MAKALAH DENTISTRY UPDATE

Metode Baru untuk Perbaikan Tulang Alveolar

Menggunakan Gigi yang Dicabut untuk Bahan Cangkok

Pembimbing : Dr. drg. Didin Erma Indahyani, M.Kes.

Oleh :

M. Ziyad Afif (181610101119)

Salsabila Izdihar (181610101120)
Ahmad Yarham (181610101122)
Syafika Nuring (181610101123)
Octaviana Putri (181610101125)

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS JEMBER
2021
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kepada kehadirat Allah SWT. atas segala nikmat, rahmat dan
karunia-Nya. Sehingga tugas makalah ini dapat terselesaikan. Dalam penyelesaian
makalah ini, penulis mengucapkan terimakasih kepada Dr. drg. Didin Erma
Indahyani, M.Kes. selaku dosen dentistry update yang telah membimbing kami
hingga selesainya makalah ini

Dalam penulisan makalah ini, penulis sadar bahwa masih terdapat

kekurangan. Oleh karena itu, penulis sangat mengharapkan adanya kritik dan saran
agar penulis dapat memperbaiki dan tidak terulang di waktu kedepan. Akhir kata
penulis mengucapkan terimakasih.

Jember, 9 Mei 2021

Penyusun

2
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR.................................................................................................2

DAFTAR ISI................................................................................................................3

I. ABSTRAK...................................................................................................................4

II. PENDAHULUAN.......................................................................................................5

III. BAHAN DAN METODE..........................................................................................8

IV. HASIL........................................................................................................................11

V. DISKUSI....................................................................................................................14

VI. KESIMPULAN.........................................................................................................24

DAFTAR PUSTAKA...............................................................................................22

3
 ABSTRAK

Latar Belakang: Dalam bidang klinis pembentukan tulang rahang,

penggunaan tulang autogenous sebagai bahan cangkok merupakan standar emas.
Namun, ada beberapa masalah dengan teknik ini, seperti risiko infeksi pada sisi
donor, terbatasnya jumlah massa tulang yang tersedia, dan resorpsi tulang yang
dicangkokkan. Kami meneliti potensi penggunaan gigi sebagai bahan cangkok tulang
untuk pembentukan tulang rahang karena pulpa gigi mengandung sel punca, termasuk
krista neural yang tidak berdiferensiasi sel turunan.

Metode: Cacat tulang alveolar dibuat pada tikus Wistar, dan cacat diisi
dengan bahan cangkok tulang gigi atau iliaka, atau dibiarkan sebagai kontrol. Potensi
penggunaan gigi sebagai material cangkok tulang untuk pembentukan tulang rahang
diukur dengan menggunakan reaksi berantai polimerase real-time, microcomputed
tomography, dan analisis histologis.

Hasil: Reaksi berantai polimerase mengungkapkan bahwa ekspresi P75, P0,

nestin, dan musashi-1 secara signifikan lebih tinggi pada gigi dibandingkan pada
cangkok tulang rahang bawah dan tulang iliaka. Pewarnaan hematoksilin dan eosin
serta mikrokomputasi tomografi menunjukkan bahwa pada minggu ke 8 bahan
cangkok gigi menghasilkan jumlah tulang baru yang sama dibandingkan dengan
bahan cangkok tulang iliaka. Osteopontin diekspresikan pada bahan cangkok gigi dan
tulang iliaka pada 6 dan 8 minggu setelah operasi. Sialoprotein dentin diekspresikan
dalam bahan cangkok gigi di tulang baru hanya dalam 6 minggu.

Kesimpulan: Hasil ini menunjukkan bahwa gigi dapat menjadi bahan

alternatif untuk tulang autogenous untuk mengobati kerusakan tulang alveolar dengan
pencangkokan.

KATA KUNCI: Regenerasi tulang; pengganti tulang; cangkok, tulang; puncak saraf;
gigi.

4
 PENDAHULUAN

Terdapat berbagai bahan cangkok tulang yang dapat digunakan dalam

pembentukan tulang gigi secara klinis termasuk allografts, xenografts, dan alloplasts.
Tiga sifat yang dibutuhkan untuk bahan cangkok tulang yang ideal yaitu
osteokonduksi (menyediakan perancah untuk regenerasi tulang), osteoinduksi
(mendorong perekrutan sel-sel pembentuk tulang, seperti sel-sel yang tidak
berdiferensiasi dan preosteoblas, dan pembentukan tulang dari sel-sel ini), dan
osteoproliferasi (induksi sel yang terkandung dalam bahan cangkok untuk mendorong
regenerasi tulang). Allograft kekurangan osteoproliferasi, sedangkan xenograft dan
aloplas hanya menunjukkan osteokonduksi. Karena hanya tulang autogenous yang
menunjukkan ketiga sifat tersebut, pencangkokan tulang autogenous saat ini dianggap
sebagai metode terbaik (Schallhorn, 1980).

