PHYLUM DINOPHYTA

Dosen Pengampu : Prof. Dr. Dra. Berna Elya, Apt., M.Si

Disusun Oleh:
Anggita Dipika Wulandari (1906338346)
Ilham Rinaldi (1906338421)
Outline
Definisi

Klasifikasi

Kandungan kimia dan Khasiat

Proses ekstraksi
 PHYLUM DINOPHYTA
(Alga Api)

 Dinophyta mencakup semua dinoflagellata, suatu kelompok

besar fitoplankton perairan berflagella. Kebanyakan dinoflagellata
menghuni lautan, walaupun juga ada yang menempati perairan
tawar. Populasi mereka terbagi bergantung pada suhu, kadar
garam dan kedalaman laut.
 Dinoflagellata bertanggung jawab atas gejala "pasang merah",
peristiwa memerahnya perairan laut karena ledakan populasi
plankton ini yang berakibat kematian massal penghuni laut lainnya
karena mengalami keracunan.

Susilaningsih, D. (2014). Observation , Isolation and Characterization of Microalgal Red Tide Agent Dinoflagellates Prorocentrum sp . Ilmu Kelautan,
19(September), 149–158. Retrieved from https://ejournal.undip.ac.id/index.php/ijms/article/viewFile/8517/pdf
 Ciri-Ciri Dinoflagellata
 merupakan organisme bersel tunggal, memiliki nucleus yang besar, memiliki stigma dan trichocysts.
 Memilki kloroplas yang kecil  yang berbentuk discoid dan bentuk lainnya yang berisi pigmen untuk
berfotosintesis sama dengan yang ada pada diatom. Sebagian dinoflagellata mengandung pigmen klorofil
–a, klorofil-c dan karotenoid yang memungkinkan mereka untuk menjalani proses fotosintesis untuk
menghasilkan energi
 Ukuran selnya yakni antara 25µm - 1000µm. Terdapat juga spesies yang tumbuh dengan rantai yang
panjang atau pseudocoloni.
 Dinoflagellata bertatahkan dengan piring yang terbuat dari bahan seperti selulosa dan silica.
 Beberapa spesies dinoflagellata mengeluarkan racun ke dalam air, ledakan populasi organisme ini dapat
menyebabkan daerah yang mereka tempati di laut untuk menerima warna merah dan umumnya disebut
“ Red Tide ( pasang merah ) ”, selama pasang merah ikan kerang dan ikan lainnya dianggap beracun bagi
manusia dan tidak boleh dikonsumsi.
 KLASIFIKASI
 Pyrrophyta (Alga Api)
Name :Dinoflagellates
Class :Dinoflagellata, Dinophyceae
Phylum :Dinophyta
Order :Gonyaulacales
Species :Gonyaulax balechii
 Gonyaulax merupakan salah satu dinoflagellata bertanggung jawab untuk munculnya pasang merah. Selama
pasang merah, banyak ikan, ikan paus, manatee, dan pantai burung telah mati dalam jumlah besar karena
kondisi anoxic dihasilkan oleh dinoflagellata. Gonyaulax racun dari hewan laut juga dapat langsung beracun di
bagian atas piramida makanan.
 Kista Gonyaulax mungkin menunjukkan cadangan minyak bumi. Mereka telah berguna bagi industri bahan
bakar fosil. kista dinoflagellata Jadi fosil diharapkan untuk menunjukkan lokasi cadangan minyak bumi. Toksin
Gonyaulax memiliki aplikasi medis.. Saat ini sedang dilakukan penelitian tentang penggunaan saxitoxin
dimodifikasi secara kimia dalam pengobatan gangguan syaraf dan jantung. Selain itu, saxitoxin mungkin
memiliki kepentingan di masa depan sebagai anestesi lokal.
CONT’D Gymnodiniphycidae (Gymnodinium,Amphidinium, Gyrodinium)

Carty, S., & Parrow, M. W. (2015).

Dinoflagellates. In Freshwater Algae of Borghiellaceae (Borghiella)
North America: Ecology and Classification.
https://doi.org/10.1016/B978-0-12-
385876-4.00017-7
Tovelliaceae (Esoptrodinium, Jadwigia, Tovellia)

Peridiniphycidae with order Gonyaulacales (Ceratium,

Gonyaulax)

Peridiniales (Amphidiniopsis, Peridinium,Peridiniopsis)

Prorocentrales (Prorocentrum)

Thoracosphaeraceae (Tyrannodinium).
 Senyawa Bioaktif dan biotoksin pada
Dinoflagellata

