Abstrak

Pati resisten (RS) telah terbukti bermanfaat mempengaruhi sensitivitas insulin pada individu sehat dan
mereka yang mengalami sindrom metabolik, tetapi efeknya pada diabetes tipe 2 manusia (DMT2) tidak
diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh peningkatan konsumsi RS terhadap
sensitivitas insulin dan kendali glukosa serta perubahan metabolit postprandial dan lemak tubuh pada
DMT2. Tujuh belas orang dengan T2DM yang terkontrol dengan baik (HbA1c 46.6G2 mmol / mol)
dikonsumsi, dalam urutan acak, baik 40 g tipe 2 RS (HAM-RS2) atau plasebo, setiap hari selama 12
minggu dengan periode pencucian 12 minggu di antara. Pada akhir setiap periode intervensi, peserta
menghadiri tiga penyelidikan metabolik: klem euglikemik-hiperinsulinemik dua langkah yang
dikombinasikan dengan infus glukosa [6,6-2H2], tes toleransi makan (MTT) dengan pengambilan sampel
arterio-vena di lengan bawah, dan pencitraan seluruh tubuh. HAM-RS2 menghasilkan konsentrasi
glukosa postprandial yang lebih rendah secara signifikan (PZ0.045) dan tren untuk pengambilan glukosa
yang lebih besar di seluruh otot lengan bawah (PZ0.077); Namun, tidak ada efek HAM-RS2 pada
sensitivitas insulin hati atau perifer, atau pada HbA1c. Konsentrasi asam lemak non-esterifikasi puasa
(NEFA) secara signifikan lebih rendah (PZ0.004) dan penekanan NEFA lebih besar selama penjepit
dengan HAM-RS2 (PZ0.001). Konsentrasi trigliserida puasa (TG) dan konsentrasi TG intramuskular soleus
secara signifikan lebih tinggi setelah konsumsi HAM-RS2 (PZ0.039 dan PZ0.027 masing-masing).
Meskipun konsentrasi GLP1 puasa secara signifikan lebih rendah setelah konsumsi HAM-RS2 (PZ0.049),
kunjungan GLP1 postprandial selama MTT secara signifikan lebih besar (PZ0.009). HAM-RS2 tidak
meningkatkan sensitivitas insulin jaringan pada DMT2 yang terkontrol dengan baik, tetapi menunjukkan
efek menguntungkan pada penanganan makanan, mungkin karena GLP1 postprandial yang lebih tinggi.

Latar Belakang

Diperkirakan bahwa 25,8 juta anak-anak dan orang dewasa di AS menderita diabetes (8,3% dari
populasi), setara dengan biaya kesehatan sebesar $ 218 miliar (w10% dari total pengeluaran perawatan
kesehatan). Intervensi gaya hidup, terutama modulasi untuk asupan makanan, adalah strategi lini
pertama dalam pengobatan diabetes dan tetap menjadi tema yang konstan selama penatalaksanaan.

Secara tradisional, serat makanan telah digunakan untuk mengelola konsentrasi glukosa darah dan telah
dikaitkan dengan peningkatan kontrol glikemik pada kelompok sehat dan mereka dengan diabetes
melalui berbagai meta-analisis (1). Asupan serat yang direkomendasikan USDA adalah 14 g / 1000 kkal
pada orang sehat, dengan bukti yang saat ini kurang untuk merekomendasikan asupan yang lebih tinggi
pada penderita diabetes. Hal ini disorot dalam pernyataan komite penasihat ilmiah (SACN) tentang
nutrisi yang menyatakan, meskipun asupan serat sereal telah dikaitkan dengan penurunan insiden jenis.

Diabetes tipe 2(DMT2) dan faktor risiko metabolik seperti resistensi insulin, sebagian besar bukti
berkaitan dengan pencegahan DMT2. Meskipun hal ini penting mengingat epidemi obesitas saat ini, hal
ini tidak dapat serta merta diterjemahkan ke dalam manfaat kesehatan bagi pasien dengan DMT2 (2).

Pati resisten (RS) adalah sejenis serat sereal dan telah terbukti memiliki efek menguntungkan pada
sensitivitas insulin dan metabolisme asam lemak (FA) pada individu sehat dan mereka yang mengalami
sindrom metabolik (3, 4, 5, 6, 7). Namun, kemanjuran RS pada individu dengan DMT2 belum diteliti.
Penelitian pada hewan secara konsisten menunjukkan bahwa RS meningkatkan metabolisme glukosa
dan insulin melalui peningkatan sekresi GLP1 postprandial karena stimulasi sel enteroendokrin kolon (8,
9). Hal ini dapat meningkatkan sekresi insulin. Baru-baru ini data kami sendiri menunjukkan pemulihan
sekresi insulin fase pertama pada sindrom metabolik (10); namun, kurangnya pekerjaan penerjemahan
baru-baru ini disorot (11). Posisi ADA di RS menyatakan 'tidak ada studi jangka panjang yang
dipublikasikan pada subjek dengan diabetes untuk membuktikan manfaat dari penggunaan pati resisten'
(12), sedangkan Kelompok Studi Nutrisi Diabetes dari EASD (13) tidak menyebutkan RS , yang
menyatakan bahwa 'total serat makanan idealnya lebih dari 20 g / 1000 kkal'. Asupan serat AS dan
Inggris saat ini sama dengan w7 g dan 6 g / 1000 kkal, masing-masing, kurang dari pedoman jumlah
harian (GDA) yang bahkan sederhana.

