LABORATORIUM FARMAKOLOGI-BIOFARMASETIKA

PRAKTIKUM BIOFARMASETIKA
JURUSAN FARMASI

PERCOBAAN I DAN VI
“MENENTUKAN KECEPATAN FILTRASI GLOMELURAR”

DISUSUN OLEH:
NAMA : AGNES LALLO ALLOLAYUK
NIM : G 701 18 117
KELAS/KELOMPOK : B/ V (LIMA)
TANGGAL : RABU, 24 MARET 2021
ASISTEN : FADRIANI

JURUSAN FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS TADULAKO
PALU
2021
A. Latar Belakang
Ginjal adalah organ utama eksresi obat. Beberapa obat menghindari metabolisme
yang luas dan keluar tidak berubah dalam urine. Yang lain menjalani
biotransformasi didalam hati sebelum ginjal mengeluarkannya. Pemeliharaan
asupan cairan yang adekuat (50 mL/Kg/Jam) mendorong pengeluaran obat-obatan
yang tepat untuk orang dewasa rata-rata. Jika fungsi ginjal pasien menurun, ginjal
tidak dapat mengeluarkan obat secara memadai. Dengan demikian resiko toksisitas
pengobatan meningkat (Novieastari dkk, 2020).

Ginjal memiliki peran penting dalam mendukung dan mengatur tubuh kita di
lingkungan internal. Ginjal mengatur asam basa, cairan dan keseimbangan garam,
ekskresi produk, zat beracun, dan obat. Ginjal juga mempengaruhi pembentukan
sel darah merah, metabolisme mineral, tekanan darah dan beberapa fungsi
endokrin lainnya. Tanpa fungsi ginjal, kematian terjadi dalam beberapa hari
hingga seminggu karena ketidakseimbangan elektrolit dan akumulasi cairan dan
produk limbah dalam tubuh. Laju filtrasi glomerulus (GFR) diukur dalam
ml/menit biasanya dinormalisasi menjadi luas permukaan tubuh 1,73 m2. Dalam
keadaan sehat orang dewasa umumnya memiliki GFR adalah 100 sampai 130 mL/
menit / 1,73 m2. GFR menurun dengan bertambahnya usia, tetapi pendapat
berbeda tentang kapan penurunan terkait usia dimulai. Mulai dari usia 40 hingga
50 tahun, GFR tampaknya menurun sekitar 10 mL / menit / 1,73 m 2 per dekade.
(Mans Rosen, 2013).

Berdasarkan hal tersebut kita sebagai seorang farmasis perlu mengetahui keadaan
fungsi ginjal dengan menentukan kecepatan fungsi glomerular (Glomerular
Filtration Rate atau GFR). Dimana penentuan renal clearance sangat penting
dalam menentapkan ukuran dosis dan interval pemberian obat karena Jika fungsi
ginjal pasien menurun, ginjal tidak dapat mengeluarkan obat secara memadai. Hal
inilah yang melatar belakangi percobaan ini.
B. Tujuan Percobaan
Mengetahui keadaan fungsi ginjal dengan menntukan kecepatanfungsi glomerular
(Glomerular Filtration Rate = GFR)

C. Maksud Percobaan
Memahami keadaan fungsi ginjal dengan menntukan kecepatan fungsi glomerular
(Glomerular Filtration Rate = GFR)

D. Manfaat Percobaan
Mengetahui dan memahami keadaan fungsi ginjal dengan menntukan kecepatan
fungsi glomerular (Glomerular Filtration Rate = GFR)

E. Prinsip Percobaan
F. Tinjauan Pustaka
Ginjal memiliki peran penting dalam mendukung dan mengatur tubuh kita di lingkungan
internal. Ginjal mengatur asam basa, cairan dan keseimbangan garam, ekskresi produk,
zat beracun, dan obat. Ginjal juga mempengaruhi pembentukan sel darah merah,
metabolisme mineral, tekanan darah dan beberapa fungsi endokrin lainnya. Tanpa fungsi
ginjal, kematian terjadi dalam beberapa hari hingga seminggu karena ketidakseimbangan
elektrolit dan akumulasi cairan dan produk limbah dalam tubuh. Laju filtrasi glomerulus
(GFR) diukur dalam mL/ menit biasanya dinormalisasi menjadi luas permukaan tubuh
1,73 m2. Dalam keadaan sehat orang dewasa umumnya memiliki GFR adalah 100 sampai
130 mL/ menit / 1,73 m2. GFR menurun dengan bertambahnya usia, tetapi pendapat
berbeda tentang kapan penurunan terkait usia dimulai. Mulai dari usia 40 hingga 50 tahun,
GFR tampaknya menurun sekitar 10 mL / menit / 1,73 m 2 per dekade. (Måns Rosén,
2013).

