Usul Skripsi

USUL SKRIPSI
EFEK LAMA WAKTU PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL SELEDRI

(Apium graveolens L.) TERHADAP KADAR SUPEROXIDE DISMUTASE
TIKUS PUTIH (Sprague dawley) MODEL ISCHEMIA REPERFUSION
INJURY
Oleh :
Ahmad Musafi Hazan
G1A016048
KEMENTERIAN RISET, TEKNOLOGI, DAN PENDIDIKAN TINGGI

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
FAKULTAS KEDOKTERAN
JURUSAN KEDOKTERAN UMUM
PURWOKERTO
2019
LEMBAR PENGESAHAN
EFEK LAMA WAKTU PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL SELEDRI

(Apium graveolens L.) TERHADAP KADAR SUPEROXIDE DISMUTASE
TIKUS PUTIH (Sprague dawley) MODEL ISCHEMIA REPERFUSION
INJURY
Diajukan Sebagai Pedoman Pelaksanaan Penelitian

Pada Fakultas Kedokteran UNSOED
Purwokerto
Disetujui dan disahkan

Pada tanggal ....................................
Pembimbing I Pembimbing II
dr. Afifah, M.Sc dr. Khusnul Muflikhah, M.Sc

NIP. 19850217 201012 2 003 NIP. 19831126 200812 2 003
Mengetahui,
Dekan Fakultas Kedokteran Ketua Jurusan Kedokteran
Dr. dr. Fitranto Arjadi, M.Kes Dr. dr. Nendyah Roestijawati, M.KK
NIP. 19850217 201012 2 003 NIP. 19831126 200812 2 003
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL.........................................................................................i
LEMBAR PENGESAHAN.............................................................................ii
DAFTAR ISI................................................................................................... iii
DAFTAR TABEL.............................................................................................v
DAFTAR GAMBAR.......................................................................................vi
DAFTAR SINGKATAN................................................................................ vii
I. PENDAHULUAN...............................................................................................1
A. Latar Belakang........................................................................................... 1
B. Rumusan Masalah......................................................................................5
C. Tujuan dan Manfaat Penelitian.................................................................. 5
1. Tujuan Penelitian...................................................................................5
2. Manfaat Penelitian.................................................................................7
D. Keaslian Penelitian.....................................................................................7
II. TINJAUAN PUSTAKA...................................................................................... 10

A. Materi Pustaka..........................................................................................10
1. Ginjal .................................................................................................. 10
2. Ischemia Reperfusion Injury................................................................13
3. Acute Kidney Injury.............................................................................18
4. Stres Oksidatif..................................................................................... 21
5. Superoxide Dismutase......................................................................... 25
6. IRI, Stres Oksidatif dan SOD.............................................................. 27
7. Seledri..................................................................................................28
8. Keterkaitan antara IRI, SOD dan Seledri...............................................34
B. Kerangka Teori Penelitian........................................................................37
C. Kerangka Konsep Penelitian....................................................................38
D. Hipotesis Penelitian..................................................................................38
III.METODE PENELITIAN....................................................................................39
A. Materi dan Bahan.....................................................................................39
B. Metode Penelitian.................................................................................... 42
C. Rancangan Percobaan dan Pengambilan Sampel.....................................42
D. Variabel yang Diukur............................................................................... 46
E. Cara Mengukur Variabel.......................................................................... 46
F. Tata Urutan Kerja.....................................................................................47
G. Analisis Kerja...........................................................................................52
H. Waktu dan Tempat Penelitian...................................................................53
I. Jadwal Penelitian......................................................................................53
DAFTAR PUSTAKA..................................................................................... 54
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.1 Keaslian Penelitian.................................................................................7
Tabel 2.1 Kriteria RIFLE dan AKIN dalam Diagnosis AKI.................................19
Tabel 3.1 Variabel dan Definisi Operasional........................................................46
Tabel 3.2 Jadwal Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Seledri......................................53
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Anatomi Ginjal Tikus.......................................................................11
Gambar 2.2 Nefron Ginjal...................................................................................13
Gambar 2.3 Fase-Fase AKI..................................................................................18
Gambar 2.4 Patofisiologi AKI di Renal...............................................................21
Gambar 2.5 Mekanisme Peroksidasi Lipid..........................................................24
Gambar 2.6 Seledri..............................................................................................30
Gambar 2.7 Kerangka Teori Penelitian................................................................37
Gambar 2.8 Kerangka Konsep Penelitian............................................................38
DAFTAR SINGKATAN
AKI Acute Kidney Injury

AKIN Acute Kidney Injury Network
AMP Adenosin Monofosfat
ARF Acute Renal Failure
ATP Adenosin 5`-Trifosfat
BPA Bradford Protein Assay
BUN Blood Urea Nitrogen
CAT Catalase
CKD Chronic Kidney Disease
CMJ Cortico-Medullary Junction
CRD Completed Randomized Design
DNA Deoxyribonucleic Acid
EDTA Ethylenediaminetetraacetic Acid
GFR Glomerular Filtration Rate
GGA Gagal Ginjal Akut
GPxs Glutathione Peroxidase
HTERT Human Telomerase Reverse Trancriptase
ICAM-1 Intercellular Adhesion Molecule 1
IL-1 Interleukin 1
IL-18 Interleukin 18
IFN-γ Interferon Gama
IRI Ischemia Reperfusion Injury
KDIGO Kidney Disease Improving Global Outcomes
MDA Malondialdehida
MPTP Mitochondrial Membrane Permeability Transition Pore
NADPH Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate
NF-κB Nuclear Factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cell
NO Nitrit Oksida
PAF Platelet-Activating Factor
PUFA Poly Unsaturated Fatty Acid
RIFLE Risk, Injury, Failure, Loss, End-stage kidney disease
RNS Reactive Nitrogen Species
ROS Reactive Oxygen Spesies
SOD Superoxide Dismutase
TNF-α Tumor Necrosis Factor Alpha
VCAM-1 Vascular Cell Adhesion Molecule 1
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Ginjal merupakan organ yang memiliki fungsi multipel antara lain
filtrasi, pengaturan keseimbangan air dan elektrolit, glukoneogenesis,
pengaturan keseimbangan asam basa, serta ekskresi produk sisa darah (Guyton
& Hall, 2015). Ginjal dapat mengalami kerusakan fungsi dengan cepat dan
tiba-tiba atau biasa disebut Acute Kidney Injury (AKI) (Singbartl & Joannidis,
2015). AKI ditandai oleh akumulasi kreatinin, urea, dan metabolit
persenyawaan nitrogen (Moore et al., 2018). Prevalensi AKI di dunia
mengalami peningkatan yang berkisar antara 9% - 67% (Mehta et al., 2011).
Pada tahun 1983 tercatat 4,9%, tahun 2002 meningkat menjadi 7,2% dan
pada tahun 2012 meningkat menjadi 20% (Case et al., 2013). Di Indonesia
sendiri kejadian AKI mencapai 8% dari 24.650 pasien yang menjalani
hemodialisis (PERNEFRI, 2016).

Penyebab AKI secara umum dibagi menjadi tiga, yaitu prerenal, renal,
dan postrenal (Waikar & Bonventre, 2012). Namun penyebab AKI yang paling
besar adalah prerenal, yaitu adanya hipoperfusi darah ke ginjal (Bonventre &
Yang, 2011). Hipoperfusi darah merupakan penurunan aliran darah menuju
ginjal yang menyebabkan ischemia dan apabila aliran darah kembali mengalir
ginjal menyebabkan terjadinya reperfusion injury (Basile et al., 2012).
Ischemia reperfusion injury (IRI) atau cedera iskemia reperfusi merupakan
respon kerusakan pada organ tubuh akibat kekurangan suplai darah dan
kerusakan tersebut semakin parah ketika organ tersebut kembali dialiri darah
(reperfusi) (Eltzschig & Eckle, 2011). Terjadinya peradangan akibat iskemik
menjadi perantara kerusakan berikutnya yang lebih berat akibat adanya

reperfusi. Sel darah putih yang dibawa kembali ke jaringan tersebut
menghasilkan sejumlah faktor inflamasi seperti TNF-α, IL-18, IFN-γ dan
radikal bebas yang semakin memperparah kerusakan jaringan. Aliran darah
tersebut juga membawa kembali oksigen ke dalam sel yang mengakibatkan
kerusakan sel protein, DNA, dan membran plasma. Kerusakan membran sel
pada akhirnya menyebabkan pelepasan radikal bebas yang lebih banyak lagi
(Clark & Wayne, 2005).

Kegagalan sel melakukan recovery menyebabkan terjadinya kerusakan ginjal
yang menetap sehingga mengakibatkan terjadinya chronic kidney disease
(CKD) (Basile et al., 2012). Sebesar 70% AKI akan menjadi CKD (Arfian et
al., 2012)
IRI pada ginjal mengakibatkan ginjal mengalami serangkaian respon
inflamasi dan kerusakan lokal pada tubulus ginjal sehingga menurunkan
fungsi ginjal. IRI dapat terjadi akibat shock hipovolemic, sudden cardiac
death, prosedur bedah yang melibatkan sistem vaskuler, maupun sumbatan
arteri mendadak yang kemudian dilakukan terapi (Dorweiler et al., 2007).
Proses inflamasi pada jaringan ginjal ini meningkatkan terbentuknya stres
oksidatif. Stres oksidatif mengakibatkan terjadinya kerusakan histologis pada
ginjal. Proses inflamasi dan peningkatan stres oksidatif merupakan mekanisme
yang mendasari terjadinya acute kidney injury (AKI) serta berbagai
komplikasi lain dari AKI seperti gangguan kardiovaskuler, endokrin
metabolik, penyakit pulmoner, penyakit autoimun, keganasan, dan penuaan
(Sudoyo et al., 2007).

Stres oksidatif merupakan suatu keadaan dimana terjadi
ketidakseimbangan antara pembentukan Reactive Oxygen Species (ROS) dan
sistem pertahanan antioksidan yang berlangsung dalam waktu yang lama

(Ahmad et al., 2013). ROS terbentuk dari proses metabolik di dalam tubuh
melalui reaksi enzimatik yang melibatkan rantai respiratori mitokondria serta
berbagai mekanisme di organela sel yang lain yaitu lisosom dan makrosom
(Sudoyo et al., 2007; Kim & Kim, 2010). Peningkatan produksi ROS dan
penurunan efektivitas dari antioksidan didalam tubuh distimulasi oleh
peningkatan pengeluaran mediator inflamasi, molekul adhesi serta akumulasi
leukosit (Zhao et al., 2014).

Reactive Oxygen Species (ROS) merupakan senyawa yang tidak
memiliki pasangan elektron dan bergerak bebas di dalam tubuh. ROS
mencapai kestabilan dengan cara menyerang molekul yang terdekat untuk
mencari pasangan elektron. ROS akan merusak bentuk dari molekul tersebut.
Akibat dari aktivitas ROS ini, komponen makromolekul sel seperti protein,
karbohidrat, lemak dan asam nukleat akan hancur sehingga menyebabkan
integritas sel terganggu dan sel mengalami apoptosis atau nekrosis (Chapple et
al., 2007; Kim & Kim, 2010).

Antioksidan mempunyai kemampuan mengurangi stres oksidatif
dengan cara mengeliminasi superoxides, hydrogen peroxide dan hydroxyl
radicals. Jenis-jenis Antioksidan tersebut antara lain superoxide dismutase
(SOD), glutathione peroxidase (GPxs) dan catalase (CAT) (Verma et al.,
2013). Superoxide dismutase merupakan enzim yang berperan dalam
pertahanan endogen melawan stres oksidatif akibat produksi radikal bebas
yang berlebih, dengan cara mengkonversi superoxide (O2-) menjadi hydrogen
peroxide (H2O2) yang kemudian didegradasi menjadi air dan molekul oksigen
oleh catalase dan glutathione peroxidase (Peixoto, 2009). Superoxide
dismutase merupakan parameter yang sering digunakan untuk mengukur

aktivitas antioksidan di dalam tubuh (Rehman et al., 2016; Sukketsiri et al.,
2016). Aktivitas SOD tertinggi ditemukan di hati, ginjal, darah, kelenjar
adrenalin, limfa, pankreas, otak, paru-paru, lambung, usus, ovarium dan timus
(Murray et al., 2015). Upaya pencegahan terhadap stres oksidatif diperlukan
untuk dapat mencegah terjadinya kerusakan ginjal pada AKI atau bahkan
CKD.
Salah satu tanaman yang memiliki potensi sebagai antioksidan adalah
seledri (Apium graveolens L.) (Duke, 2010). Selain itu, seledri juga
mempunyai kemampuan sebagai antiseptik, antihelmintik, antiinflamsi, dan
antikanker (Baananou et al., 2012). Seledri mengandung banyak senyawa
metabolit sekunder antara lain flavonoid, glikosida iridoid, alkaloid serta
saponin (Faizal & Iskandar, 2018; Rehman et al., 2016; Sukketsiri et al., 2016;
Jung et al., 2011). Penelitian Nadia & Osman (2012) mengevaluasi efek
hepatoprotektif dari seledri terhadap efek berbahaya yang ditimbulkan dari
timbal dan radiasi. Hasil paparan timbal menyebabkan pengurangan enzim-
enzim antioksidan seperti superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT),
glutathione peroxidase (GPxs). Timbal meningkatkan tingkat perksidasi lipid
di hati dan otak dan menyebabkan penurunan aktivitas SOD, CAT dan GPxs.
Radiasi pengion juga menyebabkan stres oksidatif melalui peningkatan
reactive oxygen species (ROS) sehingga menyebabkan ketidakseimbangan
status antioksidan. Paparan dari timbal dan radiasi ini meyebabkan stres
oksidatif karena peningkatan reactive oxygen species (ROS) dan penurunan
kadar antioksidan dalam tubuh (Nadia & Osman, 2012). Kandungan dari
seledri tersebut diharapkan dapat meningkatkan sistem pertahanan antioksidan
dalam melawan stres oksidatif (Basile, 2007; Rehman et al., 2016). Terapi
seledri terutama tergantung pada flavon (flavonoid) dan apigenin. Zat-zat
tersebut memiliki aktivitas antioksidan yang mampu membuang radikal bebas
yaitu radikal hidroksil (OH-) dan diphenyl picrylhydrazyl (DPHH) dan
mengurangi peroksidasi lipid (Nadia & Osman, 2012). Penelitian Afifah et al.
(2019) menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanol seledri dosis 1000
mg/kgBB selama 14 hari sebelum dan 3 hari setelah pembuatan model AKI
dapat mencegah penurunan kadar SOD tikus. Belum pernah dilakukan
penelitian mengenai efek lama waktu pemberian ekstrak etanol seledri
terhadap kadar SOD tikus model IRI. Berdasarkan uraian tersebut, maka
peneliti tertarik untuk meneliti efek lama waktu pemberian ekstrak etanol
seledri (Apium graveolens L.) terhadap pencegahan penurunan kadar SOD
ginjal pada tikus model IRI.

