LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA

( 17 - KETOSTEROID )

ISRA NUR HIDAYAH

N10120053

KELOMPOK 4 (EMPAT)

BAGIAN BIOKIMIA

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS TADULAKO

2021

i
DAFTAR ISI
 SAMPUL LAPORAN……………………………………………………….. i

DAFTAR ISI……………………………………………………………….... ii

BAB I PENDAHULUAN………………………………………………….... 1
1.1. Latar Belakang……………………………………………………… 1
1.2. Tujuan ………………………………………….………………....... 2

1.3. Prinsip percobaan…………………………………………………… 2

1.4. Manfaat percobaan……………………………………………….…. 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA………………………………..…………… 4
BAB III METODE PERCOBAAN...………..………………………...…….. 7

3.1. Waktu dan Tempat………………………………………………….. 7

3.2. Alat dan Bahan……………………………………………………… 7
3.3. Prosedur…………………………………………………………….. 7
BAB IV HASIL PERCOBAAN...………………………..…………..……… 10
4.1. Tabel Hasil Praktikum…..…………………………………………... 10
4.2. Pengolahan Data……………………………………………………. 10
BAB V PEMBAHASAN ………………..……………………………........... 11
BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN……………….…..………………... 16

6.1. Kesimpulan………………………………………………………….. 16
6.2. Saran………………………………………………………………… 16
DAFTAR PUSTAKA……………………………………….………….……. iii
 ii
BAB I
PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Steroid yang ada dalam urin bisa dibagi menjadi senyawa netral, fenolik, dan
asam. Steroid asam mewakili empedu asam fenolik terutama adalah estrogen.
Steroid netral mengandung metabolit dari testis atau ovarium dan dari adrenal.
Ada empat kelompok senyawa penting yang ada di korteks adrenal yang
menimbulkan steroid netral di urin. Ini adalah zat androgenik, progesteron,
desoksikortikosteron, kortikosteron. Hormon testis, testosteron, adalah prekursor
dari beberapa 17-ketosteroid netral dalam urin. Steroid netral dalam urin dapat
dibagi lagi menjadi fraksi ketonik dan nonketonik. Yang terakhir relatif kecil
dalam jumlah dan biasanya merupakan turunan dari progesteron dan
desoksikortikosteron. Fraksi keton yang lebih penting terdiri dari: Isoandrosterone
from testis, dehydroisoandrosterone dari adrenal korteks, androsterone, dan
steroid kompleks lainnya yang merupakan metabolit dari korteks adrenal dan
testis (Fransisco, 2017).

Prinsip dasar yang mendasari pengujian 17-ketosteroid urin netral tidaklah

rumit. Steroid metabolit dalam urin dengan cepat diubah oleh hidrolisis menjadi
senyawa bebas dengan cara merebus dengan asam anorganik kuat. Steroid
diekstraksi dari urin melalui pelarut organik. Dibeberapa teknik, hidrolisis dan
ekstraksi mungkin dilakukan secara bersamaan. Estrogen dikeluarkan dari ekstrak
dengan mencuci dengan yang lemah alkali. Ekstrak yang tersisa dikeringkan,
dilarutkan alkohol, dan diuji dengan mereaksikannya dengan m-dinitrobenzene.8
Warna merah yang dihasilkan dari reaksi ini dibandingkan dengan warna yang
dihasilkan oleh yang dikenal jumlah dehydroisoandrosterone. Ini menentukan total
17-ketosteroid netral dalam urin. Alih-alih reaksi kimia, uji biologis untuk
aktivitas androgenik dapat diganti; namun, 17-ketosteroid netral termasuk zat itu
bukan androgen, sehingga korelasi langsung antara aktivitas androgenik dan