Ekskresi obat artinya eliminasi atau pembuangan obat dari tubuh. Sebagian besar obat
dibuang dari tubuh oleh ginjal dan melalui urin. Obat jugadapat dibuang melalui paru-
paru, eksokrin (keringat, ludah, payudara), kulit dan traktusintestinal. Organ terpenting
untuk ekskresi obat adalah ginjal. Obat diekskresi melalui ginjal dalam bentuk utuh
maupun bentuk metabolitnya. Ekskresi dalam bentuk utuh atau bentuk aktif merupakan
cara eliminasi obat melalui ginjal. Ekskresi melalui ginjal melibatkan 3 (tiga) proses,
yakni filtrasi glomerulus, sekresi aktif di tubulus, dan reabsorpsi pasif di sepanjang
tubulus. Fungsi ginjal mengalami kematangan pada usia 6-12 bulan, dan setelah dewasa
menurun 1% per tahun. Organ ke dua yang berperan penting, setelah ginjal, untuk
ekskresi obat adalah melalui empedu ke dalam usus dan keluar bersama feses. Ekskresi
melalui paru terutama untuk eliminasi gas anastetik umum (Noviani N & Vitrinurilawaty,
2017).

Glomerular Filtration Rate (GFR) masih dianggap sebagai indikator terbaik dari
fungsi ginjal di seluruh dunia. Penilaian GFR yang tepat sangat penting bagi
beberapa orang yakni, GFR menentukan stadium penyakit ginjal kronis (CKD),
karena sistem pementasannya didasarkan pada GFR. Ini sistem pementasan
memiliki beberapa implikasi klinis, seperti dosis obat, penerapan yang berpotensi
nefrotoksik agen kontras, waktu terapi penggantian ginjal, kesesuaian donasi
organ hidup, dan juga pelabelan diagnosis 'CKD,' yang memiliki asuransi (dan
karena itu finansial) dan implikasi psikologis (Schaeffner E, 2017).

Laju filtrasi glomerulus digunakan sebagai ukuran untuk mengetahui besarnya

kerusakan ginjal karena filtrasi glomerulus merupakan tahap awal dari fungsi
nefron. Besarnya laju filtrasi glomerulus sama dengan klirens suatu bahan yang
difiltrasi secara bebas oleh glomerulus, tidak direabsorbsi dan tidak disekresi oleh
tubulus ginjal. Klirens yaitu volume darah atau plasma yang dibersihkan dari
bahan tertentu oleh ginjal dalam satu satuan waktu. Bahan penanda filtrasi adalah
bahan endogen dan bahan eksogen. Bahan endogen berat molekul kecil seperti
Kreatinin, Cystatin-c, ß-2 mikroglobulin, α-1 mikrogobulin dan retinol binding
protein. Bahan penanda filtrasi eksogen yakni inulin, PAH/ Para amino hipurat,
iohexol, DTPA, 99m Tc-diethylene triamine penta acetic acid, 51- Cr-EDTA dan
125 I-iothalamate (Rahmawati F, 2018).

Renal clierence berpengaruh signifikan pada farmakologi obat. Pengetahuan

tentang Renal clierence menjadi bagian terpenting dalam mengatur dosis obat
yang berlebihan. Renal clearance memainkan peran khusus dalam mengetahui
obat tersebut mekanisme interaksi obat tertentu. Studi tentang obat ekskresi
melalui urin memberikan pengetahuan penting mengenai parameter distribusi,
absorpsi dan ekskresi obat dari tubuh. Ketidakkonsistenan senyawa ekskresi urin
pada manusia disebabkan variasi lingkungan, protein plasma, obat-obatan
metabolisme enzim, pH urin aliran darah ginjal, genetic perbedaan, kelarutan
obat dan keadaan kesehatan (Qodir et al, 2017).
G. Uraian Bahan
1. Aquadest (FI Edisi III, hal. 96)
Nama resmi : AQUA DESTILLATA
Nama lain : Air Suling, Aquadest
RM/BM : H2O/18,02
Rumus struktur :

(Pubchem. 2021)
Pemerian : Cairan jernih, tidak berwarna, tidak
berbau, tidak mempunyai rasa
Kelarutan : -
Khasiat : -
Kegunaan : Sebagai pelarut
Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat
Persyaratan kadar : -
2. Larutan Glukosa (FI IV, 1995; 300)
Nama resmi : DEXTROSUM
Nama lain : Dekstrosa/Glukosa
RM/BM : C6H12O6.H2O/ 198,17 g/mol
Rumus struktur :