B. Rumusan Masalah
Apakah lama waktu pemberian ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.)
berpengaruh terhadap pencegahan penurunan kadar superoxide dismutase
tikus putih (Sprague dawley) model IRI?

C. Tujuan dan Manfaat Penelitian
1. Tujuan Penelitian
a. Tujuan Umum
1) Mengetahui efek lama waktu pemberian ekstrak etanol seledri
(Apium graveolens L.) terhadap pencegahan penurunan kadar
superoxide dismutase tikus putih (Sprague dawley) model IRI.

b. Tujuan Khusus
1) Mengetahui kadar superoxide dismutase tikus putih (Sprague
dawley) sehat.
2) Mengetahui kadar superoxide dismutase tikus putih (Sprague
dawley) model IRI.

3) Menganalisis efek pemberian ekstrak etanol seledri (Apium
graveolens L.) dosis 1000 mg/KgBB tikus/hari selama 7 hari

sebelum pembuatan model IRI terhadap pencegahan penurunan
kadar superoxide dismutase tikus putih (Sprague dawley) model
IRI.
IRI.
IRI.
2. Manfaat Penelitian
a. Manfaat Teoritis
Memberikan informasi tentang efek lama waktu pemberian
ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.) terhadap pencegahan
penurunan kadar superoxide dismutase tikus putih (Sprague dawley)
model IRI.
b. Manfaat Praktis
1) Sebagai langkah awal bagi peneliti untuk melakukan penelitian
lebih lanjut dalam upaya pemanfaatan seledri (Apium graveolens
L.) sebagai fitofarmaka.

2) Sebagai salah satu sumber informasi ilmiah bagi masyarakat
mengenai khasiat dan efek ekstrak etanol seledri (Apium
graveolens L.) yang berperan sebagai nefroprotektif.

3) Penelitian ini diharapkan dapat menjadi dasar penelitian
selanjutnya mengenai potensi seledri (Apium graveolens L.)
terhadap pencegahan berlanjutnya AKI menjadi CKD pada tikus
putih (Sprague dawley) model IRI.
D. Keaslian Penelitian
Tabel 1.1 Keaslian Penelitian
No Nama Peneliti Judul Persamaan Perbedaan

1. Wanda Sukketsiri, Effect of Apium a. Variabel Model hewan
Pennapa graveolens on Independent coba berbeda,
Chonphatompikunlert, the Oxidative : efek pada jurnal
Supita Tanasawet, Stress in the ekstrak menggunakan
Nutjanat Choosri, and Liver of Apium model artritis,
Tulaporn Adjuvant- graveolens pada skripsi ini
Wongtawatchai (2016) Induced menggunakan
Arthritic Rats model IRI.
2. Watub Maulana Efek Pemberian a. Variabel Skripsi Watub
(2018) Skripsi (Tidak Ekstrak Etanol Independent Maulana
Dipublikasikan) Seledri (Apium : Seledri (2018)
graveolens L.) b. Variabel menggunakan
terhadap kadar Dependent : perbedaan
superoxide superoxide dosis dalam
dismutase pada dismutase pemberian
Tikus Putih c. Sampel Ekstrak Etanol
(Sprague dawly) sebanyak 30 Seledri yaitu
model acute ekor 250 mg/KgBB,
kidney injury. d. Analisis 500 mg/KgBB
Data : Post dan 1000
test only mg/KgBB
with control tikus dengan
group desin waktu
pemberian
yang sama
yaitu 14 hari
sebelum dan
dilanjutkan
sampai 3 hari
setelah
pembuatan
model AKI,
sedangkan
penelitian ini
menggunakan
dosis tetap
yaitu 1000
mg/KgBB
tikus dengan
tiga perbedaan
waktu
pemberian
yaitu 7 hari, 14
hari dan 28
hari sebelum
pembuatan
tikus model
IRI.
3. Arfian Ifan Rizaldi Efek Pemberian a. Variabel Hewan coba :

(2019), Skripsi (Tidak Ekstrak Etanol Independent Tikus putih
Dipublikasikan Seledri (Apium : Seledri (Sprague
graveolens L.) b. Variabel dawley) model
terhadap kadar Dependent : Ischemia
superoxide superoxide Reperfusion
dismutase pada dismutase Injury.
Tikus Putih c. Sampel
(Sprague sebanyak 30
dawly)model ekor
chronic kidney d. Analisis
disease. Data : Post
test only
with control
group desin
II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Materi Pustaka
1. Ginjal
a. Anatomi Ginjal Tikus
Tikus memiliki bentuk anatomi ginjal yang sedikit berbeda dari
ginjal manusia, namun tetap memiliki fungsi yang sama. Jumlah nefron
pada tikus lebih sedikit dibandingkan nefron pada ginjal manusia, yaitu
hanya sekitar 30.000 – 35.000. Ginjal tikus hanya mempunyai satu papila
renalis (unipapillate) sedangkan pada manusia memiliki banyak papila.
Bagian medula ginjal sama halnya dengan manusia yaitu dikelilingi oleh
korteks ginjal. Bagian korteks ginjal pada tikus memiliki pembagian yang
sedikit berbeda dibandingkan dengan ginjal manusia. Korteks ginjal tikus
dibagi menjadi dua bagian, yaitu labirin korteks dan medullary rays.
Labirin korteks didalamnya terdapat korpuskulum ginjal dan segmen
tubulus yang rumit, sedangkan medullary rays dibentuk oleh segmen-
segmen tubulus ginjal yang lurus. Perbedaan yang lainnya adalah terdapat
pada korpuskulum ginjal tikus yang terletak di tiga bagian ginjal yaitu
superfisial, midkortikal, dan nefron jukstamedular, sedangkan pada

manusia hanya terdapat pada bagian korteksnya saja (Faustinawati et
al., 2017).
Gambar 2.1
Anatomi
Ginjal Tikus
( Suckow,
2006)
b. Fisiologi
Ginjal
Ginjal merupakan organ yang memiliki fungsi multipel antara lain
filtrasi, pengaturan keseimbangan air dan elektrolit, glukoneogenesis,
pengaturan keseimbangan asam basa, serta ekskresi produk sisa
(Guyton & Hall, 2015). Ginjal menjalankan fungsi yang vital sebagai
pengatur volume dan komposisi kimia darah dan lingkungan dalam
tubuh dengan mengekresikan zat terlarut dan air secara selektif. Fungsi
vital ginjal dicapai dengan filtrasi plasma darah melalui glomerulus
dengan reabsorpsi sejumlah zat terlarut dan air dalam jumlah yang
sesuai di sepanjang tubulus ginjal. Kelebihan zat terlarut dan air di
eksresikan keluar tubuh dalam urin melalui sistem pengumpulan urin
(Price dan Wilson, 2016).

Terdapat 3 proses dasar yang mendasari fungsi ginjal yaitu Filtrasi
Glomerulus, Reabsorbsi Tubulus, dan Sekresi Tubulus.

1) Filtrasi Glomerulus
Darah mengalir melalui glomerulus, terjadi filtrasi plasma bebas
protein yang menembus kapiler glomerulus ke dalam kapsula
bowman. Setiap hari 180 liter terbentuk filtrat glomerulus, dengan
volume plasma rata-rata orang dewasa sekitar 2,75 liter. Oleh
karena itu, jika semua volume cairan dikeluarkan melalui urin,
maka volume plasma total akan habis dalam waktu 3 setelah
berkemih (Sherwood, 2014).

2) Reabsorbsi Tubulus
Hasil filtrasi berupa zat-zat yang masih bermanfaat bagi tubuh akan
dikembalikan ke plasma kapiler peritubulus. Zat-zat yang
direabsorbsi tadi nantinya tidak akan dikeluarkan melalui urin, tapi
diangkut ke sistem vena dan ke jantung untuk kembali diedarkan.
Dari 180 liter plasma yang difiltrasi, rata-rata 178,5 liter yang
diserap kembali, dengan sisa 1,5 liter terus mengalir ke pelvis
ginjal untuk dikeluarkan sebagai urin (Sherwood, 2014).

3) Sekresi Tubulus
Dalam proses ini terjadi perpindahan selektif zat-zat dari darah
kapiler peritubulus ke dalam lumen tubuus. Dimana hanya sekitar
20 % dari plasma mengalir melalui kapiler glomerulus disaring ke
dalam kapsul bowman, sedangkan sisanya 80 % mengalir melalui
arteriol eferen ke dalam kapiler peritubulus (Sherwood, 2014).

Gambar 2.2 Nefron Ginjal (Sherwood, 2014)
Menurut Sherwood (2014), ginjal memiliki beberapa fungsi yaitu:
1) Mempertahankan keseimbangan H2O dalam tubuh.
2) Memelihara volume plasma yang sesuai sehingga sangat berperan
dalam pengaturan jangka panjang tekanan darah arteri.

3) Membantu memelihara keseimbangan asam basa pada tubuh.
4) Mengekskresikan produk-produk sisa metabolisme tubuh.
5) Mengeluarkan zat toksis/racun.
6) Mengekskresikan senyawa asing seperti obat-obatan.
2. Ischemia Reperfusion Injury (IRI)
Ischemia reperfusion injury atau cedera iskemia reperfusi
merupakan respon kerusakan pada organ tubuh akibat kekurangan suplai
darah (iskemia) dan kerusakan tersebut semakin tinggi saat organ tersebut
kembali dialiri darah (reperfusi). Cedera iskemia reperfusi pada ginjal
menyebabkan kerusakan pada sel-sel ginjal. Ketidakseimbangan
metabolisme organ IRI menghasilkan hipoksia jaringan dan disfungsi
mikrovaskuler. Cedera mikrovaskular menyebabkan gangguan aliran
darah, peningkatan adhesi leukosit, dan peningkatan permeabilitas
pembuluh darah. Proses ini diikuti oleh cedera tubulus, penebalan dinding
pembuluh darah, reduksi rasio daerah dinding/daerah lumen dari arteri-

arteri kecil ginjal, terjadinya respon inflamasi, dan peningkatan stres
oksidatif (Arfian et al., 2012; Basile et al., 2012; Eltzschig & Eckle, 2011).
Sel tersebut juga dapat mengalami kematian melalui apoptosis atau
nekrosis (Bonventre & Yang, 2011). Pada saat reperfusi terjadi
peningkatan aliran darah ke dalam sel. Namun, cedera sel yang sudah
terjadi meningkatkan kejadian inflamasi dan semakin memperparah cedera
(Sugawara et al., 2004). Terjadinya peradangan akibat ischemia bertindak
sebagai perantara bagi kerusakan cedera reperfusi darah. Sel darah putih
yang dibawa ke daerah tersebut oleh darah yang baru kembali
menghasilkan sejumlah faktor inflamasi seperti Interleukin, juga radikal
bebas yang mengakibatkan kerusakan jaringan. Mengalirnya kembali
darah membawa kembali oksigen kedalam sel yang mengakibatkan
kerusakan sel protein, DNA, dan membran plasma. Kerusakan membran
sel pada akhirnya menyebabkan pelepasan radikal bebas yang lebih
banyak lagi (Clark & Wayne, 2005).

