SKRIPSI AJENG SEKAR Dipake

SKRIPSI
EFEK PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL SELEDRI (Apium graveolens L.)

TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN TIKUS PUTIH (Sprague dawley)
MODEL CHRONIC KIDNEY DISEASE
Oleh :
Ajeng Sekar Kirana
G1A015097
KEMENTERIAN RISET, TEKNOLOGI, DAN PENDIDIKAN TINGGI

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
FAKULTAS KEDOKTERAN
JURUSAN KEDOKTERAN PURWOKERTO
2018
LEMBAR PENGESAHAN

Oleh:
Ajeng Sekar Kirana
(G1A015097)
SKRIPSI
Untuk memenuhi salah satu persyaratan memperoleh gelar

Sarjana Kedokteran pada Fakultas Kedokteran
Universitas Jenderal Soedirman
Purwokerto
Disetujui dan disahkan

Pada tanggal November 2018
Pembimbing I Pembimbing II
dr. Afifah, M.Sc Dr. dr. Eman Sutrisna, M.Kes

NIP. 19850217 201012 2 003 NIP. 19750227 200212 1 003
Mengetahui,
Dekan Fakultas Kedokteran Ketua Jurusan Kedokteran
Dr. dr. Fitranto Arjadi, M.Kes Dr. dr. Eman Sutrisna, M.Kes
NIP. 19711122 200012 1 001 NIP. 19750227 200212 1 003
ix
SURAT PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini:

Nama : Ajeng Sekar Kirana
NIM : G1A015097
Judul Skripsi : Efek Pemberian Ekstrak Etanol Seledri (Apium graveolens L.)
Terhadap Kadar Hemoglobin Tikus Putih (Sprague dawley) Model
Chronic Kidney Disease
Pembimbing Skripsi : I. dr. Afifah, M.Sc
II. dr. Khusnul Muflikhah, M.Sc
Menyatakan bahwa :
1. Skripsi ini merupakan hasil karya sendiri bukan hasil plagiasi
2. Pelaksanaan penelitian ini merupakan bagian dari paying yang berjudul “Efek
Pemberian Ekstrak Etanol Seledri (Apium graveolens L.) Terhadap Kadar
Hemoglobin Tikus Putih (Sprague dawley) Model Chronic Kidney Disease”
dengan susunan tim peneliti adalah dr. Afifah, M.Sc dan dr. Khusnul
Muflikhah, M.Sc
3. Hak kekayaan intelektual penelitian berikut data-data hasil penelitian menjadi
milik dr. Afifah, M.Sc.
4. Hak publikasi penelitian ini berada pada dr. Afifah, M.Sc.
Pernyataan ini saya buat dengan sesungguhnya tanpa paksaan atau tekanan dari
siapapun. Saya bertanggung jawab secara hokum apabila terdapat hal-hal yang
tidak benar dalam pernyataan ini.
Purwokerto, November 2018
Ajeng Sekar Kirana

G1A015097
x
Ajeng Sekar Kirana1, Afifah2, Khusnul Muflikhah3

1
Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Soedirman
2
Departemen Farmakologi dan Terapi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman,
3
Departemen Fisiologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman
Email: ajengskirana@gmail.com Commented [E1]: Coba dilihat dipanduan lagi format
abstrak utk skripsi., apakah nama dan institusi dituliskan
ABSTRAK atau tidak
Latar Belakang: Chronic Kidney Disease (CKD) didefinisikan sebagaiadalah

kerusakan ginjal dan/atau penurunan Glomerular Filtration Rate (GFR) kurang dari
60mL/min/1,73 m2 selama minimal 3 bulan. CKD adalah suatu proses
patofisiologis kerusakan dengan etiologi beragam yang menyebabkan penurunan
fungsi ginjal yang progresif. Ssalah satunya ialah penurunan produksi eritropoietin
sehingga mengakibatkan komplikasi berupa anemia. Anemia , yang ditandai
dengan menurunnya kadar hemoglobin dari kadardi bawah normal. Ekstrak etanol
seledri (Apium graveolens L.) berfungsi sebagai antioksidan dan antiinflamasi yang
berpotensi mencegah kerusakan ginjal pada CKD sehingga diduga dapat mencegah
penurunan kadar hemoglobin pada CKD
Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian ekstrak etanol
seledri (Apium graveolens L.) dalam mencegah penurunan kadar hemoglobin tikus
putih (Sprague dawley) model chronic kidney diseaseCKD.
Metode penelitian: Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan post
test only with control group design. Dua puluh lima ekor tikus putih dibagi dalam
5 kelompok. Kelompok A: kelompok normal (SO, n=5) (larutan CMC) sebagai
sham control, kelompok B: kelompok nefrektomi (SN, n=5), sebagai kontrol sakit
(larutan CMC) sebagai kontrol sakit , kelompok C, D, dan E adalah kelompok
nefrektomi dan diberikan ekstrak etanol seledri 250 mg/kgBB, 500 mg/kgBB, dan
1000 mg/kgBB 14 hari sebelum dan 14 setelah nefrektomi. (250 mg/kgBB),
kelompok D (500 mg/kgBB), dan kelompok E (1000 mg/kgBB). Pada hari ke 15
setelah pemberian ekstrak, kelompok A dilakukan sham operation, sedangkan
kelompok B, C, D, E dilakukan 5/6 subtotal nephrectomy. Pemberian ekstrak
dilanjutkan sampai hari ke 14 setelah operasi.
Hasil: Rerata kadar hemoglobin kelompok A=10,82 ± 1,93; B=10,04 ± 0,63;
C=10,2 ± 0,85; D=10,12 ± 1,55; E=10,06 ± 0,43. Hasil uji One Way ANOVA
hemoglobin menunjukkan nilai p=0,849 (p>0,05).
Kesimpulan: Pemberian ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.) tidak dapat
mencegah penurunan kadar hemoglobin tikus putih (Sprague dawley) model CKD.
Kata kunci: Seledri, Apium graveolens L., hemoglobin, chronic kidney disease
xi
THE EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF CELERY (Apium graveolens
L.) TO HAEMOGLOBIN LEVELS ON CHRONIC KIDNEY DISEASE
MODEL RATS (Sprague dawley)
Ajeng Sekar Kirana1, Afifah2, Khusnul Muflikhah3

