bakteri yang dimungkinkan berasal dari genus
Aeromonas sp., Bacillus sp., Pseudomonas sp.,
Micrococcus sp., Streptococcus sp. dan Neisseria
sp., sedangkan untuk koloni berwarna putih, bakteri
yang dimungkinkan berasal dari genus Escherichia
sp., Acinetobacter sp., Staphylococcus sp. dan
Plesiomonas sp. (repository.usu.ac.id). Untuk
kapang, kemungkinan terbesar berasal dari genus
Aspergillus sp. dan Rhizopus sp. dengan ciri-ciri
berupa hifa yang berwarna kuning kecoklatan
hingga hitam (Firmansyah, 2013) dan untuk khamir
masih cukup sulit untuk mencari dugaan terkuat
mengenai genus khamir tersebut. Namun, untuk
mengetahui lebih lanjut hingga tingkat spesies
diperlukan uji lainnya. Salah satu uji tersebut adalah
uji biokimia pada bakteri.
 Hasil uji biokimia
Hasil Uji
Nama Mikroba Asam H2S
Polisakarida Protein Lemak Indol MR VP OF Katalase
Sitrat
Warna Retakan
Kuning
Sp. 1 Positif Kontam Positif Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif Positif Ada
kehitaman
Sp. 2 Positif Kontam Positif Negatif Negatif Negatif Negatif Positif Negatif Kuning Tidak
Tidak
Sp. 1 Positif Positif Negatif Positif Negatif Negatif Negatif Negatif Kuning Tidak
Tumbuh
Tidak
Sp. 1 Positif Positif Negatif Positif Positif Negatif Positif Negatif Kuning Ada
Tumbuh
Tidak
Sp. 1 Positif Positif Negatif Negatif Positif Negatif Positif Negatif Kuning Ada
Tumbuh
Tidak
Sp. 1 Positif Positif Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif Positif Kuning Tidak
Tumbuh
Tabel 2. Data hasil uji biokimia pada bakteri

Setiap mikroorganisme memiliki sifat yang
khas dalam menguraikan suatu senyawa menjadi
senyawa yang baru. Uji biokimia bakteri merupakan
suatu cara atau perlakuan yang dilakukan untuk
mengidentifikasi dan mendeterminasi suatu biakan
murni bakteri hasil isolasi melalui sifat-sifat
fisiologinya (Pelczar, 1986).
Uji isiologis merupakan tahapan lanjutan
yang diperlukan untuk mengidentifikasi suatu
bakteri (Darmayasa, 2008). Dilakukan serangkaian
uji seperti uji katalase, uji hidrolisis lemak,
polisakarida dan protein, uji fermentasi karbohidrat,
uji produksi indol, uji produksi H2S, uji MR-VP dan
uji OF. Uji Katalase bertujuan untuk mengetahui
kemampuan bakteri dalam menguari Hidrogen
peroksida (H2O2) (Yulvizar, 2013). Uji hidrolisis
lemak, polisakarida dan protein untuk mengetahui
kemampuan bakteri dalam menghidrolisis dan
memanfaatkan molekul lemak, protein dan
polisakarida (Wulandari, 2014). Uji fermentasi
karbohidrat dilakukan untuk mengidentifikasi
bakteri yang mampu memfermentasikan
karbohidrat. Karboidrat atau gula dapat
difermentasikan menjadi bermacam-macam zat,
seperti alkohol, asam, dan gas, tergantung pada
macamnya gula dan spesies bakteri. Terbentuknya
asam pada uji ini ditandai dengan berubahnya warna
indikator dalam medium (Ferdiaz, 1992). Uji Indol
dikatakan positif ditandai dengan terbentuknya
warna merah pada medium yang menunjukkan
bakteri memiliki enzim triptonase yang dapat
menghidrolisis asam amino jenis triptofan yang
memiliki gugus samping indol sehingga indol akan
bereaksi dengan reagen uji dan membentuk indol
yang berwarna merah (Ferdiaz, 1992). Uji Produksi
H2S untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam
memecah gugus protein dan memproduksi H2S. Uji
Methyl Red (MR) sendiri digunakan untuk
menentukan adanya produk asam campuran dari
fermentasi glukosa melalui jalur fermentasi asam
campuran yang umumnya berupa asam laktat, asam
asetat, asam format, dan asam suksinat, sedangkan
uji Voges-Proskauer (VP) digunakan untuk
menentukan kemampuan bakteri tersebut untuk
menghasilkan produk akhir yang netral
(asetilmetilkarbinol) dari fermentasi glukosa
melalui jalur butanediol (Muthmainnah, 2013). Uji
Oksidasi Fermentasi akan mendeterminasi bakteri
yang bersifat oksidatif dengan yang bersifat
fermentif. Bakteri oksidatif hanya akan
menghasilkan produksi asam bila terkena udara dan
tidak atau sedikit sekali menghasilkan produk asam
pada kondisi tanpa udara. Sementara, bakteri
fermentif baik tanpa udara atau pun udara akan
tetap menghasilkan produk fermentasi berupa asam.
