A.

Judul
DENATURASI PROTEIN OLEH REAKSI PENGENDAPAN DENGAN LOGAM
BERAT
B. Dasar Teori
Pada pH di atas titik isoelektrik protein bermuatan negative, sedangkan di bawah titik
isoelektrik protein bermuatan positif. Olehkarena itu untuk mengendapkan protein
dengan ion logam diperlukan pH larutan di atas titik isoelektrik, sedangkan untuk
pengendapan protein dengan ion negative memerlukan pH larutan di bawah titik
isoelektrik. Ion- ion positif yang dapat mengendapkan protein adalah Ag+, Ca2+, Zn2+,
Hg2+,Pb2+,Cu2+,Fe2+. Sedangkan ion-ion negative yang dapat mengendapkan protein
adalah ion salisilat, trikloroasetat, pikrat, tanat dan sulfosalisilat (Sirajuddin, 2012).
C. Alat dan Bahan
Tabel E.1 Alat yang Digunakan
No Nama Alat Jumlah
1 Tabung reaksi 5 buah
2 pH Universal Indicator 4 lembar
3 Pipet tetes 5 buah

Tabel E.2 Bahan yang Dipakai

No. Nama Bahan Jumlah
1 Albumin 2ml
2 Casein 2 ml
3 Gelatin 2ml
4 Pepton 2ml
5 CuSO4 0,1 M
6 Pb-asetat

D. Langkah Kerja
DAFTAR PUSTAKA
Sirajuddin. 2012. Penuntun Praktikum Biokimia. Makassar: Universitas
Hasanuddin.
E. Hasil pengamatan denaturasi dengan logam CuSo4

Bahan
Albumin Casein Gelatin Pepton
Bening
Keadaan awal Putih Bening Putih kekuningan
+CuSO4 0,1 M 30
4 30 30
(jumlah tetesan)
Sedikit Tidak mengendap Sedikit
Mengendap
Keadaan akhir mengendap (Tidak mengendap
(Terdenaturasi)
(Terdenaturasi) terdenaturasi) (Terdenaturasi)
Ph setelah 4
4 3 4
perlakuan
 Albumin dengan pH 4 Gelatin dengan pH 4

Pepton dengan pH 4 Casein dengan pH 3

Denaturasi Protein oleh Reaksi Pengendapan dengan Reagen Bersifat Asam

Asam Trikloroasetat

a. Dasar Teori
Asam trikloroasetat (nama sistematis: asam trikloroetanoat) adalah analog dari asam asetat,
dengan ketiga atom hidrogen dari gugus metil digantikan oleh atom-atom klorin. Senyawa ini
merupakan asam yang cukup kuat (Tanpa nama, 2014). Senyawa ini banyak digunakan dalam
bidang biokimia, untuk pengendapan makromolekul seperti protein, DNA dan RNA.

b. Alat dan Bahan

Alat Jumlah
Pipet tetes 3 buah
Tabung reaksi 4 buah
Plat tetes 1 buah
Lakmus merah 8 lembar kecil
Ph universal 4 buah

Bahan Jumlah
Protein albumin 2 ml
 Protein casein 2 ml
Protein pepton 2 ml
Protein gelatin 2 ml
Asam trikloroasetat 50 ml
NAOH encer 3 M 200 ml

c. Langkah kerja

d. Hasil Pengamatan
1. Tabel hasil pengamatan
Bahan Keadaan Awal +Asam (5-30 +NaOH Ket.
tetes)
Albumin berwarna bening, Warna tidak Semua Mengalami
memiliki endapan berubah, banyak endapan denaturasi dan
endpan hilang renaturasi
Casein Berwarna bening, Warna tidak Kembali ke Mengalami
tidak ada endapan berubah, sedikit keadaan awal denaturasi dan
endapan renaturasi
Gelatin Berwarna bening, Warna tidak Kembali ke Mengalami
tidak ada endapan berubah, sedikit keadaan awal denaturasi dan
endapan renaturasi
Pepton Berwarna bening, Warna berubah Tetap Tidak
tidak ada endapan menguning, tidak mengalami
ada endapan denaturasi dan
renaturasi

2. Dokumentasi hasil pengamatan

e. Pembahasan
Seperti yang sudah dibahas sebelumnya bahwa protein akan mengalami
denaturasi oleh asam. Reagen asam trichloroasetat yang diberikan pada uji coba ini
terbukti membuat protein terdenaturasi. Sedangkan pemberian NaOH yang dilakukan
bertujuan untuk menetralkan larutan protein yang sudah diberi reagen asam sehingga
terjadi renaturasi. Renaturasi merupakan keadaan dimana protein yang terdenaturasi
kembali seperti keadaan semula sebelum mengalami denaturasi. Ketika ditambahkan
NaOH, protein yang tadinya mengalami denaturasi dengan indikasi adanya
penggumpalan, mengalami renaturasi dengan indikasi gumpalan tersebut berangsur-
angsur mengalami pengurangan atau bahkan hilang. Jumlah NaOH yang diberikan
bervariasi pada masing-masing protein yang diuji. Ada yang diberi sedikit saja NaOH,
sudah mengalami renaturasi. Tetapi ada juga yang harus diberi NaOH dalam jumlah
banyak baru dapat mengalamu renaturasi
Pada hasil praktikum yang didapat, tiga jenis protein diantaranya adalah
albumin, kasein, dan gelatin mengalami denaturasi oleh asam trichloroasetat. Hal ini
terbukti saat terbentuknya endapan ketika diberi tetesan asam trichloroasetat. Lalu,
ketiga protein tersebut mengalami renaturasi saat diberi tetesan NaOH. Endapan-
endapan yang terdapat pada ketiga bahan tersebut menghilang saat diberi tetesan
NaOH. Pada protein pepton, tidak membentuk endapan saat diberi tetesan asam
trichloroasetat hal ini membuktikan bahwa pepton tidak terdenaturasi oleh asam
trichloroasetat.