TUGAS FARMAKOLOGI MOLEKULER

PRIYOSETYOKO

MAGISTER KIMIA UNIVERSITAS DIPONEGORO

FAKULTAS SAINS DAN MATEMATIKAN
2020/2021
Methotrexate an Old Drug with New Tricks
1. Sejarah Methotrexate

2. Farmakokinetik MTX

3. Mekanisme Aksi Terapi MTX dalam Pengaturan Inflamasi

4. MTX sebagai obat imunosupresan

5. Kesimpulan
1. Sejarah Methotrexate
Methotrexate (4-amino-10-methylfolic acid, MTX), sebelumnya dikenal sebagai amethopterin, awalnya
adalah salah satu dari beberapa antagonis asam folat disintesis pada tahun 1940-an untuk pengobatan
yang dirancang untuk menghambat secara struktural dihydrofolate reductase (DHFR), enzim esensial untuk
sintesis purin dan pirimidin dalam sel proliferasi.

Alasan pengenalan MTX untuk pengobatan RA (Rheumatoid Arthritis) diasumsikan pada kapasitasnya
menghambat respon inflamasi dan proliferatif jaringan ikat. Reumatoid artritis (RA) merupakan penyakit
autoimun dengan sistem kekebalan tubuh yang menyerang sinovium dan dapat menyebabkan peradangan
kronis. Antifolate yang terkait erat dengan aminopterin. Aminopterin secara bertahap digantikan oleh MTX
karena sifatnya yang kurang toksik dan penggunaan klinis pertama yang didokumentasikan dari MTX untuk
pengobatan RA adalah pada tahun 1951. Potensi klinis MTX sebagai pengobatan RA disarankan oleh
Gubner, setelah mempelajari efek MTX pada pasien RA, yang dilakukan selama 1980-an. Pasien RA yang
diobati dengan MTX menunjukkan peningkatan penilaian aktivitas penyakit secara global, skor sendi, dan
penurunan nyeri yang nyata. Sejak itu, penggunaan MTX dosis rendah telah meluas hingga melibatkan
penyakit inflamasi dan autoimun tambahan.
Methotrexate atau metotreksat (MTX) merupakan obat golongan
antineoplastik serta imunosupresan, dengan mekanisme sebagai agen
antimetabolit dan antifolat. Obat ini digunakan untuk kemoterapi beberapa
jenis kanker, seperti kanker payudara, kepala dan leher, paru-paru, darah,
tulang, kelenjar getah bening, dan rahim. Selain itu juga digunakan untuk
mengobati rheumatoid arthritis parah, dan mengatasi gejala psoriasis berat
pada orang dewasa
Methotrexate atau MTX bekerja untuk menghambat
dihidrofolat reduktase, enzim yang diperlukan dalam
produksi perantara asam folat yang dibutuhkan
untuk replikasi DNA dan sintesis protein. MTX paling
efektif dalam membelah sel secara aktif, oleh karena
itu manfaat terapeutiknya dalam mengobati kanker.
2. Farmakokinetik MTX
Dalam pengobatan penyakit autoimun inflamasi, MTX biasanya diberikan
secara oral sebagai dosis mingguan tunggal. Dalam praktek klinis, pengobatan
dimulai dengan dosis 10 mg / minggu, dengan peningkatan 5 mg setiap 2-4
minggu hingga dosis maksimum 20-30 mg / minggu, tergantung klinis respon
atau intoleransi.

Setelah pemberian oral, MTX diserap di jejunum proksimal oleh folat yang
digabungkan dengan proton transporter (PCFT / SLC46A1), yang mengangkut
folat dan MTX yang berkurang.
Gambar 1. Proses farmakokinetik
MTX setelah pemberian oral.
Penyerapan MTX, distribusi,
metabolisme, dan ekskresi setelah
pemberian oral.
Intraseluler pembentukan MTX poliglutamat juga
memainkan peran penting dalam aktivitas MTX,
meningkatkan penghambatan dihidrofolat reduktase
(DHFR) dan beberapa enzim yang bergantung pada folat
seperti timidilat sintase (TYMS), 5-amino-imidazole-4-
carboxide ribonucleotide (AICAR) transformylase (ATIC),
dan metilen Tetrahydrofolate reductase (MTHFR)
menurunkan intermediet jalur folat hilir diperlukan untuk
sintesis nukleotida, DBD, dihidrofolat; THF, tetrahidrofolat;
FAICAR, formyl AICAR; NONA, sintetase metionin; dTMP,
deoxythymidine monophosphate.
Gambar 2. Transporter Methotrexate (MTX), jalur metabolisme dan target enzim
intraseluler.
3. Mekanisme Aksi Terapi MTX dalam Pengaturan Inflamasi
Antagonisme Folat