1
kandungan 17-ketosteroid tidak selalu terbukti. Jika penentuan yang lebih akurat
diperlukan, ekstrak diperlakukan dengan Pereaksi Girard T untuk memisahkan
ketonik dari pecahan nonketonik. Pada individu normal file jumlah bahan
nonketonik tidak cukup untuk membutuhkan prosedur yang rumit ini. Keton total
porsi dapat diukur dengan menggunakan reaksi m-dinitrobenzene, atau dapat
diperlakukan dengan digitonin untuk memisahkan alfa dari senyawa beta.
Androsterone mewakili porsi utama dari alfa 17-ketosteroid yang tidak dapat
diendapkan. Itu komponen utama dari pengendapan digitonin beta 17-ketosteroid
adalah dehydroisoandrosterone, dan itu hanya berasal dari korteks adrenal. Dalam
urin dari individu normal jarang terjadi fraksi beta melebihi 10 persen dari jumlah
total ketosteroid ketonat. Pada pria, hormon testis menimbulkan sekitar seperlima,
dan hormon dari korteks adrenal ke sebagian besar 17- ekskresi ketosteroid. Pada
wanita sebagian besar dari 17- ketosteroid berasal dari hormon korteks adrenal
(Fransisco, 2017).

Peningkatan jumlah 17-ketosteroid dalam urin dapat ditemukan pada penyakit

endokrin tertentu. Itu yang paling penting dan paling umum adalah fungsinya
tumor korteks adrenal. Tumor ini menghasilkan berbagai sindrom klinis yang telah
diklasifikasikan menjadi sindrom adrenogenita, sindrom Cushing, gambaran klinis
campuran yang memiliki gambaran umum dengan yang pertama dua, ekspresi
neoplasma yang terisolasi, feminisasi pada pria dewasa dan jarang pada
anak-anak, tumor tanpa manifestasi endokrin (Fransisco, 2017).

1.2. Tujuan

Untuk mengetahui kadar 17-ketosteroid pada urin yang dapat

mengindikasikan pada kerusakan testis, korteks adrenal, dan adenohipofisis.

1.3. Prinsip Percobaan

2
Netral 17-ketosteroid urin diekskresikan sebagai sulfat dan konjugat
glukuronat. Keduanya dihidrolisis dengan mendidihkannya dalam asam kuat dan
steroid bebas terekstraksi dengan pelarut organik. Ekstrak diberi perlakuan dengan
m-dinitrobenzen yang dengan adanya alkali memberikan warna merah pada
komponen mengandung gugus metilen aktif (Zimmerman reaksi 66). Warna
merah yang diperoleh dengan 17-ketosteroid terlihat tidak banyak dipengaruhi
oleh susbtitusi pada beberapa bagian cincin steroid. Namun, pada prosedur ini
pengembangan karakterisitik diklorometan larut dalm warna merah dengan
absorpsi maksimum pada 520 mm memerlukan nukleus cincin steroid memiliki
gugus hidroksil. 3-,11,-, dan 20-ketosteroid memberikan beberapa warna dengan
alkali m-dinitrobenzena, tetapi sangat kurang dari 17- ketosteroid, dan absorpsi
maksimumnya bukan tepat 520 mm.

1.4. Manfaat Percobaan

Praktikan dapat mengetahui kadar 17-ketosteroid pada urin yang dapat

mengindikasikan pada kerusakan testis, korteks adrenal, dan adenohipofisis.
 3
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

Steroid berperan penting bagi tubuh dalam menjaga keseimbangan garam,

mengendalikan metabolism dan meningkatkan fungsi organ seksual serta
perbedaan fungsi biologis lainnya antara jenis kelamin. Steroid pada tumbuhan
menunjukan efek menurunkan kolesterol dan antikarsinogenik (Maryam, 2020).

Kortikosteroid adalah kelas hormon steroid yang dilepaskan oleh korteks

adrenal, yang meliputi glukokortikoid dan mineralokortikoid 1. Namun, istilah
"kortikosteroid" umumnya digunakan untuk merujuk pada glukokortikoid.
Dinamakan karena efeknya dalam metabolisme karbohidrat, glukokortikoid
mengatur beragam fungsi seluler termasuk perkembangan, homeostasis,
metabolisme, kognisi, dan peradangan 2. Karena tindakan modulator imun yang
mendalam, glukokortikoid adalah salah satu obat yang paling banyak diresepkan
di dunia dan pasar glukokortikoid di seluruh dunia diperkirakan bernilai lebih dari
USD 10 miliar per tahun (Ramamoorthy,2016).
 Kelenjar adrenal terdiri dari korteks dan medula. Korteks menghasilkan
hormon steroid termasuk glukokortikoid, mineralokortikoid, dan androgen
adrenal, dan medula menghasilkan katekolamin, epinefrin, dan norepinefrin.
Artikel singkat ini mengulas fisiologi kelenjar adrenal dan menyoroti relevansi
pemahaman sindrom klinis kelebihan dan kekurangan. Korteks adrenal berperan
dalam steroidogenesis, menghasilkan glukokortikoid, mineralokortikoid, dan
prekursor androgen. Ia memiliki 3 zona fungsional dan histologis yang berbeda:
zona glomerulosa (lapisan paling luar), zona fasciculata (lapisan tengah), dan zona
retikularis (lapisan paling dalam). Setiap lapisan menghasilkan hormon steroid
dari kolesterol prekursor. Namun, hormon steroid spesifik yang diproduksi
berbeda di setiap lapisan karena enzim spesifik zonal. Zona glomerulosa
menghasilkan mineralokortikoid, zona fasciculata menghasilkan glukokortikoid,
dan zona retikularis menghasilkan prekursor androgen (kebanyakan DHEA
dengan beberapa androstenedion) (Dutt,2020).

