Metode Identifikasi bakteri

Mikroorganisme adalah organisme yang berukuran sangat kecil sehingga jika ingin melihatnya
diperlukan alat bantu ( mikroskop ).Jadi jika ingin mengidentifikasi keberadaan suatu
mikroorganisme dapat dilakukan dengan cara meningkatkan populasi mikroorganisme
tersebut dengan menggunakan metode mikroskopis, medis, biokimia, & serologis.

Identifikasi berdasarkan morfologi:

Metode ini digunakan untuk menentukan penampilan fisik bakteri secara individual.

1. Berdasarkan ukuran:

Di sini bakteri diidentifikasi berdasarkan ukuran fisiknya. Seperti ukuran kecil atau
besar yang diekspresikan dalam bentuk mikron. Di sini bakteri dilihat di bawah
mikroskop untuk melihat ukurannya. Salah satunya dapat menerapkan beberapa
pewarnaan dengan metode penggunaan seperti celah kaca atau metode tetes
gantung. Dalam metode celah kaca lapisan kultur bakteri diterapkan, diwarnai dan
dilihat dengan mikroskop di atas perbesaran 40x. Dalam metode tetes gantung,
setetes kultur dibuat supaya menggantung di antara kaca geser dan celah dan dilihat
di bawah mikroskop. Keuntungan dari metode tetes gantung adalah kita dapat
mengidentifikasi bakteri motil ( bakteri yang mampu bergerak yang disebabkan oleh
adanya flagel )

2. Berdasarkan bentuk

Struktur bakteri bervariasi, ada yang seperti bola (kokus), batang atau tongkat seperti

(basil), rantai seperti (strepto), berbentuk koma seperti bakteri kolera dll. Bahkan

bentuk koloni bakteri yang tumbuh pada media nutrisi juga berbeda

3. Dengan karakter ekstraseluler

Di sini beberapa karakter ekstra seluler digunakan dalam identifikasi bakteri.

Beberapa bakteri memiliki flagela untuk bergerak. Jadi mereka dapat diidentifikasi

berdasarkan jumlah flagela dan susunan flagela pada permukaan bakteri. Contohnya
adalah Bakteri atrichous yang tidak memiliki flagela, Monotrichous memiliki satu

flagel, Polytrichous memiliki banyak flagela. Bahkan beberapa bakteri memiliki dua

flagela satu di setiap sisi sel. Keberadaan flagella ini sering dapat dilihat tanpa perlu

diwarnai , cukup dengan menggunakan mikroskop fase kontras.

Berdasarkan karakteristik kultur

Di sini bakteri diidentifikasi sebagai kelompok atau kultur secara keseluruhan dan

bukan bakteri per individu. Karena sebagian besar bakteri tumbuh dalam koloni dan

juga membelah dengan cepat, mereka dapat dengan mudah tumbuh menjadi kultur

dalam media nutrisi yang sesuai. Berdasarkan karakteristik kultur mereka dapat

diidentifikasi sebagai

1. Bentuk kultur: Edaran, tidak beraturan, rizoid dll.

2. Ukuran kultur atau koloni dalam milimeter.

3. Jenis elevasi kultur seperti efuse, cembung, cekung dll.

4. Margin koloni seperti dentate, kasar, halus dll.

5. Permukaan koloni: Seperti halus, bergelombang, papill dll.

6. Warna kultul.

Berdasarkan resistensi

Antibiotik spesifik hanya dapat digunakan untuk bakteri tertentu. Oleh karena itu

beberapa bakteri mengembangkan resistensi terhadap jenis antibiotik tertentu.

Dengan menambahkan antibiotik ke dalam kultur dan mengukur resistensi mikroba

terhadap antibiotik tersebut, jenis bakteri dapat diidentifikasi.

Contoh: Bakteri TB yaitu Mycobacterium tuberculosis tidak terpengaruh oleh penisilin

tetapi musnah oleh ciproflaxain. Jadi diferensiasi ini dapat digunakan untuk

mengidentifikasi beberapa bakteri.

Oleh metabolisme

Beberapa bakteri sangat spesifik untuk kebutuhan metabolisme. Berdasarkan

kekhususan ini, mereka dapat diidentifikasi. Contoh: Bakteri aerob membutuhkan

oksigen untuk bertahan hidup. Bakteri anaerob mati ketika terkena oksigen. Demikian

pula beberapa memerlukan karbon dioksida, darah atau pigmen lain untuk

metabolisme.

bentuk bakteri

Identifikasi bakteri dengan tes biokimia

Ini adalah salah satu metode yang banyak digunakan dan lebih penting.

 Uji fermentasi gula: Bakteri ditanam dalam media gula.

