sumber:www.oseanografi.lipi.go.

id

Oseana, Volume XXXII, Nomor 4, Tahun 2007 : 1 - 11 ISSN 0216-1877

MANIPULASI POLIPLOIDI UNTUK MEMPEROLEH

JENIS BARU YANG UNGGUL
Oleh

Achmad Kadi1)
ABSTRACT

POLYPLOIDY MANIPULATION TO GET A NEW FAVOURABLE SPECIES.

Polyploidy manipulation is a method to manipulate chromosomes of either diploid or
haploid organisms in order to get a new favourable species. Polyploidy occurs in
spontaneous somatic chromosome duplication or as a result of non-disjunction of the
homologous chromosomes during meiosis of the diploid gametes. Polyploidy
organisms contain multiple or combination of the chromosome sets. If the
chromosomes of one genome are simply duplicated, the polyploidy will be referred as
autopolyploid. Polyploid which occurs as a duplication of two different species
(genome) is referred as an allopolyploid.

PENDAHULUAN lebih tinggi. Poliploid ini dapat tumbuh lebih

Manipulasi poliploidi dilakukan untuk
mendapatkan jenis yang mempunyai lebih dari
2 set kromosom (2n), berdasarkan
pertimbangan pemuliaan terhadap flora dan
fauna untuk memperbaiki mutu yang lebih
baik dari jenis atau organisme sebelumnya.
Individu normal di alam pada umumnya
memiliki 2 set kromosom yang biasa disebut
diploid (2n) . Individu diploid yang
menghasilkan mutan gamet haploid (n),
biasanya berumur pendek. Apabila telur dari
organisme diploid dirangsang untuk menjalani
embriogenesis tanpa fertilisasi oleh sperma,
lebih dahulu akan menghasilkan individu
haploid yang menyimpang (ADISOEMARTO,
1988). Manipulasi poliploidi menghasilkan
individu triploid, tetraploid dan ploid yang
pesat dibandingkan individu diploid dan
haploid. Individu triploid memiliki sifat steril
dan individu tetraploid bersifat fertil
(SISTINA, 2000).
Poliploidi terbentuk dalam dua
kelompok, yaitu : Kelompok pertama
autopoliploidi yaitu penggandaan ploidi
melalui penggabungan genom-genom yang
sama. Ploid yang dihasilkan dari proses ini
adalah aneuploid (kromosom abnormal) yakni
dalam bentuk triploid, tetraploid dan
pentaploid. Kelompok kedua alopoliploidi
adalah penggandaan kromosom yang terjadi
melalui pengga-bungan genom-genom yang
berbeda. Manipulasi ini banyak dilakukan pada
tanaman, dari dua jenis tanaman berbeda
digabungkan, keduanya menghasilkan
organisme alopoliploid dengan jumlah
kromosom 2 x + 2 y (JUSUP, 1988).

