PROPOSAL PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

JUDUL PROGRAM

Produk Olahan Edamame (Glycin max (L.) Merrill) sebagai Agen Estrogenik
untuk Prevensi Aterosklerosis pada Tikus yang Diovariektomi

BIDANG KEGIATAN:
PKM PENELITIAN

Diusulkan oleh:
Nur Ulfiatus Sholichah
Trinita Diyah Permatasari
Nihayah Lukman
Yuli Lusiana Sari
Achmad Noval Rilo Pambudi

NIM 142010101039 Angkatan 2014

NIM 142010101068 Angkatan 2014
NIM 142010101072 Angkatan 2014
NIM 142010101084 Angkatan 2014
NIM 152010101026 Angkatan 2015

UNIVERSITAS JEMBER
JEMBER
2016

PENGESAHAN PROPOSAL PKM-PENELITIAN

1. Judul Kegiatan

2. Bidang Kegiatan
3. Ketua Pelaksana Kegiatan
a. Nama Lengkap
b. NIM
c. Jurusan
d.Universitas/ Institut/Politeknik
e. Alamat Rumah dan No Tel.
/HP
f. Alamat email
4. Anggota Pelaksana Kegiatan
5. Dosen Pendamping
a. Nama Lengkap dan Gelar
b. NIDN
c. Alamat Rumah dan No Tel.
/HP
6. Biaya Kegiatan Total
a. Kemenristek Dikti
b. Sumber lain
7. Jangka Waktu Pelaksanaan

: Produk Olahan Edamame (Glycin max

(L.) Merrill) sebagai Agen Estrogenik
untuk Prevensi Aterosklerosis pada Tikus
yang Diovariektomi
: PKM-P
: Nihayah Lukman
: 142010101072
: Pendidikan Dokter
: Universitas Jember
: Jl. Mastrip No 53B, Kos Amarin, Jember,
Jawa Timur / 08563120810
: nihayahlukman@yahoo.co.id
: 5 orang
: dr. Ika Rahmawati Sutejo, M.Biotech.
: 0019088404
: RT 02 RW 01 Krajan Barat Candijati
Arjasa Jember/081335560333
:
: Rp 12.500.000,00
:
: 3 bulan
Jember, 04 November 2016

Menyetujui
Pembantu Dekan I
Fakultas Kedokteran Universitas Jember

Ketua Pelaksana Kegiatan

(dr. Hairrudin, M.Kes)

NIP 1975101 1200312 1 008
Pembantu Rektor I
Universitas Jember

(Nihayah Lukman)
NIM 142010101072
Dosen Pendamping

(Drs. Zulfikar, Ph.D)

NIP 19631012 198702 1 001

(dr. Ika Rahmawati Sutejo, M.Biotech.)

NIP 19840819 200912 2 003

DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL.......................................................................................
HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................
DAFTAR ISI....................................................................................................
DAFTAR LAMPIRAN...................................................................................
BAB 1. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang...................................................................................
1.2 Rumusan Masalah.............................................................................
1.3 Tujuan.................................................................................................
1.4 Urgensi Penelitian..............................................................................
1.5 Temuan yang Ditargetkan.................................................................
1.6 Luaran yang Diharapkan.................................................................
1.7 Manfaat...............................................................................................
BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Aterosklerosis.....................................................................................
2.2Keterkaitan Estrogen pada Wanita Menopause dengan CVD
(Cardiovascular Disease) dan Bobot Uterus..........................................
2.3 Fitoestrogen........................................................................................
2.4 Edamame (Glycin max (L.) Merrill)................................................
BAB 3. METODE PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian........................................................................
3.2 Sampel Penelitian..............................................................................
3.3 Variabel Penelitian.............................................................................
3.4 Alur Penelitian...................................................................................
3.5 Prosedur Penelitian............................................................................
3.6 Analisis Data.......................................................................................
BAB 4. BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN
4.1 Anggaran Biaya..................................................................................
4.2 Jadwal Kegiatan................................................................................
DAFTAR PUSTAKA......................................................................................

i
ii
iv
vi
1
1
2
2
2
2
2
3
3
3
4
4
4
5
6
6
9
9
10
10

DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Biodata Ketua, Anggota dan Dosen Pembimbing........................
Lampiran 2. Justifikasi Anggaran Kegiatan .....................................................
Lampiran 3. Susunan Organisasi Tim Peneliti dan Pembagian Tugas ............
Lampiran 4. Surat Pernyataan Ketua Peneliti ..................................................

11
24
27
28

Produk Olahan Edamame (Glycin max (L) Merrill) sebagai Agen Estrogenik
untuk Prevensi Aterosklerosis pada Tikus yang Diovariektomi
Abstrak
Penyakit kardiovaskuler merupakan penyebab kematian nomer satu di dunia.
Plak aterosklerosis merupakan etiologi tersering penyakit kardiovaskuler yang
menyebabkan penyakit jantung koroner dan stroke. Salah satu tindakan preventif
untuk masalah kardiovaskular adalah dengan mencegah pembentukan plak
aterosklerosis. Estrogen yang diproduksi selama menarche dapat melindungi vaskuler
dari terbentuknya plak. Saat menopause terjadi penurunan produksi estrogen sehingga
resiko terbentuknya plak semakin tinggi. Oleh karena itu, prevalensi aterosklerosis
meningkat pada wanita postmenopause. Terapi fitoestrogen digunakan untuk
mencegah plak aterosklerosis saat menopause. Fitoestrogen merupakan senyawa
mirip estrogen yang terdapat pada tanaman. Glycin max (L) Merrill yang digunakan
dalam penelitian ini merupakan salah satu tanaman yang memiliki komposisi
fitoestrogen tinggi. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan produk olahan
Glycin max (L) Merrill dapat meningkatkan kadar estrogen darah dan memperbaiki
profil lipid pada tikus yang diovariektomi. Desain penelitian yang digunakan adalah
eksperimental semu secara in vivo dengan rancangan post test only. Sampel penelitian
adalah tikus putih betina galur Sprague dawley. Penelitian ini menggunakan tiga
kelompok kontrol yaitu kontrol, kontrol ovx, dan kontrol ovx+diet aterogenik dan
tiga kelompok perlakuan, dimana kelompok perlakuan diovariektomi dan diberi diet
aterogenik agar terbentuk plak aterosklerosis yang mirip dengan kondisi pada wanita
postmenopause. Lalu, sampel pada kelompok tersebut diberi produk olahan edamame
(Glycin max (L) Merrill). Penelitian ini diharapkan mampu membuktikan kandungan
fitoestrogen dalam produk olahan edamame (Glycin max (L) Merrill) dapat mencegah
aterosklerosis pada wanita postmenopause.

