Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.
com
J. Ma. Ova Res. Jil. 32 (3), 95-102, 2015
— Ulasan Mini—
Mekanisme molekuler desidualisasi
endometrium manusia yang diaktifkan oleh
jalur pensinyalan adenosin monofosfat siklik
Mikihiro Yoshie1*, Kazuya Kusama1, 2 dan Kazuhiro Tamura1
1Departemen Farmakologi Endokrin dan Saraf, Universitas Farmasi dan Ilmu Hayati Tokyo,
Tokyo 192-0392, Jepang
2Alamat saat ini: Laboratorium Theriogenologi dan Pemuliaan Hewan, Sekolah Pascasarjana Ilmu
Pertanian dan Kehidupan, Universitas Tokyo, Tokyo 113-8657, Jepang
Abstrak: Selama siklus menstruasi, endometrium manusia
mengalami perubahan dramatis, termasuk siklus
proliferasi, diferensiasi dan menstruasi, di bawah kendali
ketat hormon steroid ovarium. Sel stroma endometrium
(ESC) secara spontan berdiferensiasi menjadi sel desidua
sebagai respons terhadap peningkatan kadar progesteron
dan siklik adenosin monofosfat (cAMP) intraseluler selama
fase sekretori pertengahan siklus. Proses ini, yang disebut
desidualisasi, secara ketat didefinisikan sebagai
pemograman ulang morfologi dan biokimia dari ESC dan
diperlukan untuk kehamilan yang sukses. Pada kehamilan,
desidua berfungsi sebagai penghalang penting antara ibu
dan janin dengan memodulasi invasi trofoblas dan respons
imun. Kami baru-baru ini menunjukkan keterlibatan target
cAMP baru, protein pertukaran yang langsung diaktifkan
oleh cAMP (EPAC), dalam proses desidualisasi. Ulasan ini
menyajikan mekanisme molekuler desidualisasi yang diatur
oleh progesteron dan jalur pensinyalan cAMP dan
menyoroti peran
EPAC dalam proses desidualisasi.
Kata kunci: Desidualisasi, kamp, PKA,
Progesteron
pengantar
Di bawah kendali ketat hormon steroid ovarium, estradiol
dan progesteron (P4), endometrium manusia berubah
secara dinamis dan siklis selama siklus menstruasi (Gbr. 1A).
Salah satu perubahan khas yang diperlukan
©2015 Japan Society for Ova Research
Diterima: 12 Juni 2015
Diterima: 21 Juli 2015
* Kepada siapa korespondensi harus ditujukan. e-
mail: yoshie @ toyak u.ac.jp
95
untuk implantasi embrio adalah diferensiasi sel stroma
endometrium (ESC); proses yang dikenal sebagai
'desidualisasi' (Gbr. 1B). Bahkan dalam keadaan rahim di
mana tidak ada embrio yang dibuahi, ESC manusia
secara spontan berubah dan berdiferensiasi menjadi sel
desidua dalam proses yang dikendalikan oleh P4 selama
fase sekretori pertengahan siklus. Desidualisasi secara
ketat didefinisikan sebagai morfologi dan biokimia
pemrograman ulang sel stroma dan sangat diperlukan
untuk implantasi embrio. Proses desidualisasi disertai
dengan transisi morfologi dari fibroblastik ke morfologi
yang membesar dan membulat, serta sekresi antigen
penanda spesifik, termasuk prolaktin (PRL) dan insulin-
like growth factor binding protein-1 (IGFBP-1) (Gbr. 1B)
[1-5]. Bukti yang muncul menunjukkan bahwa ESC
manusia menjadi sensitif terhadap sinyal embrio saat
desidualisasi dan merespons embrio berkualitas rendah
dengan menghambat produksi faktor terkait implantasi
[6]. Selain itu, gangguan desidualisasi menonaktifkan
EPAC, interaksi embriomaternal dan menyebabkan keguguran
berulang [7]. Pada kehamilan, desidualisasi meluas ke
lapisan basal endometrium. Desidua mengatur invasi
trofoblas, pembentukan plasenta dan respon imun
terhadap janin [8]. Dengan demikian, desidua
diperlukan untuk pembentukan dan pemeliharaan
kehamilan yang sukses dan berfungsi sebagai biosensor
selama seleksi embrio saat implantasi, dan oleh karena
itu, merupakan penentu keberhasilan reproduksi.
Dalam kondisi fisiologis normal, proses desidualisasi
bergantung pada aksi P4. P4 disekresikan dari korpus
luteum yang baru terbentuk setelah ovulasi dan
menginduksi proliferasi dan desidualisasi ESC. Tindakan
P4 ini dimediasi melalui pengikatan pada reseptor P4
nuklir (PGR). Seri dariin vivo
96 J. Ma. Ova Res. Jil. 32 (3), 2015

Gambar 1. Diagram yang mengilustrasikan perubahan histologis pada endometrium manusia selama siklus menstruasi (A), dan
Reseptor P4/P4 (PGR) dan pensinyalan cAMP dalam desidualisasi (B). (A) Sel stroma endometrium (ESC) secara spontan
berdiferensiasi menjadi sel desidua sebagai respons terhadap peningkatan kadar P4 dan cAMP intraseluler selama fase
sekretorik pertengahan siklus. (B) Crosstalk dari pensinyalan cAMP yang dimediasi P4 / PGR dan PKA dan EPAC yang
terlibat dalam desidualisasi. Kompleks reseptor P4/PGR berikatan dengan daerah promotor penanda desidua PRL dan
IGFBP-1. Berbagai faktor fisiologis termasuk PGE2, relaksin, gonadotropin, dan Wnt5a mengaktifkan reseptor
berpasangan protein G (GPCR) yang terkait dengan protein G stimulator dan kemudian meningkatkan cAMP
intraseluler. Aktivasi pensinyalan cAMP/PKA menginduksi atau mengaktifkan beberapa faktor transkripsi yang
berinteraksi dengan PGR. Pensinyalan cAMP yang dimediasi EPAC secara kooperatif merangsang jalur cAMP/PKA
melalui aktivasi RAP1 dan/atau ekspresi calreticulin (CRT). Selanjutnya, EPAC dapat meningkatkan ekspresi dan aktivitas
C/EBPβ selama desidualisasi.
