PIROGEN

OLEH :Kp.F-6
NI MADE AYU GANGGA DEWI 110116282
NI PUTU RISMA WINDAYANTHI 110116203
NUR JAMALIAH 110116266
NI PUTU DIANTARI PRATIWI 110116215
HELDINA MELYAWATI 110116230

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SURABAYA
A. LATAR BELAKANG
Pyrogen berasal dari kata pyro yang artinya keadaan yang berhubungan dengan panas, dan
kata gen yang artinya membentuk atau menghasilkan.Pirogen adalah suatu produk
mikroorganisme, terutama dari bakteri gram negatif.
Sterilisasi adalah suatu proses untuk membunuh atau memusnahkan semua
mikroorganisme atau jasad renik yang ada, sehingga jika ditumbuhkan didalam suatu medium
tidak ada lagi mikroorganisme atau jasad renik yang dapat berkembang biak.
Sediaan steril memiliki beberapa kriteria, seperti bebas dari mikroorganisme, bebas dari
pirogen, bebas dari partikulat dan standar yang sangat tinggi dalam hal kemurnian dan kualitas,
bagaimanapun tujuan utama pembuatan sediaan steril adalah mutlak tidak adanya kontaminasi
mikroba. Tidak seperti syarat banyak sediaan yang lain, syarat sterilitas adalah nilai yang mutlak.
Secara historis, pertimbangan sterilitas bersandar pada uji sterilitas lengkap yang resmi,
namun sediaan akhir pengujian sterilitas mengalami banyak batasan. Batasan yang paling nyata
adalah sifat dasar dari uji sterilitas. Ini adalah uji yang dekstruktif, sehingga hal ini tergantung
pemilihan statistic sampe lacak dari keseluruhan.

Kontaminasi obat-obatan dan peralatan medis dengan pirogen adalah penyebab paling
umum dari masalah sistemik. Pirogen yang paling dikenal berasal dari mikroba, termasuk bakteri,
ragi, jamur, virus atau komponen dan lingkungannya partikel.

Yang paling dipelajari adalah komponen bakteri dan dinding sel ragi, seperti
lipopolisakarida (LPS, juga dikenal sebagai endotoksin) bakteri Gram-negatif, atau lipoteichoic
acid (LTA) dan peptidoglikan (PGN) dari bakteri Gram-positif , atau zymosan dari ragi, yang
merangsang leukosit untuk melepaskan sitokin dan menyebabkan reaksi berat seperti kegagalan
organ, syok septik, dan bahkan kematian Oleh karena itu, deteksi pirogen adalah prasyarat untuk
produk farmasi. Saat ini, beberapa berbedametode untuk mendeteksi pirogen tersedia, tes
pirogen kelinci (RPT), tes endotoksin bakteri (BET, juga disebut limulus amebocyte lysate assay
(LAL), hanya dapat digunakan untuk mendeteksi endotoksin pirogen) dan tes aktivasi monosit
(MAT)

B. RUMUSAN MASALAH
1. Bagaimanacara-carapencegahanpirogen ?
2. Bagaimanacaramenghilangkanpyrogen ?
3. Sebutkanmetodeujiaktivitasterhadappirogen ?