1) Bidang Sumberdaya Laut, Pusat Penelitian Oseanografi-LIPI, Jakarta

Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007


Tujuan manipulasi poliploidi adalah
pemuliaan pada flora maupun fauna. Individu
poliploidi secara fenotif, berbeda dengan
diploid maupun haploid. Sel darah merah
triploid dan tetraploid lebih besar
dibandingkan sel darah diploid dan haploid.
Kelebihan individu poliploid adalah tumbuh
lebih cepat dan mudah beradaptasi dengan
lingkungan, dibandingkan dengan individu
diploid dan haploid. Individu triploid dan
tetraploid dapat berperan mengontrol
pertumbuhan organisme lain di lingkungan
habitat yang sama (SISTINA, 2000).
ASAL-USUL JENIS POLIPLOIDI
Organisme poliploid awalnya diperoleh
akibat terjadinya polusi perairan yang
mengandung berbagai bahan kimia dan radiasi
sinar ultraviolet atau akibat pengaruh hormon
berlebihan (ROTTMAN et al., 1999). Bahan
kimia, penyinaran dan efek kerja hormon ini
berpengaruh terhadap organisme yang sedang
mengalami reproduksi pada fase pembelahan
kromosom garnet oosit I dan oosit II, tepat
pada saat terjadi fertilisasi oleh spermatozoa.
Pada pembelahan kromosom, idealnya benang
gelondong kromosom pada fase meiosis
mendistribusikan kromosom pada sel-sel
anakan tanpa kesalahan, tetapi ada kalanya
terjadi kecelakaan yang disebut nondisjungsi
(Gambar 1). Nondisjungsi adalah kondisi
dimana bagian-bagian dari pasangan
kromosom yang homolog tidak bergerak
memisahkan diri sebagaimana mestinya pada
waktu fase pembelahan meiosis I, atau dimana
kromatid saudaranya gagal berpisah selama
fase meiosis II.
Organisme poliploid dapat pula
diperoleh dari hasil rekayasa manusia dengan
memberi perlakuan kejut suhu, pemberian
bahan kimia atau tekanan pada fase oosit II
setelah mengalami pembuahan. Pemberian
Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007
sumber:www.oseanografi.lipi.go.id
perlakuan ini, akan menyebabkan aktifhya
oosit (totipotensi) dalam proses duplikasi
kromosom. Beberapa metoda manipulasi
kromosom dengan berbagai perlakuan, seperti
kejutan (shocking) dengan suhu panas, dingin,
pemberian tekanan (hydrostatic pressure) atau
menggunakan bahan kimiawi. Bahan kimia
yang biasa digunakan adalah kolkisin atau
kolsemid. Kedua zat kimia tersebut,
menimbulkan kerusakan mikrotubula yang
selanjutnya akan menyebabkan kerusakan
dalam pembentukkan gelondongan meiosis
atau mitosis (ADISOEMARTO, 1988).
POLIPLOIDI SECARA ALAMI
Kasus nondisjungsi (Gagal berpisah),
terjadi pada saat satu garnet menerima dua
jenis kromosom yang sama dan satu garnet
lain tidak mendapat salinan (copy) sama
sekali. Salah satu garnet yang menyimpang ini
bersatu dengan garnet normal. Poliploidi
secara alami relatif lebih banyak pada
tumbuhan dengan pemunculan yang spontan.
Individu poliploid ini memainkan peran
penting dalam evolusi tumbuhan. Pada hewan
poliploidi secara alami jarang terjadi, namun
terjadi pada katak dan ikan. Proses ploidisasi
alami terjadi sebagai berikut :
a. Jika kromosom di dalam telur yang
dibuahi hadir dalam bentuk triplikat
(rangkap tiga), sehingga sel
mempunyai jumlah total kromosom
2n + 1 = 3 set kromosom maka sel
aneuploid yang terbentuk (sel
abnormal) disebut trisomik.
b. Jika satu kromosom hilang dan sel
memiliki jumlah kromosom 2n - 1 =
1 set kromosom maka sel aneuploid
yang terbentuk haploid dan disebut
monosomik.
 sumber:www.oseanografi.lipi.go.id

Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007


c. Jika nondisjungsi (gagal berpisah)
terjadi selama mitosis, kesalahan
berlangsung di awal perkembangan
embrionik, kondisi aneuploid ini
diteruskan di fase mitosis untuk
sebagian besar sel dan ini bisa
berdampak besar pada organisme
tersebut.
d. Organisme yang memiliki dua set
kromosom lengkap, didalam sel telur
yang telah dibuahi secara umum
dapat berubah sehingga terbentuk
kromosom poliploidi, dengan istilah
spesifik triploid (3n) dan tetraploid
(4n), masing-masing menunjukkan 3
atau 4 set kromosom.
e. Organisme triploid bisa dihasilkan
dari fertilisasi telur diploid abnormal
yang mengalami nondisjungsi (gagal
berpisah) pada semua kromosomnya.
Kecelakaan berikutnya menghasilkan
kromosom tetraploid yang tebentuk
akibat kegagalan zigot 2n dalam
membelah diri setelah replikasi
kromosom-kromosomnya pada
pembelahan mitosis berikutnya.
Proses ini akan menghasilkan embrio
yang memiliki kromosom 4n.
BEBERAPA TIPE JENIS BARU
Perubahan jenis simpatrik terjadi pada
tumbuhan adalah sebagai akibat perubahan
yang cepat dalam suatu genom, dan
menghasilkan subpopulasi yang secara
reproduksi terisolasi dengan populasi
leluhurnya. Secara garis besar terdapat dua
macam poliploid hasil manipulasi yaitu :
Autopoliploid
Autopoliploid adalah sel yang
mempunyai lebih dari dua genom dimana
Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007
sumber:www.oseanografi.lipi.go.id
genomnya identik atau mempunyai kromosom
homolog, karena pada umumnya berasal dari
satu jenis. Autopoliploid muncul dari
penggandaan kromosom yang komplemen
secara langsung. Autopoliploid dapat diinduksi
artifisial melalui perlakuan kolsisin dan dapat
terjadi secara spontan, tetapi yang terakhir ini
jarang ditemukan. Menurut VANDEPOEL et
al., (2003) autopoliploid dapat berasal dari
persilangan intraspesies diikuti dengan
penggandaan kromosom, dimana garnet tidak
mengalami reduksi dan kromosomnya
membentuk multivalent pada saat miosis,
dengan pewarisan yang multisomik Beberapa
tanaman yang termasuk autopoliploid alami
adalah kentang, ubi jalar, kacang tanah, alfalfa
dan "orchardgrass".
Beberapa sifat autopoliploid yang
berbeda dengan diploid adalah : (1) volume sel
dan nukleus lebih besar, (2) bertambah ukuran
daun dan bunga serta batang lebih tebal,
(3) terjadi perubahan komposisi kimia meliputi
peningkatan dan perubahan karbohidrat,
protein, vitamin dan alkaloid, (4) kecepatan
pertumbuhan lebih lambat dibanding diploid,
menyebabkan pembungaannya juga ter lambat,
(5) miosis sering tidak teratur dengan
terbentuknya multivalen sebagai penyebab
sterilitas, (6) poliploidi tidak seimbang
terutama pada triploid dan pentaploid
(Sparrow, 1979). SLEPER et al., (2005) juga
menyebutkan bahwa autopoliploid berperan
meningkatkan ukuran sel merismatik, tetapi
jumlah total sel tidak bertambah. Menurut
SAREEN et al., (1992) tanaman autotetraploid
mempunyai bagian vegetatif lebih besar,
menyebabkan mereka lebih jagur dibanding
diploidnya. Tetapi efek ini tidak universal,
karena ada beberapa autotetraploid yang mirip
atau lebih lemah dibandingkan tetua diploid.
Menurut SLEPER et al., (2005), tiga
hal dasar sebagai petunjuk untuk
memproduksi dan memanfaatkan autoploidi
dalam program pemuliaan tanaman yaitu : (1)
autoploidi

cenderung mempunyai pertumbuhan vegetatif
lebih besar sedangkan biji yang dihasilkan
sedikit, sehingga lebih bermanfaat untuk
pemuliaan tanaman yang bagian vegetatifnya
dipanen, (2) lebih berhasil untuk mendapatkan
autoploidi yang jagur dan fertil melalui
penggandaan diploid yang jumlah kromosom
sedikit, (3) autoploidi yang berasal dari spesies
menyerbuk silang lebih baik dari pada
autoploidi dari spesies menyerbuk sendiri,
sebab penyerbukan silang membantu secara
luas rekombinasi gen dan kesempatan untuk
memperoleh keseimbangan genotip pada
poliploidi (Gambar 2).
Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007
sumber:www.oseanografi.lipi.go.id
Alopoliploid
Allopoliploid adalah keadaan sel yang
mempunyai satu atau lebih genom dari genom
normal 2n = 2x, dimana pasangan
kromosomnya tidak homolog. Allopoliploid
terbentuk dari hibridisasi antara spesies atau
genus yang berlainan genom (hibridisasi
interspesies). Tanaman Fl-nya akan steril,
karena tidak ada atau hanya beberapa
kromosom homolog. Bila terjadi penggandaan
kromosom spontan atau diinduksi, maka
tanaman menjadi fertil. Beberapa tanaman
yang termasuk alloploidi alami adalah
gandum, terigu, kapas, tembakau, tebu dan
beberapa spesies kubis.