 Yoshie, dkk. 97

dan in vitro penelitian telah menunjukkan peran penting yang yang merupakan faktor transkripsi penting untuk desidualisasi
dimainkan oleh jalur pensinyalan P4/PGR dalam desidualisasi [3, 19-22] (Gbr. 1B).
pada tikus dan manusia [9, 10].
Inisiasi desidualisasi disertai dengan peningkatan Hubungan antara Pensinyalan P4 dan cAMP
berkelanjutan dalam tingkat utusan kedua intraseluler, dalam Desidualisasi
siklik adenosin monofosfat (cAMP)
[11]. Analog cAMP yang permeabel dan stabil dapat Tingkat cAMP intraseluler yang ditingkatkan dan dipertahankan
menginduksi desidualisasi lebih cepat dan efisien dalam ESCs P4-primed menyiratkan bahwa jalur pensinyalan cAMP
daripada progesteronin vitro. Dalam konteks ini, faktor diaktifkan selama desidualisasi yang bergantung pada P4 [10].
fisiologis yang memicu peningkatan cAMP intraseluler Medroxyprogesterone dan estradiol meningkatkan regulasi reseptor
dengan mengaktifkan reseptor berpasangan protein G PGE2, EP2, dan PGE2 merangsang desidualisasi yang diinduksi
(GPCRs) yang terkait dengan protein stimulator G (Gs), steroid, menunjukkan bahwa PGE2 dapat berkontribusi pada
seperti prostaglandin E2 (PGE2) [12], relaksin [13], dan peningkatan level cAMP yang dimediasi EP2 selama desidualisasi
gonadotropin [14], meningkatkan desidualisasi (Gbr. yang distimulasi P4. Selanjutnya, Matsuokadkk.
1B). Hasil ini menunjukkan pentingnya jalur pensinyalan [23] mengungkapkan bahwa Wnt5a, yang disekresikan oleh
cAMP dalam proses desidualisasi. Di sini kami secara ESCs manusia berbasis P4, mengaktifkan reseptor berpasangan
singkat fokus pada mekanisme molekuler dari proses Gs, yang pada gilirannya merangsang pembentukan cAMP dan
desidualisasi dari sudut pandang jalur pensinyalan P4 / transkripsi super oksida dismutase melalui pensinyalan yang
PGR dan cAMP. bergantung pada cAMP (Gbr. 1B). Meskipun mekanisme yang
tepat dimana P4 meregulasi Wnt5a di ESC belum dieksplorasi,
Pensinyalan P4/PGR dalam Desidualisasi studi Matsuokadkk. [23] telah memberikan bukti baru untuk
mendukung keterlibatan P4 dalam produksi cAMP dalam proses
Tindakan P4 dalam sel endometrium dianggap dimediasi oleh interaksinya dengan PGR nuklir, anggota superfamili faktor termasuk desidualisasi (Gbr. 1B). Pensinyalan cAMP dapat
transkripsi yang diaktifkan ligan. Diferensiasi yang dimediasi P4 selama desidualisasi diinduksi dalam fase sekretori siklus menstruasi. mengintegrasikan aksi P4 dengan mensensitisasi ESC ke P4
Jalur pensinyalan P4/PGR menginduksi transformasi ESC yang tidak berdiferensiasi menjadi sel desidua. PGR memiliki dua isoform, PGR-A dan merangsang aktivitas transkripsi PGR. Aktivasi jalur
dan PGR-B, yang ditranskripsi oleh penggunaan promotor yang berbeda dalam satu gen [15]. Isoform reseptor PGR-A dan -B hanya pensinyalan cAMP mengurangi interaksi PGR dengan
berbeda dalam hal bahwa PGR-B memiliki domain transaktivasi tambahan yang terletak di terminal aminonya. PGR-B telah terbukti korepresor, inti reseptor inti (NCoR) dan mediator
berfungsi sebagai aktivator transkripsi yang kuat pada beberapa promotor yang bergantung pada PGR dan aktif dalam berbagai jenis sel pembungkaman untuk retinoid dan reseptor hormon tiroid
di mana PGR-A tidak aktif. Kedua isoform PGR diekspresikan secara berbeda dalam ESC manusia. PGR-A dapat berfungsi sebagai PGR (SMRT)
dominan dalam desidualisasi [16, 17], meskipun juga telah dilaporkan bahwa PGR-B mengatur kistrom dan transkriptom yang jauh lebih [24]. Selanjutnya, PGR tunduk pada sumoylasi pasca-
besar daripada PGR-A selama diferensiasi ESC [18]. Umumnya, PGR yang diaktifkan secara langsung mengikat DNA pada elemen spesifik translasi pada saat aktivasi, yang umumnya menghasilkan
di daerah promotor dan mempromosikan atau menekan transkripsi gen target. Ada elemen respon PGR di daerah promotor penanda sifat represif. cAMP membuat ESC peka terhadap P4,
desidua PRL dan IGFBP-1 [16, 17]. PGR juga dapat secara tidak langsung mengikat DNA dengan berinteraksi dengan faktor lain, termasuk setidaknya sebagian, dengan melemahkan sumoylasi PGR
protein pengikat penambah CCAAT (C/EBPs), faktor transkripsi forkhead box-O1 (FOXO1) dan transduser sinyal dan aktivator transkripsi 5 yang bergantung pada ligan [25]. Interaksi PGR dan faktor
(STAT5), 17], meskipun juga telah dilaporkan bahwa PGR-B mengatur sistrome dan transkriptom yang jauh lebih besar daripada PGR-A transkripsi cAMPregulated termasuk FOXO1 dan C/ EBPβ,
selama diferensiasi ESC [18]. Umumnya, PGR yang diaktifkan secara langsung mengikat DNA pada elemen spesifik di daerah promotor adalah salah satu proses penting dalam induksi penanda
dan mempromosikan atau menekan transkripsi gen target. Ada elemen respon PGR di daerah promotor penanda desidua PRL dan desidua pada ESC manusia selama desidualisasi. Dengan
IGFBP-1 [16, 17]. PGR juga dapat secara tidak langsung mengikat DNA dengan berinteraksi dengan faktor lain, termasuk protein pengikat demikian, pensinyalan P4/PGR dan cAMP terlibat dalam
penambah CCAAT (C/EBPs), faktor transkripsi forkhead box-O1 (FOXO1) dan transduser sinyal dan aktivator transkripsi 5 (STAT5), 17], crosstalk kooperatif selama proses desidualisasi.
