REVIEW JURNAL STERILISASI PENYARINGAN

Disusun untuk memenuhi salah satu tugas mata kuliah Teknologi sediaan
steril

Sterilisation of aseptic drug by sterile filtration:

Microbiology validation by microbiology challenge test
Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 2014,
6(12):760-770

Disusun Oleh :
Hasib Siddiq
(311131)
Laila Awaliyah Darajatun(31113)
Ria Heryani
(31113)
Winda Resti Noor
(31113154)
PRODI S1 FARMASI
SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN BAKTI TUNAS HUSADA
TASIKMALAYA
2016

A. Pengertian Sterilisasi.
Steralisasi adalah suatu cara untuk membebaskan suatu benda dari semua, baik
bentuk vegetatif maupun bentuk spora. Proses sterilisasi dipergunakan pada bidang
mikrobiologi untuk mencegah pencernaan organisme luar, pada bidang bedah untuk
mempertahankan keadaan aseptis, pada pembuatan makanan dan obat-obatan untuk
menjamin keamanan terhadap pencemaran oleh mikroorganisme dan di dalam bidangbidang lain pun sterilisasi ini juga penting. Steralisasi juga dikatakan sebagai tindakan
untuk membunuh kuman patogen atau kuman apatogen beserta spora yang terdapat pada
alat perawatan atau kedokteran dengan cara merebus, stoom, menggunakan panas tinggi,
atau bahkan kimia. Jenis sterilisasi antara lain sterilisasi cepat, sterilisasi panas kering,
steralisasi gas (Formalin H2, O2), dan radiasi ionnisasi. Hal-hal yang perlu diperhatikan
dalam steralisasi di antaranya:
a. Sterilisator (alat untuk mensteril) harus siap pakai, bersih, dan masih berfungsi.
b. Peralatan yang akan di sterilisasi harus dibungkus dan diberi label yang jelas
dengan menyebutkan jenis peralatan, jumlah dan tanggal pelaksanaan sterilisasi.
c. Penataan alat harus berprinsip bahwa semua bagian dapat steril.
d. Tidak boleh menambah peralatan dalam sterilisator sebelum waktu mensteril
selesai.
e. Memindahklan alat steril ke dalam tempatnya dengan korentang steril.
f. Saat mendinginkan alat steril tidak boleh membuka pembungkusnya, bila terbuka
harus dilakukan sterilisasi ulang.
Macam-macam teknik sterilisasi antara lain:
Teknik filtrasi.

Sterilisasi dengan teknik filtrasi digunakan dengan menggunakan suatu

penyaring dengan ukuran pori-pori 0,22-0,45 mikron yang ditekan dengan gaya
sentrifugasi atau pompa vakum, sehingga mikroba tertahan pada penyaring
tersebut.
Teknik pemanasan
Pemijaran, yaitu dengan cara membakar alat pada api langsung, contoh: jarum
inokulum, pinset, batang L.
Panas kering, yaitu dengan pemanasan melalui suhu lebih dari 180OC dengan
menggunakan oven selama 1 jam. Teknik ini cocok digunakan untuk alat yang
terbuat dari kaca seperti tabung erlenmeyer, tabung reaksi.
Uap air panas, yaitu dengan menggunakan uap dari air panas. Tepat digunakan
untuk bahan yang mempunyai kandungan air, sehingga tidak terjadi dehidrasi.
Uap panas bertekanan, menggunakan autoklaf dengan tekanan 15 psi dan suhu
120OC.

