FITOKIMIA II
“KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS”
OLEH
Paraf asisten
MAPPING JURNAL
Judul Kromatografi Lapis Tipis
Paraf asisten
MAPPING JURNAL
Judul Kromatografi Lapis Tipis
Paraf asisten
MAPPING JURNAL
Judul Kromatografi Lapis Tipis
Paraf asisten
MAPPING JURNAL
Paraf asisten
MAPPING JURNAL
Judul Kromatografi Lapis Tipis
Paraf asisten
MAPPING JURNAL
Judul Kromatografi Lapis Tipis
Paraf Asisten
MAPPING JURNAL
Judul Kromatografi Lapis Tipis
Nama / Nim Riska Indah Rahmawati Miodu/821420081
Pembibing / Asisten Zulfianto Djufri, S.Farm
Syuto Hasegawa, Kazuhiro Ura, Hiroyuki Tanaka,
Takao Ojima, Yasuaki Takagi, 2012, Purification
Penulis, Tahun, Judul, Halaman and biochemical characterization of a cellulase
from the digestive organs of the short-spined sea
urchin Strongylocentrotus intermedius,1107-1115.
Bulu babi adalah organisme laut terkenal yang
tersebar luas dari daerah intertidal berbatu hingga
kedalaman abyssal di semua lautan di dunia. Gonad
Latar Belakang bulu babi adalah produk makanan laut bernilai
tinggi, dan banyak penelitian sedang dilakukan di
seluruh dunia tentang pengembangan budidaya
bulu babi.
Selulosa, komponen dinding sel utama pada
tumbuhan, adalah polisakarida linier yang terdiri
dari residu residu D-glukosa b-1,4- linked yang
menghidrolisis ikatan b-1,4-glikosil dari rantai
selulosa untuk menghasilkan selo-oligosakarida,
seperti selotriosa dan selobiosa. Depolimerisasi
Dasar Teori
lengkap selulosa menjadi glukosa membutuhkan
jenis lain dari enzim pendegradasi selo-
oligosakarida, 1,4-bglukosidase. Selama ini enzim
selulolitik telah diisolasi dan dikarakterisasi dari
bakteri, fungi, tumbuhan, kapang, mikroba,
artropoda, nematoda, moluska dan bulu babi.
Metode Kromatografi lapis tipis (KLT) untuk analisis
produk degradasi selulosa dan selo-oligosakarida
dilakukan pada pelat TLC-60 (Merck, Darmstadt,
Jerman) dan pelarut berkembang yang terdiri dari
n-butanol/asam asetat/air (2 :1:1, v/v/v). Gula yang
terbentuk pada pelat dideteksi dengan pemanasan
pada suhu 1200C selama 15 menit setelah
disemprot dengan etanol asam sulfat 10% (v/v).
Serbuk selulosa dibeli dari Advantec (San Diego,
CA) dan Merck. Campuran reaksi 0,1 ml (0,5 mg
selulosa bengkak asam fosfat dan selulosa kristal, 5
mM natrium fosfat, pH 7,0, 0,26 U selulase murni)
diinkubasi pada 300C hingga 24 jam. Supernatan
dari campuran reaksi menjadi sasaran KLT.
Campuran reaksi 0,05 ml yang mengandung 0,05
mg G2 (selobiosa)–G6 (selo heksaosa), 5 mM
natrium fosfat (pH 7,0), dan 0,13 U selulase murni
diinkubasi pada 30 C selama 20 jam, kemudian
dilakukan KLT.
TLC analisis menunjukkan bahwa selulase bulu
babi berduri pendek memilikiselulosa daripada ke
arah selulosa kristal. Bulu babi berduri pendek
mendegradasi fosfataktivitas degradasi yang lebih
tinggi menuju asam fosfat-bengkakdan selobiosa
sebagai produk utama. Itu juga terdegradasiselulosa
kristal untuk menghasilkan cellotetraose, celloo
triose danselulosa asam-bengkak untuk
Hasil Penelitian menghasilkan cellotetraose, cellotriosesubstrat ini
sangat rendah dan degradasi selo-oligosakarida.
Yang berduri pendekcellobiose; Namun, aktivitas
degradasi padaselulase bulu babi mudah
terdegradasi baik selohexaosedan cellopentaose
menjadi cellotetraose, cellotriose, cellobiosedan
glukosa, dan selotetrosa secara perlahan
terdegradasi menjadi selotriosa, selobiosa, dan
glukosa.
Keterkaitan dengan Percobaan Metode yang digunakan pada percobaan yaitu
Kromatografi Lapis Tipis dan pada jurnal ini juga
menggunakann metode Kromatografi Lapis Tipis
pada proses ekstraksi bulu babi.
