DIAGRAM ALAT KCKT
1. Reservoir Pelarut, Fase gerak pada
KCKT harus menggunakan pelarut
dengan kemurnian sangat tinggi.
Reservoir pelarut merupakan
wadah penyimpanan fase gerak,
biasanya berbentuk botol kaca
dengan selang penghubung.
2. Pompa, pompa yang digunakan
dalam KCKT haruslah pompa
bertekanan tinggi agar dapat
mendorong fase gerak dalam
reservoir menuju kolom fase diam
dan melewati detektor.
3. Injektor, merupakan tempat
masuknya sampel ke dalam sistem
KCKT.
4. Sampel, yang dapat dianalisis
menggunakan KCKT harus bersifat
bening dan tidak ada endapan,
untuk itu preparasi sampel
diperlukan sebelum dianalisis,
misalnya dengan melakukan filtrasi
sampel.
5. Kolom KCKT, merupakan jantung
kroatografi. Kolom dapat dibagi
menjadi dua kelompok :
- Kolom analitik
- Kolom prevaratif
6. Detektor, berfungsi untuk
mendeteksi keberadaan komponen
yang telah melewati kolom dan
memberikan sinyal elektronik pada
pengolah data.
7.Pengolah data, menampilkan output
visual hasil analisis yang terbaca oleh
detektor dalam bentuk kromatogram.
Kromatogram menggambarkan jumlah
komponen pada sampel dilihat dari
jumlah puncak (peak) yang dihasilkan.
 Buat fase gerak
(campuran air - asetonitril P (63:37)
Senyawa Betametason
Larutan baku internal Timbang sejumlah propilparaben, larutkan dalam etanol P
hingga kadar lebih kurang 0,25 mg per ml.

Larutan baku Timbang saksama sejumlah Betametason BPFI, larutkan dalam etanol P
hingga kadar lebih kurang 0,2 mg per ml

Masukkan 10,0 ml larutan ini ke dalam vial yang sesuai, tambahkan 10,0 ml Larutan
baku internal hingga kadar betametason lebih kurang 0,1 mg per ml dan kadar
propilparaben lebih kurang 0,125 mg per ml.

Penetapan kadar Lakukan penetapan

dengan cara Kromatografi cair kinerja Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 80 mg zat, lakukan seperti tertera pada
tinggi Larutan baku. Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada Kromatografi <931>.
Kromatograf cair kinerja tinggi dilengkapi dengan detektor 254 nm dan kolom 4 mm x
30 cm berisi bahan pengisi L1. Laju alir lebih kurang 1 ml per menit. Lakukan
kromatografi terhadap Larutan baku, rekam kromatogram dan ukur respons puncak
seperti tertera pada Prosedur: waktu retensi relatif untuk betametason dan
propilparaben berturut-turut lebih kurang 1,0 dan 1,4; resolusi, R antara puncak
betametason dan propilparaben tidak kurang dari 3,0; dan simpangan baku relatif pada
penyuntikan ulang tidak lebih dari 2,0%. Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah
volume sama (lebih kurang 10 µl) Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf,
rekam kromatogram dan ukur respons puncak utama. Hitung jumlah, dalam mg
betametason, C22H29FO5, dalam zat yang digunakan