Halaman Judul

LAPORAN PRAKTIKUM MANDIRI

HISTOLOGI DAN KIMIAWI KULIT
PEMBUATAN PREPARAT JARINGAN KULIT BIAWAK RETANNING

Disusun Oleh:
Kelompok 5
TBK-A
1.
2.
3.
4.
5.

Chasbiyatur Rozalia
Ester Marnita Purba
Fadhilah Tika Utami
Hendrik Maulana Ishak
Latifatul Azhimah Zuhri

(130101020)
(130101029)
(130101030)
(130101036)
(130101043)

KEMENTERIAN PERINDUSTRIAN REPUBLIK INDONESIA

PUSAT PENDIDIKAN DAN PELATIHAN INDUSTRI
AKADEMI TEKNOLOGI KULIT
YOGYAKARTA
2014

Lembar Pengesahan

LAPORAN PRAKTIKUM MANDIRI

HISTOLOGI DAN KIMIAWI KULIT
PEMBUATAN PREPARAT JARINGAN KULIT BIAWAK RETANNING
Disusun Oleh:
Kelompok 5
TBK-A
1.
2.
3.
4.
5.

Chasbiyatur Rozalia
Ester Marnita Purba
Fadhilah Tika Utami
Hendrik Maulana Ishak
Latifatul Azhimah Zuhri

(130101020)
(130101029)
(130101030)
(130101036)
(130101043)

Laporan ini dibuat guna memenuhi salah satu persyaratan penilaian dalam
mengikuti mata kuliah Histologi Kulit pada program study Teknologi
Penyamakan Kulit Konsentrasi Teknologi Bahan Kulit di Akademi Kulit
Yogyakarta.
Disahkan pada tanggal
15 Juli 2014

Asisten Dosen I

R. Arditya Satrio W., S.Pt

Asisten Dosen II

Laili Rachmawati., S.Pt,M.Sc

Dosen Pengampu

R. L. M. Satrio Arie W, S.Pt., MP

ii

KATA PENGANTAR
Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan
hidayah-Nya sehingga laporan Praktikum Histologi dan Kimiawi Kulit
tentang pembuatan preparat jaringan kulit biawak Re-tanning ini dapat
terselesaikan dengan lancar tanpa halangan suatu apapun.
Atas terselesaikannya laporan ini, tidak lupa di ucapkan terima kasih
kepada :
1. Mudhori, M. Si, selaku Direktur Akademi Teknologi Kulit Yogyakarta
2. R. L. M. Satrio Arie Wibowo, S. Pt, MP, selaku Dosen Pembimbing
mata kuliah Histologi Kulit.
3. R. Arditya Satrio W, S. Pt dan Laili Rachmawati, S. Pt, M. Sc,
selaku asisten dosen pembimbing mata kuliah Histologi Kulit.
4. Semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian praktikum
dan juga penyelesaian pembuatan laporan ini.
Dalam laporan ini berisi tentang cara pembuatan preparat jaringan
kulit Biawak Re-Tanning dan berikut hasilnya.
Laporan ini dimungkinkan masih jauh dari sempurna, oleh karena itu
diharapkan kritik dan saran yang membangun. Semoga laporan ini dapat
bermanfaat khususnya bagi penyusun dan bagi para pembacanya pada
umumnya.

Yogyakarta, Juni 2014

Penyusun

iii

DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL..............................................................................................i
LEMBAR PENGESAHAN..................................................................................ii
KATA PENGANTAR...........................................................................................iii
DAFTAR ISI.......................................................................................................iv
DAFTAR GAMBAR............................................................................................v
INTISARI...........................................................................................................vi
ABSTRACT......................................................................................................vii
PENDAHULUAN................................................................................................1
Latar Belakang................................................................................................1
Permasalahan.................................................................................................2
Tujuan.............................................................................................................2
TINJAUAN PUSTAKA........................................................................................3
Struktur Kulit...................................................................................................3
Kulit Biawak....................................................................................................5
MATERI DAN METODE.....................................................................................7
Materi..............................................................................................................7
Metode............................................................................................................7
HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................................14
KESIMPULAN..................................................................................................17
DAFTAR PUSTAKA.........................................................................................18

