SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

Metode Spektrofotometri
Metode pengukuran menggunakan prinsip
spektrofotometri berdasarkan absorbsi cahaya pada panjang
gelombang tertentu melalui suatu larutan yang mengandung
kontaminan yang akan ditentukan kosentrasinya. Proses
disebut absorbsi spektrofotometri., dan jika panjang
gelombang yang digunakan adalah gelombang cahaya
nampak, maka disebut sebagai kolometri karena
memberikan warna.

(Fatma, 2007 :129)

 Prinsip Spektrofotometri
Prinsip kerja dari metode ini adalah jumlah cahaya yang
diabsorbsi oleh larutan sebanding dengan konsetrasi
kontaminan dalam larutan. prinsip ini dijabarkan dalam
hukum Beer-Lambert, yang menghubungkan antara
absorbansi cahaya dengan konsentrasi suatu bahan yang
mengabsorbsi berdasarkan persamaan berikut :

A = log ( Iin / Iout ) = ( 1/ T) = a x b x c

(Fatma, 2007 )
 Spektrofotometri UV-VIS
Spektroskopi UVVIS adalah tekhnik
analisis spektroskopi yang menggunakan
sumber radiasi elektromagnetik dan sinar
tampak dengan mengunakan instrumen.
Spektrofotometri adalah penyerapan sinar
tampak untuk ultraviolet dengan suatu
molekul yang dapat menyebabkan eksitasi
molekul dan tingkat dasar ke tingkat energi
yang paling tinggi (Sumar, 1994)
Sinar ultraviolet (UV) mempunyai panjang gelombang
antara 200-400 nm, dan sinar tampak (visible)
mempunyai panjang gelombang 400-750 nm.
Pengukuran menggunakan spektrofotometer
melibatkan energi elektronik yang cukup besar pada
molekul yang dianalisis, sehingga spektrofotometer
UV-Vis lebih banyak dipakai untuk analisis kuantitatif
dibandingkan kualitatif. Konsentrasi dari analit di
dalam larutan sampel bisa ditentukan dengan
mengukur absorbansi sinar oleh sampel pada panjang
gelombang tertentu dengan menggunakan hukum
Lambert-Beer (Rohman 2007).
 PENAMPILAN SPEKTRA UV-Vis
Spektrofotometer UV/tampak mengumpulkan data pada
kisaran yang di inginkan dan akan menghasilkan spectrum
senyawa yang di analisis sebagai suatu grafik yang
menggambarkan transmitan (absorban/ sumbu y) sebagai
fungsi panjang gelombang (sumbu x), dalam nanometer yang
merupakan satuan yang disarankan untuk digunakan dalam
daerah ini dibanding cm-1. Dalam spektroskopi, transmitan T
merupakan suatu ukuran penguatan berkas sinar
monokromatik yang didasarkan pada perbandingan antara
intensitas sinar yang di transmisikan (I) dan sinar yang
menegenai (I0) sesuai dengan apakah sampel ditempatkan
atau tidak pada jalan optic antara sumber sinar dan
detector(Gandjar, 2012).
 Absorbansi adalah perbandingan intensitas sinar
yang diserap dengan intensitas sinar datang. Nilai
absorbansi ini akan bergantung pada kadar zat yang
terkandung di dalamnya, semakin banyak kadar zat yang
terkandung dalam suatu sampel maka semakin banyak
molekul yang akan menyerap cahaya pada panjang
gelombang tertentu sehingga nilai absorbansi semakin
besar atau dengan kata lain nilai absorbansi akan
berbanding lurus dengan konsentrasi zat yang
terkandung didalam suatu sampel. ( neldawati,2013)
 FAKTOR-FAKTOR YANG MEMPENGARUHI
PENYERAPAN UV-Vis

Kromofor
Pengaruh Pelarut
Pengaruh Suhu
Ion-ion Organik
(Gandjar, 2012).
 KESIMPULAN
Spektrofotometri merupakan metode analisis yang paling
luas dalam laboratorium klinik dimana hubungan antara
kadar analit dan jumlah cahaya terserap merupakan
dasar kebanyakan penerapan analisis spektroskopi
serapan elektronik molekuler. Penyerapan radiasi UV-Vis
terjadi melalui eksitasi electron dalam suatu molekul
obat ke level energy yang lebih tinggi.Penyerapan
(absorpsi) sinar UV dan sinar tampak pada umumnya
dihasilkan oleh eksitasi electron-elektron ikatan. Dimana
penyerapannya dipengaruhi oleh beberapa factor yaitu
kromofor, pengaruh pelarut, suhu, pH dan ion-ion
organic
 Daftar Pustaka
Lestari Fatma. 2007. Bahaya Kimia Sampling dan Pengukuran
Kontaminan Kimia di Udara. EGC : Jakarta
Gandjar, Ibnu Gholib, Abdul Rohman. 2012. Analisis Obat Secara
Spektroskopi dan Kromtografi. Pustaka Pelajar: Yogyakarta.
Sumar, Hendayana. 1994. Kimia Analisis Farmasi. Jakarta: UI
Press
Neldawati, dkk. 2013. Analisis Nilai Absorbansi dalam Penentuan
Kadar Flavonoid untuk Berbagai Jenis Daun Tanaman Obat.
Universitas Negri Padang : Padang