Tujuan utama dari penelitian ini adalah untuk menerjemahkan efek menguntungkan dari pemberian
makan RS yang dilaporkan pada kelompok yang sehat dan resisten insulin, menjadi pengamatan serupa
dalam kohort T2DM. Menggunakan pendekatan seluruh tubuh yang terintegrasi, pelacak isotop stabil
untuk membedakan antara perubahan sensitivitas insulin hati dan perifer dari pengambilan glukosa,
analisis komposisi tubuh menggunakan magnetic resonance imaging (MRI) dan magnetic resonance
spectroscopy (MRS) untuk menyelidiki perubahan depot lemak tubuh. distribusi, dan tes toleransi
makan (MTT) yang dikombinasikan dengan pengambilan sampel arterio-vena (AV) di seluruh jaringan
otot, untuk pertama kalinya kami menyelidiki keefektifan peningkatan asupan RS untuk mencapai
asupan serat total di atas GDA pada individu dengan T2DM.

Subjek dan Metode

Pasien

Tujuh belas orang dengan DMT2 (12 laki-laki, lima perempuan; usia rata-rata 55 (S.E.M. 2,4) tahun, rata-
rata BMI 30,6 (S.E.M. 1,3) kg / m2) terdaftar dalam penelitian ini. Semua peserta memiliki diabetes yang
terkontrol dengan baik (rata-rata kadar HbA1c 46,6 (SEM 2) mmol / mol saat skrining) dan diet dan
olahraga terkontrol (2/17), menggunakan metformin (13/17) atau metformin dan pioglitazone (2/17 ),
berat badan stabil, dan dikeluarkan jika mereka memiliki riwayat penyakit gastrointestinal,
kardiovaskular, atau penyakit endokrin lainnya.

Penelitian dilakukan sesuai dengan pedoman yang ditetapkan dalam Deklarasi Helsinki, dan semua
prosedur telah disetujui oleh Komite Etik Penelitian NHS Kent (10 / H1101 / 29) dan Komite Etik
Penelitian Universitas Surrey. Persetujuan tertulis diperoleh dari semua pasien. Uji coba ini didaftarkan
melalui Nomor Uji Coba Terkendali Acak Standar Internasional 10727538

Desain studi

Penelitian dilakukan sebagai studi crossover intervensi diet acak tersamar tunggal, membandingkan RS
yang berasal dari jagung dengan plasebo yang dicocokkan dengan kandungan karbohidrat yang tersedia.
Peserta diberikan suplemen berlabel 'A' atau 'B' dan tidak mengetahui komposisinya. Setiap suplemen
dikonsumsi setiap hari selama 12 minggu dengan periode pencucian 12 minggu antara intervensi.
Selama minggu terakhir setiap periode intervensi, peserta menyelesaikan buku harian makanan dan
minuman selama 7 hari dan buku harian tentang gejala dan kebiasaan buang air besar selama 7 hari.
Peserta menghadiri tiga kunjungan studi pada akhir setiap intervensi: i) penjepit euglikemik-
hiperinsulinemik dua langkah yang dikombinasikan dengan infus [6,6-2H2] glukosa, ii) MTT dengan
pengambilan sampel AV di seluruh otot lengan bawah , dan iii) pemindaian MRI. Dua penelitian pertama
dilakukan di Rumah Sakit Royal Surrey County, Inggris dan yang ketiga di Pusat Ilmu Klinis MRC, Rumah
Sakit Hammersmith, Inggris. Sebelum setiap kunjungan studi, pasien mengonsumsi makan malam
standar dan kemudian berpuasa selama 12 jam. Mereka diinstruksikan untuk menghindari olahraga
berat dan alkohol selama 24 jam sebelumnya.

Peserta diacak untuk mengonsumsi 67 g Hi-maize 260 (terdiri dari 60% RS dan 40% pati yang dapat
dicerna dengan cepat yang diukur oleh Asosiasi Ahli Kimia Analitik Resmi untuk metode serat makanan
total 991.43) atau 27 g Amioca (100% RDS). Kedua suplemen tersebut dipasok oleh Ingredion, Inc.
(Bridgewater, NJ, USA) dalam sachet siap pakai yang dicampur ke dalam minuman, dan partisipan
diharuskan mengonsumsi dua sachet setiap hari untuk mendapatkan dosis yang tepat. Dalam hasil dan
pembahasan, suplemen jagung tinggi akan disebut sebagai HAM-RS2 dan suplemen Amioca sebagai
plasebo.