Dari data yang didapat, setiap bakteri yang
diujikan memberikan respon yang berbeda-beda
pada tiap uji biokimia. Artinya, diduga kuat bahwa
setiap bakteri yang didapat merupakan spesies yang
berbeda-beda, meskipun dimungkinkan berasal dari
genus yang sama. Salah satu uji yaitu uji katalase
dapat membedakan antara genus Staphylococcus
dengan Streptococcus. Kelompok Streptococcus
memberikan reaksi negatif, sedangkan
Staphylococcus memberikan reaksi positif pada uji
katalase (Karimela, 2013).
Hasil uji bakteri terhadap faktor lingkungan
konsentarsi Glukosa (%) konsentrasi Nacl (%)
kelompok Mikroorganisme
0,5 5 10 15 0,5 5 10 15
1 Bakteri Sp.1 - + - - + + - -
2 Bakteri Sp. 2 + - + - + - + -
3 Bakteri Sp. 1 + + + + + + - -
4 Bakteri Sp. 1 + + + + + + - -
5 Bakteri Sp. 1 + + + + + + + -
6 Bakteri SP.1 + + + + + + + -
1 Kapang + + - + + + + +
2 Kapang + + + + + + + -
3 Kapang + + + + + + + -
4 Kapang + + + + + + + +
5 Kapang + + + + - + + -
6 Kapang + + + + + + + -
Tabel 3. Hasil pengujian bakteri dan kapang terhadap tekanan osmosis. (+) menandakan adanya pertumbuhan, (-
) menandakan tidak ada pertumbuhan.

Ph
kelompok Mikroorganisme
5 7 9
1 Bakteri ++ +++ +
2 Bakteri ++ +++ +
3 Bakteri ++ +++ +
4 Kapang ++ +++ +
5 kapang ++ +++ +
6 Kapang ++ +++ +
Tabel 4. Hasil pengujian bakteri dan kapang tehadap pH. (+++) menunjukkan banyak pertumbuhan, (++)
menunjukan pertumbuhan sedang dan (+) menunjukkan pertumbuhan yang sedikit

Pertumbuhan pada mikroorganisme dapat
diartikan sebagai pertumbuhan jumlah koloni,
dalam pertumbuhan setiap mikroorganisme
membutuhkan nutrisi yang mencukupi dari
lingkungan hidup yang mendukung dalam proses
pertumbuhan tersebut. Kebutuhan aspek fisik pada
lingkungan dapat mencakup suhu, pH, cahaya, UV,
dan tekanan osmosis (Suharjono, 2006). Perubahan
faktor lingkungan dapat mengakibatkan perubahan
sifat morfologi dan fisiologi. Namun, beberapa
kelompok mikroba sangat resisten terhadap
perubahan faktor lingkungan. Jika suatu
mikroorganisme mendapatkan nutrien dan
menempati lingkungan yang sama, maka
pertumbuhan yang dialami pada mikroorganisme
akan optimum. Berdasarkan pada hasil uji pengaruh
faktor lingkungan terhadap kultivasi
mikroorganisme telah dilakukan uji tekanan
osmotik dan uji pengaruh pH. Tekanan osmosis
sangat erat hubungannya dengan kandungan air, dan
karena adanya perbedaan tekanan osmosis di dalam
dan di luar sel yang akan menyebabkan gangguan
pada sistem metabolisme. Medium yang paling
cocok bagi kehidupan bakteri maupun
kapang/khamir yaitu medium yang isotonik
terhadap isi sel (Dwidjoseputro, 1994).
Berdasarkan pada hasil pengamatan dapat
dilihat bahwa pada saat konsentrasi glukosa 0,5%
semua bakteri dan kapang mengalami pertumbuhan,
kecuali pada bakteri kelompok 1 tidak mengalami
pertumbuhan. Tidak hanya pada konsentrasi
glukosa 0,5% yang tidak mengalami pertumbuhan,
akan tetapi pada glukosa 10%, 15%, NaCl 15%.
