PENENTUAN SENYAWA FITOKIMIA BERAS PULU’

MANDOTI DARI KABUPATEN ENREKANG SEBAGAI

PANGAN FUNGSIONAL

PROPOSAL SKRIPSI

SITTI AISYA 432 20 011

ALTRIA NURFADHILAH 432 20 042

PROGRAM STUDI D-4 TEKNOLOGI KIMIA INDUSTRI

JURUSAN TEKNIK KIMIA
POLITEKNIK NEGERI UJUNG PANDANG
2024
 HALAMAN PERSETUJUAN

Proposal skripsi ini dengan Penentuan Senyawa Fitokimia Beras Pulu’

Mandoti dari Kabupaten Enrekang Sebagai Pangan Fungsional oleh Sitti Aisya

NIM 432 20 011 dinyatakan layak untuk diseminarkan.

Makassar, 06 Februari 2024

Menyetujui,

Pembimbing I Pembimbing II

Vilia Darma Paramita, STP., M.Food.Sc.Ph.D Dr. Fajriyati Mas’ud, STP., M. Si

NIP. 19780323 200801 2 015 NIP. 19720628 200812 2 001

Mengetahui,

Koordinator Program Studi

Sarjana Terapan Teknologi Kimia Industri

Dr. Fajriyati Mas’ud, STP., M. Si

NIP. 19720628 200812 2 001

2
 HALAMAN PERSETUJUAN

Proposal skripsi ini dengan Penentuan Senyawa Fitokimia Beras Pulu’

Mandoti dari Kabupaten Enrekang Sebagai Pangan Fungsional oleh Altria

Nurfadhilah NIM 432 20 042 dinyatakan layak untuk diseminarkan.

Makassar, 06 Februari 2024

Menyetujui,

Pembimbing I Pembimbing II

Vilia Darma Paramita, STP., M.Food.Sc.Ph.D Dr. Fajriyati Mas’ud, STP., M. Si

NIP. 19780323 200801 2 015 NIP. 19720628 200812 2 001

Mengetahui,

Koordinator Program Studi

Sarjana Terapan Teknologi Kimia Industri

Dr. Fajriyati Mas’ud, STP., M. Si

NIP. 19720628 200812 2 001

3
 HALAMAN PENERIMAAN

Pada hari ini, hari Selasa tanggal 20 Februari 2024, Tim penguji Seminar Proposal

Skripsi telah menerima dengan baik hasil Seminar Proposal Skripsi oleh

mahasiswa: Sitti Aisya NIM 432 20 011 dan Altria Nurfadhilah 432 20 042

dengan judul Penentuan Senyawa Fitokimia Beras Pulu’ Mandoti dari Kabupaten

Enrekang sebagai Pangan Fungsional.

Makassar, 20 Februari 2024

Tim seminar proposal:

1. Wahyu Budi Utomo, HND.,M.Sc. Ketua (................................)

2. Dra. Abigael Todingbua’, M.Si. Sekretaris (……………...…….)

3. Ir. Rosalin, M.Si Anggota (……………........…)

4. Muhammad Saleh, S.T.,M.Si. Anggota (……………………)

5. Vilia Darma Paramita, STP.,

M. Food.Sc., Ph.D. Pembimbing I (…...……………….)
6. Dr. Fajriyati Mas'ud, STP., M.Si. Pembimbing II (…………………...)

4
 DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL…………………………………………………………i

HALAMAN PERSETUJUAN…………………………………………………ii

HALAMAN PENERIMAAN.............................................................................iv

DAFTAR ISI.......................................................................................................v

DAFTAR GAMBAR..........................................................................................vii

DAFTAR TABEL...............................................................................................vii

BAB I PENDAHULUAN...................................................................................1

1.1 Latar Belakang.......................................................................................1

1.2 Rumusan Masalah..................................................................................4

1.3 Ruang Lingkup.......................................................................................4

1.4 Tujuan Penelitian...................................................................................5

1.5 Manfaat Penelitian.................................................................................5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA.........................................................................7

2.1 Beras Pulu’ Mandoti sebagai Salah Satu Jenis Beras Ketan (Pulu’).....7

2.2 Kandungan Beras Ketan Merah.............................................................8

2.2.1 Polifenol.......................................................................................8

2.2.2 Antosianin....................................................................................10

2.3 Ekstraksi.................................................................................................12

2.3.1 Ultrasonic-Assisted Extraction (UAE)...............................................15

2.4 Aktivitas Antioksidan............................................................................17

2.5 Penentuan Total Fenol...........................................................................18

5
 2.6 Response Surface Methodology (RSM).................................................19

BAB III METODOLOGI PENELITIAN...........................................................21

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian................................................................21

3.2 Alat dan Bahan.......................................................................................21

3.2.1 Alat...............................................................................................21

3.2.2 Bahan...........................................................................................21

3.3 Prosedur Kerja........................................................................................22

3.3.1 Preparasi Sampel.........................................................................22

3.3.2 Ultrasonic-assisted extraction (UAE).........................................22

3.3.3 Analisa Yield...............................................................................25

3.3.4 Analisa Kadar Total Fenol (Metode Folin-Ciocalteu)................25

3.3.5 Analisa kadar Flavonoid..............................................................26

3.3.6 Analisa Kadar Antosianin............................................................28

3.3.7 Uji Aktivitas Antioksidan............................................................28

3.3.8 Identifikasi Senyawa dengan GC-MS........................................29

DAFTAR PUSTAKA.........................................................................................31

6
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Beras Pulu’ Mandoti.............................................................................7

Gambar 2.2 Struktur Fenol.......................................................................................9

Gambar 2.3 Alat Ultrasonic………………...……………………………………13

Gambar 3.1 Proses Ekstrasksi Metode Ultrasonic-assisted Extraction (UAE).....22

7
 DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Kandungan Gizi dalam Beras Ketan Merah Per 100 gram…………….8

Tabel 2.2 Total Kandungan Total Fenolik Beras Berpigmen dari Varietas
Sulawesi Selatan……………………………………………………...10

Tabel 2.3 Total Kandungan Antosianin dan Flavonoid Beras Berpigmen dari
Varietas Sulawesi Selatan……………………………………………..11

Tabel 2.4 Penelitian - Penelitian Terdahulu Ekstraksi Metode Ultrasonik…..…..15

Tabel 3.1 Perlakuan Penelitian……….…………...……………………..………20

Tabel 3.2 Rancangan Penelitian………………...............…………………….…21

8
 BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Beras Pulu’ Mandoti merupakan salah satu jenis beras ketan (pulu’)

lokal yang berasal dari Desa Salukanan dan Desa Kendenan, Kecamatan Baraka,

Kabupaten Enrekang. Beras ini memiliki kekhasan aroma yang wangi karena

dipengaruhi oleh wilayah tumbuhnya yang mengandung unsur hara sangat

spesifik

dan tinggi (Hasan et al., 2021). Adanya kekhasan aroma tersebut diperkirakan

bahwa beras tersebut mengandung senyawa bioaktif yang bermanfaat. Selain itu,

warnanya yang kemerahan menunjukkan adanya kandungan antosianin yang

merupakan salah satu senyawa flavonoid sebagai antioksidan yang umumnya

ditemukan pada beras yang berwarna kemerahan. Kandungan bioaktif beras

berpigmen telah menarik penelitian terbaru untuk digunakan sebagai makanan

fungsional. Fenolik adalah zat awal dalam jalur biosynthethic flavonoid. Selain

itu, sifat fenolik dan manfaat seperti mengurangi risiko dari penyakit jantung,

diabetes, peradangan telah dikonfirmasi (Kumar dan Goel, 2019). Antosianin

adalah zat warna alami dari kelompok flavonoid.

Penelitian dan informasi terkait kandungan senyawa bioaktif pada beras

Pulu’ Mandoti di Indonesia belum pernah dilaksanakan sebelumnya. Penelitian

yang dilakukan oleh Daeli et al. (2018), diketahui bahwa beras yang mengandung

antosianin mampu meningkatkan sensitivitas insulin dan menurunkan kadar

glukosa darah dan trigliserida.

