LAPORAN PRAKTIKUM Nama : Asmeilita br Sitepu

NIM : 122270064
Dasar-Dasar Kimia Hayati Kelas : RA
PROGRAM STUDI KIMIA Kelompok: 06
INSTITUT TEKNOLOGI SUMATERA Nama Asprak: Zazza Dillah
Hariyanto

LAPORAN PRAKTIKUM DASAR DASAR KIMIA HAYATI

IDENTIFIKASI GRAM BAKTERI

Oleh :

Nama : Asmeilita br Sitepu

NIM : 122270064

Kelompok : 06

Dosen Kelas : 1 . Aditya Ayuwulanda , S.Pd., M.Si

2 . Indarto , S.Si., M.Sc

Asisten : Zazza Dillah Hariyanto

Waktu : Kamis, 16 November 2023

08.00 – 10.00 WIB

PROGRAM STUDI KIMIA

INSTITUT TEKNOLOGI SUMATERA
LAMPUNG SELATAN
2023
 LAPORAN PRAKTIKUM Nama : Asmeilita br Sitepu
NIM : 122270064
Dasar-Dasar Kimia Hayati Kelas : RA
PROGRAM STUDI KIMIA Kelompok: 06
INSTITUT TEKNOLOGI SUMATERA Nama Asprak: Zazza Dillah
Hariyanto

PERCOBAAN KE :4

JUDUL PERCOBAAN : Identifikasi Gram Bakteri

TUJUAN PERCOBAAN : 1. Mengidentifikasi bakteri dengan enggunakan pewarnaan

gram
2. Untuk mengetahui morfologi beberapa baktei seperti
Eschericia coli

DASAR TEORI :

1. Bakteri

Bakteri merupakan salah satu golongan mikroorganisme yang memiliki sel tunggal
atau prokariotik. Informasi genetic bakteri diperoleh dari DNA. Bakteri merupakan
mikroorganisme yang hidupnya berkoloni dan tidak memilki selubung inti. Terdapat 2
jenis bakteri yakni bakteri gram positif dan bakteri gram negative (Holderman, 2017).

Bakteri mampu melakukan berbagai aktivitas metabolisme sendiri serta melakukan

reproduksi dengan cara membelah diri. Bakteri gram positif berbeda dengan bakteri gram
negative. Bakteri gram positif lebih rentan terhadap antibiotic golongan penisilin serta
kurang rentan jika diberi enzim-enzim tertentu dan juga kurang rentan apabila diberi
tekanan yang amat tinggi atau getaran ultrasonic. Sedangkan bakteri gram negative lebih
rentan terhadap antibiotic golongan streptomycin. Bakteri gram positif dapat
menyebabkan suatu penyakit/pathogen (Oktavia, 2020).

Tes identifikasi suatu bakteri dapat dilakukan dengan berbagai cara diantaranya
dengan cara pewarnaan gram. Karkter pengelompokannya yaitu dengan melihat
bagaimana rekasi bakteri terhadap pewarnaan gram. Pewarnaan gram sangat penting
karena reaksi gram berhubungan dengan sifat morfologi dalam bentuk hubungan
filogenik. Pewarnaan gram berfungsi sebagai pewarna bakteri terutama memberi warna
pada sel dan bagian-bagiannya, sehingga menambah kontras dan lebih memperjelas objek
(Amin, 2023). Biasanya bakteri yang berpotensi gram positif hanya dapat dilihat dengan
metode pewarnaan gram.

