PENILAIAN SEL KUPFFER DAN SEL NEKROTIK PADA AKTIVITAS

HEPATOPROTEKTOR NANOPARTIKEL EKSTRAK KUNYIT (Curcuma

longa L.) TERHADAP TIKUS PUTIH JANTAN YANG DI INDUKSI CCL4
DITINJAU DARI KEDOKTERAN DAN ISLAM

BAGAS ANINDITO

1102015044

Proposal Skripsi Ini disusun Dalam Rangka Memenuhi Persyaratan

Tugas Akhir Pendidikan Sarjana Kedokteran

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS YARSI

JAKARTA

2018
2
 PERSETUJUAN PENGAJUAN SIDANG PROPOSAL

Nama : Bagas anindito

Nomor Pokok Mahasiswa : 1102015120

Fakultas/Program Studi : Kedokteran Umum

Universitas : Universitas YARSI

Tingkat : Pendidikan Sarjana I

Judul : Penilian Sel Kupffer dan Sel Nekrotik pada Aktivitas

Hepatoprotektor Nanopartikel Ekstrak Kunyit (Curcuma
longa L.) terhadapa tikus putih jantan yang di induksi
CCl4 Ditinjau dari Kedokteran dan Islam

Pembimbing : Dr. Juniarti, S.Si, M.Si

Dengan ini mengajukan surat persetujuan untuk sidang proposal dengan persetujuan
dosen pembimbing dan wakil dekan II.

Jakarta, 7 Juni 201

Menyetujui,
Dosen Pembimbing Pelaksana Kegiatan

(Dr. Juniarti, S.Si, M.Si) (Bagas Anindito)

NIDN : 0325067501 NPM : 1102015044

1
 DAFTAR ISI

Lembar Pengesahan............................................................................................................i

Daftar Isi............................................................................................................................ii

Daftar Tabel......................................................................................................................iii

Daftar Skema....................................................................................................................iv

BAB I

PENDAHULUAN..............................................................................................................1

1.1 Latar Belakang................................................................................................1

1.2 Perumusan Masalah........................................................................................2

1.3 Pertanyaan Penelitian......................................................................................3

1.4 Tujuan Penelitian............................................................................................3

1.5 Manfaat Penelitian..........................................................................................3

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA.....................................................................................................5

2.1 Kajian Pustaka yang Telah Dilakukan.............................................................5

2.1.1 Curcuma longa L. .....................................................................................5

2.1.1.1 Klasifikasi Curcuma longa L...............................................................5

2.1.1.2 Khasiat Curcuma longa L....................................................................6

2.1.1.3 Kandungan Kimia Curcuma longa L...................................................7

2.1.1.4 Bioaktivitas Curcuma longa L.............................................................7

2.1.1.5 Curcuma longa L. Sebagai Hepatoprotektor........................................8

2.1.2 Sel Kupffer................................................................................................8

2.1.3 Hepatoprotektor.........................................................................................9

2.1.4 Karbon Tetraklorida (CCl4)........................................................................9

2.1.5 Sistem Penghantaran Obat.........................................................................9

2.2 Kerangka Teori..............................................................................................11

2
 2.3 Kerangka Konsep..........................................................................................12

2.4 Perumusan Hipotesis.....................................................................................13

2.5 Definisi Operasional......................................................................................13

BAB III

METODE PENELITIAN.......................................................................................14
3.1 Jenis Penelitian..............................................................................................14

3.2 Rancangan penelitian.....................................................................................14

3.3 Bahan dan Alat..............................................................................................14

3.3.1 Sampel.....................................................................................................14

3.3.2 Bahan.......................................................................................................14

3.3.3 Alat..........................................................................................................14

3.4 Metode Pelaksanaan......................................................................................15

3.4.1 Pembuatan Sediaan Ekstrak Nano Kunyit...............................................15

3.4.2 Proses Enkapsulasi Ekstrak Kunyit..........................................................15

3.4.3 Uji Hepatoprotektif Invivo.......................................................................15

3.5 Jenis Data......................................................................................................16

3.6 Analisis Data.................................................................................................16

3.7 Alur Penelitian...............................................................................................17

3.8 Jadwal Kegiatan Penelitian............................................................................18

3.9 Justifikasi Anggaran Penelitian......................................................................19

3.10 Biodata Peneliti...........................................................................................20

DAFTAR PUSTAKA.......................................................................................................21

DAFTAR TABEL

Tabel 3.1 Jadwal Kegiatan Penelitian...............................................................................18

3
DAFTAR SKEMA

Skema 2.1 Kerangka Teori...............................................................................................11

Skema 2.2 Kerangka Konsep...........................................................................................12

Skema 3.1 Alur Penelitian................................................................................................17

