FORMULASI PROTEIN

REKOMBINAN

Prodi Farmasi Matakuliah Bioteknologi Lisa Savitri, S.Si., M.Imun.

Prodi Farmasi Matakuliah Bioteknologi Lisa Savitri, S.Si., M.Imun.
 Protein adalah bahan
Protein terkandung dalam
yang paling penting dari
setiap sel hidup pada
semua bahan yang
setiap sel hidup pada
membentuk organisme
semua organisme
hidup

Protein berada dalam

Semua karakteristik dari
jumlah yang sangat
organisme ditentukan
banyak dengan berbagai
oleh aktivitas protein
bentuk atau jenis
 Biologi
Molekuler

Informasi gen yang tersimpan

Central di dalam DNA dipindahkan ke
Dogma RNA dan kemudian
dipindahkan ke protein

Gen Struktural
 Rekombinan protein adalah suatu bentuk
manipulasi dari protein, yang dihasilkan dengan
berbagai cara untuk menghasilkan sejumlah
protein, memodifikasi urutan gen, dan
memproduksi produk komersial yang
bermanfaat
 Rekombinasi adalah suatu proses di mana suatu
progeny (keturunan) dikembangkan menjadi
kombinasi gen-gen yang berbeda dari gen-gen kedua
orangtuanya, yang menghasilkan satu set DNA baru

Istilah PROTEIN digunakan karena

protein adalah struktur yag
mendukung DNA dan merupakan
blok bangunan materi hidup

Istilah DNA REKOMBINAN digunakan

untuk menggambarkan urutan DNA
baru yang telah dihasilkan dari
rekombinasi gen dari kedua orang
tuanya
 Teknologi DNA rekombinan adalah
dalah satu cara mempelajari fungsi
dan interaksi dari protein

Garis besar teknik DNA rekombinan

Memindahkannya ke
vektor kloning yang Urutan DNA dari vektor
Mengisolasi urutan
memiliki kemampuan kloning berinteraksi
DNA target
untuk mereproduksi dengan DNA target
diri

Menghasilkan blue
DNA rekombinan
Menghasilkan protein print gen baru yang
tesebut ditransfer ke
rekombinan disebut DNA
RNA
rekombinan
 Sebelum membahas tentang
bagaimana protein
rekombinan dibuat, kita perlu
memahami bagaimana semua
protein dibentuk

Prodi Farmasi Matakuliah Bioteknologi Lisa Savitri, S.Si., M.Imun.

 • DNA berada di dalam inti sel

• DNA memegang semua petunjuk yang

diperlukan untuk membentuk suatu
organisme

• Rangkaian helai panjang dari DNA adalah

suaru instruksi untuk terbentuknya berbagai
protein

Prodi Farmasi Matakuliah Bioteknologi Lisa Savitri, S.Si., M.Imun.

Struktur DNA
Untai panjang dari
DNA adalah dasar
DNA pada dasarnya
genetik untuk
terdiri dari jutaan
semua makhluk
unit berulang yang
hidup
disebut nukleotida
Setiap nukleotida
memiliki 3 bagian,
Struktur DNA
yaitu: GULA, GUGUS
adalah dobel heliks
FOSFAT, DAN BASA
NITROGEN

Prodi Farmasi Matakuliah Bioteknologi Lisa Savitri, S.Si., M.Imun.

Struktur Protein
DNA yang dimiliki
menentukan dengan DNA merupakan kode-
tepat bagaimana kode sederhana untuk
organisme akan terlihat protein-protein yang
dan bagaimana setiap berbeda
sifat yang dimiliki

Urutan asam amino

Protein merupakan sangat penting karena
rangkaian rantai panjang urutan tersebut
dari asam amino memberikan bentuk
akhir protein

Inilah sebabnya protein

rekombinan sangat
penting
Kodon start: AUG
Kodon stop: UAA, UAG, UGA
 Pertimbangan Umum Formulasi Protein
DNA Peptida

Prodi Farmasi Matakuliah Bioteknologi Lisa Savitri, S.Si., M.Imun.

1. Pilihan Host untuk
Amplifikasi Protein
Sistem host tersedia dalam beberapa bentuk

Fag

Bakteri

Ragi

Tumbuhan

Jamur berserabut

Serangga

Sel mamalia
2. 1 Vektor untuk Protein
Non-fusion
2. 2 Vektor untuk Protein
Fusion
3. Pilihan Tag Fusi
Dua tag yang paling sering digunakan adalah:
• Glutathione S-transferase (GST tag)
• 6xresidu histidine (His)6 tag
4. Penanganan Badan
Inklusi
• Protein rekombinan yang terakumulasi di intrasel sering diatur dalam bentuk badan
inklusi, agregat terlarut dari protein yang berkurang aktivitas biologisnya

• Adanya badan inklusi dapat membuat langkah awal dari isolasi menjadi sederhana

• Isolasi protein dari badan inklusi sering menyebabkan kesulitan dengan lipatan ulang dari
protein
 Contoh Aplikasi Protein Rekombinan

Prodi Farmasi Matakuliah Bioteknologi Lisa Savitri, S.Si., M.Imun.

 Proses rekombinan protein Rekombinan protein dapat juga
digunakan untuk berbagai tujuan digunakan pada peternakan secara
penelitian secara komersial, medis, komersial untuk melawan penyakit
dan ilmiah pada ternak serta tanaman

Rekombinan protein mempunyai

peran besar dalam penciptaan
bahan terapi yang dapat
memodifikasi dan memperbaiki
kesalahan genetik, menghancurkan
sel-sel kanker, mengobati
gangguan sistem kekebalan tubuh,
dll.
1. Pembuatan Insulin

Protein rekombinan dimulai pertama kali saat insulin

diproduksi oleh Escherichia coli oleh Herbert Boyer di San
Fransisco, Amerika di bawah perusahaan Genentech Inc.
tahun 1978
 Para peneliti membuat insulin
manusia rekombinan dengan
struktur yang identik dengan insulin
manusia menggunakan vektor
bakteri E. coli yang telah dilemahkan
• Secara kimia, insulin adalah protein kecil sederhana yang terdiri
dari 51 asam amino, 30 di antaranya merupakan satu rantai
polipeptida, dan 21 lainnya yang membentuk rantai kedua.
• Kedua rantai dihubungkan oleh ikatan disulfida

Kode genetik insulin ditemukan

dalam DNA di bagian atas
lengan pendek dari kromosom
ke-11 yang berisi 153 basa
nitrogen (63 dalam rantai A
dan 90 dalam rantai B)
2. Pembuatan Hormon
Pertumbuhan

Osphronemus gouramy

Latar belakang:
Pakan buatan untuk memicu
pertumbuhan ikan gurame mulai dari
benih hingga untuk pembesaran
disarankan menggunakan kadar
protein tinggi, yaitu 33,9-43,3%
 ~sekian

Prodi Farmasi Matakuliah Bioteknologi Lisa Savitri, S.Si., M.Imun.