B. Perkembangan Sterilisasi
Teknik sterilisasi filter digunakan pertama kali pada tahun 1890 oleh Charles
Chamberland ketika penelitian tentang virus mulai berkembang. Filter digunakan sebagai
untuk menahan mikroorganisme yang pada udara dan memisahkan virus dari
mikroorganisme lain.
C. Pengertian Sterilisasi Penyaringan
SOLID LIQUID FILTRASI
Prinsip umum
Pemisahan zat tidak terlarut dari suspensi cair-padat dapat dipisahkan dari komponen cair
dengan cara menggunakan aliran menuju membrane berporos (filter) yang dapat menahan
komponen padat. Sedangkan komponen cairan dapat langsung melewati filter. Terdapat 4
cara pada proses ini, yaitu filtrasi gravitasi, filtrasi tekanan, filtrasi vakum, dan
sentrifugasi. Setelah itu didapatkan cake (pelet) dan dimurnikan dengan pemberian zat
pelarut kembali. Kemudian didapatkan pelet yang bersih dari filtrate dan dikeringkan.
Pada proses filtrasi ini, ketebalan dari filtrate berbanding lurus dengan waktu tetapi
berbanding terbalik dengan tekanan. -pc = ()

Dimana, = viskositas filtrate ; w= massa padatan yang disimpan per satuan volum
filtrate ; V= volum filtrate dalam waktu t ; A= Luas filter

Jika terjadi penyumbatan pelet maka dimungkinkan untuk menghitung nilai. Dalam pelet
tersebut, nilai meningkat seiring meningkatnya tekanan dan kedalaman pelet di media
filtrasi.
= 0 (-pc)s
dimana 0 dan s merupakan konstanta empiris ; s merupakan koefisien kompresibilitas
Siklus filtrasi dilakukan dengan mempertahankan penurunan tekanan total pelet dan
media. Hal ini disebut filtrasi tekanan konstan. Sedangkan jika pelet terbentuk selama
filtrasi, laju aliran filtrate berkurang atau laju aliran dipertahankan kemudian tekanan
meningkat, maka hal ini disebut filtrasi dengan laju konstan
Faktor yang mempengaruhi sterilisasi dengan penyaringan :
Ukuran pori
Tekanan
Sudut kontak antara membran dan cairan
Saluran partikel mikroba
Parameter Sterilisasi filtrasi
Tekanan, laju aliran, dan karakteristik dari penyaring adalah parameter yang harus
dikontrol untuk mencapai sterilisasi pada produk yang dapat diprediksi dan
reproduksibel.
Ukuran pori penyaring 0,2 m atau kurang dari 0,2 m .
Keuntungan sterilisasi Filtrasi

 Proses Cepat
Dapat digunakan untuk menyaring substansi yang peka terhadap suhu
Dapat untuk larutan air atau minyak, pelarut organik, cairan kental, udara dan gas

Kerugian Sterilisasi Filtrasi

Dapat meloloskan virus dan beberapa mycoplasma
Dapat mengabsorbsi filtrat dalam jumlah tertentu
Dapat menyebabkan ion logam masuk kedalam filtrat
Membran filtrat dapat tersumbat, dan mungkin terjadi kebocoran
D. Macam Sterilisasi Penyaringan
a. Filter Membran (Screen atau Ayakan)
Filtrasi membran adalah suatu teknik pemisahan campuran 2 atau lebih komponen
tanpa menggunakan panas dan juga telah menjadi alat dasar dalam pembuatan larutanlarutan steril, dan penggunanya telah dikuatkan secara resmi oleh United State
Pharmacopoeia (USP) dan The US Food and Drug Administration (FDA). Membran
dengan porositas berkisar dari 0,2 atau 0,45 mikron biasanya dispesifikasikan untuk
penyaringan-penyaringan steril. Komponen-komponen akan terpisah berdasarkan ukuran
dan bentuknya, dengan bantuan tekanan dan selaput semi-permeable. Hasil pemisahan
berupa retentate (bagian

dari

campuran

yang

tidak

melewati

membran)

dan permeate (bagian dari campuran yang melewati membran). Dalam kisaran porositas
ini, penyaring membran mungkin tersumbat dengan cepat, sehingga digunakan prafilter
untuk

menghilangkan

beberapa

benda

koloid

untuk

menyempurnakan

siklus

penyaringan. Formulasi sederhana seperti larutan-larutan intravenous, obat mata dan

produk dalam air lainnya dapat disaring langsung melalui membran dalam cara yang
ekonomis

