PRAKTIKUM TM-8

BAHAN PENGENCER SEMEN

DOSEN PJ TOPIK PRAKTIKUM:
RABU - 8 APRIL 2020 : PROF DR DRH M AGUS SETIADI
KAMIS – 9 APRIL 2020 : DRH DEDI SETIADI MS

TIM DOSEN
DIVISI REPRODUKSI & KEBIDANAN
DEPT. KLINIK REPRODUKSI DAN PATOLOGI
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
SEMESTER GENAP 2019-2020 ; MAHASISWA FAPET-IPB
 LEARNING OUTCOME

Setelah melaksanakan praktikum ini mahasiswa:

• Mampu menjelaskan jenis bahan pengencer semen
• Mampu menjelaskan fungsi bahan pengencer semen
• Mampu menjelaskan prosedur pembuatan bahan
pengencer
• Mampu merencanakan dan menyiapkan bahan dan alat
pembuatan bahan pengencer yang menggunakan air susu
dan kuning telur
 PENDAHULUAN
• Bahan pengencer diperlukan sebagai media pengawetan sementara setelah
penampungan spermatozoa yang berkualitas baik sehingga daya fertilisasinya dapat
optimal.
• Larutan pengencer harus dapat memenuhi kebutuhan fisik maupun kimiawi
spermatozoa.
• Larutan semen dapat diproses lebih lanjut menjadi semen cair dan semen beku untuk
keperluan inseminasi buatan pada hewan.
• Bahan pengencer dasar yang biasa digunakan adalah: susu segar, susu skim, natrium-
sitrat kuning telur dan air kelapa kuning telur.
• Walaupn sudah banyak penelitian terkait bahan pengencer semen yang dilakukan untuk
beragam hewan, dalam praktikum ini bahan pengencer dasar yang akan dipraktekan
pembuatannya.
FUNGSI PENGENCER BAHAN PENGENCER SEMEN

1.Zat makanan spermatozoa

2.Melindungi spermatozoa terhadap cold shock
3.Menyediakan penyanggah / buffer
4.Mempertahankan tekanan osmotic
5.Mencegah pertumbuhan kuman
6.Memperbanyak Volume
 SYARAT-SYARAT PENGENCER

1. Murah, mudah & praktis dibuat, dengan daya

preservasi tinggi
2. Tidak toksik (bersifat racun & merusak) sperma dan
saluran reproduksi betina
3. mempertahankan viabilitas (hidup) spermatozoa dan
tidak membatasi daya fertilisasi sperma
4. Memungkinkan evaluasi semen sesudah
pengenceran
JENIS-JENIS BAHAN PENGENCER
1. Air susu (sapi) segar
2. Air susu skim
3. Sitrat - kuning telur
4. Sitrat fruktosa kuning telur
5. Air kelapa - kuning telur
6. Tris-kuning telur
 TUJUAN PRAKTIKUM
• Mahasiswa mengetahui jenis & fungsi bahan pengencer semen yang
dipergunakan
• Mahasiswa paham bahan, alat dan prosedur pembuatan bahan
pengencer dengan kuning telur dan air susu
BAHAN PENGENCER AIR SUSU
SAPI & SUSU SKIM 8-10%
 BAHAN – ALAT – PROSEDUR KERJA :
Penyiapan Bahan Pengencer Air Susu Segar
BAHAN ALAT

• Susu sapi segar • Gelas Elenmeyer ; Gelas Ukur ; Gelas pengaduk

• Kapas • Corong , pipet , termometer
• Kertas saring • Water bath atau Bunsen/Kompor; Panci ;