Selama iskemik, mitokondria kekurangan oksigen, sehingga tidak
mempu lagi menghasilkan adenosin trifosfat (ATP) pada peristiwa
fosforilasi oksidasi; sehingga, ATP turun secara drastis bersamaan dengan
peningkatan adenosin difosfat (ADP), adenosin monofosfat (AMP) dan Pi.
Glikolisis terstimulasi, namun tidak dapat memenuhi kebutuhan sel. pH
intrasel turun dengan menumpuknya asam laktat, secara progresif terjadi
penurunan proses glikolisis dan aktivasi antiport Na+/H+ yang akan
memompa H+ keluar sel. Karena terjadi kekurangan ATP, maka pompa
Na+/K+ ATPase tidak dapat memompa keluar sel ion Na+. Konsentrasi
Na+ intrasel yang tinggi menghambat kerja Na+/Ca+ antiport

mengakibatkan tingginya konsentrasi Ca+ intrasel, yang pada akhirnya
akan mengaktifasi enzym degradasi termasuk fosfolipase A2 dan protease
seperti calpains (George & Casale, 2014). Saat proses iskemik
berlangsung, reactive oxygen species (ROS) dihasilkan dan terakumulasi
di mitokondria. Penigkatan jumlah ROS, Pi, Ca2+, dan deplesi nukleotida
adenin akan mengaktifkan mitochondrial membrane permeability
transition pore (MPTP), yang menyebabkan kematian sel. Terdapat data
penelitian secara invivo yang mengaitkan antara Ca2+, perubahan
cytoskleletal dan pemicu kebocoran makromolekul. (Nicholas et al., 2013;
George & Casale, 2014)

3. Acute Kidney Injury (AKI)
a. Definisi dan Kriteria
Acute Kidney Injury (AKI) adalah suatu sindrom yang ditandai
dengan adanya kerusakan fungsi ginjal yang cepat dan tiba-tiba
(Singbartl & Joannidis, 2015). Penurunan cepat fungsi ginjal berkisar
antara jam hingga minggu, namun kurang dari 3 bulan yang diukur
dari peningkatan kreatinin serum (Mehta et al., 2011).

AKI ditandai oleh akumulasi kreatinin, urea, dan metabolit
persenyawaan nitrogen (Moore et al., 2018). Peningkatan ini
disebabkan oleh penurunan secara cepat kemampuan ginjal dalam
mempertahankan keseimbangan antara cairan dan elektrolit. Selain itu
penyakit ini juga ditandai dengan penurunan produksi urin dari
kadaryang normal. (KDIGO, 2012; Roesli, 2008)

Diagnosis terhadap AKI ditentukan berdasarkan dua kriteria
berikut yaitu RIFLE dan AKIN (Ricci et al., 2011; Mehta et al., 2011;
Akcay et al., 2010). Penyakit AKI terjadi jika terdapat peningkatan
absolut kreatinin dalam serum paling tidak 26,5 mmol/l (0,3 mg/dl
atau peningkatan kreatinin dalam serum 50 % atau lebih sesuai kriteria
AKIN (Ricci et al., 2011). Perubahan BUN dan kreatinin serum tidak
hanya mempresentasikan ginjal terhadap penurunan volume
ekstraseluler atau penurunan aliran darah di ginjal (Basile et al.,
2012).
Tabel 2.1 Kriteria RIFLE dan AKIN dalam Diagnosis AKI
Stage
RIFLE category Serum Creatinine Criteria
GFR criteria Urineoutput
Urine Outputcriteria
Criteria
1 Increased ofIncreased
>0,3 mg/dL
serum(>26,4 µmol/L)
creatinine < 0,5
x Urine mL/kg/h
output < 0,5forml/kg/h
>6 h
or1,5 to 2-fold
Risk 1,5increase from baseline
or decrease of GFR > for 6 h
25%
2 > 2-fold to 3-fold increase from baseline < 0,5 mL/kg/h for >12 h
Increased serum creatinine x Urine output < 0,5 ml/kg/h
3 Injury
>3-fold increase from baseline
2 or decrease of GFRor> increase
50% for<120,3
h mL/kg/h for 24 h
of > 4,0 mg/dL (>35,4 µmol/L) with an or anuria for 12 h
acute increase of at serum
Increased least 0,5 mg/dL x(44Urine output < 0,3 ml/kg/h
creatinine
Failure
µmol/L) 3 or decrease of GFR > 75% for 12 h
Loss Complete loss of renal function for >4 weeks
End-stage kidney
Need for RRT for >3 months
disease
b. Etiologi
Penyebab AKI secara umum dibagi menjadi tiga, yaitu
prerenal, renal, dan postrenal (Waikar & Bonventre, 2012). Namun
penyebab AKI yang paling besar adalah prerenal, yaitu adanya
hipoperfusi darah ke ginjal (Bonventre & Yang, 2011). Hipoperfusi
darah merupakan penurunan aliran darah yang menuju ke ginjal.
Penurunan aliran darah ke ginjal ini disebabkan berbagai faktor, seperti
kehilangan volume cairan tubuh, penurunan volume efektif pembuluh
darah, redistribusi cairan, atau obstruksi renovaskuler. Hipoperfusi ini
akan menyebabkan cedera iskemia reperfusi (Lameire et al., 2007;
Roesli, 2008).
Penyebab AKI prerenal antara lain disebabkan karena
hipovolemia, gangguan fungsi jantung, peningkatan resistensi vaskular
ginjal. Penyebab AKI renal antara lain adalah adanya kelainan atau
penyakit pada parenkim ginjal, misalnya seperti glomerulonefritis dan
nekrosis tubular akut. Penyebab AKI postrenal adalah obstruksi uretra,
obstruksi kandung kemih, dan obstruksi ureter (Devarajan, 2006;
Ackay et al., 2010; Basile et al., 2012)

c. Patogenesis
Patogenesis dari AKI bersifat kompleks. Mekanisme yang
mendasari terjadinya AKI yaitu hipoperfusi. Hipoperfusi merupakan
penurunan suplai aliran darah ke ginjal (iskemia) bahkan dapat
berhenti sama sekali. Berkurangnya aliran darah tersebut menyebabkan
cedera iskemia reperfusi. Iskemia menimbulkan inflamasi pada sel
ginjal dan kembalinya aliran darah ke ginjal (reperfusi) justru
menambah kerusakan karena inflamasi yang ditimbulkan cedera ini
(Basile et al., 2012). Cedera iskemia reperfusi pada ginjalmerupakan
penyebab umum dari AKI (Mehta et al., 2011), akibat dari gangguan
pengiriman oksigen dan nutrisi serta gangguan pembuangan produk
sisa dari sel ke ginjal (Dorze et al., 2009). Adanya ketidakseimbangan
antara persediaan dan permintaan oksigen, serta akumulasi produk sisa
dapat menyebabkan epitel tubulus mengalami cedera, apoptosis dan
nekrosis dengan gangguan homeostatis air dan elektrolit serta
penurunan ekskresi metabolisme produk sisa (Bonventre & Yang,
2011).
Gambar 2.4 Patofisiologi AKI di Renal (Gandolfo, 2007)
4. Stres Oksidatif
Stres oksidatif merupakan suatu keadaan dimana terjadi
ketidakseimbangan antara pembentukan radikal bebas dan sistem
pertahanan antioksidan yang berlangsung dalam waktu yang lama (Ahmad
et al., 2013). Radikal bebas merupakan suatu gugus molekul atom atau ion
yang mempunyai satu elektron yang tidak berpasangan pada orbit atom
atau molekular terjauh dan dapat tereksistensi sendiri. Beberapa radikal
bebas dalam tubuh merupakan derivate dari oksigen yang disebut Reactive
Oxygen Species (ROS) dan derivate dari nitrogen yang disebut Reactive
Nitrogen Species (RNS). Reactive Oxygen Species (ROS) terdapat dalam
bentuk Superoxide anion (O2-), radikal hidroksil (OH-), asam hipoklorit
(HOCL-), radikal peroksil (LO2-) dan radikal alkoksil (LO-) (Puspitasari et
al., 2016; Halliwell & Gutteridg, 2007).
ROS terbentuk dari proses metabolik di dalam tubuh melalui reaksi
enzimatik yang melibatkan rantai respiratori mitokondria serta berbagai

mekanisme di organela sel yang lain yaitu lisosom dan makrosom (Sudoyo
et al., 2007; Kim & Kim, 2010). Dalam keadaan tubuh normal, ROS
berperan penting dalam berbagai proses biologis tubuh. Reactive Oxygen
Species (ROS) bersama neutrofil, monosit, makrofag dan eosinofil ikut
pada proses pertahanan terhadap mikroba yang melibatkan sel fagosit
melalui Nicitianamide Adenine Dinucleotidase Phosphate (NADPH).
Zat-zat ini mempunyai kemampuan merusak membran, DNA serta
komponen lain dari kuman. Fungsi lain dari ROS adalah mengatur
tonus vaskuler dan relaksasi sel otot polos serta menghancurkan
sel tumor. Reactive Oxygen Species (ROS) juga ikut membantu kerja
beberapa enzim seperti ribonuleoside diphosphate reductase, sitokrom
p450 dan sintesis prostaglandin. Namun ROS yang terlalu banyak akan
menimbulkan toksisitas pada sel (Ukhrowi, 2011). Peningkatan produksi
ROS dan penurunan efektivitas dari antioksidan didalam tubuh distimulasi
oleh peningkatan pengeluaran mediator inflamasi, molekul adhesi serta
akumulasi leukosit (Zhao et al., 2014).
Reactive Oxygen Species (ROS) merupakan senyawa yang tidak
mempunyai pasangan elektron dan bergerak bebas di dalam tubuh. ROS
mencapai kestabilan dengan cara menyerang molekul yang terdekat untuk
mencari pasangan elektron. ROS akan merusak bentuk dari molekul
tersebut. Akibat dari aktivitas ROS ini, komponen makromolekul sel
seperti protein, karbohidrat, lemak dan asam nukleat akan hancur sehingga
menyebabkan integritas sel terganggu dan sel mengalami apoptosis atau
nekrosis (Chapple et al., 2007; Kim & Kim, 2010). Stres oksidatif
mengakibatkan terjadinya kerusakan histologis sel-sel pada ginjal yang
mendasari terjadinya acute kidney injury (AKI) serta berbagai komplikasi
lain dari AKI seperti gangguan kardiovaskuler, endokrin metabolik,
penyakit pulmoner, penyakit autoimun, keganasan, dan penuaan (Sudoyo
et al., 2007).
Mekanisme kerusakan sel atau jaringan akibat serangan radikal
bebas yang paling awal diketahui dan terbanyak diteliti adalah peroksidasi
lipid. Peroksidasi lipid paling banyak terjadi di membran sel, terutama
asam lemak tidak jenuh yang merupakan komponen penting penyusun
membran sel. Membran sel kaya akan sumber poly unsaturated fatty acid
(PUFA), yang mudah dirusak oleh bahan-bahan pengoksidasi; proses
tersebut dinamakan peroksidasi lemak. Hal ini sangat merusak karena
merupakan suatu proses berkelanjutan (Sinaga, 2016)
Peroksidasi membran lipid menjadi dasar hilangnya integritas sel-
sel pada ginjal. Hal ini mengakibatkan membran sel mengalami kerusakan
dan sel mengalami nekrosis. Peroksidasi membran lipid menyebabkan
perubahan pada sel, seperti peningkatan permeabilitas membran sel,
penurunan transport kalsium dalam retikulum sarkoplasma, gangguan
fungsi dari mitokondria dan enzim, serta pembentukan metabolit toksik
(Lieberman M & Marks, 2009) . Peroksidasi lipid ini terdiri dari empat
fase yang dijelaskan lebih lanjut oleh gambar berikut. (Candrawati, 2013)
Gambar 2.5 Mekanisme Peroksidasi Lipid (Candrawati, 2013)
Fase I disebut fase inisiasi, pada fase ini ROS menyerang membran
lipid yang berupa PUFA dan kemudian membentuk lipid radical (L.). Fase
II disebut propagasi, pada fase ini terjadi reaksi antara lipid radical dengan
oksigen untuk membentuk suatu lipid peroxy radical (LOO.) dan lipid
peroxide (LOOH). Fase III disebut dengan fase degradasi, pada fase ini
terjadi degradasi produk fase II menjadi aldehid aktif seperti
Malondialdehida (MDA) dan ethane atau pentane. Fase terakhir disebut
fase terminasi, yaitu fase dimana terjadi terminasi reaksi oleh antioksidan
baik endogen maupun eksogen (Candrawati, 2013).

5. Superoxide Dismutase (SOD)
Tubuh memiliki kemampuan untuk melakukan pertahanan
melawan radikal bebas dengan menggunakan enzim-enzim antioskidan
seperti Superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase
(Ighodaro & Akinloye, 2018). Antioksidan tersebut secara umum bekerja

dengan cara menambahkan elektron ke radikal bebas kemudain
mengubahnya menjadi netral (Baradaran et al., 2015). Superoxide
dismutase (SOD) meruapakan enzim detoksifikasi pertama dan
antioksidan paling kuat dalam sel. SOD Ini adalah enzim antioksidan
endogen penting yang bertindak sebagai komponen sistem pertahanan lini
pertama terhadap spesies oksigen reaktif (ROS) (Ighodaro & Akinloye,
2018). Aktivitas SOD tertinggi ditemukan di hati, ginjal, darah, kelenjar
adrenalin, limfa, pankreas, otak, paru-paru, lambung, usus, ovarium dan
timus (Murray et al., 2015).