Penjepit euglikemik-hiperinsulinemik dengan isotop stabil "Peserta tiba dengan puasa dan setelah buang
air kecil, berat badan dan komposisi diukur dengan bioimpedansi (Tanita, Arlington Heights, IL, USA).
Sebuah kanula iv dimasukkan ke setiap lengan untuk pengambilan sampel darah dan untuk glukosa,
insulin, dan infus isotop. Sampel darah awal dikumpulkan dan infus terus menerus [6,6-2H2] glukosa
(170 mg; 1,7 mg / menit) dimulai. Setelah keadaan stabil tercapai, lima sampel darah diambil antara 100
dan 120 menit.Pada 120 menit, penjepit euglikemik-hiperinsulinemik dua langkah dimulai. Langkah
pertama menilai produksi glukosa hati (endogen) (EGP) dan melibatkan infus insulin (Actrapid, Novo
Nordisk, Bagsvaerd, Denmark) dari

0,3 mU / kg per menit (dosis rendah) selama 120 menit. Langkah kedua menilai sensitivitas insulin dari
pengambilan glukosa (pembuangan, Rd) dan melibatkan infus insulin 1,5 mU / kg per menit (dosis tinggi)
selama 180 menit selanjutnya. Konsentrasi glukosa plasma dipertahankan pada tingkat puasa melalui
infus variabel dekstrosa 20% yang dibubuhi glukosa [6,6-2H2] (8 mg / g untuk dosis rendah dan 10 mg /
g untuk dosis tinggi). Sampel darah diambil setiap 10 menit dan konsentrasi glukosa darah diukur segera
dengan metode glukosa oksidase menggunakan YSI 2300 STAT Plus (YSI Life Sciences, Fleet, UK). Sampel
tambahan diambil selama langkah dosis rendah (210-240 menit) dan tinggi (390-420 menit).

Karena kesulitan dengan akses vena pada beberapa individu, data untuk klem euglikemik-
hiperinsulinemik disajikan hanya untuk nZ15.

MTT dengan pengambilan sampel AV "Mengikuti sisa 10 menit, kecepatan gelombang nadi karotis-
femoralis, analisis gelombang nadi brakialis (termasuk pengukuran tekanan arteri rata-rata, tekanan
nadi aorta, indeks augmentasi, stroke volume, tekanan darah aorta sistolik dan diastolik, dan tekanan
darah total resistensi perifer), dan tekanan darah dinilai menggunakan sistem Vicorder (Smart Medical,
Inc., La Mirada, CA, USA).
Untuk menilai metabolisme otot rangka in vivo, perbedaan A-V di seluruh otot lengan dinilai seperti
yang dijelaskan sebelumnya (5). Darah yang mengalami arterialisasi diperoleh dari kanula yang
dimasukkan ke tangan yang ditempatkan dalam kotak yang dipanaskan (50 8C). Darah vena diambil dari
kanula yang ditempatkan ke dalam vena yang mengeringkan otot dalam dari lengan yang berlawanan
dan tangan ditutup selama 2 menit sebelum mengambil setiap sampel menggunakan manset
pergelangan tangan yang dipompa hingga 20 mmHg di atas tekanan darah sistolik. Saturasi oksigen
dinilai di setiap tempat untuk memastikan penempatan dan arteriisasi yang benar, dengan batas dari!
60% O2 untuk darah vena dan O95% O2 untuk darah arterialisasi.

Dua sampel darah puasa diambil secara bersamaan dari kedua situs. Pasien kemudian mengonsumsi
makanan cair standar yang tidak mengandung salah satu suplemen (436 kkal, 61,2 g karbohidrat, 11,9 g
lemak, dan 0 g serat makanan) pada waktu 0. Sampel darah selanjutnya dikumpulkan secara bersamaan
dari kedua situs setiap setengah jam selama 5 jam

Karena kesulitan dengan akses vena, data postprandial yang disajikan hanya untuk 16 pasien dan data
perbedaan A-V hanya untuk 12 pasien.

Pencitraan resonansi magnetik "Setelah tiba di unit MRI, pasien menjalani pemindaian MRI seluruh
tubuh untuk mengukur total dan isi jaringan adiposa regional (AT), serta pengukuran MRS proton hati,
pankreas, dan otot (1H-MRS) seperti yang dijelaskan sebelumnya (3) Karena tidak semua individu
merupakan kandidat yang cocok untuk pemindaian MRI, data yang disajikan hanya untuk 14 pasien.

Biokimia

Metabolit dari kelompok plasebo dan HAM-RS2 dianalisa bersama dengan variasi intra-assay CV 2,5%
untuk semua metabolit. Sampel plasma yang dikumpulkan selama penjepit dianalisis secara enzimatis
untuk konsentrasi glukosa menggunakan Cobas Mira (Roche Laboratories). Pengayaan isotop dari
sampel plasma yang sama diukur dengan kromatografi gas spektrometri massa pada detektor selektif
massa HP5971A (Agilent, Santa Clara, CA, USA). Pengayaan ditentukan dengan menggunakan turunan
penta-O-trimetilsilil-D-glukosa-O-metoksim yang dianalisis dengan pemantauan ion yang dipilih dari ion-
ion tersebut pada rasio muatan-ke-massa 319 dan 321 (14). Konsentrasi glukosa plasma dari MTT diukur
menggunakan metode oksidase glukosa pada YSI 2300 STAT Plus (YSI Life Sciences) dengan koefisien
variasi intraassay (CV) 1,7%. Konsentrasi insulin plasma selama penjepit dan MTT diukur dengan ELISA
(Millipore, Billerica, MA, USA) dengan inter-assay CV! 14% dan intra-assay CV! 10%.

Trigliserida plasma (TG), FA non-esterifikasi (NEFA), kolesterol total, dan konsentrasi kolesterol HDL
diukur dengan menggunakan kit yang tersedia secara komersial untuk ILab650 (Laboratorium
Instrumentasi, Warrington, Inggris), dengan semua nilai CV antar-uji menjadi! 2.5 % dan semua nilai CV
intra-assay menjadi! 1,5%.