Allopoliploid ditemukan ada yang
allopoliplod segmental (sebagian kromosom
homolog) menyebabkan steril sebagian, dan
allopolyploid (semua kromosom tidak
homolog) menyebabkan steril penuh.
Allopoliploid segmental memiliki segmen
kromosom homologous dan homoeologus
(homolog parsial) yang selama miosis dapat
terjadi bivalen dan multivalen, sehingga
pewarisannya campuran disomik-polisomik
(VANDEPOEL et al., 2003). Dikatakan juga
bahwa prototipe poliploidi dari rumput-
rumputan seperti gandum adalah
allopolyploid, jagung adalah alloploidi
segmental dan padi adalah paleopoliploid.
Tujuan induksi allopoliploid adalah
mengkombinasi sifat-sifat yang diinginkan
dari dua tetua diploid ke dalam satu tanaman
(SPARROW & NAUMAN, 1976). Menurut
SLEPER et al., (2005) beberapa manfaat
alloploidi untuk para pemulia adalah : (1)
dapat mengidentifikasi asal genetik spesies
tanaman poliploidi, (2) menghasilkan genotip
tanaman baru, (3) dapat memudahkan transfer
Kesalahan fase
mitosis
Menghasilkan
poliploidi
Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007
sumber:www.oseanografi.lipi.go.id
gen antar spesies dan (4) memudahkan
transfer atau subtitusi kromosom secara
individual atau pasangan kromosom.
Para pemulia menginduksi poliploidi
dengan menyilangkan antara spesies budidaya
tetraploid dengan kerabat liarnya, dengan
tujuan supaya gen yang diinginkan dapat
ditransfer dari spesies liar ke kultivar budidaya
(SPARROW & NAUMAN, 1976). Menurut
SLEPER et al., (2005), hampir semua kerabat
liar Solanum dapat disilangkan dengan
Solarium tuberosum (interspesies) dengan
tujuan untuk mendapatkan resistensi terhadap
stress abiotik maupun biotik, serta
memperbaiki heterosigositas tanaman.
Pendekatan pembuatan allopoliploid ini
kelihatan kurang berhasil dibanding induksi
autopoliploid. Kesulitan yang ditemui dengan
pendekatan ini adalah : (1) adanya "barier
incompatible" antar kedua spesies yang akan
disilangkan, (2) terjadi pembuahan, tetapi
mengalami aborsi embrio. Kendala dalam
menghasilkan tanaman allopoliploid ini dapat
diatasi dengan teknik hibridisasi baru, yaitu
fusi protoplas atau hibridisasi somatik.

POLIPLOIDI SECARA REKAYASA
Poliploidisasi:
Poliploidisasi adalah suatu metoda
manipulasi kromosom dari diploid (2n)
menjadi jumlah kromosom yang lebih tinggi
triploid, tetraploid, pentaploid dan seterusnya.
Pada gambar 4 dapat dilihat perbedaan fase
meiosis pada siklus hidup berbagai organisma
diploid (2n). Jumlah kromosom yang ganjil
pada individu flora maupun fauna akan
menyebabkan kemandulan (steril). Pada
tanaman yang memiliki jumlah kromosom
ganjil, buahnya tidak berbiji sedangkan pada
hewan akan bersifat steril (tidak bisa
bereproduksi). Jumlah kromosom genap pada
individu poliploid umumnya mati sebelum
terjadi reproduksi (SISTINA, 2000).
1. Proses poliploidi
Proses awal pembentukan oosit I
hingga fase meiosis I, akan menghasilkan oosit
II yang mengandung sitoplasma dan polar bodi
II. Bila pada fase ini terjadi fertilisasi oleh
spermazoa, maka oosit II menjadi totipotensi
aktip. Dalam tahap penggabungan
Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007
sumber:www.oseanografi.lipi.go.id
kromosom ini, pelakuan kejut segera
laksanakan. Untuk mendapatkan individu
poliploid yang diinginkan dapat dilakukan
berbagai kejutan seperti suhu panas, dingin,
tekanan (hydrostatic pressure) dan
menggunakan bahan kimiawi. Bahan kimia yang
digunakan adalah kolkisin atau kolsemid.
Tujuannya adalah untuk menghalangi peloncatan
polar body II, bersama pronuklei betina dan
jantan akan membentuk zigot poliploidi.
Penggunaan zat kimia memiliki tujuan sama,
yakni untuk menimbulkan kerusakan
mikrotubula yang selanjutnya akan menyebabkan
kerusakan selama pembentukkan gelondongan
meiosis atau mitosis, dan akan menghasilkan
zigot poliploid. Hal yang perlu diperhatikan
dalam melakukan kejut panas adalah waktu awal
kejutan, suhu kejutan dan lama kejutan. Nilai
parameter tersebut berbeda pada setiap jenis.
Menurut hasil penelitian MUKTI et al., (2001)
ploidisasi dilakukan setelah menghitung jumlah
nukleus, kemudian memberi perlakuan kejut
suhu 40°C selama 1,5 menit maka akan
dihasilkan triploid 70 % dan tetraploid sebesar 60
%. Perlakuan ini efektif untuk menghasilkan
poliploidisasi pada ikan (Gambar 5).
 sumber:www.oseanografi.lipi.go.id

