PENGANTAR PRAKTIKUM

BIOKIMIA NEUROSAINS
-Pengukuran aktivitas
asetilkolinesterase di jaringan
- pengukuran kadar protein total di
jaringan
• Asetil kolinesterase : enzim untuk
menghidrolisis neurotransmiter asetilkolin
• Rx : asetilkolin → asetil + kolin
AChE
Asetilkolin : neurotransmiter
 Prakt. 1. AKTIVITAS
ASETILKOLINESTERASE
• Tujuan : membandingkan aktivitas enzim
asetilkolinesterase di jaringan otak dan otot
tikus wistar
• Dasar teori : jaringan otak dan otot
mengandung enzim asetilkolinesterase yang
akan mengubah asetilkolin menjadi asetil dan
kolin yang dapat dibaca pada serapa tertentu
• Cara kerja :
200 μL R1 + 4 μL sample diamkan 5 menit ,
tambahkan ditambah R2 50 μL, baca pada
serapan 405 nm ( 2 menit dan 5 menit)
Hasil dinyatakan dalam U/L
 Prakt. 2. pengukuran kadar protein
total (metode Biuret)
• Tujuan : untuk mengetahui kadar protein total
dalam jaringan otak dan otot
• Dasar teori : Adanya ikatan peptida pada
protein akan bereaksi positif dengan pereaksi
Biuret yang akan membentuk warna
lembayung dan dapat diukur pada panjang
gelombang 540 nm.
• Bahan : homogenat jaringan otak dan otot,
NaOH, pereaksi biuret, standar albumin
• Cara kerja :
tabung Sample Biuret
Homogenat otak 25 μL 2 mL
Homogenat otot 25 μL 2 mL Diamkan 30 Baca pd
menit serapan 540
nm
Standar albumin 25 μL 2 mL
Blanko akuades 25 μL 2 mL

Bandingkan dengan BSA

Hasil dinyatakan dalam mg/mL
• Aktivitas spesifik ChE : aktivitas (U/L) / kadar
protein total