Tulang iliaka adalah tulang autogenous yang sering digunakan dan

dicangkokkan ke dalam defek tulang alveolar pada kebanyakan kasus celah langit-
langit (Schallhorn, 1967). Namun, terdapat masalah dengan pencangkokan tulang
autogenous, seperti risiko infeksi pada sisi donor, terbatasnya jumlah tulang yang
tersedia. massa, dan resorpsi yang ditandai dari tulang yang dicangkokkan. Secara
perkembangan, sebagian besar tulang batang dan ekstremitas, termasuk tulang iliaka,
dibentuk oleh osifikasi endokondral, sedangkan tulang rahang dan alveolar dibentuk
oleh osifikasi intramembrane (Koole dkk, 1989). Menggunakan tulang dengan pola
osifikasi yang berbeda dari tulang rahang dan tulang alveolar sebagai bahan cangkok
untuk rekonstruksi tulang rahang menjadi perhatian utama. Donovan dkk (1993) dan
Donos dkk (2005) mencangkok tulang iliaka dan kranial dan menyelidiki laju resorpsi
tulang graft setelah 6 bulan. Mereka mengamati bahwa sekitar dua kali lebih banyak
tulang iliaka yang diserap dibandingkan dengan tulang kranial yang dicangkokkan.
Tulang rahang dan tulang alveolar keduanya berbeda dari sel krista saraf.

5
 Vertebrata berkembang dari tiga lapisan germinal, ektoderm, mesoderm, dan
endoderm, serta sejenis jaringan yang berasal dari daerah fusi tabung saraf, sel krista
saraf. Ini disebut lapisan kuman keempat karena kepentingannya. Sel-sel yang
diturunkan dari krista saraf telah terbukti menunjukkan multipotensi dan
berdiferensiasi menjadi sel mesenkim mesodermal, meskipun ektodermal. Mereka
menunjukkan kapasitas tinggi untuk regenerasi diri dan bertahan di jaringan dewasa
(Chung dkk, 2009).

Jaringan yang berasal dari puncak saraf termasuk tulang maksilofasial (tidak
termasuk tulang oksipital, sphenoid, temporal, dan ethmoid); tulang rawan; gigi; dan
sel saraf dan glial (Yoshita dkk, 2008). Dari jumlah tersebut, gigi mengandung sel
punca di pulpa gigi, dan telah disarankan bahwa pulpa gigi mengandung sel yang
diturunkan dari krista saraf yang tidak berdiferensiasi (Stevens dkk, 2008). Seo dkk.
(2008) sel punca yang dikultur diisolasi dari pulpa gigi, dicangkokkan menjadi cacat
yang disiapkan di tulang tengkorak, dan diamati pembentukan jaringan keras. Selain
itu, dentin mengandung faktor pertumbuhan: insulin-like growth factor (IGF) -II,
bone morphogenetic protein (BMP) -2, dan transforming growth factor (TGF) -b
(Schmidt, 2005). Cementum mengandung TGF-b, IGF-I, dan kolagen tipe I dan III
(Gao dkk, 1998). Saygin dkk. (2000) menyarankan bahwa penggunaan sementoblas
untuk regenerasi jaringan periodontal bermanfaat. Isaka dkk. (2001) melaporkan
bahwa ligamentum periodontal memiliki kemampuan untuk meregenerasi tulang, dan
Flores dkk (2008) meregenerasi jaringan periodontal menggunakan kultur sel ligamen
periodontal. Ligamentum periodontal juga mengandung TGF-b, IGF-I, faktor
pertumbuhan fibroblast dasar, faktor pertumbuhan endotel vaskular, BMP-2, faktor
pertumbuhan turunan trombosit (PDGF), dan kolagen tipe I. Selanjutnya, dentin dan
sementum mengandung protein yang umum pada tulang, seperti osteopontin (OPN),
bone sialoprotein (BSP), osteocalcin, dentin sialoprotein (DSP), dentin matrix
protein-1 (DMP-1), kolagen tipe I, osterix, dan Cbfa1 (Runx2). Ini dilaporkan terlibat
dalam pembentukan dan resorpsi tulang (Hoeppner dkk, 2009).

6
 Dengan demikian, kami menganggap bahwa gigi yang mengandung sel-sel
yang diturunkan dari krista saraf yang tidak berdiferensiasi, protein yang terlibat
dalam pembentukan tulang, dan faktor pertumbuhan dapat digunakan sebagai bahan
cangkok tulang untuk pembentukan tulang rahang.

Meskipun belum ada penelitian tentang gigi yang digunakan sebagai bahan
cangkok tulang, namun telah dilaporkan adanya penggantian gigi dengan tulang. Pada
kasus sebelumnya, sel osteoklas muncul di rongga pulpa setelah reimplantasi gigi dan
pulpa digantikan oleh jaringan tulang, diikuti oleh resorpsi akar dan ankilosis.
Akhirnya, seluruh akar diintegrasikan ke dalam tulang alveolar sekitarnya
(Tsukamoto dkk, 2006). Laporan ini menunjukkan bahwa tulang rahang dan gigi
memiliki tingkat afinitas yang tinggi satu sama lain.

Berdasarkan informasi sebelumnya, kami menyelidikinya kemungkinan

menggunakan gigi sebagai bahan cangkok tulang untuk pembentukan tulang rahang
dengan membandingkannya dengan cangkok tulang iliaka autogenous.

7
 BAHAN DAN METODE

Reaksi Rantai Polimerase Waktu Nyata (PCR) Isolasi RNA. Gigi, tulang
iliaka, dan tulang rahang bawah (kontrol) dimusnahkan dari tikus Wistar jantan
berusia 12 minggu (350 hingga 400 g), dan RNA diekstraksi dari jaringan yang
terpapar pengobatan penstabil RNA sesuai dengan protokol pabrikan.