Dalam dunia mikrobiologi, pewarnaan adalah salah satu hal terpenting, karena dapat
memudahkan dalam mengidentifikasi suatu bakteri menggunakan mikroskop, serta
memperjelas ukuran dan bentuk bakteri. Pewarnaan gram biasa menggunakan pewarna
seperti safranin, Kristal violet, metilen biru dan lain-lain. Tujuan dilakukan pewarnaan
gram agar dapat membedaakan antara bakteri gram positif dan bakteri gram negarif yang
mana dapat dilihat dari perbedaan komposisi dnding selnya. Mekanisme yang terjadi saat
pewarnaan berbeda antara gram negraif dan gram positif. Pada proses pewarnaan, gram
positif akan mempertahankan warna namun gram negatif sebaliknya (Virgianti, 2017).
Dalam pewarnaan gram di laboratorium cenderung dimanfaatkan untuk
menggolongkan bakteri, apakah bakteri termasuk gram positif atau gram negatif. Pada
 LAPORAN PRAKTIKUM Nama : Asmeilita br Sitepu
NIM : 122270064
Dasar-Dasar Kimia Hayati Kelas : RA
PROGRAM STUDI KIMIA Kelompok: 06
INSTITUT TEKNOLOGI SUMATERA Nama Asprak: Zazza Dillah
Hariyanto

pewarnaan gram biasanya menggunakan larutan Kristal violet yang berfungsi sebagai
pewarna bakteri yang termasuk ke dalam golongan gram positif yang mana pada bakteri
akan mempertahankan warna ungu. Sedangkan pada gram negatif menggunakan larutan
karbol fuchsin yang mana akan menghasilkan warna merah muda pada bakteri (Marbun,
2020).

Identifikasi bakteri dilakukan dengan pewarnaan gram pada koloni tunggal. Bakteri
gram positif memiliki dinding sel tebal, membrane sel selapis serta tidak memiliki
membrane luar. Sedangkan bakteri gram negatif memiliki dinding sel tipis yang berada
diantara dua lapis membrane sel. Berbagai macam bakteri yang dapat menahan zat warna
ungu ketika sudah diberi zat penghilang warna maka dapat disimpulkan bakteri tersebut
gram positif. Sedangankan apabila ketika warna yang yang dihasilkan bukan ungu violet
maka reaksi tersebut memperlihatkan bakteri gram negarif (Putri, 2018).

ALAT DAN BAHAN (5) :

Alat :

• Kawat ose
• 2 buah gelas kimia 100 ml
• 5 buah piprt tetes
• 1 set kaca objek
• 1 set mikroskop

Bahan :

• Reagen kristal violet

• Larutan iodine
• Safranin
• Alkohol
• Isolat tunggal bakteri dalam media padat

BAGAN ALIR CARA KERJA (10) :

Alat dan Bahan

➢ Disterilisasi kawat ose, kaca objek, biakan bakteri dengan

menggunakan pembakar bunsen

Biakan bakteri
 LAPORAN PRAKTIKUM Nama : Asmeilita br Sitepu
NIM : 122270064
Dasar-Dasar Kimia Hayati Kelas : RA
PROGRAM STUDI KIMIA Kelompok: 06
INSTITUT TEKNOLOGI SUMATERA Nama Asprak: Zazza Dillah
Hariyanto

➢ Diambil sebanyak 4 dan 5 loop

➢ Digoreskan diatas kaca objek
➢ Dibiarkan kering di udara terbuka
➢ Difiksasi kaca objek di atas api lilin

Pewarna bakteri

➢ Diteteskan ke preparat dengan kristal violet

➢ Dimiringkan untuk membuang cairan terlebih dahulu
➢ Dibasahi preparat dengan iodine
➢ Dimiringkan untuk membuang cairan yang berlebih
➢ Dicuci preparat dengan air dan dilanjutkan dengan alkohol
➢ Dicuci kembali dengan air
➢ Dimiringkan preparat untuk membuang larutan yang tersisa
➢ Dicuci preparat dengan air
➢ Dikeringkan preparat dengan tisu
➢ Diamati dengan mikroskop dan digambarkan hasilnya

Hasil

HASIL DAN DATA PERCOBAAN (15) :

1. Data Hasil Pengamatan

No Larutan Pewarna Reaksi yang terjadi Keterangan

1. Kristal Violet Menjadi warna ungu Gram negatif/gram positif
➢
2. Larutan iodine Warna tetap ungu Gram negatif/gram positif