meskipun juga telah dilaporkan bahwa PGR-B mengatur sistrome dan transkriptom yang jauh lebih besar daripada PGR-A selama

diferensiasi ESC [18]. Umumnya, PGR yang diaktifkan secara langsung mengikat DNA pada elemen spesifik di daerah promotor dan Pensinyalan cAMP dalam Desidualisasi
mempromosikan atau menekan transkripsi gen target. Ada elemen respon PGR di daerah promotor penanda desidua PRL dan IGFBP-1

[16, 17]. PGR juga dapat secara tidak langsung mengikat DNA dengan berinteraksi dengan faktor lain, termasuk protein pengikat Pembawa pesan kedua intraseluler, cAMP, diproduksi
penambah CCAAT (C/EBPs), faktor transkripsi forkhead box-O1 (FOXO1) dan transduser sinyal dan aktivator transkripsi 5 (STAT5), PGR oleh stimulasi reseptor berpasangan protein Gs, mengatur
yang diaktifkan secara langsung mengikat DNA pada elemen spesifik di daerah promotor dan mempromosikan atau menekan transkripsi banyak respons seluler dan mengatur jaringan peristiwa
gen target. Ada elemen respon PGR di daerah promotor penanda desidua PRL dan IGFBP-1 [16, 17]. PGR juga dapat secara tidak intraseluler. Tingkat cAMP intraseluler dikendalikan oleh
langsung mengikat DNA dengan berinteraksi dengan faktor lain, termasuk protein pengikat penambah CCAAT (C/EBPs), faktor transkripsi dua jenis enzim yang berbeda, adenilat siklase (ACs) dan
forkhead box-O1 (FOXO1) dan transduser sinyal dan aktivator transkripsi 5 (STAT5), PGR yang diaktifkan secara langsung mengikat DNA fosfodiesterase (PDEs), yang masing-masing memproduksi
pada elemen spesifik di daerah promotor dan mempromosikan atau menekan transkripsi gen target. Ada elemen respon PGR di daerah dan mendegradasi cAMP. Seperti disebutkan di atas,
promotor penanda desidua PRL dan IGFBP-1 [16, 17]. PGR juga dapat secara tidak langsung mengikat DNA dengan berinteraksi dengan pensinyalan cAMP sangat penting untuk inisiasi
desidualisasi [4]. Padahal, aktivitas AC itu
faktor lain, termasuk protein pengikat penambah CCAAT (C/EBPs), faktor transkripsi forkhead box-O1 (FOXO1) dan transduser sinyal dan aktivator transkripsi 5 (STAT5),
98 J. Ma. Ova Res. Jil. 32 (3), 2015
mengkatalisis siklisasi adenosin trifosfat (ATP) menjadi
cAMP yang melimpah di endometrium [26]. Tingkat cAMP
endometrium lebih tinggi selama fase sekretori daripada
selama fase proliferasi [27]. P4 atau berbagai zat bioaktif
lain yang mengaktifkan reseptor Gscoupled menambah
peningkatan tingkat cAMP intraseluler di ESC. Selanjutnya,
forskolin, senyawa kimia yang mengaktifkan ACs, juga
menyebabkan desidualisasiin vitro [11]. Selain produksi
cAMP, tingkat cAMP intraseluler umumnya dikendalikan
oleh PDE spesifik yang mengkatalisis hidrolisis cAMP dan
guanosin monofosfat siklik menjadi bentuk tidak aktifnya
[28]. Di antara keluarga isozim PDE, penghambatan
farmakologis dari PDE4 meningkatkan kadar cAMP
intraseluler dan ekspresi penanda desidua pada ESC
manusia yang menggunakan relaksin, menunjukkan
pentingnya PDE4 sebagai target potensial untuk intervensi
farmakologis dalam desidualisasi pada wanita subfertil [29].
Berbagai faktor transkripsi yang diatur oleh jalur
pensinyalan cAMP selama desidualisasi, termasuk C/
EBPs, FOXO1 dan cAMP response element-binding
protein (CREB), memainkan peran sentral dalam
ekspresi penanda desidua PRL dan IGFBP-1 pada ESC
manusia. Gambar 1B).
C / EBP milik keluarga ritsleting leusin dari faktor
transkripsi. Di antara berbagai C/EBP, pembatalan C/EBP
β pada tikus betina menghasilkan fenotipe yang tidak
subur karena desidualisasi yang rusak [30]. C/EBPβ
sebagian besar diekspresikan dalam desidualisasi ESC di
endometrium manusia dan diregulasi oleh aktivasi
pensinyalan cAMP [31]. Situs pengikatan C/EBP di daerah
promotor PRL dan IGFBP-1 desidua sangat penting untuk
aktivasi promotor yang diinduksi cAMP [20, 31]. Beberapa
bukti menunjukkan bahwa regulasi epigenetik, termasuk
modifikasi histon, terlibat dalam ekspresi PRL dan IGFBP-1
yang diinduksi cAMP [32, 33]. C/EBPβ mengatur ekspresi
PRL dan IGFBP-1 dengan mengubah status asetilasi histon
dari promotor mereka di ESC manusia selama desidualisasi
[33]. Hasil ini jelas menunjukkan bahwa C/EBPβ memainkan
peran kunci dalam desidualisasi.