Transkripsi terbalik. Setelah isolasi RNA, kit reverse transcriptase (RT)

digunakan untuk membuat cDNA. Campuran itu terdiri dari 13 m l dari total RNA, 2
m l primer acak, 2 m l dari deoxynucleotide triphosphate, 2 m l buffer RT, dan 1 m l
RT omniscript ditambahkan ke volume akhir 20 m l. Campuran itu dipanaskan saya
selama 60 menit pada suhu 37 C.

PCR semikuantitatif. CDNA dari reaksi RT digunakan sebagai template di

PCR. Kami menggunakan empat primer (P75, P0, nestin, dan musashi-1 ††).
Campuran PCR terdiri dari 2 m l sampel cDNA, 1 m l dari setiap primer, 7 m l air
bebas RNase, dan 10 m l dari campuran ekspresi gen ‡‡ hingga volume akhir 20 m l.
Kami melakukan PCR waktu nyata §§ selama 50 siklus pada 95 C selama 15 detik,
60 C selama 1 menit diikuti 50 C selama 2 menit, dan 95 C selama 10 menit. Kami
menghitung tingkat ekspresi relatif dengan membagi intensitas sinyal dari setiap gen
dengan GAPDH.

Untuk perhitungan, serangkaian standar pengenceran lima kali lipat dan

kontrol negatif (air bebas RNase) dijalankan di samping sampel grup), gigi kecuali
enamel dengan b- TCP kompleks; kelompok 2 (kelompok tulang), tulang iliaka
dengan b- Kompleks TCP (kontrol positif); dan kelompok 3 (kelompok kontrol),
nomaterial (kontrol negatif). Komite Penelitian Hewan Universitas Showa, Tokyo,
Jepang, menyetujui semua prosedur.

8
Persiapan Bahan Cangkok
Semua prosedur pembedahan dilakukan dengan anestesi umum dalam kondisi
steril. Setelah inhalasi anestesi dengan etil eter, anestesi umum dicapai dengan
injeksi natrium pentobarbital intraperitoneal. Pada kelompok gigi, gigi dicabut pada
sisi yang berlawanan dengan daerah di mana defek tulang alveolar dibuat. Bagian
mahkota dari gigi yang dicabut dicabut dengan gunting, dan bagian akar dari gigi
yang tersisa dipotong sedekat mungkin menjadi 500 m m sekaligus. Selanjutnya, gigi
yang sudah dipotong dicampur dengan jumlah yang terukur b- TCP.

Cangkok ini disiapkan di atas es. Dalam kelompok tulang, tulang kanselus
dari tulang iliaka diangkat, digranulasi, dan dicampur b- TCP. Bahan cangkok yang
digunakan pada kedua kelompok kira-kira 0,2 g. Rasio campuran bahan transplantasi
dan b- TCP disesuaikan menjadi 2: 1.

Protokol Bedah
Sayatan dibuat di palate, dan flap dengan ketebalan penuh dibuat untuk
mengekspos tulang alveolar. Cacat tulang alveolar, diameter 2 mm, dibuat dengan bur
intan. Selanjutnya, salah satu dari dua bahan dicangkokkan ke setiap cacat tulang
alveolar (kelompok kontrol tidak menerima implantasi bahan cangkok), dan membran
kolagen bilayer yang dapat diserap tubuh ditempatkan di atas kerusakan tulang di
semua kelompok. Semua bahan cangkok ditransplantasikan ke cacat dalam waktu 30
menit setelah pemusnahan. Flap direposisi dan dijahit dengan jahitan resorbable,
menutupi cacat tulang.

Perawatan Pasca Bedah

Semua tikus menerima antibiotik (penisilin G kalium, 200.000 unit aku aku
aku) secara intramuskular setiap hari selama 3 hari setelah pembedahan. Tikus diberi
makan makanan lunak selama 2 minggu untuk mengurangi potensi kerusakan
mekanis.

9
Tomografi Komputer Mikro ( m- CT)
Pengamatan m- CT digunakan untuk mengamati pembentukan tulang baru.
Gambar diperoleh segera setelah operasi dan pada minggu ke 6 dan 8. Kami
memastikan bentuk tulang rahang atas tikus utuh dengan percobaan percontohan.

Prosedur Histologis
Hewan disuntik mati 6 dan 8 minggu setelah operasi dengan overdosis etil
eter. Semua cacat dalam kelompok dibedah bersama dengan lunak sekitarnya. dan
jaringan keras. Bagian blok difiksasi dengan 4% paraformaldehyde, dekalsifikasi
selama 2 hari, dinetralkan dengan 5% natrium sulfat anhidrat, dan kemudian ditanam
dalam parafin. Bagian dipotong, distaraf, dan diwarnai dengan hematoxylin dan eosin
(H&E). Kami memastikan bentuk tulang rahang atas tikus utuh dengan percobaan
percontohan di bagian jaringan.

Prosedur Imunohistokimia
Bagian (7 m m) dipotong, dipasang pada slide, deparaffinisasi, dan diinkubasi
dengan antibodi anti-OPN dan antibodi anti-DSP pada pengenceran yang tepat.
Spesimen yang akan direaksikan dengan antibodi anti-DSP diberi perlakuan
sebelumnya dengan menggunakan aktivator selama 10 menit.