iv

DAFTAR GAMBAR
Gambar

Halaman

1. Struktur Kulit.................................................................................................4
2. Struktur Histologis Pada Epidermis..............................................................5
3. Penampang Melintang Kulit Reptil (Purnomo, 1987)...................................6
4. Proses Dehidrasi..........................................................................................8
5. Proses Clearing............................................................................................8
6. Proses Embedding.......................................................................................9
7. Proses Pencetakan Paraffin.........................................................................9
8. Proses Trimming...........................................................................................9
9. Mikrotom.....................................................................................................11
10. Proses Peletakkan Preparat Pada Objek Glass........................................11
11. Proses Deparafinisasi................................................................................12
12. Proses Rehidrasi.......................................................................................12
13. Proses Pewarnaan....................................................................................12
14. Proses Pengeringan Setelah Pewarnaan.................................................13
15. Mikroskop...................................................................................................13

PEMBUATAN PREPARAT JARINGAN KULIT BIAWAK RE-TANNING

DENGAN PEWARNAAN HE
Ishak, H.M., Utami, F.T., Purba, E.M., Rozalia, C., Zuhri, L.A.
INTISARI
Semakin banyak pemanfaat kulit biawak sebagai kulit samak maka
semakin orang ingin mengetahui kulit biawak secara detail termasuk
mengenai struktur histologi retikular. Sehingga dilakukan praktikum untuk
mengamati struktur histologi kulit tersebut dengan tahapan pembuatan
preparat dan pewarnaan preparat dan mendapatkan hasil pengamatan pada
potongan melintang dan membujur pada kulit biawak re-tanning. Praktikum ini
bertujuan untuk mengetahui bagian-bagian struktur kulit dari biawak retanning. Metode praktikum yang dilakukan adalah metode parafin yaitu
dengan pembuatan preparat dengan potongan membujur dan melintang.
Praktikum dimulai dengan tahap pengambilan sampel, fiksasi, dehidrasi,
clearing, embedding, trimming, cutting, dan pewarnaan dengan HE. Dari hasil
pengamatan preparat membujur kulit biawak re-tanning menggunakan
mikroskop hanya terlihat bagian epidermis atau sisik dan stratum papilare.
Sedangkan, dari hasil pengamatan preparat melintang kulit biawak re-tanning
menggunakan mikroskop terlihat epidermis, stratum papilare, dan stratum
retikulare.
Kata kunci: biawak, histologi, preparat

vi

MAKING PREPARATIONS OF RE-TANNING LIZARD LEATHER TISSUE

WITH HE COLORATION
Ishak, H.M., Utami, F.T., Purba, E.M., Rozalia, C., Zuhri, L.A.
ABSTRACT
The more beneficiaries as leather lizard skin, the more people want to
know in detail including lizard skin histology of the reticular structure. So do
lab to observe the histological structure of the skin with the stages of
manufacture of coloring preparations and preparations and obtain
observations on cross-sectional and longitudinal re-lizard skin tanning. This
lab aims to determine the structural parts of a lizard re-skin tanning. The
method is performed lab paraffin method is by making preparations with
longitudinal and transverse pieces. Practicum begins with phase sampling,
fixation, dehydration, clearing, embedding, trimming, cutting, and staining with
HE. From the observation longitudinal lizard skin preparations re-tanning
visible only under a microscope or scaling of the epidermis and stratum
papilare. Meanwhile, preparations of transverse observations re-tanning lizard
skin using a microscope looks epidermis, the stratum papilare, and stratum
retikulare.
Keywords: lizard, histology, preparations

vii

PENDAHULUAN
Latar Belakang
Biawak atau dalam bahasa latin disebut dengan Vuranus adalah
salah satu hewan jenis reptil yang masuk kedalam golongan kadal besar.
Spesies biawak sangat banyak, tetapi yang paling banyak dikenal orang
Indonesia adalah spesies Vuranus komodoensis atau Biawak Komodo.
Namun, spesies biawak yang paling banyak dimanfaatkan kulitnya atau
disamak adalah spesies biawak air seperti Vuranus salvator, Vuranus
karlsmidi, Vuranus vavirus, Vuranus gigantia,dan Vuranus spenceri (Mustika,
2011).
Kulit biawak berfungsi untuk penyerapan cahaya matahari di siang hari
dimana radiasi matahari diserap pada kulit daerah dorsal. Sekitar 85%
digunakan sebagai energi dan 15% sisanya dia pantulkan kembali pada kulit
untuk mempertahankan suhu di kulit. Ini merupakan kontrol fisiologis dari
biawak untuk mengatur suhu tubuhnya ( Bartholomew G.A. 1982 ).
Biawak mempunyai mata dan kelopak mata serta bentuk kepala lonjong
dilengkapi dengan rahang yang kuat serta lidah yang panjang dan bercabang
dua. Hewan ini memiliki kaki yang kokoh serta kuku yang tajam yang
biasanya digunakan hewan ini untuk memanjat pohon , menggali sarang di
bawah tanah dan untuk mempertahankan diri. Biawak juga dilengkapi dengan
ekor yang panjang dan sangat kuat dan kokoh dimana biasanya digunakan
untuk memecut dalam rangka mempertahankan diri dari serangan juga untuk
mendukung pergerakan ketika berenang dalam air.
Klasifikasi Ilmiah Biawak :
Kelas
Bangsa
Suku
Marga
Jenis
Makanan
Habitat