4
 BAB I
Pendahuluan

1.1 Latar Belakang

Hati merupakan organ terbesar yang sangat penting untuk pertahanan
hidup dan berperan hampir dalam setiap fungsi metabolik tubuh. Fungsi hati
antara lain untuk pembentukan dan ekskresi empedu. Empedu dibentuk di
dalam hati dan sekitar 1 liter empedu diekskresikan oleh hati dalam sehari. Di
samping menghasilkan energi dan tenaga, hati memiliki peranan penting pada
metabolisme karbohidrat, protein dan lemak, selain itu juga berperan dalam
pertahanan tubuh, baik berupa detoksifikasi maupun fungsi perlindungan.
Detoksifikasi dilakukan dengan berbagai proses yang dilakukan oleh enzim-
enzim di hati terhadap zat-zat beracun. Fungsi perlindungan dilakukan oleh
sel kupffer yang berada dalam dinding sinusoid (Price and Wilson, 2005).
Curcuma longa L. adalah ramuan rhizomatous perennial milik
keluarga Zingiberaceae, asli Asia Selatan dan umumnya dikenal sebagai
kunyit. Tanaman kunyit adalah bahan yang populer untuk menyiapkan
hidangan kuliner. Yang digunakan sebagai obat herbal karena kepercayaan
umum bahwa tanaman tersebut memiliki sifat medis. Dalam pengobatan
tradisional, jus rimpang dari Curcuma longa L. digunakan dalam pengobatan
beberapa penyakit seperti anthelmintik, asma, kencing nanah dan kemih, dan
minyak esensial digunakan dalam pengobatan karminatif, perut serta
digunakan sebagai hepatoprotektor dan mempengaruhi gangguan hati,
termasuk sirosis hati. Curcuma longa L. memiliki antioksidan, anti-tumor,
antimikroba, anti-inflamasi, penyembuhan luka, dan aktivitas gastroprotektif.
Penelitian sebelumnya juga menunjukkan bahwa ekstrak air Curcuma longa
L. memiliki aktivitas hepatoprotektif terhadap toksisitas karbon tetraklorida .
Dalam penelitian ini, kami menilai efek hepatoprotektif dari ekstrak etanol

1
rimpang Curcuma longa terhadap sirosis hati TAA-induced pada tikus
Sprague Dawley (Salama et al, 2013)

Karbon tetraklorida (CC14) adalah zat hepatotoksik yang paling sering

digunakan dalam penelitian yang berkaitan dengan hepatotoksisitas. CCl4
dapat menyebabkan kerusakan pada hati yang disebabkan oleh radikal bebas.
CC14 memerlukan aktivasi metabolisme terutama oleh enzim sitokrom P450
di hati. Aktivasi tersebut akan mengubah CC14 menjadi metabolit yang lebih
toksik, sehingga dapat menyebabkan kerusakan hati pada hewan coba dan
manusia. Pembentukan radikal bebas yang berlebihan akan mengakibatkan
stress oksidatif, yang dapat menimbulkan gangguan pada hati. Stres oksidatif
yang berlebihan dalam tubuh perlu tambahan antioksidan dari luar. Proses
menginduksi peradangan hepar pada hewan coba (tikus putih) sering
dugunakan CCl4, karena gambaran hispatologi yang ditimbulkan mirip dengan
penyakit hepatitis virus pada manusia. Cedera hepar akibat toksis CCl 4
diantaranya adalah nekrosis yaitu perubahan morfologis yang menunjukkan
kematian sel, terhalangnya sintesa lipoprotein yag membawa triglierida keluar
dari hepar, terjdinya sirosis yaitu tidak efisiennya fungsi regeneratif sel-sel
hepar (Widiyanto, 2003).

Dalam endoplasmik retikulum hati CCl4 dimetabolisme oleh sitokrom

P450 2E1 (CYP2E1) menjadi radikal bebas triklorometil (CCl3) .
Triklorometil dengan oksigen akan membentuk radikal triklorometilperoxi
yang dapat menyerang lipid membran endoplasmik retikulum dengan
kecepatan yang melebihi radikal bebas triklorometil. Selanjutnya
triklorometilperoxi menyebabkan peroksidasi lipid sehingga mengganggu
homeostasis Ca2+, dan akhirnya menyebabkan kematian sel. (Panjaitan et al,
2007)

