PLASTIDA

Banyak peneliti telah mengikuti petunjuk awal Correns, dan sekarang hampir semua yang
diketahui tentang genetika plastid berasal dari studi tentang variegasi pada tanaman berbiji.
Setiap tanaman yang mengembangkan bercak dengan warna berbeda di daun atau bagian
vegetatif lainnya dikatakan beraneka ragam. Banyak variasi tidak diwariskan, beberapa
dikendalikan oleh gen inti, dan yang lainnya bergantung pada pewarisan plastid. Interaksi terjadi,
dan sulit untuk membedakan contoh yang hanya bergantung pada pewarisan plastida. Pola
figuratif (pita marginal, bintik menyebar, vena menonjol dan daun bergaris) yang merupakan
perkembangbiakan sejati biasanya mewakili modifikasi fisiologis yang mempengaruhi regulasi
perkembangan kloroplas normal dan bukan mutasi gen spesifik. Penempatan plastida normal dan
mutan menjadi pola warna mungkin bergantung pada mutasi di dalam plastida.

Ovula, serta sel-sel somatik tanaman berbintik-bintik (misalnya jam empat), dapat membawa
plastida abnormal yang hampir tak berwarna dan kloroplas hijau normal dalam sitoplasma
mereka (Gbr. 14.3). Efek berbintik-bintik ditransmisikan melalui garis ibu, generasi demi
generasi. Karena serbuk sari jam empat memiliki sedikit sitoplasma, pengaruhnya terhadap
variegasi dapat diabaikan. Tanaman tunggal dengan cabang atau sektor berwarna hijau, putih,
dan beraneka ragam dapat menghasilkan biji yang melestarikan ketiga jenis tersebut.

Biji yang ditanggung di cabang putih hanya mengandung primordia untuk plastida tidak
berwarna, yang di cabang hijau hanya hijau, dan yang ditanggung di cabang beraneka ragam
mungkin mengandung kloroplas tidak berwarna atau hijau atau kombinasi keduanya. Pada
tumbuhan seperti primrose, P. sinensis, kadang-kadang terbentuk chimeras (sektor yang
mengandung jenis plastida berbeda), dengan hanya sebagian tumbuhan yang mengandung
klorofil. Daerah dengan plastida abnormal yang kekurangan klorofil dapat mengandalkan bagian
hijau tanaman untuk produk fotosintesis dan karenanya dapat terus hidup. Setiap bagian chimera
dapat menghasilkan sel reproduksi dan dengan demikian mengirimkan jenis plastidnya melalui
gamet betina.

Kloroplas sekarang telah diisolasi dan ditemukan mampu melakukan sintesis protein dengan
adanya adenosin trifosfat atau cahaya. Produknya identik dengan protein kloroplas asli, yang
menunjukkan bahwa kloroplas yang terisolasi memiliki mesin sintesis protein yang berfungsi
penuh di mana mRNA diterjemahkan secara akurat. Dengan analisis DNA dan penggunaan
restriksi endonuklease untuk fragmentasi DNA, banyak yang telah dipelajari tentang DNA
plastid. Sekitar 30 hingga 60 salinan genom kloroplas ditemukan di setiap kloroplas tumbuhan
tingkat tinggi; sekitar 100 salinan genom terjadi di setiap plastida dari beberapa alga. Kloroplas
unik yang cukup telah ditemukan untuk mengkode sekitar 126 protein, dan sekitar 12 persen dari
kode urutan DNA plastida untuk komponen plastida.