Protein FOXO berfungsi sebagai mediator hilir dari jalur
phosphoinositol-3-kinase (PI3K)/AKT dan memodulasi ekspresi
gen yang terlibat dalam diferensiasi sel, resistensi terhadap
stres oksidatif, perbaikan kerusakan DNA, penghentian siklus
sel dan apoptosis [34]. Modifikasi pasca-translasi, seperti
fosforilasi protein FOXO, adalah mekanisme utama yang
digunakan untuk mengatur berbagai gen. FOXO1, juga dikenal
sebagai FKHR, adalah anggota dari keluarga forkhead protein.
Ini adalah salah satu gen paling awal yang diinduksi sebagai
respons terhadap cAMP selama desidualisasi [3, 35]. Protein
FOXO1 terakumulasi dalam inti
sel desidualisasi in vivo. Interaksi FOXO1 dengan PGR
dan HOXA10 atau C/EBPβ telah terbukti menginduksi
IGFBP-1 dan PRL, masing-masing, dengan mengikat
daerah promotor penanda desidua ini [3, 22].
cAMP . yang dimediasi oleh Protein Kinase a (PKA)
Pensinyalan dalam Desidualisasi
Protein kinase A (PKA) adalah enzim sitoplasma yang
terdiri dari dua subunit pengatur dan subunit katalitik
dan dikenal sebagai mediator pensinyalan cAMP.
Subunit katalitik, yang dilepaskan pada pengikatan dua
molekul cAMP oleh masing-masing subunit pengatur,
memfosforilasi protein target inti seperti CREB dan
protein modulator elemen respons cAMP (CREM) [36].
Protein ini mengikat elemen respons cAMP (CRE) di
daerah kontrol gen responsif cAMP dan memodulasi
transkripsi mereka. Tidak ada perubahan pada level
transkrip isoform subunit PKA yang terdeteksi selama
desidualisasiin vitro, meskipun penurunan tingkat
protein dari isoform subunit pengatur diamati. Tingkat
protein dari semua bentuk lain tetap tidak berubah.
Pengurangan tingkat subunit pengatur ini dapat
menghasilkan peningkatan bersih dalam aktivitas
subunit katalitik bebas [4].
Transkripsi gen PRL desidual (dPRL) didorong oleh
promotor hulu alternatif yang terletak sekitar 6 kb di
hulu situs awal transkripsi diduga dari ekson 1A non-
coding tambahan [36]. Pada ESC manusia, cAMP
mengaktifkan promotor dPRL secara bifasik, dengan
induksi awal yang lemah dalam 12 jam, diikuti oleh
induksi yang jauh lebih intens kemudian [37]. Mutasi
CRE menghapus respons awal, tetapi bukan respons
selanjutnya, menunjukkan bahwa aktivasi jalur cAMP/
PKA/CREB merangsang induksi dPRL awal. Selanjutnya,
jalur cAMP/PKA menginduksi promotor dPRL secara
tertunda melalui dua urutan konsensus C/EBP yang
tumpang tindih. Adapun IGFBP-1, analisis penghapusan
dan mutasi menunjukkan bahwa CRE dalam promotor
IGFBP-1 sangat penting untuk aktivasinya [38].
Pertukaran Protein Langsung Diaktifkan
oleh cAMP yang dimediasi cAMP (EPAC)
dalam Desidualisasi
Protein pertukaran yang diaktivasi secara langsung oleh
cAMP (EPAC) adalah faktor pensinyalan teraktivasi cAMP
yang berfungsi sebagai bagian dari jalur yang berbeda dari
jalur pensinyalan cAMP/PKA klasik [39, 40]. Ada dua isoform
EPAC, EPAC1 (juga dikenal sebagai RAPGEF3) dan EPAC2
(RAPGEF4). Protein ini berbagi urutan yang luas

homologi, tetapi merupakan produk dari gen yang
berbeda pada mamalia. Perbedaan struktural antara
EPAC1 dan EPAC2 adalah adanya domain pengikat
nukleotida siklik tambahan dalam N-terminus EPAC2
[41]. Baik EPAC1 dan EPAC2 berfungsi sebagai faktor
pertukaran nukleotida guanin untuk keluarga Ras dari
trifosfatase guanin kecil (GTPase), termasuk Rap1 [42].
Rap1 dan anggota keluarga Rap lainnya terlibat dalam
regulasi proliferasi sel, diferensiasi, apoptosis, dan
adhesi. Pengikatan cAMP ke domain pengikat nukleotida
siklik dari EPAC mengarah pada perubahan konformasi
yang memungkinkan perekrutan protein Rap ke domain
spesifik EPAC dan konversi bentuk tidak aktif pengikatan
guanosin difosfat (GDP) menjadi pengikatan GTP bentuk
aktif. Dengan demikian, Rap1 adalah faktor hilir dalam
jalur pensinyalan EPAC.
Dalam endometrium manusia, ekspresi EPAC1 dan
EPAC2 konstitutif diamati dalam sel epitel dan stroma
selama fase proliferasi dan sekretori dari siklus
menstruasi [43]. In vitro penelitian telah menunjukkan
bahwa paparan simultan dari ESCs manusia yang
dikultur primer atau garis sel ESC ke analog cAMP
selektif EPAC dan analog cAMP selektif PKA secara nyata
meningkatkan ekspresi IGFBP-1 dan PRL, tetapi tidak
pada FOXO1 [43]. Namun, analog cAMP selektif EPAC
saja tidak menginduksi ekspresi IGFBP-1 dan PRL.
Membungkam EPAC1 atau EPAC2 menekan ekspresi
IGFBP-1 dan PRL yang diinduksi analog cAMP. EPAC
mempotensiasi ekspresi IGFBP-1 dan PRL hanya dalam
kondisi aktivasi PKA [43]. Hasil ini menyiratkan ada
fungsi kooperatif dari jalur pensinyalan cAMP yang
dimediasi EPAC dan PKA dalam proses desidualisasi
(Gbr. 1B). Selain itu, kami juga telah menunjukkan
bahwa pensinyalan EPAC dikaitkan dengan diferensiasi
sitotrofoblas plasenta menjadi sinsitiotrofoblas [44].
