MAKALAH MIKOLOGI

Mysetoma

Disusun Oleh :

1. Anisa Marselina (061711009)

2. Artmylia Tizaureen (061711014)
3. Cika Dara Auliani (061711019)

TLM A’2017-1

PROGRAM STUDI TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS

FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

UNIVERSITAS BINAWAN

2019
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kami panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah melimpahkan
rahmat dan karunia-Nya kepada kami berupa kesempatan, pengetahuan dan memberikan kami
kemudahan sehingga kami dapat menyelesaikan makalah ini dengan tepat waktu. Tanpa
pertolongan-Nya tentunya kami tidak akan sanggup untuk menyelesaikan penulisan makalah
misetoma tepat pada waktunya. Terima kasih juga kami ucapkan kepada teman-teman yang telah
berkontribusi dengan memberikan ide-idenya sehingga makalah ini bisa disusun dengan baik dan
rapi Makalah ini dibuat untuk memenuhi tugas Mata kuliah mikologi.
kami berharap makalah ini dapat menambah pengetahuan pembaca khusunya mahasiswa
mengenai misetoma. Namun terlepas dari itu, makalah ini masih jauh dari kata sempurna dan
masih banyak terdapat kesalahan serta kekurangan di dalamnya. Untuk itu kami mengharapkan
kritik dan serta saran yang membangun dari pembaca demi terciptanya makalah selanjutnya yang
lebih baik lagi .

Jakarta, 16 November 2019

Penyusun

1
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR......................................................................................................................................... 1
DAFTAR ISI..................................................................................................................................................... 2
BAB I .............................................................................................................................................................. 3
PENDAHULUAN ......................................................................................................................................... 3
1.1 Latar Belakang ........................................................................................................................... 3
1.2 Rumusan Masalah ..................................................................................................................... 3
1.3 Tujuan Makalah............................................................................................................................... 4
BAB II ............................................................................................................................................................. 5
PEMBAHASAN ........................................................................................................................................... 5
2.1 Pengertian Misetoma................................................................................................................ 5
2.2 Penyebab Misetoma ................................................................................................................. 5
2.3 Gejala Klinis ............................................................................................................................... 6
2.4 Orang yang rentan terkena misetoma ........................................................................................... 6
2.5 Diagnosa untuk misetoma .............................................................................................................. 7
2.6 PENCEGAHAN MISETOMA ............................................................................................................ 14
BAB III .......................................................................................................................................................... 15
PENUTUP ................................................................................................................................................. 15
3.1 Kesimpulan ................................................................................................................................... 15
3.2 Saran ............................................................................................................................................. 15
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................................................... 16

2
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Mycetoma adalah penyakit inflamasi granulomatous kronis subkutan yang
disebabkan oleh beberapa jamur dan bakteri , diklasifikasikan sebagai eumycetoma dan
actinomycetoma, masing-masing . Penyakit ini ditandai oleh banyak deformasi dan
kecacatan, morbiditas tinggi, dan pada tahap akhir berpotensi fatal. Mycetoma adalah
endemik di "mycetoma belt" yang disebut yang mencakup berbagai negara di seluruh
dunia, tetapi dilaporkan secara luas dari Sudan, Meksiko, dan India. Tiga hal yang
menjadi karakteristik misetoma adalah ditandai dengan kombinasi massa subkutan tanpa
rasa sakit, banyak sinus dan granul (butiran).

Penyakit ini umumnya menyerang orang dewasa muda, sebagian besar pria berusia
antara 15 sampai 30 tahun di Negara- negara berkembang. Orang- orang dengan status
social ekonomi rendah dan pekerja manual seperti petani, buruh, dan pengembala adalah
yang rentan untuk terkena misetoma dan paling parah terkena dampaknya

Oleh karena itu, pengobatan misetoma membutuhkan diagnosis penyebab yang

memadai dan akurat. Saat ini, serangkaian investigativ tersedia untuk menetapkan
diagnosis misetoma. Sebagian besar investigasi ini bersifat invasif, memakan waktu, dan
membutuhkan pengalaman pribadi yang baik. Dalam kebanyakan kasus, kombinasi dari
investigasi ini diperlukan di laboratorium yang dilengkapi dengan baik untuk mencapai
diagnosis.