Ketika Ruth Sager menempatkan sel alga Chlamydomonas pada media kultur yang mengandung
antibiotik streptomisin, sebagian besar sel mati, tetapi sekitar satu per juta bertahan dan
berkembang biak, masing-masing membentuk koloni yang tahan streptomisin. Mutan dengan
resistensi sedang dipilih dari alga yang sebagian besar rentan terhadap streptomisin. Sekitar 90
persen mutan melibatkan gen nuklear (sr- \). Mutasi seperti itu hanya ditunjukkan oleh
penghambat antibiotik. Sekitar 10 persen dari mutasi (sr-2), bagaimanapun, adalah uniparental
dan nonchromosomal. Mereka ditemukan diinduksi oleh konsentrasi subletal obat. Akhirnya,
mutan nonkromosom ditemukan dari hampir setiap koloni. Streptomisin tidak spesifik untuk
perubahan tertentu tetapi menyebabkan beberapa jenis perubahan mutasi pada koloni yang
dirawat. Mutasi DNA nonkromosom memberikan fenotipe yang sama dengan mutan DNA
kromosom. Frekuensi kemunculannya jauh lebih besar daripada frekuensi mutasi kromosom
spontan. Gen nonkromosom ini diduga berada di kloroplas.

Persilangan timbal balik (Gbr. 14.4) menunjukkan bahwa resistensi antibiotik, yang dikendalikan
oleh gen nonkromosom, bersifat uniparental dalam pewarisan. Di sisi lain, jenis kawin dalam
ganggang uniseluler seksual ini dikendalikan oleh gen kromosom, yang ditunjuk oleh peneliti mt
'' dan mr atau hanya plus (+) dan minus (-), bukan betina dan jantan. Semua keturunan dari setiap
kawin timbal balik adalah sama, tipe kawin plus (+) berkenaan dengan resistensi streptomisin
relatif sehingga menunjukkan warisan ibu. Ketika jenis kawin plus (-I-; betina) resisten, semua
keturunan resisten; ketika jenis kawin plus {+) tidak resisten, semua keturunan tidak resisten.
Hasil persilangan timbal balik ini menunjukkan pewarisan non-Mendel, yang melibatkan
sepasang sifat yang kontras. Gen nonkromosom, sr untuk resistensi streptomisin dan .s.s untuk
sensitif streptomisin, didalilkan untuk mengontrol dua karakteristik alternatif ini.

Mutan lain, ac2 ^ yang memblokir aktivitas fotosintesis, diinduksi dan sepasang alel
nonkromosom, aci dan ac2, dengan demikian tersedia untuk dipelajari pada strain yang sama dari
Chlamydomonas. Mutan membutuhkan asetat di media untuk pertumbuhan. Dengan dua pasang
gen nonkromosom yang tersedia, persilangan dihibrid dapat dilakukan dalam sistem yang sama
untuk memeriksa bukti rekombinasi. Persilangan dihibrid tipe aci ss x ac2 sr dibuat, dan
keturunan dibiarkan tumbuh untuk beberapa perbanyakan vegetatif. Setiap sel kemudian
diklasifikasikan untuk penanda pemisahnya, baik nonkromosom maupun kromosom (yaitu, tipe
kawin dan lainnya yang dikenal sebagai kromosom). Baik pasangan alel aci / ac2 dan sr / ss
diamati untuk memisahkan, tetapi tidak selalu dalam divisi yang sama. Setelah empat atau lima
penggandaan mitosis, baik induk {aci ss dan aCi sr) dan rekombinasi {aci sr dan act ss) telah
diperoleh. Hasilnya menunjukkan bermacam-macam independen, menunjukkan bahwa dua
pasang gen nonkromosom dibawa pada plastida yang berbeda. Persilangan tiga dan empat titik
dan persilangan timbal balik telah dilakukan dengan penambahan beberapa mutan, yang diduga
terbawa dalam kloroplas dan mitokondria. Peta genetik dari gen non-Mendel di Chlamydomonas
telah dibuat, tetapi masih ada ketidakpastian mengenai apakah beberapa kelompok hubungan
"kloroplas" hanya ada dalam genom kloroplas.