Sebaliknya, karena ekspresi FOXO1 yang diinduksi oleh
analog cAMP selektif PKA tidak terpengaruh oleh analog
cAMP selektif EPAC, ekspresi FOXO1 yang bergantung pada
cAMP sebagian besar diatur oleh pensinyalan PKA. Dengan
demikian, ekspresi gen responsif cAMP dalam desidualisasi
ESC diatur secara berbeda dan kooperatif oleh jalur
pensinyalan PKA dan EPAC. Data kami menimbulkan
pertanyaan; Bagaimana pensinyalan EPAC bersinergi
dengan pensinyalan PKA dalam desidualisasi yang diinduksi
oleh analog cAMP? Karena analog cAMP selektif EPAC tidak
mempengaruhi stimulasi analog cAMP selektif PKA
Yoshie, dkk. 99
fosforilasi CREB [43], jawaban yang mungkin adalah bahwa
pensinyalan EPAC dapat secara tidak langsung
mempengaruhi pensinyalan PKA independen dari fosforilasi
CREB klasik. Sebuah studi baru-baru ini menunjukkan
bahwa pembungkaman EPAC1 atau EPAC2 menurunkan
regulasi C/EBPβ ekspresi mRNA, dan bahwa aktivasi
pensinyalan EPAC dapat meningkatkan aktivitas pengikatan
DNA C / EBPβ (data yang tidak dipublikasikan). Rap1,
faktor pensinyalan hilir dalam jalur pensinyalan cAMP yang
dimediasi EPAC, diaktifkan oleh analog cAMP selektif EPAC
atau forskolin dalam ESC yang dilengkapi dengan analog
cAMP selektif PKA, tetapi tidak pada ESC pembeda non-
prima. Aktivasi ini dihambat oleh knockdown EPAC1 atau
EPAC2. Membungkam Rap1 juga menekan ekspresi IGFBP-1
dan PRL yang diinduksi cAMP. Hasil ini menunjukkan bahwa
pensinyalan EPAC/Rap1 sebenarnya diaktifkan dalam sel
desidualisasi, dan bahwa pensinyalan ini memainkan peran
kunci dalam perolehan fenotipe sekretori, dengan IGFBP-1
dan PRL, selama proses desidualisasi yang diinduksi oleh
aktivasi pensinyalan PKA (Gbr. 1B).
Baru-baru ini, kami mengidentifikasi calreticulin (CRT) sebagai
target potensial EPAC2, karena ekspresi CRT secara signifikan
diturunkan regulasinya dalam ESC yang dibungkam EPAC2 [45]. CRT
adalah molekul pendamping yang memainkan peran sentral dalam
kontrol kualitas protein yang baru diproduksi dan bertindak sebagai
pengatur homeostasis ion kalsium intraseluler.
[46]. Knockdown ekspresi CRT dalam ESC yang dikultur
secara signifikan menghambat ekspresi PRL dan IGFBP1
yang distimulasi oleh analog cAMP dan ovarium serta
diferensiasi morfologis. Dengan demikian, ekspresi CRT
yang dimediasi EPAC2 sangat penting untuk desidualisasi.
Membungkam EPAC2 atau CRT menginduksi fenotipe
seperti penuaan yang menyimpang dengan peningkatan
penuaan terkait-β- galaktosidase (SA-β-Gal) dan ekspresi
p21 serta penurunan ekspresi p53. Tikus knockout
bersyarat p53 spesifik uterus menampilkan pembatasan
pertumbuhan terkait penuaan dengan peningkatan SA-β
aktivitas -gal dan ekspresi p21 di desidua, serta gangguan
desidualisasi dan persalinan prematur [47]. Oleh karena itu,
dapat dibayangkan bahwa disregulasi EPAC2 atau CRT
dapat mengganggu desidualisasi, sebagian, melalui induksi
penuaan seluler abnormal (Gbr. 1B).
Kesimpulan
Banyak temuan telah mengungkapkan bahwa pensinyalan
cAMP mengatur fungsi endometrium melalui pemeliharaan
homeostasis seluler dan sekresi berbagai hormon dan faktor
pertumbuhan. Pensinyalan EPAC mungkin penting untuk
diferensiasi fungsional dan morfologis ESC menjadi sel desidua.
Studi lebih lanjut tentang
100 J. Ma. Ova Res. Jil. 32 (3), 2015
fungsi EPAC dalam fisiologi uterus akan memberikan data
baru yang dapat digunakan untuk mengeksplorasi
mekanisme regulasi desidualisasi, implantasi, dan
plasentasi dalam kondisi fisiologis dan patologis.
Memperoleh data tersebut merupakan langkah penting
menuju pemahaman yang lebih baik tentang mekanisme
yang mengatur reproduksi pada wanita. Dari sudut
pandang peneliti klinis, masalah yang harus kami tangani
meliputi: infertilitas yang disebabkan oleh gangguan
aktivitas fisiologis EPAC selama fase sekretori awal siklus
menstruasi, dan pengembangan obat target baru yang
meningkatkan regulasi terkoordinasi dari sinyal cAMP
menuju desidualisasi. Selanjutnya, penelitian di masa depan
harus bertujuan untuk menentukan: 1) hubungan yang
tepat antara jalur pensinyalan EPAC dan jalur lainnya,
termasuk jalur pensinyalan P4/PGR dan cAMP/PKA serta
fungsi CRT dalam berbagai proses reproduksi; 2) fungsi
EPAC dan regulasi epigenetik, seperti metilasi dan asetilasi
DNA, yang memodulasi ekspresi gen yang terkait dengan
implantasi dan desidualisasi; dan 3) profil transkriptom dan
metabolomik dari perubahan yang diatur oleh pensinyalan
EPAC atau PKA.
