LAPORAN PRAKTIKUM BAKTERIOLOGI

Hari / Tanggal Rabu / 26 Februari 2020

Judul Pewarnaan Gram

Tujuan - Untuk mempermudah melihat mikroba dengan mikroskop

- Mengamati dua kelompok bakteri yaitu, bakteri Gram positif dan
Gram negatif, dengan menggunakan prosedur pewarnaan Gram dan
memahami setiap langkan serta reaksi-reaksi kimia yang terjadi.

Alat dan Bahan Alat Bahan

 Jembatan pewarnaan  Suspensi bakteri

 Ose bulat  Aquades
 Objek glass  Zat warna karbol fuksin
 Bunsen  Zat warna gentian violet
 Labeling  Zat warna lugol
 Pipet
 Alkohol 70%
 Mikroskop
 Oil Immersion
 Tabung
 Air mengalir
 Kapas atau tisu

Cara Kerja Pewarnaan Sederhana

a. Disiapkan semua Alat dan Bahan
b. Kaca objek disterilisasi dengan cara di cuci, laku dimasukkan
kedalam larutan alkohol 70%, kemudian di lap menggunakan tisu.
c. Dilewatkan objek glass yang telah kering diatas nyala api bunsen
d. Diberi label pada bagian bawah objek glass
e. Ose difiksasi dengan cara dibakar dengan api bunsen sampai ose
berpijar, lalu kemudian ose didinginkan.
f. Dibuat olesan bakteri dari suspensi bakteri di atas kaca objek yang
bersih dan bebas lemak dengan menggunakan ose yang sudah
difiksasi
 g. Dilewatkan kaca objek yang yang telah diolesi suspensi bakteri
diatas nyala api bunsen sampai sampel kering dan berwarna
keputihan
h. Diletakkan kaca objek di atas jembatan pewarnaan
i. Digenangi kaca objek dengan zat warna 1 (gentian violet) selama 30
detik, setelah 30 detik zat warna gentian violet dibuang
j. Dibilas kaca objek dengan air kran atau aquadest yang mengalir,
kemudian ditiriskan
k. Digenangi kaca objek dengan zat warna 2 (lugol) selama 30 detik,
setelah 30 detik larutan lugol dibuang
l. Dibilas kaca objek dengan air kran atau aquadest yang mengalir,
tiriskan
m. Dibilas dengan larutan alkohol 70% sampai zat warna tidak luntur
lagi.
n. Dibilas dengan air kran atau aquadest yang mengalir, tiriskan
o. Digenangi dengan zat warna 3 (Karbol fuchsin selama 1 menit,
setelah 1 menit buang zat warna karbol fuchsin
p. Dibilas dengan air kran atau aquadest yang mengalir, dan tiriskan
sampai kering.
q. Periksa kaca objek atau preparat menggunakan mikroskop dengan
pembesaran 100x
r. Catat hasil pengamatan.
Hasil Ciri-ciri bakteri Gram positif (+):
1. Memiliki cytoplasmic lipid membrane
2. Memiliki lapisan peptidoglikan yang tebal
3. Terdapat asam teikoat dan lipoid yang membentuk lapisan asam
lipoteikoat yang berguna untuk chelating agen dan adhesi tipe
tertentu
4. Gram positif berbentuk bulat, batang atau filamen
5. Gram positif berwarna ungu

Gambar
 Gram positif (+)

Hasil Ciri-ciri bakteri Gram negatif (-):

1. Memiliki membran sitoplasma
2. Lapisan peptidoglikan tipis
3. Membran luar terdiri atas Lipopolisakarida (LPS) yang tersusun
oleh lipid A, inti polisakarida, antigen O
4. Gram negatif berbentuk bulat, oval, batang lurus atau melingkar
seperti koma, heliks atau filamen dan beberapa memiliki kapsul
pelindung
5. Gram negatif berwarna merah

Gambar

Gram negatif (-)

Kesimpulan Pewarnaan bakteri bertujuan untuk memudahkan melihat bakteri dengan
menggunakan mikroskop, memperjelas ukuran dan bentuk baktyeri, untuk
melihat struktur luar dan struktur dalam bakteri seperti dinding sel, dan
vakuola, menghasilkan sifat-sifat fisik dan kimia yang khas. Pewarnaan
gram dibagi menjadi dua hasil yaitu Gram positif (+) dan Gram negatif (-),
tergantung dari reaksi dinding sel terhadap zat warna karbol fuchsin atau
zat warna gentian violet.

Salbiah, S.Pd, M.Kes Nia Rista Erimafu’ah

 Laporan Praktikum Bakteriologi
Pengecatan Gram

Diajukan sebagai salah satu tugas mata kuliah Bakteriologi Praktikum

Dosen Pengampu:
1. Husjain Djajaningrat, S.KM, M.Kes
2. Salbiah, S.Pd, M.Kes

Ditulis oleh
Nama : NIA RISTA ERIMAFU’AH
Nomor Mahasiswa : P3.73.34.1.19.066
Semester : II (Genap)

Poltekkes Kemenkes Jakarta III

Jurusan Teknologi Laboratorium Medik
2020