Paramecium

Reproduksi aseksual terjadi melalui pembelahan sel untuk menghasilkan klon sel yang identik
secara genetik. Pada fase seksual, paramecia melakukan konjugasi secara berkala dan
mentransfer materi genetik dari satu sel ke sel lainnya. Paramecia dan ciliata lain memiliki dua
jenis inti: makronukleus vegetatif besar dan mikronukleus kecil, yang melewati urutan meiosis
dan menghasilkan gamet haploid. Mikronukleus juga memunculkan makronukleus yang
membelah dalam pembelahan sel aseksual. Di laboratorium, dimungkinkan untuk membuat
persilangan seksual yang melaluinya DNA inti ditransfer dari donor ke penerima, menghasilkan
keturunan heterozigot, yaitu AA x -> Aa. Proses pembuahan sendiri, yang disebut autogami,
menghasilkan homozigosis sempurna dari keturunan yang dihasilkan (Gbr. 14.5). Setelah
meiosis, sel-selnya bersifat haploid, tetapi melalui autogami mereka menjadi diploid homozigot.
Hal ini memberikan dasar untuk membandingkan pewarisan ekstranuklir dan nuklir — dan
dengan demikian untuk menunjukkan bahwa keturunan dapat berbeda dari sifat tipe liar yang
dikendalikan oleh kedua gen ekstranuklir nuklir.

G. H. Beale menemukan bahwa resistensi eritromisin di Paramecium, seperti pada ragi,

dihasilkan dari pewarisan non-Mendel. Sejumlah mutasi sitoplasma dan nukleus tambahan yang
mempengaruhi resistensi antibiotik telah dipelajari oleh Beale dan J. Beisson. Para peneliti ini
dan peneliti lain melakukan transfer sitoplasma dan juga transfer mitokondria terisolasi antara
strain paramecia dan mitokondria (mungkin DNA mitokondria) mengontrol resistensi. Studi juga
menunjukkan bahwa sementara beberapa ciri mitokondria ditentukan oleh mitokondria itu
sendiri, yang lain bergantung pada elemen lain dalam protoplasma.

T. M. Sonneborn dan lainnya telah menyelidiki efek ekstranuklear yang persisten di

Paramecium. Beberapa strain P. aurelia menghasilkan zat yang memiliki efek mematikan pada
anggota strain lain dari spesies yang sama. Paramecia dari galur yang mampu menghasilkan zat
beracun disebut "pembunuh". Ketika pembunuh berada dalam suhu rendah, kapasitas membunuh
mereka perlahan-lahan menghilang. Efek racun juga menurun setelah pembelahan sel berulang.
Unsur terpisah dalam sitoplasma didalilkan untuk produksi zat beracun. Dari kalkulasi
matematis, diperkirakan sekitar 400 partikel dibutuhkan untuk membuat sebuah pembunuh
efektif. Pembunuh kemudian diamati secara mikroskopis dan "partikel '' yang disebut" kappa
"diamati dalam jumlah yang diharapkan." Partikel "ini, yang terbukti sebagai bakteri simbiosis,
dinamai Caedohcicter tcieniospinilis (bakteri pembunuh dengan pita spiral).

Sebuah "zat beracun" (paramecin), yang diproduksi oleh bakteri pembunuh, dapat berdifusi
dalam media cairan. Ketika pembunuh dibiarkan berada di dalam medium untuk beberapa waktu
dan kemudian digantikan oleh zat sensitif, zat sensitif tersebut dibunuh. Paramecin, yang tidak
berpengaruh pada pembunuh, dikaitkan dengan jenis kappa tertentu yang terjadi pada sekitar 20
persen populasi kappa. Bakteri kappa ini memiliki tubuh "R" yang mengandung protein tahan api
dan disebut "brights", karena mereka terinfeksi virus yang mengontrol sintesis protein virus.
Virus ini beracun bagi paramecia yang sensitif tetapi tidak beracun bagi bakteri "nonbright".