4
Androgen adrenal utama adalah 17-ketosteroid dehidro-epiandrosteron, walaupun
androstenedion juga disekresi-kan. Turunan 11-hidroksi dari androstenedion dan
17-ketosteroid yang terbentuk dari kortisol dan kortison dengan pemecahan rantai
sisi di hati adalah satu-satunya 17-ketosteroid yang memiliki sebuah gugus =O
atau—OH di posisi 11 (―11-oksi-17-ketosteroid‖). Testosteron juga diubah
menjadi 17-ketosteroid. Karena ekskresi 17-ketosteroid harian pada orang dewasa
normal adalah 15 mg pada pria dan 10 mg pada wanita, sekitar dua pertiga
ketosteroid urine pada pria disekresi oleh adrenal atau dibentuk dari kortisol di
hati, dan sekitar sepertiga berasal dari testis (Barret, 2012).

Sekitar 10% kortisol yang disekresikan diubah di hati menjadi turunan turunan
17-ketosteroid kortisol dan kortison. Ketosteroid sebagian besar mengalami
konjugasi dengan sulfat lalu diekskresikan dalam urine. Terbentuk metabolit lain,
termasuk turunan 20-hidroksi. Terdapat sirkulasi ente-rohepatik untuk
glukokortikoid, dan sekitar 15% kortisol yang disekresikan diekskresikan di tinja.
Metabolisme kortikosteron serupa dengan metabolisme kortisol, kecuali bahwa
 molekul ini tidak membentuk turunan 17-ketosteroid (Barret, 2012).

Sejumlah kecil testosteron dalam darah diubah menjadi estradiol, tetapi

sebagian besar testosteron diubah menjadi 17-ketosteroid, terutama androsteron
dan isomernya etiokolanolon, dan diekskresikan di urine. Sekitar dua pertiga 17-
ketosteroid urine berasal dari adrenal, dan sepertiga berasal dari testis. Walaupun
sebagian besar 17- ketosteroid merupakan androgen lemah (memiliki potensi
testosteron sebesar 20% atau kurang), perlu ditekankan bahwa tidak semua 17-
ketosteroid adalah androgen dan tidak semua androgen adalah 17-ketosteroid.
Etiokolanolon, misalnya, tidak memiliki aktivitas androgenik, dan testosteron itu
sendiri bukan suatu 17-ketosteroid (Barret, 2012).

Pada laki-laki prepubertas, tumor adrenal yang bersifat virilisasi ini juga
akan menimbulkan gejala-gejala yang mirip dengan gejala-gejala yang timbul
pada perempuan, disertai dengan pertumbuhan organ seks laki-laki yang cepat,
yang menunjukkan seorang anak berumur 4 tahun pengidap sindrom
adrenogenital. Pada pria dewasa, sifat virilisasi dan sindrom adrenogenital ini

5
biasanya secara sempurna tertutup oleh sifat-sifat virilisasi yang normal akibat
dari testosteron yang disekresi oleh testis. Pada laki-laki dewasa, diagnosis
sindrom adrenogenital ini menjadi sukar ditegakkan. Pada sindrom adrenogenital,
ekskresi 17-ketosteroid (yang berasal dan androgen) dalam urine mungkin akan
meningkat sebanyak 10 sampai 15 kali dari jumlah normalnya. Penemuan ini
dapat digunakan dalam mendiagnosis penyakit (Hall, 2011).