Ucapan Terima Kasih
Karya ini didukung oleh KAKENHI (Grant-in-Aid for
Young Scientists (B), 25861511 to MY) dari Japan Society
for the Promotion of Science.
Referensi
1) Giudice, LC, Dsupin, BA dan Irwin, JC (1992): Regulasi steroid dan
peptida dari protein pengikat faktor pertumbuhan mirip
insulin yang disekresikan oleh sel stroma endometrium
manusia bergantung pada diferensiasi stroma. J.klin.
Endokrinol. Metab., 75, 1235–1241.[Garis Tengah]
2) Maslar, IA, dan Riddick, DH (1979): Produksi prolaktin oleh
endometrium manusia selama siklus menstruasi normal. NS. J.
Obstesi. Ginekol., 135, 751–754.[Garis Tengah]
3) Christian, M., Zhang, X., Schneider-Merck, T., Unterman,
TG, Gellersen, B., White, JO and Brosens, JJ (2002): Faktor
transkripsi forkhead yang diinduksi AMP siklik, FKHR, bekerja
sama dengan beta protein pengikat CCAAT/peningkat dalam
membedakan sel stroma endometrium manusia. J.Biol. Kimia.,
277, 20825-20832.[Medline] [CrossRef]
4) Telgmann, R., Maronde, E., Taskén, K. dan Gellersen, B.
(1997): Protein kinase A yang diaktifkan diperlukan untuk
transkripsi yang bergantung pada diferensiasi dari gen prolaktin
desidua dalam sel stroma endometrium manusia. Endokrinologi,
138, 929-937.[Garis Tengah]
5) Tang, B., Guller, S. dan Gurpide, E. (1993): Mekanisme yang
terlibat dalam desidualisasi sel stroma endometrium manusia.
Akta Eur. Subur., 24, 221–223.[Garis Tengah]
6) Tekelenburg, G., Salker, M., Molokhia, M., Lavery, S., Trew,
G., Aojanepong, T., Mardon, HJ, Lokugamage, AU, Rai,
R., Landles, C., Roelen, BA, Quenby, S., Kuijk, EW, Kavelaars, A.,
Heijnen, CJ, Regan, L., Brosens, JJ dan Macklon, NS (2010):
Seleksi alam manusia embrio: desidualisasi sel stroma
endometrium berfungsi sebagai sensor kualitas embrio saat
implantasi. PLoS SATU, 5, e10258.
[Medline] [CrossRef]
7) Salker, M., Tekleenburg, G., Molokhia, M., Lavery, S., Trew,
G., Aojanepong, T., Mardon, HJ, Lokugamage, AU, Rai,
R., Landles, C., Roelen, BA, Quenby, S., Kuijk, EW,
Kavelaars, A., Heijnen, CJ, Regan, L., Macklon, NS and
Brosens, JJ (2010): Seleksi alam manusia embrio:
gangguan desidualisasi endometrium menonaktifkan
interaksi embriomaternal dan menyebabkan keguguran
berulang. PLoS SATU, 5, e10287.[Medline] [CrossRef]
8) Gellersen, B., Brosens, IA dan Brosens, JJ (2007):
Desidualisasi endometrium manusia: mekanisme,
fungsi, dan perspektif klinis. mani. Reproduksi. Med.,
25, 445–453.[Medline] [CrossRef]
9) Lydon, JP, DeMayo, FJ, Funk, CR, Mani, SK, Hughes,
AR, Montgomery, CA Jr., Shyamala, G., Conneely, OM dan
O'Malley, BW (1995): Tikus yang kekurangan reseptor
progesteron menunjukkan kelainan reproduksi
pleiotropik. Gens Dev., 9, 2266–2278.[Medline] [CrossRef]
10) Brar, AK, Frank, GR, Kessler, CA, Cedars, MI dan
Handwerger, S. (1997): Desidualisasi yang bergantung
pada progesteron dari endometrium manusia dimediasi
oleh cAMP. Endokrin, 6, 301–307.[Medline] [CrossRef]
11) Tang, B., Guller, S. dan Gurpide, E. (1993): Cyclic adenosine 3′,5′-
monophosphate menginduksi ekspresi prolaktin dalam sel
stroma yang diisolasi dari endometrium proliferatif manusia.
Endokrinologi, 133, 2197-2203.[Garis Tengah]
12) Frank, GR, Brar, AK, Cedars, MI dan Handwerger,
S. (1994): Prostaglandin E2 meningkatkan diferensiasi sel
stroma endometrium manusia. Endokrinologi, 134, 258-263.
[Garis Tengah]
13) Tseng, L., Gao, JG, Chen, R., Zhu, HH, Mazella, J. dan Powell, DR
(1992): Pengaruh progestin, antiprogestin, dan relaksin pada
akumulasi prolaktin dan pertumbuhan seperti insulin faktor-
mengikat protein-1 messenger asam ribonukleat dalam sel
stroma endometrium manusia. Biol. Reproduksi, 47, 441–
450. [Medline] [CrossRef]
14) Tang, B., dan Gurpide, E. (1993): Efek langsung
gonadotropin pada desidualisasi sel stroma endometrium
manusia. J. Biokimia Steroid. mol. Biol., 47, 115-121.
[Medline] [CrossRef]
15) Zelent, A., Mendelsohn, C., Kastner, P., Krust, A., Garnier,
JM, Ruffenach, F., Leroy, P. dan Chambon, P. (1991): Isoform yang
diekspresikan secara berbeda dari beta reseptor asam retinoat
tikus yang dihasilkan oleh penggunaan dua promotor dan
penyambungan alternatif. EMBO J., 10, 71-81.[Garis Tengah]
16) Gao, J., Mazella, J., Tang, M. dan Tseng, L. (2000): Ligandactivated
progesteron reseptor isoform hPR-A adalah transaktivator yang
lebih kuat daripada hPR-B untuk ekspresi IGFBP-1 (insulin- seperti
growth factor binding protein-1) dalam sel stroma endometrium
manusia. mol. Endokrinol., 14, 1954–1961.