Bakteri Kappa dilestarikan hanya pada organisme yang membawa alel nuklear dominan K yang
membentuk lingkungan dan diperlukan untuk reproduksi bakteri. Ketika pembunuh berkonjugasi
dengan zat sensitif dalam kondisi yang sesuai (untuk menghindari pembunuhan pasangannya)
dan tidak terjadi pertukaran sitoplasma (Gbr. 14.7), dua jenis klon muncul: satu dari sel
pembunuh asli, yang mengandung alel K {Kk) dan bakteri kappa, dan yang lainnya dari sel
sensitif asli, yang membawa alel K (Kk) dan tidak memiliki kappa. Setelah autogami, separuh
keturunan dari para pembunuh adalah pembunuh dan separuh lagi adalah paramecia sensitif.
Semua keturunan sensitif sensitive. Karena tidak ada sitoplasma yang ditransfer dalam konjugasi
ini, hanya sel dari pembunuh asli yang mewarisi bakteri kappa. Kappa tidak dapat bereproduksi
dalam sel kecuali ada alel K di nukleus. Dalam beberapa kondisi, konjugasi berlangsung lebih
lama; koneksi yang lebih besar dibuat antara konjugan dan sitoplasma serta gen inti
dipertukarkan (Gbr. 14.8). Ketika konjugannya adalah KK dan kk, alel K dan k ditukar dan
kedua exconjugant adalah Kk. Pertukaran sitoplasma telah memindahkan bakteri kappa dari
pembunuh ke sel nonkiller. Autogami menghasilkan sel homozigot KK dan kk, yang masing-
masing menghasilkan klon pembunuh atau nonkiller

DNA PLASMID dan TRANSFORMASI TUMOR

Plasmid merupakan molekul DNA ekstrakromosom yang bereplikasi secara independen dan
mempertahankan diri dalam sitoplasma sel tumbuhan. Mereka memiliki banyak kesamaan
dengan kromosom mitokondria dan plastida, tetapi mereka tidak diatur menjadi organel yang
penting bagi sel inang mereka. Beberapa plasmid adalah fragmen dari kromosom bakteri dan
beberapa merupakan rekombinan dari fragmen DNA. Kebanyakan plasmid tidak penting untuk
sel inangnya, tetapi beberapa mengontrol reaksi yang menguntungkan terhadap antibiotik.
Karena kemampuannya untuk mereplikasi secara mandiri, untuk bergabung dengan DNA lain,
dan untuk membawa DNA ke pusat sel dari aktivitas sintetik, mereka berguna dalam rekayasa
genetika.

Plasmid yang disebut Ti (untuk menginduksi tumor) membawa urutan DNA yang mengubah sel
tanaman dikotil (tembakau, bunga matahari, wortel, tomat, dll.) Menjadi sel tumor. Transformasi
tumor dikaitkan dengan penyakit mahkota empedu. Penyakit ini, yang dimanifestasikan sebagai
pertumbuhan bulat atau empedu, disebabkan oleh bakteri, agrobacterium tumefaciens. Penyakit
ini penting secara ekonomi, terutama pada tanaman buah-buahan dan persemaian. Hal ini
disebabkan oleh bakteri hidup yang masuk ke permukaan tanaman yang terluka, biasanya di
tajuk (persimpangan batang dan tanah). Tetapi bakteri yang memulai penyakit empedu tidak
diperlukan untuk mengabadikan tumor. Mereka dapat dibunuh setelah beberapa hari dan
tumornya terus berkembang. Sebuah fragmen dari plasmid Ti yang dibawa oleh bakteri telah
digabungkan dengan segmen DNA dari sel tumbuhan yang terinfeksi. Gen yang dibawa oleh
plasmid, sekarang diintegrasikan ke dalam sel tumbuhan, kode untuk enzim yang mendorong
pertumbuhan tumor yang terus menerus dan tidak terkontrol, yang meluas dari empedu yang
diinduksi oleh bakteri.

Male Sterilitas

Contoh lain dari pewarisan sitoplasma dikaitkan dengan kegagalan serbuk sari. Hal ini terjadi
pada banyak tanaman berbunga dan menyebabkan kemandulan jantan. Pada jagung, gandum, bit
gula, bawang merah, dan beberapa tanaman tanaman lainnya, kesuburan dikontrol setidaknya
sebagian oleh faktor sitoplasma. Akan tetapi, pada tumbuhan lain, kemandulan jantan dikontrol
sepenuhnya oleh gen inti. Pengamatan dan tes kritis harus dilakukan dalam kasus individu untuk
menentukan mekanisme pewarisan. Kemandulan jantan memiliki kepentingan praktis ketika
persilangan dilakukan dalam skala besar untuk menghasilkan benih hibrida. Tanaman hibrida
diproduksi secara komersial dalam bentuk jagung, ketimun, bawang merah, sorgum, dan
tanaman lain untuk mendapatkan kekuatan hibrida.