Penyaring membran terutama berfungsi dengan mengayak atau dengan menyaring

partikel dari larutan atau gas, Jadi menahannya diatas permukaan penyaring. Karena sifat
penyaring membran dan ketebalannya yang terbatas, media penyaring mempunyai
kemampuan menangkap hanya sedikit; hal ini merupakan suatu mekanisme yang dapat
diterapkan pada fungsi penyaring yang mempunyai kedalaman seperti yang terbuat dari
gelas dan kertas. Dalam beberapa hal, penyaring membran juga berfungsi dengan gaya
tarik elektrostatis. Hal ini khususnya cocok untuk penyaringan gas kering, di mana
muatan elektrostatis cenderung meningkat karena efek gesekan gas yang mengalir.
Salah satu penggunaan penyaringan membran yaitu pada uji sterilisasi sebagai berikut:
1. cairan dan serbuk yang dapat larut yang bersifat bakteriostatik atau fungistatik,
untuk memisahkan mikroba kontaminan dari penghambat pertumbuhan.
2. untuk bahan seperti minyak, salep, atau krem yang dapat melarut kedalam larutan
pengencer bukan bakteriostatik atau bukan fungistatik
3. untuk uji sterilitas permukaan atau lumen kritis alat-alat kesehatan.
Filtrasi dengan membran dapat memisahkan makromolekul dan koloid dari larutannya.
Serat membran mempunyai diameter pori yang berbeda. Berdasarkan ukuran pori,
membran filtrasi dibagi menjadi membran mikrofiltrasi (MF), yang mempunyai diameter
pori 0,1 m, membran ultrafiltrasi (UF) dengan pori 0,001m, dan reverse osmosis (RO)
dengan pori 0,0001 m.

Gambar ukuran pori membrane 0,0001 m.

Penyaring untuk tujuan sterilisasi umumnya dilaksanakan menggunakan rakitan

yang memiliki membran dengan porositas nominal 0,2 m atau kurang, berdasarkan pada
pembanding yang telah divalidasi tidak kurang 107 suspensi Pseudomonas diminuta
(ATCC 19146) tiap cm2 dari luas permukaan penyaring. Media membran penyaring yang
tersedia saat ini yaitu selulosa asetat, selulosa nitrat, fluorokarbonat, polimer akrilik,
polikarbonat, poliester, poli vinil klorida, vinil, nilon, politef dan juga membran logam,
dan ini dapat diperkuat atau ditunjang oleh bahan berserat internal. Rakitan penyaring
membran harus diuji untuk integritas awal sebelum digunakan, dengan ketentuan bahwa
uji tersebut tidak menggunakan validitas sistem uji, dan harus diuji sesudah proses
penyaringan selesai, untuk menunjukkan bahwa rakitan penyaring mempertahankan
integritas sepanjang prosedur penyaringan berlangsung. Uji penggunaan khusus adalah uji
titik gelembung, uji aliran udara difusif, uji penahan tekanan, dan uji aliran ke depan.
Semua uji harus dikaitkan dengan retensi mikroba.
b. Cara Kerja Filter Membran.
Cara kerja membrane filter yaitu :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Sterilisasi dasar corong dan corong menggunakan bunsen.

Mengeluarkan kertas membrane dari pembungkus.
Meletakkan kertas membrane pada dasar corong.
Merakit peralatan dengan memasang corong pada dasar corong.
Membuka
Menuang sampel dan menyalakan pompa vakum
Melepaskan corong.
Mengangkat kertas membrane ke dalam cawan.
Menginkubasi cawan pada suhu dan waktu yang tepat.