Efektivitasnya dikaitkan dengan kemampuannya untuk menghambat enzim kunci yang terlibat dalam biosintesis
purin dan pirimidin, sehingga membatasi pergantian sel ganasSebagai penghambat ampuh dihidrofolat reduktase
(Gambar 2), mengurangi folat intraseluler yang aktif secara metabolik sintesis de novo purin dan pirimidin
(prekursor DNA dan RNA) diperlukan untuk seluler proliferasi

Efek pada Akumulasi Adenosin Ekstraseluler

Adenosine adalah mediator anti-inflamasi yang kuat yang bekerja melalui interaksi dengan berbagai jenis subtipe sel
kekebalan termasuk neutrofil, makrofag, dan sel T dan memodulasi susunan yang luas fungsi fisiologis denosine
bekerja melalui empat G-protein-coupled 7-transmembrene-receptors (ADOR); adenosin reseptor A1 (ADORA1),
reseptor adenosin A2a (ADORA2A), reseptor adenosin A2b (ADORA2B), dan reseptor adenosin A3 (ADORA3). Efek
anti-inflamasi Adenosine sebagian besar dianggap dimediasi melalui ADORA2A, dan kemungkinan stimulasi ADORA3
[62- 64]. Aktivasi ADORA2A dan Hasil ADORA3 dalam pengurangan sitokin proinflamasi IL-1β, TNF-α, dan IL-6, dan
produksi matrix metaloproteinase (MMPs)

Efek pada Produksi Polyamine

Kemampuan MTX dalam melawan DHFR menyebabkan penurunan produksi tetrahidrofolat (THF). Dan
methyltetrahydrofolate (methyl THF) (Gambar 2) yang merupakan donor metil dalam reaksi kimia.
Generasi Spesies Oksigen Reaktif

Sifat pengubah redoks MTX telah diusulkan sebagai mekanisme penting dari efek
imunosupresif obat. MTX dosis rendah ditemukan untuk menginduksi transformasi
apoptosis sel T melalui pembentukan spesies oksigen reaktif (ROS). Generasi ROS yang
diinduksi MTX dapat dimediasi oleh penipisan tetrahidrobiopterin. MTX adalah penghambat
kuat DHFR. DHFR mengkatalisis reduksi dihydrobiopterin menjadi tetrahydrobiopterin yang
merupakan kofaktor yang dibutuhkan untuk sintesis NO oleh nitric oxide synthases (NOSs)

Efek pada Produksi Sitokin

Sitokin adalah mediator utama dalam respons inflamasi dan imun dan sangat bagus minat
dalam perkembangan terapeutik baru-baru ini pada arthritis kronis, awalnya dengan TNF-α
sebagai hal yang sangat penting sitokin yang ditargetkan
MTX telah dilaporkan menurunkan TNF-α, IL1β, dan molekul adhesi (E-selektin dan VCAM-1)
ekspresi pada biopsi sinovial RA (Gambar 3).
Gambar 3. Pengaturan kekebalan MTX dosis rendah di jaringan sinovial RA. Pengobatan MTX berkurang produksi sitokin
monositik / makrofagik proinflamasi (IL1, IL6, dan TNF-), meningkatkan Th2 ekspresi gen sitokin antiradang (IL4 dan L10),
dan menurunkan sitokin proinflamasi Th1 (IL2 dan IFN) ekspresi gen. MTX menurunkan regulasi reseptor IgG Fc Fc
Tingkat ekspresi RI dan Iia pada monosit menurunkan aktivasi mereka. MTX tampaknya mengganggu fibroblas sinovial
dan sel T. sinyal cross-talk dengan menginduksi penghambatan ekspresi IL15, IL6, dan IL8 oleh fibroblas sinovial, sebagai
serta IFN dan ekspresi IL17 dalam limfosit RA T yang dikultur bersama. MTX meningkatkan sintesis ROS di Sel T, monosit
dan neutrofil.
Efek pada Matriks Metalloproteinase

MMP adalah famili enzim ekstraseluler dependen Zn 2+ yang berperan penting peran dalam renovasi jaringan fisiologis
dan patologis. MMP disintesis sebagai tidak aktif proenzim (pro-MMPs) dan kebanyakan dari mereka diaktifkan di luar sel
dengan pembelahan proteolitik. Di luar sel, aktivitas MMPs diatur oleh jaringan bernama penghambat endogen
penghambat MMPs (TIMPs)

Efek pada Produksi Prostaglandin

Data yang tersedia sangat terbatas tentang efek MTX pada produksi PGE2. MTX disarankan memiliki efek penghambatan
pada sintesis PGE2. Penelitian lain menunjukkan bahwa MTX gagal menghasilkan perubahan dalam sintesis PGE2. MTX
tidak punya efek pada jalur metabolisme COX pada tikus rematik ajuvan [114]. MTX tidak memengaruhi mPGES-1, COX-1,
dan ekspresi COX-2 dalam biopsi jaringan sinovial dari pasien RA

