REVIEW JURNAL

“Design, Synthesis, Characterization, QSAR, Docking,

Anti-inflammatory and Analgesic Evaluation of Some New
Phthalazinediones”

Disusun oleh :
Anggie Fuji Lestari 12017007
Farmasi A

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN PRIMA INDONESIA

JURUSAN SARJANA FARMASI
BEKASI
2020
 BAB I
PENDAHULUAN

Obat antiinflamasi non-steroid (NSAID) mengurangi rasa sakit secara

signifikan pada pasien dengan artritis yang menghambat siklooksigenase (COX).
Selain itu, sebagian besar NSAID memblokir 2 siklooksigenase yang berbeda,
COX-1 dan COX-2. Jadi penggunaan klinis jangka panjang NSAID dikaitkan
dengan efek samping perdarahan gastrointestinal karena mereka akan memblokir
enzim COX-1, yang melindungi selaput lambung dari asam. Oleh karena itu,
penemuan obat antiinflamasi baru yang lebih aman, yang menghambat COX-2
tetapi tidak COX-1, muncul sebagai target untuk area penelitian tersebut.
Pengembangan inhibitor COX-2 baru berdasarkan percobaan dan
kesalahan penyaringan farmakologis beberapa senyawa sangat mahal, memakan
waktu dan membutuhkan prosedur yang panjang, sehingga kuantifikasi kimiawi
awal suatu senyawa akan lebih ekonomis untuk biaya dan waktu. Dengan
demikian, persamaan HKSA telah digunakan untuk mengembangkan obat baru.
Program kualifikasi kimia (HKSA) ini bergantung pada kuantifikasi sifat
fisikokimia, yang memfasilitasi selektivitas tinggi terhadap COX-2. Pengenalan
grafis komputer mengubah dan merevolusi bidang kimia obat sehingga kebaikan
desain obat rasional dan ilmiah sekarang layak.
Studi mengungkapkan bahwa gugus Phthalazine adalah perancah lazim
dalam sejumlah molekul sintetis dan yang terjadi secara alami dengan aktivitas
biologis yang menawan seperti antikonvulsan, kardiotonik, antibakteri, analgesik,
antiinflamasi, dan aktivitas anti-mikroba. Lebih jauh, Phthalazines semakin
menarik perhatian kami karena fungsionalisasi yang mudah di berbagai posisi
cincin, yang menjadikannya senyawa sintetis yang menarik untuk merancang dan
mengembangkan obat phthalazine baru di masa depan. Dalam studi saat ini, kami
menerapkan QSAR untuk prediksi phthalazinediones baru yang menggabungkan
bagian thioamide.

2
 BAB II
METODE

2.1. Bahan
Thiosemicarbazide, 4-phenylthiosemicabazide, 4-ethylthiosemicarbazide,
4-allylthiosemicabazide, 4- (pyridin-2-yl) thiosemicarbazide dan 4-
thiocarbonylhydrazide

2.2. Instrumentasi
Titik lebur dalam °C (tidak dikoreksi) dan diukur pada peralatan titik lebur
listrik Gallenkamp. Spektra IR (KBr) dilakukan pada Mattson 5000 FTIR
Spectrophotometer. Spektra H-NMR dan C-NMR diperoleh pada
spektrofotometer Bruker masing-masing pada 400 dan 100 MHz, menggunakan
tetramethylsilane sebagai referensi internal dan DMSO-d6 sebagai pelarut dan
diukur. Spektrum massa direkam pada GCMS-QP 1000 EX Shimadzu Jepang
(Spektrometer Gas ChromatographyMass). Analisis unsur (C dan H) diukur,
hasilnya baik dengan nilai yang dihitung. Dilakukan analisa aktivitas biologis.