 Saxitoxin  Brevetoxin
 Tetrodotoxin  Azaspiracid
 Okadaic Acid dan Dinophysistoxin  Gymnocin
 Yessotoxin  Karlotoxin
 Pectenotoxin  Cyclic Imine Toxins (spirolide dan Gymnodimine)
 Ciguatoxin  Gambieric Acid
 Maitotoxin  Goniodamin A
 Palytoxin dan Ostreocin  Amphidinolide
 Gambierol  Amphidinol
Biotoksin Yang Diproduksi Oleh Dinoflagellata Dan Potensi Penggunaan Terapeutik.
Saxitoxin

 Saxitoxin dan analognya (seperti gonyautoxin dan neosaxitoxin)

diproduksi terutama oleh dinoflagellate laut yang memiliki genera
Alexandrium (misalnya A. minutum, A. tamarense, A. cetenella),
Gymnodinium (G.catenatum) dan Pyrodinium (P.bahamense).
 Sumber racun dari kelompok Saxitoxin berasal dari cyanobacteria,
seperti genera Anabaena, cylindrospermopsis, Aphanizomenon,
planktotrix dan Lyngbya.
  STX adalah alkaloid dari kelompok produk alami laut
yang mengandung kelompok guanidin sebagai
komponen struktural utama.
 STX terdiri dari sistem trisiklik 3,4-
propinoperhydropurine dan adanya dua gugus guanidin
membuat molekul ini sangat polar

 Kelompok biotoksin ini bertindak dengan selektivitas yang tinggi terhadap sodium channel blocker, sehingga
mencegah masuknya aliran ion Na+ dan mengkompromikan pembangkitan potensi aksi.
 STX dan analognya membuat neuron dan sel otot kehilangan kemampuan mereka untuk mengirimkan impuls
listrik, sehingga, STX dan analognya memiliki potensi terapetik sebagai anestesi.
 Selain itu, STX telah dilaporkan memiliki aktivitas antimikroba ( antibakteri, antijamur, antialga dan antiprotozoal).
Namun sebagian besar studi tersebut hanya menggunakan tes in viro
 Tetrodotoxin

 Tetrodotoxin (TTX) secara tradisional dikenal sebagai toksin

utama pada ikan buntal, meskipun diproduksi oleh hewan laut
lainnya (mis. Gurita, ikan gobi, bintang laut). Spesies penghasil
bakteri TTX juga diidentifikasi dalam genera Actinomyces,
Aeromonas, Alteromonas, Bacillus dan Pseudomonas
 Satu-satunya referensi untuk produsen mikroalga adalah
(dinoflagellate) A. tamarense. Setidaknya ada 30 analog  TTX memiliki struktur kimia yang sangat tidak
struktural TTX yang dilaporkan hingga saat ini, dan tingkat biasa, mengandung bagian guanidinium
toksisitasnya dapat berbeda sesuai dengan struktur kimia bermuatan positif yang melekat pada tulang
punggung karbon yang sangat teroksigenasi.
Tulang punggung karbon TTX terdiri dari
struktur 2,4-dioxyadamantane, didekorasi
dengan 5 gugus hidroksil.
CONT’D
 Selain sebagai peran penting VGSC dalam nyeri, subtipe TTX-sensitif telah
terlibat dalam nyeri normal dan patologis
 TTX merupakan obat yang kuat dan selektif, dengan efek analgesik / anestesi
yang terkait dengan sifatnya.
 Beberapa penelitian telah menunjukkan keefektifannya dalam banyak jenis
protokol manajemen nyeri . Misalnya, obat neurotoksin — Tectin® oleh Wex
Pharmaceuticals di Kanada
 saat ini Tectin telah menjalani uji klinis fase III, dengan sukses besar sebagai
pengendali nyeri pada pasien kanker.
 Uji klinis fase II juga telah berlangsung, yang bertujuan menilai kemanjuran TTX
terhadap nyeri neuropatik yang dihasilkan oleh neuropati perifer yang diinduksi
kemoterapi.
 Yessotoxin

 Yessotoxin (YTX) adalah polieter sulfat laut,

yang diproduksi oleh Protoceratium
reticulatum, Lingulodinium polyedra dan
spesies Gonyaulax spinifera dinoflagellate.
 Toksin ini tersusun oleh bentuk tangga khas
yang dibentuk oleh beberapa cincin eter
dengan ukuran berbeda, dan rantai samping
tak jenuh terminal asiklik yang terdiri dari 9
karbon dan 2 eter sulfat
 CONT’D
 Penggunaan terapi yessotoxin sebagai penghambat pertumbuhan sel
tumor manusia.
 YTX dapat mengganggu beberapa jalur apoptosis biologis dalam berbagai
sistem seluler, termasuk sel-sel tumor.
 YTX juga dapat menginduksi kematian sel non-apoptosis pada sel myoblast
BC3H1, neuron kortikal primer dan sel glioma.
 YTX juga mempunyai peran sebagai anti alergi dan anti asma
 Mengenai efek farmakologis lainnya, YTX dan analognya dapat digunakan
sebagai terapi untuk penyakit Alzheimer.
 Selain itu, YTX dapat membantu dalam pengobatan / pencegahan penyakit
terkait metabolisme lipid dan glukosa.
 Goniodomin