1
Faculty of Medicine, Jenderal Soedirman University
2
Departement of Pharmacology and Therapy, Faculty of Medicine, Jenderal Soedirman University,
3
Departement of Physiology, Faculty of Medicine, Jenderal Soedirman University,
Email: ajengskirana@gamil.com
ABSTRACT
Background: Chronic Kidney Disease (CKD) is defined as kidney damage and /

or decreased Glomerular Filtration Rate (GFR) of less than 60 mL/min/1,73 m2 for
at least 3 months. CKD is a pathophysiological process with so many etiologies that
cause progressive decline in kidney function. One of them is the ability to produce
erythropoietin. In CKD there is a decrease in erythropoietin production which
which leading to a complication called anemia. Anemia is marked by the decrease
of haemoglobin levels from its normal levels. Ethanol extract of celery (Apium
graveolens L.) has antioxidant and anti-inflammatory effect which has potention to
prevent the progression of kidney damage in CKD so the decrease of erythropoietin
and haemoglobin levels can be prevented.
Goals: This study aims to know the effect of celery ethanol extract (Apium
graveolens L.) administration in preventing the decrease of haemoglobin levels on
chronic kidney disease model rats (Sprague dawley).
Study Method: The method was an experimental study with post test only with
control group design. Twenty five males of white rats were randomly assigned to 5
groups. Group A (CMC solution) as sham control, group B (CMC solution) as sick
control, group C (250 mg/kgBW), group D (500 mg/kgBW), and group E (1000
mg/kgBW). On the 15th day after giving the extract and CMC, sham operation was
performed in group A, while 5/6 subtotal nephrectomy was performed in group B,
C, D, and E. Then the extract and CMC was continue gived until the 14th day after
operation. The mean result of haemoglobin concentration in group A=10,82 ± 1,93;
B=10,04 ± 0,63; C=10,2 ± 0,85; D=10,12 ± 1,55; E=10,06 ± 0,43.
Result: The result of One Way ANOVA test shows a value of p = 0.849 (p>0.05).
Conclusion: Administration of ethanol extract of celery (Apium graveolens L.) can
not prevent the decrease of haemoglobin levels in CKD rats models.
Keywords: Celery, Apium graveolens L., haemoglobin, chronic kidney disease
xii
DAFTAR ISI
DAFTAR TABEL ................................................................................................ x

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ..........................................................................................1
B. Rumusan Masalah .....................................................................................4
C. Tujuan dan Manfaat .................................................................................. 5
D. Keaslian Penelitian ....................................................................................6
II. TINJAUAN PUSTAKA

A. Materi Pustaka ......................................................................................... 7
1. Seledri (Apium graveolens L.) ............................................................... 7
2. Chronic Kidney Disease ....................................................................... 13
3. Teknik induksi CKD dengan 5/6 Subtotal Nephrectomy. .................... 18
4. Eritropoietin .......................................................................................... 19
5. Hemoglobin .......................................................................................... 20
6. Hubungan Kadar Hemoglobin pada CKD dengan seledri.................... 21
B. Kerangka Pemikiran Penelitian................................................................ 24
C. Kerangka Konsep Penelitian ....................................................................25
D. Hipotesis ...................................................................................................25
III. METODE PENELITIAN

A. Materi dan Bahan .................................................................................... 26
B. Metode Penelitian .................................................................................... 28
C. Rancangan Percobaan .............................................................................. 28
D. Variabel yang Diukur ............................................................................... 31
E. Cara Mengukur Variabel ......................................................................... 31
F. Tata Urutan Kerja .................................................................................... 32
G. Analisis Data ........................................................................................... 38
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil ........................................................................................................ 55
B. Pembahasan............................................................................................. 61
V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan ............................................................................................. 67
B. Saran ....................................................................................................... 67
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 68

LAMPIRAN .......................................................................................................... 72
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel 1.1 Keaslian Penelitian........................................................................... 6

Tabel 3.1 Definisi Operasional Variabel.......................................................... 31
Tabel 3.2 Jadwal Penelitian.............................................................................. 40
Tabel 4.1 Hasil Analisis Univariat kadar hemoglobin pada tikus.................... 57
Tabel 4.2 Hasil Uji One Way ANOVA terhadap kadar hemoglobin ............... 60
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Seledri........................................................................................... 8

Gambar 2.2 Progresivitas CKD dan Komplikasi yang Berhubungan
dengan Tahap CKD ......................................................................................... 17
Gambar 2.3 Mekanisme Eritropoietin dalam Mempengaruhi Produksi
Eritrosit (kiri) dan proses pembentukan eritrosit (kanan) ................................ 20
Gambar 2.4 Struktur Hemoglobin .................................................................... 21
Gambar 2.5 Kerangka Pemikiran Penelitian .................................................... 24
Gambar 2.6 Kerangka Konsep Penelitian ........................................................ 25
Gambar 3.1 Tata Urutan Kerja ......................................................................... 37
Gambar 4.1 Rata-Rata Berat Badan Tikus (Sprague dawley).......................... 56
Gambar 4.2 Rerata Kadar Hemoglobin............................................................ 59
Gambar 4.3 Jumlah Eritrosit dan Kadar Hematokrit
Tikus putih (Sprague dawley) .......................................................................... 65
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Prosedur 5/6 Subtotal Nefrektomi ............................................... 74

