LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM BIOKIMIA

”AKTIVITAS ENZIM AMILASE SALIVA DENGAN METODE

WOHLGEMUT’S”

ASISTEN DOSEN

Marwah Hulfah (1710911220032)

Nadya Salsabila (1710911320038)

DISUSUN OLEH

Diba Eka Diputri

1911111220021

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS LAMBUNG MANGKURAT

2020
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala rahmat yang telah Ia

berikan sehingga laporan akhir praktikum biokimia yang berjudul “Aktivitas Enzim

Amilase Saliva Dengan Metode Wohlgemut’s” ini dapat diselesaikan. Penyusun

mengucapkan terimakasih kepada pihak-pihak yang membantu dalam terselesaikannya

laporan ini, yaitu kakak-kakak asisten dosen yang membimbing dalam praktikum

biokimia, sehingga laporan akhir praktikum ini dapat selesai dengan tepat waktu, serta
pihak-pihak lain yang tidak dapat penyusun tuliskan satu per satu di sini.

Penyusun berusaha menuliskan laporan akhir praktikum biokimia ini dengan

sebaik-baiknya. Penyusun mohon maaf jika terdapat kesalahan kata maupun

kekurangan-kekurangan lain dalam laporan akhir praktikum biokimia ini. Penyusun

sangat mengharapkan saran dan kritik yang membangun dari pembaca demi
kesempurnaan isi dari laporan akhir praktikum ini.

Banjarmasin, 1 April 2020

Penyusun

ii
 DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL .....................................................................................i

KATA PENGANTAR ......................................................................................ii

DAFTAR ISI ....................................................................................................iii

BAB 1 PENDAHULUAN.................................................................................1

1.1 Latar Belakang ......................................................................................1

BAB 2 PEMBAHASAN ...................................................................................2

BAB 3 PENUTUP ............................................................................................9

3.1 Kesimpulan ...........................................................................................9

DAFTAR PUSTAKA

iii
 BAB 1
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Enzim pencernaan diproduksi dan disekresikan oleh sistem pencernaan untuk

menurunkan lemak, protein, dan karbohidrat untuk mencapai pencernaan dan setelah

itu penyerapan nutrisi. Suplementasi mereka, ketika ditunjukkan, dapat memberikan

bantuan yang dapat diandalkan sebagai perawatan tambahan beberapa gangguan yang

ditandai dengan gangguan fungsi pencernaan. Sampai saat ini, berbagai formulasi dari

suplemen enzim tersedia di pasaran, dan memang tersedia saat ini digunakan dalam

praktik klinis untuk pengelolaan beberapa penyakit pencernaan, terutama yang

melibatkan organ yang ditunjuk produksi enzim pencernaan, termasuk pankreas

eksokrin (yang menghasilkan enzim pankreas) dan usus kecil perbatasan sikat (yang

menghasilkan laktase). 21

Amilase saliva adalah enzim pembelahan glukosa-polimer yang diproduksi

oleh kelenjar saliva. Itu terdiri dari sebagian kecil dari total amilase yang diekskresikan,

yang sebagian besar dibuat oleh pankreas. Amilase mencerna pati menjadi molekul

yang lebih kecil, yang pada akhirnya menghasilkan maltosa, yang pada gilirannya

adalah dibelah menjadi dua molekul glukosa oleh maltase. Air liur memiliki banyak

peran penting dalam meningkatkan kesehatan, termasuk melindungi rongga mulut dan

memfasilitasi makan, serta dalam pencernaan makanan.3

1
 BAB 2
PEMBAHASAN

Saliva tersusun dari campuran secretary products yang kompleks (organik dan

anorganik) terutama disekresikan oleh kelenjar ludah. Ini adalah sumber penting untuk

mengevaluasi kondisi fisiologis dan patologis pada manusia. Saliva manusia memiliki

kandungan protein sekitar 0,5-3,0 mg/ml, yang sebagian besar disumbangkan oleh

kelenjar parotis. Protein ini memainkan peran biologis yang berbeda dalam
2
pencernaan, pelumasan dan pertahanan
host.

Saliva utuh (WS) adalah solusi kompleks yang dihasilkan dari sekresi dari

kelenjar ludah mayor dan minor, mukosa mulut sel, mikroorganisme, dan elemen dari

plasma, yang mencapai air liur melalui cairan crevicular gingiva. WS berpartisipasi

dalam mekanisme yang berbeda terkait dengan pengolahan makanan, perlindungan

jaringan mulut yang keras dan lunak, dan oral homeostasis mikroorganisme. Faktanya,

sebagian besar fungsi yang dikaitkan dengan WS dieksekusi oleh protein saliva.

