Mengepung. Sci. teknologi.

2008, 42, 5026 –5031

  Atlantik selama 40 tahun terakhir (3). Dalam hal numerik

Plastik Mikroskopis Tertelan kelimpahan, pekerjaan baru-baru ini di Muara Tamar (Inggris) telah menunjukkan

mikroplastik dapat terdiri dari sebanyak 85% dari plastik yang terdampar
Translokasi ke Peredaran Darah
kotoran (4). Sampah plastik berukuran besar ( > 5 mm) tertelan
Sistem Kerang, Mytilus oleh lebih dari 180 spesies, termasuk ikan, penyu, mamalia laut,

dan burung (2). Efeknya didokumentasikan dengan baik dan termasuk

edulis (L.) mati lemas dan kelaparan (2). Namun, konsumsi mi-

cropplastic telah mendapat sedikit perhatian, sebagian karena kuantitas

, tifying fragmen plastik kecil di jaringan hewan menyajikan

MARKA. COKLAT, *
kan sejumlah tantangan metodologis. Seperti puing-puing ini
AWANTHADISSANAYAKE ,
kan menempati kisaran ukuran yang sama dengan butiran pasir dan planktonik
TAMARA. GALERI,

DAVIDM . RENDAH,
kan
DAN organisme, tersedia untuk berbagai invertebrata

kan
RICHARDC. THOMPSON dekat dasar rantai makanan. Uji laboratorium telah menunjukkan

bahwa amphipoda (detritivora), teritip (penyaring-pengumpan), dan

Sekolah Ilmu Biologi, Universitas Plymouth, Drake

lugworms (deposit-feeder) dapat menelan partikel mikro-

Circus, Plymouth, PL4 8AA, Inggris, Universitas Exeter, Pangeran

Wales Road, Exeter, EX4 4PS, UK, dan Plymouth Marine plastik (3). Banyak invertebrata makan dengan mengumpulkan, menyortir,

Laboratorium, Tempat Prospek, Plymouth, PL1 3DH, Inggris dan mencerna partikel dan eksperimen laboratorium

difokuskan pada pemilihan partikel juga telah menunjukkan bahwa filter-

memberi makan polychaetes, echinodermata, bryozoa, dan bivalvia

Diterima 02 Februari 2008. Naskah revisi diterima
akan menelan mikrosfer polistiren 10 m (5). Satu kali
01 Mei 2008. Diterima 07 Mei 2008.
mikroplastik yang tertelan dapat tertahan di saluran pencernaan

saluran, dikeluarkan melalui buang air besar, atau dipindahkan melalui

lapisan epitel usus ke dalam jaringan tubuh (translokasi

 
Sampah plastik terakumulasi di lingkungan dan
tion). Percobaan laboratorium menunjukkan bahwa lugworm,

j
memecah men adi bagian-bagian yang lebih kecil; seperti itu, potensi untuk
Arenicola marina (L.), egests (230 m) partikel polivi-

nilklorida dalam gips tinja mereka (3). Namun, medis

konsumsi oleh hewan meningkat. Konsekuensi dari makroplastik
penelitian pada hewan pengerat dan manusia juga menunjukkan bahwa
puing-puing untuk satwa liar didokumentasikan dengan baik, namun dampaknya
partikel polivinilklorida (6) dan polistirena ( 7 ) kurang dari
mikroplastik ( <1 mm) kurang dipahami. kerang, 150 m dapat berpindah dari rongga usus ke getah beningnya

Mytilus edulis, digunakan untuk menyelidiki konsumsi, translokasi,

dan sistem peredaran darah. Eksperimen in vitro dengan segmen

dan akumulasi puing-puing ini. Eksperimen awal menunjukkan jaringan kolon dari tikus menunjukkan bahwa partikel yang lebih kecil

bahwa pada saat tertelan, mikroplastik terakumulasi di usus. Kerang mengalami translokasi lebih mudah daripada partikel yang lebih besar ( 8 ).

kemudian terkena perawatan yang mengandung air laut Namun tidak diketahui apakah partikel yang tertelan dari

dan mikroplastik (3,0 atau 9,6 m). Setelah transfer untuk membersihkan   mikroplastik dapat berpindah dari rongga usus ke

sistem peredaran darah invertebrata, atau apakah lebih kecil

kondisi, mikroplastik dilacak di hemolymph. Partikel
partikel bertranslokasi lebih mudah daripada partikel yang lebih besar dari
ditranslokasi dari usus ke sistem peredaran darah dalam waktu 3
plastik.
Kelimpahan mikroplastik
hari dan bertahan selama lebih dari 48 hari.

terbesar setelah 12 hari dan menurun setelahnya. Lebih kecil

Dalam penelitian ini, moluska bivalvia M. edulis adalah

digunakan sebagai organisme model untuk menyelidiki serapan, nasib,

partikel lebih berlimpah daripada partikel yang lebih besar dan data kami
dan konsekuensi biologis dari menelan partikel mikroskopis
j j
menun ukkan sebagai fragmen plastik men adi partikel yang lebih kecil,
lembaran polistirena. Kerang adalah komponen penting
potensi akumulasi dalam jaringan organisme kumpulan bentik di seluruh dunia ( 9 ) dan dianggap bertindak

meningkat. Paparan pulsa jangka pendek yang digunakan di sini tidak sebagai ekosistem-insinyur melalui pendudukan ruang primer,

menghasilkan efek biologis yang signifikan. Namun, plastik filtrasi, dan penyediaan habitat sekunder (10). Mytilus

sangat tahan lama dan bekerja lebih lanjut menggunakan lebih luas edulis dipilih sebagai organisme model karena memiliki

kisaran organisme, polimer, dan periode paparan akan jangkauan geografis dan merupakan komponen penting dari diet

berbagai predator intertidal termasuk manusia. Itu

diperlukan untuk menetapkan konsekuensi biologis dari ini
hemolymph dapat dengan mudah diambil sampelnya dan toksikologinya
serpihan.
tanggapan terhadap banyak kontaminan dijelaskan dengan baik (11-14).