Pada wanita yang kekurangan gizi kadar hormon steroid mengalami

perubahan. Semua hormon seks merupakan steroid, yang diubah dari molekul
prekursor melalui kolesterol sampai bentuk akhirnya. Kolesterol sebagai pembakal
(prekursor) steroid disimpan dalam jumlah yang banyak di sel-sel theka.
Pematangan folikel yang mengakibatkan meningkatnya biosintesa steroid dalam
folikel diatur oleh hormon gonadotropin. Progesteron adalah suatu steroid aktif
dan juga berfungsi. sebagai prekursor untuk tahap-tahap selanjutnya. Testosteron
berasal dari progesteron, estrogen terbentuk dari perubahan struktur molekul
testosteron. Baik laki-laki maupun perempuan memiliki androgen dalam darah
mereka dalam jumlah yang bermakna. drenal mengeluarkan hormon-hormon yang
mampu berubah menjadi androgen dan hormon ovarium. Di bawah rangsangan
LH, steroid yang oleh jaringan perifer diubah menjadi senyawa aktif secara
androgenis. Peningkatan kadar testosteron serum dan penurunan ekskresi 17-
ketosteroid dalam urine, diantaranya androsteron dan epiandrosteron akan
berdampak pada perubahan siklus ovulasi dan terganggunya siklus menstruasi
(Meiriza, 2017).

Urinary 17-Ketosteroids (17-KS), metabolit testosteron, ekspresi

menunjukkan fungsi korteks adrenal. Perbedaan ekspresi 17-KS urin terkait
dengan gangguan endokrin. Ekskresi 17-KS urin dipengaruhi oleh beberapa faktor
perancu seperti yang disebutkan di atas. Selain itu, aktivasi hipo atau hiper dari
17-KS tergantung pada jenis sumber pajanan. Penurunan regulasi 17-KS dapat
menyebabkan pubertas tertunda sedangkan aktivasi hiper dapat menyebabkan
pubertas dini pada anak laki-laki prapubertas (Shrivastava, 2017).

6
BAB III
METODE PERCOBAAN

3.1 Waktu dan Tempat

Waktu : Senin, 26 April 2021 pada pukul 13.30 – 15.00 WITA Tempat :
Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Tadulako

3.2 Alat dan Bahan

a. Alat
1. Tabung reaksi
2. Erlenmeyer
3. Pipet tetes
 4. Tip biru
5. Kelereng
6. Waterbath

b. Bahan
1. Aquades
2. Petroleum eter-benzena
3. Diklorometana
4. Asam hidroklorat
5. Etil alkohol
6. Etil alkohol 50%
7. 1% m-dinitrobenzena
8. Benziltrimetilamonium
9. Standard dehidroisoandrosteron

3.3 Prosedur
a. Pengeringan sampel
1. Mengumpulkan spesimen urine 24 jam

7
2. Mengukur volume urine yang digunakan
3. Memasukkan 5 mL urine kedalam tabung reaksi
4. Menambahkan 0,5 mL HCl
5. Menempatkan tabung reaksi pada waterbath 100oC selama 20 menit
menutup bagian atas dengan kelereng
6. Mendinginkan larutan
7. Memindahkan larutan pada erlenmeyer
8. Menambahkan petroleum benzena 25 mL dengan perbandingan 1:1
campuran ptroleum eter-benzena
9. Mengocok selama 20 menit dan aspirasi keluarnya urine 10. Mencuci
pelarut dengan menambahkan 1,7 mL KOH 5% dan mengocok
11. Mengilamgkan KOH dengan aspirasi menggunakan pipet kapiler 12.
 Mencuci pelarut sebanyak 2 kali dengan 2,5 mL air, aspirasi air dengan
cara yang sama dengan KOH
13. Memindahkan 20 mL alikuot pelarut ke dalam tabung konikal
berkapasitas 30-40 mL dengan diameter 19 mm
14. Melarutkan dengan 0,2 mL etanol 96%

b. Pengukuran kadar 17-ketosteroid dengan pembuatan sampel 1.