SOD merupakan salah satu antioksidan endogen yang mempunyai
fungsi untuk mengatalisis reaksi dismutasi radikal bebas anion superoksida
(O2-) menjadi hidrogen peroksida (H2O2) dan molekul oksigen (O2) (Birben
et al., 2012). SOD berperan dalam mengikat radikal bebas dan
mengubahnya menjadi bentuk yang tidak berbahaya (Otitoju et al., 2008).
SOD berperan
merubah superoxide
anion menjadi hidrogen peroksida (H2O2) dan oksigen (O2). Hidrogen
peroksida kemudian dirubah menjadi Oksigen (O2) dan air (H2O) oleh
katalase di peroksisom sel atau oleh glutathione peroxidase di mitokondria
sel (Mohammedi et al., 2014).

Superoxide dismutase pertama kali ditemukan oleh McCord &
Fridovich pada tahun 1969. Aktivitas SOD menggunakan oksigen dan
melawan kerusakan sel yang diakibatkan oleh oksigen. Pada manusia
terdapat tiga isoform SOD yang diekspresikan oleh gen yang berbeda dan
diklasifikasikan berdasarkan kofaktor logamnya. SOD1 (copper-zinc
superoxide dismutase, Cu-Zn SOD) berada di sitoplasma. SOD1
merupakan isoform yang utama dan hampir terdapat di semua sel termasuk
pembuluh darah. SOD2 (manganese superoxide dismutase, Mn-SOD)
terutama ditemukan di dalam membran mitokondria. SOD2 merupakan
isoform yang sangat aktif di ginjal manusia. SOD2 merupakan pertahanan
lini pertama melawan radikal superoxide (O2-), karena rantai transport
elektron mitokondria merupakan sumber utama O2- pada kondisi normal.
SOD3 (extracellular superoxide dismutase, EC-SOD) merupakan enzim
antioksidan ekstraseluler yang utama. SOD 3 diproduksi oleh sel otot
polos vaskuler dan terlokalisasi pada dinding pembuluh darah, yaitu antara
endotel dan sel otot polos. SOD3 merupakan isoform yang paling banyak
ditemukan di glomerulus. Distribusi enzim SOD1 secara imunositokimia
berhasil dilokalisasi pada inti dan sitoplasma sel epitel tubuli proksimalis,
ruang ekstraseluler dan kapiler dari glomerulus. SOD1 dan SOD 3
merupakan penentu utama biovailabilitas nitric oxide (NO) di pembuluh
darah. NO berfungsi sebagai vasodilator pembuluh darah. Jika terjadi
penurunan NO dapat menyebabkan terganggunya mekanisme vasodilatasi
pembuluh darah. Penurunan SOD1 dan SOD3 dapat mengakibatkan
peningkatan jumlah superoxide di mikrovaskuler glomerulus (Fujita et al.,
2009; Mohammedi et al., 2014).

6. Ischemia Reperfusion Injury (IRI), Stres Oksidatif dan Superoxide
Dismutase (SOD)
Ischemia Reperfusion Injury terjadi karena hipoperfusi jaringan
yaitu penurunan suplai aliran darah yang diikuti dengan kembalinya aliran
darah ke jaringan tersebut. IRI pada ginjal menyebabkan kerusakan sel-sel
ginjal yang membuat terjadinya proses inflamasi pada jaringan ginjal.
Pada saat hipoperfusi, IRI menstimulasi peningkatan pengeluaran mediator
inflamasi seperti TNF-α, IL-18, IFN-γ yang meningkatkan akumulasi
leukosit seperti neutrofil dan monosit. Selain itu juga terdapat peningkatan
molekul adhesi seperti ICAM-1 dan VCAM-1 yang menyebabkan
peningkatan perlekatan leukosit pada dinding endotel. Peningkatan
mediator inflamasi seperti TNF-α dan IL-18 meningkatkan ekspresi dari
ICAM-1 dan P-selectin dari sel endotel, sehingga terdapat perlekatan sel
radang terutama sel netrofil yang menyebabkan proses inflamasi. (Sudoyo
et al., 2007; Kim & Kim, 2010; Zhao et al., 2014).

Proses inflamasi tersebut meningkatkan terbentuknya stres
oksidatif sehingga mengakibatkan terjadinya kerusakan histologis ginjal
yang mendasari terjadinya berbagai manifestasi pada AKI seperti
gangguan kardiovaskuler, endokrin metabolik, penyakit pulmoner,
penyakit autoimun, keganasan, dan penuaan (Sudoyo et al., 2007).
Superoxide dismutase merupakan enzim yang berperan dalam pertahanan
endogen melawan stres oksidatif akibat produksi radikal bebas yang
berlebih, dengan cara mengkonversi superoxide (O2-) menjadi hydrogen
peroxide (H2O2) yang kemudian didegradasi menjadi air dan molekul
oksigen oleh catalase dan glutathione peroxidase (Peixoto, 2009).
Superoxide dismutase merupakan parameter yang sering digunakan untuk
mengukur aktivitas antioksidan di dalam tubuh (Rehman et al., 2016;
Sukketsiri et al., 2016).

7. Seledri (Apium graveolens L.)
a. Taksonomi
Seledri mempunyai taksonomi sebagai berikut (Fazal dan
Singla, 2012):
Kerajaan : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Subdivisi : Angiospermae
Kelas : Magnolisia
Sub-kelas : Rosidace
Ordo : Apiacedes
Famili : Apiaceae
Genus : Apium
Spesies : Apium graveolens
Nama binomial : Apium greveolens Linn
b. Penamaan
Terdapat beberapa penamaan seledri yaitu Celery (Inggris),
Celeri (Perancis), Seleri (Italia), Selinon, Parsley (Jerman), Saladri,
Seleri, dan Sederi (Jawa) (Hariana, 2006).
c. Habitat dan distribusi

Seledri merupakan tanaman hortikultura yang dapat tumbuh
dengan baik di dataran yang tinggi, terutama daerah yang mempunyai
hawa sejuk. Seledri berasal dari daerah subtropik Eropa dan Asia, yang
ditemukan pada ketinggian di atas 900 m di atas permukaaan laut
(Dalimartha, 2009). Di Indonesia daerah yang banyak ditanami seledri
yaitu Cipanas, Pangalengan, dan Bandungan (Sunarjono, 2003).

d. Morfologi
Seledri merupakan herba tegak, tinggi sekitar 50 cm dengan
bau aromatik yang khas, batang persegi, beralur, beruas, tidak
berambut, bercabang banyak, berwarna hijau pucat. Daun majemuk
menyirip ganjil dengan anak daun 3-7 helai. Anak daun bertangkai
panjangnya 1-2,7 cm, petualangan menyirip, berwarna hijau keputih-
putihan. Bunga majemuk berbentuk payung, 8-12 buah, kecil-kecil,
berwarna putih mekar secara bertahap. Buahnya kotak, berbentuk

kerucut, panjang 1-1,5 mm, dan berwarna hijau kekuningan
(Dalimartha, 2009).
Gambar 2.6. Seledri (Apium graveolens L.) (Fazal & Singla, 2012)
e. Kandungan dan Senyawa Aktif
Seledri mengandung air dengan jumlah paling banyak yaitu
95%, selain itu seledri juga kaya akan vitamin C dan serat. Seledri
merupakan sumber dari kalium, asam folat, vitamin B6, vitamin B1,
vitamin B2 dan kalsium yang sangat baik. Seledri mengandung lebih
banyak natrium daripada sayuran lain yang diimbangi dengan kadar
kalium yang tinggi pula. Satu batang seledri (sekitar 20 cm)
mengandung kira-kira 32 mg natrium dan 104 mg kalium, tetapi hanya
mengandung 6 kalori (U.S. Department of Agriculture, 2012)

Kandungan senyawa yang terdapat pada seledri antara lain :
1) Flavonoid
Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang ditemukan
sebagai metabolit sekunder pada tanaman. Flavonoid merupakan

polifenol yang terdapat pada bagian daun, bunga dan biji seledri
(Yusni & Puteh, 2014).

Berbagai macam aktivitas farmakologi telah diketahui
dimiliki oleh senyawa flavonoid, seperti antioksidan, antiinflamasi,
dan antikanker (Mahapatra et al., 2015). Flavonoid memiliki
struktur kimia yang mengandung dua cicin aromatik fenil (α,β) dan
sebuah cincin heterosiklik (Orlikova et al., 2011). Flavonoid
tersusun dalam sebuah rantai C6-C3-C6. Struktur rantai tersebut
yang membuat senyawa flavonoid mampu mendonasikan atom
hidrogennya sehingga senyawa ini memiliki fungsi berupa
antioksidan (Redha, 2010). Selain efek antioksidan, flavonoid juga
mempunyai efek protektif terhadap penyakit kanker (Fantini et al.,
2015; Farzaei et al., 2016), penyakit gangguan gastrointestinal
(Jain, 2015), penyakit epilepsy (Diniz et al., 2015), penyakit
Alzheimer (Spinello et al., 2016), dan penyakit neurodegeneratif
yang lain (Bell et al., 2015). Vaya et al., (2017) menyebutkan
bahwa flavanoid dalam seledri menunjukkan adanya aktivitas
nefroprotektif.
Mekanisme kerja flavonoid sebagai antioksidan untuk
menurunkan keadaan stres oksidatif yaitu dengan cara
mendonorkan ion hidrogen atau elektron kepada anion superoksida
sehingga melindungi lipoprotein, protein, dan DNA dari oksidasi
(Rahmawati et al., 2014). Flavonoid dapat diklasifikasikan menjadi
beberapa senyawa yaitu flavonol, flavon, isoflavon, flavanon,
flavanol, dan antosianidin (Perez-cano dan Margarida, 2016)

2) Apigenin
Apigenin merupakan salah satu subkelas dari flavonoid
yang diperoleh dari daun Apium graveolens. Banyak penelitian
yang telah menyatakan bahwa apigenin mempunyai aktivitas
biologis yang luas, termasuk sebagai antikanker, antivirus,
antibakteri, antioksidan dan antiinflamasi (Kanazawa et al., 2006;
Gupta et al., 2002)
Apigenin didistribusikan ke berbagai jaringan setelah
dikonsumsi. Apigenin dapat melindungi relaksasi endotelium pada
tikus terhadap stress oksidatif (Jin et al., 2009). Konsumsi apigenin
dalam jangka waktu pendek dapat meningkatkan enzim
antioksidan dan superoksida dismutase (Meyer et al., 2006). Dalam
penelitian yang dilakukan dengan tikus, apigenin mempunyai efek
proteksi terhadap jantung yang mengalami cedera iskemia
reperfusi (Jing et al., 2014).
3) Glikosida Iridoid
Glikosida iridoid adalah senyawa yang didapatkan dalam
ekstrak Apium graveolens. Kandungan metabolit sekunder seperti
glikosida iridoid berpotensi sebagai antioksidan (Venkatachalam et
al., 2011; Kensa, 2011). Penelitian oleh Mesia-vela (2004)
menyatakan bahwa iridoid juga mempunyai sifat sebagai
antiinflamasi. Glikosida iridoid mempunyai efek antiinflamasi
dengan menghambat ekspresi tumor necrosis factor-α (TNF-α) dari
makrofag.
4) Tannin
Tannin merupakan senyawa flavonoid yang dapat
ditemukan pada tumbuhan dan memiliki sifat lipofilik. Tannin
merupakan senyawa fenol dengan antioksidan kuat dibandingkan
dengan senyawa fenol berat molekul rendah lainnya (Amarowicz,
2007). Mekanisme antioksidan tersebut didapatkan dari aktivitas
tannin sebagai scavenger radikal bebas dan kemampuannya
sebagai chelator transisi logam, khususnya Fe(II) dan Cu(II)
(Karamać, 2009). Aktivitas tannin dalam ekstrak seledri dapat
mencegah terjadinya stres oksidatif yang merupakan gangguan
keseimbangan antara produksi oksidan dan antioksidan dengan
konsumsi radikal bebas (Sukandar et al., 2006). Selain itu, tannin
dalam seledri juga memiliki efek sebagi antikanker dan
antimikroba (Hayati et al., 2010).

5) Alkaloid
Alkaloid mempunyai efek sebagia antibakteri dengan cara
mengganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri,
sehingga dinding sel bakteri tidak terbentuk secara utuhdan
menyebabkan kematian sel bakteri tersebut.

Selain itu alkaloid juga berperan sebagai antikanker karena
kemampuannya dalam menghambat proliferasi sel dan
menginduksi terjadinya penuaan pada sel kanker sehingga tidak
terjadi pertumbuhan pada sel kanker. Alkaloid menghambat
ekspresi hTERT yang dikeluarkan oleh sel kanker sehingga dapat
menimbulkan efek penuaan pada sel tersebut (Kabashima et al.,
2010). Luliana et al., (2017) menyebutkan bahwa alkaloid
memiliki efek antiinflamasi dengan cara menekan pelepasan

histamin oleh sel mast, mengurangi sekresi IL-1 oleh monosit dan
PAF pada platelet.

