ALAT& BAHAN :
Alat :
1. Timbangan Analitik 5. Spatel
2. Cawan timbangan 6. Botol larutan stok
3. Hot Plate Magnetic Stirer 7. Beaker Galss/Erlenmeyer
4. Labu takar/ gelas ukur
Alat :
1. Autoklaf 7. Gelas ukur
2. Timabangan Analitik 8. Erlenmeyer
3. Spatel 9. Ph meter/Ph stik
4. Botol-botol Kultur
5. Pengaduk kaca
6. Spet
A. PEMBUATAN LARUTAN PERSEDIAAN/ STOK
Larutan Stok Konsentrasi Stok ∑ yang Vol Pengambilan
media MS =.....10...x MS Ditimbang Larutan Untuk buat
(g/l) (g) Stok Media (ml/l)
STOK MAKRO:
STOK BESI:
SUPLEMEN
ORGANIK:
Pyridoxine HCl
0.0005 ……10…… ……0.005…
Thiamine HCl
0.0001 ……10…… ……0.001
Nicotinic Acid …200 ml… …20 ml……
0.0005 ……10… ……0.005…
Glysine
0.002 ……10…… ……0.02…
Mio inositol
0.1 .......10........... ..........1......... …200 ml… .......20 ml/L.
Larutan Stok
⅀ yang Vol Larutan Pelarut Pengambilan Pengambilan
ZPT: ditimbang Stok (ml) Stok (ml/L) untuk buat
media (100ml)
NAA 1 ppm
…0.01… …100… Alkohol 10 1
BAP 1 ppm 96%/KOH…
…0.01…. …100.. …HCl 10 1
BAP 1 ppm
…0.01… …100.. …HCl.. 10 1
2,4D1 ppm
…0.01… ….100. …Alkohol 10 1
96%/ KOH…
Kebutuhan Pengambilan
SUKROSA/GULA Tiap 1 Liter untuk buat
media (100ml)
PASIR
30 g/L 3 g/L
pH
6 6
AQUADES
Tepatkan 1L Tepatkan
100ml
B. PEMBUATAN MEDIA MS
NH4NO3 40 4 ml/100 ml
KNO3 40 4 ml/100 ml
CaCl2.2H2O 40 4 ml/100 ml
MgSO4.7H2O 40 4 ml/100 ml
KH2PO4 40 4 ml/100 ml
STOK MIKRO:
KI 10 1 ml/100 ml
H3BO3 10 1 ml/100 ml
Mn SO4.4H2O 10 1 ml/100 ml
ZnSO4.7H2O 10 1 ml/100 ml
Na2MoO4.2H2O 10 1 ml/100 ml
CuSO4.5H2O 10 1 ml/100 ml
CoCl2.6H2O 10 1 ml/100 ml
STOK BESI:
NaEDTA 10 1 ml/100 ml
FeSO4.7H2O 10 1 ml/100 ml
SUPLEMEN ORGANIK:
Glysine 20 2 ml/100 ml
ZPT:
pH 7 7
AQUADES 100 ml 10 ml
C.MEDIA KOMBINASI
Agar 7g 0,7 ml
pH 6 6
Perhitungan:
Pembuatn Media MS
Kebutuhan dalam 100 ml media
Kebutu h an 1liter
× Stok
Kebutu h an yang diinginkan
40 ZPT
Stok Makro = ×10 10
100 ×10
NAA 1 ppm =
= 4 ml 100
= 1 ml/ 100 ml media
10 10
Stok Mikro = × BAP 1 ppm = ×10
100 100
= 1 ml = 1 ml/100 ml media
30
BAP 3 ppm = ×10
10 100
Stok Besi = ×10
100 = 3 ml/ 100 ml media
= 1 ml 20
2,4D 2 ppm = ×10
100
20 = 2 ml/ 100 ml media
Suplemen Organik = ×10
100
= 2ml
Media Kombinasi
150 g
Ekstrak Pisang/ Kentang =
10 l
g
= 15
l
150 ml
Air Kelapa =
10 l
ml
= 15
l
3 g
Pupuk Daun =
10 l
= 0,3
20
Sukrosa/ gula pasir =
10
= 0,2 gr
7
Agar =
10
= 0,7 gr
PEMBAHASAN:
Media tanam merupakan tempat tumbuhnya eksplan dalam kultur Invitro , Media tanam berfungsi
seperti tanah dalam wadah pot yaitu menyediakan mineral,
KESIMPULAN:
Salah satu indikator keberhasilan dalam pembuatan media kultur jaringan tanaman yang baik
adalah tingkat kontaminasi media yang kita buat. Semakin sedikit media yang terkontaminasi
maka semakin baik tingkat keberhasilan kita.Autoklaf merupakan salah satu alat yang penting
dalam pembuatan media kultur jaringan. Autoklaf dapat dipakai untuk membunuh
mikroorganisme seperti bakteri dan cendawan, sehingga media yang kita buat dapat steril dari
mikroorganisme-mikroorganisme tersebut.
DAFTAR PUSTAKA: