KEMAJUAN TEKNOLOGI DI 

BIDANG MIKROBIOLOGI
Oleh 
dr Hegi Darmawan
PENDAHULUAN
 Seiring berkembangnya ilmu mikrobiologi dan 
biokimia, para peneliti melakukan uji coba untuk 
membuat obat, vaksin, dan anti toksin terhadap 
penyakit­penyakit yang masih belum ada 
pengobatannya
 Salah satu perkembangan penelitian yang bisa 
kita pelajari dalam kemajuan teknologi di bidang 
mikrobiologi adalah Rekayasa Genetika 
Insulin
 Dimana pada tahun 1920 penyakit diabetes 
mellitus masih belum ditemukan pengobatan 
insulin dan pemurniannya
 PENGERTIAN INSULIN
 Insulin  dalam  bahasa  latin  adalah  "insula"  yang  berarti 
pulau,  Insulin  adalah  hormon  yang  diproduksi  oleh  sel 
beta  dari  pulau­pulau  langerhans  kelenjar  pankreas  atau 
diberikan  melalui  suntikan,  yang  diperlukan  untuk 
glukosa (dalam darah) yang akan diangkut ke dalam sel di 
mana akan diubah menjadi energi.
 Salah  satu  pekerjaan  insulin  yang  paling  penting  adalah 
untuk  membantu  sel  menggunakan  glukosa.  Insulin 
bertindak  seperti  kunci  untuk  membuka  pintu  yang 
memungkinkan  glukosa  ke  dalam  sel.  Sel  menggunakan 
glukosa  tubuh  sebagai  sumber  energi  yang  mereka 
butuhkan untuk hidup. Tanpa energi, sel­sel dalam tubuh 
tidak dapat bertahan hidup. Insulin juga membantu tubuh 
untuk menyimpan bahan bakar ekstra sebagai lemak.
 Eksokrin; pancreatic juice; 
natrium bikarbonat, amilase, 
tripsin, lipase dan dua nuklease
 Endokrin; hormone; Insulin dan 
glukagon
 sel A (terletak di pinggiran 
pulau) mensekresi glukagon, sel 
B (terletak terpusat di pulau) 
mensekresikan insulin, dan sel D 
(tersebar di seluruh pulau) 
mensekresi somatostatin
 Insulin merangsang 
pengambilan glukosa oleh 
sel, terutama sel hati, sel 
otot, dan sel­sel jaringan 
adiposa. di hati dan sel otot, 
glukosa kemudian disimpan 
sebagai glikogen. dalam otot 
sel, glukosa memasok 
energi untuk kontraksi otot, 
dan dalam sel lemak, 
glukosa menjadi gliserol 
untuk pembentukan lemak. 
Dengan cara ini, insulin 
menurunkan kadar glukosa 
darah.
 Biphasic  insulin  merespon  stimulus  glukosa:  ketika  sel  β
dirangsang,  ada  tahap  cepat  pertama  respon  dari  insulin  1­3 
menit  setelah  kadar  glukosa  meningkat,  ini  akan  kembali  ke 
arah baseline 6­10 menit kemudian. Setelah itu, ada tahap kedua 
respon  insulin  yang  stabil  untuk  durasi  stimulus  selanjutnya. 
Diabetes  mellitus  tipe  2  ditandai  dengan  hilangnya  respon 
insulin tahap pertama dan tahap kedua yang berkurang
DEFINITION OF DM
• In  1999,  WHO  defined  diabetes  mellitus  as  “a 
metabolic  disorder  of  multiple  etiology, 
characterized  by  chronic  hyperglycaemia  with 
disturbances  of  carbohydrate,  fat  and  protein 
metabolism  resulting  from  defects  in  insulin 
secretion,  insulin  action,  or  both.  The  effects  of 
diabetes  mellitus  include  long­term  damage, 
dysfunction and failure of various organs”. Thus, 
the  metabolic  abnormalities  of  diabetes  result 
from inadequate insulin action on target tissues, 
due  to  deficient  insulin  secretion  or  insensitivity 
to insulin action, or a combination of both.
 Seorang  anak  3­tahun  dengan  diabetes  • Anak  yang  sama  pada  tahun  1923 
mellitus  tipe  1,  difoto  pada  tahun  1922  setelah  pengobatan  insulin  tersedia 
sebelum  pengobatan  insulin  tersedia.  yang  ditemukan  oleh  Toronto  Group. 
Satu­satunya  pengobatan  saat  itu  Efek dari terapi baru ini 'Ajaib'
adalah  ‘starvation’  diet.  pasien  jarang 
bertahan selama lebih dari 2 tahun
 Tipe  2  diabetes  mellitus  (DM)  sangat  berhubungan  • Anak muda ini memiliki obesitas. kasus 
dengan obesitas dan telah diakui selama berabad­abad.  DM  tipe  2  sekarang  sedang 
Meningkatnya  resiko  DM  tipe  2,  progresif  dengan  diidentifikasi  pada  anak­anak  tersebut 
meningkatnya  indeks  massa  tubuh.  Obesitas  sangat  dan  di  usia  remaja,  terutama  dalam 
terkait  dengan  resistensi  insulin  dan  tingginya  kadar  kelompok  etnis  yang  sangat  rentan 
insulin  puasa.  Telah  diusulkan  bahwa  ini  (riwayat keluarga)
memungkinkan  pada  akhirnya  menyebabkan 
kegagalan sel β dan munculnya jenis DM tipe 2
SEJARAH INSULIN
 Pada tahun 1869 Paul Langerhans, seorang 
mahasiswa kedokteran di Berlin, sedang belajar 
struktur pankreas.
 Pada tahun 1889, dokter Polandia­Jerman Oscar 
Minkowski bekerjasama dengan Joseph von 
Mering dihapusnya pankreas dari seekor anjing 
yang sehat untuk menguji perannya 
diasumsikan dalam pencernaan.
 Pada tahun 1921 dua peneliti, Fred Banting dan 
Charles Best, adalah yang pertama kali 
menemukan insulin dan menggunakannya untuk 
mengobati diabetes
SEJARAH INSULIN
 Pada 11 Januari 1922, Leonard Thompson, diabetes 14 
tahun yang terbaring sekarat di Rumah Sakit Umum 
Toronto, diberikan suntikan insulin pertama. Namun, 
begitu ekstrak murni yang suntikkan, menderita reaksi 
alergi yang parah, dan suntikan lebih lanjut dibatalkan. 
 Pada akhirnya insulin untuk pengobatan pada manusia 
diisolasi dari pankreas sapi atau babi. Walaupun insulin 
hewan secara umum cukup memuaskan tetapi untuk 
penggunaan pada manusia dapat menimbulkan dua 
masalah;
i. Adanya perbedaan kecil dalam asam amino penyusunnya yang 
dapat menimbulkan efek samping berupa alergi pada beberapa 
penderita
ii. Prosedur pemurnian sulit dan cemaran berbahaya asal hewan 
tidak selalu dapat dihilangkan secara sempurna
SEJARAH INSULIN
 Rekayasa genetik pertama, sintetik "manusia" insulin 
diproduksi di laboratorium pada tahun 1977 oleh Herbert 
Boyer menggunakan E. coli
 Pada tahun 1981 telah terjadi perbaikan secara berarti 
cara produksi insulin melalui rekayasa genetika. Insulin 
yang diperoleh dengan cara ini mempunyai struktur mirip 
dengan insulin manusia. Melalui teknologi DNA 
rekombinan, insulin diproduksi menggunakan sel mikroba 
yang tidak patogen. Karena kedua hal tersebut di atas, 
insulin hasil rekayasa genetika ini mempunyai;
i. Efek samping yang relatif sangat rendah dibandingkan 
dengan insulin yang diperoleh dari ekstrak pankreas hewan 
ii. Tidak menimbulkan efek alergi serta tidak mengandung 
kontaminan berbahaya
iii. waktu generasi E.coli yang cukup pendek, yaitu hanya 20 
menit, setiap 20 menit, satu sel E.coli membelah menjadi 2 
sel. Sehingga insulin yang diproduksi semakin banyak.
PENGERTIAN REKAYASA GENETIKA
 Rekayasa genetika dalam bahasa Inggris genetic 
engineering dalam arti paling luas adalah penerapan 
genetika untuk kepentingan manusia. Rekayasa genetika 
adalah teknik yang dilakukan manusia untuk mentransfer 
(memindahkan) gen (DNA) yang dianggap 
menguntungkan dari satu organisme kepada susunan gen 
(DNA) dari organisme lain.
 DNA rekombinan (rDNA) adalah pembentukan kombinasi 
materi genetik yang baru dengan cara penyisipan molekul 
DNA ke dalam suatu vektor sehingga memungkinkannya 
untuk terintegrasi dan mengalami perbanyakan di dalam 
suatu sel organisme lain yang berperan sebagai sel inang
PROSES PEMBUATAN INSULIN
1. Pada proses pembuatan insulin ini, langkah pertama adalah mengisolasi plasmid dari E. coli. 
Plasmid adalah salah satu bahan genetik bakteri yang berupa untaian DNA berbentuk lingkaran 
kecil. Selain plasmid, bakteri juga memiliki kromosom. Keunikan plasmid ini adalah dapat bisa 
keluar­masuk tubuh bakteri, dan bahkan sering dipertukarkan antar bakteri.
2. Pada langkah kedua ini plasmid yang telah diisolir dipotong pada segmen tertentu menggunakan 
enzim restriksi endonuklease. Sementara itu DNA yang di isolasi dari sel pankreas dipotong pada 
suatu segmen untuk mengambil segmen pengkode insulin. Pemotongan dilakukan dengan enzim 
yang sama.
3. DNA kode insulin tersebut disambungkan pada plasmid menggunakan bantuan enzim DNA 
ligase. Hasilnya adalah kombinasi DNA kode insulin dengan plasmid bakteri yang disebut DNA 
rekombinan.
4. DNA rekombinan yang terbentuk disisipkan kembali ke sel bakteri.
5. Bila bakteri E. coli berkembangbiak, maka akan dihasilkan koloni bakteri yang memiliki DNA 
rekombinan.
 Setelah tumbuh membentuk koloni, bakteri yang mengandung DNA rekombinan diidentifikasi 
menggunakan probe. Probe adalah rantai RNA atau rantai tunggal DNA yang diberi label bahan 
radioaktif atau bahan fluorescent dan dapat berpasangan dengan basa nitrogen tertentu dari DNA 
rekombinan. 
 Untuk memilih koloni bakteri mana yang mengandung DNA rekombinan, caranya adalah 
menempatkan bakteri pada kertas filter lalu disinari dengan ultraviolet. Bakteri yang memiliki 
DNA rekombinan dan telah diberi probe akan tampak bersinar. Nah, bakteri yang bersinar inilah 
yang kemudian diisolasi untuk membuat strain murni DNA rekombinan. Dalam metabolismenya, 
bakteri ini akan memproduksi hormon insulin.
TAMBAHAN
TERIMA KASIH ATAS 
PERHATIANNYA