6) Saponin
Saponin dalam ekstrak seledri (Apium graveolens L.)
berkontribusi dalam mencegah proses inflamasi (Rotelli et al.,
2003). Saponin berasal dari bahasa latin yang berarti sabun karena
berkaitan dengan sifatnya yang menimbulkan busa jika dikocok
dalam air (Osbourn, 2003). Mekanisme kerja dari saponin
dalam penyembuhan luka adalah menstimulasi
pembentukan kolagen tipe 1 yang berperan penting
dalam proses penutupan luka dan meningkatkan
epitelisasi jaringan (Miladiyah & Prabowo, 2012).
Saponin juga dapat meningkatkan aktivitas
antimikroba, antioksidan dan mempercepat migrasi
sel epitel (Bone & Mills, 2013). Kim et al. (2011)
menyebutkan bahwa saponin mempunyai efek antiinflamasi dengan
menurunkan produksi TNF-α melalui penghambatan aktivasi NF-
κB.
8. Keterkaitan antara IRI, SOD dan Seledri.
Penyebab AKI paling utama yaitu karena hipoperfusi darah ke
ginjal (Bonventre & Yang, 2011). Hipoperfusi jaringan menyebabkan
ischemia reperfusion injury. IRI pada ginjal menyebabkan ginjal
mengalami serangkaian respon inflamasi dan kerusakan lokal pada tubulus
ginjal sehingga menurunkan fungsi dari ginjal (Dorweiler et al., 2007).
Proses inflamasi pada jaringan ginjal ini kemudian meningkatkan
terbentuknya stres oksidatif. Stres oksidatif mengakibatkan terjadinya

kerusakan histologis pada ginjal yang mendasari terjadinya acute kidney
injury (AKI) (Sudoyo et al., 2007).

Antioksidan mempunyai kemampuan mengurangi stres oksidatif.
Jenis-jenis Antioksidan tersebut antara lain superoxide dismutase (SOD),
glutathione peroxidase (GPxs) dan catalase (CAT) (Verma et al., 2013).
Superoxide dismutase merupakan enzim yang berperan dalam pertahanan
endogen melawan stres oksidatif akibat produksi radikal bebas yang
berlebih (Peixoto, 2009). Superoxide dismutase merupakan parameter yang
sering digunakan untuk mengukur aktivitas antioksidan di dalam tubuh
(Rehman et al., 2016; Sukketsiri et al., 2016).

Salah satu tanaman yang memiliki potensi sebagai antioksidan
adalah seledri (Apium graveolens L.) (Duke, 2010). Selain itu, seledri juga
mempunyai kemampuan sebagai antiseptik, antihelmintik, antiinflamsi,
dan antikanker (Baananou et al., 2012). Seledri mengandung banyak
senyawa metabolit sekunder antara lain flavonoid, glikosida iridoid,
alkaloid serta saponin (Faizal & Iskandar, 2018; Rehman et al., 2016;
Sukketsiri et al., 2016; Jung et al., 2011). Kandungan dari seledri tersebut
diharapkan dapat meningkatkan sistem pertahanan antioksidan dalam
melawan stres oksidatif (Rehman et al., 2016; Basile, 2007). Penelitian
Afifah et al. (2019) menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanol seledri
dosis 1000 mg/kgBB selama 14 hari sebelum dan 3 hari setelah pembuatan
model AKI dapat mencegah peningkatan kadar SOD tikus. Belum pernah
dilakukan penelitian mengenai efek lama waktu pemberian ekstrak etanol
seledri terhadap kadar SOD tikus model IRI. Berdasarkan uraian tersebut,
maka peneliti tertarik untuk meneliti efek lama waktu pemberian ekstrak
etanol seledri (Apium graveolens L.) terhadap pencegahan penurunan
kadar SOD ginjal pada tikus model IRI dengan mempertimbangkan fase-
fase yang terjadi pada AKI, sehingga diharapkan tidak berlanjut menjadi
CKD.
B. Kerangka Teori Penelitian
Hilum Renalis Ekstrak Etanol Seledri
Klem Hilum Renalis
Glikosida
Iridoid
Hipoperfusi jaringan
Alkaloid
Ischemia Reperfusion Injury

Saponin
Kerusakan sel-sel ginjal
Flavonoid
Molekul
Adhesi Mediator
Inflamasi
Tanin Apigenin
Leukosit
Inflamasi Peroksidase
ROS DPPH lipid
ROS SOD
Stres Oksidatif
AKI
: Mempengaruhi
: Menghambat
Gambar 2.7 Kerangka Teori Penelitian.
C. Kerangka Konsep Penelitian
Kontrol sehat
Kontrol sakit.
Pemberian ekstrak etanol Kadar Superoxide

seledri (Apium graveolens L.) Dismutase
Pemberian
dosis ekstrak etanol
1000 mg/KgBB pada
seledri (Apium
tikus putih graveolens
model L.)
IRI selama
dosis 1000 mg/KgBB pada
7 hari sebelum pembuatan
tikus putih model
model IRI selama
IRI.
model IRI.
Pemberian ekstrak etanol
seledri (Apium graveolens L.)
dosis 1000 mg/KgBB pada
tikus putih model IRI selama
model IRI.
Gambar 2.8 Kerangka Konsep Penelitian.
D. Hipotesis
Lama waktu pemberian ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.)
berpengaruh terhadap pencegahan penurunan kadar superoxide dismutase
tikus putih (Sprague dawley) model IRI.
III. METODE PENELITIAN

A. Materi dan Bahan
1. Hewan coba
Hewan coba yang digunakan berupa tikus putih (Rattus
norvegicus) jantan galur Sprague dawley sebanyak 30 ekor dengan berat
badan 190-210 gram, usia berkisar 2-3 bulan dan sehat. Hewan coba
diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Terapi Universitas Gajah
Mada.
Hewan coba diaklimatisasi selama 7 hari. Setiap kelompok hewan
coba ditempatkan dalam kandang masing-masing dengan bentuk, ukuran,
dan bahan yang sama serta masing-masing hewan coba akan mendapat
makanan dan minuman dengan jenis, jumlah, dan komposisi yang sama
secara ad libitum (Willems, 2009). Tikus putih dipelihara dalam suhu 22±3
°C dan kelembapan 30% serta memperoleh pencahayaan (siklus gelap-
terang selama 12 jam) yang cukup (Kusumawati, 2004).

Faktor perancu penelitian dikontrol dengan menggunakan kriteria
inklusi dan eksklusi sebagai berikut:

a. Kriteria inklusi
1) Berat badan tikus 190-210 gram.
2) Usia 2-3 bulan
3) Jenis kelamin jantan
4) Sehat, aktif dan tidak memiliki kelainan struktur anatami (cacat)
b. Kriteria eksklusi
1) Tikus yang sakit selama aklimatisasi
2) Peningkatan dan penurunan berat badan lebih dari 10%
2. Alat dan Bahan
a. Alat
1) Kandang hewan coba dengan tempat pakan dan minum berukuran
60 x 30 x 30 cm berbahan stainless steel.

2) Timbangan digital, skala 0-2000 gram merk Sweet Scale Oxone
OX-211 diproduksi oleh PT Oxone Indonesia.

3) Timbangan digital, skala 0,00000-100,0000 gram merk Dragon 303
Precision Balance-AAR 3231 diproduksi Mettler Toledo Group.

4) Spidol Snowman Permanent Marker warna hitam
5) Bulldock klem
6) Minor set merk Weiss Germany
7) Pinset
8) Botol air minum
9) Alat sonde oral nomor 18 G stainless steel dengan ball tripped
needle
10) Sarung tangan
11) Spuit Terumo Syringe with needle 3 cc
12) Gelas kimia
13) Labu Erlenmeyer
14) Batang pengaduk
15) Gelar ukur 100 cc
16) Mikropipet 100 µl Fit merk Accumax pro diproduksi PT Endo
Indonesia
17) Mikropipet 1000 µl Fit merk Accumax pro diproduksi PT Endo
Indonesia
18) Pipet tetes
19) Tabung eppendorf
20) Tabung vakum vacutainer
21) Rak tabung reaksi
22) Pipet kapiler hematokrit
23) Tabung mikrosentrifuse
24) Laboratory Centrifuge Lab Medical Practice 4000 rpm
25) Spektofotometer
b. Bahan
1) Tanaman seledri (Apium graveolens L.) yang diperoleh dari Desa
Pratin, Kecamatan Karangreja, Kabupaten Purbalingga, Jateng.

2) Bahan ekstraksi daun seledri (Apium graveolens L.) berupa etanol
96%.
3) Kapas
4) Bahan pakan tikus standar 551 (pellet)
5) Anestesi ketamin
6) Akuades
7) EDTA 10 %
8) Reagen BPA (Bradford Protein Assay)
B. Metode Penelitian
Metode yang dipakai dalam penelitian ini adalah metode experimental
dengan post test only with control group design dengan hewan coba berupa
tikus putih Sprague dawley. Hewan dibagi menjadi 5 kelompok, yaitu
kelompok A, B, C, D, dan E dengan kelompok A sebagai kontrol sehat,
kelompok B sebagai kontrol sakit, sedangkan kelompok C, D, dan E
merupakan kelompok perlakuan yang akan diberi ekstrak etanol daun seledri
dosis tetap 1000 mg/kgBB tikus/hari dengan lama waktu pemberian 7 hari
sebelum pembuatan model IRI, 14 hari sebelum pembuatan model IRI, dan 28
hari sebelum pembuatan model IRI.

C. Rancangan Percobaan dan Pengambilan Sampel
Pemilihan hewan coba didasarkan pada kriteria inklusi kemudian
dikelompok secara random menggunakan Completed Randomized Design
(CRD) menjadi lima kelompok, yaitu kelompok A, B, C, D, dan E dengan
tikus dibagi menjadi 5 kelompok, yaitu 1 kelompok kontrol sehat, 1 kelompok
kontrol sakit, dan 3 kelompok perlakuan, masing-masing kelompok perlakuan
terdiri atas 6 ekor tikus. Setelah penimbangan dan pengelompokan selesai
dilakukan, diberikan label dengan tanda secara berurutan pada pangkal ekor
tikus.
Tikus diaklimatisasi selama tujuh hari dengan menempatkan hewan
coba pada kandang dengan ukuran 60 x 30 x 30 cm, tikus mulai diberi
perlakuan yaitu penyondean ekstrak seledri dengan dosis tetap pada masing-
masing kelompok selama 7 hari, 14 hari dan 28 hari kemudian dilakukan
pembedahan untuk dibuat ischemia reperfusion injury kemudian dilakukan
terminasi. Perlakuan diberikan dengan ketentuan sebagai berikut :

1. Kelompok A : yaitu kontrol sehat, hewan coba diberikan akuades tanpa
diberi ekstrak etanol seledri kemudian dibedah tetapi tidak tidak dilakukan
klem pada arteri dan vena renalis.

2. Kelompok B : yaitu kontrol sakit, hewan coba diberikan akuades tanpa
diberi ekstrak etanol seledri kemudian hewan coba dibedah dan dibuat
model ischemia/ reperfusion injury.

3. Kelompok C : hewan coba diberi ekstrak etanol seledri (Apium graveolens
L.) dosis 1000 mg/kgBB selama 7 hari kemudian dibedah dan dibuat
model ischemia/ reperfusion injury (hari ke-8).

4. Kelompok D : hewan coba diberi ekstrak etanol seledri (Apium graveolens

5. Kelompok E : hewan coba diberi ekstrak etanol seledri (Apium graveolens

Penentuan dosis pada penelitian ini berdasarkan penelitian Afifah et
al. (2019), tentang efek protektif ekstrak seledri terhadap kerusakan ginjal
pada tikus model ischemia/ reperfusion injury yaitu menggunakan dosis 250
mg/kgBB, 500 mg/kgBB, dan 1000 mg/kgBB tikus per hari. Dosis paling
efektif dalam pemberian ekstrak etanol seledri adalah 1000 mg/kgBB tikus
per hari. Pemberian ekstrak etanol seledri dilakukan selama 7 hari, 14 hari
dan 28 hari yang didahului dengan aklimatisasi selama 7 hari kemudian
dilanjutkan pembedahan pada hari ke-8, hari ke-15, dan hari ke-29 dan
kemudian dilakukan terminasi. Selama proses perlakuan, berat badan hewan
coba selalu ditimbang tiap minggunya untuk menyesuaikan dosis.