Faktor nekrosis tumor puasa a (TNFa) dan interleukin 6 (IL6) diukur dengan ELISA Kits yang tersedia
secara komersial (2B Scientific, Upper Heyford, UK) dengan nilai CV antar-assay! 4 dan! 18% masing-
masing dan nilai CV intra-assay! 7 dan! 10% masing-masing. Adiponektin plasma dan leptin diukur
menggunakan ELISA (Millipore) dengan CV intra-assay masing-masing 3,6 dan 4,4%.
Sampel darah untuk C-peptida dan analisis GLP1 total dari MTT dikumpulkan ke dalam tabung kalium
EDTA yang berisi 200 aprotinin / ml kallikrein unit (KIU) darah. Sampel plasma kemudian diukur dengan
ELISA (Millipore), dengan nilai CV inter- dan intra-assay

! 25 dan! 6,5% masing-masing untuk C-peptida dan GLP1.

Serum short-chain FAs (SCFAs) diukur menggunakan metode berbasis kromatografi gas seperti yang
dijelaskan sebelumnya (15, 16). Untuk setiap sampel, 1 ml diinjeksikan ke dalam sistem GC Hewlett
Packard 5890 Seri II yang dilengkapi dengan Kolom Kapiler Nukol (30 m! 0,53 mm! 1,0 mm, SUPELCO
Analytical, Poole, Dorset, UK) dan detektor ionisasi nyala. Puncak diintegrasikan menggunakan Agilent
Chem-Station Software, dan isi SCFA dihitung dengan metode standar internal titik tunggal. Identitas
puncak dan faktor respon internal ditentukan dengan menggunakan koktail kalibrasi 1 mM, termasuk
asam asetat, propionat, iso-butirat, butirat, iso-valer, valerat, etil-butirat, dan asam kaproat.

Ukuran sampel retrospektif

Ukuran sampel didasarkan pada nZ15 (7). Berdasarkan 15 peserta yang menyelesaikan studi persilangan
ini (aZ0.05), akan ada kemungkinan 82% untuk mendeteksi perbedaan perlakuan

73,7 mmol / l per menit di area glukosa di bawah kurva (AUC) 0–120 menit, berdasarkan asumsi
pengobatan S.D. dari 84, dengan toleransi glukosa postprandial sebagai ukuran hasil utama. Baik
pengambilan A-V dan pemindaian MRI tidak dilakukan karena masalah dengan akses vaskular dan tak
terdugalaustrofobia pada sejumlah pasien. Berdasarkan jumlah peserta yang sebenarnya, perkiraan
kekuatan retrospektif untuk mendeteksi perbedaan dalam pengambilan glukosa A-V ke dalam otot
adalah 84%, berdasarkan pengobatan S.D. dari 58 dan efek pengobatan terukur 111 mmol / l per 100 ml
jaringan. Untuk ukuran MRI, variabilitas antar-individu yang ditemukan dalam kohort DMT2 ini jauh
lebih tinggi daripada yang diharapkan berdasarkan data yang tersedia dari mereka yang tidak menderita
diabetes. Dengan demikian, hasil sekunder ini secara signifikan kurang bertenaga selama penelitian,
dengan hanya 21% daya (aZ0.05) karena variabel perlakuan S.D. dari 4.2.

Perhitungan dan analisis statistik

Kolesterol LDL dihitung dengan menggunakan persamaan Friedewald (17). Sensitivitas insulin puasa (%
S) dan fungsi sel-b (% B) dinilai dengan penilaian model homeostatis (HOMA) (18), dan sensitivitas
insulin postprandial dihitung menggunakan indeks Matsuda (19).

Selama penjepit, EGP dan glukosa Rd dihitung menggunakan model yang diusulkan oleh Steele (20) yang
dimodifikasi untuk memasukkan penggunaan isotop stabil. Volume distribusi diasumsikan 22% dari
berat badan. Perhitungan juga dimodifikasi untuk memasukkan [6,6-2H2] glukosa dalam infus dekstrosa
(21). Sebelum perhitungan pergantian glukosa, konsentrasi glukosa plasma dan kursus waktu pengayaan
glukosa dihaluskan menggunakan analisis teknik segmen optimal (22). Untuk setiap titik waktu, EGP dan
Rd dihitung. Data dinyatakan sebagai EGP dan Rd rata-rata dari lima nilai sampel yang dikumpulkan
selama setiap kondisi tunak (dosis dasar, rendah, dan tinggi).
AUC dihitung menggunakan aturan trapesium selama 0-120 menit (AUC0-120 menit) untuk masing-
masing metabolit postprandial. AUC inkremental (iAUC) juga dihitung untuk memungkinkan adanya
perbedaan yang signifikan dalam konsentrasi dasar. Selama MTT, perbedaan A-V dalam konsentrasi
metabolit dihitung. Total pengambilan FA ke dalam otot dihitung dari tingkat pembuangan TG dan NEFA
di seluruh jaringan seperti yang dijelaskan sebelumnya (5).

Semua analisis diet dilakukan dengan menggunakan software analisis nutrisi (versi Dietplan6
Professional, Forestfield Software, Horsham, Inggris) dan asupan harian rata-rata dihitung.