Lampiran 2 Kandungan Ekstrak Etanol Seledri ............................................... 75
Lampiran 3 Ethic Approval .............................................................................. 76
Lampiran 4 Data Berat Badan Hewan Coba .................................................... 77
Lampiran 5 Kadar Hemoglobin Setelah Perlakuan.......................................... 78
Lampiran 6 Data Rerata dan Hasil
Analisis Statistik Kadar Hemoglobin ............................................................... 79
Lampiran 7 Jumlah Eritrosit Tikus Setelah Perlakuan..................................... 83
Lampiran 8 Kadar Hematokrit Tikus Setelah Perlakuan ................................. 84
Lampiran 9 Dokumentasi Penelitian ................................................................ 85
xvi
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Chronic Kidney Disease (CKD) didefinisikan sebagai kerusakan ginjal
dan/atau penurunan Glomerular Filtration Rate (GFR) kurang dari
60mL/min/1,73 m2 selama minimal 3 bulan (KDIGO, 2012). CKD adalah
suatu proses patofisiologis dengan etiologi beragam yang menyebabkan
penurunan fungsi ginjal yang progresif (Tandi et al., 2014).
CKD merupakan masalah kesehatan masyarakat global dengan
prevalensi dan insidensi yang meningkat, prognosis yang buruk, dan biaya
yang tinggi. Di Indonesia, perawatan penyakit ginjal merupakan ranking
kedua pembiayaan terbesar dari BPJS kesehatan setelah penyakit jantung.
(Kementrian Kesehatan RI, 2017). Rata-rata biaya riil pengobatan CKD
dengan hemodialisis sebesar ialah Rp23.732.520,00 ± Rp19.142.379,00 per
pasien setiap sekali rawat inap (Azalea et al., 2016). Menurut United State
Renal Data System, di Amerika Serikat prevalensi CKD meningkat 20-25%
setiap tahun (Tandi et al., 2014). RISKESDAS (2013) menyatakan bahwa
prevalensi CKD berdasarkan diagnosis dokter di Indonesia sebesar 0,2%. Di
Indonesia pada tahun 2015, pasien pengguna hemodialisis yang terdiagnosis
CKD ialah sebanyak 18.613 pasien (PERNEFRI, 2015).
Proses awal terjadinya CKD bergantung pada penyakit yang
mendasarinya, namun dalam progresivitasnya kurang lebih hampir sama
(Thomas et al., 2008). Faktor yang mendasari terjadinya CKD bisa berupa
hipertensi, diabetes mellitus,
1
2
hiperlipidemia, obesitas, ataupun kebiasaan merokok (Kazancioğlu, 2013).
Progresivitas CKD berawal dari berkurangnya massa ginjal atau
berkurangnya nefron ginjal yang fungsional (Kasper et al., 2015 ; Thomas et
al., 2008). Hal ini akan menimbulkan mekanisme kompensasi oleh nefron
yang tersisa untuk menggantikan peran dari nefron yang sudah tidak
berfungsi sehingga akan terjadi hiperfiltrasi. Tekanan glomerular yang tinggi
secara terus menerus akibat hiperfiltrasi menyebabkan terjadinya proses
maladaptasi berupa kerusakan pada endotel glomerulus. Kemudian akan
terjadi proses inflamasi yang diperantarai oleh sitokin dan growth factor dan
juga stress oksidatif yang pada akhirnya mengakibatkan sklerosis glomerulus
dan fibrosis tubulointerstisial (Thomas et al., 2008). Apabila terjadi
kerusakan pada ginjal, maka akan mengakibatkan gangguan pada fungsi
ginjal, salah satunya adalah pembentukan hormon eritropoietin. Akibatnya
sumsum tulang akan menghasilkan lebih sedikit sel darah merah sehingga
menyebabkan anemia (Brugnara dan Eckardt, 2011).
Anemia merupakan komplikasi yang sering terjadi pada CKD (Singh,
2008). Di Amerika Serikat, prevalensi anemia pada CKD ialah 15,4%.
Prevalensi anemia meningkat seiring dengan meningkatnya tahap CKD, yaitu
8,4% pada tahap 1 dan 53,4% pada tahap 5. Anemia pada CKD berhubungan
dengan gangguan kognitif, gangguan tidur, komorbiditas kardiovaskular, dan
mortalitas yang tinggi. Anemia juga mengakibatkan menurunnya kualitas
hidup karena dapat menyebabkan lemah, lesu, menurunnya produktivitas, dan
lain-lain. Pada pasien CKD dengan anemia, biaya yang dikeluarkan untuk
3
pengobatan juga lebih tinggi dibandingkan pasien CKD tanpa anemia
(Staufer dan Fan, 2014).
Anemia ditandai dengan kadar hemoglobin <13 g/dL pada pria dengan
usia lebih dari 15 tahun dan <12 g/dL pada wanita dengan usia lebih dari 15
tahun (KDIGO,2012). Pada CKD sering kali terdapat penurunan kadar
hemoglobin (Hb) seiring dengan penurunan GFR. GFR menggambarkan
banyaknya nefron yang berfungsi, baik fungsi ekskresi maupun fungsi
sekresinya. Semakin menurun GFR, semakin sedikit nefron yang berfungsi,
termasuk fungsi dalam produksi hormon eritropoetin yang berakibat pada
terjadinya anemia (Ayu et al., 2010).
Deteksi dini dan pencegahan terhadap progresivitas CKD merupakan hal
yang penting dalam mengurangi resiko mortalitas dan morbiditas pada
penyakit ini (Kazancioğlu, 2013). Bahan-bahan herbal bukan merupakan hal
yang baru bagi masyarakat Indonesia dalam mencegah atau mengobati
penyakit. Selain murah dan mudah didapat, bahan-bahan herbal cenderung
tidak memberikan efek samping negatif yang terlalu besar (Mardiana, 2012).
Contoh bahan herbal yang cukup dikenal sebagai antioksidan dan
antiinflamasi ialah seledri. Tumbuhan seledri (Apium graveolens L.)
merupakan salah satu tanaman berkhasiat yang banyak digunakan oleh
masyarakat (Dewi et al., 2016).
Efek antiinflamasi pada seledri sudah lama dikenal dalam pengobatan
tradisional. Seledri secara tradisonal digunakan sebagai anti-spasmodik
(kejang), antirematik, pengobatan nyeri karena sakit gigi, penyakit kulit, dan
nyeri kepala (Baananou et al., 2012). Seledri juga berkhasiat menurunkan