[Medline] [CrossRef]

17) Christian, M., Pohnke, Y., Kempf, R., Gellersen, B. dan Brosens, JJ
(2002): Asosiasi fungsional PR dan CCAAT/peningkat-pengikat
protein beta isoform: kerjasama yang bergantung pada promotor
antara PR-B dan protein penghambat yang diperkaya hati, atau
protein aktivasi yang diperkaya hati dan PR-A dalam sel stroma
endometrium manusia. mol. Endokrinol.,
16, 141-154. [Garis Tengah]
18) Kaya, HS, Hantak, AM, Stubbs, LJ, Taylor, RN, Bagchi, IC
dan Bagchi, MK (2015): Peran reseptor progesteron A
dan B isoform selama desidualisasi endometrium
manusia. mol. Endokrinol., 29, 882-895.[Medline]
[CrossRef]
19) Mak, IY, Brosens, JJ, Christian, M., Hills, FA, Chamley,
L., Regan, L. dan White, JO (2002): Ekspresi yang diatur dari
transduser sinyal dan aktivator transkripsi, Stat5, dan
peningkatan ekspresi PRL dalam sel stroma endometrium
manusia secara in vitro. J.klin. Endokrinol. Metab., 87,
2581–2588.[Medline] [CrossRef]
20) Ghosh, AK, Lacson, R., Liu, P., Cichy, SB, Danilkovich,
A., Guo, S. and Unterman, TG (2001): Kompleks nukleoprotein
yang mengandung CCAAT/enhancer-binding protein beta
berinteraksi dengan urutan respons insulin dalam gen
protein-1 pengikat faktor pertumbuhan seperti insulin dan
berkontribusi pada gen yang diatur insulin ekspresi. J.Biol.
Kimia., 276, 8507–8515.[Medline] [CrossRef]
21) Takano, M., Lu, Z., Goto, T., Fusi, L., Higham, J., Francis,
J., Withey, A., Hardt, J., Cloke, B., Stavropoulou, AV,
Ishihara, O., Lam, EW, Unterman, TG, Brosens, JJ dan Kim,
JJ (2007): Transkripsi silang pembicaraan antara forkhead
faktor transkripsi forkhead box O1A dan reseptor progesteron
mengkoordinasikan regulasi siklus sel dan diferensiasi dalam
sel stroma endometrium manusia. mol. Endokrinol.,
21, 2334-2349. [Medline] [CrossRef]
22) Kim, JJ, Buzzio, OL, Li, S. dan Lu, Z. (2005): Peran FOXO1A
dalam regulasi insulin-like growth factorbinding protein-1
dalam sel endometrium manusia: interaksi dengan
reseptor progesteron. Biol. Reprod., 73, 833–839.
[Medline] [CrossRef]
23) Matsuoka, A., Kizuka, F., Lee, L., Tamura, I., Taniguchi,
K., Asada, H., Taketani, T., Tamura, H. dan Sugino, N.
(2010): Progesteron meningkatkan ekspresi mangan superoksida
dismutase melalui pensinyalan yang bergantung pada cAMP yang
dimediasi oleh jalur Wnt5a nonkanonik dalam sel stroma
endometrium manusia. J.klin. Endokrinol. Metab., 95, E291–E299.
[Medline] [CrossRef]
24) Wagner, BL, Norris, JD, Knotts, TA, Weigel, NL dan McDonnell, DP
(1998): The corepressors nuklir NCoR dan SMRT adalah
pengatur utama dari aktivitas transkripsi yang bergantung
pada ligan dan 8-bromosiklik AMP manusia reseptor
progesteron. mol. Sel. Biol., 18, 1369–1378.
[Garis Tengah]
25) Jones, MC, Fusi, L., Higham, JH, Abdel-Hafiz, H., Horwitz,
KB, Lam, EW dan Brosens, JJ (2006): Regulasi jalur
SUMO peka membedakan sel stroma endometrium
manusia untuk progesteron . Prok. Natal akad. Sci. AS,
103, 16272-16277.[Medline] [CrossRef]
26) Tanaka, N., Miyazaki, K., Tashiro, H., Mizutani, H. dan
Okamura, H. (1993): Perubahan aktivitas adenilat siklase di
Yoshie, dkk. 101
endometrium manusia selama siklus menstruasi dan desidua
manusia selama kehamilan. J. Reproduksi. Subur., 98, 33–39.
[Medline] [CrossRef]
27) Pansini, F., Bergamini, CM, Bettocchi, S. Jr., Malfaccini,
M., Santoiemma, M., Scoppetta, V., Bagni, B. dan Mollica,
G. (1984): Hormon steroid seks mempengaruhi kandungan cAMP di
endometrium manusia selama siklus menstruasi. Ginekol. Obstet.
Investasikan., 18, 174–177.[Medline] [CrossRef]
28) Maurice, DH, Ke, H., Ahmad, F., Wang, Y., Chung, J. dan
Manganiello, VC (2014): Kemajuan dalam menargetkan
fosfodiesterase nukleotida siklik. Nat. Rev. Drug Discov.,
13, 290–314.[Medline] [CrossRef]
29) Bartsch, O., Bartlick, B. dan Ivell, R. (2004): penghambatan
Phosphodiesterase 4 bersinergi dengan sinyal relaksin untuk
mempromosikan desidualisasi sel stroma endometrium
manusia. J.klin. Endokrinol. Metab., 89, 324–334.[Medline]
[Cross-Ref]
30) Mantena, SR, Kannan, A., Cheon, YP, Li, Q., Johnson,
PF, Bagchi, IC dan Bagchi, MK (2006): C/EBPbeta adalah
mediator penting dari proliferasi dan diferensiasi sel yang
diatur oleh hormon steroid dalam epitel uterus dan
stroma. Prok. Natal akad. Sci. AS, 103, 1870–1875.
