KULTUR MIKROALGA PADA SKALA LABORATORIUM

Oleh:
Nama : Veghy Nur Salindhry
NIM : B1J013115
Kelompok : 3
Rombongan : II
Asisten : Ichsan Dwiputra Sofiadin

LAPORAN PRAKTIKUM FIKOLOGI

KEMENTERIAN RISET TEKNOLOGI DAN PENDIDIKAN TINGGI

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
FAKULTAS BIOLOGI
PURWOKERTO
2016
 I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Kultur mikroalga merupakan salah satu bioteknologi modern. Kultur uni alga
pertama dicapai oleh Beijerinck pada tahun 1890 dengan Chlorella vulgaris, dan
penggunaan budaya tersebut untuk mempelajari fisiologi tanaman dikembangkan
oleh Warburg di awal 1900-an. Massa kultur dari mikroalga benar-benar mulai
menjadi fokus penelitian setelah tahun 1948 di Stanford (USA), Essen (Jerman) dan
Tokyo dan buku klasik yang disunting oleh Burlew pada tahun 1953 dengan
merangkum banyak dari studi awal. Tujuan kultur alga diterapkan terus-menerus,
terutama dengan studi tentang penggunaan ganggang sebagai penukar gas
fotosintesis untuk perjalanan ruang angkasa dan sebagai sumber protein mikroba
(Perumal et al., 2012).
Kultur skala besar komersial mikroalga dimulai pada awal 1960-an di Jepang
dengan kultur Chlorella yang diikuti pada awal 1970-an dengan pendirian sebuah
pemanenan Spirulina dan fasilitas kultur di Danau Texcoco, Meksiko oleh Sosa
Texcoco SA pada tahun 1977 Dai Nippon Inc. dan Kimia Inc. didirikan pabrik
Spirulina komersial di Thailand, dan pada tahun 1980 ada 46 pabrik skala besar di
Asia memproduksi lebih dari 1000 kg mikroalga (terutama Chlorella) per bulan dan
pada tahun 1996 sekitar 2000 t Chlorella yang diperdagangkan di Jepang saja.
Tanaman Spirulina lainnya didirikan di Amerika Serikat (misalnya. Microbio di
California dan Cyanotech di Hawaii). Produksi komersial dari Dunaliella salina,
sebagai sumber β-karoten, menjadi industri mikroalga utama ketiga ketika fasilitas
produksi didirikan oleh Western Biotechnology Ltd dan Betatene Ltd (sekarang
Cognis Nutrition & Health) di Australia pada tahun 1986 (Perumal et al., 2012).
Ini segera yang diikuti oleh tanaman komersial lainnya di Israel dan Amerika
Serikat. Ganggang ini, Cyanobacteria (alga hijau-biru) produksi skala besar yang
dimulai di India pada waktu yang sama. Baru-baru ini beberapa memproduksi
tanaman Haematococcus pluvialis sebagai sumber astaxanthin telah dibentuk di
Amerika Serikat dan India. Dengan demikian dalam waktu singkat sekitar 30 tahun
industri bioteknologi mikroalga telah tumbuh dan diversifikasi secara signifikan
(Perumal et al., 2012).
 B. Tujuan