1.2 Rumusan Masalah

1. Apa pengertian dari misetoma?
2. Apa penyebab misetoma?
3. Apa gejala atau tanda fisik dari seseorang yang terkena misetoma?

3
 4. Siapa saja orang yang rentan terkena misetoma?
5. Bagaimana diagnosa untuk misetoma?
6. Bagaimana pencegahannya?

1.3 Tujuan Makalah

1. Mendeskripsikan pengertian misetoma
2. Mendeskripsikan penyebab misetoma
3. Mendeskripsikan gejala atau tanda fisik dari seseorang yang terkena misetoma
4. Mendeskripsikan siapa saja orang yang rentan terkena misetoma
5. Mendeksripsikan diagnosa untuk misetoma
6. Mendeskripsikan pencegahan misetoma

4
 BAB II

PEMBAHASAN

2.1 Pengertian Misetoma

Misetoma adalah penyakit tropis yang unik dan meresahkan, endemik di banyak daerah
tropis dan subtropis. Misetoma penyakit ini adalah penyakit peradangan kronis subkutan
granulomatosa yang memiliki dampak mendalam dan negatif pada berbagai aspek medis,
kesehatan dan aspek sosial ekonomi dari kehidupan pasien dan masyarakat di daerah
endemis.

Misetoma termasuk kedalam mikosis subkutan yang paling sering ditemui, biasanya
misetoma terjadi di kaki atau pergelangan kaki tetapi setiap bagian tubuh dapat
terkena.infeeksi Secara singkatnya misetoma adalah Misetoma adalah infeksi kronik yang
dapat disebabkan oleh mikroorganisme (jamur dan bakteri ) pada jaringan bawah kulit, yang
dapat meluas sampai ke tulang.

2.2 Penyebab Misetoma

Infeksi kemungkinan besar diperoleh dari organisme yang merupakan penghuni tanah
dan lingkungan yang masuk kedalam jaringan subkutan melalui inokulasi traumatis atau
cedera. Organisme penyebab misetoma berasal dari bakteri berfilamen atau jamur oleh
karena itu diklasifikasikan sebagai actinomycetoma dan eumycetoma.

a) Actinomycetoma ( bacterial mycetoma)

Disebabkan oleh mikroorgansme golongan Schizomycophyta, yaitu Actinomyces ,
Nocardia, dan Streptomyces. Bakteri penyebab aktinomisetoma yang penting
adalah Actinomadura pelletieri, Nocardia brasiliensis, dan Streptomyces
somaliensis.

b) Eumycetoma ( fungal mycetoma)

5
 Disebabkan oleh jamur golongan Eumycophyta, diantaranya adalah Madurella
mycetomati, Scedosprium apiospermum ( Pseudoaallescheria boydii), Madurella
grisea, dan Leptosphaeria sinegalensis.

Selama masa infeksi, organisme penyebab tumbuh menjadi modifikasi mikrokoloni

terlokalisasi yang dikenal sebagai granul (butiran) yang dikelilingi sel-sel peradangan dan
menimbulkan sinus.

2.3 Gejala Klinis

Gejala klinis biasanya merupakan lesi kulit yang sirkumskrip terdiri atas pembengkakan(
pembengkakan seperti tumor jinak), abses, sinus dan di dalam sinus ditemukan butir-butir
atau yang biasa yang berpigmen yang kemudian dikeluarkan melalui eksudat. Butir memiliki
fitur morfologi yang berbeda; ukurannya bervariasi dari mikroskopis hingga 1-2 mm.
Marsella mycetomatis dan A. Ahmadurae memiliki biji-bijian besar, sedangkan Nocardia
brasiliensis, N.cavae, butiran berukuran kecil . Warnanya bervariasi, mulai dari hitam, kuning,
putih, atau merah hingga pucat. Sebagian besar organisme penyebab eumycetoma
menghasilkan butiran hitam atau pucat dan jarang berwarna kuning, dan actinomycetoma
umumnya disebabkan oleh organisme yang menghasilkan butiran kuning, putih, atau merah.
Inflamasi dapat menjalar dari permukaan sampai ke bagian dalam dan dapat menyerang
subkutis, fasia, otot dan tulang.

2.4 Orang yang rentan terkena misetoma

Sebagian besar pasien adalah orang dewasa muda dalam kelompok usia 15-30 tahun
terutama pria di negara-negara berkembang. Dominasi pria adalah temuan konstan pada
misetoma dengan rasio jenis kelamin 3,7: 1 Hal ini umumnya dikaitkan dengan risiko paparan
mikroorganisme yang lebih besar di tanah selama kegiatan terkait pekerjaan di luar ruangan.
Namun, di daerah miketoma-endemik, perempuan juga terlibat dalam kegiatan kerja di luar
ruangan. Lalu Orang-orang dengan status sosial ekonomi yang rendah dan para pekerja
manual seperti petani, buruh, dan pengembala yang melakukan kontak langsung dengan
tanah. Dalam sebagian kasus yang dilaporkan, anak-anak menyumbang 30% dari total kasus
yang dilaporkan .

6
 Hal Ini memiliki implikasi besar bagi pasien, keluarga dan masyarakat di daerah endemis
karena banyak dari merka yang putus sekolah karena sakit dan tida bekerja karena sakit.
sehingga meningkatkan tekanan pada pendapatan keluarga dan masyarakat serta sumber daya
dalam rumah tangga yang sudah miskin.

2.5 Diagnosa untuk misetoma

Butir miketoma
Granul sangat penting untuk menegakkan diagnosis organisme penyebab. Meskipun
karakteristik morfologi butir dapat memberikan identifikasi sementara cepat dari agen
etiologi, dalam beberapa kasus mereka mungkin menipu . Butir memiliki fitur morfologi yang
berbeda; ukurannya bervariasi dari mikroskopis hingga 1-2 mm. Marsella mycetomatis dan A.
Ahmadurae memiliki biji-bijian besar, sedangkan Nocardia brasiliensis, N.cavae, dan N.
butiran asteroid berukuran kecil . Warnanya bervariasi, mulai dari hitam, kuning, putih, atau
merah hingga pucat. Sebagian besar organisme penyebab eumycetoma menghasilkan butiran
hitam atau pucat dan jarang berwarna kuning, dan actinomycetoma umumnya disebabkan
oleh organisme yang menghasilkan butiran kuning, putih, atau merah. Konsistensi dari
kebanyakan butiran lunak, tetapi Streptomyces somaliensis and M. mycetomatis cukup sulit.
Biji-bijian biasanya diperoleh dengan biopsi bedah dalam pada kondisi aseptik untuk
menghindari kontaminasi. Biji-bijian yang diperoleh dari sinus terbuka umumnya tidak dapat
hidup dan sering terkontaminasi .

Biopsi bedah harus segera ditangani oleh teknologi laboratorium di ruang bedah. Biopsi
harus dibagi menjadi 2 bagian; 1 bagian untuk kultur biji-bijian dan yang lainnya untuk
pemeriksaan histopatologi. Yang pertama ditempatkan di saline normal, sedangkan yang
kedua ditempatkan di saline formalin 10%.

a) Pemeriksaan mikroskopis langsung

Pemeriksaan mikroskopis langsung dari granul yang diperoleh dari pelepasan
serosanguinosa sinus adalah cara tercepat untuk membuat diagnosis dugaan dari organisme
penyebab miketoma, tetapi kurang akurat. Granul dapat langsung diperiksa di bawah
mikroskop cahaya menggunakan 10% kalium hidroksida (KOH), yang mencerna lendir dan