M.M Rhoades menemukan mekanisme pewarisan mitokondria betina terhadap kemandulan

jantan pada jagung. Rhoades menyatakan bahwa gen nuclear tidak mengendalikan kemandulan
pada jantan. Hal ini diwariskan dari generasi ke generasi melalui sitoplasma sel telur

Contoh klasik dari mekanisme pewarisan ibu yang menularkan kemandulan jantan pada jagung
(jagung) ditemukan dan dianalisis dengan cermat oleh M. M. Rhoades. Serbuk sari di aborsi di
kepala sari tanaman jagung tertentu, menyebabkan mereka mandul jantan, tetapi struktur dan
kesuburan betina normal. Gen inti tidak mengendalikan jenis kemandulan ini. Itu ditularkan dari
generasi ke generasi melalui sitoplasma telur. Suatu varietas jantan-mandul hanya menghasilkan
keturunan jantan-steril bila dibuahi dengan serbuk sari dari tanaman jagung normal. Tanaman
induk-benih jantan mandul kemudian disilangkan berulang kali dengan garis subur-serbuk sari
sampai semua kromosom dari garis steril jantan ditukar dengan yang dari garis subur jantan
(Gambar 14.9). Dalam garis steril yang dipulihkan secara genetik, kemandulan jantan tetap ada,
hal ini menunjukkan bahwa kemandulan tersebut diwarisi oleh betina dan tidak dikontrol oleh
gen kromosom. Saat penyelidikan berlangsung, sejumlah kecil serbuk sari diperoleh dari garis
steril jantan, memungkinkan persilangan timbal balik. Persilangan ini menghasilkan keturunan
dari galur tanaman berbiji malesteril yang subur jantan. Jadi, pewarisan kemandulan laki-laki
adalah keibuan, terlepas dari arah mana salib dibuat. Kemandulan pria dalam contoh ini
dikaitkan dengan gen sitoplasma (plasmagenes) yang ditularkan oleh gamet betina.

Namun, efek sitoplasma bukan satu-satunya faktor penyebab kemandulan pria. Gen inti spesifik
sekarang diketahui menekan kemandulan yang diturunkan secara maternal pada jagung. Sebuah
gen kromosom dominan tunggal, misalnya, dapat memulihkan kesuburan serbuk sari di hadapan
sitoplasma yang biasanya akan memastikan kemandulan. Dalam satu percobaan, aborsi serbuk
sari hanya terjadi ketika jenis sitoplasma tertentu hadir bersama dengan gen dominan untuk
kemandulan jantan. Alel resesif homozigot hadir di lokus penekan. Penggunaan jagung steril
jantan dalam skala besar untuk produksi benih membawa bencana bagi tanaman jagung Amerika
Serikat pada tahun 1970. Karena keuntungan keseragaman dalam jagung dan keuntungan besar
dari kemandulan jantan dalam produksi benih, satu sumber sitoplasma, yang dikenal sebagai
Sitoplasma steril jantan Texas (T), telah digunakan dalam memproduksi benih untuk sebagian
besar jagung hibrida yang ditanam tahun itu.