 Goniodomin A (GDA) adalah polyrol macrolide

antijamur, yang diproduksi oleh genus
Alexandrium, yaitu A. hiranoi, A. monilatum,
dan A. pseudogonyaulax.
 Studi farmakologis telah menunjukkan efek
yang kuat pada reorganisasi sitoskeleton
 senyawa ini disusun oleh cincin lakton
makrolida, dengan cincin spiroketal dan cincin
hemiasetal yang melekat padanya
 zat ini telah menunjukkan aktivitas antijamur
terhadap Candida albicans dan Mortierella
ramannianus
 Amphidinol

 Amphidinol (AM) milik kelompok unik senyawa polyhydroxy polyene, yang diproduksi oleh
spesies Amphidinium (mis., A. klebsii, A. carterae
 AMs termasuk dalam keluarga besar polieter linier rantai panjang, menghadirkan aktivitas
biologis yang potensial — termasuk sifat antijamur, sitotoksik, dan hemolitik
 Toxin Supplier Source Price Range (  euro/mg)
Okadaic acid SGA Prorocentrum concavum 1430
Commercially available GEN
LCL
unkown
unkown
3510
561
MER Prorocentrum sp. 2538
biotoxins—with SL
TC
unkown
unkown
3479
5000
corresponding suppliers, BP
SCB
unkown
Prorocentrum sp.
1210
1850

sources and price range \ Okadaic acid, ammonium

salt
SGA
LCL
Prorocentrum concavum
Unkown
16,620
561

(per mg). Okadaic acid, sodium salt SGA

GEN
Prorocentrum concavum
unkown
9730
2320
LCL unkown 561
SL unkown 2657
Okadaic acid, potassium salt SGA Prorocentrum concavum 8050
GEN unkown 2320
LCL unkown 561
Okadaic acid, solution MER Prorocentrum sp. 4480
Tetrodotoxin GEN unkown 451
TC unkown 195
Saxitoxin, diacetate GEN Unkown 9920
Yessotoxin, antibody GEN Unkown 1580
Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam produksi biotoksin

 1. Campuran Nutrisi dalam Media Pertumbuhan

Komposisi campuran nutrisi dalam media pertumbuhan dapat sangat mempengaruhi
kelangsungan hidupdinoflagellate (mis., pembelahan sel) dan produksi biotoksin.
Dalam beberapa kultur dinoflagellate, efek makronutrien sangat penting untuk pemeliharaan
proses seluler; misalnya, nitrat dan fosfat tampaknya memicu sintesis biotoksin.
Produksi spesifik sel yessotoxin bioaktif tidak dipengaruhi oleh konsentrasi fosfat, tetapi oleh
konsentrasi nitrat yang lebih tinggi.
Unsur-unsur vitamin juga terbukti sangat penting. Contohnya, P. reticulatum ditemukan
menunjukkan tingkat pertumbuhan yang lebih tinggi ketika selenium dan besi ditambahkan
ke dalam kultur, dan produksi yessotoxin meningkat secara signifikan dengan penambahan
selenium.
Vitamin B (mis., B1, B7, B12) memiliki potensi secara luas mempengaruhi produktivitas
biomassa laut.
Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam produksi biotoksin

 2. Sumber Energi
Baik cahaya alami dan buatan telah dilaporkan menghasilkan pertumbuhan dinoflagellat yang baik.
Cahaya buatan memberikan kontrol yang lebih baik terhadap spektrum cahaya, kerapatan fluks foton
radiasi atau fotosintesis , serta photoperiod (siklus terang / gelap) pada photobioreaktor.
Beberapa penelitian menggunakan lampu fluorescent dan light-emitting diode (LEDs) semakin
penting dalam kultur dinoflagellate . Performa LED sangat mirip dengan cahaya fluoresen, tetapi
membutuhkan energi yang lebih sedikit. LED tidak merusak sel-sel dinoflagellate, karena tidak
menghasilkan panas yang berlebihan dan dapat dengan mudah dirancang untuk menyampaikan
cahaya yang telah ditentukan kepada photobioreaktor
Intensitas cahaya (irradiansi) sangat penting dalam kultur dinoflagellate, dalam bioproduksi toksin.
Energi cahaya harus diberikan secara merata di atas photobioreactor; untuk mencegah pembatasan
pertumbuhan, photoxidation dan / atau photoinibition. Studi awal menunjukkan bahwa produksi
biotoksin sel mikroalga dikendalikan oleh cahaya dan tergantung pada siklus sel.
 MARINE AMPHIDINIUM CARTERAE