7
keratin, sehingga memberikan latar belakang yang jelas. Mikroskopi granul tidak dapat
membedakan antara organisme tertentu seperti M.mycetomatis dan Trematosphaeria griesia.
Oleh karena itu, prosedur ini tidak cukup spesifik untuk membuat diagnosis definitif
miketoma dan harus dilengkapi dengan identifikasi fitur karakteristik tambahan. Selain 10%
KOH, tinta Parker dapat digunakan untuk memeriksa pelepasan serosanguineous yang
mengandung butiran secara mikroskopis.
Granul yang dihancurkan ditempatkan pada slide kaca dan ditutup dengan penutup. Dua
atau 3 tetes noda dioleskan ke tepi slide dan dibiarkan meresap di bawah slip. Sediaan
kemudian diperiksa di bawah mikroskop cahaya untuk melihat adanya hifa dan spora. Mereka
biasanya mengambil warna biru gelap di latar belakang seluler biru muda. Actinomycetes di
bawah mikroskop biasanya menunjukkan filamen bercabang, miselium udara berlimpah, dan
rantai panjang spora. Serat kain dapat menyebabkan kebingungan diagnostik, karena mereka
juga dapat mengambil noda, tetapi mereka sering keluar dari bidang jaringan, lebih besar dari
hifa, diameternya tidak beraturan, dan sering memiliki konfigurasi spiral yang tidak teratur.

pemeriksaan langsung mikroskopis dari butir M. mycetomatis yang menunjukkan struktur hifa.

Beberapa teknik pewarnaan histokimia digunakan untuk identifikasi cepat agen penyebab
misetoma dari kultur. Pewarnaan Gram dan teknik pewarnaan Ziehl-Neelsen (ZN) adalah
yang paling umum digunakan. Organisme penyebab actinomycetoma adalah gram positif,
sedangkan organisme penyebab eumycetoma adalah gram negatif . Actinomycetes terdiri dari
filamen bercabang halus, tebal sekitar 1 mikron, sedangkan butir eumycetes terdiri dari hifa
septat setebal 4-5 mikron. Teknik pewarnaan ZN lebih unggul dalam membedakan antara
agen aktinomikotik; Nocardia spp. ZN positif, sedangkan Ahmad dan S. somaliensis adalah
ZN negatif .

8
 b) Grain culture
Sejumlah besar granul dibutuhkan untuk membiakkan agen penyebab misetoma. Mereka
harus direndam dan disimpan dalam larutan salin untuk dikultur, dicuci beberapa kali dengan
larutan salin normal, dan diinokulasi ke media kultur yang cocok dalam kondisi steril
menggunakan lemari pengaman atau area yang disterilkan dengan api. Agar Sabouraud yang
dimodifikasi dilengkapi dengan ekstrak ragi 0,5%, agar darah, agar infus otak-jantung, dan
agar Lo ¨ wenstein adalah media yang paling sering direkomendasikan. Media kultur bebas
antibiotik diperlukan untuk isolasi aktinomiset, sedangkan kultur eumycetes harus
mengandung antibiotik. Antibiotik yang biasa digunakan adalah penisilin G (20 U / ml),
gentamisin sulfat (400μg / ml), streptomisin (40μg / ml), atau kloramfenikol (50μg / ml).

Organisme penyebab miketoma dapat diidentifikasi dengan deskripsi tekstur dan aktivitas
morfologis dan biologisnya dalam kultur murni. Aktivitas biologis dapat meliputi tahan asam,
suhu optimal, aktivitas proteolitik, pemanfaatan gula, dan senyawa nitrogen.
Nocardia biasanya menghasilkan hifa substrat dan udara yang terlihat seperti batang dan
coccoids.