3. Alkohol Warna menjadi agak pudar Gram negatif

4. Safranin Berwarna ungu namun sedikit Gram negatif

kemerahan
5. Uji Mikroskop Berwarna ungu violet Gram positif

2. Tabel Pengamatan
 LAPORAN PRAKTIKUM Nama : Asmeilita br Sitepu
NIM : 122270064
Dasar-Dasar Kimia Hayati Kelas : RA
PROGRAM STUDI KIMIA Kelompok: 06
INSTITUT TEKNOLOGI SUMATERA Nama Asprak: Zazza Dillah
Hariyanto

No Gambar hasil pengamatan Nama bakteri Keterangan

1. Perbesaran : 100x
Diplobacillus Warna : ungu
Keterangan :Gram
Positif, terdapat
butiran-butiran kecil

PEMBAHASAN (30) :

Pada percobaan kali ini dilakukan identifikasi bakteri dengan cara pewarnaan gram. Pertama
dilakukan sterilisasi semua alat dan bahan. Kemudian pada saat pewarnaan, warna pertama yang
diteteskan yaitu pewarna primer pada percobaan ini menggunakan larutan Kristal violet, lalu
dibilas dengan aqua dest menghasilkan warna ungu maka belum dapat diidentifikasi apakah
bakteri tersebut gram positif atau gram negatif. Kristal violet bersifat basa sehingga dapat
berikatan dengan sel mikroorganisme yang bersifat asam sehingga sel mikroorganisme terlihat
berwarna ungu. Selanjutnya ditambahkan iodine/lugol dan dibilas, warna tetap ungu namun
sedikit lebih terang. Reaksi yang dihasilkan yaitu iodine membentuk kompleks Kristal violet-
iodine yang terbentuk di dalam dinding sel dan sitosol. Lalu diberi peghilang warna yaitu alcohol
dan dibilas, warna yang dihasilkan menjadi agak pudar, pada reaksi ini lipid terekstraksi dari
dinding sel sehingga pori-pori mengembang dan komplek Kristal violet-iodine keluar dari sel
sehingga sel tidak menghasilkan warna. Dan terakhir diberi penghilang noda yaitu larutan
 LAPORAN PRAKTIKUM Nama : Asmeilita br Sitepu
NIM : 122270064
Dasar-Dasar Kimia Hayati Kelas : RA
PROGRAM STUDI KIMIA Kelompok: 06
INSTITUT TEKNOLOGI SUMATERA Nama Asprak: Zazza Dillah
Hariyanto

safranin dan dibilas, menghasilkan warna ungu pudar namun seperti terlihat kemerahan. Hal ini
dikarenakan sel menyerap warna sehingga dapat diidentifikasi gram negatif. Lalu kaca slide
dikeringkan dan dilakukan pengamatan menggunakan mikroskop.

Berdasarkan hasil pengamatan menggunakan mikroskop diperoleh hasil bakteri gram positif
dengan ciri-ciri bakteri yang mempertahankan warna ungu Kristal violet pada saat pewarnaan.
Bakteri yang diperoleh yaitu bernama diplobacillus dimana berbentuk batang dan berpasangan
dua. Namun sebelum dilakukan pengamatan menggunakan mikroskop dapat diamati warna yang
diperoleh mengidentifikasi bahwa bakteri tersebut gram negatif.

JAWABAN POST TEST (15) :

1. 1. Jelaskan fungsi dari mempelajari penggunaan mikroskop!

Jawaban :
Mikroskop merupakan alat optik yang berfungsi sebagai alat bantu untuk melihat dan
memperbesar objek yang akan diamati. Mikroskop mempunyai perbesaran sampai 10x
lipat dari gambar semula. Mikroskop dapat ditemukan hampir diseluruh laboratorium
penelitian untuk mengamati sel maupun organisme yang berukuran sangat kecil.

2. Jelaskan perbedaan jaringan batang, daun, dan bawang merah! (sertakan dengan nama
jaringan penyusun pada masing-masing sampel).