:
:
:
:
:
:
:

Perkembangbiakan :

Reptilia
Squamata
Varanidae
Varanus
Varanus salvator
Tikus, ikan air tawar, dan serangga.
Hidup di daerah dekat dengan air ( sungai,
rawa dll )
Bertelur, masa inkubasi 168-171 hari

Semakin banyak pemanfaat kulit biawak sebagai kulit samak maka

semakin orang ingin mengetahui kulit biawak secara detail termasuk
mengenai struktur histologi retikular. Sehingga dilakukan praktikum untuk

mengamati struktur histologi kulit tersebut.Untuk mengetahui struktur histologi

kulit biawak re-tannimg maka dibuatlah preparat jaringan kulit. Metode
pembuatan preparat jaringan kulit bermacam-macam dan terdiri dari banyak
tahapan. Dalam pembuatan preparat jaringan kulit biawak re-tanning dipilih
metode yang paling umum yaitu metode parafin (Said, 2013).
Permasalahan
Biawak merupakan hewan reptil, pada dasarnya biawak adalah hewan
berdarah dingin. Kulit biawak bisa diproses samak, oleh karena itu kita ingin
mengetahui mengamati struktur kulit biawak yang telah mengalami proses
tanning. Selain itu, kita juga ingin mengetahui apakah kulit biawak retanning
dapat dibuat sebagai preparat histologi.
Tujuan
Adapun tujuan dari penulisan laporan ini yaitu mahasiswa mampu
terampil membuat preparat histologi dan jaringan, mahasiswa mampu
mewarnai preparat jaringan, mampu melihat, memahami dan mengerti
struktur jaringan kulit biawak serta bagian-bagiannya. Pada tujuan khusus
yaitu mahasiswa mampu memahami urutan pembuatan preparat jaringan
kulit, mampu dan terampil mengoperasikan mikrotom, melakukan terampil
melakukan tahapan-tahapan dalam pembuatan preparat jaringan kulit,
terampil melakukan tahapan-tahapan dalam pewarnaan preparat jaringan,
mampu melihat, mempelajari dan mengetahui struktur jaringan kulit untuk
mengetahui karakteristik dari kulit yang satu dengan yang lainnya, mampu
dan terampil mengoprasikan mikroskop.