BAB 1. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Penyakit kardiovaskuler merupakan penyebab kematian nomer satu di dunia.
Pada tahun 2012 sekitar 17,5 juta orang meninggal akibat penyakit kardiovaskuler.
82% kematian terjadi pada negara-negara berkembang seperti Indonesia (WHO,
2015). Plak aterosklerosis merupakan etiologi tersering penyakit kardiovaskuler yang
dapat mencentuskan infark miokard dan stroke. Oleh sebab itu, diperlukan perhatian
khusus untuk menyelesaikan masalah kardiovaskuler salah satunya dengan mencegah
terbentuknya plak aterosklerosis.
Pengobatan yang dilakukan saat ini masih bersifat kuratif padahal
patofisiologi pembentukan plak aterosklerosis menunjukan perjalanan progresif.
Proses retensi, oksidasi, dan modifikasi lipid yang terjadi pada aterosklerosis
mengakibatkan inflamasi kronis pada dinding arteri. Lesi aterosklerosis
menyebabkan stenosis yang berpotensi iskemia atau memicu oklusi trombotik arteri
ke jantung, otak, dan organ lainnya (Insull, 2009). Estrogen yang dihasilkan ovarium
merupakan salah satu hormon yang berperan sebagai anti aterosklerosis. Estrogen
mampu menyebabkan vasodilatasi dan mengurangi aktivitas fagosit makrofag pada
modifikasi LDL (Nofer, 2012). Oleh karena itu, prevalensi aterosklerosis meningkat
pada wanita postmenopause yang produksi estrogenya berkurang.
Fitoestrogen adalah substrat dari bahan tumbuhan yang memiliki aktivitas
estrogen (Glover dan Assinder, 2006). Pada tanaman dikenal ada beberapa kelompok
fitoestrogen yaitu; isoflavon, lignan, kumestan, triterpen, glikosida, dan senyawa lain
yang berefek estrogenik, seperti flavones, chalconcs, diterpenoids, triterpenoids,
coumarins dan acyclics (Achdiat, 2003, Anonim, 2007). Adanya kandungan
fitoestrogen yang tinggi pada edamame (Glycin max (L) Merrill) merupakan sebuah
potensi untuk meningkatkan kadar estrogen sehingga dapat mencegah terbentuknya
plak aterosklerosis pada wanita postmenopause.
Edamame (Glycin max (L.) Merrill) merupakan produk unggulan Kabupaten
Jember. Komoditas ini termasuk dalam salah satu jenis kedelai. Edamame (Glycin
max (L) Merrill) memiliki berbagai keunggulan dibandingkan kedelai yang lainnya,
yaitu produktivitas yang tinggi, kandungan protein lebih tinggi dan lebih lengkap,
lebih cepat panen, pasar ekspor masih terbuka luas, dan harga di pasar ekspor yang
tinggi (Firmansyah & Dhuha, 2014). Saat ini terdapat berbagai produk olahan
edamame (Glycin max (L.) Merrill) berupa susu edamame dan rebusan edamame.
Belum ada penelitian yang membuktikan manfaat berbagai olahan edamame (Glycin

max (L.) Merrill). Oleh karena itu, peneliti ingin mengetahui potensi olahan edamame
(Glycin max (L.) Merrill)
1.2 Rumusan Masalah
Rumusan masalah dari penelitian ini ialah sebagai berikut:
1. Apakah produk olahan edamame (Glycin max (L) Merrill) dapat meningkatkan
kadar estrogen darah?
2. Produk olahan edamame (Glycin max (L) Merrill) manakah yang meningkatkan
kadar estrogen darah paling tinggi?
3. Apakah produk olahan edamame (Glycin max (L) Merrill) dapat menambah
bobot uterus tikus dengan diet aterogenik?
4. Produk olahan edamame (Glycin max (L) Merrill) manakah yang menambah
bobot uterus paling banyak?
5. Bagaimana profil lipid pada tikus dengan diet aterogenik antara yang diinduksi
masing-masing produk olahan edamame (Glycin max (L.) Merrill)?
6. Bagaimana gambaran histopatologi aorta tikus dengan diet aterogenik yang
diinduksi masing-masing produk olahan edamame (Glycin max (L.) Merrill)?
1.3 Tujuan
Tujuan dari penelitian ini ialah sebagai berikut:
1. Untuk membuktikan konsumsi produk olahan edamame (Glycin max (L) Merrill)
dapat meningkatkan kadar estrogen darah
2. Untuk membuktikan konsumsi produk olahan edamame yang dapat menambah
bobot uterus tikus dengan diet aterogenik
3. Untuk mengetahui profil lipid pada tikus dengan diet aterogenik yang di induksi
masing-masing produk olahan edamame
4. Untuk mengetahui gambaran histopatologi aorta tikus dengan diet aterogenik
yang di induksi masing-masing produk olahan edamame
5. Untuk mengetahui produk olahan edamame (Glycin max (L.) Merrill) yang lebih
unggul dalam menambah bobot uterus dan meningkatkan kadar estrogen.
1.4 Urgensi Penelitian
Seiring bertambahnya usia, prevalensi penyakit degeneratif seperti
aterosklerosis pada manusia akan bertambah. Pada wanita, hormon estrogen yang
diproduksi saat menarchedapat mencegah timbulnya plak aterosklerosis, hal ini
menyebabkan wanita yang telah mengalami menopause akan lebih rentan terkena
penyakit jantung. Pencegahan terhadap plak aterosklerosis dengan pemberian
fitoestrogen akan meningkatkan angka harapan hidup wanita postmenopause dengan
menjaga kualitas hidup sangat penting untuk dilakukan.
1.5 Temuan yang Ditargetkan