Contoh dari fungsi protein saliva adalah pembentukan Acelle Enamel Pellicle (AEP),

sebuah protein lapisan dibentuk terutama oleh protein saliva dengan afinitas yang lebih

tinggi untuk hidroksiapatit. Terutama, AEP berfungsi sebagai fisik dan penghalang

kimia yang melindungi gigi. Namun, oral mikroorganisme juga menggunakan AEP

sebagai platform untuk secara selektif menempel pada permukaan gigi yang mengarah

ke pembentukan bioflm oral (plak gigi). 5

2
 3

Kelenjar parotis mengandung sejumlah besar sel asinar serosa dan

menghasilkan alfa-amilase tingkat tinggi dan protein kaya prolin. Sedangkan kelenjar

submandibular mengeluarkan alpha-amylase lebih sedikit dari kelenjar parotid, mereka

mengeluarkan lebih banyak lendir. Kelenjar Sublingual terutama terdiri dari sel-sel

mukosa dan mengandung konsentrasi tinggi glikoprotein (musin) dan lisozim dalam

jumlah besar. Kelenjar ludah minor terutama menghasilkan lendir dan lipase. 10

Enzim adalah katalis biologis yang mengatur reaksi biokimia spesifik. Dalam

beberapa tahun terakhir, potensi menggunakan mikroorganisme sebagai sumber

bioteknologi yang relevan secara industri, enzim telah merangsang minat dalam

eksplorasi aktivitas enzimatik ekstraseluler di beberapa mikroorganisme. Di antara

enzim industri penting, protease dan amilase dianggap sebagai enzim yang paling

menonjol karena mereka banyak digunakan dalam pembuatan bir, deterjen, dan

industri makanan. Amilase digunakan dalam industri pengolahan pati untuk hidrolisis

polisakarida seperti pati menjadi konstituen gula sederhana. Dengan munculnya

perbatasan baru dalam bioteknologi, spektrum aplikasi amilase telah berkembang

menjadi banyak bidang baru seperti kimia klinis, kedokteran, dan analitik. 12

Manusia memiliki banyak salinan gen yang mengkode enzim, tetapi tepat

jumlahnya bervariasi antar orang. Penelitian sebelumnya telah menemukan bahwa

populasi dengan salinan lebih banyak juga makan lebih banyak pati; jika korelasi ini

juga ada pada spesies lain, itu bisa membantu untuk memahami caranya diet

mempengaruhi dan membentuk informasi genetik. Selain itu, tidak jelas bagaimana
 4

amilase muncul hadir dalam air liur, karena nenek moyang mamalia hanya

menghasilkan protein di pankreas. 14

Saliva mengandung sejumlah besar protein yang terlibat dalam lipase,

peptidase, dan kegiatan hidrolase. Ketika membandingkan saliva dan proteome plasma,

jelas bahwa distribusi protein saliva diarahkan untuk proses metabolisme dan

katabolik. Ini menunjukkan bahwa air liur memiliki peran fisiologis utama dalam

pencernaan makanan. Yang paling berlimpah dalam air liur manusia adalah enzim

pencernaan α-amilase. Enzim ini memecah molekul pati besar menjadi dekstrin dan

selanjutnya menjadi lebih kecil, maltooligosaccharida (MOS) yang mengandung

hubungan α-D-(1,4), isomaltooligosaccharides (IMOS) yang mengandung hubungan

α-D-(1,6), trisaccharide maltotriose, dan disaccharide maltose. Glukosa kemudian akan

dihasilkan dari maltosa melalui aksi disakarida enzim, seperti maltase. Dalam tubuh

manusia, amilase sebagian besar diproduksi oleh kelenjar ludah dan pankreas.

Meskipun amilase saliva dan pankreas serupa, mereka dikodekan oleh gen yang

berbeda (AMY1 dan AMY2, masing-masing) dan menunjukkan tingkat yang berbeda

mengenai aktivitas terhadap pati dari berbagai asal. 3

Signifikansi fisiologis amilase saliva masih terbuka dan aspek-aspeknya

kontroversial, misalnya, fungsi sekresi normatif dalam plasma tetap menjadi misteri.