Studi memeriksa makan di M. edulis telah menunjukkan bahwa

pengantar mikrosfer polystyrene ditarik melalui inhalansia

disedot dan disaring melalui insang. Pada insang, silia berserabut

Produksi plastik global telah meningkat dari 5 juta ton
menangkap partikel plastik dan dengan cepat mengangkutnya ke
pada 1950-an menjadi lebih dari 230 juta ton pada 2005 (1). Ini
alur ventral dan ke palp labial, di mana silia menyortir
volume produksi ditambah dengan daya tahan tinggi mereka telah
partikel untuk konsumsi atau penolakan sebagai pseudofeses (15).
menyebabkan akumulasi luas dari plastik yang dibuang di
Produksi global polistiren pada tahun 2001 lebih dari
tempat pembuangan sampah dan sebagai serasah di habitat darat dan perairan
13,6 juta ton dan pada tahun 2010 diperkirakan akan melebihi 15
di seluruh dunia (2). Puing-puing ini secara bertahap terfragmentasi menjadi
juta ton (1). Polystyrene terutama digunakan (36%) sebagai
potongan-potongan yang lebih kecil dan seperti itu potensinya untuk menjadi
pengemasan dan isolasi makanan di industri konstruksi
tertelan oleh hewan meningkat. Fragmen plastik kurang dari
(1). Pekerjaan terbaru menunjukkan bahwa, dalam hal numerik
1 mm (puing-puing mikroplastik) telah menumpuk di timur laut
kelimpahan, polystyrene menyumbang 24% dari makro-

 
plastik ditemukan di habitat muara (16). partikel bulat
* Telepon penulis yang sesuai: + 44 (0)1752 232941; faks: + 44 polistirena (0,1 - 2 mm) diketahui terakumulasi dalam ikan,
(0)1752 232970; email: mabrowne@plymouth.ac.uk.
kan dan analisis isi perut telah menunjukkan bahwa lebih dari 20% dari
Universitas Plymouth.
kan ikan bekicot ( Liparis liparis ) dan flounder ( Platichthys esus )
Universitas Exeter.
kan
Laboratorium Kelautan Plymouth. dari Bristol Channel (UK), berisi pecahan

5026 9 ILM U & TEKNOLOGI LINGKUNGAN / VOL. 42, TIDAK. 13, 2008, 10.1021/es800249a CCC: $40.75 2008 American Chemical Society
Diterbitkan di Web 30/05/2008

- 1
polistirena (17). Pekerjaan serupa di pantai New England perlakuan (masing-masing dengan tiga ulangan) yang mengandung 0,51 gL

(Amerika Serikat) telah menunjukkan bahwa isi perut hampir baik dari 2 m mikrosfer berlabel fluoresensi poli-

60 % spesies ikan termasuk Myoxocephalusaenus, Pseudopleu- stirena (eksitasi 365 nm/emisi 447 nm; Brookhaven

ronectes americanus, Roccus americanus, Menidia menidia, Internasional, Inggris), mikrosfer tak berlabel (4 - 16 m) dari

dan cacing polychaete, Sagitta elegans, mengandung polystyrene (Sigma-Aldrich, UK), atau perawatan kontrol

bahan polistirena (18 ). Menelan fragmen besar tanpa plastik. Setelah paparan, teknik histologis

plastik dapat menyebabkan akumulasi di usus dan cenderung digunakan untuk menentukan keberadaan mikroplastik di usus.

kompromi makan [misalnya, ref (19)]; Namun, itu tidak diketahui

Eksperimen kedua dilakukan untuk menentukan apakah

apakah konsumsi mikroplastik akan memengaruhi pemberian makan

mikroplastik yang tertelan dapat berpindah dari rongga usus
perilaku hewan laut atau apakah bahan ini dapat
ke sistem peredaran darah. Gelas gelas bersih (400 mL) adalah
mentranslokasi dari rongga usus ke sistem peredaran darah mereka.
diisi dengan 350 mL air laut yang telah disaring, batang pengaduk diaduk

Selanjutnya, toksisitas polistirena dan monomernya,

ditambahkan, dan gelas kimia ditempatkan pada pengaduk magnet.
styrene, untuk hewan laut kurang dipahami, hanya dengan
Kerang secara acak ditugaskan untuk waktu / perawatan /
satu penelitian laboratorium yang meneliti efek styrene pada
mereplikasi kombinasi menggunakan desain blok yang direplikasi. Dua

viabilitas dan kerusakan DNA pada hemosit moluska dan ikan

ukuran partikel polistiren fluoresen, 3,0 m (490 nm
(20). Namun, hanya dengan satu tangki eksposur dan satu kontrol
eksitasi/515 nm emisi) dan 9,6 m (eksitasi 520 nm/
tangki, desain eksperimental menderita pseudorepli-
580 nm emisi) diperoleh dari probe Molekuler

kation.
(USA) dalam pembawa air suling. Partikel ini berwarna

Dalam penelitian ini kami menguji hipotesis secara kuantitatif

sebagai bagian dari pembuatan melalui adsorpsi. Bagian dari

berkaitan dengan translokasi dan efek biologis mikroplastik eksperimen fisiologis, partikel-partikel ini telah disuntikkan

partikel. Kerang secara independen terkena satu ke dalam sirkularitas dan sistem paru-paru hewan pengerat dan

pulsa partikel berlabel fluoresensi dalam air laut atau anjing di mana mereka dapat tinggal selama berbulan-bulan tanpa kehilangan

ke air laut tanpa partikel plastik (kontrol). Hewan resolusi atau deteksi ( 23, 24 ). Dalam studi eksposur kami, kami

dipindahkan secara individual ke kondisi bersih untuk mencegah

menggunakan 15.000 mikrosfer polistiren individu untuk masing-masing

menelan mikrosfer lebih lanjut. Terkena dan kendalikan perawatan plastik (diverifikasi oleh analisis Coulter Counter) dari

hewan kemudian diambil sampelnya pada skala waktu logaritmik untukukuran kecil atau besar per kerang, di setiap waktu/
partikel

melacak partikel berlabel dan mengukur setiap efek biologis. kombinasi pengobatan/replikasi. Ukuran plastik yang dipilih

Teknik histologis dan hematologi digunakan untuk mewakili kisaran ukuran partikel yang lebih kecil yang diketahui

menilai translokasi partikel, dan tes toksikologi adalah untuk dicerna oleh invertebrata laut (3, 5, 25) dan

digunakan untuk menguji efek biologis tertentu pada M. edulis. diameter terkecil sampah plastik yang ditemukan di habitat laut

Hipotesis berikut diperiksa: (I) Setelah konsumsi,

(3). Kerang terkena perawatan ini selama 3 jam, karena

partikel polistiren menumpuk di rongga usus kerang. pekerjaan awal menunjukkan bahwa ini cukup untuk