Penelitian ini ditargetkan mendapat temuan baru bahwa produk

olahanedamame (Glycin max (L) Merrill) dapat dimanfaatkan sebagai sumber
fitoestrogen dalam upaya pencegahan aterosklerosis pada tikus yang diovariektomi.
Penemuan ini akan memberi kontribusi besar dalam dunia kesehatan khususnya
dalam pencegahan penyakit degeneratif.
1.6 Luaran yang Diharapkan
Hasil penelitian diharapkan dapat dipublikasikan dalam jurnal nasional dan
media massa, serta dipresentasikan dalam seminar internasional. Selain itu, terdapat
peluang hak paten untuk pengembangan produk penelitian ini.
1.7 Manfaat
Manfaat aplikatif yang didapatkan yaitu berupa terapi preventif baru dalam
pengobatan aterosklerosis khususnya pada wanita postmenopause. Selain itu,
penelitian ini dapat dijadikan sebagai acuan bagi peneliti lainnya dalam hal
pemanfaatan tanaman edamame (Glycin max (L) Merrill) yang belum banyak
diketahui aktivitas antiaterogeniknya.
BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Aterosklerosis
Aterosklerosis bermula ketika makrofag berpindah dari aliran darah ke dalam
dinding arteri dan diubah menjadi foam cell. Foam cell menarik bahan-bahan lemak
sehingga menyebabkan penebalan di tunika intima arteri. Penebalan tersebut disebut
sebagai plak aterosklerotik atau ateroma. Ateroma dapat tersebar di dalam arteri
sedang dan arteri besar namun biasanya terbentuk di daerah percabangan karena
adanya turbulensi aliran darah pada daerah tersebut. Pertumbuhan plak aterosklerosis
bersifat perlahan, progresif dan akan terus tumbuh sehingga dapat mempersempit
lumen pembuluh darah, ruptur dan menyebabkan trombus atau emboli. Hal ini akan
menyebabkan timbulnya berbagai penyakit kardiovaskuler seperti penyakit jantung
koroner dan stroke (Zhang et al., 2012).
2.2 Keterkaitan Estrogen pada Wanita Menopause dengan CVD (Cardiovascular
Disease) dan Bobot Uterus
Estrogen merupakan hormon yang menyebabkan terjadinya peningkatan
proses pembentukan protein di uterus sehingga mengakibatkan kenaikan bobot uterus
secara bermakna (Sari et al., 2004). Estrogen dikenal memiliki sifat cardioprotection
karena terbukti meningkatkan ekspresi superoksida dismutase dan menghambat
aktivitas oksidase NADPH, sehingga mengurangi stres oksidatif sebagai penanda
inflamasi. Estrogen mempromosikan mobilisasi sel progenitor endotel
dan
meningkatkan batang mesenchymal diperantarai sel faktor pertumbuhan endotel

vaskular (VEGF) rilis sehingga meningkatkan perbaikan endotel dan miokard

fungsional setelah iskemia. Selain itu, estrogen memiliki antiapoptotic dan prosurvival efek mendalam pada kardiomiosit melalui aktivasi Akt dan penghambatan
caspase-3, GSK-3 p38-dimediasi p53 fosforilasi, dan JNK1/2-dimediasi NF-kB
aktivasi. Beberapa mekanisme tersebut menjadikan estrogen sebagai salah satu
prevensi terhadap penyakit Cardio Vascular Disease (CVD) (Yang et al., 2011).
2.3. Fitoestrogen
Fitoestrogen adalah senyawa mirip estrogen yang terdapat dalam beberapa
jenis makanan nabati seperti kedelai, kacang-kacangan, dan kecambah.Fitoestrogen
mampu mengikat reseptor estrogen. Dua kelompok utama fitoestrogen adalah
isoflavonedan lignan. Reseptor estrogen telah banyak ditemukan pada beberapa
areaotak yang penting untuk fungsi kognitif, terdapat dugaan bahwa fitoestrogen
efektif dalam mengurangi penurunan fungsi kognitif setelah menopause (La Rue et
al., 1992).
2.4 Edamame (Glycin max (L) Merrill)
Edamame adalah anggota dari genus Glycin pada famili Leguminoceae. Pada
tanaman kedelai mengandung senyawa isoflavon yang cukup tinggi. Bagian tanaman
kedelai yang mengandung senyawa isoflavon yang lebih tinggi terdapat pada biji
kedelai, khususnya pada bagian hipokotil (germ) yang akan tumbuh menjadi
tanaman. Sebagian lagi terdapat pada kotiledon yang akan menjadi daun pertama dari
tanaman (Anderson, 1997). Kandungan isoflavon pada kedelai berkisar 2-4 mg/g
kedelai. Kandungan zat aktif yang diteliti pada penelitian ini adalah kandungan
Fitoestrogen dari biji kedelai. Fitoestrogen adalah substrat dari bahan tumbuhan yang
memiliki aktivitas estrogen (Glover dan Assinder, 2006). Pada tanaman dikenal ada
beberapa kelompok fitoestrogen yaitu; isoflavon, lignan, kumestan, triterpen,
glikosida, dan senyawa lain yang berefek estrogenik, seperti flavones, chalconcs,
diterpenoids, triterpenoids, coumarins dan acyclics (Achdiat, 2003, Anonim, 2007).
BAB 3. METODE PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan desain penelitian eksperimental semu (quasi
experimental design) secara in vivo dengan rancangan post test only randomized
control group design yang akan dilaksanakan di Laboratorium Farmakologi Fakultas
Kedokteran Universitas Jember, Laboratorium Biologi Molekular Fakultas
Kedokteran Universitas Jember, dan Laboratorium Fitokimia Fakultas Farmasi
Universitas Jember.
3.2 Sampel Penelitian

