V.

Alat dan Bahan

5.1 Alat

1. Beaker Glass
2. Labu ukur
3. Microplate
4. Micropipette
5. Penangas air
6. Pipet tetes
7. Spatel
8. Spektrofotometri UV-Vir

5.2 Bahan

1. Amilum
2. Aquades
3. HCl
4. Iodium
5. KI

VI. Prosedur

Pembuatan amilum 0,5%

100 mg amilum dilarutkan dalam 20 mL aquadest, lalu dipanaskan hingga

larut sempurna, lalu dinginkan dan genapkan larutan hingga 20 mL dengan
aquades (konsentrasi 5000 ppm).

Pembuatan Iodium 0,015%

dilarutkan 300 mg KI dalam 10 mL aquadest, lalu ditambahkan 30 mg I 2 dan

aquadest hingga 20 mL. Ambil 2 mL larutan dan diencerkan dengan
aquadest dalam labu ukur 20 mL.
Prosedur pembuatan

Kurva standar amilum dibuat dengan konsentrasi 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; dan 0,5 mL
amilum 5000 ppm ditambah dengan air hingga 3 mL. kemudian ditambahkan
0,5 mL asam klorida, 4 mL aquadest, dan 0,5 mL iodium. Ukur absorbansi pada
627 nm. Selanjutnya 0,025 mL sampel ditambahkan 3 mL larutan amilum dan di
 inkubasi selama 7 menit lalu ditambahkan 0,5 mL asam klorida, 4 mL aquadest,
dan 0,5 mL iodium kemudian ukur absorbansi pada 627 nm. Aktivitas amilase
dihitung berdasarkan penurunan kadar amilum

Abaku Asampel
Unit/mL = Abaku x

( mg ) starch terpakai
( ml ) enzim dalam campuran x volume total x t

U
Aktivitas Spesifik (U /mg) ( ) 1/C
mL