(Pubchem. 2021)
Pemerian : Hablur tidak berwarna, serbuk hablur atau
serbuk granul putih, tidak berbau rasa
manis
Kelarutan : Mudah larut dalam air, sangat mudah larut
dalam air mendidih, larut dalam etanol
mendidih, sukar larut dalam etanol.
Khasiat : Sumber energy
Kegunaan : Zat Tambahan
Penyimpanan : Dalam wadah tertutup baik
Persyaratan kadar : -
3. Asam Sulfat (FI edisi III,1979;)
Nama resmi : SULFURIC ACID
Nama lain : Asam Sulfat
RM/BM : H2SO4/98,07 g/mol
Rumus Struktur :

(PubChem, 2021)

Pemerian : Cairan jernih seperti minyak; tidak

berwarna; bau sangat tajam dan korosif,
Bobot jenis lebih kurang 1,84.
Kelarutan : Bercampur dengan air dan dengan etanol,
dengan menimbulkan panas.
Khasiat : Zat tambahan.
Kegunaan : Sebagai pereaksi.
Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat.
Persyaratan kadar : Mengandung tidak kurang dari 95,0% dan
tidak lebih dari 98,0% H2SO4.
4. Natrium hidroksida (FI Edisi III, 1979;412)
Nama resmi : NATRII HIDROCIDUM
Nama lain : Natrium Hidroksida
RM/BM : NaOH/40,00
Rumus struktur :

(Pubchem.2021)
Pemerian : Bentuk batang, butiran, massa hablur atau keping,
kering, keras, rapuh dan menunjukkan susunan
hablur; putih, mudah meleleh basah. Sangat alkalis
dan korosif. Segera menyerap karbondioksida.
Kelarutan : Sangat mudah larut dalam air dan etanol (95%) P.
Khasiat : Zat tambahan
Kegunaan : Sebagai pereaksi
Penyimpanan : Dalam wadah tertutup baik
Persyaratan kadar : Natrium hidroksida mengandung tidak kurang dari
2,5% NaOH.
H. Uraian Sampel
1. Natrium Pentobarbital (Mims, 2021)
Indikasi : Epilepsi
Kontra indikasi: Bronkopneumonia, kerusakan paru berat. Sejarah
porfiria dan kecanduan obat penenang dan
hipnotik. Oxybate Na bersamaan.
Dosis : Dewasa: PO Hypnotic 100-200 mg sebelum tidur.
Sedasi 20-40 mg 2-4 kali sehari. Hipnotis Awal:
100 mg, lalu tingkatkan menjadi 200-500 mg. IM
Hipnotis 150-200 mg. Rektal Hipnotis 120-200
mg.
Efek Samping : Mengantuk, mengantuk, pusing, gelisah, insomnia
hipotensi, apnea, depresi pernapasan,
bronkospasme, laringospasme, bradikardia,
depresi SSP, ketergantungan fisik dan psikologis,
gangguan kejiwaan, kebingungan, halusinasi,
mimpi buruk, kelainan berpikir, sinkop,
hiperkinesia, ataksia, agitasi, gugup, mual,
muntah, sembelit, nyeri di tempat inj.
Farmakokinetik :  Absorbsi: Diserap dengan baik di saluran GI.
Waktu untuk konsentrasi plasma puncak: 30-
60 menit.
 Distribusi: Pengikatan protein plasma: Kira-
kira 60-70%.
 Metabolisme: Metabolisme hati terutama oleh
hidroksilasi menjadi metabolit tidak aktif.
 Ekskresi: melalui urin sebagai hidroksi
pentobarbital. Waktu paruh plasma: fase
pertama: Sekitar 4 jam; Fase ke-2: 35-50 jam.
Mekanisme : Pentobarbital adalah barbiturat yang terutama
Kerja digunakan sebagai obat penenang dan hipnotik.
Telah disarankan bahwa efek farmakologisnya
adalah karena propertinya untuk meningkatkan
aktivitas GABA dengan mengubah transmisi
sinaptik penghambat yang dimediasi reseptor
GABA.
Golongan Obat : Obat Keras
I. Klasifikasi Hewan Uji
1. Kucing (Felis catus) (Animal Devirsity Web, 2021)
Kingdom : Animalia
Fillum : Chordata
Sub Fillum : Vertebrata
Kelas : Sarcopteriygii
Ordo : Carnivora
Family : Felidae
Genus : Felis
Spesies : Felis catus