Kontrol

Sampel penelitian adalah tikus putih betina galur Spraguedawley ditempatkan

dalam kandang plastik dengan alas sekam dan diberi makan pellet serta diberi minum
secara ad libitum. Kriteria inklusi meliputi tikus putih betina galur Spraguedawley,
yang berumur 40 hari dengan berat badan 85-120 gram, sehat, bergerak aktif dan
normal. Kriteria eksklusi ialah tikus putih betina galur Spraguedawley yang selama
penelitian tidak mau makan dan mati. Perijinan ethical clearance terhadap prosedur
penelitian diajukan ke komisi etik penelitian kesehatan Fakultas Kedokteran
Universitas Jember.
Jumlah perlakuan pada penelitian ini ialah sebanyaktiga kelompok kontrol
danlima kelompok perlakuan berdasarkan dosis pemberian produk olahan edamame.
Pengulangan dilakukan pada tiap kelompok untuk mencegah adanya
bias.Penghitungan besarnya pengulangan menggunakan rumus sebagai berikut.
(n-1) (p-1) 15 (p = jumlah perlakuan, n= jumlah ulangan, p=5), sehingga:
(n-1) (8-1) 15
n-1 2,143
n 3,143 sehingga berarti minimal 3 pengulangan. Namun, penulis melakukan
penambahan sebesar 25% dari jumlah sampel sebagai langkah antisipasi kematian
Tikus Putih (Rattus novergicus strain Sprague Dawley)
tikusputih betina galur Spraguedawley. Berdasarkan hal tersebut, tikus putih betina
galur Spraguedawley yang digunakan sebanyak 30 ekor.
3.3 Variabel Penelitian
Variabel bebas
1 Dosis produk olahan edamame (Glycin max (L) Merrill)
A
Variabel terikat
1 Profil lipidtikus putih betina galur Spraguedawley
Ovariektomi
(hariaorta
ke-0)tikus putih betina galur Sprague
2 Jumlah foam cell pada
histopatologi
dawley
Produk
serbuk
rebus
Produk
edamame
kombinasi
1000mg/kgBB
serbuk
susu dan rebus
edamame masing-masing 500mg/kgBB
Produk serbuk
rebusbetina
edamame
Produk
serbuk
500mg/kgBB
Produk
susu
serbuk
edamame
susu 500mg/kgBB
edamame
1000mg/kgBB
3 Bobot uterustikus
putih
galur
Spraguedawley
4 Kadar glutathion peroksidase (GPx) darahpada tikus putih betina galur
Sprague dawley

3.4 Alur Penelitian

Pemberian diet aterogenik mulai hari ke-16
Pembedahan hewan coba hari ke-30

Pengukuran profil lipid, berat uterus, histopatologi foam cell pada aorta dan kadar GPx serum

3.5 Prosedur Penelitian

3.5.1 Adaptasi dan Perawatan Hewan Coba
Hewan coba diadaptasikan dalam kandang selama satu minggu untuk
menghindari stres. Alas kandang, tempat pakan dan minum, sisa pakan dan
kotorantikus setiap hari dibersihkan untuk menghindari timbulnya penyakit.
Alat
: kandang, tempat pakan dan minum
Bahan
: lantai/alas kandang, dan handscoon
3.5.2 Pembuatan Hewan Coba Ovariektomi
Seminggu pasca adaptasi pakan, dilakukan tindakan ovariektomi.Ovariektomi
adalah proses pemotongan ovarium sehingga tikus dalam keadaan defisiensi estrogen.
Tikus usia 50 hari dianestesi dengan ketamin secara intra muscular. Rambut tikus
dicukur di area bedah seluas 4 cm2. Insisi pada area bedah (agak menjorok ke dalam

tubuh jika dipegang atau 2 cm mengikuti tulang belakang dengan jarak 1,5 cm dari
tulang belakang). Ovarium dicari kemudian dipotong dan disisihkan. Kulit dalam
dijahit sebanyak 1 simpul dan kulit luar sebanyak 2 simpul. Untuk pemulihan luka
pada tikus berlangsung selama 10 hari.
Alat
: spuit, gunting, pisau bedah, jarum, benang plain, papan
parafin, kapas, handscoon, masker
Bahan
: ketamin, alkohol 70%, betadin
3.5.3 Pembuatan serbuk edamame rebus
Edamame ditimbang sebanyak 2 kg, selanjutnya direbus dalam akuades
mendidih selama 5 menit hingga matang. Edamame kemudian disaring dengan
saringan kawat. Edamame digiling hingga halus, dan dikeringkan dengan freeze
dryer. Serbuk edamame rebus kemudian digerus hingga menjadi serbuk yang
homogen
Alat
: panci, saringan kawat, freeze dryer (Zirbuss)
Bahan
: edamame, akuades
3.5.4 Pembuatan serbuk susu edamame
Edamame ditimbang sejumlah 2 kg, selanjutnya diblender dengan akuades
hingga homogen. Akuades yang dibutuhkan sekitar 3 kali berat edamame. Supernatan
disaring dengan corong buchner, ampas selanjutnya diblender kembali dengan cara
yang sama. Proses tersebut diulang sebanyak tiga kali. Filtrat ditampung dan direbus
hingga mendidih, kemudian didinginkan. Susu edamame (Glycin max (L) Merrill)
yang sudah diperoleh selanjutnya dikeringkan dengan menggunakan freeze dryer
hingga kering. Serbuk susu edamame (Glycin max (L) Merrill) kemudian digerus
hingga menjadi serbuk yang homogen.
Alat
: blender, corong buchner, freeze dryer (Zirbuss)
Bahan
: edamame, akuades, kertas saring
3.5.5 Penginduksian produk olahan edamame Pada Tikus
Pemberian produk olahan edamame secara per oral selama 30 hari. Langkah
pertama dimulai dengan penyedotan menggunakan sonde yang ujungnya terbuat dari
karet. Untuk mengencerkan diberi pelarut CMC Na 0,5%. Lalu tikus dipegang pada
kepala sehingga mulut mengahadap ke atas. Selanjutnya sonde dimasukkan melalui
mulut secara perlahan sampai ke lambung. Pemberian susu edamame (Glycin max (L)
Merrill) dilakukan satu kali sehari.
Alat
: sonde
Bahan
: Produk olahan edamame, pelarut CMC Na 0,5%
3.5.6 Pengukuran Profil Lipid
Pengukuran kadar trigliserida memakai metode GPO-PAP. Trigliserida diukur
dengan pembentukan indikator quinoneimin. Untuk mengukur kadar kolesterol, LDL,

