PRAKTIKUM

LABORATORIUM
FORENSIK SEDERHANA

Dr.dr.Rika Susanti, Sp.F.M(K)

BAHAN PEMERIKSAAN
• Darah
• Cairan Vagina
• Urin
• Cairan tubuh lain
• Bercak pada benda lain
PEMERIKSAAN CAIRAN MANI/SPERMA

Tujuan :
Menentukan adanya sperma/cairan mani dalam
vagina untuk membuktikan adanya persetubuhan

Bahan :
• Cairan di forniks posterior vagina
• Bercak pada pakaian
 ALUR PEMERIKSAAN CAIRAN MANI DAN
SPERMA

Sampel

Bilas & Swab Bercak

Sperma Mani Mani Sperma

Langsung Malachite Berberio Fosfatase Asam Baecchi

green Florence
PEMERIKSAAN SPERMATOZOA

- Pemeriksaan Langsung
- Pewarnaan Malachite Green
- Pewarnaan Baecchi
 PEMERIKSAAN LANGSUNG
Cara Pemeriksaan :
• Satu tetes lendir vagina diletakkan pada kaca objek,
lihat dibawah mikroskop
• Perhatikan adanya sperma/pergerakkan

Bahan dari swab/bilas vaginal

• Buat ekstrak dalam tabung reaksi + garam fisiologis
• Sentrifuge 1000 rpm selama 2 menit
• Endapan diperiksa dibawah mikroskop
PEMERIKSAAN LANGSUNG
 MALACHITE
GREEN
Reagen :
Larutan Malachite green 1%
Larutan Eosin Yellowish 1%

Cara kerja :
• Bahan diletakkan pada kaca objek, biarkan mengering di udara, atau
fiksasi dengan api kecil
• Pulas dengan larutan malachite green 1% selama 10 – 15 menit, lalu cuci
dengan air
• Pulas lagi dengan larutan eosin yellowish 1% selama 1 detik, keringkan di
udara
• Lihat dengan mikroskop
Malachite green
 MALACHITE GREEN

Hasil :
Kepala sperma tampak
berwarna merah, leher
warna merah muda dan
ekornya berwarna hijau
 BAECCHI
Reagen Baecchi
• Asam Fuschin 1 % 1 tetes
• Biru Methylen 1% 1 tetes
• Asam klorida 1 % 40 tetes

Cara Kerja :
• Gunting pakaian yang mengandung bercak sebesar 5 mm X 5 mm, lalu
masukkan ke dalam reagen selama 3-5 menit, masukkan ke dalam HCl
1% sebentar
• Dehidrasi berturut dalam alkohol 70%, 85% & absolut, jernihkan
dengan Xylol sebanyak 2 kali
• Ambil 1-2 helai benang dan uraikan menjadi serabut halus, lihat
dengan mikroskop
BAECCHI
 BAECCHI

Hasil :
Kepala spermatozoa berwarna
merah, ekor merah muda, menempel
pada serabut benang
 PEMERIKSAAN CAIRAN MANI

Sampel :
1. Forniks posterior vagina
Fosfatase asam, PAN, Berberio, Florence

2. Bercak pada pakaian

Pemeriksaan Taktil, Visual, Sinar UV,
Fosfatase asam, PAN, Berberio, Florence
 PEMERIKSAAN CAIRAN MANI
Pemeriksaan Bercak Cairan Mani pada pakaian
• Pemeriksaan Taktil
Bercak pada pakaian teraba kaku seperti kanji
• Pemeriksaan Visual
Bercak segar permukaannya mengkilat dan
transulen, lama kelamaan akan berwarna kuning
sampai coklat
• Pemeriksaan Sinar UV
Bercak akan berfluoresensi putih
REAKSI FOSFATASE ASAM
Reagen :
Larutan A :
• Brentamin Fast Blue B 1 gram (1)
• Na Acetate Trihydrat 20 gram (2)
• Galcial Acetate acid 10 ml (3)
• Aquadest 100 ml (4)
(2) & (3) dilarutkan dalam (4) untuk menghasilkan
larutan penyangga dengan pH 5, kemudian (1)
dilarutkan dalam lar.penyangga tsb.
 REAKSI FOSFATASE ASAM
Larutan B :
Na – alfa-naphyl phosphat 800 ml
Aquadest 10 ml
89 ml lar.A ditambah 1 ml lar.B, disaring cepat
kedalam botol berwarna gelap, simpan dalam lemari
es.
 REAKSI FOSFATASE ASAM

Dasar Reaksi :
• Fosfatase asam menghidrolisis Na-Alfa-naftil fosfat
dibebaskan Alfa-naftol
• Alfa-naftol + Brentamin fast blue menghasikan zat
warna azo berwarna merah ungu
 REAKSI FOSFATASE ASAM
Cara kerja :
• Kertas saring dibasahkan dengan air, letakkan
pada bercak/kapas lidi dan tekan dengan
tangan
• Setelah 5-10 menit teteskan reagen FA
• (+) muncul warna ungu, < 30 detik
Reaksi FA
 Uji PAN
Buat larutan Tris 0,5 M yang terdiri dari :
Tambahkan 3,0 gram Tris (hydroxy methyl) aminomethane ke
dalam 50 cc aquadest

Buat larutan PAN yang terdiri dari :

Larutkan 1 mg PAN (1-(2-pyridilazo)2-naphthol) ke dalam 0,2
ml larutan Tri ton X – 100

Reagen dibuat dengan menambahkan larutan PAN

dengan 9,8 ml larutan Tris
 Uji PAN
Cara kerja :
• Bercak pada pakaian diekstraksi dengan cara
menempelkan kertas saring Whatman no.2 yang
dibasahi dengan aquadest, selama 10 menit
• Biarkan kertas mengering pada suhu ruangan
• Teteskan reagen PAN pada bercak
• Catat warna yang terbentuk
• Hasil (+) warna merah jambu
 UJI BERBERIO
Dasar Reaksi :
Spermin dalam cairan mani dengan asam pikrat jenuh
menghasilkan kristal spermin pikrat.

Reagen : larutan asam pikrat jenuh

 UJI BERBERIO
Cara Kerja :
• Ekstraksi bercak dengan aquadest, taruh di kaca
obyek, biarkan mengering di udara, lalu tutup
dengan kaca penutup
• 1 tetes Reagen dialirkan di bawah kaca penutup
pada satu sisi
• Lihat di bawah mikroskop
Uji Berberio
 UJI BERBERIO
Hasil :
• Kristal spermin pikrat berwarna kekuningan
berbentuk jarum dengan ujung tumpul
• Kadang-kadang tedapat garis refraksi terletak
longitudinal
• Kristal kadang berbentuk ovoid
KRISTAL SPERMIN PIKRAT
 REAKSI FLORENCE
Dasar reaksi :
Adanya kholin dalam cairan mani, merupakan produk
degradasi dari lechitin, dengan larutan lugol, kholin
bereaksi dengan cholin membentuk kristal kholin
peryodida
Reagen :
Larutan Lugol dibuat dari :
• Kalium Iodida 1,5 gram
• Yodium 2,5 gram
• Aquadest 30 ml
 REAKSI FLORENCE
Cara Kerja :
• Ekstraksi bercak dengan aquadest, taruh di kaca
obyek, biarkan mengering di udara, lalu tutup
dengan kaca penutup
• 1 tetes Reagen dialirkan di bawah kaca penutup
pada satu sisi
• Lihat di bawah mikroskop
Uji Florence
 REAKSI FLORENCE

Hasil :
Tampak kristal kholin peryodida berwarna coklat
berbentuk jarum dengan ujung sering terbelah
Terima Kasih