Jawaban :
Jaringan batang, atau disebut juga dengan parenkima, adalah jenis jaringan tumbuhan
yang terdapat pada batang dan memiliki peran dalam penyimpanan zat makanan,
penyokong, dan pengangkutan air dan nutrisi. Selain parenkima, batang juga
mengandung jaringan pembuluh (xilem dan floem) yang berperan dalam
pengangkutan air, mineral, dan nutrisi ke seluruh bagian tumbuhan. Xilem
bertanggung jawab untuk mengangkut air dan mineral dari akar ke bagian atas
tumbuhan, sedangkan floem membawa hasil fotosintesis dari daun ke bagian-bagian
lain.

Jaringan daun, dikenal sebagai kloroplas, merupakan bagian yang sangat penting
dalam proses fotosintesis. Daun mengandung sel-sel khusus yang disebut kloroplas, di
mana terjadi reaksi kimia yang menggunakan energi matahari untuk mengubah karbon
dioksida dan air menjadi glukosa dan oksigen. Selain kloroplas, daun juga memiliki
jaringan pembuluh (xilem dan floem) untuk mengangkut air, nutrisi, dan hasil
fotosintesis ke seluruh bagian tumbuhan.

Bawang merah memiliki struktur yang berbeda, terutama dengan adanya jaringan
meristem yang berperan dalam pertumbuhan primer dan sekunder. Jaringan meristem
terdapat di ujung akar (meristem apikal) dan di sekitar batang (meristem lateral).
 LAPORAN PRAKTIKUM Nama : Asmeilita br Sitepu
NIM : 122270064
Dasar-Dasar Kimia Hayati Kelas : RA
PROGRAM STUDI KIMIA Kelompok: 06
INSTITUT TEKNOLOGI SUMATERA Nama Asprak: Zazza Dillah
Hariyanto

Jaringan ini terus membelah diri untuk menghasilkan sel-sel baru, memungkinkan
pertumbuhan dan perkembangan tumbuhan. Bawang merah juga mengandung
jaringan penyimpanan yang berfungsi menyimpan cadangan makanan.

KESIMPULAN :

1. Identifikasi suatu bakteri dapat dilakukan dengan cara pewarnaan gram.

2. Pewarna Kristal violet berperan sebagai pemberi warna pada mikroorganisme target.

3. Alcohol digunakan sebagai zat penghilang warna yang akan mempengaruhi

mikroorganisme target.

4. Gram positif ditunjukkan dengan hasil reaksi dimana mempertahankan warna zat violet
sehingga hasil warna yang diamati berwarna ungu, sedangkan gram negatif
ditunjukkan dengan hasil reaksi dimana tidak dapat mempertahankan warna zat violet

DAFTAR PUSTAKA (5) :

Amin, S. S. (2023). Identifikasi Bakteri dari Telapak Tangan dengan Pewarnaan Gram. Jurnal
Kimia dan Ilmu Lingkungan, 1-5.
Holderman, M. V. (2017). Identifikasi Bakteri Pada Pegangan Eskalator Di Salah Satu Pusat
Perbelanjaan Di Kota Manado. Jurnal Ilmiah Sains, 13-18.
Marbun, R. W. (2020). Pemanfaatan Sari Ubi Jalar Ungu(Ipomea batatas poiret) Sebagai Zat
Pewarna pada Pewarnaan Gram Terhadap Bakteri Staphylococus aureus dan Esccherichia
coli. Jurnal Analisis Kesehatan Klinikal Sains, 82-89.
Oktavia. (2020). PERFORMA PRODUKSI BROILER TERPAPAR BAKTERI Escherichia coli
YANG DIBERI EKSTRAK DAUN AFRIKA (Vernonia amygdalina). Jurnal Rekasatwa
Peternakan, 89-93.
Putri, A. L. (2018). Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat dari Pangan Fermentasi berbasis
Ikan (Inasua) yang Diperjualbelikan di Maliuku-Indonesia. Jurnal Biologi Tropika, 6-12.
Virgianti, D. P. (2017). PENGGUNAAN EKSTRAK KOMBINASI ANGKAK DAN DAUN
JATI. Jurnal Kesehatan Bakti Tunas Husada, 66-72.

Tanda Tangan Praktikan Paraf Asisten Praktikum Nilai Laporan