TINJAUAN PUSTAKA
Reptilia adalah hewan yang mempunyai kulit yang kering, ditutupi oleh
sisik, mempunyai dua pasang ekstermitas luar yang dilengkapi dengan jarijari dan berakhir dengan cakar. Reptilia tidak mempunyai banyak kelenjer
pada kulitnya, kelenjer pada reptilian terdapat pada rongga mulutnya.
Kelenjer parapin pada langit-langit mulut, lingual gland pada lidah, sub lingual
gland (kelenjer dibawah lidah) dan labial gland (pada bibir). Pada serpentes
terdapat modifikasi dari labial gland di rahang atas. Lidah pada serpentes
sempit dan bertakik dalam yang pada bagian ujungnya bertindak sebagai
organ sensori untuk merasakan bau, suhu dan partikel zat yang ada pada
udara (Tim Taksonomi Hewan Vertebrata, 2010).
Reptilia merupakan kelompok hewan darat pertama yang sepanjang
hidupnya bernafas dengan paru-paru. Ciri umum kelas ini yang membedakan
dengan kelas yang lain adalah seluruh tubuhnya tertutup oleh kulit kering atau
sisik. Kulit ini menutupi seluruh permukaan tubuhnya dan pada beberapa
anggota ordo atau sub ordo tertentu mengalami pergantian kulit . Pergantian
kulit secara total terjadi pada anggota sub-ordo ophidia dan pada anggota
sub-ordo lacertilia pergantian kulit terjadi secara sebagian. Sedangkan pada
ordo chelonia dan crocodilia sisiknya hampir tidak pernah mengalami
pergantian atau pengelupasan. Kulit pada reptil memiliki sedikit sekali kelenjar
kulit (Jasin, 1992).
Struktur Kulit
Kulit adalah organ tubuh yang terletak paling luar dan membatasinya dari
lingkungan hidup manusia. Kulit merupakan organ yang esensial dan vital
serta
merupakan cermin kesehatan dan kehidupan. Kulit juga sangat kompleks,
elastis dan peka (Wasitaatmadja, 2002). Secara garis besar kulit tersusun
atas 3 lapisan ( Junqueira, 2007): Lapisan Epidermis, Lapisan Dermis,
Lapisan Subcutis.
Ia juga menyatakan lapisan epidermis yaitu lapisan epitel yang berasal
dari ekstoderm. Berdasarkan ketebalan epidermis, dapat dibedakan kulit tebal
dan kulit tipis. Turunan epidermis meliputi rambut, kuku, kelenjar sebasea dan
kelenjar keringat. Lapisan epidermis terdiri dari stratum korneum, stratum
lusidum, stratum granulosum, stratum spinosum, stratum basale. Sedangkan
Lapisan dermis yaitu suatu lapisan jaringan ikat yang berasal dari mesoderm,
terletak di bawah lapisan epidermis dan jauh lebih tebal dari epidermis.
Lapisan ini terdiri dari lapisan elastik dan fibrosa padat dengan elemenelemen selular dan folikel rambut. Secara garis besar, lapisan dermis dibagi

menjadi dua bagian yaitu stratum papilare dan stratum retikulare. Pada
lapisan ini tedapat sel-sel saraf dan pembuluh darah. Lapisan ketiga adalah
Lapisan subkutis. Lapisan ini terdiri atas jaringan ikat longgar yang mengikat
kulit secara longgar pada organ-organ di bawahnya, yang memungkinkan
kulit di bagian atas bergeser. Lapisan ini mengandung sel-sel lemak. Gambar
1 menerangkan mengenai struktur kulit secara umum.

Gambar 1. Struktur Kulit

(http://dhearatnasari.blogspot.com/2013/06/integumen-kulit_2.html)

Struktur histologis pada epidermis dapat dibedakan 5 stratum, seperti

gambar 5 yang terdiri dari lima lapisan atau stratum, yaitu sratum korneum,
stratum lucidum, stratum granulosum, stratum spinosum, dan membrane
basal. Stratum korneum adalah lapisan yang terdiri atas sel pipih tidak berinti
serta dapat mengalami keratinaisasi sempurna. Lapisan ini juga bertugas
untuk mencegah penguapan air yang berlebihan maupun mencegah
masuknya senyawa asing dan mengikat berbagai senyawa yang kemudian
melepaskannya kembali secara lambat. Sedangkan, stratum lucidum adalah
lapisan yang terdiri atas sel-sel gepeng, dengan protoplasma tanpa protein.
Lapisan ini terlihat seperti garis jernih, dan biasanya terdapat pada kulit tebal
seperti kulit telapak kaki dan telapak tangan.
Sratum granulosum adalah lapisan yang hanya terdiri atas 2-5 lapis sel
poligonal gepeng dengan inti yang kecil di tengah dan sutoplasmanya terisi
oleh granula basofilik kasar atau granula keratohialin yang mengandung
protein kaya hisidin.keratohialin yang mengandung protein kaya akan histidin.
Dalam lapisan ini keratinosom dilepaskan didalam ruang intersel. Lapisan ini
juga mengandung ceramida dan komponen lipid epidermal. Sedangkan,
stratum spinosum adalah lapisan yang terdiri atas sel-sel poligonal yang yang
dihubungkan dengan desmosome. Pada lapisan ini terdapat berkas- berkas
filamen yang dinamakan tenofibril yang memegang peranan penting untuk
mempertahankan kohesi sel dan melindungi efek abrasi.Stratum basale yaitu
Stratum basale adalah lapisan yang terdiri dari selapis sel silindris pendek

dengan inti oval. Lapisan ini dapat mengalami aktivitas mitosis yang hebat
dan bertanggung jawab pembaharuan sel epidermis secara konstan. Selsel
lapisan ini berbatasan dengan jaringan pengikat corium dan berbentuk
silindris atau kuboid. Di dalam sitoplasmanya terdapat butir butir pigmen.
Seperti yang ditunjukkan pada gambar 2.