10
 HASIL

Real-Time PCR
Hasil PCR real-time untuk ekspresi P75, P0, nestin, dan musashi-1 pada gigi,
tulang iliaka, dan tulang rahang bawah (kontrol) ditentukan secara kuantitatif (Gbr.
1). Ekspresi dari keempat gen secara signifikan lebih tinggi pada gigi dibandingkan
pada tulang mandibula dan iliaka. Pada tulang iliaka ekspresi dari keempat gen tidak
signifikan.

Pengamatan Klinis
Penyembuhan luka berjalan lancar. Enam minggu setelah operasi, luka pada
gigi, tulang, dan kelompok kontrol tampak serupa. Tidak ada paparan material atau
reaksi peradangan yang intens yang diamati selama periode penyembuhan.

Pengamatan µ-CT
Penyerapan bahan cangkok dan pembentukan tulang baru dengan waktu baik
di kelompok gigi dan tulang dikonfirmasi dengan µ-CT (Gambar 2 dan 3). Dalam
kelompok tulang, pembentukan tulang baru yang melebihi daerah tulang yang rusak
dicatat 6 minggu setelah pembedahan, tetapi resorpsi tulang baru yang ditandai terjadi
pada 8 minggu. Pada kelompok gigi, pembentukan tulang baru mengisi defek tulang
pada 6 minggu, dan tulang baru dipertahankan pada 8 minggu. Sedikit pembentukan
tulang baru dicatat pada kelompok kontrol pada 8 minggu.

Pengamatan Histologis
Pada kelompok gigi, sedikit reaksi inflamasi tidak terjadi di sekitar defek pada
6 minggu, tetapi pembentukan tulang baru dikonfirmasi pada defek tersebut. Pada
reaksi kelompok tulang, peradangan ringan juga ditunjukkan. Volume pembentukan
tulang baru melebihi daerah tulang yang rusak pada 6 minggu. Selanjutnya, sumsum
tulang yang terbentuk lebih banyak dibandingkan dengan kelompok gigi. Pada
kelompok kontrol, tulang kecil baru terbentuk pada minggu ke 6 atau 8. Tidak ada
tanda-tanda peradangan yang diamati pada cacat apapun 8 minggu setelah operasi.

11
Resorpsi tulang baru terjadi pada 8 minggu sedangkan dibandingkan dengan 6
minggu pada kelompok tulang. Sebaliknya, sebagian besar tulang baru mengisi defek
pada minggu ke-8 pada kelompok gigi (Gbr. 4).

Gambar 1.

Ekspresi P75 (A), P0 (B), Nestin (C), dan Musashi-1 (D) di gigi, tulang
iliaka, dan kontrol tidak terawat (tulang mandibula). Dua puluh tikus jantan
Wistar berusia 12 minggu dibagi secara acak menjadi empat kelompok yang
masing-masing terdiri dari lima tikus. Semua ekspresi dari empat gen secara
signifikan lebih tinggi pada gigi dibandingkan pada tulang rahang bawah
dan tulang iliaka

12
Pengamatan Imunohistokimia
Di sekitar tulang yang baru terbentuk pada kelompok gigi dan tulang pada
minggu ke 6 dan 8, OPN diekspresikan lebih luas. Pada kelompok kontrol, ada sedikit
ekspresi OPN pada minggu ke-6 dan ke-8. DSP diekspresikan dalam cangkok
fragmen gigi. Pada defek tulang, ekspresi positif pada 6 minggu, tetapi hampir tidak
terlihat pada 8 minggu (Gambar 5 dan 6).

13
 DISKUSI

Peneliti menyelidiki kegunaan gigi sebagai bahan cangkok tulang untuk

pembentukan tulang rahang dengan membandingkan cangkok dilakukan dengan gigi
dan tulang iliaka autogenous. Perawatan cacat dilakukan di tulang tengkorak tikus
menggunakan bahan cangkok telah dilaporkan (Seo & Schmidt, 2009). Namun, telah
dilaporkan bahwa beberapa bagian tulang tengkorak berasal dari perkembangan sel
yang berbeda. Yoshida dkk. melaporkan bahwa tulang frontal adalah berasal dari sel
krista saraf, sedangkan tulang temporal berasal dari mesoderm.dll. Sesuai dengan
Park dkk., peneliti menggunakan tulang rahang untuk cangkok tempat tidur. untuk m-
CT dan pemeriksaan histologis di 6 dan 8 minggu setelah okulasi berdasarkan proses
penyembuhan jaringan tulang rahang tikus, seperti yang dilaporkan oleh Schmitz dkk.
dan Hyun dkk.

14
 Gambar 3. Gambar m-CT menunjukkan cangkok gigi segera
setelah operasi (A), 6 minggu setelah operasi (B), dan 8 minggu
setelah operasi (C). Gambar m CT menunjukkan iliaka cangkok
tulang segera setelah pembedahan (D), 6 minggu setelah
pembedahan (E), dan 8 minggu setelah pembedahan (F). Citra
m-CT pada kelompok kontrol (tanpa graft) segera setelah
operasi (G), 6 minggu setelah operasi (H), dan 8 minggu setelah
operasi (I).