Semua analisis statistik dilakukan dengan menggunakan SPSS 19.0 for Windows. Signifikansi statistik
diambil sebagai P! 0,05. Semua data dinormalisasi dan dianalisis menggunakan uji-t sampel berpasangan
dan data kursus waktu dianalisis menggunakan ANOVA pengukuran berulang. Karena heterogenitas dari
kelompok pasien, koefisien korelasi Pearson eksplorasi dihitung untuk menilai hubungan potensial.
Untuk korelasi ini, persentase perubahan setelah konsumsi HAM-RS2 dibandingkan dengan plasebo
dihitung. Semua hasil dinyatakan sebagai meanGS.E.M.

Hasil

Dimasukkannya kedua suplemen ke dalam pola makan kebiasaan dapat ditoleransi dengan baik oleh
para peserta sebagaimana dinilai oleh catatan harian tentang kebiasaan buang air dan gejala. Satu-
satunya efek samping yang dilaporkan adalah peningkatan ringan tapi signifikan dalam peringkat perut
kembung dengan HAM-RS2 dibandingkan dengan plasebo (1,1G 0,2 vs 0,7G0.1, masing-masing, PZ0.006,
diukur pada skala 0-4 (tidak ada melemahkan)).

Tidak ada perbedaan yang signifikan pada asupan energi antara HAM-RS2 dan plasebo (masing-masing
2044G116 vs 2089G 119 kkal). Juga tidak ada perbedaan yang signifikan dalam asupan karbohidrat dan
lemak; Namun, asupan protein secara signifikan lebih rendah dengan HAM-RS2 dibandingkan dengan
plasebo (84.2G2.6 vs 92.3G4.8 g, PZ0.043). Seperti yang diharapkan, asupan serat rata-rata meningkat
secara signifikan selama intervensi HAM-RS2 (60.1G1.3 dibandingkan dengan 22.7G1.9 g; P! 0.001), yang
dapat langsung dikaitkan dengan suplemen HAM-RS2.

Tidak ada perbedaan yang signifikan pada asupan energi

antara HAM-RS2 dan plasebo (masing-masing 2044G116 vs 2089G 119 kkal). Juga tidak ada perbedaan
yang signifikan dalam asupan karbohidrat dan lemak; Namun, asupan protein secara signifikan lebih
rendah dengan HAM-RS2 dibandingkan dengan plasebo (84.2G2.6 vs 92.3G4.8 g, PZ0.043). Seperti yang
diharapkan, asupan serat rata-rata meningkat secara signifikan selama intervensi HAM-RS2 (60.1G1.3
dibandingkan dengan 22.7G1.9 g; P! 0.001), yang dapat langsung dikaitkan dengan suplemen HAM-RS2.
Metabolisme glukosa dan sensitivitas insulin

Nilai HAM-RS2 Placebo P.

Tidak ada perbedaan yang signifikan, antara HAM-RS2 dan plasebo pada akhir intervensi 12 minggu,
dalam glukosa puasa atau insulin (Tabel 1) dan oleh karena itu tidak ada perbedaan yang signifikan
dalam sensitivitas insulin puasa atau fungsi sel-b seperti yang dinilai oleh HOMA (Tabel 1). Demikian
pula, tidak ada perbedaan yang signifikan antara intervensi dalam pengendalian glukosa jangka panjang
seperti yang dinilai oleh HbA1c (Tabel 1). Selama penjepit euglikemik-hiperinsulinemia dua langkah,
tidak ada perbedaan yang diamati antara intervensi di EGP di basal (plasebo, 11.5G0.6 mmol / kg per
menit dan HAM-RS2, 10.7G0.7 mmol / kg per menit) atau selama infus insulin dosis rendah (plasebo,
4.6G0.3 mmol / kg per menit dan HAM-RS2, 5.0G0.4 mmol / kg per menit). Tidak ada perbedaan
signifikan yang diamati antara intervensi untuk glukosa Rd di basal (plasebo, 11.9G0.5 mmol / kg per
menit dan HAM-RS2, 10.7G0.8 mmol / kg per menit) atau selama infus insulin dosis tinggi (plasebo, 47.0
G5.4 mmol / kg per menit dan HAM-RS2, 47.3G6.0 mmol / kg per menit). Tidak ada perbedaan
konsentrasi insulin selama penelitian penjepit. Konsentrasi glukosa postprandial selama MTT
menunjukkan perlakuan yang signifikan dengan interaksi waktu (PZ0.045; Gambar 1A); ini
diterjemahkan sebagai penurunan yang signifikan dalam glukosa AUC0-120 menit dengan HAM-RS2
(PZ0.036). Pengambilan sampel A-V di seluruh otot lengan bawah juga menunjukkan tren penyerapan
glukosa yang lebih tinggi dengan HAM-RS2 dibandingkan dengan plasebo (PZ0.077; Gambar 1B).
Konsentrasi glukosa postprandial yang lebih rendah dengan HAM-RS2 tidak terkait dengan penurunan
yang signifikan dari konsentrasi insulin plasma; Namun, ada efek interaksi waktu perlakuan yang
signifikan terhadap konsentrasi peptida-C plasma (PZ0.038; data tidak ditampilkan). Tidak ada
perbedaan yang signifikan antara intervensi untuk sensitivitas insulin postprandial yang dinilai dengan
indeks Matsuda (19).