2
 Hewan sering digunakan dalam berbagai penelitian, contohnya tikus,
dalam islam hewan memiliki manfaat dalam kehidupan manusia, seperti
menghangatkan tubuh dengan bulu-bulu mereka, lalu bisa menjadi sumber
makanan yang baik bagi umat manusia. Sebagaimana firman Allah Swt: “Dan
hewan ternak telah diciptakan-Nya, untuk kamu padanya ada (bulu) yang
menghangatkan dan berbagai manfaat, dan sebagiannya kamu makan. Dan
kamu memperoleh keindahan padanya, ketika kamu membawanya kembali ke
kandang dan ketika kamu melepaskannya (ke tempat penggembalaan). Dan ia
mengangkut beban-bebanmu ke suatu negeri yang kamu tidak sanggup
mencapainya, kecuali dengan susah payah. Sungguh, Tuhanmu Maha
Pengasih, Maha Penyayang, dan (Dia telah menciptakan) kuda, bagal, dan
keledai, untuk kamu tunggangi dan (menjadi) perhiasan. Allah menciptakan
apa yang tidak kamu ketahui” (QS. an-Naḥl (6): 5-8) Melakukan Penyiksaan
terhadap hewan hukumnya dosa, karena hewan merupakan makhluk ciptaan
Allah SWT.
Tumbuhan dalam islam sudah banyak diketahui sebagai sumber
pengobatan yang baik, contohnya dalah madu yang diambil dari sari
tumbuhan yang hidup, dapat digunakan sebagai obat. Curcuma Longa L.
merupakan tumbuhan. pada penelitian sebelumnya Curcuma Longa L.
memiliki manfaat sebagai Hepatoprotektor. Dalam hal ini tumbuhan dalam
islam dikatakan sebagai obat dalam penyembuhan penyakit atau melindungi
umat manusia dari serangan penyakit.
Madu merupakan contoh dari manfaat tumbuhan sebagai obat
Sebagaimana Allah SWT berfirman: “Kemudian makanlah dari tiap-tiap
(macam) buah-buahan dan tempuhlah jalan Tuhanmu yang telah dimudahkan
(bagimu). Dari perut lebah itu ke luar minuman (madu) yang bermacam-
macam warnanya, di dalamnya terdapat obat yang menyembuhkan bagi
manusia. Sesungguhnya pada yang demikian itu benar-benar terdapat tanda

3
(kebesaran Tuhan) bagi orang-orang yang memikirkan.” (QS. An Nahl (16) :
69).
Beberapa tanaman alami telah diketahui memiliki fungsi sebagai
hepatoprotektor. Hal ini berkaitan dengan komponen dari tanaman yang kaya
akan antioksidan yang dapat melindungi hati dari kerusakan akibat induksi
hepatotoksin. Diantara jenis tanaman tersebut adalah kunyit dan meniran.
Rimpang kunyit (Curcuma domestica) merupakan tanaman famili
Zingiberaceae yang mengandung kurkuminoid, yang terdiri atas senyawa
kurkumin, demetoksikurkumin, dan bis-demetoksikurkumin. Kunyit juga
mengandung minyak atsiri yang terdiri dari seskuiterpen dan senyawa turunan
fenilpropan yang meliputi arturmeron, α dan β turmeron, kurlon, kurkumol,
atlanton, turmerol, β bisabolen, β seskuifelandren, zingiberen, ar-kurkumen,
humulen, serta mengandung arabinosa, fruktosa, glukosa, pati, tanin, dan
damar (Jayaprakasha et al., 2001) Kunyit memiliki aktivitas hepatoprotektif
terhadap beberapa senyawa hepatotoksin seperti 1 2 parasetamol,
galatosamine, CCl4, thioacetamide (Salama et al., 2013). Kurkuminoid
merupakan bahan aktif dari rimpang kunyit yang diketahui memiliki efek
hepatoprotektif (Hadi, 2000).

1.2 Perumusan Masalah

Curcuma longa sudah terbukti sebagai hepatoprotektor, hanya saja masih
tidak adanya dosis yang efektif untuk membuat Curcuma longa efektif
menjadi hepatoprotektor yang baik. Oleh karena itu, di buatlah nanopartikel
dari ekstrak Curcuma longa tersebut. Hanya saja, belum terbukti
keefektifannya. Hati sendiri memiliki sel Kupffer yang berfungsi sebagai
pertahanan terhadap kerusakan pada hati, maka para peneliti melihat sel
Kupffer pada percobaan induksi CCl4, maka dari itu, di buatlah suatu
penelitian “Penilaian Sel Kupffer dan Sel Nekrotik pada Aktivitas
Hepatoprotektor Nanopartikel Ekstrak Kunyi Curcuma Longa terhadap Tikus
Putih Jantan yang di Induksi CCl4

4
1.3. Pertanyaan Masalah
1. Bagaimanakah reaksi dari sel-sel nekrotik pada hati tikus putih jantan
yang terkena CCl4 jika di beri ekstrak nanopartikel Curcuma longa L.?
2. Bagaimana efek pada sel Kupfer pada hati tikus putih jantan yang sudah
di beri ektrak nanopratikel Curcuma longa L.?
3. Bagaimana pandangan islam terhadap Penggunaan Curcuma Longa
sebagai obat hepatoprotektor?