Pengisolasian selulase dari organ pencernaan
landak laut berduri pendek Strogylocentrotus
intermedius menggunakan kombinasi kromatografi
penukar ion dan filtrasi gel bersama-sama dengan
uji aktivitas karboksimetil selulase. Selulase yang
diisolasi diwarnai sebagai pita tunggal oleh Congo
red. Hal ini menghasilkan stabilitas termal enzim
Ringkasan Materi dicirikan dengan menentukan suhu di mana
aktivitas menurun 50% dengan perlakuan selama
30 menit pada pH 7,0 dan ditemukan pada 32 C.
Aktivitas selulase tetap pada tingkat tinggi pada 5-
200C, yang merupakan suhu pertumbuhan bulu
babi duri pendek. Hasil ini menegaskan bahwa bulu
babi duri pendek sebaiknya dipelihara pada suhu
air \200C.
Paraf Asisten
MAPPING JURNAL
Judul Kromatografi Lapis Tipis
Nama / Nim Riska Indah Rahmawati Miodu/821420081
Pembibing / Asisten Zulfianto Djufri, S.Farm
Alexander N. Shikova, Vladimir I. Ossipov , Olli
Martiskainen, Olga N. Pozharitskaya, Svetlana A.
Ivanova, Valery G. Makarov, 2011, The Offline
Combination Of Thin-Layer Chromatography And
High-Performance Liquid Chromatography With
Penulis, Tahun, Judul, Halaman
Diode Array Detection And Microtof-Q Mass
Spectrometry For The Separation And
Identification Of Spinochromes From Sea Urchin
(Strongylocentrotus Droebachiensis) Shells,9111-
9114.
Spesies bulu babi tersebar luas di lautan dunia, dan
beberapa dipanen karena gonadnya. Gonad
dinamakan “uni” di Jepang, yang mana merupakan
Latar Belakang bahan sushi yang mahal dalam masakan tradisional
Jepang. Peneliti ingin mengetahui senyawa yang
terkandung pada cangkang bulu babi dengan
menggunakan metode KLT dan HPLC.
Dasar Teori Cangkang bulu babi mengandung pigmen dengan
beberapa gugus hidroksil fenolik yang
menunjukkan aktivitas antioksidan yang kuat.
Lebih dari dua puluh pigmen, yang dikenal sebagai
spinokrom, telah diisolasi dari bulu babi dan
dideskripsikan. Berdasarkan hasil penelitian
Anderson dkk. dan Moore et al. memisahkan
pigmen dari cangkang bulu babi menggunakan
kromatografi kolom silika gel dan kromatografi
lapis tipis (KLT). Kromatografi dengan kolom
Sephadex LH-20 telah digunakan untuk pemisahan
dan fraksinasi pigmen dari cangkang bulu babi
merah.
Pelat kaca, Kieselgel 60 F 254 (10 cm × 10 cm),
digunakan. Sampel diaplikasikan pada pelat yang
diberi perlakuan asam oksalat dalam 80 l alikuot
sebagai pita 6 mm dengan 12 mm di antara pusat
pita dengan jarum suntik sampel 100 l
menggunakan sistem Linomat V. Pelat
dikembangkan dalam ruang kaca vertikal pra
Metode
jenuh, palung kembar selama 20 menit
menggunakan fase gerak kloroformmetanol : asam
asetat : air (5/1.1/0.5/0.2, v/v). Setelah
pengembangan, pelat dikeringkan dan dianalisis
dengan TLC Scanner 3 dengan DAD. Dua area
pigmen berwarna dielusi dengan 0,1 ml metanol
menggunakan antarmuka TLC-MS.
Hasil penelitian KLT, untuk mendapatkan
pemisahan pigmen yang baik dengan KLT, pelarut
fase gerak yang berbeda, rasionya, dan jenis fase
diam diuji dalam studi pendahuluan. Penggunaan
fase gerak kloroform-metanol-asam asetat-air
Hasil Penelitian
(5/1.1/0.5/0.2, v/v) pada pelat silika gel
menghasilkan pemisahan terbaik dari ekstrak
pigmen kasar. Dua bintik pigmen, S1 (nilai Rf
0,67) dan S2 (nilai Rf 0,53), diamati pada pelat
KLT.
Metode yang digunakan pada percobaan yaitu
Kromatografi Lapis Tipis dan pada jurnal ini juga
Keterkaitan dengan Percobaan
menggunakann metode Kromatografi Lapis Tipis
pada proses ekstraksi bulu babi.
Ringkasan Materi Kromatografi lapis tipis (KLT) dengan
kromatografi cair kinerja tinggi off-line
digabungkan dengan deteksi susunan dioda dan
spektrometri massa microOTOF-Q (HPLC–DAD–
MS) menghasilkan keberhasilan fraksinasi,
pemisahan, dan identifikasi pigmen spinokrom dari
bulu babi (Kerang Strongylo centrotus
droebachiensis).
Paraf Asisten