Amilase saliva memiliki waktu kontak aktif yang relatif singkat dengan pati. Sekali

bolus makanan ditelan dan diinfiltrasi dengan jus lambung, aktivitas kataboliknya

sebagian besar dihentikan oleh rendahnya pH asam. Beberapa aktivitas tetap berada

dalam partikel karena perlindungan penghalang yang disediakan oleh sebagian pati
 5

dicerna di bagian luar partikel, tetapi sebagian besar pati tersebut dicerna oleh amilase

pankreas yang melimpah, yang dilepaskan ke bagian duodenum usus kecil. Namun

demikian, penelitian telah menunjukkan pati yang cukup terhidrolisis terjadi dalam

beberapa detik di rongga mulut, mengubah tekstur agar-agar pati menjadi semiliquid.

Perubahan tekstur ini sendiri mungkin mempengaruhi pati pencernaan, preferensi

indera, dan asupan pati. Selain itu, penelitian terbaru juga menunjukkan bahwa produk

amilolitik MOS kecil dapat dideteksi melalui sistem rasa pada rongga mulut. Temuan

ini mendukung peran pre-absorptif fisiologis amilase saliva dalam pencernaan pati. 3

Pati pada dasarnya dapat dihidrolisis oleh enzim amilase yang diproduksi oleh

saliva manusia atau makhluk hidup lainnya. Industri pati menggunakan enzim amilase

untuk menghidrolisis polisakarida menjadi gula sederhana. Amilase secara khusus

mengkatalisasi reaksi hidrolisis -1,4-glikosidik polisakarida untuk menghasilkan

oligosakarida, maltosa dan D-glukosa. Beberapa peneliti mempelajari pengaruh

komposisi medium pada produksi alpha amylase oleh B. licheniformis. Aktivitas enzim
-amilase yang diisolasi dari Bacillus licheniformis mampu menghidrolisis bubur

dedak dan menunjukkan aktivitas enzim tinggi pada 40-90 ° C dan kemudian turun

pada suhu di atas 100 ° C. Hasil lain mengenai aktivitas enzim amilase yang diisolasi

dari bakteri tanah mencapai aktivitas tinggi 0,94 unit/mL pada pH 7 dan 35-40 ° C.
Tinggi aktivitas enzim -amilase pada 40°C, pH 7,5 pada 15,76 dan 31,11 Unit/mL

sementara pada konsentrasi substrat 2%, enzim menunjukkan aktivitas 8,23 Unit/mL.
 6

Enzim memiliki suhu dan pH optimal untuk diperoleh hasil optimal. Penyimpangan

dari kondisi optimal akan menyebabkan berkurangnya aktivitas enzim.1,6

Amilase adalah enzim ekstraseluler, yang terlibat dalam industri pengolahan

pati di mana ia memecah pati menjadi konstituen gula sederhana. Alpha amylase miliki

aplikasi luas dalam pengolahan pati, pembuatan bir dan produksi gula, dalam industri

tekstil dan deterjen proses manufaktur. Menariknya, enzim pertama yang diproduksi

secara industri adalah amilase dari jamur sumber pada tahun 1894, yang digunakan

sebagai bantuan farmasi untuk pengobatan gangguan pencernaan. Amilase adalah salah

satu enzim yang paling penting dan merupakan 30% dari produksi enzim. Enzim ini

ditemukan pada hewan, tumbuhan, bakteri, dan jamur. Berbagai jenis mikroorganisme

seperti bakteri, jamur dan ragi telah dilaporkan sebagai sumber amilase dan mereka

properti dijelaskan. Meskipun ada banyak sumber mikroba yang tersedia untuk amilase

produksi, strain Bacillus memiliki kemampuan untuk menghasilkan sejumlah besar

amilase. Mereka menghasilkan sekitar 60% dari enzim yang tersedia secara komersial.

Amilase termostabil yang paling banyak digunakan dalam industri pati adalah

diproduksi oleh Bacillus subtilis dan Bacillus mesentericus. Konversi enzimatik pati

menjadi dekstrin dan gula berlangsung oleh enzim yang diperoleh dari tumbuhan,

hewan, bakteri, dan jamur. 9,15

Respon glukosa setelah makan yang diukur dengan indeks glikemik sangat

berbeda tergantung pada makanan yang mana dicerna, dan melakukan diet dengan

indeks glikemik tinggi diduga menjadi faktor risiko penyakit metabolik. Kopi fenolat
 7

mungkin memiliki efek yang sebanding dengan obat acarbose, yaitu penghambatan

aktivitas pencernaan α-amilase dan α-glukosidase. 4,11

Tingkat alpha-amylase saliva (sAA) baru-baru ini diselidiki sebagai indikator

aktivitas simpatik. Amilase dan lipase adalah enzim pankreas yang digunakan sebagai