9
 Pulu’ Mandoti memiliki warna yang khas dengan warna merah

kecokelatan, sama dengan beras ketan yang lain namun memiliki aroma harus

yang sangat khas. Beras merah merupakan gandum utuh, kaya nutrisi seperti pati,

protein, lipid, serat makanan, vitamin, mineral, dan bahan lainnya (Yoshida et al.,

2010; Zhou et al., 2002). Butirnya biasanya berwarna putih; namun, warnanya

juga bisa merah, hitam, atau ungu (Pang et al., 2018; Shao et al., 2018; Yu et al.,

2021). Beras gandum utuh dengan warna berbeda mengandung subkelompok

polifenol unik, yang dapat berdampak positif bagi kesehatan manusia (Min et al.,

2012; Pang et al., 2018).

Banyak studi epidemiologi telah menemukan bahwa peningkatan

konsumsi biji - bijian sangat terkait dengan penurunan insiden penyakit kronis

(Zhang et al., 2023; Zhang et al., 2010). Penelitian lain dari Samyor et al.,

(2017), menemukan bahwa dalam beras yang memiliki pigmen mengandung

berbagai senyawa bioaktif termasuk flavonoid (khususnya antosianin dan

proantosianidin), karotenoid (seperti α−, β−karoten, lutein, dan likopen), senyawa

fenolik (seperti asam caffeic, asam ferulic), fitosterol (seperti β-sitosterol,

stigmasterol, dan capesterol), isoform vitamin E (α−, γ−, δ− tokotrienol dan

tokoferol), γ-oryzanol, asam coumaric, asam fitat, dan tricin.

Metode Ultrasonic-assisted extraction (UAE) memiliki keuntungan

seperti mudah digunakan, aman karena pada tekanan atmosfer dengan suhu ruang,

dan proses ekstraksi yang cepat sehingga lebih efektif dan efesien (Torres et al.,

2017). Suhu yang cukup tinggi digunakan untuk meningkatkan kelarutan senyawa

yang diekstrak sehingga dapat mempercepat proses oksidasi antioksidan.

10
Ultrasonic- assisted extraction (UAE) adalah salah satu metode ekstraksi berbantu

ultrasonik. Gelombang ultrasonik adalah gelombang suara yang memiliki

frekuensi di atas pendengaran manusia (≥ 20 kHz) (Deng et al., 2017). Proses

ekstraksi senyawa organik pada tanaman dan biji-bijian menggunakan pelarut

organik dapat berlangsung lebih cepat dengan bantuan ultrasonik. Dinding sel dari

bahan dipecah dengan getaran ultrasonik sehingga kandungan yang ada

didalamnya dapat keluar dengan mudah (Altemimi et al., 2015; Kadam et al.,

2013). Keuntungan utama dari ekstraksi dengan bantuan gelombang ultrasonik

dibandingkan dengan ekstraksi konvensional menggunakan maserasi yaitu

efisiensi lebih besar dan waktu operasinya lebih singkat (Sari et al., 2019).

Penentuan senyawa fitokimia Pulu’ Mandoti untuk dimanfaatkan

sebagai pangan fungsional dengan metode Ultrasonic-assisted extraction (UAE)

belum pernah dikaji sebelumnya. Optimasi ekstraksi terhadap kandungan

flavonoid, aktivitas antioksidan, yield, dan antosianin pada beras pulu' mandoti

dilakukan dengan menggunakan Response Surface Methodology (RSM). RSM

merupakan metode statistik yang yang efektif untuk menentukan optimasi pada

proses ekstraksi yang dilakukan. Optimasi menggunakan RSM tidak

membutuhkan data yang banyak, sehingga kondisi optimum respon bisa

didapatkan dengan cepat dan biaya yang minim (Nuryati dan Salimy, 2008).

Berdasarkan penelitian pendahuluan pada program PKM-RE dengan

judul “Potensi Metabolomik Beras Khas Pulu’ Mandoti dari Kabupaten Enrekang

Sebagai Pangan Fungsional Antidiabetik” Tahun 2023, diketahui bahwa

perlakuan terbaik ekstraksi yakni pada suhu 40 oC selama 30 menit. Oleh karena

11
itu, dilakukan penelitian lanjutan pada kondisi tersebut dengan melakukan

optimasi proses.

1.2 Rumusan Masalah

Adapun rumusan masalah pada penelitian ini yaitu:

1. Bagaimana kondisi optimum metode ekstraksi Ultrasonic-assisted

extraction (UAE) beras pulu’ mandoti dengan menggunakan rancangan

Response Surface Methodology (RSM).

2. Bagaimana pengaruh konsentrasi pelarut dan waktu optimum pada hasil

ekstraksi beras Pulu’ Mandoti dengan metode Ultrasonic-assisted

extraction (UAE) dan maserasi terhadap kandungan flavonoid, aktivitas

antioksidan, yield, dan antosianin?

3. Bagaimana komponen senyawa yang terkandung pada ekstrak beras Pulu’

Mandoti dengan menggunakan Gas Chromatography - Mass Spectrometry

(GC-MS)?

1.3 Ruang Lingkup

Ruang lingkup pada penelitian ini adalah:

1. Mengekstraksi beras pulu’ mandoti menggunakan pelarut metanol

konsentrasi 70% dengan suhu 40oC dan waktu 30 menit sebagai titik

tengah perlakuan dengan metode Ultrasonic-assisted Extraction (UAE)

menggunakan rancangan Response Surface Methodology (RSM).

12
 2. Mengekstraksi beras pulu’ mandoti metode maserasi selama 1 x 24 jam

berdasarkan kondisi optimum yang diperoleh dari perlakuan ekstraksi

sebelumnya.

3. Menganalisis kandungan total fenolik dengan menggunakan reagen Folin-

Ciocalteu dan aktivitas antioksidan dengan menggunakan reagen DPPH.

4. Menganalisis antosianin dan flavanoid menggunakan instrument

spektrofotometri UV-Vis.

5. Menganalisis yield ekstrak beras Pulu’ Mandoti.

6. Mengidentifikasi komponen senyawa pada ekstrak beras Pulu’ Mandoti

dengan menggunakan Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-

MS).

1.4 Tujuan Penelitian

Tujuan dari penelitian ini adalah sebagai berikut:

1. Menentukan kondisi optimum proses ekstraksi beras Pulu’ Mandoti

dengan metode Ultrasonic-assisted extraction (UAE) menggunakan

rancangan Response Surface Methodology (RSM).

2. Menentukan pengaruh konsentrasi pelarut dan waktu optimum pada hasil

ekstraksi beras Pulu’ Mandoti dengan metode Ultrasonic-assisted

extraction (UAE) dan maserasi terhadap kapasitas antikosidan (IC 50).

3. Mengetahui komponen senyawa pada ekstrak beras Pulu’ Mandoti dengan

menggunakan Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS).

1.5 Manfaat Penelitian

Manfaat yang diharapkan dari penelitian ini :

13
1. Dapat memberikan informasi kepada masyarakat mengenai potensi beras

Pulu’ Mandoti sebagai pangan fungsional yang merupakan sumber

kearifan lokal masyarakat Sulawesi Selatan, khususnya Kabupaten

Enrekang.

2. Dapat memberikan informasi kepada industri tentang manfaat dan potensi

beras Pulu’ Mandoti sehingga menjadi sumber pangan fungsional yang

dapat dikonsumsi oleh masyarakat luas.

3. Sebagai referensi bagi peneliti selanjutnya dan pengembangan ilmu

pengetahuan.

14
 BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Beras Pulu’ Mandoti sebagai Salah Satu Jenis Beras Ketan (Pulu’)

Beras ketan (Oryza sativa var.glutinosa) adalah jenis beras yang utamanya

tumbuh di Asia Tenggara dan Asia Timur. Ketan memiliki butir opak, kadar

amilosa rendah, dan tekstur nasi yang lengket. Beras ketan berdasarkan warna

dibagi menjadi ketan putih, hitam dan merah (Purbasari, 2016). Beras Pulu’

Mandoti merupakan salah satu jenis beras ketan (Pulu’) yang berasal dari Desa

Salukanan dan Desa Kendenan, Kecamatan Baraka, Kabupaten Enrekang. Beras

ini hanya dapat tumbuh pada ketinggian 700 Mpdl yang wilayah tumbuhnya

mengandung unsur hara yang sangat tinggi (Hasan et al., 2021).