C. TUJUAN
Mengetahuisumber-sumber pyrogen, carasterilisasisediaandari pyrogen,
danmetodeujiaktivitasterhadap pyrogen.
D. PEMBAHASAN
Steril adalah kondisi yang memungkinkan terciptanya kebebasan penuh dari
mikroorganisme dengan keterbatasan (Lachman).
Pirogen merupakan substansi yang mampu menyebabkandemam terutama dari bakteri
gram negatif yang terdiri atas suatu senyawa kompleks lipopilisakarida. Endotoksin diketahui
merupakan pirogen yang paling kuat, namun kehadiran pirogen lain dalam suatu sediaan perlu
diperhitungkan, karena manusia tidak hanya respon terhadap endotoksin tetapi juga pirogen yang
lain (Suwandi, 1988).
Pengobatan demam yang disebabkan oleh pyrogen sangat sulit dan pada beberapa kasus
dapat menyebabkan kematian. Pirogen berasal dari kelompok senyawa yang luas, meliputi
endotoksin (LPS). Endotoksin adalah suatu molekul yang berasal dari membran luar bakteri gram
negatif. Organisme gram negative membawa 3-4 juta LPS pada permukaannya yang meliputi
75% permukaan membranluar (Sudjadi, 2008).
Sifat-sifatpyrogen :
1. Termostabil, sehingga hanya dapat dihilangkan dengan pemanasan pada suhu 650
derajat C selama 1 menit.
2. Larut dalam air.
3. Tidak dipengaruhi oleh bakterisida biasa.
4. Tidak menguap.
5. Berat Molekul (BM) antara 15.000-4.000000 (BM tinggi, disebut lipopolisakarida)
6. Ukuran umumnya 1-50 millimikron.

Pyrogen secara garis besar dikelopokkan menjadi endogen dan eksogen yaitu :

1. Pirogen endogen adalah faktor-faktor yang berasal dari dalam tubuh kita sendiri
sebagai reaksi kekebalan melawan kuman penyakit yang masuk ke tubuh. Misalnya
interleukin-1 (IL-1), interleukin-6 (IL-6), alpha-interferon, dan tumor necrosis factor
(TNF).
2. Pirogen eksogen merupakan faktor eksternal tubuh yang menyebabkan gangguan
pada fungsi tubuh manusia. Misalnya bagian dari sel bakteri dan virus. Selain itu, bisa
juga berupa zat racun (toksin) yang dihasilkan oleh bakteri atau virus tertentu.

Saat ini, beberapa berbeda metode untuk mendeteksi pirogen tersedia, tes pirogen kelinci
(RPT), tes endotoksin bakteri (BET, juga disebut limulus amebocyte lysate assay (LAL), hanya
dapat digunakan untuk mendeteksi endotoksin pirogen) dan tes aktivasi monosit (MAT).
Tes pirogen kelinci (RPT), standar yang sering digunakan untuk deteksi pirogen,
didasarkan pada peningkatan suhu pada kelinci setelah intravena injeksi larutan pengujian atau
 implantasi alternatif perangkat medis. Pada awal abad ke-20, RPT diperkenalkan untuk
mendeteksi berbagai jenis kontaminan karena kepekaan kelinci terhadap pirogen mirip dengan
manusia. Namun, sensitivitas kelinci dipengaruhi oleh banyak faktor, seperti strain digunakan,
usia dan jenis kelamin kelinci, dan kondisi perumahan Selanjutnya, RPT itu mahal dan memakan
waktu. Sebagai tambahan, RPT hanya bersifat kualitatif daripada kuantitatif. Kontrol kualitas in
vitro yang bagus adalah endotoksin bakteri test (BET), yang mendeteksi endotoksin dari bakteri
gram negatif berdasarkan reaksi kaskade enzimatik koagulasi di kepiting amebocyte lysate, dan
karena itu juga disebut Limulus Tes Amebocyte Lysate (LAL).
Dibandingkan dengan RPT, tes LAL dapat melakukan pengukuran semi-kuantitatif atau
kuantitatif endotoksin, bahkan pada tingkat femtogramme, yang merupakan perkembangan besar
adalah mungkin untuk pertama kalinya mengukur endotoksin. Namun hasil LAL dipengaruhi
oleh protease. LAL juga telah menunjukkan reaktivitas bagi sebagian orang bentuk polimer
glukosa, misalnya, β- (1,3) -D-glukan, ada di sel-sel jamur, alga, dan ragi. Meskipun β- (1,3) -D-
glukan tidak pirogenik, dapat memicu kaskade koagulasi, mengganggu respon LAL ke LPS .
Selain itu, tes ini bereaksi sangat berbeda ke LPS dibandingkan dengan respon imun
manusia. Baru-baru ini, tes aktivasi monosit (MAT), alternatif metode tes RPT atau LAL, telah
dikembangkan. MAT adalah berdasarkan aktivasi monosit manusia oleh pirogen dan pada
pengukuran pelepasan sitokin, seperti interleukin-1β (IL-1β), interleukin- 6 (IL-6) dan tumor
necrosis factor α (TNF-α) oleh Enzim- Linked Immunosorbent Assay (ELISA), dan yang mirip
dengan manusia reaksi demam. Saat ini, MAT mampu mendeteksi semua jenis pirogen dan juga
lebih akurat, waktu efisien daripada metode lain. Namun, selain pertimbangan ekonomi, mungkin
masih ada tantangan untuk menghasilkan sejumlah besar darah manusia yang dikumpulkan
dengan kualitas seragam untuk digunakan di MAT karena perbedaan gaya hidup dan latar
belakang genetik antara donor. Karena itu, itu kebutuhan mendesak untuk mencari metode uji
pirogen baru.