4
kadar asam urat darah, diuretik, afrodisiak, penenang (sedatif), dan
antihipertensi (Dewi et al., 2016). Efek antiinflamasi pada seledri
berhubungan dengan adanya kandungan flavonoid dan saponin dalam seledri
(Baananou et al., 2012). Contoh flavonoid yang terkandung dalam seledri
adalah tannin dan apigenin (Pramono, 2004). Selain itu, seledri juga memiliki
efek antioksidan. Kandungan lain yang memberikan efek antioksidan dari
seledri adalah iridoid, coumarin, dan asam fenolat (Baananou et al, 2011).
Melihat dari mekanisme terbentuknya CKD dan kandungan zat dari seledri,
seledri diduga dapat mencegah progresivitas kelainan ginjal yang disebabkan
oleh CKD.
Berdasarkan latar belakang diatas, peneliti ingin mengetahui pengaruh
seledri (Apium graveolens L.) dalam mencegah penurunan kadar hemoglobin
tikus putih model chronic kidney disease (CKD).
B. Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang yang telah dipaparkan, rumusan masalah dalam
penelitian ini adalah :
1. “Apakah pemberian ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.) dapat
mencegah penurunan kadar hemoglobin tikus putih (Sprague dawley)
model chronic kidney disease?”
2. “Berapa dosis efektif ekstrak etanol seledri yang dapat mencegah
penurunan kadar hemoglobin tikus putih (Sprague dawley) model chronic
kidney disease?”
5
C. Tujuan dan Manfaat
1. Tujuan Penelitian
a. Tujuan Umum
Mengetahui efek pemberian ekstrak etanol seledri (Apium graveolens
L.) dalam mencegah penurunan kadar hemoglobin tikus putih
(Sprague dawley) model chronic kidney disease.
b. Tujuan Khusus
1) Mengetahui kadar hemoglobin tikus putih (Sprague dawley) sehat
2) Mengetahui kadar hemoglobin tikus putih (Sprague dawley)
model chronic kidney disease
3) Mengetahui dosis efektif ekstrak etanol seledri (Apium
graveolens L.) yang dapat mencegah penurunan kadar
hemoglobin tikus putih (Sprague dawley) model chronic kidney
disease
2. Manfaat Penelitian
a. Manfaat Teoritis
1) Penelitian ini diharapkan mampu menambah wawasan ilmiah
terkait dengan pengaruh ekstrak etanol seledri (Apium graveolens
L.) dalam mencegah penurunan kadar hemoglobin darah tikus
putih (Sprague dawley) model chronic kidney disease.
2) Penelitian ini diharapkan mampu menjadi acuan peneitian
selanjutnya terkait dengan pengaruh ekstrak etanol seledri (Apium
graveolens L.) dalam mencegah penurunan kadar hemoglobin
darah tikus putih (Sprague dawley) model chronic kidney disease.

6
b. Manfaat Praktis
Penelitian ini diharapkan dapat menjadi langkah awal dalam
penilitian dan pengujian lebih lanjut ekstrak etanol seledri (Apium
graveolens L.) sebagai bahan herbal yang dapat mencegah
penurunan kadar hemoglobin darah yang merupakan salah satu
penanda progresivitas dari chronic kidney disease.
D. Keaslian Penelitian
Tabel 1.1 Keaslian Penelitian
No Judul Peneliti dan Persamaan Perbedaan

Penelitian Tahun
1. Protective Mukhtar et al. a. Variabel a. Variabel yang
Effect of (2015) bebas diteliti berupa
Apium berupa ureum kreatinin
graveolens ekstrak serum dan
Against etanol histopatologi ginjal
Cisplatin seledri b. Hewan coba berupa
Induced (Apium mencit
Nephrotoxic graveolens c. Induksi CKD
ity in Male L.) menggunakan
Mice. injeksi Cisplatin
II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Materi Pustaka
1. Seledri (Apium graveolans L.)
a. Taksonomi
Kedudukan tanaman seledri dalam taksonomi tumbuhan
diklasifikasikan sebagai berikut (Lansdown, 2013) :
Kingdom : Plantae
Filum : Tracheophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Apiales
Famili : Apiaceae
Genus : Apium
Spesies : Apium graveolens L.
b. Morfologi dan Habitat
Seledri (Apium graveolens L.) dapat tumbuh baik di dataran
rendah maupun tinggi dan paling baik pada kisaran suhu 7-16° C.
Tanah yang baik untuk areal penanamannya adalah yang subur dan
gembur dengan pH 5,5-6,8. Tumbuhan seledri dikategorikan sebagai
sayuran (Dewi, 2010).
Berdasarkan bentuk pohonnya, tanaman seledri dapat dibagi
menjadi tiga golongan, yaitu seledri daun, seledri potong, dan seledri
umbi. Seledri daun (A. graveolus l. var. secalinum alef) merupakan
7
8
seledri yang banyak ditanam di Indonesia (Arisandi dan Sukohar,
2016).
Seledri merupakan herba tegak, dapat tumbuh tinggi sekitar 60-
90 cm dengan bau aromatik yang khas, batang persegi, beralur, beruas,
tidak berambut, bercabang banyak, dan berwarna hijau pucat. Daun
seledri berbentuk bulat telur yang terdiri atas tiga lobus dengan
panjang 2 - 4,5 cm. Daun seledri berwarna hijau tua, licin, berbentuk
baji, dengan pinggir bergerigi, terletak pada kedua sisi tangkai yang
berseberangan. Daun seledri majemuk menyirip ganjil dengan anak
daun 3-7 helai. Anak daun bertangkai yang panjangnya 1-2,7 cm.
Bunganya majemuk dengan jumlah 8-12 buah, berbentuk payung
kecil-kecil, berwarna putih, dan mekar secara bertahap. Buahnya
berbentuk kerucut dengan panjang 1-1,5 mm, dan berwarna hijau
kekuningan. Batangnya bercabang dan bergerigi (Arisandi dan
Sukohar, 2016 ; Kooti dan Daraei, 2017). Gambaran morfologi
tanaman seledri dapat terlihat pada Gambar 2.1.
Gambar 2.1 Seledri (Kooti dan Daraei, 2017)