Menurut Purbasari (2016), adanya perbedaan gen yang mengatur warna

aleuron, endosperma dan komposisi pati pada endosperma menyebabkan

perbedaan warna pada beras ketan. Pada aleuron tersebut terdapat kandungan

antioksidan yang memiliki pigmen warna antosianin. Antosianin merupakan salah

satu jenis senyawa fenolik yang bermanfaat bagi kesehatan tubuh. Namun,

aleuron pada beras ketan putih tidak mengandung pigmen warna antosianin

sehingga aktivitas antioksidannya lebih rendah dibandingkan ketan hitam dan

ketan merah.

15
 Gambar 2.1 Beras Pulu’ Mandoti

Keunikan beras ini yaitu mengeluarkan aroma khas, namun apabila

ditanam pada habitat lain aroma khas tersebut tidak sama dengan yang ditanam

dihabitat aslinya. Sehingga masyarakat pada wilayah tersebut senantiasa

melakukan penjagaan dan pelestarian melalui pembudidayaan (Hasan et al.,

2021).

2.2 Kandungan Beras Ketan Merah

Kandungan gizi pada beras Ketan Merah dapat dilihat pada tabel sebagai berikut:

Kandungan Jumlah
Air (g) 14,6
Energi (kkal) 352
Protein (g) 7,3
Lemak (g) 0,9
Karbohidrat (g) 76,2
Abu (g) 1,0
Zat Besi (mg) 4,2
Tabel 2.1 Kandungan Gizi dalam Beras Ketan Merah Per 100 gram
Sumber : Arifsyah (2022)

2.2.1 Polifenol

Polifenol merupakan senyawa yang memiliki struktur dasar berupa

(2013)
fenol. Menurut Etxeberria et al. , polifenol merupakan fitokimia dari

sekelompok besar senyawa yang berasal dari tumbuhan yang terdiri dari banyak

unit struktural fenol dengan berbagai macam senyawa kimia. Polifenol dapat

ditemukan pada tumbuhan sebagai metabolit sekunder dari tumbuhan tersebut.

Profil polifenol buah dan sayuran dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti

jenis tanaman, kondisi tumbuh, pemanenan tumbuhan dan keadaan produk yang

16
disimpan. Senyawa ini diketahui sebagai antioksidan, antiglikemik, antivirus,
(Manach et al., 2004)
antikanker, antiinflamasi, antialergi dan anti mikroba .

Gambar 2.2 Struktur Fenol (Anku et al., 2017)

Senyawa fenol sangat peka terhadap oksidasi enzim dan mungkin

hilang pada proses isolasi akibat kerja enzim fenolase yang terdapat dalam

tumbuhan. Ekstraksi senyawa fenol tumbuhan dengan etanol mendidih biasanya

mencegah terjadinya oksidasi enzim. Semua senyawa fenol berupa senyawa

aromatik sehingga semuanya menunjukkan serapan kuat di daerah spektrum UV.

Selain itu secara khas senyawa fenol menunjukkan geseran batokrom pada

spektrumnya bila ditambahkan basa. Karena itu cara spektrometri penting

terutama untuk identifikasi dan analisis kuantitatif senyawa fenol. Polifenol

diklasifikasikan menjadi dua kelompok utama sebagai non-flavonoid dan

flavonoid sesuai dengan jumlah kelompok aromatik dengan kerangka karbon

(Singh et al., 2017)
alifatik dan fenol yang mengikat cincin ini satu sama lain .

Beras merah memiliki kadar total fenol yang lebih tinggi dibandingkan

beras putih, karena senyawa pigmen pada beras merah terikat pada lapisan

aleuron. Senyawa fenolik yang ada dalam beras, meliputi asam fenolik,

antosianin, dan senyawa lainnya (Pangastuti, Affandi, 2012). Klasifikasi total

fenol beras merah ini dapat digunakan untuk mengidentifikasi beras yang

17
memiliki kadar total fenol yang tinggi dan senyawa fenolik yang bermanfaat

sebagai sumber antioksidan (Widyawati et al., 2014).

Tabel 2.2 Total Kandungan Total Fenolik Beras Berpigmen dari Varietas
Sulawesi Selatan
Sulawesi Selatan Fenolik

(mg GAE/100g berat kering)

Beras hitam
Kobo 134.59ABCDE
Lotong 154.35ABCD
Ambo 49.99f
Lallodo 189.60AB
Lotong Tanduk 88.42def
Le'leng 201.49a
Beras merah
Ra'rang 141.50ABCDE
Lea 126.84bcde
Maminyak 137.63ABCDE
Mandoti 169.14ABC
Balan 81.64ef
Kamida 118.00 WIB
Jambu 109.01CDom
Bakka Eja 77.36ef
Punu Eja 132.24bcde
Variasi nasional/modern
Inpari 24 (merah) 107.08CDom
Ciherang (putih)
Sumber: Hanifa et al (2020)

2.2.2 Antosianin
Antosianin merupakan metabolit sekunder yang termasuk dalam

golongan flavonoid, yang berperan sebagai senyawa biokatif karena memiliki sifat

antioksidan. Flavonoid merupakan senyawa fenolik tumbuhan yang paling

18
melimpah. Senyawa tersebut dapat berperan sebagai antioksidan. Berdasarkan

hasil-hasil penelitian yang telah dilakukan, diyakini bahwa flavonoid memiliki

sifat antioksidatif serta mampu mencegah kerusakan sel dan komponen selularnya

oleh radikal bebas reaktif. Kerangka flavonoid terdiri atas satu cincin aromatik A,

satu cincin aromatik B, dan cincin tengah berupa heterosiklik yang mengandung

oksigen dan bentuk teroksidasi cincin ini dijadikan sebagai dasar pembagian
(Ferreira dan Pinho, 2012)
flavonoid ke dalam sub-sub kelompoknya .

Antosianin merupakan senyawa yang membentuk zat warna alami pada

tumbuhan dalam memberikan warna merah, ungu, serta orange. Antosianin pada

tumbuhan dapat digunakan sebagai pewarna alami pada makanan. Antosianin juga

memiliki manfaat untuk kesehatan tubuh diantaranya adalah sebagai senyawa anti

inflamasi pada otak, dapat melindungi lambung dari kerusakan, meningkatkan

kemampuan penglihatan mata, anti kanker, dapat menurunkan kelebihan berat

badan, melindungi tulang, pengurangan lemak dalam tubuh, menurunkan resiko

diabetes, dan antioksidan (Suryana, 2021).

Tabel 2.3 Total Kandungan Antosianin dan Flavonoid Beras Berpigmen dari
Varietas Sulawesi Selatan
Sulawesi Selatan Total Antosianin Total Flavonoid

(mg CGE/100g berat kering) (mg CE/100g berat kering)

Beras hitam
Kobo 78,90 hari 43,67b
Lotong 92.04c 47,18b
Ambo 11.33f 10,17 hari
Lallodo 169,04b 59,56a
Lotong Tanduk 35,35e 23,60c
Le'leng 187,23a 62,45a
Beras merah

19
 Ra'rang 3.07gr 9,33 hari
Lea 2.91gr 7,25 hari
Maminyak 4.42fg 13,30cd
Mandoti 4.00fg 14,34CD
Balan 2.89gr 8,93hari
Kamida 7.41fg 14,33CD
Jambu 3.25fg 15,27CD
Bakka Eja 3.55fg 8,09 hari
Punu Eja 4.26fg 11,54CD
Varietas nasional
Inpari 24 (merah) 3.45FG 8,89 juta
Ciherang (putih) 3.04gr 5,45 juta
Sumber: Hanifa et al (2020)

2.3 Ekstraksi

Ekstraksi adalah suatu proses pemisahan suatu bahan berupa padat

maupun cair dari campurannya dengan bantuan pelarut. Pelarut yang digunakan

harus dapat mengekstrak substansi yang diinginkan biasanya ekstraksi digunakan

untuk campuran bahan padat dan cair yang tidak dapat atau sukar sekali

dipisahkan dengan metode pemisahan mekanis atau termis. Adapun istilah-istilah

yang digunakan dalam teknik ekstraksi adalah sebagai berikut:

a. Bahan ekstraksi, yaitu bahan baku yang akan diekstraksi.

b. Pelarut (media ekstraksi), yaitu cairan yang digunakan untuk melangsungkan

ekstraksi.

c. Ekstrak, yaitu bahan yang dihasilkan dari proses ekstraksi.

d. Larutan ekstrak, yaitu pelarut yang didalamnya terlarut bahan yang diekstraksi.

e. Ekstraktor, yaitu alat ekstraktor.

f. Ekstraksi padat cair, yaitu ekstraksi dari bahan yang padat dengan menggunakan

pelarut.