Gambar 2. Struktur Histologis Pada Epidermis

(http://histologidrgtadeus.blogspot.com/2009/01/10-kulit.html)
Sedangkan pada bagian Korium, Dermis atau korium merupakan lapisan
terpenting dalam kulit hewan yang akan diubah menjadi kulit samak. Dalam
korium terdapat tiga tipe tenunan pengikat, yaitu tenunan kolagen, elastin,
dan retikulin. Tenunan kolagen merupakan tenunan pokok dan kostituen
utama pembentuk kulit samak. Tenunan kolagen tersusun tidak beraturan,
berbentuk lurus atau agak bekelok (Judoamidjojo, 1981). Elastin adalah
protein pembentuk serat- serat elastik dalam tenunan dan terdapat pembuluh
darah.
Berdasarkan struktur jaringan penyusunnya, korium dibedakan dua
stratum yaitu stratum papilare dan stratum retikulare. Stratum papilare
merupakan lapisan teratas dermis yang mengandung folikel rambut, kelenjar
keringat, kelenjar minyak, dan otot polos penegak bulu rambut
(Judoamidjojo,1981). Stratum papilare akan membentuk jalinan dengan
epidermis pada kulit tidak berambut. Sedangkan, stratum
retikulare
merupakan lapisan yang sering disebut sebagai korium sesungguhnya atau
bagian kulit yang disamak atau kulit hasil samak (Purnomo, 1987). Lapisan
retikulare juga mempunyai berkas serabut kasar yang diameternya lebih
besar daripada serabut pada stratum papilare (Harjana, 2011). Didalam
stratum retikulare tidak terdapat kelenjar seperti pada stratum papilare.
Kulit Biawak
Kulit biawak air biasanya berwarana coklat gelap dengan bintik kuning
pada bagian perutnya, namun seiring bertambahnya umur, bintik-bintik

kuning tersebut akan semakin hilang. Kulit biawak lebih tipis dari pada kulit
konvensional (kulit sapi, domba, dan kambing) dan digolongkan menurut
ukuran panjang dan lebarnya. Kulit reptil seperti kulit biawak mempunyai
sisik yang mengkilap dan lengkap (belum ada yang terlepas), serta tingkat
cacat yang sedikit sekali. Beberapa biawak mempunyai kulit yang bercorak
belang- belang, bercak-bercak piramid, atau empat persegi panjang dengan
kombinasi warna indah cemerlang dan kadang berubah-ubah. Corak ini
merupakan keunggulan kulit biawak sehingga harga jual kulitnya tinggi
terutama barang jadinya (Purnomo, 1988).
Kulit reptil (ular dan biawak) terdiri dari epidermis yang berlapis-lapis dan
didasari dermis (Purnomo, 1998). Lapisan luar epidermis berkembang
menjadi lapisan- lapisan yang keras dan dibagian dalamnya berkembang
menjadi lebih lunak (Purnomo, 1985). Epidermis pada biawak mengalami
pertandukan, dan biasanya akan mengelupas pada waktu- waktu tertentu,
satu sampai enam kali setiap tahun (Purnomo, 1987). Lapisan germanif dari
epidermis menghasilkan sel yang tumbuh menuju kepermukaan dan
kemudian menanduk (cornifield) sehingga merupakan penutup luar atau
external layer.

Gambar 3. Penampang Melintang Kulit Reptil (Purnomo, 1987)

Ketebalan lapisan dermis pada hewan kecil seperti reptil berkisar antara
45- 50% dari seluruh tebal kulit (Fahidin dan Muslich, 1999). Lapisan dermis
reptil mengandung jaringan penghubung dan mengandung sel-sel pigmen,
pembuluh darah, dan darah (Purnomo, 1987). Komoditas kulit secara umum
digolongkan menjadi kulit mentah dan kulit samak (Purnomo, 1984). Kulit
mentah adalah bahan baku kulit yang berasal dari hewan besar (hide)
seperti sapi dan kerbau, serta berasal dari hewan kecil (skin) seperti domba,
kelinci, dan reptil. Sedangkan kulit samak adalah kulit hewan yang diolah
sedemikian rupa sehingga bersifat lebih permanen, tahan terhadap
dekomposisi bila basah dan bersifat lemas bila kering serta tahan terhadap
serangan mikroorganisme.