(II) Mikrosfer polistiren yang tertelan berpindah dari mikrosfer untuk dicerna. Hewan kemudian dipindahkan

usus ke cairan peredaran darah (hemolymph), dan ketika trans-

untuk memisahkan gelas bersih dan makan setiap hari di I. galbana . Air laut

ilih d i k di i b ih k li h ik l ik di di b h i h i k ik k b d
Dilihat dari kondisi bersih, kelimpahan mikroplastik di diubah setiap hari. Untuk memeriksa keberadaan
kerang akan menurun seiring waktu. (III) Setelah memberi makan

dengan jumlah mikrosfer yang sama, lebih kecil (3,0 m)

 
kerang polistirena dalam kotoran, air laut adalah
mikrosfer

disaring vakum menggunakan filter Whatman GFA, yang

partikel polystyrene akan terjadi di hemolymph di lebih besar selanjutnya diperiksa di bawah mikroskop fluoresensi.

jumlah yang lebih besar dari partikel yang lebih besar (9,6 m). (IV) Tertelan dan/
Tes Biologi. Uji viabilitas sel digunakan untuk

atau translokasi partikel mikroplastik akan mengurangi

memeriksa apakah konsumsi mikroplastik menyebabkan pengurangan

viabilitas dan fungsi fagositik hemosit, mengurangi tion dalam kemampuan hemosit kerang untuk menyerap netral

status oksidatif hemolimf, dan mengurangi aktivitas makan

pewarna merah (26), sama halnya dengan uji fagositosis yang digunakan untuk
kerang.
menentukan apakah sistem kekebalan kerang telah

dikompromikan dengan menelan mikroplastik. Pengujian ini mengukur

Bahan dan metode kemampuan hemosit kerang untuk menelan ragi (zymosan)

partikel ( 26 ). Untuk menilai apakah konsumsi dan translokasi

M. edulis (3 - 4 cm) dikumpulkan dari Port Quinn mikroplastik mengurangi kapasitas hemolimfa untuk

(50 ° 35 20,60 N, 4 ° 52 05,63 W), Cornwall (Inggris), situs gratis mengatasi stres oksidatif, antioksidan pereduksi besi

dari sumber titik kontaminasi kimia (21, 22). uji potensial (FRAP) digunakan ( 27 ). Perubahan dalam pemberian makan

Kerang dikumpulkan dari platform berbatu dengan hati-hati perilaku dinilai dengan memeriksa tingkat izin

memotong benang byssal untuk menghindari kerusakan pada soft yang makanan
partikel mendasarinya
dari larutan stok alga ( 28 ). Untuk detailnya

tisu. Epifauna dihilangkan dan kerang dipindahkan protokol silakan lihat Informasi Pendukung S1.

untuk kondisi yang dikontrol suhu (15 ° C). Perorangan Melacak Serapan Mikrosfer Polistirena. Ke

diberi nomor menggunakan label plastik, ditugaskan secara acak untuk

menentukan apakah mikrosfer polistiren memiliki akumulasi

gelas kimia terpisah, dan dibiarkan selama 48 jam untuk menyesuaikan

Di usus, diri dalam
kerang filter dan usus tengahnya dibedah
dibedah

air laut yang mengandung suplemen makanan Isochyrsis galbana. Dua

diekstraksi menggunakan bagian butter fly dan diawetkan di Baker's
percobaan kemudian dilakukan. Yang pertama diselidiki kalsium formal (24 jam, 4 ° C). Setelah fiksasi, jaringan
apakah kerang menelan dan mengakumulasi mikropolistiren didehidrasi melalui seri alkohol menaik, dibersihkan

bola di rongga usus mereka (Hipotesis I). Percobaan kedua dalam xylene, diresapi dalam lilin, dan diblokir menggunakan

kemudian diselidiki apakah bahan ini dapat bertranslokasi Sistem Tissue-Tec. Bagian dipotong menggunakan Brights WM3050-

dari rongga usus ke sistem peredaran darah, ditentukan jika mikrotom, dipasang pada slide berlapis APTS, dan diwarnai

kelimpahan mikroplastik dalam kerang akan menurun lebih menggunakan teknik Papanicolaou untuk membedakan jaringan

waktu ketika dipindahkan ke kondisi bersih (Hipotesis II). rongga usus dan tubulus pencernaan yang lebih kecil (11).

Eksperimen ini juga menguji apakah ada perbedaan Untuk menilai apakah mikroplastik yang tertelan telah ditranslokasi

ences dalam translokasi menurut ukuran partikel (Hipotesis dari rongga usus ke sistem peredaran darah kerang, 500

III ), dan dinilai jika konsumsi/translokasi terganggu L hemolymph ditempatkan ke poli yang sudah disiapkan
L-lisin

kesehatan organisme (Hipotesis IV). slide kaca yang menambahkan muatan positif yang membantu kehidupan

Dalam percobaan pertama untuk menentukan apakah kerang

sel menempel pada permukaan slide. Untuk mencegah kontaminasi,

mampu menyerap mikroplastik dari kolom air ke dalam air cangkang dikeringkan dari setiap kerang sebelum hemolymph

rongga usus, hewan diekspos selama 12 jam untuk dipisahkan ekstraksi dari otot abduktor posterior, dan yang baru

JIL. 42, TIDAK. 13, 2008 / ILMU & TEKNOLOGI LINGKUNGAN 9 5027

jarum suntik/jarum digunakan untuk setiap hewan untuk menghindari

hemolimfa setelah 48 hari. Mikroplastik hadir di dalam

kemungkinan kontaminasi silang. Slide tertinggal di a pelet tinja dari pertama kali pemeriksaan setelah 3 hari

ruang kelembaban selama 30 menit sementara hemosit dipatuhi

dalam kondisi bersih dan selama sisa percobaan.

slide, dan kemudian dibalik dan dibiarkan kering di kamar Ingesti dan translokasi mikropolistiren

suhu. Slide kemudian difiksasi dalam metanol (15 menit) bola oleh kerang tidak menyebabkan pengurangan yang signifikan

dan dibiarkan kering pada suhu kamar ( 27 ). Sebuah penutup kaca

dalam status oksidatif hemolimf, kelangsungan hidup dan

kemudian dipasang pada setiap slide menggunakan forsep bersih dan a fagositosis hemosit, atau aktivitas filter-makan
aktivitas

beberapa tetes agen pemasangan resin polivinil-alkohol berair (Hipotesis IV, lihat Gambar S1 pada Informasi Pendukung).