PROSEDUR KERJA
• Air susu sapi segar dipindahkan ke dalam bejana steril lainnya melalui proses penyaringan dengan kapas melalui
corong
• Tuangkan sebanyak 50 – 100 ml air susu sapi ke dalam tabung Elenmeyer, tutup dengan aluminum foil, diberi
termometer
• Panaskan air susu tersebut secara tidak langsung ( gunangan penangas air dengan memasukan elenmeyer tsb kedalam
bejana lain yang berisi air, Gambar 1)
• Setelah suhu mencapai 92o C, maka kecilkan api (bila memakai kompor/bunsen), pertahankan pada suhu ini selama
10 menit
• Dinginkan air susu dengan air kran yang mengaliri bejana elenmeyer dalam posisi miring sampai suhu mencapai 20o -
27oC atau 32oC sesuai dengan suhu semen yang diencerkan (Gambar 1)
 BAHAN – ALAT – PROSEDUR KERJA :
Penyiapan Bahan Pengencer Susu Skim 8-10 %
BAHAN ALAT
• Timbangan ; kertas timbang ; sudip, kuas
• Susu skim pembersih timbangan
• Kapas • Gelas Elenmeyer ; Gelas Ukur ; Gelas pengaduk;
• Kertas saring Corong gelas ; Pipet
• Kapas
• Water bath atau Bunsen/Kompor; Panci
PROSEDUR KERJA
• Susu skim dalam bentuk bubuk => perlu penimbangan
• Timbang sebanyak 8 - 10 gram susu skim untuk membuat larutan 8-10% air susu
• Masukan bubuk susu skim ke dalam tabung elenmeyer
• Tambahkan aquadest sampai 100 ml, aduk dengan tongkat pengaduk sampai larut
• Selanjutnya diproses seperti pada proses susu segar
 • Air susu sapi segar
• Larutan susu skim 8-10 % Susu
kapas

Larutan susu
• skim:
• Timbang susu skim 8-10 g
• Masukan dalam tabung
Erlenmeyer + Aquadestilata
sampai 100 ml
• Homogenkan (aduk
dengan gelas kaca)
DIPANASKAN DALAM PENANGAS AIR BERSUHU
92-98oC SELAMA 10 MENIT

DINGINKAN (➔ 32oC) Buang kepala susu (lemak ) dari air susu segar

GAMBAR 1. SKEMA PROSEDUR KERJA PENYIAPAN BAHAN PENGENCER

AIR SUSU SAPI SEGAR DAN SUSU SKIM
 BAHAN PENGENCER KUNING
1)
TELUR & NATRIUM SITRAT 2,9%
2)
ATAU AIR KELAPA
 FORMULA LARUTAN BAHAN PENGENCER DENGAN KUNING TELUR

SITRAT KUNING TELUR TRIS KUNING TELUR

• Sitrat Buffer A ( untuk praktikum) • BUFFER TRIS

• Na Sitrat (gr) 2.9 • Tris Hydroxymethyl
• aquadest ad (mL) 100 aminomethane (g) 3.028
• Fruktosa (g) 1.25
• Sitrat Fruktosa Buffer B • Asam sitrat (g) 1.7
• Na Sitrat (gr) 2.32 • aquadest ad (mL) 100
• Fruktosa (gr) 1.25
• aquadest ad (mL) 100
 BAHAN – ALAT – PROSEDUR KERJA :
Penyiapan Bahan Pengencer dengan kuning telur (KT)
PROSEDUR KERJA – Lihat gambar 2.
PENYIAPAN KUNING TELUR
1. Bersihkan telur ayam ; disinfektan dengan alkohol 70%
2. Pecahkan telur secara perlahan di bagian yang runcing dengan pinset yang aseptik (disinfektan alcohol 70%).
3. Buat lubang dengan diameter ± 2 cm, keluarkan putih telur; jika hampir habis, perbesar lubang sampai cukup besar
untuk mengeluarkan kuning telurnya.
4. Keluarkan kuning telur yang masih terbungkus selaput vitelin (tidak pecah) dan letakkan diatas kertas saring
5. Gulir-gulirkan kuning telur dengan perlahan diatas kertas saring.
6. Bila masih belum kering, pindahkan kuning telur pada kertas saring yang baru dengan prosedur yang sama pada butir
5. sampai putih telur habis dan tersisa hanya kuning telur yang terbungkus vitelin dan benang khalaza
7. Toreh selaput vitelin dan keluarkan kuning telurnya ke dalam gelas ukur atau gelas piala
- kuning telur dijatuhkan langsung ke dasar gelas agar mudah menghitung volumenya (TIDAK KENA SISI
GELAS UKUR)
- jangan biarkan selaput vitelin dan khalaza masuk ke dalam gelas.