penanda pankreatitis akut karena pelepasan mereka dari sel asinar pankreas. Pasien

dengan pankreatitis akut cenderung mengalami sakit perut yang parah, mual dan

muntah. Pada pankreatitis akut, amilase cenderung naik dengan cepat dengan tingkat

tiga kali batas atas normal dalam 12 jam presentasi, kembali normal 3 hingga 5 hari

setelah resolusi. Amilase juga diproduksi oleh kelenjar saliva (S-amylase), dengan

isoform saliva dan pankreas berbagi 97% homologi. S-amilase juga ditemukan di tuba

uterina, namun demikian, jaringan ovarium, paru-paru, dan prostat kontribusi terhadap

sejumlah kecil amilase saliva. Amilase dalam saliva membantu pemecahan karbohidrat

selama pengunyahan tetapi juga memberikan kekebalan mukosa. Amilase dapat tetap

normal pada individu dengan gejala pankreatitis akut dan dapat meningkat pada

penyakit kelenjar ludah dan radang intra-abdominal. 17,18

Obesitas adalah masalah kesehatan masyarakat yang menjadi predisposisi

individu dengan risiko tinggi kematian dini, melalui suatu peningkatan risiko penyakit

kronis, termasuk diabetes tipe 2 mellitus, penyakit kardiovaskular, hipertensi, dan

kanker. Prevalensi obesitas meningkat di seluruh dunia, tingkat yang mengkhawatirkan

di kedua negara berkembang dan maju. Secara global, sekitar 2,1 miliar orang, hampir

30% dari jumlah populasi dunia, kelebihan berat badan atau obesitas. Pada 2030,

diperkirakan 38% dari populasi orang dewasa di dunia adalah kelebihan berat badan,
 8

dan 20% lainnya akan mengalami obesitas. Di Arab Saudi, prevalensi obesitas pada

populasi umum adalah sekitar 28% pada pria dan 44% pada wanita. 13

Diabetes mellitus adalah kelainan metabolisme, suatu penyakit yang

mengancam yang meningkat dari hari ke hari. Insulin adalah pemain kunci untuk

mengatur karbohidrat, lemak dan metabolisme protein. Kekurangan insulin dapat

mempengaruhi metabolisme penting di atas. Enzim alfa amilase dan alfa glukosidase

bertanggung jawab pemecahan karbohidrat menjadi glukosa. Alfa amilase bertanggung

jawab untuk menghidrolisis pati terurai menjadi glukosa sebelum penyerapan. Karena

penyebaran diabetes dan obesitas, perhatian signifikan telah diberikan pada α-amilase

baru dan inhibitor α-glikosidase selama dekade terakhir. Terapi yang tersedia untuk

mengobati diabetes tipe-II terdiri dari stimulasi endogen sekresi insulin, meningkatkan

aktivitas insulin di jaringan target serta penghambatan α-amilase enzim untuk

mengurangi degradasi pati menjadi mengurangi produksi glukosa. Penghambatan

amilase pencernaan dapat memperlambat pencernaan pati, dengan demikian

merupakan kesempatan untuk menunda pengambilan glukosa turunan pati dan

meningkatkan respons glikemik postprandial. 7,8,16,19,20

 BAB III
PENUTUP

3.1 Kesimpulan

Enzim adalah katalis biologis yang mengatur reaksi biokimia spesifik. Di

antara enzim industri penting, protease dan amilase dianggap sebagai enzim yang

paling menonjol karena mereka banyak digunakan dalam pembuatan bir, deterjen, dan

industri makanan. Amilase digunakan dalam industri pengolahan pati untuk hidrolisis

polisakarida seperti pati menjadi konstituen gula sederhana. Dengan munculnya

perbatasan baru dalam bioteknologi, spektrum aplikasi amilase telah berkembang

menjadi banyak bidang baru seperti kimia klinis, kedokteran, dan analitik.

Amilase adalah salah satu enzim yang paling penting dan merupakan 30% dari
produksi enzim. Amilase secara khusus mengkatalisasi reaksi hidrolisis -1,4-

glikosidik polisakarida untuk menghasilkan oligosakarida, maltosa dan D-glukosa.

Enzim α-amilase memecah molekul pati besar menjadi dekstrin dan selanjutnya

menjadi lebih kecil, maltooligosaccharida (MOS) yang mengandung hubungan α-D-

(1,4), isomaltooligosaccharides (IMOS) yang mengandung hubungan α-D-(1,6),

trisaccharide maltotriose, dan disaccharide maltose. Glukosa kemudian akan dihasilkan

dari maltosa melalui aksi disakarida enzim, seperti maltase.