Metabolisme lemak

Peningkatan konsumsi HAM-RS2 menghasilkan konsentrasi TG puasa yang secara signifikan lebih tinggi
(PZ0.039; Tabel 1) dibandingkan dengan plasebo, tanpa efek pada konsentrasi kolesterol. Setelah 12
minggu peningkatan konsumsi HAM-RS2, konsentrasi NEFA puasa secara signifikan lebih rendah
(PZ0.004; Tabel 1) dan ada penekanan diferensial yang lebih besar dari NEFA oleh insulin selama
penjepit dua langkah (PZ0.001; Gbr. 2). Selama MTT, tidak ada efek pengobatan pada konsentrasi
postprandial NEFA atau TG dan tidak ada efek pada fluks FA yang diukur dengan pengambilan sampel A-
V (data tidak ditampilkan); Namun, persentase peningkatan pengambilan FA ke dalam otot dari plasebo
ke asupan HAM-RS2 berkorelasi secara signifikan baik dengan peningkatan pembuangan glukosa (Rd)
yang diukur selama studi penjepit (PZ0.036) dan dengan fluks glukosa yang diukur dengan pengambilan
sampel AV di postprandial. negara bagian (PZ0.004).

Penanda inflamasi, SCFA, dan hormon

Peningkatan asupan HAM-RS2 selama 12 minggu menghasilkan konsentrasi TNFa puasa yang secara
signifikan lebih rendah (PZ0.013; Tabel 1) tetapi tidak memiliki efek pada konsentrasi IL6 puasa (Tabel 1).
Juga tidak ada efek pengobatan HAM-RS2 pada leptin plasma puasa atau konsentrasi adiponektin (Tabel
1). Konsentrasi plasma propionat dan butirat puasa secara signifikan lebih rendah (PZ0.021 dan P! 0,001
masing-masing) mengikuti HAM-RS2 dibandingkan dengan plasebo, tetapi tidak ada perbedaan yang
signifikan antara perlakuan untuk konsentrasi plasma asetat (Tabel 1).

Konsentrasi GLP1 puasa secara signifikan lebih rendah (PZ0.049) setelah HAM-RS2 dibandingkan dengan
plasebo; Namun, ada perjalanan makan GLP1 secara signifikan lebih besar dengan HAM-RS2
dibandingkan dengan plasebo (PZ0.009; Gbr. 1C).

Fungsi pembuluh darah dan tekanan darah

Tidak ada perbedaan yang signifikan dalam tekanan darah, kecepatan gelombang nadi karotis-femoralis
atau salah satu penanda klinis dari fungsi vaskular (data tidak ditampilkan) setelah HAM-RS2.

Berat badan dan Komposisi tubuh

Meski ada perbedaan signifikan pada berat badan, BMI, atau massa lemak (Tabel 1), setelah 12 minggu
peningkatan asupan HAM-RS2, kandungan lipid intramyocellular soleus (S-IMCL) secara signifikan lebih
tinggi dibandingkan dengan plasebo (PZ0.027; Tabel 1); tibialis IMCL (T-IMCL) juga lebih tinggi setelah
HAM-RS2 meskipun tidak signifikan (Tabel 1). Peningkatan S-IMCL ini secara signifikan berkorelasi
dengan penurunan puasa NEFA (PZ0.022) dan HbA1c (PZ0.017). Tidak ada perbedaan signifikan lainnya
antara intervensi untuk depot lemak hati, pankreas atau AT, yang dinilai dengan pemindaian MRS.
 Tabel 1 Pengukuran antropometri,
depot lemak tubuh, dan konsentrasi
plasma puasa diambil setelah 12
minggu suplementasi dengan 40 g /
hari HAM-RS2 dibandingkan dengan
plasebo. MeanG

S.E.M. untuk 17 pasien.

Diskusi

Meskipun konsumsi HAM-RS2 telah diteliti secara ekstensif pada kelompok sehat dan mereka dengan
sindrom metabolik (3, 4, 5, 6, 7, 10), pekerjaan ini merupakan upaya pertama untuk menerjemahkan
temuan ini menjadi pengobatan diet yang manjur untuk T2DM manusia. Pada individu dengan diabetes
yang terkontrol dengan baik (rata-rata HbA1c, 46,6 mmol / mol dan target level Inggris untuk T2DM, 48
mmol / mol), mengonsumsi hipoglikemik oral, asupan HAM-RS2 menghasilkan peningkatan yang
signifikan dalam penanganan glukosa makanan (Gbr. 1) ) tanpa perubahan dalam pengobatan,
kebiasaan diet, olahraga, atau bahkan penurunan berat badan. Namun, tidak ada perubahan dalam
HbA1c setelah suplementasi, tetapi karena intervensi relatif singkat pada 12 minggu pada pasien yang
sudah mencapai level HbA1c target, periode yang lebih lama mungkin diperlukan untuk hal ini menjadi
jelas. Meskipun tujuan utama dari pekerjaan ini adalah untuk menerjemahkan hasil positif dari individu
dengan peningkatan risiko diabetes menjadi mereka dengan kondisi tersebut (3, 7), terbukti bahwa
terdapat perbedaan yang jelas dalam responsivitas antara kelompok pasien terhadap perubahan pola
makan. Tanpa diduga, sensitivitas insulin intravena yang dinilai dengan teknik klem hiperinsulinemik
tidak dipengaruhi oleh asupan HAM-RS2, meskipun penanganan glukosa oral membaik. Perbedaan
antara i.v. dan pembuangan glukosa oral mungkin menyiratkan faktor yang dimediasi oleh usus yang
bertanggung jawab atas efek, sebuah fenomena yang sering dikaitkan dengan GLP1. Memang, GLP1,
incretin yang terdefinisi dengan baik, ditemukan meningkat postprandially setelah asupan HAM-RS2,
lagi-lagi sebuah temuan yang tidak ditemukan dalam pekerjaan kami yang diterbitkan sebelumnya pada
mereka yang tidak menderita diabetes (23) tetapi telah dilaporkan dalam penelitian RS di model hewan
(24). Menariknya, tidak ada efek dari GLP1 yang meningkat ini pada level insulin postprandial sehingga
efek apapun pada pembuangan glukosa postprandial mungkin telah melalui mekanisme insulin-
independent. GLP1 telah terbukti secara langsung meningkatkan pengambilan glukosa otot pada model
hewan pengerat (25), dengan reseptor GLP1 baru-baru ini dilokalisasi ke otot rangka manusia (26).