1.4. Tujuan Penelitian

1.4.1 Tujuan Umum
Untuk mengetahui bahwa nanopartikel ekstrak kunyit bisa menjadi
hepatoprotektor
1.4.2 Tujuan Khusus
1. Mengetahui efek nanopartikel ekstrak kunyit pada sel-sel yang ada pada
Hepar tikus putih jantan yang sudah di beri induksi CCl4
2. Mengetahui Pandangan islam terhadap Curcuma Longa sebagai obat
Hepatoprotektor

1.5. Manfaat Penelitian

1.5.1 Untuk Peneliti

Memberikan pengetahuan dan kemajuan di bidang kesehatan khususnya

kesehatan hati

1.5.2 Untuk Pasien

Dengan adanya penelitian ini memungkinkan adanya pengobatan yang efektif

pada Hepar

5
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Kajian pustaka yang telah di lakukan

2.1.1 Curcuma Longa
Kunyit merupakan salah satu tanaman remah dan obat. Kunyit secara
umum dapat di gunakan sebagai bumbu masakan, bahan obat tradisional
untuk mengobati berbagai peyakit bahan baku industry jamu dan kosmetik

6
(Nugroho, 1998). Kunyit kuning atau Curcuma Longa, familia Ziniberaceae,
merupakan tanaman yang tumbuh di daerah tropi maupun subtropik di dunia,
dan di budidayakan di negara-negara Asia, terutama: India, Cina, Malaysia,
dan Indonesia,. Tanaman tersebut secara tradisional di gunakan sebagai
bumbu masakan, pewarna maupun obat (Firstya, 2007)

2.1.1.1 Klasifikasi
Berdasarkan penggolongan dan tata nama tumbuhan menurut
Rukmana(1995), tanaman kunyit termasuk ke dalam klasifikasi sebagai
berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Sub divisi : Angiospermae

Kelas : Monocotyledoneae

Ordo : Zingiberales

Familia : Zingiberaceae

Genus : Curcuma

Spesies : Curcuma longa Linn

Tanaman yang termasuk suku temu-temuan terdiri dari 45 genus dan

lebihkurang ada 500 spesies. Asal kata Zingiberaceae adalah zingiber yang
berasal dari bahasa Sanskerta singaberi. Kata singaberi dalam bahasa
Sanskerta itu berasal dari bahasa Arab zanzabil atau bahasa Yunani zingiberi.
Curcuma berasal dari Bahasa Arab kurkum yang berarti kuning (Winarto
2003).

7
2.1.1.2 Khasiat

Kunyit telah ditemukan memiliki karakteristik hepatoprotektif mirip dengan

silymarin. Penelitian pada hewan menunjukkan efek hepatoprotektif kunyit
dari berbagai penyakit he-patotoksik, termasuk karbon tetraklorida (CCl4),
galactosamine, acetaminophen (parasetamol), dan Aspergillus aflatoksin. Efek
hepatoprotektif kunyit adalah terutama karena sifat antioksidannya, serta
kemampuannya untuk menurunkan pembentukan sitokin pro-inflamasi. Pada
tikus dengan induksi CCl4 akut dan cedera hati subakut, pemberian kurkumin
secara signifikan mengurangi kerusakan hati pada hewan uji dibandingkan
dengan kontrol. Ekstrak kunyit menghambat aflatoksin jamur produksi
sebesar 90% ketika diberikan kepada anak-anak itik yang terinfeksi
Aspergillus parasiticus. Kunyit dan kurkumin juga memulihkan kondisi
hiperplasia empedu, perubahan lemak, dan nekrosis yang disebabkan oleh
produksi aflatoksin. Sodium curcuminate, garam dari curcumin, juga
memberikan efek koleretik dengan meningkatkan ekskresi bilier garam
empedu, kolesterol, dan bilirubin, serta meningkatkan kelarutan empedu, oleh
karena itu mungkin mencegah dan mengobati kolestasis. (Akram et al., 2010)

2.1.1.3 Kandungan
Kandungan zat-zat kimia yang terdapat dalam rimpang kunyit adalah
zat warna kurkuminoid (kurkumin, desmetoksikurkumin, dan
bisdesmetoksikurkumin), minyak atsiri, protein, fosfor, kalium, besi, dan
vitamin C. Dari ketiga senyawa kurkuminoid tersebut, kurkumin merupakan
komponen terbesar dalam rimpang kunyit (Anand et al. 2008). Kadar total
kurkuminoid sering dihitung sebagai persentase kurkumin, sehingga pada
beberapa penelitian, baik fitokimia maupun farmakologi, lebih ditekankan
pada kurkumin (Sumiati dan Adyana 2007). Kurkumin [1,7-bis-(4'-hidroksi-