Mengeringkan residu kedua tabung dengan menambahkan 0,1 mL
m-dinitrobenzena alkohol
2. Mencampurkan hingga residu tercampur dengan sempurna
3. Menambahkan 0,2 mL NaoH 40%
4. Mengaduk dengan rata, menginkubasi dengan suhu 25oC selama 60
menit
5. Menambahkan 3 mL etanol
6. Menambahkan 3 mL diklorometan
7. Mengocok selama 10 menit
8. Mengukur dengan panjang gelombang 520 nm

8
c. Pengukuran kadar 17-ketosteroid dengan pembuatan blanko 1.
Mengeringkan residu kedua tabung dengan menambahkan 0,2 mL
benziltrimetil-amonium metoksida
2. Mencampurkan hingga residu tercampur dengan sempurna
3. Menambahkan 0,2 mL NaoH 40%
4. Mengaduk dengan rata, menginkubasi dengan suhu 25oC selama 60
menit
5. Menambahkan 3 mL etanol
6. Menambahkan 3 mL diklorometan
7. Mengocok selama 10 menit
8. Mengukur dengan panjang gelombang 520 nm
 d. Pengukuran kadar 17-ketosteroid dalam pembuatan standard 1.
Mengeringkan residu kedua tabung dengan menambahkan
dehidroisoandrosteron
2. Mencampurkan hingga residu tercampur dengan sempurna
3. Menambahkan 0,2 mL NaoH 40%
4. Mengaduk dengan rata, menginkubasi dengan suhu 25oC selama 60
menit
5. Menambahkan 3 mL etanol
6. Menambahkan 3 mL diklorometan
7. Mengocok selama 10 menit
8. Mengukur dengan panjang gelombang 520 nm

9
BAB IV
HASIL PRAKTIKUM

4.1. Tabel Hasil Praktikum

Table 4.1.1 Data absorbansi hasil praktikum

TABUNG ABSORBANSI

SAMPEL 1,089
 BLANKO 0,785

STANDAR 1,053

4.2. Pengolahan Data

Kadar normal pria dewasa: 10-24 mg perhari

Kadar normal wanita dewasa: 6-14 mg perhari

10
BAB V
PEMBAHASAN

Senyawa steroid adalah senyawa turunan (derivat) lipid yang tidak

terhidrolisis. Senyawa yang termasuk turunan steroid, misalnya kolesterol,
ergosterol, dan estrogen. Pada umunya steroid berfungsi sebagai hormon. Secara
sederhana steroid dapat diartikan sebagai kelas senyawa organic bahan alam yang
kerangka strukturnya terdiri dari androstan (siklopentano fenantren) mempunyai
empat cincin terpadu. Senyawa ini mempunyai efek fisiologis tertentu . Sterol atau
steroid merupakan triterpena yang memiliki cincin sikiopentana perhidro
fenantrena sebagai kerangka dasarnya. Saponin merupakan perpaduan glikosida
triterpene dan sterol yang ada di kurang lebih 90 marga tanaman. Saponin
memiliki kemampuan menghemolisis sel darah, menurunkan kadar kolesterol,
mencegah penyempitan pembuluh darah jantung (arterosklerosis). Saponin
sanggup menembus dinding sel darah pada beberapa organism bisa bersifat racun
(Illing, 2017).

17 ketosteroid merupakan metabolit utama dari androgen dan merupakan

steroid dengan oksigen keton pada C17 yang bersifat netral maupun. Steroid yang
dieksresikan dalam bentuk ketosteroid yang terkonjugasi oleh sulfat dan
glukoronat. Steroid yang akan menjadi 17-ketosteroid berasal dari gugus
androstan (C19). Yang termasuk anggota 17 ketosteroid adalah androsteron,
etiocholanolone, dehidroisoandrosterone dan isoandrosteron. Ketosteroid yang
kurang ataupun lebih dari kadar normal yang dieksresikan sehari dapat
mengindikasikan adanya kelainan. Tujuan percobaan ini yakni untuk mengetahui
kadar 17-ketosteroid pada urin yang dapat mengindikasikan adanya kerusakan
pada testis, korteks adrenal dan adenohipofisis.

Biasanya jumlahnya meningkat pada penyakit di mana ada hiperfungsi

korteks adrenal akibat tumor atau hiperplasia, dan menurun pada lesi yang
mengganggu fungsi korteks adrenal. Kondisi lain seperti myxedema, eunuchism,
gout, dan arthritis dapat mengubah ekskresi 17-ketosteroids. Kadar rendah juga

11
ditemukan pada usia muda dan lanjut usia. Sejarah kasus disajikan untuk
menggambarkan temuan pada penyakit berikut: Tumor korteks adrenal dengan (a)
maskulinisasi, (b) sindrom Cushing dengan virilisme dan, (c) hirsutisme; serta
gigantisme dengan akromegali, gout, eunuchism, penyakit Addison, miksedema,
dan panhypopituitarism parah.