Prosedur uji sterilitas menggunakan penyaringan membran. Jika tekhnik penyaringan

membran digunakan untuk bahan cair yang dapat diuji dengan cara inokulasi langsung ke
dalam media uji, uji tidak kurang dari volum dan jumlah seperti yang tertera pada
Pemilihan spesimen uji dan masa inkubasi. Peralatan Unit penyaring membran yang
sesuai terdiri dari satu perangkat yang dapat memudahkan penanganan bahan uji secara
aseptik dan membran yang telah diproses dapat dipindahkan secara aseptic untuk
inokulasi ke dalam media yang sesuai atau satu perangkat yang dapat ditambahkan media
steril ke dalam penyaringnya dan membran di inkubasi in situ. Membran yang sesuai

umumnya mempunyai porositas 0,45 m, dengan diameter lebih kurang 47 mm, dan
kecepatan penyaringan air 55 ml sampai 75 ml per menit pada tekanan 70 cmHg. Unit
keseluruhan dapat dirakit dan disterilkan bersama dengan membran sebelum digunakan,
atau membran dapat disterilkan secara terpisah dengan cara apa saja yang dapat
mempertahankan karakteristik penyaring dan menjamin sterilitas penyaring dan
perangkatnya. Jika bahan uji berupa minyak, membran dapat disterilkan terpisah, dan
setelah melalui pengeringan, unit dirakit secara aseptik.
setelah melalui pengeringan, unit dirakit secara aseptik.

Gambar alat filtrasi membrane untuk uji sterilitas

Prinsip tekhnik filtrasi membran ini adalah dengan menyaring cairan sampel melewati
saringan yang sangat tipis dan yang terbuat dari bahan sejenis selulosa. Membran ini
memiliki pori-pori berukuran mikroskopis dengan diameter lebih kecil daripada ukuran
sel mikroba pada umumnya. Jadi selama proses penyaringan berlangsung, sel-sel yang
terdapat pada sempel akan terjebak dari peralatan filtrasi kedalam cawan petri berisi
media. Kertas membran ini bersifat solid sehingga dapat menahan sel yang terjebak tetap
pada posisinya dan kemudian dapat berkembang tanpa bercampur dengan sel lain yang
ikut terjebak juga. Nutrisi yang terdapat pada media akan berdifusi dan terserap kedalam
kertas membrane sehingga sel-sel yang tersebar acak dan kasat mata itu dapat tumbuh
menjadi koloni yang dapat dihitung dengan mata telanjang setelah melewati masa waktu
inkubasi tertentu. Bentuk, warna dan sifat lain dari masing-masing koloni tergantung
kepada jenis mikroba yang berada pada kertas membran.
c. Keuntungan dan kerugian Filter Membran (Screen atau Ayakan).......
Keuntungan sterilisasi filtrasi (dengan membran filter) :

1. Dapat mensterilkan bahan-bahan (ex. Obat-obat, cerra, vitamin, media, nutrient

khusus, dll) yang tidak tahan dengan pemanasan.
2. Membran filter relatif tidak mahal
3. Dapat menyaring dalam volume besar
4. Membran filter dapat diautoklaf atau dibeli dalam kondisi steril.
5. Dapat menganalisa sampel dengan volume yang besar dalam waktu yang singkat
yang dibatasi oleh kekentalan dan kekeruhan cairan sampel.
6. Dapat menganalisa sampel dengan jumlah mikroba yang sedikit (peningkatan
keakuratan pendeteksian mikroba).
7. Inhibitor pada sampel yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba seperti
antibiotik, klorin atau zat pengawet dapat terbilas.
8. Pada umumnya cawan yang digunakan berukuran kecil (50mm) sehingga dapat
menghemat penggunaan media dan tempat pada inkubator.
9. Praktis dalam preparasinya, dapat dilakukan berulang kali penyaringan
(melipatgandakan cabang corong) dan reprodusibel.
10. Sangat cocok untuk mikroba aerob (jika dibandingkan dengan pour plate) yang
sebagian besar menjadi faktor pengontaminasi yang penting pada produk industri.
11. Melalui proses pengeringan tertentu, kertas membran yang telah ditumbuhi koloni
dapat dijadikan dokumen atau data permanen demi kepentingan perekaman data.
Kerugian sterilisasi filtrasi (dengan membran filter) :
1. Dapat meloloskan virus dan beberapa mycoplasma.
2. Dapat mengabsorbsi filtrat dalam jumlah tertentu.
3. Dapat menyebabkan ion logam masuk ke dalam filtrat.
4. SAL kurang dari sterilisasi panas basah dan panas kering.