Tujuan praktikum kultur mikroalga pada skala laboratorium adalah mengetahui

cara kultur mikroalga Chlorella pada skala laboratorium.
 C. Tinjauan Pustaka

Mikroalga laut adalah tanaman uniseluler mikroskopis terapung di air laut yang
umumnya hidup bebas, pelagis dan berbagai ukuran dari 2 sampai 20μm. Komponen
penting dari mikroalga adalah diatom, dinoflagellata, hijau alga, ganggang biru-hijau
dan coccolithophores. Kebanyakan mikroalga telah mendapat nilai besar merupakan
sumber yang kaya asam lemak esensial, pigmen, asam amino dan vitamin.
Mikroorganisme ini memainkan peran penting dalam budidaya pesisir dan laut ikan,
moluska, udang dan tiram. Fitoplankton ini memainkan peran penting dalam
budidaya untuk memenuhi kebutuhan gizi larva serta untuk bioencapsulation. Ini
adalah fakta menetapkan bahwa keberhasilan setiap operasi pembenihan akan
tergantung terutama pada ketersediaan sembako, fitoplankton. Pemeliharaan dan
pasokan dari spesies yang dibutuhkan pada waktu yang tepat membentuk masalah
utama yang dihadapi budidayawan alga. Prosedur untuk kultur fitoplankton
melibatkan aspek-aspek seperti isolasi spesies yang diperlukan, penyusunan media
kultur yang sesuai, pemeliharaan budaya dalam skala laboratorium, serta skala besar
dalam kondisi yang terkendali cahaya, suhu dan aerasi dan konstan mereka pasokan
dalam fase yang berbeda dari pertumbuhan (Perumal et al., 2012).
Chlorella sp. merupakan salah satu mikroalga yang sering dibudidayakan untuk
berbagai macam keperluan seperti obat, kosmetik, ataupun untuk energi alternatif
biodiesel. Chlorella sp. bersifat kosmopolit yang mampu hidup dimana mana kecuali
pada tempat yang sangat kritis bagi kehidupanya. Kemudahan dalam mengkultur
mikroalga ini memungkinkan untuk dilakukan penelitian terhadap kandungan
lipidnya yang tergolong cukup tinggi untuk menghasilkan biofuel sebagai salah satu
solusi dalam mengatasi krisis sumber daya minyak (Widiyanto et al., 2014).
Suatu mikroalga merupakan sumber penting dari nutrisi dan digunakan secara
luas dalam budidaya organisme lain, baik secara langsung atau sebagai sumber
tambahan nutrisi dasar. Budidaya peternakan membesarkan larva moluska,
echinodermata, krustasea dan ikan menggunakan mikroalga sebagai sumber nutrisi.
Rendah bakteri dan biomassa alga mikro yang tinggi merupakan sumber makanan
penting bagi kerang akuakultur (Perumal et al., 2012).
Mikroalga dapat membentuk awal dari rantai proses budidaya lanjut. Misalnya,
mikroalga adalah yang penting sumber makanan di budidaya udang laut. Udang air
laut menghasilkan telur dorman, disebut kista, yang dapat disimpan dalam periode
yang lama dan kemudian menetas sesuai permintaan untuk memberikan bentuk yang
nyaman sebagai pakan hidup selama budidaya larva ikan dan krustasea (Perumal et
al., 2012).
Aplikasi lain dari mikroalga dalam budidaya termasuk meningkatkan daya
tarik estetika ikan bersirip yang dibiakkan di penangkaran. Salah satu contohnya
dapat dicatat dalam budidaya ikan salmon, di mana mikroalga yang digunakan untuk
membuat daging salmon menjadi lebih merah muda. Hal ini dicapai dengan
penambahan pigmen alami yang mengandung karotenoid seperti Astaxanthin
dihasilkan dari mikroalga yang Haematococcus untuk pola makan ikan budidaya.
(Perumal et al., 2012).
 II. MATERI DAN METODE

A. Materi

Alat-alat yang digunakan pada praktikum kultur mikroalga pada skala

laboratorium adalah mikroskop, pipet tetes, hamocytometer, Sedgewich rafter, cover
glass dan botol kultur.
Bahan-bahan yang digunakan pada praktikum kultur mikroalga pada skala
laboratorium adalah media Conway, media Miquel-Allen dan media Zarrouk.

B. Metode

Metode yang digunakan pada praktikum kultur mikroalga pada skala

laboratorium adalah sebagai berikut:
1. Alat dan bahan disiapkan
2. Isolat yang akan digunakan disiapkan
3. Isolat 5 ml, media dan akuades dimasukkan ke dalam botol kultur
4. Isolat pada botol kultur diteteskan ke haemocytometer dengan pipet tetes
5. Kerapatan dan kepadatan mikroalga dihitung dengan pipet tetes
6. Mikroalga dipelihara selama 4 hari
 III. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil

Gambar 3.1.Hasil Kultur Gambar 3.2.Hasil Kultur

Mikroalga hari ke-1 Mikroalga hari ke-4

Gambar 3.3.Perhitungan
Kepadatan Mikroalga

Perhitungan kepadatan (Jumlah Sel) Mikroalga

L1=11, L2=8, L3=14, L4=8; ƩL=41, rata-rata ƩL=41/4= 10,25

Kepadatan Mikroalga = rata-rata ƩL x 2,5 x 104

= 10,25 x 2,5 x 104

= 2,563 x 105 sel/ml

 B. Pembahasan

Biakan dapat didefinisikan sebagai lingkungan buatan di mana mikroalga

tumbuh. Kultur fitoplankton adalah merupakan aspek penting dari Planktonology
kultur massa fitoplankton dicapai dalam kondisi laboratorium yang terkontrol dan di
bawah bidang / kondisi outdoor. Kultur di bawah kondisi laboratorium, wadah yang
dibersihkan atau steril diisi dengan air laut tersaring/ steril (28-34 ‰) dan diperkaya
dengan penambahan nutrisi seperti contohnya media Walne atau Conway. Wadah
kultur yang telah terinokulasi dengan strain murni fitoplankton yang diinginkan
sebelumnya dibudidayakan di laboratorium. Dilengkapi dengan aerasi berat dan
ringan melalui bank cahaya dalam laboratorium yang terkendali dengan suhu 25 ± 2°
C. Fase pertumbuhan eksponensial umumnya diamati dalam 36 jam sampai 3 hari
setelah inokulasi. Kepadatan sel 1,5-4500000 sel per ml dapat tercatat. Jumlah yang
cukup untuk inokulum fitoplankton biasanya hadir dalam air laut tersaring secara
kasar ketika nutrisi ditambahkan, bloom fitoplankton berkembang dalam beberapa
hari di bawah sinar matahari yang cukup besar (Perumal et al., 2012).
Chlorella sp. merupakan alga hijau yang mengandung klorofil yang tinggi.
Spesies ini berwarna hijau dan non motil, dan tidak memiliki flagella. Habitat
Chlorella sp. yaitu air tawar dan air laut. Selnya berbentuk bola berukuran sedang
dengan diameter 2-10 mm, tergantung spesiesnya, dengan kloroplas berbentuk
cangkir. Selnya bereproduksi dengan membentuk dua sampai delapan sel anak
didalam sel induk yang akan dilepaskan dengan melihat kondisi lingkungan. Spesies
ini mengandung vitamin, mineral, serat, asam nukleat, asam amino, dan enzim
(chlorophyllase dan pepsin). Chlorella sp. mengandung protein yang sangat tinggi
yaitu sekitar 60%. Chlorella sp. dapat dimanfaatkan sebagai pakan dalam produksi
zooplankton (rotifera, dhapnia, dan lain-lain), larvikultur ikan, produksi makanan,
kosmetik, green water technique, menjaga kualitas air, dan sebagainya. Selain itu,
Chlorella sp. juga dapat dimanfaatkan untuk mempercepat pemulihan jaringan rusak
dan memperbaiki sistem imun (Erlina dan Hastuti, 1986).
Spirulina platensis (Cyanobacteria), genus fotoautotropik hijau-biru dan
mikroalga uniseluler, merupakan alternatif sumber protein, pigmen, minyak lemak
esensial, vitamin, antioksidan dan imunostimulan untuk makanan manusia dan tujuan
pakan hewan (darat, air tawar dan laut). Selain itu, dapat pulih dengan mudah dan
murah dengan penyaringan dari media karena ukurannya yang relatif besar. S.
platensis, mengandung berbagai kelompok fungsional seperti karboksil, hidroksil,
sulfat dan kelompok lainnya yang dikenakan yang bertanggung jawab untuk logam
mengikat. Tidak hanya tergantung pada konsentrasi logam total dan bebas, tetapi
juga pada berbagai lingkungan dan faktor fisiologis yang mempengaruhi kedua
spesiasi logam kimia dan penyerapan logam oleh sel-sel (Sayin et al., 2011).
Pertumbuhan mikroalga dalam suatu kultur dapat ditandai dengan bertambah
besarnya ukuran sel atau bertambahnya jumlah sel. Bertambahnya kepadatan sel pada
kultur Spirulina akan berpengaruh terhadap kepekatan warna kultur yang
dipengaruhi oleh kandungan klorofil. Menurut Fogg (1965), Secara umum
pertumbuhan mikroalga ada 5 fase, yaitu :
1. Fase induksi atau lag, pada fase ini tidak terdapat penambahan sel tetapi ukuran
sel umumnya meningkat.
2. Fase eksponensial, pada fase ini pembelahan sel berjalan dengan cepat
sehingga jumlah sel bertambah.
3. Fase berkurangnya pertumbuhan relatif, pada fase ini pembelahan sel mulai
berkurang sehingga laju pertumbuhan mulai menurun.
4. Fase stationer, pada fase ini jumlah sel tetap karena laju reproduksi sama
dengan laju kematian. Penambahan dan pengurangan jumlah mikroalga relatif
sama atau seimbang sehingga kepadatan mikroalga tetap.
5. Fase kematian, pada fase ini laju kematian lebih cepat daripada laju reproduksi
sehingga jumlah sel akan menurun. Penurunan kepadatan mikroalga ditandai
dengan perubahan kondisi optimum yang dipengaruhi temperatur, cahaya, pH