HDL, digunakan metode uji kalorimetrik enzimatik CHOD-PAP. Kadar kolesterol

diukur dengan pembentukan indikator quinoneimin.
Alat
: spektrofotometri, reagen CHOD-PAP dan GPO-PAP
Bahan
: darah hewan coba
3.5.7 Penginduksian Aterosklerosis Hewan Coba
Pemberian diet aterogenik dilakukan selama 14 hari. Diet aterogenik yang
diberikan merupakan kuning telur yang disondekan sekali sehari sebanyak 0,2cc pada
setiap kelompok tikuskecuali kelompok kontrol dan kontrol ovx. Pemberian diet
aterogenik ini bertujuan untuk membuat tikus yang diinduksi memiliki plak
aterosklerosis pada aorta akibat adanya kerusakan endotel.Sebelum diberikan diet
aterogenik tikus tersebut terlebih dahulu diinjeksi adrenalin intra vena sebanyak
0,00084mg/20g BB pada vena lateralis ekor tikus di hari pertama perlakuan.
Alat
: sonde dan spuit
Bahan
: diet aterogenik (kuning telur 0,2cc/hari), adrenalin
3.5.8 Pengukuran Bobot Uterus
Pertumbuhan dan perkembangan uterus digambarkan melalui bobot uterus.
Sehingga, mula-mula tikus dibedah untuk diambil uterusnya. Segera setelah
pembedahan, uterus diletakkan diatas kertas saring untuk dibersihkan dari darah dan
cairan tubuh. Selanjutnya, uterus ditimbang untuk mendapatkan data berat basah
uterus (Wet Weight Uterin). Untuk mendapatkan bobot kering, diambil contoh seberat
50 g lalu dikeringkan dalam oven pada suhu 54 0C selama 48 jam. Contoh kering
selanjutnya ditimbang untuk mendapatkan bobot kering uterus.
Alat
: pisau bedah, kertas saring, neraca analitik
Bahan
: uterus hewan coba
Indikator capaian
:didapatkan bobot uterus hewan coba yang terukur secara
kuantitatif
3.5.9 Pembuatan Preparat Histopatologis
Arkus aorta tikus diambil untuk pemeriksaan histopatologi terbentuknya foam
cell. Jaringan diwarnai menggunakan Oil Red-O (OR-O) dan Hematoxylen Eosin
(HE).
Alat : slide preparat
Bahan : Oil Red-Osolution, HE solution
Indikator capaian : jumlah foam cell pada preparat histopatologi arkus aorta tikus
putih (Rattus novergicus strain Wistar) dapat dihitung
3.5.10 Pengukuran Kadar GlutathionPeroksidase Darah dengan ELISA
Untuk sampel serum, darah dikumpulkan dalam wadah aditif bebas dan
dibiarkan mengental untuk setidaknya 1 jam. Setelah sentrifugasi pada 3000 rpm
selama 10 menit, serum dikumpulkan dan disimpan pada -80 C sampai analisis

lebih lanjut. GPx Sandwich ELISA kit digunakan untuk mengukur Glutathion
Peroksidase (GPx) serum sesuai dengan petunjuk yang diberikan oleh produsen.
Secara singkat, 100 uL standar GPx (7,82-500 pg / ml manusia rekombinan GPx)
yang diterapkan, diduplikat pada GPX 96 well plates. Sampel diencerkan (1: 220) dan
100 uL ditambahkan ke plate di duplikat.Plate ditutupi dan diinkubasisemalam pada
suhu 4 C. Kemudian, plate dicuci dengan larutan buffer (untuk 4x2 menit),
diinkubasi dengan yang lain. Antiserum utama terbiotinilasi selama 3 jam, dicuci
untuk 4x2 menit dan kemudian diinkubasi dengan streptavidin-HRP kompleks untuk
1 jam. Akhirnya, reaksi dikembangkan dalam larutan TMB (3,3', 5,5'tetramethylebenzidine) dan hydrogenperoxide dalam gelap selama 15 menit. Reaksi
itu berhenti dengan 1 M HCl dan absorbansi langsung diukur pada ELISA-reader
menggunakan 450 nm filter. Sampel dan standar dijalankan dan konsentrasi GPx
dihitung dengan menggunakan kurva standar dan konten itu dinyatakan sebagai setara
dengan protein GPx manusia rekombinan dalam standar.
3.6 Analisis Data
Data yang dianalisis berupa kadar kolesterol, berat uterus tikus, dan jumlah
foam cell pada sediaan histolopatologi aorta. Analisis yang dilakukan adalah uji
regresi karena tujuan penelitian adalah melihat pengaruh pemberian produk olahan
edamame (Glycin max (L) Merrill)
terhadap ketiga data yang telah
disebutkan.Langkah pertama uji regresi adalah melakukan uji normalitas dengan uji
Komolgorov-Smirnov atau uji Saphiro-Wilk.Langkah kedua adalah membandingkan
data tiap perlakuan yang dianalisis dengan metode one way anova.

1
No
2.
3.
4.
5.

BAB 4. BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN

Anggaran Biaya

Jenis Pengeluaran
Jumlah
Peralatan Penunjang
1.510.000,00
Bahan habis pakai
3.125.000,00
Perjalanan
3.125.000,00
Lain lain
1.870.000,00
Total
10.120.000,00
K Fe
Penanggung jawab
M A
eg br
M
ar pr
iat ua
ei
et il
an ri
Mingguke- Mingguke- Mingguke- Mingguke1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

10

1.Persiapan
Perijinan dan
persiapan
penelitian
Adaptasi hewan
coba
Produk Olahan
Edamame
2.Perlakuan
HewanCoba
Ovariektomi
Induksi produk
olahan edamme
Induksi diet
aterogenik
3.Pengumpula
n Data dan
Hasil
Pengukuran
profil lipid
Pengukuran
berat uterus
Pembuatan
oalahan
edamame
Elisa
Pembuatan
preparat
histopatologis
Analisis data
4.Publikasi
dan Hak Paten