 Tes susu lakmus: Ketika bakteri tumbuh di media ini, mungkin ada produksi asam atau

basa atau bahkan tidak ada perubahan pH.

 Tes produksi Indole: Bakteri ditanam dalam kultur air pepton. Setelah 48 hingga 96

jam, inkubasi pada suhu 37 ° C, diperiksa apakah ada warna merah. Warna merah

menunjukkan produksi indol dari asam amino typtophane. Reagen yang digunakan

disebut sebagai reagen kovac.

 Tes Metil Merah: Bakteri ditanam dalam medium glukosa fosfat pada suhu 30 ° C

selama lima hari. Kemudian beberapa tetes 0,04% metil merah ditambahkan dan
 dicampur untuk mengamati perubahan warna. Warna merah menunjukkan positif

sedangkan warna kuning menunjukkan tes negatif untuk bakteri fermentasi glukosa.

 Tes pemanfaatan sitrat: Tes ini membantu mengidentifikasi sebagian besar bakteri

gram negatif usus. Media sitrat pemanfaatannya dilihat dari segi kekeruhan. Jika positif

menunjukkan mikroba tersebut di atas.

Dengan pewarnaan diferensial

Identifikasi tergantung pada pewarnaan bakteri. Dan sebagian besar bakteri dapat

diwarnai dengan pewarnaan spesifik: Bakteri Gram + ve diwarnai oleh Gram satin

sementara bakteri Gram -ve tidak mengambil pewarnaan gram. Bakteri tuberkulosis

dapat diwarnai dengan pewarnaan cepat-asam khusus dan jenis lainnya tidak

mengambil pewarnaan ini.

Metode serologis

di sini identifikasi bakteri dilakukan dengan menggunakan antibodi dan antigen yang

spesifik terhadap bakteri yang dicurigai. Antigen dan antibodi sangat spesifik dan

berikatan dengan satu jenis bakteri.

Dengan analisis protein dan nukleotida

Konstituen seluler seperti kandungan protein, urutan nukleotida dalam DNA

digunakan untuk identifikasi bakteri. Ini membutuhkan metode seperti Polymerase

Chain Reaction (PCR), elektroforesis gel, radio immuno asssay dll.

Identifikasi bakteri diperlukan karena

1. Identifikasi penyakit: Ada baiknya mengetahui jenis infeksi dan penyakit yang

disebabkan oleh individu tersebut. Contoh: Tuberkulosis dapat diidentifikasi dengan

tes pewarnaan asam-cepat untuk mikobakterium. Jadi identifikasi bakteri penting

dalam perawatan kesehatan.

2. Pilih obat yang sesuai: Tidak semua obat (antibiotik) aktif terhadap semua bakteri.

Jadi identifikasi membantu menargetkan bakteri tertentu dengan pilihan obat yang

sesuai. Contoh rifamycin paling cocok untuk tuberkulosis dan tidak dapat dikontrol

oleh antibiotik lain.

3. Evaluasi perkembangan pengobatan: Identifikasi bakteri juga perlu untuk

mengetahui sejauh mana obat ini efektif dan jika pasien dibebaskan dari bakteri

tersebut oleh pengobatan.

Selama perawatan, sampel tubuh pasien berulang kali diperiksa selama pelatihan

untuk melihat apakah ada pemulihan pada pasien. Ini dipastikan dengan melakukan

tes identifikasi untuk bakteri penyebab. Indikasi hasil negatif dalam tes menunjukkan,

ia bebas dari infeksi.

4. Untuk keperluan industri: Ini juga membantu mengisolasi strain bakteri tertentu yang

diperlukan untuk penelitian atau produksi industri lainnya seperti fermentasi dll.

Banyak vitamin (B12), hormon (insulin) dan suplemen diproduksi oleh teknologi rDNA

dengan menggunakan prinsip bioteknologi.

5. Untuk penyimpanan: Beberapa bakteri secara khusus disimpan dengan maksud

untuk kebutuhan masa depan. Identifikasi juga diperlukan untuk menyimpan bakteri

dalam bentuk murni tanpa kontaminasi asing. Bakteri yang disimpan ini dipasok ketika

diperlukan untuk penelitian atau manufaktur industri.

Karena keunggulan di atas, identifikasi bakteri adalah yang paling penting dalam

mikrobiologi.

Tidak seperti virus, bakteri mudah dilacak dengan metode pewarnaan sederhana.

Lebih lanjut dengan menggunakan mikroskop umum kita bahkan dapat melihat

apakah mereka bergerak (motil) atau tidak bergerak, pengelompokan, dll. Identifikasi

bakteri adalah bagian dari diagnosis banyak penyakit dan karenanya merupakan

permintaan yang baik untuk ahli mikrobiologi.