9
c. Penggunaan Seledri Secara Tradisional
Tumbuhan seledri (Apium graveolens L.) merupakan salah satu
tanaman herbal berkhasiat yang banyak digunakan oleh masyarakat,
salah satunya ialah sebagai obat hipertensi (Dewi et al., 2016 ;
Arisandi dan Sukohar, 2016). Selain itu, seledri secara tradisonal juga
digunakan sebagai anti-spasmodik (kejang), antirematik, pengobatan
nyeri sakit gigi, penyakit kulit dan nyeri kepala (Baananou et al.,
2012). Seledri juga berkhasiat menurunkan kadar asam urat darah,
diuretik, afrodisiak, dan penenang (sedatif) (Dewi et al., 2016).
d. Kandungan dan Senyawa Aktif Seledri
Secara umum kandungan senyawa fitokimia seledri terdiri dari
karbohidrat, fenol (flavonoid), alkaloid dan steroid. Selain itu, seledri
mengandung vitamin C yang jumlahnya dua kali lipat dari kandungan
vitamin C yang ada dalam buah jeruk. Seledri juga mengandung
Vitamin B, Vitamin E, asam folat, posfor, Kalium dan Zinc (Rusdiana,
2018). Ekstrak seledri mengandung flavonoid, iridoid, coumarin,
saponin, dan asam fenolat (phenolic acids) yang berperan sebagai
anti-oksidan (Yusni dan Puteh, 2014 ; Bananou et al., 2011).
flavonoid dan saponin juga memiliki efek dalam mencegah inflamasi
(Baananou et al., 2012). Contoh flavonoid yang terkandung dalam
seledri adalah tannin, apigenin, kuersetin, luteolin dan kaempferol
(Pramono, 2004 ; Yao, 2010).

10
e. Efek Farmakologis dari Senyawa Aktif Seledri
1) Saponin
Saponin dalam ekstrak seledri (Apium graveolens L.)
memiliki peran dalam mencegah inflamasi. Mekanisme
antiinflamasi diduga diperankan oleh penghambatan terhadap
LPS-induces iNOS, ekspresi siklooksigenase 2 (COX-2),
produksi prostaglandin dan TNF-α (Lee et al., 2012).
2) Flavonoid
Flavonoid adalah jenis polifenol yang terkonsentrasi di
bagian daun, buah, biji, dan bunga dari seledri (Yusni dan Puteh,
2014). Flavonoid memiliki peran dalam mencegah inflamasi
dengan cara berperan sebagai antioksidan, memodulasi ekspresi
gen (sitokin dan CAM) atau aktivitas enzim (Perez-cano dan
Margarida, 2016). Selain itu, flavonoid juga dapat menghambat
jalur siklooksigenase (COX) yang akan mengurangi
pembentukan dari prostaglandin (Arisandi dan Sukohar, 2016).
Selain itu, flavonoid juga diketahui memiliki efek diuretic (Tandi
et al., 2017).
Contoh flavonoid yang terkandung dalam seledri adalah
apigenin dan kuersetin. Apigenin adalah anggota dari flavon dan
masuk dalam subklas flavonoids. Apigenin memiliki toksisitas
lebih rendah bila dibandingkan dengan flavonoids lain. Apigenin
memiliki sejumlah fungsi biologis diantaranya sebagai

11
antimutagenik ,antiinflamasi, antikarsinogenik, anti-viral, dan
anti radikal bebas (Arisandi dan Sukohar, 2016). Kuersetin
bekerja sebagai anti-oksidan yang berguna mengatasi radikal
bebas. Radikal bebas yang terbentuk bereaksi dengan oksigen
sehingga menghasilkan peroksida aktif. Kuersetin berperan saat
sudah terbentuk peroksida aktif. Senyawa kuersetin akan
mendonasikan satu atom hidrogen pada senyawa peroksida aktif,
diikuti oksidasi lebih lanjut membentuk produk akhir yang stabil
nonreaktif sehingga pembentukan radikal bebas selanjutnya dapat
dihentikan. Salah satu contoh flavonoid lain adalah tannin.
Tannin merupakan salah satu antioksidan yang kuat (Yusni dan
Puteh, 2014).
3) Asam fenolat
Asam fenolat merupakan salah satu jenis metabolit sekunder
yang banyak ditemukan dalam berbagai jenis tumbuhan. Asam
fenolat diketahui memiliki efek antioksidan (Ekaviantiwi et al.,
2013). Asam fenolat memiliki efek terhadap mitokondria dan
neutrofil yang merupakan produsen utama dari ROS di jaringan
dan sirkulasi. Asam fenolat memberikan efek pro-oksidan pada
mitokondria dan menginhibisi pembentukan ROS pada neutrofil
(Beloborodova et al., 2012). Contoh asam fenolat yang
terkandung dalam seledri ialah asam caffeat, asam p-kumarat dan
asam ferrulat (Rusdiana, 2018).