(Imuno-mount, Thermo-Shandon, USA) ditambahkan. Itu Namun, ada efek yang signifikan dari "waktu" di semua
kelimpahan partikel mikroplastik dihitung di bawah tes biologis. Status oksidatif hemolimfa adalah

mikroskop fluoresensi (Leica DMR). Mikrosfer adalah lebih dari 35% lebih tinggi dari sampel kerang pada hari ke 3, 12, dan

dibedakan karena ukurannya (3,0 atau 9,6 m) dan 48 dibandingkan dengan yang disampel pada hari ke) 6 dan 24 ( F
5.03,
4,60

fluoresensi pada panjang gelombang spektral yang sesuai, dan P < 0,001). Viabilitas hemosit kerang mencapai 64%
tidak ada pencucian yang diamati dari bahan kimia fluoresen lebih besar pada hari ke-6 dan ke-12 dibandingkan semua
4,60
waktu lainnya (F
)
label. 8,16, P < 0,001). Perbandingan sampel kerang antara
Untuk mengkonfirmasi apakah mikrosfer polistiren memilikihari 3 dan 6, dan antara hari 24 dan 6, hari 12 dan 48

terakumulasi dalam hemosit, 500 L hemolimfa adalah menunjukkan bahwa aktivitas fagositosis hemosit bervariasi dengan

ditempatkan ke poli
Gelas-slide L-lisin dan diinkubasi dalam a lebih dari 50 % selama percobaan ( F 4,60
) 6,33, P < 0,001).
ruang kelembaban (30 menit) dengan fluorescein-isothiocyanate.
Tingkat izin bervariasi dari waktu ke waktu hingga 70%, dengan hari ke-3

Slide dibalik dan dicuci dengan buffer fosfat, dan 6 secara signifikan lebih tinggi dari hari 12 dan 24, sedangkan hari ke-6

kemudian dikeringkan pada suhu kamar. Sebuah penutup kemudian

secara signifikan lebih tinggi dari hari ke 48 (F
) 6,62, P
4,60
< 0,001).
dipasang dan hemosit pada slide dilihat di bawah

mikroskop confocal Zeiss LSM. 3 dimensi yang dihasilkan

Diskusi
citra hemosit digunakan untuk menilai apakah

mikrosfer polistirena telah terakumulasi dalam hemosit.

Mytilus edulis menelan dan mengangkut partikel mikro-
Analisis Statistik. Untuk menentukan pengaruh partikel
plastik ke usus, di mana mereka terakumulasi dalam pencernaan
ukuran pada akumulasi mikroplastik di hemolymph,
rongga dan tubulus ( Hipotesis I ). Padahal partikel plastik
perbandingan formal dibuat menggunakan ANOVA 2-faktor di mana:
telah terbukti menumpuk di rongga usus burung
"waktu" memiliki 5 level (3, 6, 12, 24, 48 hari) dan "pengobatan" memiliki
(30), ikan (2), dan cacing polychaete (18), translokasi dari
2 tingkat (3,0 dan 9,6 m partikel polistiren), analisis
usus ke sistem peredaran darah invertebrata belum
mengecualikan hewan kontrol karena tidak mengandung
telah ditampilkan sebelumnya. Dalam penelitian kami, partikel polistirena
mikrosfer. Waktu secara khusus dipilih untuk mewakili
ditranslokasi dari rongga usus ke sistem peredaran darah di
deret semilogaritma. Oleh karena itu kedua faktor diperlakukan
sedikitnya 3 hari dan bertahan dalam sistem peredaran darah untuk
sebagai tetap dan ortogonal, dengan 5 ulangan setiap kali/
selama 48 hari (Hipotesis II). Ini penting karena
kombinasi pengobatan. Karena setiap unit percobaan adalah
penelitian sebelumnya menyelidiki konsumsi makroplastik
independen, ANOVA digunakan untuk menguji hipotesis tentang
 
puing-puing (
translokasi dan secara kuantitatif menilai denyut nadi dan tekan
> 1 mm) oleh hewan laut hanya menunjukkan bahwa itu
mungkin tertahan di saluran pencernaan (2) atau tergeser di
efek toksikologi. Sebelum ANOVA, homogenitas varians
bentuk feses ( 31 ). Pekerjaan lebih lanjut diperlukan untuk menentukan bagaimana
diperiksa menggunakan uji Cochran. Varian dari
partikel mikroplastik dengan cepat berpindah ke sirkulasi
mikrosfer dalam hemolimf, status oksidatif, viabilitas,
sistem dan mekanisme di mana partikel-partikel ini
dan aktivitas fagositosis hemosit adalah heteroskedastis,
diambil melintasi usus / penghalang ekstraseluler dan terakumulasi
dan karena ini tidak dapat diselesaikan dengan transformasi,
dalam hemolimfa. Tanpa pemotongan histologis yang mendetail
analisis dilakukan pada data yang tidak ditransformasi. Besar
dan pemeriksaan semua jaringan/organ menggunakan fluoresensi
desain ANOVA seimbang dianggap kuat untuk keberangkatan
mikroskop, tidak mungkin untuk berspekulasi mengapa puncak
dari asumsi varians ( 29 ), dan untuk mengurangi kemungkinan
kelimpahan partikel kecil dan besar terjadi setelah 12 hari
kesalahan tipe-I, tingkat signifikansi yang lebih konservatif dari P(Hipotesis
< II). Pada manusia dan hewan pengerat, kinetika partikel
0,01 digunakan. Efek yang signifikan diperiksa menggunakan
translokasi di usus tergantung pada difusi dan
posthoc Student - Newman - Keuls (SNK) tes. Statistik
aksesibilitas partikel plastik melalui lendir, inisial
analisis dilakukan menggunakan winGMAV 5 for windows (EICC,
kontak dengan enterosit, perdagangan sel, dan pasca-
Universitas Sydney).
peristiwa translokasi ( 32 ). Oleh karena itu, penting untuk

mengkarakterisasi berbagai jenis sel dalam usus kerang

Hasil dan menyelidiki kemampuan mereka untuk memfagositosis dan lalu lintas

partikel plastik melalui lapisan epitel. Khususnya,

Untuk percobaan pertama, analisis histologis menunjukkan bahwa

penting untuk menyelidiki kemungkinan adanya

dalam waktu 12 jam, kerang terkena kedua perlakuan ukuran partikel

enterosit khusus seperti sel '' microfold ''. Sel-sel ini

telah mengumpulkan mikrosfer polistiren di rongga usus mereka

memiliki lipatan mikro berbentuk tidak beraturan, mi-

dan tubulus pencernaan (Hipotesis I, Gambar 1a dan b). crovilli, pengikatan lektin, dan pada manusia dan hewan pengerat diketahui