8
3'-metoksifenil) hepta1,6-diena-3,5-dion] merupakan bahan alami yang
terdapat pada berbagai spesies Curcuma. Kurkumin merupakan komponen
penting dari Curcuma longa yang memberikan warna kuning yang khas.
Kurkumin termasuk golongan senyawa polifenol (Antony et al. 2008).
Polifenol merupakan senyawa yang bersifat antioksidan. Pada ekstrak mentah
rimpang kunyit kuning, terkandung 70-76% kurkumin, sekitar 16%
desmetoksikurkumin, dan sekitar 8% bisdesmetoksikurkumin, dimana ketiga
nya sering disebut sebagai kurkuminoid. Penelitian yang luas pada kurkumin
telah menunjukkan spektrum efek terapi yang luas, seperti antioksidan,
antiinflamasi, antibakteri, antivirus, antijamur, antitumor, antispasmodik, dan
hepatoproteksi (Kohli et al.2004)

2.1.1.4 Bioaktivitas
Kurkuminoid merupakan senyawa bioaktif utama yang terdapat dalam
rhizome Curcuma longa yang bersifat sebagai antioksidan yang ditunjukkan
melalui kemampuannya mengahambat 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)
(Nurcholis et al., 2012; Itokawa et al. 2008).kurkuminoid yang terdapat pada
Curcuma longa terutama curcumin, demethoxycurcumin, dan
bisdemethoxycurcumin (Lechtenberg et al., 2004; Thaikert dan
Paisooksantivatana, 2009). Hasil uji in vitro menunjukkan bahwa ekstrak
ethanol dari C. longa memiliki nilai IC50 sebesar 81.99 μg/ mL menghambat
raikal bebas 2,2-diphenyl1-picrylhydrazyl (DPPH) (Nurcholis et al., 2012).
Senyawa yang berfungsi sebagai antioksidan antara lain: curcumin,
bisdemethoxy curcumin, demethoxy curcumin (Araujo dan Leon, 2001).

2.1.1.5 Curcuma longa sebagai hepatoprotektor

Dalam semua kandungan pada Curcuma Longa, Kurkumin terbukti
sebagai hepatoprotektor. Mekanisme hepatoprotektif terjadi karena efek
kurkumin sebagai antioksidan yang mampu menangkap ion superoksida dan

9
 memutus rantai antar ion superoksida (O 2- ) sehingga mencegah kerusakan sel
hepar karena peroksidasi lipid dengan cara dimediasi oleh enzim antioksidan
yaitu superoxide dismutase (SOD) dimana enzim SOD akan mengonversi O 2-
menjadi produk yang kurang toksik. Curcumin juga mampu meningkatkan
gluthation S-transferase (GST) dan mampu menghambat beberapa faktor
proinflamasi seperti nuclear factor-ĸB (NF-kB) dan profibrotik sitokin.
Aktifitas penghambatan pembentukan NF-kB merupakan faktor transkripsi
sejumlah gen penting dalam proses imunitas dan inflamasi, salah satunya
untuk membentuk TNF-α. Dengan menekan kerja NF-kB maka radikal bebas
dari hasil sampingan inflamasi berkurang (Marinda, 2014)

2.1.2 Sel Kupffer

Suatu sel stelata yang ditemukan dalam sinusoid hati, memiliki
aktivitas fagositik yang intensif dan membentuk bagian dari sistem
retikuloendotelial. Disebut juga von Kuppfer c’s (Dorland, 2010). Sel Kupffer
merupakan makrofag pada hati yang melapisi sunusoid dan mampu
memfagositosis bakteri dan benda asing lain dalam darah (Guyton and Hall,
2014)

2.1.3 Hepatoprotektor
Hepatoprotektor adalah senyawa atau zat yang berkhasiat
melindungi sel sekaligus memperbaiki jaringan hati yang rusak akibat
pengaruh zat toksik. Beragam jenis tumbuhan obat telah diteliti khasiat
hepatoprotektornya salah satu diantaranya adalah Silybum marianum,
dan Curcuma longa (Panjaitan et al., 2011)