12
4) Iridoid
Iridoid memiliki efek antiinflamasi maupun antioksidan.
Menurut penelitian, iridoid dapat menghambat mediator
inflamasi dan stress oksidatif dengan menghambat ekspresi gen
NF-κBp65 yang merupakan pro-inflamasi (Liu dan Wang, 2011)
5) Coumarin
Coumarin membantu dalam mencegah radikal bebas yang
merusak sel (Sowbhagya, 2014). Coumarin bekerja dengan
menghambat pembentukan anion superoksida. Selain itu,
coumarin juga dapat menginhibisi lipooksigenase dan
siklooksigenase dalam metabolism arakidonat (Kontogiorgis et
al., 2007). Coumarin dapat meningkatkan aktivitas dari sel darah
putih tertentu yang berfungsi sebagai sistem imun tubuh dalam
mengeleminasi sel-sel tertentu yang merugikan semisal sel
kanker. (Sowbhagya, 2014). Coumarin juga dapat menurunkan
tekanan darah, menyeimbangkan sistem vascular dan mungkin
efektif digunakan di dalam kasus migrain (Rusdiana, 2018).
f. Efek Beberapa Senyawa Aktif Seledri Terhadap Hemolisis Eritrosit
Membran eritrosit mengandung asam lemak yang tidak
tersaturasi. Eritrosit juga merupakan sel yang paling sering terekspos
oleh oksigen sehingga akan lebih rentan terhadap kerusakan oksidatif.
Hemoglobin juga merupakan katalis kuat yang dapat menginisiasi

13
peroksidase lemak. Invasi membran eritrosit oleh peroksidan dapat
menyebabkan hemolisis (Asgary et al., 2005).
Beberapa senyawa aktif seledri seperti flavonoid dan diketahui
dapat mencegah hemolisis. Flavonoid seperti kuersetin mencegah
hemolisis dengan menghambat 2,2’-azobis dihydrochloride (AAPH)
pada eritrosit. AAPH merupakan radikal bebas yang menginduksi
terjadinya hemolisis (Asgary et al., 2005 ; Banerjee et al., 2008).
2. Chronic Kidney Disease (CKD)
a. Definisi
Chronic Kidney Disease (CKD) didefinisikan sebagai kerusakan
ginjal dan/atau penurunan Glomerular Filtration Rate (GFR) kurang
dari 60 mL/menit/1,73 m2 selama minimal 3 bulan (KDIGO, 2012).
CKD merupakan suatu proses patofisiologis dengan etiologi beragam
yang menyebabkan penurunan fungsi ginjal yang progresif (Tandi et
al., 2014).
b. Klasifikasi CKD
CKD diklasifikasikan berdasarkan estimated glomerular
filtration rate (eGFR) (Thomas et al., 2008) :
1) Tahap 1: eGFR normal ≥ 90 mL/min per 1.73 m2 dan albuminuria
persisten
2) Tahap 2: eGFR antara 60 - 89 mL/menit per 1.73 m2

14
5) Tahap 5: eGFR of < 15 mL/menit per 1.73 m2 atau end-stage
renal disease
c. Patomekanisme CKD
Pada awalnya, patogenesis CKD tergantung pada penyakit yang
mendasarinya, namun dalam progresivitasnya proses yang terjadi
kurang lebih serupa. Pengurangan massa ginjal, mengakibatkan
peningkatan GFR pada nefron yang tersisa sehingga terjadi
hiperfiltrasi dan hipertrofi. Mekanisme kompensasi ini terjadi karena
peningkatan tekanan hidrolik dan laju aliran plasma pada kapiler
glomerular yang tersisa (Thomas et al., 2008 ; Suwira, 2009). Aktivasi
renin angiotensin angiotensinogen system (RAAS) intrarenal, ikut
memberikan kontribusi terhadap mekanisme hiperfiltrasi tersebut
(Yamaguchi et al., 2015).
Tekanan glomerular yang tinggi secara terus menerus
mengakibatkan proses maladaptasi berupa kerusakan pada endotel
glomerulus. Hal ini akan menginduksi mikroinflamasi glomerulus
sehingga terjadi interaksi antara sel-sel inflamasi dan sel mesangial.
Sel mesangial akan mengalami aktivasi, proliferasi, dan disfungsi sel
pada akhirnya. Komunikasi antar sel dipengaruhi oleh sitokin dan
growth factor. Dibawah pengaruh growth factor, terutama
transforming growth factor β1 (TGF-β1), sel mesangial berubah
menjadi bentuk embrioniknya yaitu mesangioblas. Mesangioblas

15
menghasilkan matriks ekstraseluler yang akan mengakibatkan deposit
matriks ekstraseluler yang berlebihan. Deposit matriks ekstraseluler
yang berlebihan ini akan mengakibatkan terjadinya glomerusklerosis
(Thomas et al., 2008).
Rusaknya glomerulus akibat glomerulosklerosis akan
menyebabkan fungsi filtrasinya terganggu sehingga protein seperti
albumin dapat lolos ke tubulus ginjal. Hal ini mengakibatkan
reabsorbsi masif albumin oleh sel tubulus proksimal sehingga akan
mengstimulasi sekresi dari mediator proinflamasi termasuk kemokin.
Agen inflamasi ini akan menarik sel inflamasi ke interstitial renal dan
akan mengakibatkan aktivasi dan proliferasi dari fibroblast dan
miofibroblas. Aktivasi dan proliferasi dari fibroblast maupun
miofibroblas akan mengakibatkan sekresi matriks ekstraseluler.
Selain pada sel tubulus yang telah rusak akan terjadi apoptosis yang
menyebabkan atrofi tubular. Dibawah pengaruh TGF β1, beberapa sel
tubulus mengalami transformasi menjadi bentuk embrional yang
menyerupai fibroblas dan miofibroblas. Hal ini akan mengakibatkan
sintesis matriks ekstraseluler yang lebih banyak lagi dan apabila terus
berlanjut akan menjadi fibrosis tubulointerstitial yang ireversibel
(Thomas et al., 2008).
Mekanisme terjadinya glomerulosklerosis dan fibrosis
tubulointerstisial pada progresifitas CKD juga berkaitan dengan
adanya stress oksidatif (Ruiz et al., 2013). Stress oksidatif terjadi
akibat adanya ketidakseimbangan antara produksi Reactive Oxygen