Setelah 3 hari, mikroplastik yang tertelan terakumulasi dalamuntuk mengangkut partikel plastik dari lumen usus, melalui

cairan sirkulasi kerang dan kedua ukuran polistiren epitel, menuju folikel melalui fagositosis, dari mana

partikel ditemukan di hemolimf dan hemosit partikel kemudian dapat bermigrasi ke sistem peredaran darah ( 33 ). Di

(Gambar 1c - e). Mikrosfer tidak ditemukan dalam hemolimfa percobaan kami, kelimpahan mikrosfer di

kerang dari perlakuan kontrol. Analisis statistik hemolimf menunjukkan pola akumulasi yang sama untuk

j
menun ukkan efek yang signifikan dari
4,40
waktu "
) 13,33, (F
P " < 0,01**) kedua ukuran, oleh karena itu tampaknya kedua ukuran itu bertranslokasi

dan “ukuran partikel” ( F) 9,87, P < 0,01**). kelimpahan

1,40
dengan mekanisme yang sama. Mikroskop confocal menunjukkan

kedua ukuran mikroplastik terbesar setelah hari ke-12 dan bahwa kedua ukuran partikel plastik ada di dalamnya

menurun setelahnya ( Hipotesis II , Gambar 1f), lebih kecil 3,0 mhemoctytes (Gambar 1e) dan percobaan in vitro menggunakan

partikel terjadi dalam kelimpahan yang lebih besar secara konsisten

spesies
daripada
terkait Mytilus galloprovincialis menunjukkan bahwa granula

j
partikel yang lebih besar sepan ang durasi percobaan (Hy- hemosit lositik bertanggung jawab untuk fagositosis

hipotesis III, Gambar 1g), dan efek ini keduanya signifikan. partikel polistiren hingga 800 nm ( 34 ). Oleh karena itu untuk pasca-

Selanjutnya, kedua ukuran mikroplastik masih ada di peristiwa translokasi setidaknya, fagositosis bisa memainkan kunci

5028 U & TEKNOLOGI LINGKUNGAN / VOL. 42, TIDAK. 13, 2008

9 ILM
GAMBAR 1. Serapan partikel plastik oleh Mytilus edulis (L.). (a) Bagian jaringan (tebal 4 m) berisi 2 m dan (b) 4 - 16 m
mikrosfer polistiren di rongga usus dan tubulus pencernaan. 3,0 (c) dan 9,6 m (d) mikrosfer polistirena di hemeolimfa

dan (e) hemosit. Perbedaan yang signifikan dalam akumulasi dalam hemeolymph menurut (f) "ukuran partikel" dan (g) "waktu" pada P <
0,01**. Nilai NB dinyatakan sebagai mean (SE dan dihitung dari data independen dari setiap waktu/perlakuan/ulangan

kombinasi dan karena itu tidak kumulatif.

peran. Persistensi partikel mikroplastik di partikel yang lebih kecil. Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menguji

hemolimfa M. edulis selama lebih dari 48 hari memiliki implikasi

prediksi ini dan untuk menentukan ukuran atas dan bawah

untuk predator, termasuk burung, kepiting, bintang laut, predator

batas untuk menelan dan translokasi puing-puing plastik

whelks ( 35, 36 ), dan manusia ( 37 ). Untuk potongan plastik yang

dalam
lebih
organisme
besar, lain. Semakin besar akumulasi semakin kecil

ditemukan dalam kotoran anjing laut, diduga sumbernya partikel menunjukkan bahwa sebagai item dari plastik terdegradasi,

bahannya dari ikan dalam makanan mereka yang sebelumnya potensinya untuk terakumulasi dan bertranslokasi di dalam

akumulasi plastik; namun, masih belum diketahui apakah jaringan organisme meningkat. Sifat fisik lainnya

plastik dari berbagai ukuran dapat ditransfer sepanjang rantai makanan

partikel plastik
( 38 ). juga dapat mempengaruhi konsumsi dan translokasi;

Sumber alternatif mikroplastik adalah melalui abrasi penelitian medis menggunakan manusia dan hewan pengerat menunjukkan bahwa keduanya

plastik yang tertelan di rongga usus sebagai akibat dari pencernaan

bentuk dan muatan partikel cenderung memainkan

proses. Misalnya, beberapa burung laut ( 39 ) dan ikan ( 40 ) mengandung:

peran penting dalam translokasi ( 42 ). Komposisi dari

partikel sedimen di usus mereka, yang dikombinasikan dengan puing-puing mikroplastik di habitat laut bervariasi bentuknya

kontraksi otot, dapat mengikis plastik dan menimbulkan (misalnya, serat, bola, fragmen tidak beraturan) dan jenis polimer

partikel mikroplastik di usus mereka.

Ukuran partikel mempengaruhi kapasitas polistirena untuk

  (misalnya, polistirena, polietilen, poliester), dan sebagai artikel

sampah plastik yang terdegradasi akan berkurang ukurannya, dan

translokasi dari rongga usus ke hemolymph, dengan over kandungan monomer dan sifat permukaannya juga akan berubah.

60% lebih kecil (3,0 m) mikrosfer dalam sirkulasi Misalnya, studi medis dengan sel darah putih manusia

cairan dari mikrosfer yang lebih besar (9,6 m) ( Hipotesis III ). Ini
telah menunjukkan bahwa kandungan styrene dari polystyrene micro-

hasilnya sesuai dengan percobaan in vitro menggunakan bola sangat mempengaruhi kemampuan mereka untuk difagositosis

segmen jaringan kolon dari tikus, yang juga menunjukkan kecepatan

( 43 ). Oleh karena itu, penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menyelidiki

translokasi lebih kecil (14 nm) dibandingkan dengan yang lebih faktor
besar (415
yang mempengaruhi konsumsi dan translokasi mikro-

dan 1000 nm) partikel polistirena ( 41 ). Jika fagositosis adalah plastik pada organisme yang lebih luas.