BAHAYA SERAGAM

Jamur Helminthosporium maydis merupakan mutan penyebab kerusakan pada tanaman jagung
hibrida. Ini terutama merusak jagung dengan sitoplasma (T) steril jantan. Ahli patologi dan
pemulia tanaman menghadapi epidemi dengan mencari varietas jagung yang tahan terhadap
jamur. Karena penyakit hawar daun kuning yang sebelumnya tidak terlalu parah, sekitar tahun
1970 produksi benih telah dialihkan ke jagung tanpa sitoplasma T. Jagung ini membutuhkan
pembongkaran manual tetapi digunakan untuk penanaman musim dingin di banyak ladang tahun
1971. Itu juga menghasilkan beberapa benih tahan untuk penggunaan pertanian umum segera.
Beberapa petani lebih menyukai hilangnya hasil panen sebesar 20 hingga 30 persen yang dapat
diprediksi daripada risiko tinggi kehilangan yang jauh lebih besar dari penanaman hibrida yang
rentan. Oleh karena itu, sebagian besar produksi benih tahun 1971 dicapai tanpa menggunakan
kemandulan jantan dan sitoplasma T. Ras T H, maydis tidak serius pada tahun 1972. Masih ada
ras H. maydis yang lain, atau salah satu penyakit jagung lainnya dapat menjadi ancaman bagi
jagung hibrida yang sangat seragam dengan sitoplasma T steril jantan. Beberapa varietas jagung
yang tahan terhadap ras T H. maydis yang ada sekarang telah diidentifikasi dan tersedia untuk
produksi benih. Contoh ini menggambarkan bahaya keseragaman dalam plasma nutfah untuk
tanaman yang ditanam dalam skala besar. Ini juga menunjukkan bahwa program penelitian yang
berkelanjutan sangat penting dalam melindungi pasokan makanan dari potensi kerugian yang
sangat besar.

RINGKASAN

Sebagian besar sifat yang dapat diwariskan dikendalikan oleh gen kromosom inti, tetapi
beberapa bergantung pada DNA dalam organel sitoplasma. Mitokondria dan kloroplas membawa
sejumlah kecil DNA unik yang berperilaku independen terhadap gen inti. Organel sitoplasma ini
diduga telah berevolusi dari bakteri dan alga yang hidup bebas, masing-masing, yang masuk ke
dalam hubungan simbiosis dengan sel eukariotik. Resistensi streptomisin pada beberapa alga saat
ini bergantung pada plastida yang membawa DNA. Di Paramecium, simbion dengan DNA
mereka sendiri didirikan di sitoplasma, tetapi mereka hanya dapat bereproduksi dengan adanya
genotipe inti tertentu (A '). Organel sitoplasma yang membawa DNA dan telah berkembang dari
simbion prokariota telah menjadi mapan dalam evolusi dan telah mempertahankan operasi
genetik terbatas yang kurang lebih tidak bergantung pada gen inti. Plasmid adalah fragmen DNA
dalam sitoplasma yang dapat mengubah sel tumbuhan normal menjadi sel tumor dan
menghasilkan enzim yang menghasilkan pertumbuhan tumor. Kemandulan jantan pada tanaman
jagung dan beberapa tanaman lain serta tanaman taman bunga dikendalikan oleh faktor
sitoplasma. Efek maternal dikontrol oleh gen nuklear ibu dan oleh karena itu bukan merupakan
contoh pewarisan ekstranuklear. Isi ekstranuklear telur, bagaimanapun, mencerminkan pengaruh
genotipe ibu, dan pola pewarisannya seperti pewarisan ekstranuklear.

di universitas texas pertumbuhan abnormal di wilayah kepala Drosophila melanogaster muncul

secara sporadis dalam sampel dari populasi liar yang dikumpulkan. lalat-lalat ini dibiakkan dan
dipilih untuk pertumbuhan kepalanya yang abnormal selama beberapa tahun. Proporsi lalat yang
mengekspresikan sifat tersebut, yang dinamai tumorous head, meningkat menjadi sekitar 76
persen pada suhu 22 c ketika lalat dibesarkan di atas media tepung jagung dan molase. Ketika
persilangan timbal balik dilakukan, efek keibuan diindikasikan. penelitian lebih lanjut
menunjukkan efek keibuan. gen induk memberikan pengaruh ke arah pertumbuhan abnormal
pada kepala keturunan dewasa selama 22 jam pertama perkembangan. Dua gen utama ditemukan
untuk mengontrol sifat kepala tumor: 1) gen terkait jenis kelamin pada 64,5 unit peta pada
kromosom X yang mengendalikan efek ibu dan 2) gen struktural pada 58 unit peta pada
kromosom ketiga yang mengendalikan fenotipe kepala tumor.