Jumlah hewan coba untuk masing-masing kelompok diperoleh dari
rumus Federer sebagai berikut (Federer, 1977)
(t-1)(n-1) > 15
Keterangan:
t = jumlah perlakuan
n = jumlah sampel
Penelitian ini membagi hewan coba menjadi 5 kelompok (2 kelompok
kontrol dan 3 kelompok perlakuan), sehingga perhitungan hewan coba untuk
masing-masing kelompok adalah:
(t-1)(n-1) > 15
(5-1)(n-1) > 15
4(n-1) > 15
4n – 4 > 15
4n > 19
n > 4,75 (dibulatkan menjadi 5)
Berdasarkan perhitungan rumus Federer tersebut, didapatkan bahwa
tiap perlakuan membutuhkan 5 pengulangan (nilai n > 5), jumlah pengulangan
perlakuan per kelompok menjadi 5 ekor tikus (Federer, 1977; Jasda et al.,
2014). Namun untuk mengantisipasi hilangnya unit eksperimen maka
dilakukan koreksi dengan rumus:
N = n/(1-f)
Keterangan:
N = Besar sampel koreksi
n = Besar sampel awal
f = Perkiraan proporsi drop out sebesar 10%
Sehingga,
N = n/(1-f)
N = 5/(1-10%)
N = 5/(1-0,1)
N = 5/0,9
N = 5,55 (dibulatkan menjadi 6)
Berdasarkan perhitungan tersebut, maka jumlah hewan coba menjadi 6
ekor per kelompok, sehingga total jumlah hewan coba tikus dalam penelitian
adalah 30 ekor tikus.
D. Variabel yang diukur

Tabel 3.1 Variabel dan Definisi Operasional
Variabel Definisi Operasional Nilai Skala

Data
Bebas Ekstrak Etanol Ekstrak yang berasal Jumlah hari Kategorik
Seledri dari bagian tanaman pemberian - Ordinal
(Apium seledri (batang dan
graveolens daun.) menggunaka
L.) pelarut etanol 96%
dengan teknik
maserasi dan
diberikan dalam dosis
1000 mg/kgBB
Terikat Kadar Kadar SuperoxideP unit/ml Numerik –

Superoxide Dismutase diukur dari Rasio
Dismutase serum darah tikus
putih, ditambahkan
reagen BPA dan H2O,
diukur dengan
spektofotometer
dengan panjang
gelombang 595 nm
E. Cara Mengukur Variabel
Pengukuran SOD menggunakan metode Spektrofotometri Ransod.
Adapun cara mengukur variabel SOD adalah (Rahmawati et al., 2014)

1. Pengambilan sampel darah tikus perlakuan 1, 2, 3, 4 dan 5 sesuai jadwal
yang telah ditentukan

2. Pengambilan sampel darah tikus dilakukan dengan menggunakan pipet
kapiler hematokrit yang diambil melalui vena pada pembuluh darah di
mata (periorbital).
3. Sampel darah dimasukkan kedalam tabung mikrosentrifuse.
4. Sampel darah yang telah terkumpul disentrifuse selama 20 menit dengan
kecepatan 6000 rpm.

5. Setelah terpisah antara serum dan korpuskula, keduanya dipisahkan pada
tabung mikrosentrifuse yang berbeda.

6. Serum sebanyak 20 μl serum ditambahkan reagen BPA (Bradford Protein
Assay) sebanyak 200 μl dan H 2O 780 μl. Blanko yang digunakan
adalah 800 μl H2O.

7. Pembacaan absorbansi dilakukan menggunakan spektrofotometer dengan
panjang gelombang 595 nm.

8. Didapatkan konsentrasi enzim Superoxide Dismutase (SOD) serum sampel
darah tikus.
F. Tata Urutan Kerja
1. Persiapan hewan coba
Hewan coba berupa tikus putih (Rattus norvegicus) jantan galur
Sprague dawley sebanyak 30 ekor ditimbang terlebih dahulu
menggunakan timbangan, kemudian diperiksa adanya kelainan atau cacat
anatomis pada hewan coba untuk memastikan bahwa hewan coba tersebut
masuk ke dalam kriteria inklusi. Setelah itu dilakukan aklimatisasi selama
7 hari. Setiap hewan coba memperoleh makanan dan minuman dengan
jenis, jumlah, dan komposisi yang sama. Tikus putih dipelihara dalam
suhu ruangan dan dengan kelembapan yang sama.

2. Pembuatan ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.)
Pembuatan ekstrak seledri (Apium graveolens L.) dengan pelarut
etanol 96%melalui tahapan, sebagai berikut:

a. Bahan dicuci menggunakan air mengalir untuk menghilangkan kotoran
setelah dimaserasi.
b. Seledri (Apium graveolens L.) dijemur selama + 2 hari hingga daun
kering seperti keripik.

c. Pengovenan seledri (Apium graveolens L.) pada suhu 50+1 oC.
d. Simplisia seledri (Apium graveolens L.) dijadikan serbuk
menggunakan grinde.
e. Serbuk kering seledri (Apium graveolens L.) seberat 500 gram
dimaserasi dalam 2 liter etanol 96%, kemudian didiamkan 24 jam.

f. Bahan ekstrak didiamkan kembali selama 24 jam, dilanjutkan
penyaringan, dan diperas sebanyak 2 kali.

g. Hasil penyaringan yang pertama dicampur dengan hasil penyaringan
yang kedua.
h. Sari etanol 96% pada hasil pencampuran antara penyaringan akan
diuapkan menggunakan evaporator sehingga diperoleh ekstrak seledri
(Apium graveolens L.) yang murni.

3. Pengelompokan hewan coba
Sebanyak 30 hewan coba dikelompokkan menjadi 5 kelompok,
yaitu A, B, C, D, dan E. Masing-masing kelompok terdiri dari 6 ekor
hewan coba. Kelompok A merupakan kontrol sehat, kelompok B
merupakan kontrol sakit, sedangkan kelompok C, D, dan E merupakan
kelompok perlakuan. Untuk membedakan setiap kelompok, maka masing-
masing kelompok diberi tanda dengan menandai ekor tikus menggunakan
spidol.
a. Kelompok A : Hewan coba inti diberi 1-5 titik hitam dan hewan coba
cadangan diberi 1 titik merah pada pangkal ekor dengan Snowmann
permanent marker.
b. Kelompok B : Hewan coba inti diberi 1-5 titik hitam dan hewan coba
permanent marker.
c. Kelompok C : Hewan coba inti diberi 1-5 titik hitam dan hewan coba
permanent marker.
d. Kelompok D : Hewan coba inti diberi 1-5 titik hitam dan hewan coba
permanent marker.
e. Kelompok E : Hewan coba inti diberi 1-5 titik hitam dan hewan coba
permanent marker.
4. Perlakuan hewan coba
Tahap pemberian perlakuan hewan coba pada tiap kelompok
dilakukan berdasarkan aturan sebagai berikut :

a. Kelompok A : yaitu kontrol sehat, hewan coba diberikan akuades tanpa
diberi ekstrak etanol seledri kemudian dibedah tetapi tidak dilakukan
klem pada arteri dan vena renalis.

b. Kelompok B : yaitu kontrol sakit, hewan coba diberikan akuades tanpa
diberi ekstrak etanol seledri kemudian hewan coba dibedah dan dibuat
model ischemia/ reperfusion injury.

c. Kelompok C : hewan coba diberi ekstrak etanol seledri (Apium
graveolens L.) dosis 1000 mg/kgBB selama 7 hari kemudian dibedah
dan dibuat model ischemia/ reperfusion injury (hari ke-8).

d. Kelompok D : hewan coba diberi ekstrak etanol seledri (Apium

e. Kelompok E : hewan coba diberi ekstrak etanol seledri (Apium

5. Pembentukan tikus model ischemia reperfusion injury
Proses pembuatan tikus model ischemia reperfusion injury pada
tikus putih (Rattus norvegicus) dilakukan dengan menggunakan teknik
Ischemia reperfusion induced ARF (Singh et al., 2012). Hewan coba
dianestesi menggunakan ketamin secara intramuscular pada pangkal paha
tikus putih. Setelah anestesi bekerja, hewan coba diletakkan pada papan
lilin, dicukur bulu pada bagian abdomen anterior, kemudian didesinfeksi.
Insisi abdomen dilakukan pada kelompok A, B, C, D, dan E. Insisi
dilakukan sesuai linea mediana dengan menggunakan scalpel. Selanjutnya
pada kelompok B, C, D, dan E diekplorasi rongga abdomen untuk mencari
arteri dan vena renalis yang berada di hilus renalis. Arteri dan vena renalis
dekstra dan sinistra di klem menggunakan non-traumatic vascular clamp
selama 45 menit, lalu klem dilepas. (Damianovich et al., 2006; Lieberthal
& Levine, 1996). Pengekleman selama 45 menit dinilai lebih sesuai dan
lebih banyak digunakan pada hewan untuk menyimulasikan perubahan
hemodinamik fungsi renal pada manusia (Singh et al., 2012). Tahap
terakhir, luka insisi kelompok A, B, C, D, dan E ditutup kembali dengan
cara dijahit.
6. Pengambilan sampel
Semua hewan coba (kelompok A, B, C, D dan E) diambil darahnya
melalui sinus retro-orbitalis. Darah (whole blood) disentrifugasi 6000 rpm
selama 20 menit untuk mendapatkan serum, serum yang terbentuk
dipisahkan dari endapan sel-sel darah dengan menggunakan pipet ukuran

100 μL.Serum yang diambil kemudian dimasukkan ke dalam tabung
Eppendorf.
7. Pengukuran kadar SOD
Pengukuran kadar SOD dilakukan dengan menambahkan serum
sebanyak 20 μl dengan reagen BPA (Bradford Protein Assay) sebanyak
200 μl dan H2O 780 μl. Blanko yang digunakan adalah 800 μl H 2O.
Pembacaan absorbansi dilakukan menggunakan Spektrofotometer dengan
panjang gelombang 595 nm. Konsentrasi enzim superoxide dismutase
(SOD) serum sampel darah tikus dinyatakan dengan satuan unit/ml.
8. Dokumentasi
Dokumentasi data dan foto terkait pengukuran kadar superoxide
dismutase pada tikus putih jantan.

9. Pengolahan dan analisis data
Pengolahan dan analisis data hasil penelitian dilakukan dengan
menggunakan perangkat lunak komputer.
G. Analisis Kerja
1. Analisis Univariat
Analisis univariat dilakukan dengan penyusunan statistik deskriptif
terhadap variabel-variabel yang diukur. Hasil analisis dicantumkan dalam
bentuk rerata dan simpang baku (Dahlan, 2009).

2. Analisis Bivariat
Sebelum analisis bivariat, penilaian distribusi data dilakukan
dengan uji Saphiro Wilk dengan sampel berjumlah 30 ekor tikus (<50
sampel data) dilanjutkan dengan pemeriksaan varians data menggunakan
Levene test. Analisis dilanjutkan dengan metode parametrik uji ANOVA
satu arah (one way ANOVA). Pengujian dilanjutkan dengan uji post hoc
LSD untuk data yang didapat dinyatakan bermakna (p<0,05). Untuk
sebaran data yang tidak normal dan tidak homogen, maka dilakukan
transformasi data. Jika transformasi data dinyatakan gagal, maka
selanjutnya dilakukan uji alternatif yaitu uji Kruskal-Wallis. Uji Kruskal-
Wallis yang dinyatakan bermakna (p<0,05) dilanjutkan dengan
menggunakan uji Post Hoc yaitu Mann-Whitney (Dahlan, 2012).

H. Waktu dan Tempat Penelitian
1. Waktu penelitian
Penelitian dilaksanakan selama bulan Agustus 2019 sampai dengan
September 2019.
2. Tempat Penelitian
a. Laboratorium Taksonomi Tumbuhan, Fakultas Biologi, Universitas
Jenderal Soedirman sebagai tempat determinasi tumbuhan.

b. Laboratorium Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Jenderal
Soedirman sebagai tempat pembuatan serbuk simplisia dan ekstrasi
seledri.
c. Animal house Laboratorium Farmakologi dan Terapi Fakultas
Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman sebagai tempat
pemberian perlakuan dan pengambilan sampel hewan coba.