Cutignano, A., Nuzzo, G., Sardo, A., & Fontana, A. (2017). The Missing piece in biosynthesis of amphidinols: First evidence of glycolate as a
starter unit in New Polyketides from Amphidinium carterae. Marine Drugs, 15(6), 1–12. https://doi.org/10.3390/md15060157
 Kandungan Kimia dan Khasiat

 Dinoflagellate, yang diidentifikasi adalah Amphidinium

carterae.
 Ekstrak metanol dari isolat menunjukkan aktivitas
antijamur terhadap Candida albicans (MIC = 64 μg /
mL)
 Analisis menunjukkan terjadinya oksigenasi senyawa
polyketide dengan amphidinol, keluarga polihidroksi
rantai panjang polyketide termasuk polyene-
amphidinol.
 Genus Amphidinium menunjukkan aktivitas biologis
yang kuat, termasuk sifat antijamur, sitotoksik, dan
hemolitik.
 Secara kimiawi, Amphidinium mengandung inti 2-
tetrahydropyrans yang dihubungkan dengan rantai alkil
c6.
 Proses Isolasi

• Amphidinium carterae diisolasi dari sampel Dyctiotadichotoma yang dikumpulkan dari Danau Fusaro,
dekat Naples, Italia.
• Setelah dipindahkan ke laboratorium, disimpan dalam wadah yang diisi dengan air laut, D. makroalga
dikocok.
• Zooplankton dan hewan yang lebih besar dipindahkan dengan menyaring dengan nilon 30 μm. Sampel
air laut dipindahkan ke cawan Petri.
• Sel dinoflagellate diisolasi dengan pipet kapiler yang ditumbuhkan dalam plat berisi medium K,
dilakukan Identifikasi spesies, amphidinium carterae dikultur dalam medium K pada 22,0 ± 0,5 ◦C, di
bawah cahaya.
• Sel-sel dibudidayakan secara massal dalam empat botol kaca 1,8 L steril, masing-masing berisi 1 L
kultur, kepadatan sel awal adalah sekitar 8000 sel / mL.
• Setiap subkultur dibelah dua, dan dicampur dengan setengah liter media K. Dalam fase stasioner
(kepadatan sel 230.000 sel / mL), delapan liter kultur dipanen dan di sentrifugasi selama 10 menit pada
4 ◦C. Pelet sel disimpan pada –80◦C dan dianalisis analisis.
 Proses Ekstraksi

• Pelet sel A. carterae (berat basah 1,9 g) diekstraksi dengan metanol (3 × 10 mL) dengan
sonikasi dan disentrifugasi untuk menghilangkan kotoran sel.
• Fase metanol disaring melalui kertas dan dipekatkan di bawah vakum.
• Ekstrak kasar (180 mg) difraksinasi dengan menggunakan protokol elusi bertahap berikut:
A (100% H2O, 40 mL) , B (25% MeOH, 40 mL), C (50% MeOH, 40 mL), D (75% MeOH, 40
mL), dan E (100% MeOH, 80 mL). Fraksi D (6,4 mg) selanjutnya dimurnikan pada kolom
HPLC
• Absorbansi UV pada gelombang 210 nm digunakan untuk mendeteksi puncak. Senyawa
murni 1 (1,6 mg). Fraksi C (2,5 mg) dimurnikan oleh HPLC, seperti di atas, menghasilkan
1,0 mg senyawa murni 2. Senyawa murni 1 yaitu Amphidinol A, senyawa murni 2 yaitu 7-
sulfat amphidinol B berupa padatan amorf kuning pucat.
Kultur fotobioreaktor skala pilot dari marine dinoflagellate Karlodinium
veneficum untuk Produksi ekstrak karlotoxins-rich

 Mikroalga dinoflagellat menghasilkan banyak potensi

yang berguna senyawa bioaktif. Karlodinium veneficum
menghasilkan karlotoxins (KTXs), sekelompok racun
dengan aktivitas hemolitik, sitotoksik dan, yang
bernama KTXs racun arepolyketide. Toksisitas KTX
dihasilkan dari kemampuan membentuk pori-pori
dalam membran sel yang menyebabkan hilangnya
keseimbangan osmotik dan kematian sel. KTXs
berpotensi untuk menurunkan kolesterol atau
menargetkan sel kanker yang tinggi kolesterol.
 Salah satu rintangan untuk memproduksi sejumlah
besar bioaktif adalah kurangnya metode yang
ditetapkan untuk menumbuhkan dinoflagellata di
photobioreactors skala industri karena kerentanan
ekstrim mereka terhadap kerusakan oleh turbulensi
dan gaya hidro-dinamis.
TERIMAKASIH