2.3. Prosedur Umum untuk Sintesis Thioamides 10-15

Larutan dibenzobarallene(8,28g, 30mmol) dan thiosemicarbazide(2.73g,
30 mmol), 4-phenylthiosemicabazide (5.01g, 30 mmol), 4-ethylthiosemicarbazide
(3.6 g, 30 mmol), 4-allylthiosemicabazide(3,93g, 30mmol), 4-(pyridin-2-yl)
thiosemicarbazide(5,04g, 30mmol) atau 4-thiocarbonylhydrazide (3,18g, 30mmol)
dalam dimethylformamide(30 mL) direfluks selama 10 jam. Campuran reaksi
dituangkan dalam air dingin es dan produk yang terbentuk disaring, dikeringkan
dan dikristalisasi dari benzena-etanol untuk menghasilkan senyawa 10, 11, 12, 13,
14 dan 15 masing-masing.
2.3.1. 1,4-Dioxo-3,4,4e,5,10,10a-hexahydro-1H5,10-benzenobenzo-
[g]phthalazin-2-yl-thioamide (10)
2.3.2. 1,4-Dioxo-3,4,4e,5,10,10a-hexahydro-1H5,10-benzenobenzo-
[g]phthalazin-2-yl-N-phenylthioamide (11)

3
 2.3.3. 1,4-Dioxo-3,4,4e,5,10,10a-hexahydro-1H5,10-benzeno-benzo[g]-
phthalazin-2-yl-N-ethylthioamide (12)
2.3.4. 1,4-Dioxo-3,4,4e,5,10,10a-hexahydro-1H5,10-benzeno-benzo[g]-
phthalazin-2-yl-N-allylthioamide (13)
2.3.5. 1,4-Dioxo-3,4,4e, 5,10,10a-hexahydro-1H5,10-benzeno-benzo[g]-
phthalazin-2-yl-Npyridin-2-ylthioamide (14)
2.3.6. Bis(1,4-dioxo-3,4,4e,5,10,10a-hexahydro1H-5,10-benzenobenzo[g]
phthalazin-2-yl thiocarbonyl (15)

2.4. Studi Farmakologis Studi

Anti-inflamasi dilakukan menggunakan metode edema kaki belakang tikus
yang diinduksi karagenan pada tikus Sprague-Dawley (200-250 g). Hewan-hewan
itu ditempatkan dan dibagi menjadi dua kelompok utama [kontrol non rematik
(n=6) dan kelompok artritis (n=36)]. Senyawa diberikan secara oral melalui
tabung lambung sekali sehari selama 7 hari dosis dihitung sesuai dengan tabel.
Senyawa yang digunakan tidak larut dalam air, sehingga dibuat suspensi dalam
0,5% natrium karboksimetil selulosa [SCMC] mg per 200 g berat tikus. Penilaian
aktivitas analgesik dari obat yang diuji ditentukan oleh pengukuran toleransi
tekanan pada kaki kanan di hari ke 7 pemberian obat (52 hari setelah selesai
Injeksi ajuvan Freund). Tekanan diterapkan oleh analgesimeter pada alas tikus
kaki kanan.

2.5. Hubungan Struktur-Aktivitas Kuantitatif (HKSA)

Sifat fisikokimia dari senyawa kimia yang diteliti diperoleh dari program
hyperchem versi 8.1 pada metode teoritis semi-empiris menggunakan metode
AM1. Deskriptor ini termasuk massa, energi total, energi ikat, panas
pembentukan, orbital molekul tinggi, orbital molekul rendah tidak dihuni,
perbedaan antara HOMO dan LUMO, momen dipol bersih DM. Persamaan
statistik multiregresi didasarkan pada data deskriptor kimia yang diperoleh.

2.6. Docking Molekul

Dalam penelitian ini, docking phthalazine terhadap COX-2 telah dilakukan

4
menggunakan MVD (program Molegro). Biasanya, untuk mendapatkan wawasan
tentang ikatan kimia dan penghambatan COX-2, ditentukan struktur kristal
kompleks COX-2 dengan piroxicam dan kompleks COX-2 diselesaikan dengan
penggantian molekul dan disempurnakan menjadi kerja R / bebas dari 0,202
/0.231 dan resolusi masing-masing adalah 2,45, struktur kristal COX-2 ditahan di
Bank data Protein (PDB)

5
 BAB III
HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1. Kimia
Skema.1 menjelaskan sintesis molekul target. Dibenzobarallene(3)
disintesis sesuai dengan metode melalui refluks antrasena(1) dengan maleat
anhidrida(2) dalam pelarut xilena. Kondensasi 3 dengan Thiosemicarbazide(4), 4-
phenylthiosemicar-bazide(5), 4-ethylthiosemicarbazide(6), 4-allylth-
iosemicabazide(7), 4-piridin-2-ylthiosemicabazide(8) atau
thiocarbonylhydrazide(9) di DMF diberikan, Phthalazinediones 10, 11, 12, 13, 14
dan 15. Senyawa 10-15 dibuat oleh data analitik dan spekulasi (IR, 1HNMR dan
MS, cf Bagian Eksperimental).