2. Individu poliploidi ƒ Manipulasi pencegahan

Individu poliploidi diperoleh dari berbagai
perlakuan, bermula dari awal ovum yang
dibuahi oleh spermazoa, proses poliploidisasi
terjadi sebagai berikut :
a. Triploid
■ Telur diploid yang dibuahi spermatozoa
haploid (2n) + (n) = (3n).
■ Proses meiosis pada pembentukan
ovum (oogenesis) gagal.
pelepasan polar body II
dilakukan setelah haploid
dibuahi spermatozoa haploid,
dengan suhu panas (heat
shock), suhu dingin (cold
shock) dan tekanan
(hidrostatik pressure).
ƒ Proses triploid pada ovum
dimaksudkan untuk mencegah
atau menahan pelon-catan
polar body II dari ovum.

Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007


b. Tetraploid
ƒ Perlakuan kejutan suhu panas untuk
mencegah pembelahan I (first cleavage)
atau sebelum pembelahan mitosis I.
Kejutan sebaiknya dilakukan setelah
kromosom bereplikasi dan nukleus zigot
hampir terbagi menjadi dua.
ƒ Periode sensitif tertinggi untuk
menghasilkan ikan tetraploid terjadi
pada saat menutupnya konjugasi
pronulei betina dan jantan serta lisisnya
membran nuklear yang mencapai
metafase mitosis I (GRAHAM 2006).
ƒ Peloncatan polar body II pada be-
berapa jenis terjadi 3-7 menit setelah
fertilisasi. Menurut LEGGAT (2006)
peloncatan terjadi 5 menit setelah
fertilisasi dan proses mitosis terjadi 30
menit setelah fertilisasi.
ƒ Tertraploid dipergunakan dalam
memproduksi ikan triploid melalui
persilangan dengan diploid normal dan
androgenik pada ovum yang diradiasi
dengan sinar Y.
Hasil perlakuan poliploidisasi
Beberapa penelitian menunjukan,
bahwa untuk menghasilkan poliploidisasi pada
ikan, maka yang harus dipengaruhi adalah laju
penetasan telur abnormalnya, kelangsungan
hidup dan laju pertumbuhan. Pada ikan, dapat
dibuat fertilisasi eksternal melalui proses
artifisial untuk telur yang terfertilisasi secara
Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007
sumber:www.oseanografi.lipi.go.id
invitro. Perlakuan yang dipergunakan adalah
kejut suhu panas 40°C, selama 1,5 menit untuk
individu diploid, selama 3 menit dan untuk
individu triploid dan 29 menit setelah fertilisasi
dan untuk tetraploid. Menurut MUKTI et al.,
(2001) ada tiga fakta tentang ikan hasil
ploidisasi, yaitu :
1. Poliploidisasi pada ikan mas (Gambar
6). Rata-rata laju penetasan telur untuk
ikan diploid mencapai 70%, triploid
20% dan tetraploid 10%. Nilai
persentase menunjukan rata-rata
penetasan telur yang tidak mengalami
poliploidisasi lebih tinggi
dibandingkan yang telah mengalami
poliploidisasi.
2. Rata-rata kelangsungan hidup ikan mas
(Gambar 7). Untuk ikan diploid
mencapai 70%, triploid 50% dan
tetraploid 50%. Nilai persentase rata-
rata kelangsungan diploid lebih tinggi
dibanding triploid dan tetraploid.
Nalai rata-rata persentase
kelangsungan hidup untuk triploid
dan tetraploid sama.
3. Rata-rata kecepatan pertumbuhan
relatif (panjang ikan) ikan mas
(Gambar 8). Untuk individu diploid
diperlukan 30 hari untuk mencapai
panjang tubuh 2,75 cm, triploid 4 cm
dan tetraploid 5 cm. Pada hari ke 110,
ikan diploid mencapai panjang 12 cm,
triploid 14 cm dan tetraploid 18 cm.
Pertumbuhan triploid dan tetraploid
lebih panjang dibandingkan diploid
(MUKTI et al., 2001).
 sumber:www.oseanografi.lipi.go.id