J. Spesifikasi Hewan Uji

1. Kucing (Felis catus) (Healthynex, 2021)
Umur : 9-10 bulan
Berat badan : 2 kg

K. Prosedur Kerja
1. Hewan coba dianestesi dengan natrium pentobarbital 5% secara intravena
dengan dosis 30 mg/kg berat badan.
2. Untuk membuat diuresis lakukan infusi dengan larutan glukosa 5% intravena
dengan dosis 20 mg/kg berat badan selama 30 menit dan dilakukan terus
selama perlakuan, dengan kecepatan tetesan infus yang rendah.
3. Hewan coba disuntik subkutan dengan larutan kreatinin 10% sebanyak 20
ml.
4. Tiga puluh menit kemudian, masukkan keteter ke dalam saluran kencing dan
suntikan 10 ml udara, dan tekantekan abdomennya untuk menghilangkan sisa
urin di dalam kandung kemih.
5. Segera setelah kandung kemih kosong saat ini dicatat sebagai t=0 menit,
setiap urin yang keluar ditampung.
6. Tepat 15 menit kemudian ambil darah vena sebanyak 6 ml dan sentrifus
untuk mendapatkan serumnya. Catat waktu ini sebagai midpoint sampling.

7. Tepat 30 menit dari awal penampungan urin, kosongkan kandung kemih

dengan menekan abdomen (t=30 menit). Setiap urin yang baru ditampung
dicampur dengan urin yang ditampung sebelumnya.

8. Kadar kreatinin dalam darah atau serum dan urin dianalisis dengan cara
sebagai berikut:
a) Ke dalam tabung sentrifus masukkan berturut-turut 2 ml air suling dan 2
ml H2SO4 0,33 N, kemudian campur baik-baik, kemudian 2 ml serum
dan campur lagi dengan baik. Ke dalam campuran ini tambahkan 2 ml
Na tungstat 5%, campur baik-baik, kemudian sentrifus (Pengenceran
1:4)
b) Encerkan 4 ml urin hingga 100 ml dengan air suling, kemudian ambil
lagi 4 ml dari pengenceran ini dan encerkan lagi hingga 25 ml.
c) Siapkan 4 tabung reaksi:

 Tabung 1 diisi dengan 4 ml urin hasil pengenceran terakhir

 Tabung 2 dengan 1 ml serum bebas protein ditambah 3 ml air suling

 Tabung 3 dengan 4 ml larutan kreatinin standar.

 Tabung 4 dengan 4 ml air suling. Kemudian ke dalam tiap tabung

tambahkan 1,5 ml larutan asam pikrat jenuh dan 0,5 ml NaOH 10%.
Campur baik-baik dan diamkan selama 15-20 menit. Ukur pada
panjang gelombang 540 nm.
d) Bersihkan kreatinin dihitung dengan rumus:
Cu – v
Clcr = / Cp – 30 ml/menit
Dimana:
Cu = kadar kreatinin dalam urin (mg/ml)
Cp = kadar kreatinin dalam plasma (mg/ml)
Clcr = Creatinin Clearance (bersihan kreatinin dalam ml/menit)
L. Alat dan Bahan
L.1 Alat
1. Timbangan
2. Stopwatch
3. Dispo injeksi
4. Kertas
5. Pulpen
6. Stopwatch
7. Kandang
8. Keteter
9. Lap kasar
10. Erlenmeyer
11. Pengaduk
12. Pipet volume
13. Sentrifuge

L.2 Bahan
1. Larutan steril glukosa 5 %
2. Larutan steril natrium pentobarbital 5%
3. Larutan steril kreatinin 10 %
4. Larutan kreatinin standar 0,08 mg/ml
5. Larutan natrium tungstat 5 %25
6. Larutan NaOH 10 %
7. Asam sulfat 0,33 %
8. Desinfektan
9. Larutan jenuh asam pikrat

L.3 Sampel
1. Natrium pentobarbital
L.4 Hewan Uji
1. Kucing (Felis catus)
 Daftar Pustaka

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1979. Farmakope Indonesia Edisi III.

Kementrian Kesehatan Republik Indonsia: Jakarta

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV.

Kementrian Kesehatan Republik Indonsia: Jakarta

Mans Rosen. 2013. Methods to Estimate and Measure Renal Function (Glomerular
Filtration Rate) A Systematic Review. Swedish Council on Health Technology
Assessment

Noviani N., Vitrinurilawaty. 2017. Bahan Ajar Keperawatan Gigi “Farmakologi”.

Kementrian Kesehatan Republik Indonesia: Jakarta

Qodir et al. 2017. Renal clearance and urinary excretion of omeprazole in healthy
female volunteers in Pakistan. Pak. J. Pharm. Sci., Vol.30, No.2, March 2017,
pp.499-505

Rahmawati F. 2018. Aspek Laboratorium Gagal Ginjal Kronik. Jurnal Ilmiah

Kedokteran Wijaya Kusuma 6 (1) : 14-22. ISSN 1978-2071 (Print); ISSN 2580-
5967 (Online)

Schaeffner E. 2017. Determining the Glomerular Filtration Rate—An Overview.

Journal of Renal Nutrition, Vol 27, No 6 (November), 2017: pp 375-380
Lampiran