terlibat, model yang mungkin untuk menjelaskan lebih banyak Ingesti dan translokasi mikropolistiren

partikel mikroplastik kecil adalah bahwa partikel yang lebih kecil

bola
adalah
oleh kerang tidak menyebabkan perubahan terukur

lebih mudah difagositosis, mungkin karena fagosom dalam status oksidatif hemolimf, kelangsungan hidup dan

dalam setiap sel, yang terbatas dalam ruang, dapat menampungaktivitas fagositosis hemosit, atau aktivitas penyaringan makan

JIL. 42, TIDAK. 13, 2008 / ILMU & TEKNOLOGI LINGKUNGAN 9 5029

(Hipotesis IV). Namun, terlalu dini untuk menyarankan bahwa ucapan terima kasih
menelan dan atau translokasi plastik tidak menyebabkan Kami berterima kasih kepada J. Widdows, A. Silva, dan T. Worsey atas saran dan

efek toksikologi. Percobaan laboratorium kami mengekspos kerang

bantuan teknis. Naskah memiliki komentar yang membantu

selama 3 jam hingga 15.000 partikel satu jenis plastik (polystyrene)

dari J. Spicer, A. Silva, K. Sloman, dan P. Browne. penelitian

dan kemungkinan efek biologis dipantau hanya 48 didanai oleh hibah dari Leverhulme UK ke RCT dan

hari. Di lingkungan alaminya, kerang akan diekspos TSGMAB sangat berterima kasih kepada EICC, University of Sydney,

untuk memberikan dukungan untuk menulis makalah ini sebagai bagian dari Post-
selama hidup mereka untuk berbagai jenis mikroplastik, termasuk

poliester, polietilen, polipropilen, polivinilklorida, Persekutuan Doktor. MAB mendedikasikan makalah ini untuknya

orang tua L. dan P. Browne, dan guru yang luar biasa M. Upson,
dan akrilik. Studi medis menggunakan tikus yang disuntikkan intraperi-

M. Haynes, dan Mr. Shoker.

selaras dengan mikroplastik menunjukkan bahwa serapan fagositik

partikel mikro poliester (asam polilaktat) dapat menyebabkan

kerusakan sel, melalui perubahan morfologi dan Informasi Pendukung Tersedia

viabilitas fagosit (44). Oleh karena itu, diperlukan penelitian Protokol untuk pengujian biologis dan perubahan temporal di

untuk memeriksa konsekuensi toksikologi jangka panjang berbagai tingkat organisasi biologis dalam kerang

selama percobaan paparan kedua. Materi ini tersedia gratis

paparan berbagai jenis plastik yang secara rutin ditemukan di laut

habitat. Perhatian khusus diperlukan untuk menilai apakah gratis melalui Internet di http://pubs.acs.org.

mikroplastik dapat merusak organ vital seperti jantung dan

hepatopankreas. Mengingat sistem peredaran darah terbuka Daftar pustaka

moluska, hemosit bersirkulasi ke seluruh tubuh hewan dan

(1) Plastik Eropa. Analisis Produksi Plastik, Permintaan dan
jaringan ikat organ utama, sehingga mikroplastik bisa
Pemulihan di Eropa; Plastik Eropa, Asosiasi Plastik

diangkut ke organ-organ penting ini. Percobaan laboratorium Pabrikan: Brussel, 2006; hal 1 - 20..

dengan hamster yang disuntik dengan partikel polistiren 60 nm (2) Derraik, JGB Pencemaran lingkungan laut oleh

telah menunjukkan dalam aliran darah bahwa partikel-partikel ini dapat

–852.
puing-puing plastik: ulasan. Mar. Polusi. Banteng. 2002 , 44 (9), 842

(3) Thompson, RC; Olsen, Y.; Mitchell, RP; Davis, A.; Rowland,
menginduksi trombosis ( 45 ). Oleh karena itu kehadiran partikel
SJ; John, AWG; McGonigle, D.; Russell, AE Hilang di laut:
mikroplastik dalam sistem peredaran darah dapat membatasi darah Dimana semua plastiknya? Sains 2004 , 304 (5672), 838 –838.
(4) Browne,
aliran yang menyebabkan kerusakan pada jaringan pembuluh darah MA; Galloway, TS; Thompson, RC Mikroplastik
dan perubahan

- kontaminan yang muncul yang berpotensi menimbulkan kekhawatiran. terpadu Mengepung.

aktivitas jantung. Selain itu, pecahan plastik ditemukan di
Menilai. Mengelola. 2007, 3 , 559 –566.
habitat laut di Jepang, Meksiko, dan Amerika Utara memiliki
(5) Lingkungan, JE; Shumway, SE Memisahkan biji-bijian dari sekam:
menunjukkan konsentrasi tinggi poliklorinasi bifenil
pemilihan partikel dalam suspensi dan deposit bivalvia makan.

(PBCs), dichlorodiphenyl trichloroethane (DDT), dan non- J. Eks. Maret Biol. Ekol. 2004 , 300 , 83-130.

(6) Volkheimer, G. Penyebaran hematogen dari yang tertelan

ylphenol polyaromatic dan hidrokarbon alifatik ( 46-48 ).
partikel polivinil klorida. Ann. NY Acad. Sci. 1975 , 246 , 164–
k i l b i b j kk b h
Bukti laboratorium terbaru menunjukkan bahwa penyerapan 171.
fenantrena ke partikel mikroskopis polietilen,
(7) Hussain, N.; Jaitley, V.; Florence, AT Kemajuan terbaru dalam

polypropylene, dan polyvinvylchloride mencapai urutan pemahaman tentang penyerapan mikropartikel di seluruh gas-

besarnya lebih tinggi daripada partikel sedimen alami   limfatik trointestinal. Adv. Pengiriman Obat Rev. 2001, 50, 107 –
142.
( 49 ). Meskipun penelitian kami tidak memberikan bukti penyerapan
(8) Szentkuti, L. Pengamatan mikroskopis cahaya pada luminally
bahan kimia ini, kami menunjukkan bahwa partikel yang tertelan dari
pewarna yang diberikan, dekstrans, nanosfer dan mikrosfer
mikroplastik dapat bertahan dalam hemolimfa kerang selama di lapisan gel lendir pra-epitel dari usus distal tikus. J.

selama 48 hari dan karena itu dapat menyediakan rute untuk
transportasi bahan kimia ke berbagai jaringan.
Efek "waktu" diamati di semua pengujian biologis
digunakan dalam penelitian kami konsisten dengan studi lapangan sebelumnya
169..
Rilis Terkendali 1997 , 46 , 233 –242.
(9) Benih, R.; Suchanek, TH Ekologi populasi dan komunitas
dari Mytilus. Dalam The Mussel Mytilus: Ekologi, Fisiologi, Genetika
dan Kebudayaan; Gosling, E., Ed.; Elsevier: New York, 1992; hal 87 -
untuk