Streptomyces membentuk miselium substrat kekuningan dan kekurangan hifa udara,

sedangkan identifikasi Madurella terutama didasarkan pada morfologi tubuh buah dan
morfologi koloni. Karakteristik fenotipik dari organisme penyebab penting untuk identifikasi
mereka. Ini termasuk produksi β-glukuronidase; degradasi adenin, kasein, dan hipoksantin;
pertumbuhan pada adonitol; hidrolisis aesculin; gliserin; glikogen; D-raffinose; Lrhamnose;
D-turanose; D-xilosa; dan asam L-aspartat. Yang terakhir adalah sumber karbon tunggal dan
memainkan peran dalam identifikasi patogen Streptomyces spp.A.madurae ditemukan positif
forα-glukosidase dan negatif untukN-asetil-β-glukosaminidase.

Mengingat informasi terbatas yang tersedia tentang sifat fenotipik dan pola asimilasi
untuk identifikasi agen eumycetoma, sistem baru, kit API 20C AUX, baru-baru ini
diperkenalkan dan mampu mengidentifikasi M.Fahalii, M.pseudomycetomatis, dan
M.tropicana Diferensiasi berbagai jamur dematiaceous berdasarkan morfologi kadang-kadang
sulit dan memakan waktu, dan budaya biasanya memakan waktu sekitar 3 minggu untuk
memberikan hasil yang akurat. Namun, teknik kultur memakan waktu, dan kontaminasi yang

9
tidak disengaja dapat memberikan hasil positif palsu. Ini juga membutuhkan pengalaman
untuk mengidentifikasi organisme penyebab .

c) Identifikasi sitologi miketoma

Sitologi aspirasi jarum halus (FNAC) dengan blok sel dan teknik sitologi jejak untuk
miketoma dijelaskan. Aspirasi jarum halus dalam kondisi aseptik diperlukan untuk
mengidentifikasi agen penyebab misetoma dan reaksi jaringan terhadapnya. Dalam teknik ini,
jarum yang melekat pada jarum suntik dimasukkan ke dalam dugaan lesi misetoma dan
disedot dengan tekanan negatif. Ini harus dilakukan dalam setidaknya 3 arah yang berbeda.
Setelah fiksasi, blok sel diproses dan diwarnai seperti yang dilakukan dengan bagian parafin.
Apusan atau bagian dapat diperiksa secara mikroskopis. Mycetoma memiliki ciri-ciri khas
sitologi yang berbeda, ditandai oleh adanya granuloma supuratif yang mengelilingi butir
karakteristik organisme penyebab. Granuloma terdiri dari infiltrat neutrofilik yang kontak erat
dengan dan menginfiltrasi biji-bijian. Ini dikelilingi oleh histiosit palisading di luar yang
terdapat infiltrat inflamasi campuran yang terdiri dari limfosit, sel plasma, eosinofil,
makrofag, dan fibrosis. Sel raksasa berinti banyak sering ditemukan di granuloma.

Butir actinomycetes bersifat homogen eosinofilik pada H&E. Pada noda-noda Geimsa,
butirannya tampak biru homogen di tengahnya, sementara di pinggirannya terdiri dari butiran
halus dan filamen merah muda yang memancar. Pelletieriigrain lebih eosinofilik pada H&E
dibandingkan dengan S.somaliensis, dan berbentuk semilunar, seperti yang terlihat dalam
histologi. Apusan sitologis dapat membedakan misetoma dari lesi subkutan lainnya dan dapat
mengidentifikasi agen penyebab misetoma. Teknik ini sederhana, cepat, ekonomis, dan dapat
digunakan untuk pengumpulan sampel dalam survei dan budaya epidemiologi. Kehadiran biji-
biji dalam apusan sitologis wajib untuk mencapai diagnosis.