Shapoff et al. melaporkan bahwa ukuran partikel bahan cangkok

mempengaruhi pembentukan tulang di kemudian hari. Bhaskar dkk. melaporkan
bahwa ukuran partikel cangkok tulang yang ideal bahan adalah 500 mm dan jarak
antar partikel adalah 150 mm. Ukuran ini direkomendasikan karena resorpsi
membutuhkan waktu yang lama jika ukuran partikel terlalu besar, dan partikel diserap
Kembali sebelum mereka dapat berfungsi sebagai bahan cangkok ukurannya terlalu
kecil. Retensi gumpalan darah sulit ketika jarak antar partikel terlalu besar, sedangkan
pembuluh darah tidak bisa langsung masuk ke materi padahal jaraknya terlalu kecil
(Topazian dkk, 1971). Karena tadinya sulit menyiapkan partikel dengan ukuran
homogen dari jaringan autogenous, kami menambahkan b-TCP untuk mengurangi
perbedaan jarak antar partikel cangkok tulang iliaka dan pencangkokan gigi.

Enamel, jaringan epitel, telah dihilangkan seluruhnya dari gigi yang

digunakan untuk bahan cangkok tulang. Sisa gigi termasuk dentin, sementum, pulpa,
dan ligamen periodontal digerus dan langsung digunakan untuk okulasi.

Ekspresi gen P75, P0, nestin, dan musashi-1 secara signifikan lebih tinggi
pada kelompok gigi dibandingkan pada kelompok tulang rahang bawah dan iliaka
menggunakan waktu nyata PCR. P75 dan P0 baru-baru ini digambarkan sebagai saraf
penanda sel puncak. P75 adalah anggota pendiri dari superfamili reseptor faktor
nekrosis tumor. Keluarga reseptor ini dibedakan oleh beberapa domain kaya sistein

15
untuk pengikatan ligan, transmembran tunggal urutan, dan sitoplasma non-katalitik
oleh semua neurotrofin, yang mempromosikan diferensiasi, pertumbuhan, dan
kelangsungan hidup yang beragam jenis sel dalam sistem saraf (Parkhurst dkk.,
2010). P0 adalah molekul adhesi sel dari immunoglobulin superfamili dan
merupakan yang utama konstituen selubung mielin di perifer sistem saraf (Iwao dkk.,
2008). Nestin dan musashi-1 adalah protein penanda saraf pusat sel induk. Nestin
adalah filamen perantara diekspresikan secara sementara selama saraf ontogeni.
Dalam perkembangannya, hal itu diungkapkan pertama oleh sel neuroepitel dan radial
glia, dan kemudian oleh sel progenitor dari zona ventrikel (selama embrio tahap) dan
ependyma / subependyma yang baru lahir (selama tahap postnatal) (Kawagichi dkk.,
2001).

Musashi-1 adalah protein pengikat RNA, dan gennya sebelumnya dilaporkan

sebagai gen lain calon penanda gen untuk batang usus sel. Fungsi molekulernya telah
ditentukan sebagai represi translasi dari gen target, seperti m-Numb, negative
regulator of Notch signaling (M Murayama dkk., 2009). Semua gen diekspresikan
pada level tertinggi di kelompok gigi diikuti oleh mandibula kelompok tulang dan
tulang iliaka, tetapi gen ekspresi sangat rendah di iliac tulang, menunjukkan gigi yang
dicabut berisi banyak yang tidak dapat dibedakan neural crest-diturunkan sel
dibandingkan ke jaringan lain. Oleh karena itu, file cangkok gigi tampaknya lebih
menguntungkan dari cangkok tulang rahang atau tulang iliaka.

16
17
 Gambar 4. Histologi regenerasi tulang 6 dan 8 minggu setelah
pencangkokan. A sampai F) Pencangkokan gigi (H&E,
perbesaran asli · 25, · 100, · 200, · 25, · 100, dan · 200, masing-
masing). G sampai I) cangkok tulang Iliac (H&E, perbesaran asli
· 25, · 100, · 200, · 25, · 100, dan · 200, masing-masing).
Mthrough R) Control (tanpa cangkok) (H&E, perbesaran asli · 25,
· 100, · 200, · 25, · 100, dan · 200, masing-masing). T = gigi; AB
= tulang alveolar; NB = tulang baru; garis putus-putus = cacat
tulang; panah biru = b-TCP; panah putus-putus hitam = membran
kolagen; batang skala hitam = 100 mm; batang skala biru = 25
mm.

Histologi dan m-CT menunjukkan hal baru tulang terbentuk dan diganti
dengan waktu (pada 6 dan 8 minggu) setelah gigi dicabut pencangkokan dan dentin
dimasukkan ke dalam tulang baru. Di iliac kelompok tulang, tulang baru terbentuk,
dan pembentukan sumsum tulang yang ditandai struktur di tulang baru dicatat.
Peneliti mengamati spesimen olahan dari tikus utuh dan mengamati struktur tulang
alveolar di daerah yang sesuai dengan daerah kerusakan tulang. Tidak ada struktur
sumsum tulang hadir di alveolar atas tikus utuh tulang. Akintoye dkk. melaporkan

18
bahwa sifat sel stroma sumsum tulang tulang iliaka berbeda dari itu rahang atas dan
rahang bawah, dan tulang Pembentukan struktur sumsum telah ditandai dibandingkan
saat pencangkokan tulang iliaka untuk itu setelah pencangkokan tulang rahang,
karena tulang iliaka mengandung lebih banyak sumsum merah.

19
 Gambar 5. Perbandingan pengamatan imunohistokimia untuk
OPN. A dan B) Cangkok gigi; C dan D) cangkok tulang Iliac;
E dan F) Kontrol (tanpa cangkok). T = gigi; AB = tulang
alveolar; NB = tulang baru; kepala panah = b-TCP; biru batang
skala = 25 mm (H&E, perbesaran asli · 100).