I. Jadwal Penelitian
Tabel 3.2 Jadwal Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Seledri
Agustus Agustus – September

2019 September 2019
2019
1. Tahap Persiapan
Penyusunan proposal
dan penelitian
pendahuluan
Seminar proposal
2. Tahap Pelaksanaan
3. Tahap Pengolahan Data
dan Analisis Data
4. Tahap Akhir penelitian
Penyusunan Hasil
Seminar Hasil
DAFTAR PUSTAKA
Afifah, Muflikhah, K., Ati, V.R.B., Tsani, R.M., Khasanah, D., Maulana, W.
Protective Effect of Ethanol Extract of Celery (Apium graveolens L) on
Kidney Damage in Ischemia/ Reperfusion Injury Rats Model. Molekul. Vol
14(1): 11-17
Ahmad, A., Singhal, U., Hossain, M.M., Islam, N., Rizvi, I. 2013. The Role of the
Endogenous Antioxidant Enzymes and Malondialdeyde in Essential
Hypertension. Journal of Clinical and Diagnostic Research. 7(6): 987-990
Akcay, A., Turkmen, K., Lee, D.W., Edelstein. 2010. Update on the diagnosis and
management of acute kidney injury. International Journal of Nephrology
& Renovascular Disease. 3 : 129-40.
Amarowicz, R.. 2007. Tannins: the new natural antioxidants?. European Journal
of Lipid Science and Technology. 109(6): 549-551.
Arfian, N., Emoto, N., Vignon-Zellweger, N., Nakayama, K., Yagi, K., Hirata, K.,
2012, ET-1 deletion from endothelial cells protects the kidney during the
extension phase of ischemia/reperfusion injury. Biochemical and
Biophysical Research Communications, 425(2): 443-9
Baananou, S., Bouftira, I., Mahmoud, A., Boukef, K., Marongiu, B., &
Boughattas, N.A. 2012. Antiulcerogenic and antibacterial activities of
Apium graveolens essential oil and extract. Natural product research. 27:
1075-1083
Baradaran, A., Nasri, H., Kopaei, M.R. 2014. Oxidative stress and hypertension:
Possibility of hypertension therapy with antioxidants. Journal of Research
in Medical Science. 19(4): 358-367
Basile, D.P. 2007. The endothelial cell in ischemic acute kidney injury:
implications for acute and chronic function. Kidney International. 72 (2) :
151-156
Basile, D.P., Anderson, M.D., Sutton, T.A. 2012. Pathophysiology of Acute
Kidney Injury. National Institutes of Health. 2(2): 1303-1353
Bell, L., D.J. Lamport, L.T. Butler, C.M. Williams. 2015. A Review of the
cognitive effects observed in humans following acute supplementation
with flavonoids, and their associated mechanisms of action. Nutrients.
7(12): 10290-10306
Birben, E., Sahiner, U.M., Sackesen, C., Erzurum, S., Kalayci, O. 2012. Oxidative
stress and antioxidant defense. World Allergy Organization Journal. 5(1):
9-19
Bone, K., and Mills, S. 2013. Principles and Practice of Phytotherapy. Second
Edition. Churchill Livingstone Elsevier. New York
Bonventre, J.V. & Yang L. 2011. Cellular pathophysiology of ischemic acute
kidney injury. The Journal of Clinical Investigation. 121(11): 4210-4221.
Candrawati, S. 2013. Aktivitas fisik terhadap Stres Oksidatif. Mandala of Health.
6(1) : 454-461
Case, J., Khan, S., Khalid, R., Khan, A. 2013. Epidemiology of Acute Kidney
Injury in the Intensive Care Unit. Critical Care Research and Practice. 1
(1) : 1-9
Chapple, I.L.C., Brock, G.R., Milward M.R., Ling, N., Matthews, J.B. 2007.
Compromised GCF total antioxidant capacity in periodontitis : cause or
effect ?. Journal of Clinical Periodontology. 34: 103-110
Clark & Wayney, 2005. Reperfusion injury in stroke. http: //emedicine.
medscape. com/article/ 1162437-overview. Diakses pada tanggal 21 Juni
2019
Dahlan, M.S. 2009. Besar Sampel dan Cara Pengambilan Sampel dalam
Penelitian Kedokteran dan Kesehatan. Jakarta : Salemba Medika.
Dahlan, M.S. 2012. Statistika untuk Kedokteran dan Kesehatan Edisi 5. Jakarta:
Salemba Medika.
Dalimartha, S. 2009. Atlas Tumbuhan Obat Jilid 6. Jakarta: PT Pustaka Bunda.
Damianovich, M., Ziv, I., Heyman S.N., Rosen, S., Shina, A., Kidron, D., Aloya,
T. 2006. ApoSense: a novel technology for functional molecular imaging
of cell death in models of acute renal tubular necrosis. The European
Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 33: 281–291.
Devarajan, P. 2006. Update on Mechanism of Ischemic Acute Kidney Injury.
Journal American Society Nephrology. 17 : 1503-1520
Diniz, T.C., J.C. Silva, S.R. de Lima-Saraiva, F.P. Ribeiro, A.G. Pacheco, R.M. de
Freitas, L.J. Quintans-Junior, S. Quintans Jde, R.L. Mendes, J.R. Almeida.
2015. The role of flavonoids on oxidative stress in epilepsy. Oxidative
Medicine and Cellular Longevity. 17:1756.
Dorweiler, B., Pruefer, D., Andrasi, T.B., Maksan, S.M., Schmiedt, W., Neufang,
A., Vahl, C.F. 2007. Ischemia-Reperfusion Injury Pathophysiology and
Clinical Implications. European Journal of Trauma and Emergency
Surgery. 33(6): 600-612.
Dorze, M., Legrand, M., Payen, D., Ince, C. 2009. The role of the
microcirculation in acute kidney injury. Current Opinion in Critical Care.
15(6) : 503–508
Duke, J.A. 2010. Herbal remedies for common diseases and conditions. The
Green Pharmacy: Rodale International Ltd.
Eltzschig, H.K., & Eckle, T,. 2011. Ischemia and reperfusion--from mechanism to
translation. Nature Medicine. 17(11):1391-1401.
Faizal, N.F.A.B. & Iskandar, Y. 2018. Studi Kimia dan Aktivitas Farmakologi
Tanaman Seledri (Apium Graviolens L.). Suplemen. Vol 16(2): 28-32.
Fantini, M., Benvenuto, M., Masuelli, L., Frajese, G.V., Tresoldi, I., Modesti, A.,
Bei, R. 2015. In vitro and in vivo antitumoral effects of combinations of
polyphenols, or polyphenols and anticancer drugs: Perspectives on cancer
treatment. International Journal of Molecular Science. 16: 9236–9282.
Farzaei, M.H., Bahramsoltani, R., Rahimi, R. 2016. Phytochemicals as adjunctive
with conventional anticancer therapies. Current Pharmaceutical Design.
22: 4201–4218
Fazal, S.S. & Singla, R.K. 2012. Review on the Pharmacognosticaland
Pharmacological Characterization of Apium graveolens Linn. Indo Global
Journal of Pharmaceutical Science. 2(3): 258-261.
Federer, W.T. 1977. Experimental Design Theory And Application, Third Edition.
New Delhi : Bombay Calcuta, Oxford and IBH Publishing Co.
Fujita, H., Fujishima, H., Chida, S., Takahasi, K., Qi, Z., Kanetsuna, Y., et al.
2009. Reduction of Renal Superoxide Dismutase in Progressive Diabetic
Nephropathy. The Journal Amerivan Society of Nephrology. 20 : 1303–
1313.
Faustinawati, B., Saebani, Suharto, G. 2017. Pengaruh Pemberian Ranitidin

Terhadap Gambaran Histopatologi Tubulus Proksimal Ginjal Tikus Wistar
Pada Pemberian Metanol Dosis Bertingkat. Jurnal Kedokteran
Diponegoro.Vol 6(2): 366-376
Gandolfo, M.T., Rabb, H. 2007. Very early alloantigen-independent trafficking of
lymphocytes during ischemic acute kidney injury. Journal of International
Society of Nephrology. (12): 1193-5.
George, P. & Casale, I.I.P. 2014. Ischemia-Reperfusion. 8ed. Philadelphia:
Saunders. 1: 87-98.
Gupta, S., Afaq, F., Mukhtar, H. 2002. Involvement of nuclear factor-kappa B,
Bax and Bcl-2 in induction ofcell cycle arrest and apoptosis by apigenin in
human prostate carcinoma cells. Oncogene. 21(23): 3727-3738.
Guyton, A.C. & Hall, J.E. 2015. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 9. Jakarta:
Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Halliwell, B. and Gutteridge, J. M. C. (2007). Free Radicals in Biology and
Medicine. Advances in Food and Nutrition Research. 1(4):331–332.
Hariana, 2006. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya. Jakarta: Penebar Swadaya Wisma
Hijau.
Hayati E. K., Jannah, A., Mukhlisoh, W. 2010. Pengaruh Ekstrak Tunggal dan
Gabungan Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi Linn) Terhadap
Efektivitas Antibakteri Secara In Vitro. Kimia. UIN Malang, Malang.
Ighodaro, O.M., & Akinloye, O.A., 2018, First line defence antioxidants-
superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase
(GPX) : Their fundamental role in the entire antioxidant defence grid,
Alexandria Journal of Medicine. 54: 287-293
Jain, P. 2015. Secondary metabolites for antiulcer activity. Natural Product
Research. 30: 640–656
Jasda, A., Winarto, Kristina, T.N. 2014. Pemberian Virgin Coconut Oil untuk
Meningkatkan Jumlah dan Motilitas Spermatozoa : Studi pada Tikus
Wistar dengan Diet Tinggi Lemak. Penelitian Gizi Makan. 37 (2) : 161-
167
Jin, B.H., Qian, L.B., Chen, S., Li, J., Wang, H.P., Bruce, I.C., Lin, J. Xia, Q.
2009. Apigenin protects endothelium-dependent relaxation of rat aorta
against oxidative stress. Europe Journal of Pharmacology. 616: 200-205.
Jing, H., Zilin Li, Li-ting Xu, Ai-jun Sun, Xiao-yan Fu, Li Zhang, Lin-lin Jing,
An-dong Lu, Yi-fei Dong. 2014. Protective Effect of Apigenin on
Ischemia/Reperfusion Injury of the Isolated Rat Heart. Cardiovascular
Toxicology . 15(3): 241-249.
Jung, W. S., Chung, I. M., Kim, S. H., Kim, M. Y., Ahmad, A., Praveen, N. 2011.
In vitro antioxidant activity, total phenolics and flavonoids from celery
(Apium graveolens) leaves. Journal of Medicinal Plants Research. 5(32) :
7022-7030
Kabashima, H., N. Miura, M. Shimizu, W. Shinoda, X. Wang, Z. Wang, S.
Takahashi, T. Harada, H. Maruyama, S. Tashiro, T. Ichiyanagi, J.
Hasegawa. 2010. Preventive impact of alkaloids with anti-cancer effect
extracted from natural herb and the derivatives. Webmedcentral
PREVENTIVE MEDICINE.:1(9).
Kanazawa, K., Uehara, M., Yanagitani, H., Hashimoto, T. 2006. Bioavailable
flavonoids to suppress the formation og 8-OHdG in HepG2 cells. Arch
Biochem Biophys. 455(2): 197-203.Karamać, M. 2009. In-vitro study on
the efficacy of tannin fractions of edible nuts as antioxidants. European
Journal of Lipid Science and Technology. 111(11): 1063-1071.
Karamać, M. 2009. Chelation of Cu(II), Zn(II), and Fe(II) by Tannin Constituents
of Selected Edible Nuts. International Journal of Molecular Science. Vol
10(12): 5485-5497
Kensa, V.M. 2011, Studies on phytochemical screening and antibacterial activities
of Lantana camara Linn, Plant Sciences Feed, 1 (5): 74-79.
Kidney Disease Improving Global Outcome (KDIGO). 2012. Clinical practice
guideline for the evaluation and management of chronic kidney disease.
Kidney International Supplements. 3(1) : 1–150.
Kim, M. & Kim, Y. 2010. Hypocholesterolemic Effects of Curcumin via
Upregulation of Cholesterol 7a-hydroxylase in Rats Fed a High Fat Diet.
Nutrition Research and Practice. 4 (3) : 191-195.
Kim, S., Shim, S., Choi, D.S., Kim, J.H., Kwon, Y.B., Kwon, J. 2011. Modulation
of LPS-stimulated astroglial activation by ginseng total saponins. Journal
of Ginseng Research: (35) 80-85
Kusumawati, D. 2004. Bersahabat dengan Hewan Coba. Yogyakarta: Gadjah
Mada University Press.
Lameire, N., Biesen, W.V., Vanholder, R. 2007. The rise of prevalence and the fall
of mortality of patients with acute renal failure: what the analysis of two
databases does and does not tell us. Journal of the American Society of
Nephrology. 17 : 923-925
Lieberman, M. & Marks, A. 2009. Mark’s basic medical biochemistry : a clinical
approach. Philadelphia : Lippincot Williams & Wilkins.
Lieberthal, W. & Levine, J.S. 1996. Mechanisms of apoptosis and its potential role
in renal tubular epithelial cell injury. American Journal of Physiology.
271(3 Pt 2) : F477-F488
Luliana, S., Susanti, R., Agustina, E. 2017. Uji Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak Air
Herba Ciplukan (Physalis angulata L.) terhadap Tikus Putih (Rattus
norvegicus L.) Jantan Galur Wistar yang Diinduksi Karagenan.
Traditional Medicine Journal. 22(3): 199-205
Mahapatra, D.K., S.K. Bharti, V. Asati. 2015. Anti-cancer chalcones: structural
and molecular target perspectives. European Journal of Medicinal
Chemistry. 98 :6–114.
Mesia-Vela, S., Landmanm M.T., Souccar, C., Lapa, A.J. 2004. Pharmacological
study of Stachytarpheta cayennensis Vahl in rodents. Phytomedicine. Vol
11(7-80): 616-624
Mehta, R.L., Kellum, J.A., Shah, S.V., Molitoris, B.A., Ronco, C., Warnock, D.G.,
et al., 2011. Acute Kidney Injury Network : report of an initiative to
improve outcomes in acute kidney injury. Critical Care. 11 : R31
Meyer, H., A. Bolarinwa, G. Wolfram, J. Linseisen. 2006. Bioavailability of
apigenin from apiin-rich parsley in humans. Annals Nutrition and
Metabolism. 50(3): 167-172.
Miladiyah, I., dan Prabowo, B.R., 2012, Ethanolic Extract of Anredera cordifolia
(Ten.) Steenis Leaves Improved Wound Healing in Guinea Pigs, Universa
Medicina. 31(1) : 4-11.
Mohammedi, K., Bellili-Mun˜ oz N., Driss, F., Roussel, R., Seta, N., et al. 2014.
Manganese Superoxide Dismutase (SOD2) Polymorphisms, Plasma
Advanced Oxidation Protein Products (AOPP) Concentration and Risk of
Kidney Complications in Subjects with Type 1 Diabetes. PLoS ONE . 9(5):
e96916.
Moore, P.K., Hsu, R.K., Liu, K.D. 2018. Management of Acute Kidney Injury.
American Journal Kidney Disease. 72(1):136-148
Murray, R. K., Granner, D. K., & Rodwell, V. W. 2015. Biokimia harper (27 ed.).
Jakarta: Buku Kedokteran EGC.
Nicholas, T., Kouchoukos, E.H.B., Hanley, Kirlin, J.K. 2013. Hypothermia,
Circulatory Arrest, and Cardiopulmonary Bypass. 4ed. Philadelphia:
Elsevier Saunders. 1:68-132.
Orlikova, B., D. Tasdemir, F. Golais, M. Dicato, M. Diederich, Dietary chalcones
with chemopreventive and chemotherapeutic potential. Genes and
Nutrition. 2011: 6: 125–147
Otitoju, O., Onwurah, I.N.E., Otitoju, G.T.O., Ugwu, C.E. 2008. Oxidative stress
and superoxide dismutase activity in brain of rats fed with diet containing
permethrin. Nigerian Society for Experimental Biology. 20(2): 93-98
Peixoto, E.B.M.I., Pessoa, B.S., Biswas, S.K., Faria, L.D.J.B. 2009. Antioxidant
SOD Mimetic Prevents NADPH Oxidase-Induced Oxidative Stress and
Renal Damage in the Early Stage of Experimental Diabetes and
Hypertension. American Journal of Nephrology. 29 : 309–318.
Perez-Cano, F.J. and C. Margarida. 2016. Flavonoids, Inflammation and Immune
System. Nutrients. 8: 659
th
Perhimpunan Nefrologi Indonesia. 2106. 9 Report Of Indonesian Renal Registry.
Available from : www.pernefri-inasn.org
Price, S. & Wilson, L. 2016. Patofisiologi: Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit.
Edisi 9. Jakarta : Penerbit Kedokteran EGC.
Puspitasari, M.L., Wulansari, T.V., Widyaningsih, T.D., Maligan, J.M., Nugrahini,
N.I.P. 2016. Aktivitas Antioksidan Suplemen Herbal Daun Sirsak (Annona
muricata L.) dan Kulit Manggis (Garcinia mangostana L.). Jurnal Pangan
dan Agroindustri. 4(1): 283-290
Rahmawati, G., Rachmawati, F. N., Winarsi, H. 2014. Aktivitas Superoksida