PENTING : RASIO KUNING TELUR : AIR KELAPA ATAU NATRIUM SITRAT 2,9% = 1 : 4
 2&3 4
1 •—
•— —
—
—
—

—
—

—
—

—
—

—
—
—
—

—
—
5&6 7

Gambar 2. Cara penyiapan kuning telur

(keterangan angka lihat prosedur kerja diatas)

BUFFER SITRAT atau AIR KELAPA : KUNING TELUR = 4 : 1

 BAHAN – ALAT – PROSEDUR KERJA :
Penyiapan Bahan Pengencer (BP) dengan kuning telur (KT)
Natrium Sitrat 2,9 % – Kuning Telur
BAHAN ALAT
• Air kelapa Timbangan; Kertas timbang; Sudip
• Natrium sitrat Gelas Ukur; Corong; Gelas pengaduk
• Telur ayam ; Kertas saring Elenmeyer ; Pinset
• Alkohol 70% ; kertas tisu
PROSEDUR KERJA
Persiapan larutan Natrium sitrat 2,9%: Persiapan kuning telur: lihat prosedur diatas
Siapkan alat timbang elektrik digital
Hidupkan “power” timbangan, tera timbangan dengan kertas Pembuatan 100 mL BP NaSitrat 2,9% dan KT
timbang diatasnya • Tuangkan 20 ml kuning telur kedalam gelas ukur dengan
Ambil dan Timbang natirum sitrat sebanyak 2,9 gram hati-hati secara tegak lurus sesuai volume yang telah
Siapkan Gelas ukur volume 100 ml dihitung, HARUS tidak ada yang kena pada dinding gelas
Tuangkan NaSitrat 2,9% kedalam gelas ukur ukur
Larutkan dengan aquadest sampai100 ml , aduk sampai homogen
• Tambahkan larutan penyanggah sitrat kedalam gelas
Membuat 50 ml lar. Natrium sitrat 2,9 %: larutkan 1,45 gram ukur sampai volume 100 ml, sambil diaduk perlahan
Nasitrat dalam Aquadest sampai 50 ml. • Aduk campuran tersebut hingga homogen
 BAHAN – ALAT – PROSEDUR KERJA :
Penyiapan Bahan Pengencer (BP) dengan kuning telur (KT)
AIR KELAPA - KUNING TELUR
BAHAN ALAT
Kelapa muda ; Telur ayam Untuk pengambilan air kelapa: jarum suntik + spoit 50 ml
Kertas saring (steril)
Alkohol 70% ; Kertas Tisue Untuk pemecahan kuning telur : Pinset

PROSEDUR KERJA
Air kelapa muda disedot dengan spoit steril (cari titik mata pada kelapa, sisi yang lunak) dan masukan ke
dalam gelas ukur
Persiapkan kuning telur seperti diatas
Contoh membuat 100 ml BP air kelapa kuning telur ,
- Tuangkan 20 ml kuning telur kedalam gelas ukur dengan hati-hati secara tegak lurus sesuai volume
yang telah dihitung, HARUS tidak ada yang kena pada dinding gelas ukur
- Tambahkan air kelapa kedalam gelas ukur berisi kuning telur sampai volume 100 ml, sambil diaduk
perlahan => Aduk campuran tersebut hingga homogen
 PELAKSANAAN PRAKTIKUM
• Pelajari materi topik praktikum 8 – Bahan Pengencer Semen
• Untuk laporan jawablah pertanyaan dibawah ini:
1. Sebutkan 4 bahan pengencer semen yang dipelajari penyiapannya
dalam topik 8 ini?
2. Buatlah dalam bentuk tabel, bahan pengencer apa yang biasanya
dipakai untuk hewan Sapi, domba, kuda, babi dan ayam ? sebutkan
daftar pustakanya
3. Jelaskan fungsi dan syarat bahan pengencer !
4. Jelaskan dengan lengkap bahan, alat dan prosedur pembuatan bahan
pengencer dengan kuning telur dan air susu
5. Buatlah perencanaan pembuatan 250 ml bahan pengencer:
• Natrium sitrat – Kuning telur
• Susu skim 10 %
 LAPORAN PRAKTIKUM TOPIK-8
• LAPORAN INDIVIDUAL
• DITULIS DENGAN KOMPUTER DENGAN FORMAT DOC:
▪ COVER SEPERTI BIASANYA
▪ MENJAWAB PERTANYAAN YANG DIBERIKAN
▪ Nama file: nama depan nim-IN atau IP-tpk8
▪ Contoh : Irna D24170016-IN-tpk8
• LAPORAN DIKUMPULKAN SELAMBATNYA PADA JAM 16.00, 1 HARI
SEBELUM PELAKSANAAN PRAKTIKUM BERIKUTNYA
• LAPORAN DIKIRIMKAN KE ALAMAT EMAIL YANG AKAN
DIBERITAHUKAN KEMUDIAN VIA LINE
 SAMPAI JUMPA
DI PRAKTIKUM DARING TOPIK - 9
PENGOLAHAN SEMEN CAIR