Prinsip percobaan ini yakni, netral 17-ketosteroid urin diekskresikan

sebagai sulfat dan konjugat glukuronat. Keduanya dihidrolisis dengan
mendidihkannya dalam asam kuat dan steroid bebas terekstraksi dengan pelarut
organik. Ekstrak diberi perlakuan dengan m-dinitrobenzen yang dengan adanya
alkali memberikan warna merah pada komponen mengandung gugus metilen aktif
(Zimmerman reaksi 66). Warna merah yang diperoleh dengan 17-ketosteroid
terlihat tidak banyak dipengaruhi oleh susbtitusi pada beberapa bagian cincin
steroid. Namun, pada prosedur ini pengembangan karakterisitik diklorometan
larut dalm warna merah dengan absorpsi maksimum pada 520 mm memerlukan
nukleus cincin steroid memiliki gugus hidroksil. 3-,11,-, dan 20-ketosteroid
memberikan beberapa warna dengan alkali m-dinitrobenzena, tetapi sangat kurang
dari 17- ketosteroid, dan absorpsi maksimumnya bukan tepat 520 mm.

Urin yang digunakan pada percobaan ini ialah urin 24 jam. Urine tampung
24 jam adalah urine yang dikeluarkan selama 24 jam terus-menerus dan
dikumpulkan dalam satu wadah. Urine jenis ini biasanya digunakan untuk analisa
kuantitatif suatu zat dalam urine, misalnya ureum, kreatinin, natrium, dan
sebagainya. Urin 24 jam kemudian ditambahkan HCl. Penambahan asam (HCl)
dan pemanasan pada penangas bertujuan untuk menghidrolisis steroid yang
terkandung dalam urin menjadi steroid yang bebas. HCl juga berperan
menghidrolisis sulfat dan konjugasi glukoronida. Urin yang telah dihidrolisis
menggunakan HCl dan melalui pemanasan kemudian didinginkan dan di ekstrak
menggunakan petroleum benzene dengan perbandingan 1;1 campuran petroleum
eter-benzene. Petroleum benzene merupakan larutan non polar yang bisa
melarutkan steroid bebas yang sama-sama bersifat non polar. Petroleum benzene
berperan sebagai pelarut organic yang akan melarutkan 17-ketosteroid dengan

12
mengikat gugus OH. Kemudian terbentuk 2 lapisan pada larutan, dengan lapisan
atas (bening) yang merupakan steroid terlarut, dan lapisan bawah (kuning
kecoklatan) yang merupakan sisa hidrolisis dan substansi urin yang lain yang
nantinya akan dibuang.

Untuk menetralkan susasana asam dan meningkatkan kelarutan, dilakukan

penambahan KOH 5%. Semakin banyak gugus OH maka semakin kuat kelarutan
dari reagen-reagen yang ditambahkan. KOH juga bertujuan mendestruksi 17-
ketosteroid dalam suasana asam dengan menggunakan sifat basa KOH sehingga
tidak mengganggu perhitungan 17-ketosteroid netral. KOH dihilangkan
menggunakan aspirasi aquadest yang berperan mecuci dan melarutkan substansi
yang tak berguna sehingga pembacaan nantinya tidak akan terganggu. 20 mL
alikuot pelarut dipindahkan ke tabung konikal berkapasitas 30 – 40 mL dengan
diameter 19 mm dan dikeringkan di bawah aliran udara pada penangas air bersuhu
40 - 45°C. Perlakuan pemanasan bertujuan untuk menguapkan benzene dan
menyisakan steroid saja.