Sedangkan, hanya terjadi pertumbuhan pada
glukosa 5%, NaCl 0,5%, dan NaCl 5%. Sehingga
dapat diketahui bahwa bakteri kelompok 1
merupakan bateri yang tidak dapat beradaptasi
terhadap perubahan tekanan osmosis. Kemudian,
pada bakteri kelompok 3,4,5, dan 6 pada
kapang/khamir semua kelompok dapat mengalami
proses pertumbuhan pada medium glukosa dengan
konsentrasi 15. Hal ini menunjukan bahwa bakteri,
kapang/khamir yang mengalami pertumbuhan pada
media tersebut termasuk ke dalam kelompok
osmofil. Mikroorganisme osmofil merupakan
mikroorganisme yang dapat tumbuh pada
konsentrasi gula yang tinggi (Suharjono, 2006).
Selanjutnya, pada medium NaCl 15% tidak
ada yang mengalami pertumbuhan, sedangkan pada
kapang.khamir kelompok 1 dan 4 mengalami
pertumbuhan. Hal ini menunjukan bahwa
kapang/khamir yang tumbuh tersebut tergolong
dalam kategori golongan halofilik, yang merupakan
mikroorganisme yang dapat tumbuh pada kadar
garam halogen yang tinggi, dan dengan konsentrasi
yang tinggi tidak mengalami proses metabolisme
bakteri. Bakteri halofilik memiliki membran purple
bilayer, dinding sel terdiri dari murein, sehingga
mampu bertahan dengan adanya ion Natrium
(Dwidjoseputro, 2005)
Setiap mikroorganisme memiliki pH
maksimum, minimum, dan optimum untuk
pertumbuhannya. Berdasarkan pada perbedaan
daerah pH untuk pertumbuhannya adalah asidofil
untuk mikroorganisme yang mampu tumbuh pada
pH optimum pada pH asam. Alkalofil untuk
mikroorganisme yang dapat tumbuh secara
optimum pada daerah pH basa, dan Neutrofil untuk
mikroorganisme yang dapat tumbuh secara
optimum pada daerah pH netral (Suharjono, 2006).
Berdasarkan pada hasil uji mengenai faktor
lingkungan pH diketahui bahwa hasil pertumbuhan
paling banyak terjadi pada pH yang netral (pH=7)
ketika diujikan baik dari bakteri maupun
kapanh/khamir. Hal ini dikarenakan pada keduanya
dapat tumbuh secara baik pada kondisi yang tidak
terlalu asam dan tidak terlalu basa. Bila pH
lingkungan terlalu asam atau basa maka akan
mengakibatkan terhambatnya aktivasi enzim
sehingga mikroorganisme tersebut tidak mampu
melakukan proses metabolismenya secara baik.
Pada umumnya, kisaran optimum pertumbuhan
mikroorganisme dalam pH adalah 5,5-8,0 atau yang
termasuk ke dalam tipe mesofil (neutrofil).
Pertumbuhan tertinggi kedua yaitu pada pH 5 dan
biasanya pertumbuhan ini didominasi oleh
kapang/khamir. Berdasarkan pada literatur khamir
memiliki pH optimum pada 4,0-4,5 sedangkan pada
jamur pada pH yang lebih luas (Entijang, 2003).
Analisis spesies bakteri
Untuk Sp. 1 pada Kelompok 1 dengan ciri-
ciri koloni dengan warna koloni kuning, bentuk
irregular, tepi lobate, elevasi umbonate, tekstur
kasar dan dengan bentuk sel berupa kokus, dugaan
terkuat adalah Streptococcus sp.. Meskipun
beberapa genus Streptococcus sp. memiliki hasil uji
biokimia yang berbeda, namun secara kesuluruhan
cukup mirip. Menurut Rahayu (2015), ciri-ciri
bakteri Streptococcus sp. adalah memiliki bentuk
koloni yang halus, membulat, cembung dan
transparan dengan diameter koloni antara 0,5 hingga
1 cm. Hasil uji biokimia juga menunjukkan bahwa
bakteri Streptococcus sp. tidak mampu mengatalisis
peroksida (H2O2), tidak menghasilkan indol, namun
mampu menghidrolisis polisakarida. Sebagian
Streptococcus sp. memberikan respon yang negatif
pada uji VP, Sitrat dan Indol, namun sebagian
memberikan respon positif pada uji MR.