20
 Faktor-faktor yang mempengaruhi proses ekstraksi yaitu:

1. Ukuran bahan

Bahan yang akan diekstrak sebaiknya memiliki luas permukaan yang besar

untuk mempermudah kontak antara bahan dengan pelarut sehingga

menghasilkan hasil ekstraksi yang optimal. Semakin kecil ukuran partikel,

semakin besar luas bidang kontak antara padatan dan solven, serta semakin

pendek jalur difusinya, yang menjadikan laju transfer massa semakin tinggi

(Trimanto et al., 2018).

2. Suhu

Ekstraksi akan lebih cepat dilakukan pada suhu tinggi, tetapi pada

ekstraksi oleoresin akan menyebabkan peningkatan beberapa komponen yang

terdapat dalam rempah serta mengalami dekomposisi (rusak) (Trimanto et al.,

2018).

3. Waktu

Semakin lama waktu ekstraksi yaitu waktu kontak antara pelarut dan

bahan, kesempatan untuk bersentuhan semakin besar maka hasil ekstrak juga

bertambah sampai titik jenuh larutan. Akan tetapi ekstraksi yang terlalu lama

juga dapat berdampak negatif pada hasil ekstrak. Hal ini dikarenakan waktu

ekstraksi yang terlalu lama akan memicu pemaparan oksigen lebih banyak

yang akan meningkatkan peluang terjadinya oksidasi senyawa fenolik. Waktu

ekstraksi yang berlebihan tidak dapat mengekstrak komponen fenolik lebih

banyak, hal ini telah dijelaskan hukum kedua difusi bahwa equilibrium akhir

akan dicapai antara konsentrasi zat terlarut dalam matriks tanaman dan

21
 pelarutnya setelah waktu tertentu. Semakin lama waktu ektraksi maka kontak

antara pelarut dengan bahan yang diekstrak akan semakin lama sehingga dari

keduanya akan terjadi pengendapan masa secara difusi sampai terjadi

keseimbangan konsentrasi di dalam dan di luar bahan yang diekstraksi

(Trimanto et al., 2018).

4. Jenis dan jumlah pelarut

Pemilihan jenis pelarut sesuai dengan prinsip kelarutan yaitu pelarut polar

akan melarutkan senyawa yang polar sedangkan pelarut non polar akan

melarutkan senyawa yang bersifat non polar pula. Ada dua pertimbangan

utama dalam pemilihan jenis pelarut, yaitu pelarut harus mempunyai daya larut

yang tinggi dan pelarut yang tidak berbahaya atau beracun. Pelarut yang

bersifat polar maupun semi polar telah umum digunakan untuk mengekstrak

senyawa polifenol dari tanaman seperti buah-buahan dan sayuran. Pelarut yang

sering digunakan yaitu aquades, etanol, methanol, aseton, dan etil asetat

(Trimanto et al., 2018).

5. Konsentrasi pelarut

Selain jenis pelarut, perbedaan konsentrasi juga mempengaruhi hasil

ekstraksi. Perbedaan konsentrasi etanol dapat mengakibatkan perubahan polaritas

pelarut sehingga mempengaruhi kelarutan senyawa bioaktif, salah satunya ialah

flavonoid (Zhang et al., 2009). Penetapan konsentrasi pelarut yang berbeda-beda

ditujukan untuk mendapatkan pelarut dengan kepolaran mendekati senyawa

fenolik pada kulit buah kakao (Puspitaningtyas et al., 2021)

22
 Penelitian yang dilakukan oleh Putri et al., (2023) terkait pengaruh pelarut

etanol 70% dan metanol 70% terhadap kadar flavonoid total ekstrak daun sirsak

(Annona muricata Linn). Diketahui bahwa hasil penelitian menunjukkan bahwa

perbedaan jenis pelarut pada tahap ekstraksi dapat mempengaruhi kelarutan

senyawa flavonoid didalam pelarut , dimana kadar flavonoid dalam penelitian ini

ekstrak metanol 70% daun sirsak lebih tinggi dibandingkan dengan etanol 70%

dan berdasarkan hasil uji analisis statistik menunjukkan bahwa perbedaan

penggunaan jenis pelarut pada saat ekstraksi berpengaruh secara signifikan

terhadap kadar flavonoid total daun sirsak yang dihasilkan.

2.3.1 Ultrasonic-Assisted Extraction (UAE)

Ultrasonic-assisted extraction (UAE) merupakan metode ekstraksi dengan

menggunakan gelombang ultrasonik dengan frekuensi lebih besar yaitu 16-20

KHz. Ekstraksi dengan gelombang ultrasonik dan pelarut organik pada biji-bijian

akan berlangsung lebih cepat. Hal ini dikarenakan gelombang ultrasonik akan

memecahkan dinding sel dari bahan sehingga kandungan yang ada di dalamnya

dapat keluar dengan mudah (Adhiksana, 2017).

Gambar 2.3 Alat Ultrasonic

Adapun beberapa keuntungan menggunakan metode UAE dalam

melakukan ekstraksi, seperti mempercepat waktu ekstraksi. Metode UAE juga

23
mudah digunakan karena tidak membutuhkan instrumentasi yang kompleks dan

relatif lebih murah (Sholihah et al., 2021).

Faktor - faktor yang mempengaruhi ekstraksi metode Ultrasonic-Assisted

Extraction (UAE) sebagai berikut:

1. Suhu dan waktu: Suhu ekstraksi yang terlalu tinggi dan waktu ekstraksi yang

terlalu lama dapat menyebabkan hilangnya senyawa-senyawa, sehingga perlu

diperhatikan untuk menjaga batas optimum suhu dan waktu ekstraksi

(Sekarsari et al., 2019).

2. Konsentrasi pelarut: Konsentrasi pelarut yang digunakan juga mempengaruhi

efisiensi ekstraksi, di mana konsentrasi pelarut yang tepat dapat

meningkatkan hasil ekstraksi (Sasadara dan Wiranata, 2022).

3. Frekuensi dan daya: Frekuensi gelombang ultrasonik, daya, serta siklus kerja

juga turut berperan dalam efisiensi ekstraksi, di mana paparan ultrasonik

untuk waktu yang lama dapat menyebabkan kerusakan struktur zat terlarut

dan mengurangi hasil ekstraksi (Sekarsari et al., 2019).

4. Jenis pelarut dan rasio pelarut-bahan: Pemilihan jenis pelarut dan rasio

pelarut-bahan juga mempengaruhi proses ekstraksi ultrasonik, di mana

metode ekstraksi dengan gelombang ultrasonik diketahui memiliki kelebihan

dibandingkan dengan metode maserasi, seperti meningkatkan penetrasi cairan

menuju dinding sel, laju perpindahan massa yang lebih cepat, dan

penggunaan suhu yang rendah (Marlina Kristina et al., 2022).