16
Spesies (ROS) dan kapasitas antioksidan yang terganggu (Yamaguchi
et al., 2015). Pada ginjal yamg mengalami gangguan, Aktivasi
reseptor angiotensin II tipe 1 (AT1) oleh angiotensin II akan
meningkatkan produksi ROS di ginjal dan pembuluh darah yang
diperantarai oleh NADPH oxidase (NOX), yaitu enzim yang dapat
memproduksi ROS. Sedangkan, penurunan antioksidan diakibatkan
oleh gangguan aktivasi nuclear factor-erythroid 2 related factor 2
(Nrf2), yang merupakan faktor transkripsi pengkode gen pembentuk
antioksidan. Normalnya, stres oksidatif dan inflamasi akan
merangsang aktifnya Nrf2, namun pada ginjal yang mengalami
kerusakan, proses tersebut terganggu. Stress oksidatif dan inflamasi
terjadi secara bersamaan dalam progresivitas CKD. Stress oksidatif
dapat memicu terjadinya reaksi inflamasi, begitu pula sebaliknya
inflamasi dapat meningkatkan produksi ROS (Ruiz et al., 2013).
Reactive oxygen species (ROS) dapat mempengaruhi fungsi sel dan
merusak protein, lipid, dan asam nukleat, serta dapat menghambat
aktivitas enzimatik pada respirasi seluler (Modaresi et al., 2015).
d. Komplikasi CKD
Komplikasi pada CKD menyebabkan tingginya morbiditas dan
mortallitas maupun rendahnya kualitas hidup. Beberapa komplikasi
CKD dengan mudah dapat diidentifikasi (hipertensi, penyakit
kardiovaskular, anemia, mineral bone disorder (MBD), gangguan
elektrolit, dan gangguan keseimbangan asam basa) dan membutuhkan

17
tatalaksana yang spesifik. Contohnya ialah erythropoiesis stimulating
agent (ESA) untuk anemia. Komplikasi lain yang lebih sulit untuk
diidentifikasi seperti anoreksia, fatigue, kakeksia, pruritus, nausea,
dan disfungsi seksual biasanya merupakan gejala kompleks yang
muncul pada CKD yang lebih lanjut (Bello et al., 2017). Gambar 2.2
menunjukkan komplikasi CKD yang terjadi berdasarkan tahapnya.
Gambar 2.2 Progresivitas CKD dan Komplikasi yang

Berhubungan dengan Tahap CKD (Bello et al., 2017)
e. Tatalaksana CKD
Tatalaksana CKD bergantung pada penyakit yang mendasarinya.
Pada diabetes mellitus maka dilakukan pengaturan kadar gluosa
darah, pada glomerulonefritis dilakukan terapi munosupresif, dan
lain-lain. Selain itu, dapat juga dilakukan penghambatan pada
progresivitas CKD (Kasper et al., 2015). Beberapa tatalaksana CKD,
yaitu :
1) Mengurangi hipertensi intraglomerular dan proteinuria

18
Peningkatan tekanan intraglomerular merupakan mekanisme
maladaptasi yang berperan dalam penurunan fungsi ginjal. Oleh
karena itu, mengontrol tekanan intraglomerular merupakan hal
yang penting dalam mencegah progresivitas CKD. Selain itu,
dengan meningkatnya tekanan darah maka akan terjadi
peningkatan proteinuria. ACE inhibitor dan Angiotensisn
Receptor Blocker (ARB) menghambat angiotensin yang sehingga
akan mengurangi tekanan intraglomerular dan proteinuria. Dalam
beberapa penelitian didapatkan bahwa obat-obat ini efektif dalam
menghambat progresivitas dari CKD stadium lanjut pada pasien
diabetes dan nondiabetes (Kasper et al., 2015)
2) Mengontrol komplikasi CKD
Salah satu komplikasi CKD ialah adanya penuruna ekskresi obat-
obatan oleh ginjal. Oleh karena itu, dosis pemberian obat pada
CKD merupakan suatu hal yang perlu dilakukan agar tidak
menimbulkan overdosis (Kasper et al., 2015)
3) Mempersiapkan Replacement theraphy
Hemodialisis dan transplantasi ginjal telah memperpanjang
hidup dari ratusan dari ribuan pasien dengan CKD di dunia.
Indikasi untuk dilakukan renal replacement theraphy pada pasien
CKD adalah perikarditis uremia, ensefalopati, anoreksia, dan
nausea yang tidak berhubungan dengan ulkus peptikum dan
malnutrisi, abnormalitas cairan dan elektrolit, hyperkalemia, atau
cairan ekstraseluler yang berlebihan (Kasper et al., 2015).