Pendalaman dengan uji molekuler perlu dilakukan
untuk lebih mendeterminasi hingga tingkat spesies.
Untuk Sp. 2 pada kelompok 2 dengan ciri-
ciri koloni dengan warna koloni putih, bentuk
koloni circular, tepi koloni entire, elevasi koloni
convex, tekstur yang licin, bentuk bakteri berupa
basil dengan diameter koloni adalah 1,4 mm. Koloni
berwarna putih memiliki indikasi bahwa bakteri
tersebut berasal dari genus Escherichia sp.,
Acinetobacter sp., dan Staphylococcus sp..
Escherichia coli diduga kuat karena memiliki ciri-
ciri berupa hasil katalase yang positif, bentuk
bakteri berupa basil, diameter koloni berkisar antara
1,1 hingga 1,5 cm, mampu menghidrolisis
polisakarida, tidak menghasilkan senyawa indol,
dan negati pada uji MR-VP (repository.usu.ac.id).
Dari kriteria bakteri yang berasal dari literatur,
semua kriteria sama dengan hasil uji yang
dilakukan, sehingga dapat dikatakan bahwa bakteri
pada Sp. 2 kelompok 2 merupakan bakteri
Escherichia coli.
Sp. 1 pada kelompok 3 memiliki ciri-ciri
berupa warna koloni putih, bentuk koloni circular,
tepi koloni undulate, elevasi koloni raised, tekstur
licin, bakteri berbentuk basil dengan diameter
koloni sebesar 0,2 cm. Koloni berwarna putih dapat
diduga merupakan bakteri dari genus Escherichia
sp., Acinetobacter sp., Pleisomonas sp. dan
Staphylococcus sp.. Bacillus sp. diduga kuat sebagai
bakteri pada koloni ini. Bacillus sp. memiliki ciri-
ciri seperti bentuk sel yang basil, diameter koloni
0,1 hingga 0,3 cm, warna koloni putih,
menunjukkan hasil negatif pada uji katalase,
pembentukan H2S dan sitrat (repository.usu.ac.id).
Bakteri ini diduga bakteri basil yang berbeda karena
memiliki warna putih pada koloninya, yang
berlawanan dengan literatur bahwa bakteri berasal
dari genus Bacillus sp. Untuk mengidentifikasi
hingga tingkat spesies, diperlukan uji molekuler
lebih lanjut.
Sp. 1 pada kelompok 4 memiliki ciri-ciri
berupa warna koloni kuning, bentuk circular, tepi
entire, elevasi koloni convex, tekstur halus, bentuk
bakteri berupa kokus dengan diameter koloni adalah
0,8 cm. Koloni berwarna kuning diduga berasal dari
genus Bacillus sp., Streptococcus sp., Micrococcus
sp., Neisseria sp. dan Aeromonas sp.. Micrococcus
sp. diduga kuat karena hasil isolasi menunjukkan
bahwa Micrococcus sp. memiliki diameter koloni
antara 0,2 hingga 2 cm dan memiliki warna koloni
kuning. Uji biokimia dari Micrococcus sp. adalah
positif pada uji katalase, indol, MR-VP dan uji
produksi H2S (repository.usu.ac.id).
Sp. 1 pada kelompok 5 memiliki ciri yang
sama dengan bakteri pada kelompok 4.
Perbedaannya pada hasil uji Methyl Red (MR) dan
diameter koloni. Hasil uji MR menunjukkan negatif,
yang artinya bakteri ini tidak mampu menghasilkan
produk fermentasi asam campuran. Kemungkinan
besar bahwa bakteri ini sama dengan bakteri pada
kelompok 4 yaitu Micrococcus sp., hanya saja dari
spesies yang berbeda.
Sp. 1 pada kelompok 6 memiliki ciri berupa
warna koloni putih, bentuk koloni irreguler, tepi
koloni undulate, elevasi koloni umbonate, tekstur
kasar, bentuk sel kokus dan diameter koloni 0,1 cm.
Diduga kuat spesies ini berasal dari genus
Streptococcus sp., namun berbeda dari spesies pada
kelompok 1. Strain Streptococcus yang berbeda
akan memberikan bentuk koloni yang berbeda pula.
KESIMPULAN
Isolasi mikroorganisme dari lingkungan
dapat dilakukan dengan cara menumbuhkan pada
media NA dalam keadaan terbuka yang menjadi
sumber isolasi. Mikroorganisme dapat diketahui
aktivitas biokimianya dengan melakukan berbagai
uji diantaranya yaitu uji hidrolisis pati, protein,
lemak, uji produksi indol, uji MR-VP, uji OF, uji
katalase, uji asam sitrat dan uji H2S.