MTX Menghambat Aktivitas NF-κB

Faktor inti-κB (NF-κB) adalah faktor transkripsi sitoplasma mapan yang terlibat dalam peradangan, respon imun serta
proliferasi sel dan apoptosis [117]. Ini diaktifkan oleh panel luas dari rangsangan yang berbeda termasuk sitokin pro-
inflamasi seperti TNF-α atau IL 1β
Gambar 4. MTX mempengaruhi beberapa jalur transduksi sinyal yang terlibat dalam patogenesis rheumatoid
arthritis (RA).
MTX adalah Penghambat Jalur JAK / STAT
Diaktifkan oleh berbagai sitokin dan faktor pertumbuhan, jalur pensinyalan JAK / STAT
memainkan peran penting peran dalam respon inflamasi karena berkontribusi pada
peningkatan regulasi pro-inflamasi yang signifikan ekspresi sitokin serta kelangsungan
hidup sel yang menyimpang yang keduanya terkait dengan RA

MTX Menghambat Efek Alarmin HMGBI Proinflamasi

Protein kromosom kotak kelompok mobilitas tinggi 1 (HMGB1), juga disebut amfoterin
atau HMG1, adalah protein inti non-histon yang melimpah 25 hingga 30 kDa yang secara
konstitutif diekspresikan dalam nukleus sel eukariotik.
Gambar 5. MTX menghambat interaksi HMGB-1 /
RAGE. HMGB1 dilepaskan oleh sel kekebalan yang
diaktifkan (makrofag, monosit, dan sel dendritik) atau
oleh sel cedera bertindak sebagai mediator penting
peradangan atau alarmin. HMGB-1 mengaktifkan sel
melalui keterlibatan beberapa reseptor permukaan
termasuk TLR2, TLR4, dan RAGE.
4. MTX sebagai obat imunosupresan

Ada kepercayaan di antara ahli reumatologi bahwa MTX, sebagai obat imunosupresan, terkait dengan
perkembangan infeksi oportunistik. MTX dosis rendah mingguan dapat memengaruhi aktifitas sel T. ,
dan kasus Pneumocystis pneumonia, nocardiosis, aspergillum, kriptokokosis, herpes zoster, herpes
simpleks dan listeria-meningitis telah dilaporkan. Meskipun beberapa penelitian menunjukkan
peningkatan risiko infeksi MTX, beberapa penelitian lain telah menemukan bahwa MTX dosis rendah
tampaknya tidak secara signifikan meningkatkan risiko infeksi pada RA pasien. Risiko ini tampaknya
terkait dengan aktivitas penyakit, komorbiditas (diabetes, alkoholisme) dan penggunaan
glukokortikoid, tetapi tidak langsung dengan pengobatan MTX. Itu baik-baik saja menyadari bahwa
pasien RA memiliki peningkatan risiko infeksi yang signifikan mungkin karena aktivasi kekebalan
kronis dan peradangan yang mana dapat merusak fungsi kekebalan. Peningkatan risiko infeksi terkait
dengan MTX mungkin diatur oleh peningkatan fungsi imunologi sekunder untuk pengendalian
peradangan.
Methotrexate memiliki aktivitas imunosupresan yang kuat
meskipun mekanisme kerjanya tidak jelas. Diduga obat ini dapat
mempengaruhi fungsi kekebalan tubuh. Berdasarkan hasil
penelitian, reaksi invitro methotrexate menyebabkan
pengambilan prekursor DNA terhambat karena distimulasi oleh
sel mononuklear. Selain itu ditemukan pula gambaran sel yang
mengalami koreksi parsial poliartritis dari hiporesponsivitas sel
limpa dan penekanan produksi interleukin II. Karena efek
imunosupresan ini, methotrexate dapat digunakan untuk
mengobati gejala berat.
5. Kesimpulan

 Sejumlah mekanisme farmakologis dari aksi MTX dosis rendah telah diusulkan; MTX mungkin menginduksi
penghambatan sintesis purin dan pirimidin, menekan reaksi transmetilasi dan akumulasi poliamina, dan
mempromosikan pelepasan adenosin dengan penekanan yang dimediasi adenosin peradangan dan penekanan
fungsi alarmin HMGB1

 Pemahaman tentang mekanisme terapeutik dan toksik dari aksi MTX mungkin lebih jauh minat untuk
mengidentifikasi target terapeutik baru untuk mengelola patologi inflamasi dan kekebalan yang dimediasi
sambil meminimalkan efek racun yang tidak diinginkan
TERIMAKASIH