EL Hag dan rekannya pada tahun 1995 mempelajari sekelompok 14 pasien dengan
berbagai jenis lesi miketoma menggunakan teknik FNAC. Temuan dari noda sitologi
sebanding dengan yang diamati pada bagian histologis. Mereka menyimpulkan bahwa teknik
ini berguna untuk diagnosis rutin miketoma dalam survei epidemiologis dan untuk
pengumpulan bahan . Yousif dan rekan pada 2009 menggunakan FNAC dan teknik blok sel

10
dalam diagnosis 230 pasien dengan berbagai jenis miketoma, dan mereka melaporkan tingkat
sensitivitas 87,5% dan 85,7% untuk identifikasi eumycetoma dan actinomycetoma, masing-
masing .

Singkatnya, teknik-teknik sitologi yang sederhana dan murah seperti FNAC dan imprint
smear yang menggunakan H&E rutin, Mei – Gru ¨ nwald-Giemsa, Papanicolaou, dan
pewarnaan asam periodik - Schiff (PAS) pada spesimen sitologi biasanya mengarah pada
diagnosis miketoma yang cepat, khususnya di daerah terpencil dan endemik.

d) Serodiagnosis

Selama bertahun-tahun, berbagai tes serologis dan tes digunakan untuk diagnosis
miketoma. Ini termasuk imunoblot, uji hemaglutinasi tidak langsung (IHA), immunodiffusion
(ID), counterimmunoelectrophoresis (CIE), dan ELISA.

Salinas-Carmona dan rekan-rekannya melaporkan penggunaan ELISA untuk diagnosis

serologis N.brasiliensis, agen paling umum yang menyebabkan actinomycetoma di Meksiko.
Studi ini mengungkapkan insiden antibodi yang lebih tinggi pada pasien dengan penyakit
aktif tanpa reaksi silang dengan Micobacterium leprae dan M. tuberculosis. Ini bermanfaat
dalam kasus-kasus di mana identifikasi agen etiologi dalam kultur tidak dimungkinkan.

Untuk agen eumycetoma, tes serologis telah dikembangkan hanya untuk M.mycetomatis
dan P.boydii. P.boydii baik uji ID dengan antigen kasar dan IHA dikembangkan. Uji ID dan
uji CIE untuk M.metetomatis paling banyak diterapkan menggunakan antigen sitoplasma
kasar . CIE lebih unggul dari ID karena titer antibodi yang lebih rendah ditemukan.
Sayangnya, karena preparat antigen kasar digunakan, reaktivitas silang terjadi dan
reproduktifitas rendah. Satu-satunya tes serologis yang dilakukan dengan antigen murni dari
MIycycomatis adalah ELISA berdasarkan protein tumor yang dikontrol secara translasi yang
diproduksi secara rekombinan.

TCTP dan uji Luminex berdasarkan pada TCTP, fruktosa-bifosfat aldolase (FBA), dan
piruvat kinase (PK) . Meskipun pasien memiliki tingkat antibodi yang lebih tinggi, tingkat
yang sama juga terdeteksi pada kontrol yang sehat, membuat teknik tidak cocok sebagai alat
diagnostik .

11
 ELbadawi dan rekan pada tahun 2016 melaporkan sensitivitas 75% dan spesifisitas
imunoblotting 95% dari antigen sitoplasmik miketomatis dari kultur yang diidentifikasi secara
molekuler . Jelas bahwa tes serodiagnostik ini memiliki banyak keterbatasan, yang meliputi
persiapan antigen yang panjang dan membosankan, fakta bahwa antigen itu kasar dan tidak
terstandarisasi, dan reaktivitas silang antara organisme penyebab miketoma yang berbeda.

e) Metode identifikasi berbasis molekul

Metode kimia, meskipun efektif dalam membedakan antara genera aktinomiset, sulit dan
memakan waktu. Mereka dilengkapi dan diganti dengan prosedur molekuler sistematis,
terutama studi sekuensing gen 16S rRNA. Metode molekuler lainnya diperjuangkan untuk
tujuan ini termasuk PCR digabungkan dengan analisis restriksi endonuklease produk PCR,
sidik jari DNA polimorfik berbasis PCR yang diamplifikasi secara acak, dan spektrometri
massa pirolisa titik pirolisis titik 32 .