MATERI DAN METODE

Materi
Alat. Alat-alat yang digunakan untuk pembuatan preparat jarngan kulit
biawak finising diantaranya adalah gunting, botol plastik, pipet ukur, pipet
volum, propipet, gelas beker, dan labu ukur, sebagai alat yang dibutuhkan
untuk persiapan. Botol kocok, tabung erlenmeyer, oven/ inkubator, cutter,
botol kaca, pinset, dan cetakan parafin sebagai alat yang dibutuhkan untuk
fiksasi, dehidrasi, clearing, dan embeding. Blok mikrotom, mikrotom, objek
glass, deck glass , kuas, water bath, loyang , kaki tiga, dan busen, sebagai
alat yang dibutuhkan untuk pemotongan, pengambian sediaan, dan
pengeringan sediaan. Staining jar, botol semprot, pipet tetes, serber, dan
mikroskop, sebagai alat yang dibutuhkan untuk pewarnaan sampai selesai.
Bahan. Bahan utama yang digunan dalam praktek ini adalah kulit biawak
yang telah difinishing ukuran 3x3 cm. Sedangkan, bahan- bahan lainya
adalah tepol, formaldehid, alkohol (konsentrasi 70%, 90%, 96%, dan 100%),
touluen, parafin, ewitt, cat hemaktosilin haris dan eosin, acid alkohol, es
batu, xylol, aquades, dan DPX.
Metode
Pertama dengan cara pengambilan sampel dengan mengambil kulit
biawak yang sudah disiapkan, memotong kulit menjadi 6 bagian dengan
ukuran 1 cm x 1 cm, stelah itu kulit dimasukkan ke dalam larutan fiksasi, yaitu
larutan formaldehid 10%. Pembuatan preparat yaitu dehidrasi dengan
menyiapkan alcohol dengan konsentrasi bertingkat 30%, 50%, 70%, 80%,
90%, dan 96%. Memasukkan sampel ke dalam larutan alcohol mulai dari
konsentrasi rendah menuju konsentrasi tinggi. Masing-masing sampel
dikocok dalam alcohol selama 20 menit 3 kali pengocokan tiap tingkat
konsentrasi alcohol. Seperti ditunjukkan pada gambar 4 pada proses
dehidrasi.

Gambar 4. Proses Dehidrasi

Selanjutnya adalah clearing atau penjernihan. Langkah yang dilakukan
pada proses clearing adalah dengan memasukkan sampel kedalam larutan
Alkohol Absolute: Toluen ( 1:1 ) selama 25 menit. Kemudian, memasukkan
sampel kedalam toluen murni 1-2 jam dan mengamati sampel sampai
benar-benar transparan. Apabila telah transparan, memasukkan sampel
kedalam Parafin toluen selama satu malam. Seperti pada gambar 5 proses
Clearing.

Gambar 5. Proses Clearing

Setelah clearing dilanjutkan proses embedding atau penanaman. Sebelum
masuk pada tahap ini langkah yang harus dilakukan adalah menyiapkan
empat tempat untuk parafin cair. Memasukkan sampel kedalam paraffin cair
secara berurutan masing-masing 10 menit. Menanam sampel dalam cetakan
paraffin untuk potongan melintang dan membujur. Selanjutnya, mengambil
paraffin yang berisi sampel dari cetakan jika sudah kering. Seperti pada

gambar 6 dan gambar 7.

Gambar 6. Proses Embedding

Gambar 7. Proses Pencetakan Paraffin

Gambar 8. Proses Trimming

Triming yaitu mengambil parafin dari cetakan sampel dibentuk
trapesium.Kemudian, sampel dipasang pada mikrotom. Lalu, sampel
dipotong dengan ketebalan 6-8 . Kemudian, apabila sampel agak keriting
paraffin diusap dengan es batu yang dilapisi kain. Lalu, hasil potongan
diambil dengan kuas. Seperti pada gambar 8.