Tabel 2.4 Penelitian - Penelitian Terdahulu Ekstraksi Metode Ultrasonik

Bahan Bahan Aktif Kondisi Referensi
Operasi

24
 Padi beras hitam Cyanidin-3-glikosida Ultrasonik (Devi et al., 2024)
Daun sirsak tannin, flavonoid, Ultrasonik (Handayani dan
polifenol, Sriherfyna, 2016)
Annonaceuous
acetogenius, saponin
umbi bit (Beta antioksidan, fenol, Ultrasonik (Sasadara dan
vulgaris L.) flavonoid, tannin, dan Wiranata, 2022)
antosianin
Daun jambu biji Fenol, flavonoid, Ultrasonik (Sekarsari et al.,
(Psidium tanin, antioksidan. 2019)
guajava L.)
Daun Duwet Fenol, flavonoid, dan Ultrasonik (Marlina Kristina et
(Syzygium antioksidan al., 2022)
cumini)

2.4 Aktivitas Antioksidan

Antioksidan memiliki peran penting dalam tubuh manusia untuk

mengurangi proses oksidasi dan efek berbahaya akibat radikal bebas (Cakmekci,

2015). Antioksidan merupakan molekul yang mampu menghambat oksidasi pada

(Gulcin, 2020)
molekul yang lain . Senyawa antioksidan telah menjadi kelompok

bahan tambahan makanan yang sangat diperlukan dikarenakan sifatnya yang unik

dapat memperpanjang umur simpan produk makanan tanpa efek buruk pada

kualitas sensorik atau nutrisi pada pangan tersebut. Meskipun begitu, antioksidan

yang digunakan dalam pangan harus murah, efektif, tidak beracun pada

konsentrasi rendah, sangat stabil, mampu bertahan dalam pemrosesan, tidak

memiliki bau, tidak berasa, tidak berwarna, mudah digabungkan, dan memiliki
(Shahidi dan Ambigaipalan, 2015)
kelarutan yang baik dalam produk .

Saat ini, kemungkinan toksisitas dan efek yang tidak diinginkan dari

antioksidan sintetik telah dipertimbangkan. Hal tersebut menjadikan antioksidan

25
alam yang menjadi pilihan untuk dikembangkan. Sumber antioksidan pada

tanaman dapat berasal dari semua bagian tanaman termasuk buah, biji, daun,

batang, bunga, dan akar. Senyawa antioksidan yang terdapat dalam ekstrak suatu

tanaman diduga fungsinya dapat menghambat dan menetralisir terjadinya reaksi

oksidasi yang melibatkan radikal-radikal bebas, baik yang oksigen maupun

endogen (Sinulingga et al., 2020).

Penggunaan reagen 1,1-Diphenyl-2-picrylhidrazyl (DPPH) dalam

menentukan aktivitas antioksidan merupakan salah satu uji untuk menentukan

aktivitas antioksidan penangkap radikal. Metode DPPH memberikan informasi

reaktivitas senyawa yang diuji dengan suatu radikal stabil. DPPH memberikan

serapan kuat pada panjang gelombang 515-528 nm dengan warna violet gelap.

Penangkap radikal bebas menyebabkan elektron menjadi berpasangan yang

kemudian menyebabkan penghilangan warna yang sebanding dengan jumlah

(Gulcin, 2020)
elektron yang diambil .

2.5 Penentuan Total Fenol

Total fenol sebenarnya bukan merupakan metode penentuan

antioksidan. Kandungan total fenol pada tanaman dan bahan makanan ditentukan

sebagai asam galat atau senyawa fenol lain yang diduga sama. Namun, total fenol

yang banyak dikaitkan dengan kemampuan antioksidan yang tinggi dan kapasitas

antioksidan tersebut. Penentuan total fenol banyak digunakan untuk mengevaluasi

ekstrak antioksidan yang berasal dari tumbuhan, buah, maupun bagian daunnya

26
 Pengujian Folin-Ciocalteu merupakan salah satu cara menentukan total

fenol pada suatu ekstrak. Pada awalnya, pengujian menggunakan reagen Folin-

Ciocalteu digunakan untuk menganalisis protein, yang mana akan mengukur

jumlah tirosin pada asam amino fenol dalam protein. Kemudian pengujian ini di

adopsi untuk mengukur total fenol dalam ekstrak makanan maupun tumbuhan.

Pengujian Folin-Ciocalteu banyak digunakan hingga saat ini dalam penentuan

jumlah kandungan total fenol. Hal ini dikarenakan pengujian menggunakan

reagen Folin-Ciocalteu merupakan metode yang cepat dan sederhana yang

(Fu et al., 2011)
dinyatakan sebagai massa ekuivalen asam galat tiap mg sampel .

Larutan asam galat atau asam 3,4,5-trihidroksibenzoat

(C6H2(OH)3CO2H) banyak digunakan sebagai larutan standar karena asam galat

merupakan turunan dari asam hidroksibenzoad yang tergolong asam fenolik

sederhana, merupakan fenol alami dan juga sebagai standar yang ketersediaan

substansi yang stabil dan murni serta relatif murah dibanding lainnya (Sam et al.,

2016).

2.6 Response Surface Methodology (RSM)

Response Surface Methodology (RSM) merupakan salah satu teknik

statistik dan matematik yang digunakan untuk pengembangan, peningkatan, dan

optimasi suatu proses. RSM juga penting dalam mengaplikasikan suatu desain,

pengembangan, dan formulasi produk baru, serta dalam penyempurnaan desain

produk yang sudah ada. Aplikasi RSM yang paling luas berada pada di dunia

industri, terutama dalam situasi di mana beberapa variabel input berpotensi

mempengaruhi ukuran kinerja atau karakteristik kualitas produk atau proses

27
(Myers et al., 2016). Ukuran Kinerja atau karakteristik kualitas ini disebut respon

(y). Input variabel disebut dengan independen variabel (X) dan independen

variabel yang menjadi subjek kontrol pada suatu tes atau eksperimen.

RSM menawarkan keuntungan yang lebih baik dan memberikan

pengurangan nyata dalam jumlah perlakuan, sehingga menghemat waktu dan

(Endang et al., 2012)
bahan yang digunakan .

28
 BAB III METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini akan dilaksanakan pada bulan Maret 2024 – Juli 2024 di

laboratorium kimia organik dan laboratorium analisis instrumen Jurusan Teknik

Kimia Politeknik Negeri Ujung Pandang, Makassar.

3.2 Alat dan Bahan

3.2.1 Alat

Adapun yang digunakan pada penelitian ini yaitu, Elmasonic S40H

Heated Ultrasonic 10 Cleaner, GC-MS QP-2010 Plus dari Shimadzu,

Spectrophotometer UV-VIS dari Shimadzu, blender, vortex mixer, sieving 60

mesh, neraca analitik, pipet ukur, gelas ukur, beaker glass, labu semprot, pipet

tetes, erlemeyer, labu takar, mikropipet, botol sampel (vial), aluminium foil,

tabung reaksi, corong, spatula, dan pipet volume.

3.2.2 Bahan

Adapun bahan yang digunakan pada penelitian ini yaitu Beras Pulu’

Mandoti, metanol teknis, aquades, Asam Askorbat p.a, asam galat dari Merck,

reagen Folin-Ceocalteu, natrium karbonat (Na2CO3), quercetin, kloroform, NaNO2

5%, AlCl3 10%, NaOH 1 M, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) dari sigma

29
aldrich, trifluoroacetamide (BSTFA), buffer kalium klorida 0,025 M dan piridin

diperoleh dari Merck.

3.3 Prosedur Kerja

3.3.1 Preparasi Sampel

Beras Pulu’ Mandoti sebanyak 500 g dibersihkan dari kotoran seperti

pasir dengan menggunakan air bersih, pencucian dilakukan sebanyak 3 kali

dengan air bersih. Kemudian dikeringkan dengan oven suhu 60 oC selama 2 jam

dan dihaluskan menggunakan blender. Bubuk beras tersebut kemudian di ayak

menggunakan sieving 60 mesh. Hasil dari preparasi sampel berupa bubuk Pulu’

Mandoti ukuran 60 mesh yang akan diekstraksi.

3.3.2 Ultrasonic-assisted extraction (UAE)

Setelah preparasi sampel dilakukan ekstraksi dengan menggunakan

Ultrasonic-assisted extraction. Perbandingan pelarut dan beras yang digunakan

merupakan modifikasi dari (Shao et al., 2014), dimana 3 gram sampel diekstraksi

dengan 30 mL pelarut berdasarkan perlakuan pada Tabel 3.2. Selain itu dilakukan

ekstraksi menggunakan metode maserasi selama 1 x 24 jam pada kondisi

optimum.