Studi tersebut memungkinkan klasifikasi yang lebih akurat dari jenis yang sebelumnya
salah klasifikasi. Untuk eumycetoma, berbagai teknik molekuler telah digunakan untuk
mengidentifikasi agen penyebab, dan semuanya didasarkan pada identifikasi internal
transcription spacer (ITS). Untuk mengidentifikasi semua agen penyebab misetoma jamur,
daerah ITS biasanya diamplifikasi dengan primer panfungal dan diurutkan .

Identifikasi didasarkan pada membandingkan urutan yang dihasilkan dengan urutan yang
sudah ada di GenBank. Dengan menggunakan pendekatan ini, beberapa penelitian
melaporkan bahwa sejumlah agen penyebab untuk eumycetoma tidak dihargai, seperti yang
dicontohkan oleh identifikasi 3 spesies Madurella baru (M.fahalii, M.tropicana, dan M.
pseudomycetomatis) serta Pleurostomophoraochracea, eumycetoma, yang menghasilkan butir
kuning untuk M.mycetomatis, Ahmed dan rekan mengembangkan PCR spesifik spesies
(Gambar 12) . Analisis polimorfisme panjang fragmen panjang-PCR-restriksi (RFLP) ini
menunjukkan homogenitas yang ketat antara isolat M.cetetomatis, dan dapat digunakan untuk
mengidentifikasi agen penyebab tidak hanya dari bahan klinis tetapi juga dari sampel
lingkungan . Pengetikan molekuler agen penyebab juga dapat dilakukan. ForM.mycetomatis,
berbagai metode telah digunakan, termasuk analisis restriksi endonuklease (REA), DNA
polimorfik acak yang diamplifikasi (RAPD), dan polimorfisme panjang fragmen amplifikasi

12
(AFLP). Meskipun hasil dengan RAPD adalah variabel, REA dan AFLP mampu
membedakan isolat M.cetomatis dari berbagai negara atau bahkan di dalam suatu negara.
Jenis AFLP tertentu dikaitkan dengan asal dari strain atau ukuran lesi. Identifikasi variabilitas
genetik organisme penyebab miketoma adalah pendekatan yang lebih stabil daripada
menggunakan metode berdasarkan kriteria fenotipik. Berbasis teknik molekuler. pada variasi
genetik adalah analisis perbedaan kariotipe elektroforesis dan RFLP menggunakan
elektroforesis gel atau hibridisasi DNA-DNA.

Sebelum ekstraksi DNA, jamur biasanya disubkultur pada agar Sabouraud dan diinkubasi
pada suhu 37˚C selama 3 minggu. Miselia diambil dari media kultur dan dihomogenisasi
dengan alu steril dan mortar. Miselia yang dihomogenisasi kemudian harus dibekukan dalam
nitrogen cair, dicairkan dan dibekukan dua kali, dan dihomogenisasi kembali dalam 2 ml
buffer lisis yang mengandung 4 M guanidiniumisothiocyanate, 0,1 M Tris-HCl (pH 6,4), 0,2
M EDTA, dan 0,1% Triton X100. Maka DNA harus dimurnikan dengan kromatografi afinitas
Celite. Identifikasi molekuler agen penyebab eumycetoma terutama didasarkan pada ITS yang
terletak di antara gen 18S dan 28S. Agen penyebab dapat diidentifikasi ke tingkat spesies
dengan teknik molekuler.