Mikroorganisme
DAFTAR PUSTAKA
Barnett,H.L. dan Hunter, B.B. 1998. Ilustrated
Genera of Imperfect Fungi Fourth
Edition. APS Pres. America. America.
Brooks, dkk., 1994. Mikrobiologi Kedokteran Edisi
2. EGC. Jakarta.
Darmayasa. Isolasi dan Identifikasi Bakteri
Pendegradasi Lipid (Lemak) Pada
Beberapa Tempat Pembuanngan
Sampah dan Estruasi DAM Denpasar.
Jurnal Bumi Lestari 8:122-127.
Dwidjoseputro, 1994. Dasar-Dasar Mikrobiologi.
Djambaran. Jakarta.
Entijang, I. 2003. Mikrobiologi dan Parasitologi.
PT Citr Aditya Bakti. Bandung.
Ferdiaz, S. 1992. Mikrobiologi Pangan.
Gramedia. Jakarta.
Firmansyah, E. 2013. Mikrobiologi Umum:
Kapang dan Khamir. Universitas
Brawijaya. Malang.
Hadioetomo, R.S. 1993. Teknik dan Prosedur
Dasar Laboratorium Mikrobiologi.
Gramedia. Jakarta.
Holt JG, Krieg NR, Sneath PHA, Staley JT, dan
William ST. 1994. Bergey’s Manual of
Determinative Bacteriology. Lippicolt
William and Wilkins, New York.
Karimela, E. Frans, I. Agnes, A. 2013.
Staphylococcus sp. Pada Ikan Layang
(Decapterus ruselii) Asap Pinekuhe
Produk Khas Sangihe. Jurnal Media
Teknologi Hasil Perikanan Vol. 1, No. 2,
Agustus.
Lodder J. 1970. The yeast. A taxonomic
study.NorthHolland Publishing Company.
Mulyati, S, Dede. Iis, D. Sri, R. 2013. Modul
Mikrobiologi: Metode Identifikasi Mikroba
Prokariot dan Virus. IAIN Syekh
Nurjati. Cirebon.
Muthmainnah, H. 2014. Isolasi dan Karakterisasi
Bakteri Probiotik Dari Saluran Pencernaan
Ayam Kampung (Gallus domesticus).
Jurusan Biologi Universitas
Hasanudin. Makasar.
Noverita. 2009. Identifikasi Kapang dan Khamir Suharjono. 2006. Mikrobiologi. Universitas
Penyebab Penyakit Manusia pada Sumber Brawijaya Press. Malang
Air Minum Penduduk pada Sungai
Ciliwung dan Sumber Air Sekitarnya. Suryani Y, Astuti, Oktavia B, dan Umniyati S.
Volume 02, No. 2. 2010. Isolasi dan Karakterisasi
http://biologi.unas.ac.id:8080/publikasi/Ka Bakteri Asam Laktat dari Limbah
pang%20pd%20air%20minum.pdf. 2 Kotoran Ayam Sebagai Agensi
Januari 2016. Probiotik dan Enzim Kolesterol
Reduktase. Prosiding Seminar Nasional
Pelczar, M.J. dan Chan, E.C.S. 1986. Dasar-Dasar
Mikrobiologi. UI-Press. Jakarta. Biologi. 138-147.

Rahayu, S. 2015. Deteksi Streptococcus agalactiae Suryawirya, U. 1993. Mikrobiologi Air. Alumni.
Penyebab Mastitis Subklinis Pada Sapi Bandung.
Perah Di Kecamatan Cendana
Kabupaten Enrekang. Program Studi Volk &Wheeler. 1993. Mikrobiologi Dasar jilid1.
Kedokteran Hewan Universitas Hasanudin. Erlangga. Jakarta.
Makasar.
Wulandari, D, Yanuarita. 2014. Uji Fisiologi
Repository.usu.ac.id diakses pada 1 Januari 2016. Bakteri. Pendidikan Biologi Program
Magister Pascasarjana Universitas
Samson R.A., Hoekstra E.S. dan Van Oorschot C.A. Negeri Malang. Malang.
1981. Introduction To Food- Borde Fungi.
Centraalbureau Voor Schimmelcultures.
Yulvizar, C. 2013. Isolasi dan Identifikasi Bakteri
Probiotik pada Rastrelliger sp. Jurnal
Biospesies (3):5-6.