(10) O'Connor, NE; Crowe, TP Keanekaragaman hayati di antara kerang:

kerang ( 11 ) dan keong ( 26 ). Studi ini telah menunjukkan
memisahkan pengaruh ukuran kerang dari usia patch.
variabilitas temporal pada skala minggu hingga bulan di
J.Mar.Biol. Asosiasi (Inggris Raya) 2007, 87, 551 –557.
viabilitas dan aktivitas fagositosis hemosit dan oksidatif
(11) Bloxham, MJ; Jones, MB; Galloway, TS; Lowe, DM; coklat,

keadaan hemolimfa. Perubahan temporal skala kecil ini ;

MA Depledge, MH Bioindikator Pengelolaan Ekosistem -

Laporan
dalam kesehatan organisme yang disimpan di bawah laboratorium yang terakhir ; DEFRA, Ed.; Universitas Plymouth dan Plymouth
terkendali
Laboratorium Kelautan, Inggris: London, 2004.
kondisi mendukung pandangan Underwood ( 50 ) yang
(12) Coklat, RJ; Galloway, TS; Lowe, D.; Brown, MA;
mempertanyakan kemampuan kondisi laboratorium untuk meminimalkan
Dissanayake, A.; Jones, MB; Depledge, MH Diferensial
variabilitas temporal dalam respons biologis perairan sensitivitas tiga invertebrata laut terhadap tembaga dinilai menggunakan

invertebrata dalam uji toksisitas. Oleh karena itu kemungkinan menggunakan

beberapa biomarker. air. racun. 2004 , 66 (3), 267 –278.
(13) Coles, JA; Farley, SR; Pipa, RK Efek uoranthene pada
eksperimen paparan lapangan untuk mendapatkan lebih kuat secara ekologis
imunokompetensi dari kerang laut umum Mytilus
data perlu dieksplorasi lebih luas dalam ekotoksikologi
edulis. air. racun. 1994 , 30 (4), 367 –379.
( 26, 51 ).
(14) Coles, JA; Farley, SR; Pipa, RK Perubahan sistem imun

Data yang disajikan di sini, dan studi medis lainnya respon dari kerang laut umum Mytilus edulis yang dihasilkan

dengan hewan pengerat dan manusia, menunjukkan bahwa fragmen dari

dari paparan kadmium. Dis. air. organisasi 1995 , 22 (1), 59 –
65.
mikroplastik dapat berpindah dari rongga usus ke darah
(15) Lingkungan, JE; Levinton, JS; Shumway, SE Pengaruh diet pada

mengalir di berbagai organisme. Untuk menetapkan sejauh pemrosesan partikel pra-pencernaan pada bivalvia I: Kecepatan transportasi

di mana ini terjadi pada populasi alami, dan untuk mengidentifikasi ikatan pada ctenidium. J. Eks. Maret Biol. Ekol. 2003 , 293 (2),
129-149.
setiap efek samping, akan perlu untuk lebih menyempurnakan
(16) Browne, MA Konsekuensi lingkungan dari mikroplastik di
teknik untuk mengukur fragmen plastik kecil. Sebagai contoh,
habitat laut; Ph.D. Tesis, Universitas Plymouth: Ply-
metode terkini untuk mengidentifikasi sampah plastik menggunakan Fourier
mulut, 2008.

mengubah spektroskopi inframerah hanya mengizinkan partikel

(17) Kartar, S.; Abou-Seedo, FMS Polystyrene spherules di

Muara Severn - Sebuah laporan kemajuan. Mar. Polusi. Banteng. 1976 , 7 ,

plastik berukuran sekitar 20 m untuk meyakinkan
52.
diidentifikasi (3), tetapi sepenuhnya layak bahwa partikel plastik
(18) Tukang Kayu, EJ; Anderson, SJ; Harvey, GR; Miklas, HP;
sekarang hadir di lingkungan yang jauh lebih kecil
Peck, BB Polystyrene spherules di perairan pantai. Sains 1972 ,

skala nanometer. 178 , 749 –750.

5030 9 ILM U & TEKNOLOGI LINGKUNGAN / VOL. 42, TIDAK. 13, 2008

(19) Ryan, PG Pengaruh plastik yang tertelan pada pemberian makan burung
(36) Reimer,
laut: variasi morfologi yang diinduksi oleh CT Predator dalam

Bukti dari ayam. Mar. Polusi. Banteng. 1988, 19 (3), 125 – keong predator Nucella spp.: Pengujian menggunakan eksperimen lapangan.

128. Saya. kebun binatang. 1999 , 39 (5), 30A

(20) Mamaca, E.; Bechmann, RK; Torgrimsen, S.; As, E.; Bj ørnstad, (37) CEFAS. Berita Kerang ; Weymouth, November 2005; hal 70.
SEBUAH.; Baussant, T.; Le Floch, S. Retensi lisosom merah netral
(38) Eriksson, P.; Viberg, H.; Jakobsson, E.; Orn, U.; Fredriksson, A.
uji dan uji komet pada sel hemolimf dari kerang
Sebuah penghambat api brominasi, 2,2 ,4,4 ,5-pentabromodiphenyl
( Mytilus edulis ) dan ikan ( Symphodus melops ) yang terpapar stirena.
eter: Penyerapan, retensi, dan induksi neurobehavioral
air. racun. 2005 , 75 , 191–201. perubahan pada tikus selama fase kritis otak neonatal
(21) Janda, J. Lingkup pertumbuhan dan tingkat kontaminan di Utara
perkembangan. racun. Sci. 2002 , 67 (1), 98-103.
Kerang laut Mytilus edulis. Mar. Ecol.-Prog. Ser. 1995, 127, 131 –
(39) de Villiers, MS; de Bruyn, PJN Menelan batu sebanyak tiga
148.
spesies penguin di Pulau Marion sub-antartika. Merusak.
(22) Stan, AM; Sutton, PA; Lewis, CA; Lewis, AC; Scarlett,
Ornithol. 2004 , 32 , 185 –186.
SEBUAH.; Chau, W.; Janda, J.; Rowland, S. Kompleks yang belum terselesaikan
(40) Mauchline, J.; Gordon, DM Terjadinya batu, sedimen
campuran hidrokarbon aromatik: Ribuan diabaikan
dan sisik ikan dalam isi perut ikan demersal dari
kontaminan persisten, bioakumulatif dan toksik pada kerang.
–362.
–576.
Palung Rockall. J. Biola Ikan. 1984, 24 (4), 357
Mengepung. Sci. teknologi. 2007, 32, 567
(41) Szentkuti, L. Pengamatan mikroskopis cahaya pada luminally
(23) Madl, AK; Wilson, DW; Segal, HJ; Pinkerton, Perubahan KE
pewarna yang diberikan, dekstra, nanosfer, dan mikrosfer dalam
dalam translokasi partikel paru-paru, fungsi makrofag, dan
lapisan gel lendir pra-epitel dari usus distal tikus. J.
pengaturan mikrofilamen pada tikus yang diobati dengan monokrotalin.