Apalagi pada m-CT dan pemeriksaan histologis, baru Pembentukan struktur

tulang dan sumsum tulang belakang tadi ditandai 6 minggu setelah pencangkokan
tulang iliaka, tetapi tulang struktur sumsum telah berkontraksi pada 8 minggu.
Selanjutnya, resorpsi tulang yang baru terbentuk lebih besar pada 8 minggu dari pada
6 minggu. Resorpsi yang baru terbentuk tulang setelah pencangkokan tulang iliaka
ditandai dibandingkan cangkok gigi, menunjukkan bahwa tulang iliaka terinduksi
tulang baru tadi. Namun, sejumlah besar baru tulang kemudian diserap kembali,
menghasilkan hal yang serupa Massa tulang baru yang dibentuk dengan
pencangkokan gigi pada 8 minggu. Hal ini sesuai dengan yang dilaporkan oleh Donos
dkk. setelah pencangkokan tulang iliaka. Tikus biasa dari masing-masing kelompok
perlakuan ditunjukkan pada Gambar 1 sampai 6. Semua tikus dalam setiap kelompok
eksperimen dipamerkan tren serupa dengan analisis histologi dan m-CT. Peneliti
menggunakan amembran karena sering digunakan dalam kasus perbaikan tulang
klinis. Namun, penggunaan asing membran tubuh mungkin tidak sepenuhnya

20
menguntungkan penyembuhan luka, karena mengganggu periosteum, penyedia
penting sel osteogenik di proses pembentukan tulang.

OPN mempromosikan diferensiasi awal osteoblas, adhesi mereka ke tulang,

dan pembentukan tulang. Saya t juga meningkatkan resorpsi tulang dengan
meningkatkan adhesi osteoklas ke permukaan tulang (Ono & Ihara, 2008). Tentang
imunohistokimia pewarnaan dengan antibodi anti-OPN, OPN diekspresikan dengan
jelas pada tulang iliaka dan gigi cangkok pada 6 dan 8 minggu, menunjukkan tulang
baru yang aktif pembentukan. Pada kelompok kontrol, hanya beberapa ekspresi
terdeteksi pada 6 dan 8 minggu. Peneliti percaya bahwa jaringan keras terbentuk di
dalam area yang rusak di gigi kelompok bukan fragmen gigi tetapi jaringan tulang
dibentuk dengan perombakan tulang.

DSP adalah non-spesifik dentin. dari dentin. Ini mirip dengan sialoprotein,
seperti OPN, BSP, dan DMP-1, dan keberadaannya di tulang telah ditunjukkan,
meskipun pada tingkat yang sangat rendah ( Suzuki & Qin, 2009). Protein prekursor
DSP, dentin sialophosphoprotein, diketahui terlibat dengan kalsifikasi tulang
(Verdelis, 2008). Tentang imunohistokimia pewarnaan dengan antibodi anti-DSP,
reaksi positif dilokalisasi ke dentin dari fragmen gigi yang diekstraksi dimasukkan ke
dalam tulang baru pada 6 minggu, menyarankan bahwa dentin memiliki afinitas yang
tinggi untuk dan ditandai efek osteokonduktif pada tulang rahang. DSP-positif area
menyempit pada 8 minggu. Mekanisme itu diperjelas resorpsi untuk biodegradable
dan osteoinductive bahan termasuk resorpsi awal bahan setelah transplantasi dan
pertumbuhan selanjutnya tulang baru ke dalam daerah resorpsi. Dalam istilah dari
area DSP-positif, kemungkinan butiran gigi untuk diserap kembali dengan berlalunya
waktu dan menjadi diganti dengan jaringan tulang juga diklarifikasi karena area DSP-
positif menurun dari 6 minggu sampai 8 minggu.

Gigi mengandung dentin, pulpa gigi, sementum, dan ligamen periodontal. Ike
dan Urist47 tampil percobaan regenerasi tulang menggunakan rekombinan human

21
BMP-2, di mana penggunaan dekalsifikasi dikeringkan dentin untuk scaffolding
menghasilkan pembentukan tulang baru. Dentin mengandung faktor pertumbuhan,
seperti IGF-II, BMP-2, dan TGF-b, mirip dengan bone. Saygin dkk. dilaporkan
bahwa dalam sementum, sementoblas mengandung TGF-b, IGF-I, dan PDGF-BB.
Ligamen periodontal juga mengandung TGF-b, IGF-I, faktor pertumbuhan fibroblast
dasar, faktor pertumbuhan endotel vaskular, BMP-2, PDGF, dan kolagen tipe I.

Gambar 6. Pengamatan imunohistokimia untuk DSP. A) Pada 6

minggu, tulang baru induksi terjadi di sekitar potongan gigi. B) Pada
8 minggu, pewarnaan DSP imunonegatif. T = gigi; Tulang alveolar
AB; NB = tulang baru; kepala panah = b-TCP; batang = 25 mm
(H&E, perbesaran asli · 100).

Banyak protein yang umum untuk tulang, dentin, dan sementum. Selain OPN
dan DSP, BSP, osteocalcin, DMP-1, kolagen tipe I, osterix, dan Runx2 adalah umum,
dadonosn protein ini dilaporkan terlibat dalam pembentukan dan resorpsi tulang.48
Oleh karena itu, banyak konstituen gigi adalah protein atau faktor pertumbuhan yang
terlibat dalam pembentukan tulang.