Tabel 3.1 Perlakuan Penelitian

Perlakuan Kode Perlakuan
-1 0 1
Konsentrasi (%) 60 70 80
Waktu (menit) 20 30 40

30
Tabel 3.2 Rancangan Penelitian
No Konsentrasi Waktu Konsentrasi Waktu IC 50
. (%) (menit) (%) (menit) (μg/mL)

1. -1 -1 60,00 20,00
2. 1 -1 80,00 20,00
3. -1 1 60,00 40,00
4. 1 1 80,00 40,00 DIISI
5. -α -1 55,86 30,00 DENGAN
6. α -1 84,14 30,00 DATA
7. 0 -α 70,00 15,86 HASIL
8. 0 α 70,00 44,14
9. 0 0 70,00 30,00
10. 0 0 70,00 30,00
11. 0 0 70,00 30,00
12. 0 0 70,00 30,00
13. 0 0 70,00 30,00

31
Bagan proses ekstrasksi metode Ultrasonic-assisted extraction (UAE) dapat

dilihat pada gambar 3.1 dibawah ini.

32
Gambar 3.1 Proses Ekstrasksi Metode Ultrasonic-assisted Extraction (UAE)

33
3.3.3 Analisa Yield (Foon et al., 2013)

berat hasil ekstraksi

% Yield= ×10 0
berat sebelum ektraksi

3.3.4 Analisa Kadar Total Fenol (Metode Folin-Ciocalteu) (Irsal et al., 2023)

3.3.4.1 Pembuatan kurva standar

1. Asam galat ditimbang sebanyak 0,01 g dan dilarutkan dalam labu takar

100 ml dengan aquades.

2. Larutan asam galat diambil sebanyak 1, 2, 3, 4, dan 5 ml ke dalam

masing-masing labu takar 10 ml.

3. Folin-Ceocalteu 10 % 0,5 mL ditambahkan ke dalam masing-masing

labu takar dan didiamkan selama tiga menit.

4. Na2CO3 10% 1 mL ditambahkan ke dalam masing-masing labu takar

lalu dihomogenkan.

5. Aquades ditambahkan ke dalam masing-masing labu takar sampai

volume akhir 10 ml sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 10

ppm, 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm, dan 50 ppm.

6. Larutan didiamkan selama 30 menit pada suhu kamar.

3.3.4.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

1. Sampel 30 ppm diambil dan dimasukkan dalam kuvet UV-Vis.

2. Panjang gelombang maksimum dicari pada rentang 600-700 nm

berdasarkan absorbansi sampel tertinggi.

34
3.3.4.3 Penentuan Absorbansi Pada Kurva Standar

1. Sampel dimasukkan ke dalam kuvet.

2. Absorbansi sampel diukur dengan menggunakan panjang gelombang

maksimum yang telah didapat.

3. Data absorbansi dan konsentrasi dibuatkan grafik dengan persamaan

linear yaitu y= ax+b.

3.3.4.4 Penentuan Kadar Total Fenol

1. Ekstrak 0,2 mL dipipet ke dalam labu takar.

2. Reagen Folin-Ceocalteu 10 % 0,5 mL ditambahkan ke dalam labu takar

dan didiamkan selama tiga menit.

3. Na2CO3 10% 1 mL ditambahkan ke dalam labu takar lalu

dihomogenkan.

4. Aquades ditambahkan sampai volume akhir 10 ml dan didiamkan

selama 30 menit pada suhu kamar.

5. Sampel dimasukkan ke dalam kuvet.

6. Diukur absorbansi sampel dengan menggunakan panjang gelombang

maksimum yang telah didapat.

7. Nilai absorbansi yang didapatkan dimasukkan dalam grafik untuk

mendapatkan total fenol (mg GAE/3 g sampel kering).

3.3.5 Analisa kadar Flavonoid (Atanassova et al, 2011)

3.3.5.1 Pembuatan kurva standar quercetin

1. Quercetin ditimbang sebanyak 0,01 gram kemudian dimasukkan ke

dalam labu ukur 10 mL (konsentrasi 1000 ppm).

35
 2. Etanol ditambahkan hingga tanda batas kemudian dihomogenkan.

3. Larutan standar quercetin dibuat dengan konsentrasi 200, 400, 600, 800

dan 1000 ppm.

4. Larutan 1 mL diambil dari masing-masing konsentrasi dan kemudian

dimasukkan ke dalam tabung reaksi.

5. Aquades 4 mL, NaNO2 5% 0,3 mL, ditambahkan pada masing-masing

larutan kemudian divortex dan diinkubasi selama 5 menit.

6. AlCl3 10% 0,3 mL, NaOH 1 M 2 mL dan aquades 2,4 mL ditambahkan

pada masing-masing larutan kemudian divortex dan diinkubasi selama

5 menit.

7. Absorbansi diukur menggunakan spektrofotometer uv-vis dengan

panjang gelombang 510 nm.

8. Diperoleh persamaan kurva standar quercetin.

3.3.5.2 Penentuan kadar flavonoid ekstrak beras Pulu’ Mandoti

1. Ekstrak 0,05 gram dilarutkan dalam 5 mL metanol di dalam labu ukur

sehingga diperoleh 1000 ppm ekstrak.

2. Larutan stok ekstrak diambil sebanyak 1 mL kemudian dimasukkan ke

dalam tabung reaksi.

3. Aquades 4 mL, NaNO2 5% 0,3 mL, ditambahkan pada larutan stok

ekstrak kemudian divortex dan diinkubasi selama 5 menit.

4. AlCl3 10% 0,3 mL, NaOH 1 M 2 mL dan aquades 2,4 mL ditambahkan

pada larutan kemudian divortex dan diinkubasi selama 5 menit.

36
 5. Absorbansi diukur menggunakan spektrofotometer uv-vis dengan

panjang gelombang 510 nm.

6. Nilai absorbansi yang didapat kemudian dimasukkan ke dalam

persamaan kurva standar quercetin y = ax + b. Hasil dinyatakan dalam

mg ekuivalen quercetin per g ekstrak.

3.3.6 Analisa Kadar Antosianin (Devi et al., 2024)

1. Ekstrak 0,5 mL, dicampur dengan 3,5 mL buffer kalium klorida (0,025

M, pH 1).

2. Larutan diaduk dan divorteks lalu didiamkan selama 15 menit.

3. Ekstrak 0,5 mL, dicampur dengan 3,5 mL buffer kalium klorida (0,025

M, pH 4,5).

4. Larutan diaduk dan divorteks lalu didiamkan selama 15 menit.

5. Absorbansi sampel untuk kedua larutan, dicatat pada 515 dan 700 nm

terhadap blanko etanol yang diasamkan menggunakan

spektrofotometer.

3.3.7 Uji Aktivitas Antioksidan (Modifikasi Belwal et al., 2016)

3.3.7.1 Pembuatan Kurva Standar

1. Asam Askorbat 1 mg ditimbang dan dilarutkan dalam 10 ml metanol.

2. Kemudian larutan diencerkan dengan variasi 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm, dan

8 ppm.

3.3.7.2 Penentuan Absorbansi pada Kurva Standar

1. Sampel dimasukkan ke dalam kuvet.

37
 2. Absorbansi sampel diukur dengan menggunakan panjang gelombang

520 nm yang telah didapat.

3. Data absorbansi dan konsentrasi dibuatkan grafik dengan persamaan

linear yaitu y= ax+b.

3.3.7.3 Pengukuran Aktivitas Antioksidan

1. Larutan DPPH dibuat dengan melarutkan 5 mg padatan DPPH dalam

100 ml.

2. Ekstrak 1 mL dipipet ke dalam tabung reaksi.

3. Larutan DPPH 3 mL dipipet ke dalam tabung reaksi dan didiamkan

selama 30 menit dalam ruangan gelap.

4. Absorbansi larutan sampel dan larutan tanpa sampel diukur dengan

panjang gelombang 520 nm.

5. Nilai absorbansi yang didapatkan dimasukkan dalam grafik untuk

mendapatkan nilai aktivitas antioksidannya (mg AAE/3 g sampel

kering).