10

Kemudian, sampel dimasukkan dalam waterbath 40 C. Lalu, potongan

sampel ditempelkan pada objek glass yang telah diberi larutan ewitt. Sampel
dikeringkan dalam nampan aluminium yang telah dipanaskan dengan api
bunsen. Seperti pada gambar 9 dan 10.
Setelah triming kemudian dilanjutkan dengan proses deparafinisasi yaitu
pelunturan paraffin, seperti pada gambar 11. Cara melakukan deparafinisasi
yaitu dengan merendam sampel kedalam larutan Xylol 1 selama 5 menit,
setelah itu rendam dalam larutan Xylol 2 selama 5 menit. Jika sudah 5 menit
ambil sampel lalu memasukkan sampel kedalam Alkohol Absolute selama 5
menit, kemudian memasukkan kedalam Alkohol 96% selama 5 menit, lalu
memasukkan alkohol ke dalam Alkohol 90% selama 5 menit, lalu
memasukkan sampel ke dalam Alkohol 80% selama 5 menit, kemudian
memasukkan sampel ke dalam Alkohol 70% selama 5 menit, lalu mencuci
dengan air mengalir selama 5 menit, kemudian memasukkan sampel dalam
aquadest, dan terakhir, mengeringkan sampel dengan mengelap sekitar
sampel tanpa merusak sampel. Ini adalah proses rehidrasi yang tujuannya
adalah mengembalikan molekul air pada jaringan kulit.seperti pada gambar
12. Pada proses terakhir yaitu pewarnaan.
Pewarnaan sediaan organ, diwarnai dengan menggunakan pewarna
Hematoxilin Eosin. Caranya adalah dengan memasukkan sampel dalam
Hemaktosilin Haris selama 7 menit. Kemudian, mencuci dengan aquades 3x.
Lalu, memasukkan dalam acid alkohol selama 7 menit. Kemudian, mencuci
sampel dengan air mengalir selama 10 menit. Lalu, mencuci dengan aquades
sebanyak 3x. Kemudian, memasukkan sampel kedalam Alkohol 70%, Alkohol
80%, Alkohol 90%, Alkohol 96%, dan Alkohol Absolute. Kemudian, menunggu
sampel hingga agak kering. Lalu, memasukkan sampel ke dalam Xylol 1
selama 5 menit, lalu memasukkan sampel kedalam Xylol 2 selama 5 menit,
lalu menutup sampel dengan DPX, seperti pada gambar 14. Kemudian
mengamati sampel dengan menggunakan mikroskop dengan perbesaran
lemah, sedang dan kuat yang ditunjukkan pada gambar 15.

11

Gambar 9. Mikrotom

Gambar 10 . Proses Peletakkan Preparat Pada Objek Glass

12

Gambar 11. Proses Deparafinisasi

Gambar 12. Proses Rehidrasi

Gambar 13. Proses Pewarnaan.

13

Gambar 14. Proses Pengeringan Setelah Pewarnaan.

Gambar 15. Mikroskop

14

HASIL DAN PEMBAHASAN

Dari hasil praktikum preparat yang dihasilkan dapat diamati
menggunakan mikroskop. Pada pengamatan digunakan perbesaran sedang
4x10 dan 10x10 sedangkan pada perbesaran kuat 40x10. Berdasarkan hasil
pengamatan menggunakan mikroskop, seperti pada gambar dibawah ini :

Perbesaran 10x10

Perbesaran 10x10

Perbesaran 40x10
Gambar 16.Preparat Kulit Biawak Re-tanning Posisi Membujur

15

Pada gambar terlihat struktur histologis kulit biawak re-tanning

menggunakan pewarnaan HE dengan irisan membujur terdiri atas berkas
sisik atau epidermis dan stratum papilare. Hasil tersebut sesuai dengan
tinjauan pustaka yang menyebutkan bahwa epidermis pada biawak
mengalami pertandukan (Purnomo, 1987). Pertandukan yang dimaksud
adalah struktur sisik atau epidermis yang berbentuk seperti tanduk dan bisa
mengalami keratinisasi. Epidermis tersebut merupakan epidermis bagian
dalam yang berkembang lunak bukan epidermis luar yang keras yang
merupakan sisik yang telah dihilangkan oleh proses penyamakan (Purnomo,
1985).Epidermis bagian dalam atau bagian bawah tidak hilang pada proses
beam house karenastratum papilare pada kulit tidak berambut membentuk
jalinan dengan epidermis (Anonim, 2014). Namun juga terdapat stratum
papilare dikarenakan peletakan kulit yang melengkung, jadi pada saat
pemotongan, stratum papilarenya ikut kepotong.