Nihayah

Trinita
Nur
Ulfiatus

Lusi
Noval
Nihayah

Trinita
Nur
Ulfiatus
Noval

Lusi
Nihayah

Trinita
Nur
Ulfiatus

DAFTAR PUSTAKA
Insull, W. 2009. The Pethology of Atherosclerosis: Plaquwe Development and Plaque
Responses to Medical Treatment.Am J Med 122, S3-214
Patti, G. dan Nusca, A. 2011. Review Article: Antitrombotic theraphy in patient with
acute coronary syndrome: a blance between protection from ischemic events

11

and risk of bleeding. Am J Cardiovas Dis 1(3):255-253

Yang, X-P., Reckelhoff ,J. F., (2011). Estrogen, Hormonal Replacement Therapy and
Cardiovascular Disease.Curr Opin Nephrol Hypertens. 20(2): 133138.
LAMPIRAN
Lampiran 1. Biodata Ketua, Anggota dan Dosen Pembimbing
1. Biodata Ketua
A Identitas Diri
1
Nama Lengkap (dengan gelar)
Nihayah Lukman
2
Jenis Kelamin
Perempuan
3
Program Studi
Pendidikan Dokter
4
NIM
142010101072
5
Tempat dan Tanggal Lahir
Probolinggo, 16 Juni 1996
6
E-mail
nihayahlukman7172@gmail.com
7
Nomor Telpon/HP
08563120810
B Riwayat Pendidikan
MI
Nama Instiitusi
Nurul Munim

Jurusan
Tahun
Lulus

Masuk- 2003-2009

SMP
SMPN3
Peterongan
Jombang
2009 2012

C Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

No Nama Pertemuan
Judul Artikel Ilmiah
.
Ilmiah/Seminar

SMA
SMA Darul Ulum
1 BPPT Jombang
IPA
2012 2014

Waktu dan
Tempat

D Penghargaan dalam 10 tahun terakhir (dari pemerintah, asosiasi atau institusi

lainnya)
No Jenis Penghargaan
Institusi Pemberi Penghargaan Tahun
.
1
2
3
4
5

12

Semua data yang saya isikan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan
dapat dipertanggungjawabkan secara hukum.Apabila di kemudian hari ternyata
dijumpai ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan hibah PKM-P yang berjudul Produk Olahan Edamame
(Glycin max (L) Merrill) sebagai Agen Estrogenik untuk Prevensi Aterosklerosis pada
Tikus yang Diovariektomi
Jember, 04 November 2016
Pengusul,

(Nihayah Lukman)

13

2. Biodata Anggota 1
A Identitas Diri
1 Nama Lengkap (dengan gelar)
2 Jenis Kelamin
3 Program Studi
4 NIM
5 Tempat dan Tanggal Lahir
6 E-mail
7 Nomor Telepon/HP
A Riwayat Pendidikan
SD
Nama Institusi SDN Bangsongan 3
Jurusan
Tahun Masuk- 2002-2008
Lulus

Yuli Lusiana Sari

Perempuan
Pendidikan Dokter
142010101084
Kediri, 9 Juli 1996
Yulilusianasari@gmail.com
085746732142

SMP
SMPN 1 Kediri
2008-2011

SMA
SMAN 2 Kediri
IPA
2011-2014

B Penghargaan dalam 10 Tahun Terakhir dari pemerintah, asosiasi atau

institusi lainnya)
No
.
1.
2.

Jenis Penghargaan

3.

Lomba Esai Ilmiah Nasional Finalis

Majestynas

2016

4.

Lomba KTI-GT

Juara 1

2016

5.

Lomba Penelitian Multi Center Juara 2

Temilnas

2016

Finalis LKTI Poltek Kediri

PKM-M DIKTI

Institusi Pemberi Tahun

Penghargaan
Poltek Kediri
2012
Dana Hibah LPM 2015
UNEJ

Semua data yang saya isikan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan
dapat dipertanggungjawabkan secara hukum.Apabila di kemudian hari ternyata
dijumpai ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan hibah PKM-P yang berjudul Produk Olahan Edamame

14

(Glycin max (L) Merrill) sebagai Agen Estrogenik untuk Prevensi Aterosklerosis pada
Tikus yang Diovariektomi

Jember, 04 November 2016

Pengusul,

(Yuli Lusiana Sari)

15

3. Biodata Anggota 2
A. IdentitasDiri
1
Nama Lengkap (dengan gelar)
2
Jenis Kelamin
3
Program Studi
4
NIM
5
Tempat dan Tanggal Lahir
6
E-mail
7
Nomor Telpon/HP

Nur Ulfiatus Sholichah

Perempuan
Pendidikan Dokter
142010101039
Sidoarjo, 18 Maret 1996
nurulfiatussh@gmail.com
085645102428

B. Riwayat Pendidikan
SD
Nama Institusi
Jurusan

SD Al-Ishlah
Rejeni

Tahun Masuk- 2002 - 2008

Lulus

SMP

SMA

SMPN 3 Sidoarjo

SMAN 1 Sidoarjo

2008 2011

2011 2014

C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

N
Nama Pertemuan
Judul Artikel Ilmiah
o
Ilmiah/ Seminar
1

Waktu dan
Tempat

D. Penghargaan dalam 10 tahunTerakhir ( dari pemerintah, asosiasi atau institusi

lainnya)
No Jenis Penghargaan
Institusi
Pemberi Tahun
Penghargaan
1
2
3
4
Semua data yang saya isikan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum.Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai
ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi. Demikian biodata
ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam
pengajuan hibah PKM-P yang berjudul: Produk Olahan Edamame (Glycin max (L)

16

Merrill)sebagai Agen Estrogenik untuk Prevensi Aterosklerosis pada Tikus yang

Diovariektomi
Jember, 04 November 2016
Pengusul,

(Nur Ulfiatus Sholichah)

17

4. Biodata Anggota 3
A. IdentitasDiri
1
Nama Lengkap (dengan
gelar)
2
Jenis Kelamin
3
Program Studi
4
NIM
5
Tempat dan Tanggal Lahir
6
E-mail
7
Nomor Telpon/HP

Trinita Diyah Permatasari

Perempuan
Pendidikan Dokter
142010101068
Kediri, 23 April 1995
Trinitadpermatasari8@gmail.com
081231114965