5. Membran filter dapat tersumbat, dan mungkin terjadi kebocoran.

6. Kurang cocok untuk menghitung sampel dengan jumlah mikroba yang terlalu
pekat walaupun pengenceran dapat dilakukan dengan pengenceran bertingkat.
Sulit untuk menghitung mikroba pada sampel yang berampas atau memiliki
banyak partikel (kekeruhan tinggi) karena partikel tersebut akan menyumbat poripori kertas membran.
7. Sulit untuk menghitung mikroba pada sampel dengan kekentalan yang tinggi
karena membutuhkan waktu penyaringan yang lama.
d. Aplikasi filtrasi membran filter dalam dunia farmasi yaitu:
a. Teknik filtrasi membran untuk menghitung mikroba.
e.

Filter Kedalaman (Depth Filtration)

Depht filter adalah filter berbagai filter yang menggunakan porous media

filtrasi untuk mempertahankan partikel di seluruh media, bukan yang hanya di permukaan
medium. Filter ini biasanya digunakan ketika cairan yang akan disaring mengandung
beban tinggi partikel karena, relatif terhadap jenis lain filter, mereka dapat
mempertahankan massa besar partikel sebelum menjadi tersumbat. Untuk menyaring
sejumlah besar cairan maka penggunaan penyaring abses selulosa (penyaring dalam )
adalah sangat tepat. Lapisan tersebut terdiri dari suatu jaringan rapat serabut selulosa dan
serabut abses dengan ketebalan kira kira 4 mm. Partikel dengan garis tengah yang besar
dihilangkan dari larutan melalui kerja ayakan. Sedangkan partikel dengan dimensi lebih
kecil melalui adsorpsi.
f. Mekanisme Kerja Filter Kedalaman (Depth Filtration)

Mikroorganisme yang besar seperti ragi,jamur lain dan bentuk sporanya serta
bakteri berukuran besar dapat terjaring. Jenis FKS memiliki kemampuan menjerat yang
jauh lebih kuat terhadap pengotoran bakterial. Jenis ini akan menjerat seluruh kuman
patogen dan sporanya serta pirogen material penyaring filtrasi. Garis tengah porinya
sesuai dengan lapisan penyaring SEITZ.
g. Keuntungan dan kerugian Filter Kedalaman (Depth Filtration)
Keuntungan depth filter yaitu :

a.
b.
c.
d.

Sebagai penyaring di laboratorium ( penyaring satu lapis ).

Sebagai penyaring berlapis banyak yang menyatu dalam alat penyaring lempeng.
Sebagai penyaring yang dilakukan dengan diberikan tekanan atau hampa udara.
Lapisan yang bertanda EK pada umumnya di gunakan dalam penyaring bebas bakteri.

Kerugian depth filter yaitu :

a. Adanya pelepasan serabut asbes dari penyaring dan masuk kedalam filtrat akibatnya
akan timbul permasalahan toksikologis yang baru dikenali dkemudian hari, bahwa
serabut asbes dapat menimbulkan kanker melalui kerja rangsang.
2.5.4 Aplikasi Depth Filter dalam dunia farmasi :
a. Biasanya digunakan dalam industri untuk menyaring mikroorganisme yang besar
sepaerti ragi, jamur dan bentuk sporanya, serta bakteri berukuran besar.

DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Departemen kesehatan. Jakarta
Dhadhang, W. K, Teuku N. S. S. 2012. Telnologi Sediaan Farmasi. Laboratotium
Farmasetika Unsoed: Purwokerto.
Lachman, Leon., 1989, Teori dan Praktek Farmasi Industri, UI Press, Jakarta
Zulfikar, 2011, Filtrasi, www.chem-is-try, Diakses tanggal 12 Desember 2015.
https://tsffarmasiunsoed2012.wordpress.com/2012/05/23/uji-sterilitas-dengan-tekhnikpenyaringan-membran/ Diakses tanggal 12 Desember 2015.
http://poethree-sweetgirl.blogspot.co.id/2011/04/screen-filter.html Diakses tanggal 12
Desember 2015.