Ekstrak dari reaksi kemudian dicuci menggunakan etanol. Etanol

merupakan pelarut non-polar yang berperan membersihkan kerak di dinding
tabung. Lalu dilakukan penambahan 0.2 mL standard ke dalam tabung yang
serupa dan dikeringkan di penangas air. Untuk mengeringkan residu pada ke dua
tabung ditambahkan 0.1 mL m-dinitrobenzena alkohol. Residu dicampurkan
hingga larut dengan sempurna. Kemudian, ditambahkan 0.1 mL mdinitrobenzena
alkohol ke ke tabung yang serupa lainnya untuk blanko pereaksi. Penambahan m
dinitrobenzena pada ruangan gelap untuk mempercepat reaksi dan menciptakan
kompleks warna merah hingga ungu yang disebabkan oleh adanya ikatan dengan
ketosteroid. Kemudian ditambahkan 3 mL etanol 50%, dan setelah pencampuran,
ditambahkan 3 mL diklorometana. Pemberian etanol akan menarik gugus air yang
ada dan membantu pelarutan steroid. Sedangkan diklorometana berfungsi untuk
menghilangkan pengaruh warna steroid lain dan menspesifikasikan derajat warna
hanya pada 17 ketosteroid. Ketika 2 lapisan terbentuk, lapisan bawah mengandung
17 ketosteroid dan lapisan atas yang merupakan sisa etanol dan

13
pelarut yang sudah tidak digunakan lagi. Kemudian , absorbansi lapisan bawah
(berwarna) dengan blanko air pada 520 mm dalam spektrometer dengan kuvet
yang sesuai.

Ekskresi 17-ketosteroid pria normal berusia antara 20 dan 40 tahun sekitar

15 mg tiap hari dan wanita normal pada kelompok umur yang sama
mengekskresikan sekitar 10 mg, sedangkan pada anak di bawah umur 8 tahun,
kurang dari 1 mg dieliminasi, tetapi mulai umur ini terjadi peningkatan bertahap
hingga mencapai nilai orang dewasa. Demikian juga pada lanjut usia pengurangan
signifikan dapat diamati. Pada percobaan yang dilakukan, diperoleh hasil bahwa
probandus mengeksresikan 1,70148 mg/harinya. Berdasarkan hasil tersebut dapat
kami indikasikan bahwa probandus kemungkinan memiliki kelainan pada pada
testis, korteks adrenal maupun adenohipofisis. Hal ini didasarkan pada hasil
perhitungan yang menunjukkan bahwa kadar 17-ketosteroid yang dieksresikan
probandus tidak berada dalam rentang normal kadar 17-ketosteroid yang
semestinya dieksresikan tiap harinya.

Hasil praktikum menunjukkan bahwa probandus mensekresikan . Pada

percobaan kali ini, probandus berjenis kelamin laki-laki, dengan sampel urin 300
mL. Hasil ini menunjukkan bahwa probandus memiliki gangguan sehingga kadar
17-ketosteroid yang ia sekresikan hanya mencapai nilai 1,701 mg/hari. Pada pria
normal dewasa, kadar 17- Ketosteroid disekresikan dengan rentan nilai 10-24
mg/hari. Dengan hasil ini dugaan gangguan yang diderita probandus kemungkinan
besar ialah Addison disease.

Kadar abnormal 17-ketosteroid yang kemungkinan terjadi dapat di

sebabkan oleh beberapa kondisi seperti, gonadektomi, kondisi eunuchoidism pada
bedah kebiri, penyakit Addison, tumor pada sel interstitial testis, Cushing’s
syndrome yang tidak berasosiasi dengan karsinoma korteks adrenal ataupun yang
disertai dengan karsinome korteks adrenal, sindrom adrogenital, hiperplasia biasa
pada korteks, dan lain sebagainya. Gonadektomi pada pria dapat mengurangi
produksi rerata dari 15 hingga 10 mg, dan tidak ada pengaruh pada wanita,

14
diasumsikan bahwa sekitar 10 mg diturunkan dari korteks adrenal dan 5 mg dari
testis. Pada kondisi eunuchoidism dilaporkan lebih rendah dari normal seperti
kadar pada bedah kebiri (10 mg), sedangkan pada kasus tumor pada sel interstisial
testis produksinya dapat mencapai 800 mg setiap harinya. Pada penyakit Addison
pada pria, ekskresi turun mencapai 1,2 hingga 6,4 mg yang mewakili produksi
testikular, sedangkan pada wanita praktis tidak ada 17-ketosteroid yang
diproduksi.