B. Riwayat Pendidikan
SD
Nama Institusi

MI
Muhammadiyah
1 Pare

Jurusan
Tahun Masuk- 2002-2008
Lulus

SMP
MTs Negeri 1 Pare

SMA
SMAN 2 Pare

2008-2011

IPA
2011-2014

C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

N
Nama Pertemuan
Judul Artikel Ilmiah
o
Ilmiah/ Seminar
1
-

Waktu dan
Tempat
-

D. Penghargaan dalam 10 tahunTerakhir ( dari pemerintah, asosiasi atau institusi

lainnya)
No Jenis Penghargaan
Institusi
Pemberi Tahun
Penghargaan
1
Semua data yang saya isikan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum.Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai
ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi. Demikian biodata
ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam
pengajuan hibah PKM-P yang berjudul EL-MEN: Produk Olahan Edamame (Glycin
max (L) Merrill) sebagai Agen Estrogenik untuk Prevensi Aterosklerosis pada Tikus
yang Diovariektomi

18

Jember, 04 November 2016

Pengusul,

(Trinita Diyah Permatasari)

19

5. Biodata Anggota 4
A. IdentitasDiri
1
Nama Lengkap (dengan
gelar)
2
Jenis Kelamin
3
Program Studi
4
NIM
5
Tempat dan Tanggal Lahir
6
E-mail
7
Nomor Telpon/HP

Achmad Noval Rilo Pambudi

Laki-laki
Pendidikan dokter
152010101037
Pasuruan, 30 Desember 1996
achmadnovalrilopambudi@yahoo.com
085336360316

B. Riwayat Pendidikan
SD
SMP
SMA
Nama Institusi SDN Petahunan II SMP IT AL Uswah MAN Pasuruan
Bangil
Jurusan
IPA
Tahun Masuk- 2003-2009
2009-2012
2012-2015
Lulus
C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)
N
Nama Pertemuan
Judul Artikel Ilmiah
o
Ilmiah/ Seminar
1

Waktu dan
Tempat

D. Penghargaan dalam 10 tahunTerakhir (dari pemerintah, asosiasi atau institusi

lainnya)
N Jenis Penghargaan
Institusi
Pemberi Tahun
o
Penghargaan
1
Harapan II Lomba KSM Departemen Agama
2014
Kimia
2
Juara III PIK
BKKBN Pasuruan
2014
3
Semua data yang saya isikan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan
dapat dipertanggungjawabkan secara hukum.Apabila di kemudian hari ternyata
dijumpai ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan hibah PKM-P yang berjudul: Produk Olahan Edamame

20

(Glycin max (L.) Merrill) sebagai Agen Estrogenik untuk Prevensi Aterosklerosis
pada Tikus yang Diovariektomi
Jember, 04 November 2016
Pengusul,

(Achmad Noval Rilo Pambudi)

21

6. Biodata Dosen Pembimbing

A. IdentitasDiri
1
NamaLengkap (dengangelar)
2
JenisKelamin
3
Program Studi
4
NIDN
5
TempatdanTanggalLahir
6
E-mail
7
NomorTelepon/HP
8
Alamat Rumah

dr. Ika Rahmawati Sutejo, M.Biotech.

Perempuan
Pendidikan dokter Universitas Jember
0019088404
Surabaya, 19 Agustus 1984
ikarahmawati.fk@unej.ac.id
081335560333
RT 02 RW 01 Krajan Barat Candijati Arjasa
Jember

B. RiwayatPendidikan
NamaInstitusi

Jurusan
TahunMasuk Lulus

SI
Fakultas
Kedokteran
Universitas Jember
Pendidikan Dokter
2002-2006

S2
Sekolah
Pascasarjana
Universitas
Gadjahmada
Bioteknologi
2013-2015

C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

No
Nama Pertemuan Ilmiah
Judul Artikel Ilmiah
1.

2.

3.

National Symposium and

Workshop on Antiaging
Medicine, Universitas
Udayana
Konferensi
Nasional
Inovasi dan Teknologi
(KNIT), RAMP-IPB

The 1st International

Conference
on
Pharmaceutics
and
Pharmaceutical Sciences,

S3

Peranan Vitamin C Topikal

dalam Mencegah dan
Mempercepat Pemulihan
Hiperpigmentasi Solar.
Integrasi Technopreneurship,
Pengobatan Berbasis Bukti,
& Kaidah Moral dalam
Modul Kedokteran Estetik
pada Kurikulum Pendidikan
Dokter.
Synergistic Combination Of
Curcuma xanthorrhiza, Ficus
Septica and Doxorubicin on
MCF-7/HER2

Waktu dan
Tempat
Denpasar, 1617 Maret 2012

Bogor, 18-19
Februari 2013

Surabaya, 1415 November

2014

22

4.

Universitas Airlangga
The 1st University of
Muhammadiyah
Purwokerto-Pharmacy
International Conference

Cinnamon Essential Oil

Showed Cytotoxic Activity
but not Inhibit 4T1 Cell
Migration

Purwokerto, 56 Juni 2015

D. Penghargaandalam 10 tahunTerakhir (daripemerintah, asosiasi,

atauinstitusilainnya)
No
Jenis Penghargaan
Institusi Pemberi Penghargaan
Tahun
1.
Lulusan Sarjana
Universitas Jember
2006
dengan predikat
Cumlaude
2.
Sixth winner
Universitas Udayana
2012
Indonesian award
for antiaging
medicine,
Naaswam
3.
Lulusan
Universitas Gadjah Mada
2015
Pascasarjana
dengan predikat
Cumlaude
4.
Lulusan terbaik
Universitas Gadjah Mada
2015
(IPK 4,00) Sekolah
Pascasarjana UGM
Semua data yang saya isikan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum.Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai
ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi. Demikian biodata
ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam
pengajuan hibah PKM-P yang berjudul: Produk Olahan Edamame (Glycin max (L)
Merrill) sebagai Agen Estrogenik untuk Prevensi Aterosklerosis pada Tikus yang
Diovariektomi

Jember, 04 November 2016

Pembimbing,

23

(dr. Ika Rahmawati Sutejo, M. Biotech.)