9
 DAFTAR PUSTAKA

1. Miksusanti, et al. Film (Patch) Based On Starch Compound Hydrolise By

Amylase From Saliva And Bacteria. Sriwijaya International Conference on

Basic and Applied Science. 2019; 1282: 1-13.

2. Neha T, et al. Salivary Amylase as a Biomarker in Health and Periodontal

Diseases. International Journal of Contemporary Medical Research. 2018;

5(4): D4-D8.

3 . Gachons CPD & Breslin PAS. Salivary Amylase: Digestion and Metabolic
Syndrome. HHS Public Access. 2016; 16(10): 1-12.

4 . Sonestedt E. Salivary Amylase Gene Variations Influence The Physiologic

Response To Starchy Foods: 2 Sides Of The Story. American Society for

Nutrition. 2018; 108: 656-657.

5. Crosara KTB, et al. Revealing the Amylase Interactome in Whole Saliva Using

Proteomic Approaches. BioMed Research International. 2018; 2018: 1-15.

6 . Ali YRA, et al. α-Amylase Production by Thermophilic Isolates of Bacillus

licheniformis. EC MICROBIOLOGY. 2018; 14: 225-233.

7 . Chelladurai GRM & Chinnachamy C. Alpha Amylase And Alpha Glucosidase

Inhibitory Effects Of Aqueous Stem Extract Of Salacia Oblonga And Its GC-

MS Analysis. Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences. 2018; 54(1): 1-

10.
 8. Admassu H, et al. Evaluation of the in vitro α-Amylase Enzyme Inhibition

Potential of Commercial Dried Laver (Porphyra Species) Seaweed Protein

Hydrolysate. Turkish Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 2018; 18: 547-
556.

9. Ekka A & Namdeo N. Screening, Isolation and Characterization of Amylase

Producing Bacteria and optimization for Production of Amylase. Journal of

Biotechnology and Biochemistry. 2018; 4(2): 50-56.

10. Bhattarai K, et al. Compliance with Saliva Collection Protocol in Healthy

Volunteers: Strategies for Managing Risk and Errors. International Journal of

Medical Sciences. 2018; 15: 823-831.

11. Silavwe HN & Williamson G. Chlorogenic And Phenolic Acids Are Only Very

Weak Inhibitors Of Human Salivary Α-Amylase And Rat Intestinal Maltase

Activities. Food Research International. 2018; 113: 452-455.

12. Tiwari SP, et al. Amylases: An Overview With Special Reference To Alpha
Amylase. Journal of Global Biosciences. 2015; 4(1): 1886-1901.

13. Aldossari NM, et al. Association between salivary amylase enzyme activity and obesity
in Saudi Arabia. Medicine. 2019; 98: 1-5.

14. Pajic P, et al. Independent Amylase Gene Copy Number Bursts Correlate With Dietary
Preferences In Mammals. eLIFE. 2019; 8: 1-22.

15. Naik VK, et al. Evaluation Of Salivary Alpha-Amylase Levels And Perceived

Stress Scale Scores In Chronic Periodontitis Patients. European Federation of

Periodontology. 2018; 2018: 177.
 16. Samuel DA. Extraction And Purification Of Human Salivary A-Amylase And

Testing The Difference In The Inhibition By Polyphenols. School of Food

Science and Nutrition. 2018; 2018: 1-10.

17. Cross AC, et al. Fluctuating Amylase in a Female Child with Epilepsy and

Global Developmental Delay and Absence of Pancreatitis. Biochemistry &

Molecular Biology Journal. 2018; 4(2): 1-3.

18. Ozdemir A, et al. Evaluation Of Salivary Alpha-Amylase Activity After Stroke.

Medicine Science. 2019; 8(4): 852-856.

19. Freitas D & Feunteun SL. Inhibitory Effect Of Black Tea, Lemon Juice, And

Other Beverages On Salivary And Pancreatic Amylases: What Impact On

Bread Starch Digestion? A Dynamic In Vitro Study. Food Chemistry. 2019;

297: 1-8.

20. Lehoczki G, et al. Inhibition Studies On Α-Amylase Using Isothermal Titration

Calorimetry. De Gruyter. 2018; 2: 11-16.

21. Ianiro G, et al. Digestive Enzyme Supplementation in Gastrointestinal

Diseases. Current Drug Metabolism. 2016; 17: 187-193.