Skema 1. Pembentukan dari Phthalazinedions 10-15.

6
3.2. Hubungan Struktur-Aktivitas Kuantitatif (HKSA)

Gbr 1. Struktur derivatif phthalazine 16-34 dan 35 (indometasin) yang dipostilkan

sebagai agen antiiflammatory

Persamaan QSAR telah dielaborasi untuk memilih turunan

phthalazinedione dari aktivitas matory anti-inflamasi yang tinggi. Turunan
phthalazine 16-34 (Gbr. 1) merupakan turunan baru dari 10-15 (Skema 1) dan
indometasin 35 (Gbr. 1) disaring untuk aktivitas anti-inflamasi mereka,
memberikan database di mana aktivitas anti-inflamasi pada tikus ( penghambatan

7
edema) untuk dua puluh turunan phthalazine diukur. Tabel 2 mewakili aktivitas
biologis pada konsentrasi phthalazine yang diselidiki (2 mg / 100 g untuk setiap
tikus). Sifat fisikokimia (deskriptor) dari senyawa kimia yang diteliti (Gambar 1)
diperoleh dengan menggunakan Hyperchem versi 8.1. Secara umum, sebagian
besar modifikasi struktural dari sistem induk yang telah dilakukan untuk
mengoptimalkan aktivitas biologis obat turunan phthalazine dapat dilihat sebagai
variasi dari pola substitusi pada posisi 1, 2 dan 4, yaitu substitusi pola bagian 1, 2-
diazine dari sistem bicyclic. Deskriptor ini meliputi volume, polarisasi, energi
hyderation, massa, energi ikat, total energi, HUMO dan LUMO, ΔH, dan momen
dipol pada arah XY dmx dan dmy, dengan metode perhitungan AM1 semi-empiris
(Tabel 3). QSAR tergantung pada deskriptor kimia yang dikirim dari Tabel 3.
Selanjutnya, persamaan (1) telah diperoleh dari data ini menggunakan perhitungan
statistik multi-regresi dengan mengedipkan mata program 4.65. Aktivitas anti-
inflamasi = -0.1658844 VOLUME +0.6034567 HYD. E.-0.4811556 Kemampuan
Polari + 0,4982975 Massa + 0,6457734 Total Energi - 0,0191501 Energi Binding
- 0,0545701 ΔH + 3,6251524 HOMO - 36,20572 LUMO 0,5111692 Dmy -
2,935804 Dmz + 50,4353 Persamaan (1) diukur dengan perhitungan melalui
perhitungan -kegiatan peradangan pada tikus sebagai% penghambatan edema.
Data yang diperoleh dibandingkan dengan nilai eksperimental [11, 17], (Tabel 2).
Koefisien regresi (R = 0.9217) dan derajat kebebasan (F = 8.5648 dan P = 0.003)
mencerminkan validitas dari persamaan yang diajukan. Deskriptor paling penting
yang mempengaruhi persentase aktivitas antiinflamasi adalah Volume (nilai-t <-
12,9 dan nilai-p <0,001). Dari perhitungan, senyawa 10, 11, 12 dan 13 lebih kuat
daripada senyawa 16-35. Di sisi lain, senyawa 15 kurang manjur.