24

Lampiran 2. Justifikasi Anggaran Kegiatan

1. Peralatan penunjang
Justifikasi
Material
Pemakaian
General
Handscoon
precaution
General
Masker
precaution
Pengambilan
Spuit
sampel darah
Operasi
Jarum bedah
ovariektomi
Induksi produk
Sonde
olahan
edamame
Operasi
Gunting bedah
ovariektomi
General
Kapas
precaution
General
Kasa
precaution
Operasi
Scalple
ovariektomi
Operasi
Blade
ovariektomi
Kolesterol kit Pengukuran
kolesterol
Estrogen Elisa Pengukuran
kit
kadar estrogen
Media Massa Publikasi

2. Bahan Habis Pakai

Justifikasi
Material
Pemakaian
Tikus putih
Sampel
Sprague
penelitian
dawley

Kuantitas

Harga
Satuan (Rp)

Total (Rp)

3 kotak

60.000,00

180.000,00

4 kotak

30.000.00

120.000,00

1 box

75.000,00

75.000,00

3 set

75.000,00

225.000,00

12.000,00

60.000,00

50.000,00

100.000,00

1 pak

8.000,00

8.000,00

1 pak

12.000,00

12.000,00

1 buah

50.000

50.000

1 box

80.000

80.000

1 buah

800.000,00

800.000,00

1 paket

3.500.000

2.000.000

470.000
SUB TOTAL

470.000
5.210.000

1 kali

Kuantitas
30 ekor

Harga
Satuan
25.000,00

Keterangan
750.000,00

25

Sekam dan
Pakan sampel
minum
Formula diet Bahan
aterogenik
perlakuan
Pelarut proses
Etanol 70%
maserasi
tanaman

30 buah

30.000,00

900.000,00

20 ekor x
15 hari

2.000,00

600.000,00

1 liter

75.000,00

75.000,00

SUB TOTAL

2.325.000

3. Perjalanan
Material
Perjalanan
Perjalanan ke
toko hewan
coba
Perjalanan ke
laboratorium
Pemesanan

Justifikasi
Pemakaian
Pembelian
alat penelitian
Pembelian
hewan coba

Pemesanan
produk olahan
edamame

Kuantitas

Harga
Satuan (Rp)

Total (Rp)

100.000,00

500.000,00

120.000,00

600.000,00

105.000,00

525.000,00

5 kg

300.000,00

1.500.000,00

SUB TOTAL

4.125.000

4. Lain-lain
Material
Sewa kandang
Administrasi,
print, fotocopy
Foto

Sewa
Laboratorium
Pembuatan
sediaan
histopatologi

Justifikasi
Pemakaian
Kandang tikus
Proposal, surat
keterangan,
dan laporan
Laporan 20
kegiatan
Pelaksanaan
penelitian
Data penelitian

Kuantitas
30 buah
1

Harga Satuan
(Rp)
14.000.00

Total (Rp)
420.000,00

50.000,00

50.000,00

2.500,00

50.000,00

100.000,00

300.000,00

30

35.000,00

1.050.000,00

26

SUB TOTAL

1.870.000,00

Lampiran 3. Susunan Organisasi Tim Peneliti dan Pembagian Tugas

No Nama/NIM
Program
Bidang
Alokasi Uraian Tugas
Studi
Ilmu
Waktu
(jam/mi
nggu)
1
Nihayah
Pendidikan Kedokteran 7 jam/ 1. Ketua
Lukman/14201 Dokter
minggu 2. Ovariektomi
3. Penarikan
0101072
kesimpulan
4. Pelaksana
kegiatan
2
Trinita Diyah Pendidikan Kedokteran 7 jam/ 1. Sekertaris
Permatasari/14 Dokter
minggu 2. Pembuatan
olahan edamame
2010101068
3. Penyusunan
laporan kegiatan
4. Induksi olahan
edamame
5. Analisis data
3
Nur Ulfiatus Pendidikan Kedokteran 7 jam/ 1. Bendahara
Sholihah/1420 Dokter
minggu 2. Pengukuran
profil lipid
10101039
3. Pelaksana
kegiatan
4. Pengukuran
bobot uterus
4
Yuli Lusiana Pendidikan Kedokteran 7 jam/ 1. Humas
Sari/14201010 Dokter
minggu 2. Pembuatan
preparat histoPA
1084
3. Publikasi
4. Pelaksana
kegiatan
5
Noval
Pendidikan Kedokteran 7 jam/ 1. Koordinator
Pambudi/1520 Dokter
minggu
pelaksana
10101026
lapangan
2. Adaptasi Hewan

27

coba
3. Pengumpulan
data
4. Persiapan alat
dan bahan
5. Pelaksana
kegiatan

KEMENTERIAN RISET, TEKNOLOGI, DAN PENDIDIKAN TINGGI

UNIVERSITAS JEMBER
Jalan Kalimantan 37 Kampus Tegal Boto Kotak Pos 159
Telp. (0331)-330224, 336579, 336580, 333147, 334267, 339029 Fax.(0331)-339029
Jember (68121)
Lampiran 4
SURAT PERNYATAAN KETUA PENELITI/PELAKSANA
Yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama
: Nihayah Lukman
NIM
: 142010101072
Program Studi
: Pendidikan Dokter
Fakultas
: Kedokteran
Dengan ini menyatakan bahwa usulan PKM-P saya dengan judul:
Produk olahan(Glycin max (L) Merrill) sebagai Agen Estrogenik untuk Prevensi
Aterosklerosis pada Tikus yang Diovariektomi
yang diusulkan untuk tahun anggaran didanai 2016 bersifat original dan belum pernah dibiayai
oleh lembaga atau sumber dana lain.
Bilamana di kemudian hari ditemukan ketidaksesuaian dengan pernyataan ini, maka saya
bersedia dituntut dan diproses sesuai dengan ketentuan yang berlaku dan mengembalikan seluruh
biaya penelitian yang sudah diterima ke kas negara.
Demikian pernyataan ini dibuat dengan sesungguhnya dan dengan sebenar-benarnya.

Mengetahui
Pembantu Rektor I
Universitas Jember

(Drs. Zulfikar, Ph.D)

NIP 19631012 198702 1 001

Jember, 04 November 2016

Yang menyatakan,

(Nihayah Lukman)
NIM 142010101072