2.1.4. Karbon Tetraklorida

10
 Karbon tetraklorida (CCl4) merupakan xenobiotik yang lazim
digunakan untuk menginduksi peroksidasi lipid dan keracunan. Dalam
endoplasmik retikulum hati CCl4 dimetabolisme oleh sitokrom P450
2E1 (CYP2E1) menjadi radikal bebas triklorometil (CCl3).
Triklorometil dengan oksigen akan membentuk radikal
triklorometilperoksi yang dapat menyerang lipid membran
endoplasmik retikulum dengan kecepatan yang melebihi radikal bebas
triklorometil. Selanjutnya triklorometilperoksi menyebabkan
peroksidasi lipid sehingga mengganggu homeostasis Ca2+ , dan
akhirnya menyebabkan kematian sel (Panjaitan et al., 2007)

2.1.5 Sistem penghantar obat

Teknologi nanopartikel saat ini telah menjadi tren baru dalam
pengembangan sistem penghantaran obat. Partikel atau globul pada
skala nanometer memiliki sifat fisik yang khas dibandingkan dengan
partikel pada ukuran yang lebih besar terutama dalam meningkatkan
kualitas penghantaran senyawa obat. Kelebihan lain dari teknologi
nanopartikel adalah keterbukaannya untuk dikombinasikan dengan
teknologi lain, sehingga membuka peluang untuk dihasilkan sistem
penghantaran yang lebih sempurna. Keterbukaan lain dari teknologi
nanopartikel adalah kemampuannya untuk dikonjugasikan dengan
berbagai molekul pendukung tambahan, sehingga menghasilkan
sebuah sistem baru dengan spesifikasi yang lebih lengkap. Namun,
sifat umum nanopartikel yang berlaku pada berbagai jaringan maupun
organ di dalam tubuh adalah sifat fisik nanopartikel yang relatif lebih
mudah menembus berbagai pembatas biologis, sehingga menjadi
kurang spesifik jika digunakan dengan tujuan aplikasi khusus. Oleh
karena itu, molekul yang dikonjugasikan pada nanopartikel secara

11
 umum dimanfaatkan sebagai molekul pentarget untuk meningkatkan
selektivitas dari sistem nanopartikel secara keseluruhan ( Martien et
al,. 2012). Beberapa kelebihan nanopartikel adalah kemampuan untuk
menembus ruang-ruang antar sel yang hanya dapat ditembus oleh
ukuran partikel koloidal (Buzea et al., 2007), kemampuan untuk
menembus dinding sel yang lebih tinggi, baik melalui difusi maupun
opsonifikasi, dan fleksibilitasnya untuk dikombinasi dengan berbagai
teknologi lain sehingga membuka potensi yang luas untuk
dikembangkan pada berbagai keperluan dan target. Kelebihan lain dari
nanopartikel adalah adanya peningkatan afinitas dari sistem karena
peningkatan luas permukaan kontak pada jumlah yang sama
(Kawashima, 2000)

2.2. Kerangka Teori

Curcuma longa CCl4

X
X

Kurkumin
CYP450
X

Antioksidan CCl3-
12

Hepatoprotektif
Molekul seluler
 Skema 2.1 Kerangka Teori

Keterangan :
: Mempunyai kandungan, menghasilkan, berikatan, menyebabkan dan menjadi

X : Menghambat

2.3. Kerangka Konsep

13
Skema 2.2 Kerangka Konsep

14
 Keterangan :

= Tidak diteliti = Diteliti

= Tidak diteliti = Ditelit

2.4. Hipotesis
Dengan menjadikan ektrak Curcuma longa dengan bentuk nano, dapat meningkatkan
efek kunyit sebagai hepatoprotektor

2.5. Definisi Operasional

2.5.1. Curcuma longa
Curcuma longa atau kunyit adalah suatu tanaman yang di percaya
masyarakat sejak dulu sebagai tanaman obat, bumbu masakan, serta
banyak penelitian menunjukkan bahwa kunyit sebagai hepatoprotektor

3.5.2. Sel Kupffer

Sel Kupffer merupakan makrofag pada hati yang melapisi sunusoid dan
mampu memfagositosis bakteri dan benda asing lain dalam darah

3.5.3. Karbon tetraklorida

Karbon tetraklorida (CC14) adalah zat hepatotoksik yang paling sering
digunakan dalam penelitian yang berkaitan dengan hepatotoksisitas
dan
digunakan sebagai induktor kerusakan hati.

15
 BAB III

BAHAN DAN CARA KERJA

3.1 Jenis Penelitian

Penelitian ini menggunakan metode penelitian eksperimental.

3.2 Rancangan Penelitian

Rancangan pada penelitian ini dilakukan secara eksperimental menggunakan

27 ekor tikus yang sebelumnya diinduksi oleh CCl4 yang kemudian diuji dengan
pemberian nanoenkapsulasi ekstrak kasar Curcuma longa L..