3.3.8 Identifikasi Senyawa dengan GC-MS (Mihyaoui et al., 2023)

1. Sampel 10 mg dimasukkan ke dalam tabung reaksi.

2. Piridin anhidrat 100 μL dan BSTFA 100 μL ditambahkan ke dalam

tabung reaksi.

3. Larutan dipanaskan pada suhu 65oC selama 30 menit.

4. Larutan diencerkan dengan 200 μL kloroform.

5. Larutan 50 μL dianalisis menggunakan GC-MS.

 Settingan pengujian GC-MS (Yusuf et al., 2022).

38
Pengujian ini dilakukan dengan menggunakan kolom kapiler Shimadzu

2010 GC-MC dan RTX-5 (30 mm x 0,25 μm) dengan rasio pemisahan

40:1 dan suhu 70oC, laju pemanasan 10oC min-1, hingga 300oC,

dibiarkan selama 5 menit dengan total waktu analisis 25 menit. Helium

digunakan sebagai gas pembawa yang mengalir secara konstan pada

1,0 ml/menit dan suhu saluran masuk 280 oC, tekanan pra-kolom 80 kP

dan tegangan ionisasi eV16.

39
 DAFTAR PUSTAKA

Adhiksana, A. (2017). Perbandingan Metode Konvensional Ekstraksi Pektin dari

Kulit Buah Pisang dengan Metode Ultrasonik. Journal of Research and
Technology, 3(2), 80–88.

Altemimi, A., Watson, D. G., Kinsel, M., dan Lightfoot, D. A. (2015).

Simultaneous Extraction, Optimization, and Analysis of Flavonoids and
Polyphenols from Peach and Pumpkin Extracts using a TLC-densitometric
Method. Chemistry Central Journal. https://doi.org/10.1186/s13065-015-
0113-4

Anggraini, T., Wilma, S., Syukri, D., & Azima, F. (2019). Total Phenolic,
Anthocyanin, Catechins, DPPH Radical Scavenging Activity, and Toxicity
of Lepisanthes Alata (Blume) Leenh. International Journal of Food Science,
2019. https://doi.org/10.1155/2019/9703176

Anggraini, D. F. (2018). Pengaruh Perubahan Metode Ekstraksi Maserasi dan

Sonikasi terhadap Kadar Total Antosianin Ekstrak Etanol 96% Ubi Jalar
Ungu (Ipomoea batatas L.). Journal of Physics A: Mathematical and
Theoretical, 1–8. https://doi.org/10.1088/1751-8113/44/8/085201

Anri, A. (2022). Pengaruh Indeks Massa Tubuh, Pola Makan, dan Aktivitas Fisik
terhadap Kejadian Diabetes Melitus Tipe 2. Journal of Nursing and Public
Health, 10(1), 7–13. https://doi.org/10.37676/jnph.v10i1.2356

Arifsyah, J., Dewi, D. P., & Wahyuningsih, S. (2022). Pengaruh Substitusi

Tepung Talas (Colocasia esculenta) dan Tepung Beras Merah (Oryza nivara)
terhadap Kadar Proksimat dan Kadar Zat Besi pada Mochi. Ilmu Gizi
Indonesia, 5(2), 141. https://doi.org/10.35842/ilgi.v5i2.296

Belwal, T., Dhyani, P., Bhatt, I. D., Rawal, R. S., & Pande, V. (2016). Department
of Biotechnology , Kumaun University , Nainital , India. Food Chemistry.
http://dx.doi.org/10.1016/j.foodchem.2016.03.081

Bhat, F. M., Sommano, S. R., Riar, C. S., Seesuriyachan, P., Chaiyaso, T., &
Prom-U-thai, C. (2020). Status of bioactive compounds from bran of
pigmented traditional rice varieties and their scope in production of
medicinal food with nutraceutical importance. Agronomy, 10(11), 1–15.
https://doi.org/10.3390/agronomy10111817

40
Daeli, E., Ardiaria, M., & Candra, A. (2018). JNH(Journal of Nutrition and
Health) Vol.6 No.2 2018. 6(2), 43.

Deng, J., Xu, Z., Xiang, C., Liu, J., Zhou, L., Li, T., Yang, Z., & Ding, C. (2017).
Comparative Evaluation of Maceration and Ultrasonic-Assisted Extraction of
Phenolic Compounds from Fresh Olives. Ultrasonics Sonochemistry.
https://doi.org/10.1016/j.ultsonch.2017.01.023

Devi, L. M., Das, A. B., & Badwaik, L. S. (2024a). Food Hydrocolloids for
Health Ultrasound-assisted Extraction of Anthocyanin from Black Rice Bran
and its Encapsulation by Complex Coacervation. Food Hydrocolloids for
Health, 5(January), 100174. https://doi.org/10.1016/j.fhfh.2023.100174

Devi, L. M., Das, A. B., & Badwaik, L. S. (2024b). Food Hydrocolloids for
Health Ultrasound-assisted Extraction of Anthocyanin from Black Rice Bran
and its Encapsulation by Complex Coacervation. Food Hydrocolloids for
Health, 5(May 2023), 100174. https://doi.org/10.1016/j.fhfh.2023.100174

Erlidawati, E., Safrida, S., & Mukhlis, M. (2018). Potensi Antioksidan sebagai
Antidiabetes. Potensi Antioksidan sebagai Antidiabetes, 1–11.
https://doi.org/10.52574/syiahkualauniversitypress.350

Handayani, H., & Sriherfyna, F. H. (2016).Ekstraksi Antioksidan DaunSirsak

Metode Ultrasonic Bath( Kajian Rasio Bahan: Pelarut dan lama Ekstraksi)
Antioxidant Extraction of Soursop Leaf with Ultrasonic Bath ( Study of
Material : Solvent Ratio and Extraction Time ). 4(1), 262–272.

Hanifa, A. P., Millner, J. P., Mc Gill, C. R. M., & Sjahril, R. (2020). Total
anthocyanin, flavonoid and phenolic content of pigmented rice landraces
from South Sulawesi. IOP Conference Series: Earth and Environmental
Science, 484(1). https://doi.org/10.1088/1755-1315/484/1/012036

Hasan, L. D., Baraka, K., & Enrekang, I. K. (2021). Mochi Pulu Mandoti. Patent
- Pembuatan Mochi Pulu Mandoti.pdf (poltekparmakassar.ac.id)

Irsal, M., Yusuf, M., Al Hayah, M. T., Ma’Ruf, A. A., Mahmud, M. R., &
Rahayu, S. N. (2023). Ultrasonic-assisted Extraction and Microencapsulation

41
 of Bioactive Compound From Pigeon Pea Seed. Bulletin of Pharmaceutical
Sciences. Assiut, 46(1), 51–62. https://doi.org/10.21608/BFSA.2023.300760

Kadam, S. U., Tiwari, B. K., & O’Donnell, C. P. (2013). Application of Novel

Extraction Technologies for Bioactives from Marine Algae. In Journal of
Agricultural and Food Chemistry. https://doi.org/10.1021/jf400819p

Kumar, N., & Goel, N. (2019). Phenolic acids: Natural Versatile Molecules with
Promising Therapeutic Applications. Biotechnology Reports, 24, e00370.
https://doi.org/10.1016/j.btre.2019.e00370

Marlina Kristina, C. V., Ari Yusasrini, N. L., & Yusa, N. M. (2022). Pengaruh
Waktu Ekstraksi Dengan Menggunakan Metode Ultrasonic Assisted
Extraction (UAE) Terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Duwet
(Syzygium cumini). Jurnal Ilmu Dan Teknologi Pangan (ITEPA), 11(1), 13.
https://doi.org/10.24843/itepa.2022.v11.i01.p02

Meilawati, F. T., Wardana, A. S., & TP, S. (2022). Critical Review: Pengaruh
Antosianin Terhadap Kadar Glukosa Darah pada Hewan Coba Tikus
Diabetes Melitus Tipe Ii. 94.
http://eprints.ums.ac.id/id/eprint/96611%0Ahttp:
//eprints.ums.ac.id/96611/1/Naskah Publikasi Gizi_J310170173_Fau Ziah Tri
Meilawati.pdf

Mihyaoui, A. El, Charfi, S., Erbiai, E. H., Pereira, M., Duarte, D., Vale, N.,
Castillo, C., Badoc, A., Lamarti, A., Esteves, J. C. G., & Arnao, M. B.
(2023). Cladanthus mixtus Extracts from Northern Morocco.