E. KESIMPULAN
Pyrogen adalah zat-zat yang merangsang secara kimiawi heterogen berasal dari
mikroorganisme, khususnya bakteri, virus, dan jamur. Deteksi kontaminasi pirogenik adalah
bagian penting dari obat pengujian keamanan di industri farmasi, laboratorium rujukan seperti
serta lembaga perawatan kesehatan.
Saat ini, ada tiga metode untuk mendeteksi kontaminasi pirogenik: RPT, BET atau LAL,
dan MAT. RPT adalah tes yang paling direkomendasikan untuk mendeteksi pirogenik
kontaminasi dalam produk suntik. Namun, yang paling sensitif strain kelinci mengembangkan
peningkatan suhu yang signifikan setelah terpapar hingga 0,5 EU / mL endotoksin, sedangkan
ambang demam manusia kurang lebih 0,3 EU / mL [38]. BET (juga dikenal sebagai tes LAL)
 adalah rentan terhadap gangguan dari jenis produk tertentu, seperti glukan, produk biologis
dengan kadar protein dan lipid yang tinggi. Itu juga tidak efektif dalam mendeteksi pirogen "Non-
Endotoksin". Yang penting, karena mekanisme dasar yang sama sekali berbeda, BET tidak
mencerminkan reaksi demam manusia . Selain itu, kerentanan individu donor, dan pelaksanaan
metode, dari isolasi sel dan budaya untuk pembacaan ELISA akhir, semua mempengaruhi hasil
MAT. Penemuan baru, beberapa penelitian telah berfokus pada pelepasan prostaglandin E2
(PGE2), dari sel darah atau sel monocytic, sebagai ukuran dari reaksi demam. Untuk endotoksin
tertentu, aktivitas mereka menginduksi PGE2 berkorelasi dengan pyrogenicity lebih baik daripada
sifat LAL

F. DAFTAR PUSTAKA
1. Lachman, et al. 1986. TeoridanPraktekIndustriFarmasi Third Edition. Philadelphia: Lea and Febiger.
2. Sudjadi. 2008. Bioteknologikesehatan. Yogyakarta: Kanisius.
3. Suwandi. 1988. UjiPirogenitasdenganKelincidan Limulus Amebocyt Lysate. Cermin Dunia Kedokteran
no.52.
4. aili Lia,b, Henan Xua,c, Wei Jianga, Jing Lia, Wenjun Liua, Tao Wangd,∗, Min Fanga,e,∗∗
Development and characterization of stable reporter cells for fast and sensitive detection of
pyrogen. Analytical Biochemistry 557 (2018) 69–76
5. M.E. Lopes, et al,. Lipopolysaccharida potentiates platelet responses via toll-like receptor 4-
stimulated Akt-Erk-PLA2 signalling, Plos 12 (11) (2017) p.e0186981