Gambar.1) Konsentrasi glukosa postprandial (A), fluks glukosa ke jaringan otot diukur dengan sampling arterio-
vena di seluruh otot lengan bawah (B), dan perubahan dari konsentrasi GLP1 postprandial dasar (C) selama MTT
pada akhir 12 minggu suplementasi dengan HAM-RS2 (lingkaran terisi) dibandingkan dengan plasebo (lingkaran
terbuka). MeanCS.E.M.s untuk 16 pasien (A dan C) dan 12 pasien (B). Ada pengobatan yang signifikan! Interaksi
waktu untuk konsentrasi glukosa postprandial seperti yang dinilai dengan tindakan berulang ANOVA (PZ0.045),
yang sesuai dengan AUC0-120 menit yang berkurang secara signifikan setelah suplemen HAM-RS2 (PZ0.036)
dibandingkan dengan uji-t berpasangan. Pengukuran berulang ANOVA menunjukkan kecenderungan peningkatan
pengambilan glukosa dengan HAM-RS2 dibandingkan dengan plasebo (PZ0.077). Ada respon GLP1 yang secara
signifikan lebih besar dengan HAM-RS2 dibandingkan dengan plasebo (PZ0.009) dibandingkan dengan uji-t
berpasangan pada iAUC0-120 menit.

Gambar.2) Konsentrasi NEFA plasma selama dua langkah euglikemik-hiperinsuli-nemic pada akhir 12
minggu suplementasi dengan HAM-RS2 (lingkaran terisi) dibandingkan dengan plasebo (lingkaran
terbuka). MeanCS.E.M.s untuk 15 pasien. Pengukuran berulang ANOVA menunjukkan penekanan
diferensial yang lebih besar dari NEFA oleh insulin dengan HAM-RS2 dibandingkan dengan plasebo
(PZ0.001).

GLP1 secara akut meningkatkan kadar oksida nitrat (NO) sehingga perubahan akut pada perekrutan
mikrovaskuler (27) dan fungsi endotel (28) pada tingkat otot diyakini terlibat dalam efek ini. Dalam studi
saat ini, pengambilan glukosa di seluruh otot lengan bawah yang diukur secara langsung menggunakan
pengambilan sampel AV meningkat setelah asupan HAM-RS2 dan dengan latar belakang GLP1 yang
meningkat (Gbr. 1) meskipun gagal mencapai signifikansi statistik (PZ0.077) pada 12 pasien di yang
sampel darah arterialized diperoleh. Menariknya, dalam membandingkan data yang diperoleh dari
mereka dengan T2DM dengan hasil yang diperoleh menggunakan teknik yang identik pada pasien
sindrom metabolik (7), tampak bahwa asupan HAM-RS2 meningkatkan serapan glukosa otot di Pasien
T2DM ke tingkat yang ditemukan pada pasien pra-diabetes / sindrom metabolik. Karena asupan HAM-
RS2 dalam sindrom metabolik telah terbukti menormalkan pengambilan glukosa ke tingkat 'sehat', dapat
dihipotesiskan bahwa periode suplementasi yang lebih lama akan berpotensi meningkatkan toleransi
glukosa makanan lebih lanjut pada DMT2 daripada yang dicapai investigasi 12- minggu pertama.