medium, jumlah nutrien dan beberapa kondisi lingkungan lain.
Menurut Song (1980), peningkatan produktivitas sel-sel mikroalga akan
terhenti setelah mencapai titik puncak produktivitasnya, yang kemudian akan
mengalami penurunan sehubungan dengan berjalannya waktu. Menurut Isnansetyo
dan Kurniastuty (1995), ada 2 faktor lingkungan yang dapat menentukan daya biak
populasi yaitu faktor yang bergantung pada kepadatan populasi misal kekurangan
bahan makan, kekurangan ruang untuk hidup karena populasi terlalu padat dan faktor
yang tidak tergantung pada kepadatan populasi, misalnya penurunan suhu
lingkungan secara drastis dan mendadak.
Faktor lain yang diduga menentukan daya biak populasi pertumbuhan suatu
kultur dapat dihambat oleh adanya bahan-bahan yang diproduksi oleh sel kedalam
media yang merupakan autoinhibitor. Nitrogen merupakan komponen utama
pembentuk asam amino yang sangat dibutuhkan dalam pertumbuhan alga. Bila
konsentrasi nitrogen dalam media berkurang maka dapat mengakibatkan
pertumbuhannya lambat (Peter et al., 2010). Menurut Kurniawan dan Lukman (1999)
menambahkan bahwa kekurangan nitrogen menyebabkan fotosintesis menurun dan
produktivitas protein juga menurun. Selain itu dapat pula menyebabkan pembelahan
sel terhambat dan sebagai akibatnya pertumbuhannya akan terhambat pula.
Faktor lainnya ialah keberadaan sinar UV yang sangat berpengaruh pada
Spirulina terutama dalam proses fotosintesis. Keberadaan sinar UV-A dan UV-B
dapat menghambat proses pertumbuhan dan fotosintesis. Pigmen fotosintesis pada
PS II lebih rentan terserang UV-B dan UV-B dapat merusak fikobili (Gao, 2008).
Spirulina juga sangat peka terhadap keberadaan Nitrogen. Pengujian dengan
penambahan Nitrogen pada media pertumbuhan menunjukkan adanya pengaruh
pengikatan spektrum sinar yang diikat oleh PSII dan transfer energi dari PC ke Chlα.
Media kultur Spirulina jenis in vivo sangat sekali bergantung pada pupuk yang
mengandung unsur N untuk mencegah perusakan PSII oleh enzim protease (Peter et
al., 2010).
Menurut Erlina dan Hastuti (1986), pertumbuhan suatu jenis fitoplankton erat
kaitannya dengan ketersediaan hara makro dan hara mikro. Setiap unsur hara
mempunyai manfaat tertentu yang tercermin pada pertumbuhan dan kepadatan yang
dicapai. Unsur N, P, dan S penting untuk pembentukan protein, dan unsur K
berfungsi dalam metabolisme karbohidrat. Unsur Fe dan Na berperan dalam
pembentukan klorofil. Sedangkan unsur Si dan Ca merupakan bahan untuk
pembentukan dinding sel.
Pemantauan pertumbuhan alga dalam kultur tangki massa sangat penting
untuk keberhasilan produksi ukuran yang lebih akurat dari pertumbuhan dapat dibuat
dengan membandingkan jumlah sel yang sebenarnya dengan penghitungan hari
sebelumnya. Penghitungan ruang Sedgewick-rafter adalah perangkat berteknologi
rendah secara rutin digunakan untuk menghitung alga dalam kumpulan campuran.
Sel ini membatasi volume dan area sampel untuk memungkinkan penghitungan
mudah dan perhitungan angka fitoplankton (Perumal et al., 2012). Penentuan pola
pertumbuhan fitoplankton, dilakukan dengan penghitungan jumlah sel per mililiter
medium setiap 24 jam. Penghitungan kepadatan sel fitoplankton menggunakan alat
Haemositometer dengan pengamatan mikroskop. Contoh diambil dengan pipet tetes
steril, diteteskan sekitar 0,1-0,5 mL pada Haemositometer, kemudian diamati melalui
mikroskop (Rizky et al., 2013).
Berdasarkan hasil praktikum didapatkan jumlah Chlorella sp. pada
haemositometer yaitu 2,563 x 105 sel/ml dan hasil perhitungan kepadatan. Setelah
dikultur selama 4 hari, Chlorella sp. tidak mengalami pertumbuhan, ini terlihat
bahwa kultur di dalam botol tidak berwarna hijau. Faktor yang mempengaruhi tidak
tumbuhnya Chlorella sp. ini karena aerasi yang kurang sesuai dan cahaya yang tidak
maksimal, pernyataan ini sesuai dengan pernyataan yang disampaikan oleh
Wirosaputro (1998), bahwa Nannochloropsis oculata yang diberi cahaya dan diberi
aerasi akan mengalami perbanyakan. Pemberian cahaya ditujukan untuk mendukung
terjadinya proses fotosintesis pada mikroalga. Spirulina membutuhkan cahaya untuk
melangsungkan proses fotosintesis. Isnansetyo dan Kurniastuty (1995)
menambahkan bahwa cahaya sebagai sumber energi fotosintesies harus cukup yaitu
dengan intensitas sekitar 5000-10000 lux, sedangkan aerasi sangat dibutuhkan untuk
sirkulasi oksigen dan nutrisi.
 IV. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan dapat disimpulkan bahwa:

1. Kultur di bawah kondisi laboratorium, wadah yang telah steril diisi dengan air
laut steril (28-34 ‰) dan diperkaya dengan penambahan nutrisi seperti contohnya
media Walne atau Conway. Wadah kultur yang telah terinokulasi dengan strain
murni fitoplankton yang diinginkan sebelumnya dibudidayakan di laboratorium.
Kultur dilengkapi dengan aerasi berat dan ringan melalui bank cahaya dalam
laboratorium yang terkendali dengan suhu 25 ± 2° C. Fase pertumbuhan
eksponensial umumnya diamati dalam 36 jam sampai 3 hari setelah inokulasi.
Kepadatan sel per ml dicatat.

B. Saran

Sebaiknya, peralatan yang digunakan untuk mengamati mikroalga khususnya

mikroskop diperiksa terlebih dahulu mengenai kualitasnya agar gambar dan hasil
yang diperoleh lebih meyakinkan dan akurat.
.
 DAFTAR REFERENSI

Erlina, A dan W. Hastuti. 1986. Kultur Plankton. Jakarta: IDRC.

Fogg, G. E. 1965. Algal Cultures and Phytoplankton Ecology. London: The
University of Wisconsin Press.
Gao, K., dan Z. Ma. 2008. Photosynthesis and Growth of Arthrospira (Spirulina)
Platensis (Cyanophyta) in Response to Solar UV Radiation, with Special
Reference to Its Minor Variant. Environmental and Experimental Botany,
63: 123–129.
Kurniawan, H dan Lukman G. 1999. Aspek Industri Sistem Kultivasi Sel Mikroalga
Imobil. Jurnal Tinjauan Ilmiah Riset Biologi dan Bioteknologi Pertanian, 2
(2).
Isnansetyo, A dan Kurniastuty. 1995. Teknik Kultur Phytoplankton dan
Zooplankton. Yogyakarta: Kanisius.
Peter, P., A.P. Sarma, M.D.A. Hasan dan S.D.S. Murthy. 2010. Studies on The
Impact of Nitrogen Starvation on The Photosyntesic Pigmen Through
Spectral Properties of Cyanobacterium, Spirulina Platensis: Identification of
Target Phycobilinprotein Under Nitrogen Chlorosis. Botany Research
International, 3(1): 30 – 34.
Perumal, P., B. Balaji Prasath, P. Santhanam, S. Ananth, A. Shenbaga Devi dan
S. Dinesh Kumar. 2012. Isolation and culture of microalgae. Workshop on
Advances in Aquaculture Technology, 166-181.
Rizky, Y.A., Indah R., Seniwati, D. 2013. Penentuan laju pertumbuhan sel
fitoplankton Chaetoceros calcitrans, Chlorella vulgaris, Dunaliella salina, dan
Porphyridium cruentum. Repository Unhas : 1-7.
Song, P. 1980. Production and Development of Chlorella and Spirulina in Taiwan.
In Algae Biomass. G. Sheief and C. J. Soeder (Eds.) Holand: Elsevier.
Suriadnyani, N.N. N.L.T. Aryani, K. Mastantra, dan Saifuddin. 2007. Kultur Massal
Diatom Sebagai Sediaan Pakan Alami Pada Pembenihan Udang Windu
(Penaeus monodon). Bul. Tek. Lit. Akuakultur, 6(1): 1-4.
Widiyanto, A., Bambang S., Rini Y. 2014. Studi Kultur Semi-Massal Mikroalga
Chlorella sp. Pada Area Tambak Dengan Media Air Payau (Di Desa
Rayunggumuk, Kec. Glagah, Kab. Lamongan). Jurnal Bioproses Komoditas
Tropis, 2(1): 1-7
Wirosaputro, S. 1998. Chlorella: Makanan Kesehatan Global Alami I. Yogyakarta:
Gadjah Mada University Press.
Sayin, S., Yilmaz, A. B., Ergün, N., and Turan, F. 2011. Competitive biosorption of
different forms of lead [Pb(NO3)2 and Pb(CH3COO)2] on growth, biomass and
proline in Spirulina platensis (Cyanophyta). African Journal of Biotechnology,
10(80): 18458-18462.