8
3.3 Docking

Tabel 4. Pengaruh piroksikam dan senyawa 10 sampai 14 dalam efek analgesik, dan peradangan
pada perangsang model rheumatoid arthritis pada tikus (M ± S. E), n jumlah tikus = 6.
 SCMC 0.5% sodium carboxymethyl cellulose
 ¥ P < 0.001 vs. non-arthritic control. Ɵ P < 0.01 vs. arthritic control. Ø P < 0.01 vs. piroxicam

Struktur kristal COX-2 terikat ke phthalazinediones 10-15 disajikan pada

Tabel 4 dan Gambar. (2-8). Dengan membandingkan hasil yang ditunjukkan pada
Tabel 4 dan Gambar. (2-8), kami menemukan bahwa (i) sebagian besar senyawa
yang disintesis berinteraksi dengan orientasi pengikatan yang sama di dalam situs
aktif COX-2, (ii) Senyawa 10, 11 dan 12 mengikat ke situs aktif enzim melalui
atom belerang dari grup SH, (iii) grup SH dalam senyawa 10, 11 dan 12
membentuk dua ikatan hidrogen dengan Ser 471 & Tyr122 dan Thr 62 dan Arg
61, secara berurutan, (iv) Senyawa 14 adalah paling berlabuh daripada senyawa
10, 11, 12 dan piroksikam, yang mungkin disebabkan oleh pembentukan tiga
ikatan hidrogen, (v) grup SH dalam senyawa 14 membentuk ikatan hidrogen
dengan Asn43, selanjutnya atom N-3 dan oksigen (C4 = O) dari gugus phthalazine
membentuk dua ikatan hidrogen dengan Ser 471, masing-masing dan (vi) ligan
adalah 13 dan 15 tidak terhubung oleh ikatan kovalen. Selain itu, perhitungan
potensial elektrostatik dari senyawa 14 diselidiki yang menunjukkan bahwa
permukaan di sepanjang saluran ini sangat positif, memberikan lingkungan yang
menguntungkan bagi yang lebih hidrofilik, di mana potensi elektrostatik yang kuat
"mengarahkan" yang bermuatan positif.

9
3.4 Kegiatan Farmakologis
3.4.1. Pengukuran Inflamasi Sendi
Aktivitas anti-inflamasi dan efek nalgesik dari turunan Phthalazine
dievaluasi dengan uji kolagen II-adjuvant yang diinduksi adjuvant pada
edema paw pada tikus. Data pada Tabel 5, mengungkapkan bahwa senyawa
14 menunjukkan hasil yang lebih baik dalam pengurangan indeks reumatoid
dibandingkan semua senyawa lainnya. Di sisi lain, senyawa ketebalan
edema (14) menunjukkan hasil yang lebih baik daripada piroksikam
sebagaimana ditentukan oleh.
3.4.2. Efek Analgesik Efek
Analgesik dari senyawa yang disintesis ditentukan oleh toleransi
nyeri. Data pada Tabel 5 menunjukkan bahwa senyawa 14 menunjukkan
hasil yang lebih baik daripada Piroxicam. Sedangkan, dalam penilaian
nyeri, senyawa 14, 10, 11 dan 12 lebih efektif daripada Piroxicam. Urutan
kegiatan adalah sebagai berikut 14> 12> 10> 11> 15.

10
 BAB IV
KESIMPULAN

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mensintesis dan menyelidiki

aktivitas antiinflamasi dan analgesik dari beberapa turunan Phthalazinedione baru
dengan harapan menemukan senyawa baru. memiliki aktivitas antiinflamasi dan
analgesik. Seri novel turunan Phthalazinedione dikarakterisasi dengan analisis
unsur dan 1H. NMR, 13C NMR, spektrometri massa, analisis studi IR. Senyawa
yang dilaporkan dievaluasi untuk aktivitas anti-inflamasi dan analgesik mereka.
Sifat anti-inflamasi dan analgesik in vivo diselidiki dengan metode ologi standar.
Mengenai hubungan antara struktur perancah heterosiklik dan aktivitas biologis
yang terdeteksi, itu menunjukkan aktivitas biologis yang bervariasi. Mungkin,
dalam kasus ini, kehadiran substituen yang berbeda menyebabkan perubahan
aktivitas tertentu. SAR menunjukkan bahwa Phthalazinedione carbothioamide
yang memiliki cincin piridin tambahan muncul sebagai senyawa timbal dalam
studi antiinflamasi dan analgesik di antara semua senyawa Phthalazinedione yang
disintesis. Ini konsisten dengan apa yang telah diprediksi oleh persamaan 1 dalam
penelitian ini.

11