3.3 Bahan dan Alat

3.3.1 Sampel

Sampel berupa rimpang kunyit sebanyak 15 kg yang diperoleh dari Kecamatan

Nagrak, Kabupaten Sukabumi.

3.3.2 Bahan

Etanol 70%, nanopartikel kitosan, sodium tripolyphosphate, CMC 0.1%,

CMC 0,5%, curcuma 380 mg, kit albumin, kit cholinesterase, olive oil dan CCl4.

3.3.3 Alat

16
 Rotary evaporator, homogenizer, magnetic stirrer, centrifuge, particle size
ruskal , blender, spektrofotometer UV-Vis, micropipette, Transmission Electron
Microscope (TEM), neraca analitik, cryotube, centrifuge tube, spuit injeksi 1 ml, spuit
injeksi 5 ml, sonde, vial, pengaduk, tabung reaksi, labu ukur, sonicator, alat destilasi,
alat maserasi, penangas air, gelas piala, botol penampung, corong gelas, mikroskop
cahaya, optilab camera, cawan slide microscope .

3.4. Metode Pelaksanaan

3.4.1 Pembuatan Sediaan Ekstrak Nano Kunyit

Lima belas kilogram rimpang Curcuma longa L. dibersihkan dengan air,

dipotong-potong dan dikering anginkan selama satu minggu. Kemudian kunyit yang
sudah kering ini dirajang halus dan diblender. Sampel kemudian diekstrak dengan
cara maserasi menggunakan etanol 70%. Hasil maserasi disaring dan kemudian
dikentalkan dengan rotary evaporator. Ekstrak etanol yang dihasilkan kemudian
dikeringkan dalam kulkas sampai berat ekstrak tidak berubah lagi.

3.4.2. Proses Enkapsulasi Ekstrak Kunyit

Enkapsulasi ekstrak kunyit dilakukan dengan menggunakan metode absobsi.

Nanokitosan dikombinasikan dengan ekstrak kunyit dengan perbandingan 5:1.
Selanjutnya diaduk selama 1 jam. Sebelum dikombinasikan dengan nanokitosan,
ekstrak kunyit terlebih dahulu dilarutkan dalam akuades selama 1 jam. Sampel
kemudian disentrifugasi pada kecepatan 13.000 rpm selama 30 menit dengan suhu 4
ºC. Analisa ukuran partikel dengan menggunakan Particle Size Analyzer.

3.4.3 Uji Hepatoprotektif In vivo

17
 Tikus putih jantan jenis Sprague Dawley diaklimitasi untuk beradaptasi
selama 7 hari, kemudian dibagi menjadi 8 kelompok yang masing-masingnya terdiri
atas 3 ekor tikus putih jantan. Masing-masnig kelompok di beri perlakuan yang
berbeda selama 7 hari dan pada hari ke-7. Kelompok 1 merupakan kelompok ruskal
tanpa perlakuan yang hanya diberikan 1 ml larutan CMC 0.1%. Kelompok 2 diberi
perlakuan sama seperti kelompok 1 tetapi di induksi CCl4 pada hari ke 7. Kelompok
3 diberi 1 ml campuran 34,2 mg curcuma dengan 3 ml CMC 0.1%. Kelompok 4
diberi 1 ml campuran 250 mg ekstrak kunyit dengan 3 ml CMC 0.5%. Kelompok 5
diberi 1 ml campuran 500 mg ekstrak kunyit dengan 3 ml CMC 0.5%. Kelompok 6
diberi 1 ml campuran 125 mg nanopartikel ekstrak kunyit dengan 4 ml CMC 0.1%.
Kelompok 7 diberi 1 ml campuran 250 mg nanopartikel ekstrak kunyit dengan 4 ml
CMC 0.1%. Kelompok 8 diberi 1 ml campuran 500 mg nanopartikel ekstrak kunyit
dengan 4 ml CMC 0.1%. Seluruh kelompok dengan perlakuan diberi campuran CCl4
dengan olive oil (1:1) pada hari terakhir, kecuali kelompok tanpa perlakuan.

3.5 Jenis Data

Data yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah data kuantitatif.