10

Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007


KESEMPULAN
Manipulasi poliploidi merupakan cara
untuk merubah individu haploid atau diploid
menjadi individu triploid, tetraploid,
pentaploid dan seterusnya. Beberapa proses
dapat dilakukan secara alami melalui
nondisjungsi maupun rekayasa dengan kejut
suhu panas, dingin, tekanan dan bahan kimia
pada telur yang telah dibuahi spermatozoa.
Perlakuan ini, untuk mendapakan jenis baru
yang berkualitas, tumbuh cepat besar, bentuk
menarik. Individu poliploidi mudah
beradaptasi dan dapat sebagai kontrol
lingkungan untuk individu lain.
DAFTAR PUSTAKA
ADISOEMARTO, S. 1988. Genetika. Jilid 1.
Penerbit Erlangga, Jakarta: 186 hal.
CAMPBELL, N.A.; J.B. RECEE and L.G
MITCHELL 2000. Biology. Edisi V
(terjemahan). Penerbit Erlangga,
IKAPI, Jakarta: 433 pp.
GRAHAM, A.E. 2006. Genetica and
reproduction in fish culture. University
of California: 4857 pp.
JUSUP, M. 1988. Genetika I; Struktur dan
ekspresi gen. Institut Pertanian Bogor:
205 hal.
11
Oseana, Volume XXXII No. 4, 2007
sumber:www.oseanografi.lipi.go.id
LEGGAT, RA.; K.W. SCHECE; L.O.B. AFONSO
and GK. IWAMA. 2006. Tripioid and
diploid rainbow trout do not differ in
their stress response to transportation.
North American Jour, of Aquae, v. 68,
issue /: 1 - 17.
MUKTI, A.T.; RUSTIJA; J.B. SUMITRO dan
M.S. DJATI 2001. Poliploidisasi Ikan
Mas (Cyprinus carpio L.). Biosain,
1(1): 22-36.
SLEPER, D. ALLEN and J. M. POEHLMAN
2006. Breeding Field Crops. Blackwell
Publisher. Iowa: 424 pp
ROTTMAN, R.W.; J.V. SHIREMAN and RA.
CHAPMAN 1991. Introduction to
hormone induced spawning of fish.
Canadian Jour.of Fish, and Aqua. Sci.,
49: 2055 -2061.
SAREEN, P.K. 1992. Amphidiploids/synthetic
crop jenis. Plant genetics and breeding,
no. 16:62-81
SISTINA, Y. 2000. Biologi reproduksi, Fak.
Biologi Unsoed, Pasca - Sarjana,
Purwokerto : 66 hal.
SPARROW and NAUMAN 1976. Evolution
of genome size by DNA doublings.
Science, Vol. 192. no. 4239: 524-529
VANDEPOEL K.; C. SIMILLION and Y. Van de
PEER 2003. Evidence That Rice and
Other Cereals Are Ancient Aneuploids.
The Plant Cell, Vol. 15, 2192-2202.