Rolling circle amplification (RCA) menggunakan probe gembok khusus spesies dan
amplifikasi DNA isotermal, memiliki spesifisitas dan kesederhanaan yang tinggi, dan
berbiaya rendah. Ahmed dan rekan-rekannya pada 2013 menggunakan teknik ini untuk
identifikasi Falciformispora senegalensis, Falciformispora tompkinsii, M.fahalii,
M.mycetomatis, M.pseudomycetomatis, M.tropicana, Medicopsis romeroi, dan T.
menambahkan sampel dari 62 isolat, dan teknik tersebut menghasilkan sampel dari 62
isolat,teknik ini menghasilkan spesifisitas 100% tanpa reaktivitas silang atau hasil yang salah
penerapan teknik amplifikasi isotermal untuk identifikasi MTycetomatis digunakan, dan
metode ini terbukti andal dan mudah dioperasikan. Oleh karena itu berpotensi
diimplementasikan di daerah di mana miketoma endemik. Teknik dapat diperluas untuk
mendeteksi DNA jamur dari sampel lingkungan. Secara umum, teknik berbasis molekuler
untuk organisme penyebab miketoma menarik, karena mereka dapat mengidentifikasi
organisme ke tingkat spesies dan dengan demikian memandu pengobatan yang optimal dan

13
 tepat. Namun, sebagian besar mahal, tidak ramah lapangan, dan tidak tersedia di daerah
endemis.
Sekuensing genom adalah wawasan baru dalam diagnosis miketoma, memberikan data
tentang biologi dan patogenisitas jamur dengan membandingkan genom dengan jamur lain.
M.mycetomatis mm55 diisolasi pada tahun 1999 di Pusat Penelitian Mycetoma, Khartoum,
Sudan, dari misetoma kaki yang luas pada seorang pasien pria berusia 22 tahun. Strain
diisolasi dengan kultur langsung dari butiran hitam yang diperoleh dengan biopsi mendalam
dan diidentifikasi secara morfologi setelah PCR-RFLP dan pengurutan wilayah ITS. Strain
mm55 diurutkan dan diidentifikasi oleh Smit dan rekannya pada tahun 2016. Lucio Vera-
Cabrera dan rekan-rekannya pada tahun 2014 melaporkan rancangan sekuens genom dari
anggota keluarga Thermomonosporaceae, A.madurae LIID-AJ290, yang diisolasi dari kasus
mycetoma pada manusia. Perakitan berisi 10.308.866 bps.

2.6 PENCEGAHAN MISETOMA

Mycetoma bukanlah penyakit yang dapat diberitahukan (penyakit yang diwajibkan oleh
hukum untuk dilaporkan) dan sistem pengawasan global sedang dikembangkan. Belum ada
program kontrol untuk miketoma, kecuali untuk Sudan. Mencegah infeksi sulit dilakukan,
tetapi orang yang tinggal di atau bepergian ke daerah endemis disarankan untuk tidak berjalan
kaki tanpa alas kaki.

14
 BAB III

PENUTUP

3.1 Kesimpulan

Misetoma adalah penyakit infeksi kronis(mikosis subkutan), identifikasi yang akurat dari
agen penyebab misetoma adalah prasyarat untuk pengobatan penyakit. Berbagai alat
diagnostik digunakan untuk memastikan diagnosis misetoma yang akurat dan tepat.

3.2 Saran
Demikian makalah yang kami buat, semoga bermanfaat bagi pembaca. Apabila ada saran
dan kritik yang ingin disampaikan , silahkan sampaikan kepada kami.

15
 DAFTAR PUSTAKA

 Altayeb Ahmed, Amel,dkk. 2017. Mycetoma laboratory diagnosis: Review article. PLOS
Neglected Tropical Diseases,10(1371),1-17.
 Hassan Fahal, Ahmed,dkk. 2018. Mycetoma: The Spectrum of Clinical Presentation.
Tropical Medicine and Infectious Disease,3(97),1-11.
 https://www.mycetoma.edu.sd/index.php/mycetoma-pathology
 https://books.google.co.id/books?id=lCGwDwAAQBAJ&pg=PA47&lpg=PA47&dq=mis
etoma&source=bl&ots=_
 https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/mycetoma

16