3.6 Analisis Data

Analisis data menggunakan software SPSS Statistics Desktop versi 16.0. Data berupa
mean + SD. Perbedaan pengaruh kelompok-kelompok perlakuan pada setiap
kelompok dianalisis dengan one way anova untuk uji panggung karena distribusi data
normal dan mempunyai varian yang sama. Analisis one way anova dilanjutkan
dengan Duncan dengan tingkat kepercayaan 95% (p<0,05). Bentuk open field test
dilakukan uji ruskal wallis karena distribusi data tidak normal

18
3.7 Alur Penelitian

Kunyit

Ektrak kunyit

Nanopartikel ektrak kunyit

Di induksi dengan Hepatoksin CCl4

Hepatoprotektor Terhadap sel Kupffer

Skema 3.1 Alur Penelitian

19
3.8 Jadwal Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Herbal & Farmakologi Universitas
YARSI
Se Ok No De Ja Fe Ma Ap Me Ju Ju Ag
p t v s n b r r i n l s
Usulan
Penelitian
Persiapan
Melakukan
Penelitian
Pengolahan
& Analisis
data
Penyusuna
n Data-data

Tabel 3.1 Jadwal Penelitian

20
3.9 Justifikasi Anggaran Penelitian
Justifikasi Harga
No Material kuantitas Jumlah
pemakaian Satuan
BAHAN
1 Rimpang Kunyit Sampel 15 kg 35.000
2 Hewan Coba Sampel 30 ekor 40.000
3 Etanol (362808- Pelarut
3L 100.000
1L) organik
4 Kitosan Bahan DDS 1 pack
1.010.000
(448877-250G) (@ 250 g)
5 Tripolifosfat Bahan DDS 1 pack
200.000
(TPP) (250 g)
6 Kit Albumin Uji Aspek 1 Pack
Laboratoris
7 Kit CHE Uji Aspek 1 Pack
Laboratoris
8 Karbon Uji invivo 1 Pack 3.250.000
Tetraklorida hepatoprotektif
9 Curcuma Uji invivo
hepatoprotektif
10 Olive oil Pelarut

ALAT
1 Aquadest 1 jerigen 80.000
2 Nampan Pengeringan 15.000
5
sampel
3 Pipet tetes 1 box 350.000
4 Kertas saring 1 pack 20.000
5 Aluminium foil 15 lembar 20.000
6 Tisue 2 pack 25.000
7 Lap 5 lembar 15.000
8 Spuit 1 ml Pembedahan 50 pcs 15.000
Hewan Coba
9 Spuit 5 ml Pembedahan 50 pcs 15.000
Hewan Coba

21
10 Gunting Pembedahan 5 pcs 20.000
Hewan Coba
11 Pinset Pembedahan 5 pcs 20.000
Hewan Coba
Jumlah Sub Total 12.775.000
3.10 Biodata Peneliti
Nama : Bagas anindito
Nomor Induk Mahasiswa : 1102015044
Tempat/Tanggal Lahir : Bogor, 27 Desember 1996
Jenis Kelamin : Laki-laki
Fakultas/Program Studi : Kedokteran/Kedokteran Umum
Alamat Rumah : Jl. Bongas blok E2 no. 14 Jatiwaringin Asri
Riwayat Pendidikan : SDN Cipinang Melayu 10 (2003-2009)
SMPN 109 Jakarta Timur (2009-2012)
SMAN 5 Bekasi (2012-2015)
Universitas YARSI (2015- Sekarang)

22
 Daftar Pustaka

M salama, s. (2013). Hepatoprotective effect of ethanolic extract of Curcuma longa

on thioacetamide induced liver cirrhosis in rats. The official journal of the
International Society for Complementary Medicine Research (ISCMR)2013.

Widiyanto. (2003), Efek Pemberian Dekok Meniran (Phallanthus niriri L)

Terhadap Kadar Melonaldehid (MDA) Hepar Tikus (Rattus norveginus
Strain Wistar) yang Diinduksi CCl4, Skripsi, Universitas Muhammadiyah
Surakarta

Ganda Putri Panjaitan, R. (2007). Pengaruh Pemberian Karbon Tetraklorida Terhadap

Fungsi Hati dan Ginjal Tikus. Makara, Kesehatan, 11(1), pp.11-16.

Firstya P. 2007. Tanaman obat Indonesia. toiusd.multiply.com. [24

Januari 2010]

Akram, M. (2010). Curcuma longa and curcumin: a review article. Rom. J. Biol. –
Plant Biol., 55(2), pp.65-70.

Kohli, K., Ali, J., Ansari, M. and Raheman, Z. (2005). Curcumin: A natural
antiinflammatory agent. Indian Journal of Pharmacology, 37(3), p.141.

23
Dwi Marinda, F. (2018). Hepatoprotective Effect Of Curcumin In Chronic Hepatitis.
Faculty of Medicine, Lampung Univers

Kamus kedokteran dorland. (2007). 31st ed. Jakarta: EGC, p.381.

C. Gyton, A. and E. Hall, J. (2011). Buku ajar Fisiologi Kedokteran. 12th ed.
Singapura: Saunders elsevier, p.452.
Martien, R. et al,. (2012). Technology Developments Nanoparticles as Drug Delivery
Systems. Majalah Farmaseutik, 8(1), pp.133-144.

24