BAB III

METODOLOGI PERCOBAAN

III.1 Variabel Percobaan

Molase 85 ml dengan volume 500 mL
III.2 Bahan yang digunakan
1. Aquades
2. Alang-alang
3. Fehling A
4. Fehling B
5. Fermipan
6. H2SO4
7. Methylene blue
8. NPK
III.3 Alat yang digunakan
1. Alat Destilasi
2. Beaker glass
3. Buret & statif
4. Erlenmeyer
5. Gelas Ukur
6. Heater elektrik
7. Labu Ukur
8. pH meter
9. Picnometer
10. Pipet Tetes
11. Termometer
12. Timbangan Elektrik
III.4 Prosedur percobaan
III.4.1 Prosedur Hidrolisis asam
1. Memasukkan Molase ke dalam labu leher tiga sebanyak 85 ml.
2. Menambahkan larutan asam sulfat dengan konsentrasi 2% (v/v) sebanyak 500 ml
(artinya bila total volume larutan 500 mL, 10 mL asam sulfat ditambahkan aquades
hingga batas tera pada labu ukur 500 mL).
3. Memanaskan campuran hingga 100° C selama 30 menit
4. Setelah 30 menit, campuran disaring kemudian filtratnya akan dianalisa kandungan
gulanya.

III-1
III.4.2 Prosedur analisa kandungan gula
III.4.3.1 Pembuatan larutan gula standar 5g/l
1. Menimbang gula sebanyak 5 gram
2. Memasukkan ke dalam labu ukur 1000 ml.
3. Menambahkan aquades hingga batas pada labu ukur.
4. Melakukan analisa kadar gula pada larutan gula 5gram/L.
III.4.3.2 Analisa kadar gula
1. Memasukkan 5 ml fehling A kedalam Erlenmeyer
2. Menambahkan 5 mL fehling B
3. Menambahkan indicator metilen blue sebanyak 4 tetes
4. Memanaskan larutan dalam Erlenmeyer hingga mendidih
5. Menitrasi larutan gula standar 5 g/L, menghitung kadar gula dengan rumus :
C sampel = C standar x V satandar
V sampel
III.4.4 Prosedur fermentasi
1. Filtrate dari hasil hidrolis asam dimasukkan ke dalam Erlenmeyer
2. Menambahkan bakteri/saccharomyces sebanyak 5%(w/w) dari berat bahan.
3. Menambahkan NPK 0.5 gram sebagai nutrisi
4. Melakukan inkubasi selama 5 hari

III.4.5 Tahap Destilasi

1. Siapkan 1 set peralatan destilasi.
2. Masukkan campuran alkohol-air ke dalam labu, kemudian pasang labu tersebut pada
alat destilasi yang telah disediakan.
3. Atur temperaturnya 78°C, dan waktu evaporasi yang dilakukan selama 5 menit
sehingga alkohol yang didapat akan menghasilkan kadar alkohol yang bervariasi.
4. Simpan hasil yang didapat dalam botol yang ditutup rapat.

III.4.6 Uji Densitas dalam Bioetanol dari Sampel

1. Menimbang berat picnometer kosong.
2. Memasukkan bioetanol dari Sampel kedalam picnometer.
3. Menimbang berat picnometer yang telah berisi bioetanol dari Sampel.
4. Menghitung densitas bioetanol dari Sampel dengan rumus :
ρ pichno = ρ pichno isi – berat pichno
Volume Pichno

III.5 Diagram Alir percobaan

III.5.1 Prosedur pretreatment mekanik
III-2
 Mulai

Alang-alang dibersihkan kemudian dikecilkan ukurannya

Dikeringkan menggunakan oven selama ± 6-7 jam pada suhu 100° C

Selesa
i
III.5.2 Prosedur Hidrolisis asam

Mulai

Memasukkan alang-alang ke dalam labu leher tiga sebanyak 25 gram

Menambahkan larutan asam sulfat dengan konsentrasi 2% (v/v) sebanyak 500

ml (artinya bila total volume larutan 500 mL, 10 mL asam sulfat ditambahkan
aquades hingga batas tera pada labu ukur 500 mL)

Memanaskan campuran hingga 100° C selama 1 jam (hidrolisis asam)

Setelah 1 jam, campuran disaring kemudian filtratnya akan dianalisa

kandungan gulanya.

Selesa
i
III.5.3 Prosedur analisa kandungan gula
III.5.3.1 Pembuatan larutan gula standar 5g/l

Mulai

Menimbang gila sebanyak 5 gram

Memasukkan ke dalam labu ukur 1000 ml

III-3
 A

Menambahkan aquades hingga batas pada labu ukur

Melakukan analisa kadar gula pada larutan gula 5gram/L

Selesa
i
III.5.3.2 Analisa kadar gula

Mulai

Memasukkan 5 ml fehling A kedalam Erlenmeyer

Menambahkan 5 mL fehling B

Menambahkan indikator metilen blue sebanyak 4 tetes

Memanaskan larutan dalam Erlenmeyer hingga mendidih

Menitrasi larutan gula standar 5 g/L

Selesa
i
III.5.4 Prosedur fermentasi

Mulai

Filtrat dari hasil hidrolis asam dimasukkan ke dalam Erlenmeyer

Menambahkan bakteri/ saccharomyces sebanyak 5%(w/w) dari

berat bahan

Menambahkan NPK 0.5 gram sebagai nutrisi

Melakukan inkubasi selama 5 hari

Selesa
i
III-4
III.5.5 Tahap Destilasi

Mulai

Siapkan 1 set peralatan destilasi

Masukkan campuran alkohol-air ke dalam labu, kemudian

pasang labu tersebut pada alat destilasi yang telah disediakan

Atur temperaturnya 78°C, dan waktu evaporasi yang

dilakukan selama 5 menit sehingga alkohol yang didapat
akan menghasilkan kadar alkohol yang bervariasi

Simpan hasil yang didapat dalam botol yang ditutup rapat

Selesa
i

III.5.6 Uji Densitas dalam Bioetanol dari Sampel

Mulai

Menimbang berat picnometer kosong

Memasukkan bioetanol dari Sampel kedalam picnometer

Menimbang berat picnometer yang telah berisi bioetanol dari

Sampel

Menghitung densitas bioetanol dari Sampel dengan rumus

Selesa
i

III-5
III.6 Gambar Alat

Alat Destilasi Beaker Glass Buret & statif

Erlenmeyer Gelas Ukur Heater elektrik

Labu ukur pH meter Picnometer

Pipet tetes Termometer Timbangan elektrik

III-6