Perbesaran 4x10

Perbesaran 10X10

Perbesaran 40x10
Gambar 17. Preparat Kulit Biawak Re-Tanning Posisi Melintang
Sementara pada struktur histologis kulit

biawak re-tanning irisan

16

melintang terdiri atas epidermis, stratum papilare dan stratum retikulare.

Hasil tersebut sesuai dengan tinjauan pustaka yang menyebutkan yaitu
secara garis besar kulit tersusun atas 3 lapisan (Junqueira, 2007): lapisan
epidermis, lapisan dermis, lapisan subcutis.Namun pada preparat kulit
biawak re-tanning dari hasil pengamatan tidak terdapat subcutis.

17

KESIMPULAN
Dari hasil praktikum maka dapat disimpulkan bahwa cara pembuatan
preparat jaringan kulit biawak re-tanning engan metode parafin terdiri atas
fiksasi, dehidrasi, clearing, triming, embedding, cutting, dan pewarnaan.
Dapat disimpulkan juga bahwa struktur histologis kulit biawak re-tanning
irisan membujur terdiri atas berkas sisik atau epidermis dan stratum pailare.
Sementara pada struktur histologis kulit biawak re-tanning irisan melintang
terdiri atas epidermis, stratum papilare dan stratum retikulare.

18

DAFTAR PUSTAKA
Djojowidagdo, S. 1983. Pengaruh Berbagai Konsentrasi dan Perbandingan
Pankreas Babi yang Diawet Serbuk Gergaji terhadap Kekuatan Tarik dan
Kemuluran Kulit Kambing yang Disamak Crome. Laporan Penelitian.
Fakultas Peternakan UGM. Yogyakarta.
Fahidin dan Muslich. 1999. Ilmu dan Teknologi Kulit. IPB. Bogor.

Harjana, T. 2011. Buku Ajar Histologi. Universitas Negeri Yogyakarta.

Yogyakarta.
Judoamidjojo, R. M. 1974. Dasar Teknologi dan Kimia Kulit. IPB. Bogor.
Judoamidjojo, R. M. 1981. Defek- Defek Pada Kulit Mentah dan Kulit Samak.
Bhatara Aksara. Jakarta.
Judoamidjojo, R. M. 1984. Penyamakan Kulit untuk Pedesaan. Angkasa.
Bandung.
Mustika, D. 2001. Kualitas Kimia dan Organoleptik Kulit Biawak Jadi Asal
Awet Kering dengan Berbagai Jenis dan Konsentrasi Bahan Bating.
Skripsi. Jurusan Ilmu Produksi Ternak, Fakultas Peternakan, Institut
Pertanian Bogor. Bogor.
Purnomo, E. 1985. Pengetahuan Dasar Teknologi Penyamakan Kulit.
Akademi Teknologi Kulit . Yogyakarta.
Purnomo, E. 1987. Transformasi Kulit Reptil dari Kulit Mentah Menjadi Kulit
Tersamak. Akademi Teknologi Kulit. Yogyakarta.
Said, M. I.2012.Ilmu dan
Hasanuddin. Makasar.

Teknologi

Pengolahan

Kulit.

Universitas

Said, M. I. 2013. Profil Histologis Serabut Kolagen Pada Kulit Kambing

Bligon yang Direndam Dalam Larutan Asam dan Basa Lemah Pada
Konsentrasi Berbeda. Jurnal. Universitas Hasanuddin. Makasar.
Fahidin dan Muslic. 1999. Ilmu dan Teknologi Kulit. IPB. Bogor.

19

Harjana, T. 2011. Buku Ajar Histologi. Universitas Negeri Yogyakarta.

Yogyakarta.
Judoamidjojo, R. M. 1974. Dasar Teknologi dan Kimia Kulit. IPB. Bogor.
Purnomo, E. 1985. Pengetahuan Dasar Teknologi Penyamakan Kulit.
Akademi Teknologi Kulit . Yogyakarta.
Purnomo, E. 1987. Transformasi Kulit Reptil dari Kulit Mentah Menjadi Kulit
Tersamak. Akademi Teknologi Kulit. Yogyakarta.
Tim Taksonomi Hewan Vertebrata.2010. Taksonomi Hewan Vertebrata.
Universitas Andalas: Padang. Tersedia di:
http://ochenzoologivertebrata.blogspot.com/2011/12/laporan-praktikumreptilia.html Diakses pada tanggal 14 Juli 2014.

20