ACARA
GOL/KEL : Agroteknologi
HARI/JAM :
ASISTEN :
CO-ASS :
Bahan : 1. Kemikalia
2. Aquades Steril
3. Aluminium foil
4. Label
B. Media Tanam
Alat : 1. Autoklaf 6. Spet
2. Timbangan Analitik 7. Gelas Ukur
3. Spatel 8. Erlenmeyer
4. Botol-botol Kultur 9. pHMeter/pHstik
5. Pengaduk Kaca
STOK MAKRO:
KNO3 1.9 10 19
400 ml 40 ml/L
CaCl2.2H2O 0.44 10 4.4
STOK MIKRO:
KI 0.00083 10 0.0083
STOK BESI:
Mio inositol
⅀ yang Vol Larutan Pelarut Pengambilan Pengambilan
Larutan Stok ditimbang Stok (ml) Stok (ml/L) untuk buat
media (100ml)
ZPT:
Alkohol
NAA 1 ppm 0.01 100 96%/KOH… 10 1
…HCl
BAP 1 ppm 0.01 100 10 1
…HCl..
BAP 1 ppm 0.01 100 10 1
…Alkohol
2,4D 1 ppm 0.01 100 96%/ KOH… 10 1
Kebutuhan Pengambilan
Tiap 1 Liter untuk buat
SUKROSA/GULA media (100ml)
pH 6 6
B. PEMBUATAN MEDIA MS
Bahan Kebutuhan Dalam Dalam Membuat
1 liter Media Media……….ml
Dibutuhkan :
STOK MAKRO:
NH4NO3 40 4 ml/100 ml
KNO3 40 4 ml/100 ml
CaCl2.2H2O 40 4 ml/100 ml
MgSO4.7H2O 40 4 ml/100 ml
KH2PO4 40 4 ml/100 ml
STOK MIKRO:
KI 10 1 ml/100 ml
H3BO3 10 1 ml/100 ml
Mn SO4.4H2O 10 1 ml/100 ml
ZnSO4.7H2O 10 1 ml/100 ml
Na2MoO4.2H2O 10 1 ml/100 ml
CuSO4.5H2O 10 1 ml/100 ml
CoCl2.6H2O 10 1 ml/100 ml
STOK BESI:
NaEDTA 10 1 ml/100 ml
FeSO4.7H2O 10 1 ml/100 ml
SUPLEMEN ORGANIK:
Glysine 20 2 ml/100 ml
ZPT:
SUKROSA/GULA PASIR 30 30
pH 7 7
AQUADES 100 ml 10 ml
C. MEDIA KOMBINASI
Agar 7g 0,7 ml
pH 6 6
Perhitungan:
Pembuatan Media MS
Kebutuhan dalam 100 ml media
Kebutuhan 1liter
× Stok
Kebutuhan yang diinginkan
40
Stok Makro = ×10
100
= 4 ml
10
Stok Mikro = ×10
100
= 1 ml
10
Stok Besi = ×10
100
= 1 ml
20
Suplemen Organik = ×10
100
= 2 ml
ZPT
10
NAA 1 ppm = ×10
100
= 1 ml/100 ml
10
BAP 1 ppm = ×10
100
= 1 ml/100 ml
30
BAP 3 ppm = ×10
100
= 3 ml/100 ml
20
2,4D 2 ppm = ×10
100
= 2 ml/100 ml
Media Kombinasi
150 g
Ekstrak Pisang / Kentang =
10 l
g
= 15
l
150 ml
Air Kelapa =
10 l
ml
= 15
l
3 g
Pupuk Daun =
10 l
g
= 0,3
l
20
Sukrosa / gula pasir =
10
= 0,2 gr
7
Agar =
10
= 0,7 gr
PEMBAHASAN:
Media tanam merupakan tempat tumbuhnya eksplan dalam kultur in vitro. Media
tanam berfungsi seperti tanah dalam wadah pot, yaitu menyediakan mineral, sumber karbon,
vitamin maupun zat pengatur tumbuh yang diperlukan eksplan untuk tumbuh dan
berdiferensiasi menjadi tanaman utuh atau plantlet. Sumber karbon, vitamin maupun zat
pengatur tumbuh perlu ditambahkan dalam media kultur in vitro, karena eksplan hampir tidak
mengalami fotosintesis, sehingga perlu disediakan nutrisi yang siap digunakan oleh eksplan
untuk metabolisme. Media tanam yang umum digunakan dalam kultur in vitro adalah media
yang dibuat oleh Murashige dan Skoog atau biasa disebut media MS. Media ini mengandung
senyawa nitrogen dalam konsentrasi tinggi dan sesuai untuk hampir semua jenis tanaman
yang dikulturkan. Media tanam dapat berupa media padat maupun cair. Media padat berarti
ditambahkan agar sebagai pemadat media tersebut, sedangkan media cair tidak menggunakan
agar sebagai pemadat.
Media MS (Murashige And Skoog) merupakan jenis media yang digunakan untuk
perbanyakan tanaman seperti kentang dan pisang. Setiap jenis tanaman yang ditanam atau
dibiakkan dengan menggunakan jenis media MS mempunyai komposisiyang sedikit berbeda
yaitu pada penggunaan bahan hormon tumbuh.
Media yang digunakan biasanya terdiri dari garam mineral, vitamin, dan hormone.Selain itu,
diperlukan juga bahan tambahan seperti agar, gula, dan lain-lain.Zat pengatur tumbuh
(hormon) yang ditambahkan juga bervariasi, baik jenisnya maupun jumlahnya tergantung
dengan tujuan dari percobaan yang dilakukan. Media yang sudah jadi ditempatkan pada botol
kultur dan media yang digunakan juga harus steril dengan cara memanaskannya dengan
autoklaf.
Zat pengatur tumbuh yang diberikan dalam media MS adalah auksin (IAA) dan sitokinin
(kinetin). Kedua hormone ini mempengaruhi pertumbuhan akar, tunas, dan kalus berdasarkan
keseimbangan konsentrasi dari kedua ZPT tersebut yang terkandung pada media. Pada
konsentrasi yang hamper tepat sama antara auksin dan sitokinin lebih besar dari auksin akan
menginduksi tunas, sedangkan konsentrasi auksin lebih besar dari sitokinin akan
menginduksi perakaran yang lebih cepat.
KESIMPULAN:
DAFTAR PUSTAKA:
(Cara Pembuatan Larutan Stok, Media MS, Stok Hara Mikro Kultur Jaringan –
Unsurtani.Com, n.d.)Cara Pembuatan Larutan Stok, Media MS, Stok Hara Mikro
Kultur Jaringan – Unsurtani.com. (n.d.). Retrieved March 31, 2021, from
https://unsurtani.com/2017/01/cara-pembuatan-larutan-stok-media-ms-stok-hara-mikro-
kultur-jaringan
PEMBUATAN MEDIUM MURASHIGE DAN SKOOG (MS) (1962) – Site Title. (n.d.).
Retrieved March 31, 2021, from
https://kulturjaringanblog.wordpress.com/2016/10/28/pembuatan-medium-murashige-
dan-skoog-ms-1962/