racun. aplikasi farmasi. 1998 , 153 (1), 28 –38. Rilis Terkendali 1997 , 46 , 233 –242.
(24) Altemeier, WA; Robertson, HT; Glenny, RW Pulmonary (42) Donaldson, K.; Batu, V.; Trans, CL; Kreyling, W.; Borm, PJA

analisis pertukaran gas dengan menggunakan deposisi simultan Nanotoksikologi. Menempati Mengepung. Med. 2004 , 61 (9), 727 –728.
mikrosfer aerosol dan disuntikkan. J. Aplikasi Fisiol. 1998 , (43) Urakami, Y.; Kasuya, Y.; Fujimoto, K.; Miyamoto, K.; Kawaguchi,

85 (6), 2344 –2351. H. Fagositosis mikrosfer dengan permukaan yang dimodifikasi. koloid

(25) Browne, MA; Galloway, TS; Thompson, RC Mikroplastik Berselancar. B 1994 , 3 , 183 –190.
- kontaminan yang muncul yang berpotensi menimbulkan kekhawatiran. terpadu
(44) Lam, Mengepung. JM; Esselbrugge, H.; Feijen, J.;
KH; Schakenraad,

Menilai. Mengelola. 2007, 3 , 559 –566. Nieuwenhuis, P. Pengaruh fagositosis poli(asam L-laktat)
(26) Cartwright, SR; Coleman, RA; Browne, MA Secara ekologis fragmen pada morfologi seluler dan viabilitas. J. Bioma. ibu.
efek yang relevan dari aplikasi pulsa tembaga pada limpet

Patela vulgata. Mar. Ecol.-Prog. Ser. 2006, 326, 187 –194.

  Res. 1993, 27, 1569 –1577.
(45) Nemmar, A.; Hoylaerts, MF; Hoet, PHM; Vermylen, J.;
(27) Hagger, JA; Delegasi, MH; Galloway, TS Toksisitas dari
Nemery, B. Efek ukuran partikel intratrakeal pada
tributiltin dalam moluska laut Mytilus edulis. Mar. Polusi.
inflamasi paru dan trombosis vaskular. racun.
Banteng. 2005 , 51 (8 - 12), 811 –816. aplikasi Farmokol. 2003 , 186 , 38 –45.
(28) Coughlan, J. Estimasi laju penyaringan dari jarak bebas
(46) Mato, Y.; Isobe, T.; Takada, H.; Kanehiro, H.; Ohtake, C.;
dari suspensi. Maret Biol. 1969 , 2 , 356 –358.
Kaminuma, T. Pelet resin plastik sebagai media transportasi untuk
(29) Underwood, Eksperimen AJ dalam Ekologi - Desain Logisnya
bahan kimia beracun di lingkungan laut. Mengepung. Sci.
dan Interpretasi Menggunakan Analisis Varians ; Cambridge
teknologi. 2001 , 35 (2), 318 –324.
Pers Universitas: Cambridge, 1997.
(47) Tukang Kayu, EJ; Anderson, SJ; Harvey, GR; Miklas, HP;
(30) van Franeker, JA Plastic Ingestion di fulmar Atlantik utara.

Mar. Polusi. Banteng. 1985, 16 (9), 367 –369. Bradford, BP Polystyrene spherules di perairan pantai. Sains

(31) Eriksson, C.; Burton, H. Asal-usul dan akumulasi biologis dari

1972 , 178 , 749 –750.
j (48) Rios, LM; Moore, CG; Jones, PR Polutan organik yang persisten
partikel plastik kecil di an ing laut berbulu dari Pulau Macquarie. ambio

2003 , 32 (6), 380–384. dibawa oleh polimer sintetik di lingkungan laut. Merusak.

(32) Hoet, PHM; Bruske-Hohlfeld, I.; Salata, Nanopartikel OV polusi. Banteng. 2007, 54, 1230 –1237.
(49) Teuten,
- risiko kesehatan yang diketahui dan tidak diketahui. J. Nanobioteknologi. 2004EL;
, 2 ,Rowland, SJ; Galloway, TS; Thompson, RC

1–15. Potensi plastik untuk mengangkut fenantrena. Mengepung. Sci.

(33) Buda, A.; Pasir, C.; Jepson, MA Penggunaan pencitraan fluoresensi teknologi. 2007, 41 (22), 7759 –7764.
untuk menyelidiki struktur dan fungsi sel M usus. (50) Underwood, AJ Pengujian toksikologi di laboratorium tidak

Adv. Pengiriman Obat Rev. 2005, 57, 123 –134. pengujian ekologi toksikologi. Bersenandung. Ekol. Penilaian Risiko. 1995 ,

(34) Cajaraville, MP; Sobat, SG Studi morfofungsional dari 1 , 178-182.

hemosit moluska bivalvia Mytilus galloprovincialis dengan
penekanan pada kompartemen endo lisosom. Struktur Sel.
Fungsi. 1995, 145.
(35) Petraitis, PS Imobilisasi gastropoda predator, Nucella
lapillus, oleh mangsanya, Mytilus edulis. Biol. Banteng. 1987 , 172 (3),
(51) Lindegarth, M.; Underwood, AJ Eksperimen manipulatif
untuk mengevaluasi perubahan yang diprediksi pada intertidal, makro-fauna
rakitan setelah kontaminasi oleh logam berat. J. Eks. Merusak.
Biol. Ekol. 2002 , 274 (1), 41 –64.

307 –314. ES800249A

9 5031
JIL. 42, TIDAK. 13, 2008 / ILMU & TEKNOLOGI LINGKUNGAN 9 5031