22
 Secara klinis, gigi berasal dari daerah yang ada adalah infeksi potensial tidak
dapat digunakan. Secara khusus, memang begitu perlu untuk menghindari pemakaian
gigi yang terinfeksi saluran akar, karies sisi akar, atau peradangan dan kista di
jaringan periodontal sekitarnya. Ini berpikir bahwa perlu untuk menghilangkan
enamel, karies, atau bagian dengan risiko infeksius sepenuhnya sebelumnya gigi
dicabut untuk tujuan ini.

23
 KESIMPULAN

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa material yang terbuat dari gigi
pencabutan berpotensi sebagai material cangkok tulang untuk pembentukan tulang
rahang, karena sangat mudah diprediksi dan menunjukkan resorpsi yang lebih sedikit
setelah pencangkokan.

24
 DAFTAR PUSTAKA

Akintoye SO, Lam T, Shi S, Brahim J, Collins MT, Robey PG. Skeletal site-
specific characterization of orofacial and iliac crest human bone marrow
stromal cells in same individuals. Bone 2006;38:758-768.

Arthur A, Rychkov G, Shi S, Koblar SA, Gronthos S. Adult human dental pulp
stem cells differentiate toward functionally active neurons under
appropriate environmental cues. Stem Cells 2008;26:1787-1795.

Bhaskar SN, Cutright DE, Knapp MJ, Beasley JD, Perez B, Driskell TD. Tissue
reaction to intrabony ceramic implants. Oral Surg Oral Med Oral Pathol
1971;31:282-289.

Borstlap WA, Heidbuchel KL, Freihofer HP, KuijpersJagtman AM. Early

secondary bone grafting of alveolar cleft defects. A comparison between
chin and rib grafts. J Craniomaxillofac Surg 1990;18:201-205.

Chung IH, Yamaza T, Zhao H, Choung PH, Shi S, Chai Y. Stem cell property of
postmigratory cranial neural crest cells and their utility in alveolar bone
regeneration and tooth development. Stem Cells 2009;27:866-877.

Donos N, Kostopoulos L, Tonetti M, Karring T. Longterm stability of autogenous

bone grafts following combined application with guided bone regeneration.
Clin Oral Implants Res 2005;16:133-139.

Donovan MG, Dickerson NC, Hellstein JW, Hanson LJ. Autologous calvarial and
iliac onlay bone grafts in miniature swine. J Oral Maxillofac Surg
1993;51:898- 903.

Emecen P, Akman AC, Hakki SS, et al. ABM/P-15 modulates proliferation and
mRNA synthesis of growth factors of periodontal ligament cells. Acta
Odontol Scand 2009;67:65-73.

25
Flores MG, Yashiro R, Washio K, Yamato M, Okano T, Ishikawa I. Periodontal
ligament cell sheet promotes periodontal regeneration in athymic rats. J
Clin Periodontol 2008;35:1066-1072.

Gao J, Symons AL, Bartold PM. Expression of transforming growth factor-beta 1

(TGF-beta1) in the developing periodontium of rats. J Dent Res 1998;77:
1708-1716.

Handschin AE, Egermann M, Trentz O, et al. Cbfa-1 (Runx-2) and osteocalcin

expression by human osteoblasts in heparin osteoporosis in vitro. Clin Appl
Thromb Hemost 2006;12:465-472.

Hasegawa T, Suzuki H, Yoshie H, Ohshima H. Influence of extended operation

time and of occlusal force on determination of pulpal healing pattern in
replanted mouse molars. Cell Tissue Res 2007;329:259-272.

Hoeppner LH, Secreto F, Jensen ED, Li X, Kahler RA, Westendorf JJ. Runx2 and
bone morphogenic protein 2 regulate the expression of an alternative Lef1
transcript during osteoblast maturation. J Cell Physiol 2009;221:480-489.

Hyun SJ, Han DK, Choi SH, et al. Effect of recombinant human bone
morphogenetic protein-2, -4, and -7 on bone formation in rat calvarial
defects. J Periodontol 2005;76:1667-1674.

Ihara H, Denhardt DT, Furuya K, et al. Parathyroid hormone-induced bone

resorption does not occur in the absence of osteopontin. J Biol Chem
2001;276: 13065-13071.

Ike M, Urist MR. Recycled dentin root matrix for a carrier of recombinant human
bone morphogenetic protein. J Oral Implantol 1998;24:124-132.

Intini G, Andreana S, Buhite RJ, Bobek LA. A comparative analysis of bone

formation induced by human demineralized freeze-dried bone and enamel

26
 matrix derivative in rat calvaria critical-size bone defects. J Periodontol
2008;79:1217-1224.

Isaka J, Ohazama A, Kobayashi M, et al. Participation of periodontal ligament

cells with regeneration of alveolar bone. J Periodontol 2001;72:314-323.

Iwao K, Inatani M, Okinami S, Tanihara H. Fate mapping of neural crest cells

during eye development using a protein 0 promoter-driven transgenic
technique. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol 2008;246: 1117-1122.

Kamijou T, Nakajima T, Ozawa H. Effects of osteocytes on osteoinduction in the

autogenous rib graft in the rat mandible. Bone 1994;15:629-637.

Kawaguchi A, Miyata T, Sawamoto K, et al. NestinEGFP transgenic mice:

Visualization of the self-renewal and multipotency of CNS stem cells. Mol
Cell Neurosci 2001;17:259-273.