Efek metabolik lain yang dikaitkan dengan asupan HAM-RS2, seperti peningkatan aktivitas anti-lipolitik
insulin dalam lipolisis AT, kini juga telah dikonfirmasi dalam penelitian ini. Baik saat puasa dan di bawah
stimulasi insulin selama penjepit, konsentrasi NEFA menurun secara signifikan, efek yang sebelumnya
dikaitkan dengan stimulasi reseptor AT FFA2 / 3 secara langsung oleh produk fermen- tasi mikroba (29)
dan perubahan pada tingkat transkripsi (7 ). Namun, perlu dicatat bahwa konsumsi HAM-RS2 tidak
meningkatkan SCFA serum puasa dalam penelitian ini; bahkan kadar butirat dan propionat diturunkan
secara signifikan. Ini mungkin berlawanan dengan intuisi, tetapi penelitian sebelumnya menggunakan
suplemen yang sama pada individu sehat juga tidak menemukan dampak pada konsentrasi SCFA puasa
(7) dan, memang, tidak mengurangi perubahan konsentrasi tinja / luminal, yang mungkin terlibat dalam
peningkatan konsentrasi. stimulasi GLP1 melalui reseptor FFAR 2/3. Memang, penelitian terbaru
menggunakan transfer mikroba telah menunjukkan bahwa peningkatan spesies bakteri penghasil
butirat, misalnya, tidak selalu menghasilkan peningkatan produksi butirat, menyiratkan bahwa dampak
mikroba dan serat makanan lebih kompleks daripada dampak tingkat SCFA sederhana. (30). Penjelasan
untuk tingkat propionat yang lebih rendah dapat berupa peningkatan pembersihan ke jaringan perifer
seperti yang ditunjukkan sebelumnya (5) meskipun belum ditunjukkan secara in vivo pada diabetes.
Meskipun secara historis fokus penurunan NEFA dengan pemberian serat selalu dalam kaitannya dengan
kandungan AT, secara paradoks mungkin, peningkatan yang signifikan pada S-IMCL ditemukan meskipun
terdapat peningkatan toleransi glukosa. Kami sebelumnya juga telah menunjukkan hal ini pada orang
dengan sindrom metabolik di mana terdapat peningkatan yang tidak signifikan secara substansial
(peningkatan 50%) pada S-IMCL (3). Penyimpanan lemak ektopik itu sendiri tidak menyebabkan
resistensi insulin

(31) dan dihipotesiskan bahwa peningkatan partisi FA menuju penyimpanan TG dalam tetesan netral-
lipid mungkin bermanfaat dalam menumpulkan lipotoksisitas spesies lipid seperti ceramides,
diacylglycerol (DAG), dan fatty acyl coA (32). Memang, sesi latihan tunggal (33) dan puasa
berkepanjangan (34) telah terbukti mempartisi lebih banyak FA ke arah sintesis TG di otot rangka,
sedangkan penurunan berat badan saja tidak (35). Pada penelitian ini penurunan NEFA plasma puasa
berkorelasi signifikan dengan peningkatan IMCL pada otot soleus (PZ0.022).

Meskipun laju pembuangan glukosa perifer dari studi penjepit (Rd) tidak berbeda secara signifikan
dengan asupan HAM-RS2, perubahan Rd berkorelasi secara signifikan dengan perubahan fluks FA ke
otot lengan bawah. Menggabungkan bukti-bukti ini menunjukkan bahwa otot rangka adalah target
metabolik utama untuk HAM-RS2 pada DMT2, seperti yang ditemukan sebelumnya pada sindrom
metabolik. Akan menarik untuk berspekulasi apakah perubahan molekuler dalam jaringan otot paralel
dengan yang ditemukan dengan latihan olahraga seperti peningkatan konten / fungsi mitokondria (36)

Sesuai dengan data sebelumnya dari kelompok kami (5, 7), dampak metabolik dari asupan HAM-RS2
pada diabetes tampaknya terbatas pada perifer (AT dan otot). Sebuah temuan baru pada kelompok
individu dengan diabetes ini adalah penurunan inflamasi terkait obesitas yang tidak bergantung pada
perubahan volume lemak tubuh itu sendiri. Sekali lagi, seperti dalam penelitian kami sebelumnya dalam
sindrom metabolik (3, 7), penelitian kami saat ini tidak menemukan bukti untuk efek pada penyimpanan
TG hati atau kemampuan insulin untuk menghambat keluaran glukosa hati (EGP). Namun, perlu dicatat
bahwa tidak semua efek yang diamati pada lipid dapat dianggap menguntungkan / netral. Peningkatan
TG plasma yang signifikan diamati pada individu dengan DMT2 ini, peningkatan TG yang tidak signifikan
telah diamati oleh kelompok kami sebelumnya, ketika RS digunakan dalam dosis besar. Dalam penelitian
ini, peningkatan meskipun signifikan secara statistik tidak mungkin signifikan secara klinis karena peserta
memiliki kadar TG dalam kisaran referensi. Namun, implikasi untuk individu dengan hiperlipidemia awal
tidak diketahui dan memerlukan penyelidikan.

Sebagai kesimpulan, ini adalah studi pemberian makan RS pertama pada DMT2 manusia di mana efek
metabolik RS (daripada manipulasi indeks glikemik makanan / beban glikemik (37)) telah diselidiki.
Asupan HAM-RS2 meningkatkan toleransi glukosa makanan pada pasien yang sudah ada

kontrol diabetes yang baik karena mekanisme yang tampaknya melibatkan peningkatan serapan otot FA
dan peningkatan S-IMCL. Namun, sebagai peringatan, perubahan dalam distribusi TG ektopik dan TG
plasma ditemukan, signifikansi klinisnya tidak diketahui. Pekerjaan lebih lanjut sekarang diperlukan
untuk menjelaskan mekanisme molekuler dalam jaringan otot yang disebabkan oleh HAM-RS2, yang
akan sangat penting dalam hal merekomendasikan intervensi diet / olahraga untuk memaksimalkan
manfaat pengambilan glukosa otot. Intervensi skala yang lebih besar sekarang harus dilakukan pada
pasien yang menggunakan makanan berserat tinggi, dengan diabetes yang kurang terkontrol dengan
baik dan dalam jangka waktu yang lebih lama sebelum perubahan pada pedoman diet berbasis bukti
dapat diusulkan.