Dismutase Tikus Diabetes yang Diberi Ekstrak Batang Kapulaga dan
Glibenklamid. Scripta Biologica. 1(3) : 19-23.
Redha, A. 2010. Flavonoid: Struktur, Sifat Antioksidatif dan Peranannya Dalam
Sistem Biologis. Jurnal Berlian. 9 (2): 196 - 202.
Rehman, A.U., Ishaq, H., Furqan, M., Sheikh, D., Raza, M.L., Naqvi, B.S.,
Mehmood, T. 2016. Comparative study of ethanolic and aqueous extracts
of apium graveolens L root with furosemid its diuretic activity & excretion
of urinary metabolities in wistar rats. Science International Lahore.
28(3) : 2503-2507
Roesli, R.M.A. 2008. Epidemiologi gangguan ginjal akut. Bandung : Pusat
Penerbitan Ilmiah Bagian Ilmu Penyakit Dalam FK UNPAD.
Ricci, Z., Cruz, D.N., Ronco, C. 2011. Classification and staging of acute kidney
injury: beyond the RIFLE and AKIN criteria. Nature Reviews Nephrology.
7(4) : 201-208
Sherwood, Lauralee. 2014. Fisiologi Manusia dari Sel ke Sistem Ed. 8. Jakarta:
EGC.
Sinaga, F.A. 2016. Stress oksidatif dan status antioksidan pada aktivitas fisik
maksimal. Jurnal Generasi Kampus. 9(2): 197-189
Singbartl, K., & Joannidis, M. 2015. Short-term effects of acute kidney injury.
Critical Care Clinics. 31(4):51–62.
Singh R. R., Moritz K. M., Bertram J. F., Denton K. M. 2012. Renal responses to
furosemide are significantly attenuated in male sheep at 6 months of
age following fetal uninephrectomy. American Journal of Physiology
Regulatory Integrative Comprehensive Physiology. 302(7):R868-R875
Spinello, A., Bonsignore, R., Barone, G., Keppler, B.K., Terenzi, A. 2016. Metal
ions and metal complexes in Alzheimer’s disease. Current Pharmaceutical
Design. 22: 3996–4010.
Suckow, M. A., Steven H. W., Craig L. F. 2006. The Laboratory Rat Second
Edition. USA : American College of Laboratory Animal Medicine Series.
Sudoyo, A.W., Setiyohadi, B., Alwi, I., Simadibrata, M., Setiati, S. 2007. Buku
Ajar Ilmu Penyakit Dalam Jilid II edisi V. Jakarta: Departemen Ilmu
Penyakit Dalam FKUI.
Sugawara, T., Fujimura, M., Noshita, N., Kim, G.W., Saito, A., Hayashi, T.,
Narasimhan, P., Maier, C.M., Chan, PH. 2004. Neuronal death/survival
signaling pathways in cerebral ischemia. NeuroRx. 1 : 17–25.
Sukandar, E. 2006. Gagal Ginjal Dan Panduan Terapi Dialisis. Fakultas
Kedokteran UNPAD. Bandung.
Sukketsiri, W., Chonpathompikunlert, P., Tanasawet, S., Choosri, N.,
Wongtawatchai, T. 2016. Effects of Apium graveolens Extract on the
Oxidative Stress in the Liver of Adjuvant-Induced Arthritic Rats.
Preventive Nutrition Food Scencei. 21(2) : 79–84.
Sunarjono. 2003. Fisiologi Tanaman Budidaya. UI Press. Jakarta. 428 hal.
Ukhrowi, U. 2011. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Umbi Bidara Upas
(Merremia mammosa) terhadap Fagositosis Makrofag dan produksi
nitrit oksida (NO) Makrofag Studi pada mencit Balb/c yang Diinfeksi
Salmonella typhimurium ; Tesis. Fakultas Kedokteran Universitas
Diponegoro.
U.S. Department of Agriculture, Agricultural Research Service. 2012. USDA
National Database for Standard Reference, Release 25. Nutrient Data
Laboratory Home Page, http://www.ars.usda.gov/nutrientdata. Diakes
pada tanggal 10 Juni 2019
Vaya, R.K., Abishek, S., Singhvi. I.J., Dinesh, K.A. 2017. Nephroprotective
Plants: A Review. Journal of Bioscience And Technology. 8 (1): 801-812
Venkatachalam T, Kumar VK, Selvi PK, Maske AO, and Kumar NS., 2011
Physicochemical and preliminary phytochemical studies on the Lantana
Camara (L.) fruits. International Journal of Pharmacy and
Pharmaceutical Sciences, 3 (1): 52-54
Verma, S., Sagar, N., Vats, P., Shujla, K.N., Abbas, M., Banerjee, M., 2013.
Antioxidant Enzyme Levels as Markers for Type 2 Diabetes Mellitus.
International Journal of Bioassays. 2 (4) : 685-690.
Waikar, S.S. & Bonventre J. V. (2012). Acute kidney injury. Dalam: Longo, D.L.,
Fauci, A.S., Kasper, D.L., Hauser, S.L., Jameson, J.L., Loscalzo, J. eds.
Harrison’s principle of internal medicine. 18th ed. New York:
McGrawHill, pp. 2293-2308.
Yusni., Puteh I. 2014. Kajian Kemampuan Seledri (Apium graveolens Linn)
Sebagai Herbal Antistres Pada Tikus Wistar (Rattus norvegicus). Jurnal
Kedokteran Hewan. 8(2): 105-107
Zhao, H., Perez, J.S., Lu, K., George, A.J., Ma, D. 2014. Role of Toll-like
receptor-4 in renal graft ischemia-reperfusion injury. American journal of
physiology & Renal physiology. 306 : F801–F811.

Usul Skripsi

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Usul Skripsi

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

USUL SKRIPSI

EFEK LAMA WAKTU PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL SELEDRI

KEMENTERIAN RISET, TEKNOLOGI, DAN PENDIDIKAN TINGGI

EFEK LAMA WAKTU PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL SELEDRI

Diajukan Sebagai Pedoman Pelaksanaan Penelitian

Disetujui dan disahkan

dr. Afifah, M.Sc dr. Khusnul Muflikhah, M.Sc

Dekan Fakultas Kedokteran Ketua Jurusan Kedokteran

II. TINJAUAN PUSTAKA...................................................................................... 10

AKI Acute Kidney Injury

filtrasi, pengaturan keseimbangan air dan elektrolit, glukoneogenesis,

2015). AKI ditandai oleh akumulasi kreatinin, urea, dan metabolit

persenyawaan nitrogen (Moore et al., 2018). Prevalensi AKI di dunia

mengalami peningkatan yang berkisar antara 9% - 67% (Mehta et al., 2011).

sendiri kejadian AKI mencapai 8% dari 24.650 pasien yang menjalani

hemodialisis (PERNEFRI, 2016).

Yang, 2011). Hipoperfusi darah merupakan penurunan aliran darah menuju

ginjal menyebabkan terjadinya reperfusion injury (Basile et al., 2012).

Ischemia reperfusion injury (IRI) atau cedera iskemia reperfusi merupakan

(reperfusi) (Eltzschig & Eckle, 2011). Terjadinya peradangan akibat iskemik

menjadi perantara kerusakan berikutnya yang lebih berat akibat adanya

menghasilkan sejumlah faktor inflamasi seperti TNF-α, IL-18, IFN-γ dan

radikal bebas yang semakin memperparah kerusakan jaringan. Aliran darah

tersebut juga membawa kembali oksigen ke dalam sel yang mengakibatkan

(Clark & Wayne, 2005).

yang menetap sehingga mengakibatkan terjadinya chronic kidney disease

inflamasi dan kerusakan lokal pada tubulus ginjal sehingga menurunkan

death, prosedur bedah yang melibatkan sistem vaskuler, maupun sumbatan

arteri mendadak yang kemudian dilakukan terapi (Dorweiler et al., 2007).

Proses inflamasi pada jaringan ginjal ini meningkatkan terbentuknya stres

oksidatif. Stres oksidatif mengakibatkan terjadinya kerusakan histologis pada

ginjal. Proses inflamasi dan peningkatan stres oksidatif merupakan mekanisme

yang mendasari terjadinya acute kidney injury (AKI) serta berbagai

komplikasi lain dari AKI seperti gangguan kardiovaskuler, endokrin

metabolik, penyakit pulmoner, penyakit autoimun, keganasan, dan penuaan

(Sudoyo et al., 2007).

ketidakseimbangan antara pembentukan Reactive Oxygen Species (ROS) dan

sistem pertahanan antioksidan yang berlangsung dalam waktu yang lama

melalui reaksi enzimatik yang melibatkan rantai respiratori mitokondria serta

penurunan efektivitas dari antioksidan didalam tubuh distimulasi oleh

peningkatan pengeluaran mediator inflamasi, molekul adhesi serta akumulasi

leukosit (Zhao et al., 2014).

memiliki pasangan elektron dan bergerak bebas di dalam tubuh. ROS

mencapai kestabilan dengan cara menyerang molekul yang terdekat untuk

karbohidrat, lemak dan asam nukleat akan hancur sehingga menyebabkan

al., 2007; Kim & Kim, 2010).

dengan cara mengeliminasi superoxides, hydrogen peroxide dan hydroxyl

radicals. Jenis-jenis Antioksidan tersebut antara lain superoxide dismutase

(SOD), glutathione peroxidase (GPxs) dan catalase (CAT) (Verma et al.,

2013). Superoxide dismutase merupakan enzim yang berperan dalam

pertahanan endogen melawan stres oksidatif akibat produksi radikal bebas

yang berlebih, dengan cara mengkonversi superoxide (O2-) menjadi hydrogen

oleh catalase dan glutathione peroxidase (Peixoto, 2009). Superoxide

dismutase merupakan parameter yang sering digunakan untuk mengukur

2016). Aktivitas SOD tertinggi ditemukan di hati, ginjal, darah, kelenjar

(Murray et al., 2015). Upaya pencegahan terhadap stres oksidatif diperlukan

mempunyai kemampuan sebagai antiseptik, antihelmintik, antiinflamsi, dan

antikanker (Baananou et al., 2012). Seledri mengandung banyak senyawa

metabolit sekunder antara lain flavonoid, glikosida iridoid, alkaloid serta

hepatoprotektif dari seledri terhadap efek berbahaya yang ditimbulkan dari

timbal dan radiasi. Hasil paparan timbal menyebabkan pengurangan enzim-

enzim antioksidan seperti superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT),

glutathione peroxidase (GPxs). Timbal meningkatkan tingkat perksidasi lipid