Koole R, Bosker H, van der Dussen FN. Late secondary autogenous bone grafting
in cleft patients comparing mandibular (ectomesenchymal) and iliac crest
(mesenchymal) grafts. J Craniomaxillofac Surg 1989; 17 (Suppl. 1):28-30.

Miletich I, Sharpe PT. Neural crest contribution to mammalian tooth formation.

Birth Defects Res C Embryo Today 2004;72:200-212.

Morrison SJ, White PM, Zock C, Anderson DJ. Prospective identification,

isolation by flow cytometry, and in vivo self-renewal of multipotent
mammalian neural crest stem cells. Cell 1999;96:737-749.

Murayama M, Okamoto R, Tsuchiya K, et al. Musashi-1 suppresses expression of

Paneth cell-specific genes in human intestinal epithelial cells. J
Gastroenterol 2009; 44:173-182.

27
Nagoshi N, Shibata S, Kubota Y, et al. Ontogeny and multipotency of neural
crest-derived stem cells in mouse bone marrow, dorsal root ganglia, and
whisker pad. Cell Stem Cell 2008;2:392-403.

Nasr HF, Aichelmann-Reidy ME, Yukna RA. Bone and bone substitutes.
Periodontol 2000 1999;19:74-86.

Ono N, Nakashima K, Rittling SR, et al. Osteopontin negatively regulates

parathyroid hormone receptor signaling in osteoblasts. J Biol Chem
2008;283: 19400-19409.

Park CH, Abramson ZR, Taba M Jr, et al. Threedimensional micro-computed

tomographic imaging of alveolar bone in experimental bone loss or repair.
J Periodontol 2007;78:273-281.

Parkhurst CN, Zampieri N, Chao MV. Nuclear localization of the p75

neurotrophin receptor intracellular domain. J Biol Chem 2010;285:5361-
5368.

Qin C, Brunn JC, Cadena E, et al. The expression of dentin sialophosphoprotein

gene in bone. J Dent Res 2002;81:392-394.

Quattlebaum JB, Mellonig JT, Hensel NF. Antigenicity of freeze-dried cortical

bone allograft in human periodontal osseous defects. J Periodontol
1988;59:394-397.

Saygin NE, Tokiyasu Y, Giannobile WV, Somerman MJ. Growth factors regulate
expression of mineral associated genes in cementoblasts. J Periodontol
2000;71:1591-1600.

Schallhorn RG. Eradication of bifurcation defects utilizing frozen autogenous hip

marrow implants. Periodontal Abstr 1967;15:101-105.

28
Schallhorn RG. Long term evaluation of osseous grafts in periodontal therapy. Int
Dent J 1980;30:101-116.

Schmidt-Schultz TH, Schultz M. Intact growth factors are conserved in the

extracellular matrix of ancient. human bone and teeth: A storehouse for the
study of human evolution in health and disease. Biol Chem 2005;386:767-
776.

Schmitz JP, Schwartz Z, Hollinger JO, Boyan BD. Characterization of rat

calvarial nonunion defects. Acta Anat (Basel) 1990;138:185-192.

Seo BM, Sonoyama W, Yamaza T, et al. SHED repair critical-size calvarial

defects in mice. Oral Dis 2008; 14:428-434. (erratum 2009;15:302).

Shapoff CA, Bowers GM, Levy B, Mellonig JT, Yukna RA. The effect of particle
size on the osteogenic activity of composite grafts of allogeneic freeze-
dried bone and autogenous marrow. J Periodontol 1980;51: 625-630.

Stevens A, Zuliani T, Olejnik C, et al. Human dental pulp stem cells differentiate
into neural crest-derived melanocytes and have label-retaining and
sphereforming abilities. Stem Cells Dev 2008;17:1175- 1184.

Suzuki S, Sreenath T, Haruyama N, et al. Dentin sialoprotein and dentin

phosphoprotein have distinct roles in dentin mineralization. Matrix Biol
2009;28: 221-229.

Takamori Y, Suzuki H, Nakakura-Ohshima K, et al. Capacity of dental pulp

differentiation in mouse molars as demonstrated by allogenic tooth
transplantation. J Histochem Cytochem 2008;56:1075-1086.

Topazian RG, Hammer WB, Boucher LJ, Hulbert SF. Use of alloplastics for ridge
augmentation. J Oral Surg 1971;29:792-798.

29
Tsukamoto-Tanaka H, Ikegame M, Takagi R, Harada H, Ohshima H.
Histochemical and immunocytochemical study of hard tissue formation in
dental pulp during the healing process in rat molars after tooth replantation.
Cell Tissue Res 2006;325:219-229.

Verdelis K, Ling Y, Sreenath T, et al. DSPP effects on in vivo bone

mineralization. Bone 2008;43:983-990.

Ye L, MacDougall M, Zhang S, et al. Deletion of dentin matrix protein-1 leads to

a partial failure of maturation of predentin into dentin, hypomineralization,
and expanded cavities of pulp and root canal during postnatal tooth
development. J Biol Chem 2004;279: 19141-19148.

Yoshida T, Vivatbutsiri P, Morriss-Kay G, Saga Y, Iseki S. Cell lineage in

mammalian craniofacial mesenchyme. Mech Dev 2008;125:797-808.

Zins JE, Whitaker LA. Membranous versus endochondral bone: Implications for
craniofacial reconstruction. Plast Reconstr Surg 1983;72:778-785.

30