[Medline] [CrossRef]
31) Pohnke, Y., Kempf, R. dan Gellersen, B. (1999): CCAAT/
protein pengikat penambah adalah mediator dalam
aktivasi protein kinase A yang bergantung pada promotor
prolaktin desidua. J.Biol. Kimia., 274, 24808–24818.
[Medline] [Cross-Ref]
32) Grimaldi, G., Christian, M., Steel, JH, Henriet, P., Poutanen,
M. dan Brosens, JJ (2011): Down-regulation dari histone
methyltransferase EZH2 berkontribusi pada
pemrograman epigenetik desidualisasi endometrium
manusia sel stroma. mol. Endokrinol., 25, 1892–1903.
[Medline] [CrossRef]
33) Tamura, I., Sato, S., Okada, M., Tanabe, M., Lee, L., Maekawa, R.,
Asada, H., Yamagata, Y., Tamura, H. dan Sugino, N .
(2014): Pentingnya C/EBPβ pengikatan dan status asetilasi
histon di daerah promotor untuk induksi IGFBP-1, PRL,
dan Mn-SOD oleh cAMP dalam sel stroma endometrium
manusia. Endokrinologi, 155, 275-286.[Medline] [CrossRef]
34) Kajihara, T., Jones, M., Fusi, L., Takano, M., Feroze-Zaidi,
F., Pirianov, G., Mehmet, H., Ishihara, O., Higham, JM, Lam, EW
dan Brosens, JJ (2006): Ekspresi diferensial FOXO1 dan FOXO3a
memberikan resistensi terhadap kematian sel oksidatif pada
desidualisasi endometrium. mol. Endokrinol.,
20, 2444–2455. [Medline] [CrossRef]
35) Brar, AK, Handwerger, S., Kessler, CA dan Aronow, BJ
(2001): Induksi gen dan pemrograman ulang kategoris
selama desidualisasi fibroblas endometrium manusia in
vitro. Fisiol. Genomik, 7, 135-148.[Medline] [CrossRef]
36) Mayr, B., dan Montminy, M. (2001): Regulasi transkripsi oleh
faktor CREB yang bergantung pada fosforilasi. Nat. Pdt
Mol. Biol Sel., 2, 599–609.[Medline] [CrossRef]
37) Telgmann, R., dan Gellersen, B. (1998): Gen penanda
desidualisasi: aktivasi gen prolaktin desidua. Bersenandung.
Reproduksi. Perbarui, 4, 472–479.[Medline] [CrossRef]
38) Tang, M., Mazella, J., Zhu, HH dan Tseng, L. (2005): Reseptor
relaksin yang diaktifkan ligan meningkatkan transkripsi
102 J. Ma. Ova Res. Jil. 32 (3), 2015
dari IGFBP-1 dan prolaktin dalam sel stroma desidua dan
endometrium manusia. mol. Bersenandung. Reprod., 11, 237–243.
[Medline] [CrossRef]
39) de Rooij, J., Zwartkruis, FJ, Verheijen, MH, Cool, RH, Nijman,
SM, Wittinghofer, A. and Bos, JL (1998): Epac adalah faktor
pertukaran guanin-nukleotida Rap1 yang langsung
diaktifkan oleh siklik AMP. Alam, 396, 474–477.[Medline]
[CrossRef]
40) Kawasaki, H., Springett, GM, Mochizuki, N., Toki, S., Nakaya,
M., Matsuda, M., Housman, DE dan Graybiel, AM
(1998): Sebuah keluarga protein pengikat cAMP yang secara
langsung mengaktifkan Rap1. Sains, 282, 2275–2279.[Medline]
[Cross-Ref]
41) Rehmann, H., Arias-Palomo, E., Hadders, MA, Schwede,
F., Llorca, O. dan Bos, JL (2008): Struktur Epac2 di
kompleks dengan analog AMP siklik dan RAP1B. Alam,
455, 124–127. [Medline] [CrossRef]
42) Bos, JL (2006): Protein Epac: target cAMP multiguna.
Tren Biokimia. Sci., 31, 680–686.[Medline] [Cross-Ref]
43) Kusama, K., Yoshie, M., Tamura, K., Kodaka, Y., Hirata,
A., Sakurai, T., Bai, H., Imakawa, K., Nishi, H., Isaka, K.,
Nagai, T., Nagao, T. dan Tachikawa, E. (2013): Regulasi
desidualisasi dalam sel stroma endometrium manusia
melalui pertukaran protein langsung diaktifkan oleh AMP siklik
(Epac). Plasenta, 34, 212–221.[Medline] [CrossRef]
44) Yoshie, M., Kaneyama, K., Kusama, K., Higuma, C., Nishi, H.,
Isaka, K. dan Tamura, K. (2010): Kemungkinan peran protein
pertukaran langsung diaktifkan oleh siklik AMP (Epac) dalam
diferensiasi fungsional yang bergantung pada AMP siklik dan
sinkronisasi sel BeWo plasenta manusia. Bersenandung.
Reprod., 25, 2229–2238.[Medline] [CrossRef]
45) Kusama, K., Yoshie, M., Tamura, K., Nakayama, T., Nishi,
H., Isaka, K. dan Tachikawa, E. (2014): Peran protein
pertukaran langsung diaktifkan oleh ekspresi calreticulin
AMP 2-dimediasi siklik dalam desidualisasi sel stroma
endometrium manusia. Endokrinologi, 155, 240–248.
[Medline] [CrossRef]
46) Michalak, M., Groenendyk, J., Szabo, E., Gold, LI dan
Opas, M. (2009): Calreticulin, pendamping penyangga
kalsium multi-proses dari retikulum endoplasma.
Biokimia. J., 417, 651–666.[Medline] [CrossRef]
47) Hirota, Y., Daikoku, T., Tranguch, S., Xie, H., Bradshaw,
HB dan Dey, SK (2010): Defisiensi p53 spesifik uterus
menyebabkan penuaan dini uterus dan mendorong kelahiran
prematur pada tikus. J.klin. Investasikan., 120, 803–815.
[Medline] [CrossRef]