Min, B., Gu, L., McClung, A. M., Bergman, C. J., & Chen, M. H. (2012). Free
and Bound Total Phenolic Concentrations, Antioxidant Capacities, and
Profiles of Proanthocyanidins and Anthocyanins in Whole Grain Rice (Oryza
Sativa L.) of Different Bran Colours. Food Chemistry, 133(3), 715–722.
https://doi.org/10.1016/J.FOODCHEM.2012.01.079

Pang, Y., Ahmed, S., Xu, Y., Beta, T., Zhu, Z., Shao, Y., & Bao, J. (2018).
Bound Phenolic Compounds and Antioxidant Properties of Whole Grain and
Bran of White, Red and Black Rice. Food Chemistry, 240, 212–221.
https://doi.org/10.1016/J.FOODCHEM.2017.07.095

42
Pangastuti, H. A., D. R. Affandi, and D. I. (2012). Avaliable online at
www.ilmupangan.fp.uns.ac.id. Jurnal Teknosains Pangan Vol 2 No 2 April
2013, 1(1), 41–48.

Purbasari, S. W. (2016). Identifikasi Kandungan Senyawa Bioaktif dan Aktivitas

Antioksidan Beras Ketan Merah (Oryza Sativa Var. Glutinosa).
http://repository.ub.ac.id/150821/

Putri, J. Y., Nastiti, K., & Hidayah, N. (2023). Pengaruh Pelarut Etanol 70% dan
Metanol terhadap Kadar Flavonoid Total Ekstrak Daun Sirsak (Annona
muricata Linn). Journal Pharmaceutical Care and Sciences, 3(2), 20–29.
https://doi.org/10.33859/jpcs.v3i2.235

Rahmawati, A. S., & Erina, R. (2020). Rancangan Acak Lengkap (Ral) dengan
Uji Anova Dua Jalur. OPTIKA: Jurnal Pendidikan Fisika, 4(1), 54–62.
https://doi.org/10.37478/optika.v4i1.333

Sam, S., Malik, A., & Handayani, S. (2016). Penetapan Kadar Fenolik Total dari
Ekstrak Etanol Bunga Rosella Berwarna Merah (Hibiscus sabdariffa L.).
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, 3(2), 182–187.

Samyor, D., Das, A. B., & Deka, S. C. (2017). Pigmented Rice a Potential Source
of Bioactive Compounds: a review. In International Journal of Food Science
and Technology (Vol. 52, Issue 5, pp. 1073–1081).
https://doi.org/10.1111/ijfs.13378

Sari, F., Nugrahani, R. A., Anisa Nurtri Lestari, & Noviyanti1, D. (2019).
Pengaruh Konsentrasi Pelarut Etanol terhadap Ekstrak Minyak Atsiri dari
Akar Bunga Anggrek (Orchidaceae) dengan Maserasi-Ultrasonik. Prosiding
Semnastek, 16, 1–5.

Sasadara, M. M. V., & Wiranata, I. G. (2022). Pengaruh Pelarut dan Metode

Ekstraksi terhadap Kandungan Metabolit Sekunder dan Nilai IC50 Ekstrak
Umbi Bit (Beta vulgaris L.). Usadha, 2(1), 7–13.
https://doi.org/10.36733/usadha.v2i1.5277

Sekarsari, S., Widarta, I. W. R., & Jambe, A. A. G. N. A. (2019). Pengaruh Suhu

dan Waktu Ekstraksi dengan Gelomabng Ultrasonik terhadap Aktivitas

43
 Antioksidan Ekstrak Daun Jambu Biji(Psidium guajava L.). Jurnal Ilmu Dan
Teknologi Pangan (ITEPA), 8(3), 267.
https://doi.org/10.24843/itepa.2019.v08.i03.p05

Shao, Y., Xu, F., Sun, X., Bao, J., & Beta, T. (2014). Phenolic acids,
Anthocyanins, and Antioxidant Capacity in Rice (oryza sativa l.) Grains at
Four Stages of Development after Flowering. Food Chemistry, 143, 90–96.
https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2013.07.042

Sholihah, A., Aini, N., & Dwiyanti, H. (2021). Optimasi Ekstraksi Antosianin
Pada Beras Hitam Sirampog Menggunakan Metode Ultrasound Extract Assist
(UAE). Jurnal Aplikasi Teknologi Pangan, 10(3), 71–76.

Sinulingga, S., Subandrate, S., & Safyudin, S. (2020). Uji Fitokimia dan Potensi
Antidiabetes Fraksi Etanol Air Benalu Kersen (Dendrophtoe petandra (L)
Miq). Jurnal Kedokteran Dan Kesehatan, 16(1), 76.
https://doi.org/10.24853/jkk.16.1.76-83

Suryana, M. R. (2021). Ekstraksi Antosianin pada Bunga Telang (Clitoria

Ternatea L.): Sebuah Ulasan. Pasundan Food Technology Journal, 8(2), 45–
50. https://doi.org/10.23969/pftj.v8i2.4049

Trimanto, T., Dwiyanti, D., & Indriyani, S. (2018). Morfologi, Anatomi dan Uji
Histokimia Rimpang Curcuma aeruginosa Roxb; Curcuma longa L. DAN
Curcuma heyneana Valeton dan Zijp. Berita Biologi, 17(2), 245–252.
https://doi.org/10.14203/beritabiologi.v17i2.3086

Widyawati, P. S., Suteja, A. M., Suseno, T. I. P., Monika, P., Saputrajaya, W., &
Liguori, C. (2014). Effect of Pigment Color Difference in Organic Rice on
Antioxidant Activity. Agritech, 34(4), 399–406.

Yoshida, H., Tomiyama, Y., & Mizushina, Y. (2010). Lipid Components, Fatty
Acids and Triacylglycerol Molecular Species of Black and Red Rices. Food
Chemistry, 123(2), 210–215.
https://doi.org/10.1016/J.FOODCHEM.2010.04.010

Yu, X., Yang, T., Qi, Q., Du, Y., Shi, J., Liu, X., Liu, Y., Zhang, H., Zhang, Z.,
& Yan, N. (2021). Comparison of the Contents of Phenolic Compounds

44
 Including Flavonoids and Antioxidant Activity of Rice (Oryza Sativa) and
Chinese Wild Rice (Zizania Latifolia). Food Chemistry, 344, 128600.
https://doi.org/10.1016/J.FOODCHEM.2020.128600\

Yusuf, M., Indriati, S., Attahmid, N. F., Saleh, R., & Rifai, A. (2022). Effect of
Extraction Time on the Bioactive Compounds of Bottle Gourd (Lagenaria
Siceraria) Using Gas Chromatography-Mass Spectrometry. Bulletin of
Pharmaceutical Sciences. Assiut, 0(0), 0–0.
https://doi.org/10.21608/bfsa.2022.109478.1253

Zhang, L., Cui, D., Ma, X., Han, B., & Han, L. (2023). Comparative Analysis of
Rice Reveals Insights Into the Mechanism of Colored Rice Via Widely
Targeted Metabolomics. Food Chemistry, 399, 133926.
https://doi.org/10.1016/J.FOODCHEM.2022.133926

Zhang, L., Shan, Y., Tang, K., & Putheti, R. (2009). Ultrasound-assisted
extraction flavonoids from Lotus (Nelumbo nuficera Gaertn) leaf and
evaluation of its anti-fatigue activity. International Journal of Physical
Sciences, 4(8), 418–422.

Zhang, M. W., Zhang, R. F., Zhang, F. X., & Liu, R. H. (2010). Phenolic Profiles
and Antioxidant Activity of Black Rice Bran of Different Commercially
Available Varieties. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 58(13),
7580–7587. https://doi.org/10.1021/jf1007665

Zhou, Z., Robards, K., Helliwell, S., & Blanchard, C. (2002). Composition and
Functional Properties of Rice. In International Journal of Food Science and

45