Pada kasus Cushing’s syndrome yang tidak berasosiasi dengan karsinoma

korteks adrenal, jumlahnya normal atau hanya sedikit peningkatan 17-ketosteroid
diamati (10 hingga 36 mg), tetapi ketika karsinoma korteks mengkomplikasi
kondisi, ekskresi yang lebih tinggi ditemukan (40 hingga 288 mg). Demikian pula
pada sindrom adrogenital, hiperplasia biasa pada korteks hanya menyebabkan
produksi 17-ketosteroid yang cukup tinggi (mencapai sekitar 100 mg), sedangkan
karsinoma umumnya menimbulkan peningkatan yang lebih ditandai (ca 100
hingga 250 mg).

15
BAB VI
KESIMPULAN DAN SARAN

6.1. Kesimpulan
 1) Steroid adalah salah satu kelas utama dari lipid yang memiliki struktur yang
sama sekali berbeda dari kelas-kelas lipid yang lain.
2) Hiperplasia terjadi apabila jaringan mengandungi populasi sel yang mampu
bereplikasi. Hal tersebut dapat terjadi bersama dengan hipertrofia dan
sering terjadi karena stimulus yang sama.
3) Kortikosteroid adalah kelas hormon steroid yang dilepaskan oleh korteks
adrenal, yang meliputi glukokortikoid dan mineralokortikoid.
4) Senyawa steroid berbeda-beda, perbedaan diantara senyawa steroid
ditentukan oleh panjang rantai karbon pada C-17
5) Kalsium merupakan ion terbesar dalam urin, hanya 50% dari kalsium
plasma terionisasi yang difiltrasi di glomerulus. Lebih dari 95% kalsium
yang difiltrasi, direasorbsi di tubulus proksimal maupun ditubulus distal
dan sebagian kecil ditubulus kolektivus.
6) Hormon steroid berfungsi untuk membantu tubuh agar berfungsi dengan
baik. Hormon steroid terbagi menjadi dua, yaitu hormon kortisol dan
aldosterone.

6.2. Saran
Harapan saya agar praktikum selanjutnya mungkin vidio pratikum bisa
ditingkatkan dan diberikan kepada mahasiswa sebagai bahan pembelajaran dalam
praktikum daring.

16
DAFTAR PUSTAKA

Barrett, K. E., et al. 2012. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Ganong. Edisi 24. US:
McGrawHill inc
Dutt, M., et al. 2020. Physiology, Adrenal Gland. Treasure Island: StatPearls
Publishing

Fransisco, S. 2017. The Clinical Significance Of Urinary 17-Ketosteroid Assays.

Jounal of medicine. Vol. 72(3): 148-152. Viewed on 28 april 2021. From:
ncbi.nlm.nih.gov

Hall, E.J, & Guyton, A.C. 2011. Guyton and Hall Textbook of Medical
Physiology. Edisi 12. Amerika Serikat: Elsevier

Illing, I., Safitri, W., Erfiana. 2017. Uji Fitokimia Ekstrak Buah Dengen. Jurnal
Dinamika. Vol. 8(1): 66-84. Viewed on 2 Mei 2021. From :
journal.uncp.ac.id

Maryam, F., Subehan., Musthainah, L. 2020. Isolasi Dan Karakterisasi Senyawa

Steroid Dari Ekstrak Biji Mahoni (Swietenia mahagoni Jacq.). Jurnal
Fitofarmaka Indonesia. Vol. 7(2):6-11. Viewed on 1 Mei 2021. From:
jurnal.farmasi.umi.ac.id

Meiriza, W., Satria, O. 2017. Hubungan Berat Badan Tidak Normal Dengan
Kejadian Amenore Pada Remaja Putri. Jurnal Kesehatan Perintis
(Perintis’s Health Journal). Vol. 4(2):1-7. Viewed on 1 Mei 2021. From:
jurnal.stikesperintis.ac.id

Ramamoorthy, S., Cidlowski, J. A. 2016. Corticosteroids: Mechanisms of Action

in Health and Disease. Rheumatic diseases clinics of North America. Vol.
42(1). Viewed on 2 Mei 2021. From: ncbi.nlm.nih.gov

Shrivastava, P., et al. 2017. Elevated levels of urinary 17-ketosteroids in central

Indian children residing near sewage treatment plant and solid waste

17
disposal plant: A preliminary study. Human and Ecological Risk
Assessment: An International Journal. Vol. 23(2) : 241-256. Viewed on 2
Mei 2021. From : tandfonline.com
18