19
3. Teknik Induksi CKD dengan 5/6 Subtotal Nephrectomy
Diantara model eksperimental untuk CKD, 5/6 subtotal nephrectomy
telah menjadi andalan dalam studi penyakit ginjal progresif (Gava et al,
2012). Teknik ini merupakan metode pembentukan model CKD yang
paling menyerupai CKD pada manusia dan telah diakui secara klinis dalam
menguji terapi baru (Zhang dan Kompa, 2014 ; Gava et al., 2012). 5/6
subtotal nephrectomy dilakukan dengan cara mengangkat total salah satu
ginjal dan menyisakan 1/6 bagian pada satu ginjal lainnya (Danang, 2014).
Menurut penelitian Gava et al. (2012), pada mencit yang dilakukan
5/6 subtotal nephrectomy, setelah dua minggu didapatkan penurunan GFR
kurang lebih 60%, proteinuria, glomerular sclerosis, dan hipertensi arteri,
yang merupakan karakteristik utama dari CKD. GFR dapat diukur melalui
kreatinin serum ataupun dengan creatinine clearance.
Studi pada tikus oleh Zhang dan Kompa (2014) memperlihatkan
bahwa setelah dilakukan 5/6 subtotal nephrectomy, terjadi peningkatan
tekanan pada kapiler glomerular. Ini merupakan suatu bentuk adaptasi
yang berhubungan dengan hiperfiltrasi kronik. Hal ini mengakibatkan
peningkatan proteinuria dan gagal ginjal yang progresif. Hal ini
dikarenakan terdapat sklerosis glomerular baik fokal ataupun segmental.
4. Peran Eritropoietin dalam Siklus Hidup Eritrosit
Eritrosit memiliki usia hidup yang singkat. Ia hanya dapat bertahan
kurang lebih 120 hari di peredarahan darah. Seiring dengan penuaan

20
eritrosit, membran plasma eritrosit yang tidak dapat diperbaiki menjadi
rapuh dan mudah pecah saat melewati titik-titik vaskular yang sempit.
Sebagian besar eritroit tua mengakhiri hidupnya di limpa karena jaringan
kapiler organ ini sempit sehingga akan menyebabkan lisis dari eritrosit
rapuh yang melewatinya (Sherwood, 2014). Untuk menggantikan eritrosit
yang mati, sumsum tulang akan memproduksi eritrosit-eritrosit baru.
Proses ini disebut dengan eritropiesis. Dalam proses eritropoiesis terdapat
salah satu hormone yang berperan yaitu eritropoietin (Guyton dan Hall,
2014).
Eritropoietin merupakan suatu glikoprotein yang merupakan stimulus
utama yang dapat merangsang produksi dan diferensiasi sel darah merah
di sumsum tulang. Eritropoetin disekresikan oleh fibroblas interstisial
ginjal. (Guyton dan Hall, 2014 ; Thomas et al., 2008). Secara normal, kira-
kira 90% dari eritropoietin total dibentuk di ginjal, sementara sisanya
sebagian besar dibentuk di hepar. Pengaruh utama eritropoietin adalah
dengan merangsang produksi proeritroblas dari sel punca hematopoietik di
sumsum tulang. Kemudian ketika proeritroblas sudah terbentuk,
eritropoietin akan merangsang pertumbuhan sel-sel tersebut melewati
tahap proeritroblastik. Sintesis eritropoietin biasanya meningkat ketika
terjadi hipoksia jaringan. Bila tidak ada eritropietin, maka sumsum tulang
hanya membentuk sedikit sel darah merah (Guyton dan Hall, 2014).
Gambaran skematik mengenai mekanisme eritropoiten dalam
mempengaruhi produksi eritrosit dan proses pembentukan eritrosit
terdapat pada Gambar 2.3.

21
Gambar 2.3 Mekanisme Eritropoietin dalam Mempengaruhi Produksi Eritrosit

(kiri) dan Proses Pembentukan Eritrosit (kanan) (Guyton dan Hall, 2014)
5. Hemoglobin
Sel-sel darah merah mampu mengkonsentrasikan hemoglobin dalam
cairan sel sampai sekitar 34 g/100mL sel. Sintesis hemoglobin dimulai
pada tahap proeritroblas dan berlanjut hingga tahap retikulosit pada
pembentukan sel darah merah. Saat retikulosit meninggalkan sumsum
tulang dan masuk ke aliran darah, retikulosit akan tetap membentuk sedikit
hemoglobin hingga menjadi eritrosit yang matang. Hemoglobin dapat
berikatan secara longgar dan reversible dengan oksigen sehingga oksigen
dapat dihantarkan ke jaringan oleh hemoglobin (Guyton dan Hall, 2014).
Molekul hemoglobin memiliki dua bagian yaitu heme dan globin (Gambar
2.4). Globin merupakan suatu protein yang terbentuk dari empat rantai
polipeptida yang berlipat-lipat. Sementara heme merupakan empat gugus
nonprotein yang mengandung besi, dengan masing-masing terikat ke salah
satu polipeptida (Sherwood, 2014)

22
Gambar 2.4 Struktur Hemoglobin (Sherwood, 2014)
6. Hubungan Kadar Hemoglobin pada CKD dengan Seledri
Pada tahap awal proses CKD, akan terjadi penyesuaian/adaptasi dari
nefron yang tersisa. Hal ini menyebabkan hiperfiltrasi dan hipertrofi dari
ginjal yang diikuti peningkatan tekanan kapiler dan aliran darah
glomerulus. Hiperfiltrasi ini juga dipengaruhi oleh adanya aktivasi dari
Renin Angiotensin Alosteron System (RAAS). Dengan aktivas RAAS,
maka reseptor angiotensin II tipe 1 juga teraktivasi. Hal ini akan
merangsang terjadinya stress oksidatif karena ketidakseimbangan antara
produksi Reactive Oxygen Spesies (ROS) dan kapasitas antioksidan yang
terganggu (Yamaguchi et al., 2015 ; Thomas et al., 2008). ROS dapat
mempengaruhi fungsi sel dan merusak protein, lipid, dan asam nukleat,
serta dapat menghambat aktivitas enzimatik pada respirasi seluler
(Modaresi et al., 2015). Proses adaptasi yang gagal selanjutnya akan
mengakibatkan terjadinya inflamasi pada glomerulus dan tubulus yang
pada akhirnya menyebabkan sklerosis glomerulus dan atrofi tubular.

23
Atrofi tubular akan menimbulkan fibrosis tubulointerstisial, sehingga
terjadi penurunan fungsi nefron yang progresif. Hal ini akan mengurangi
fungsi dari ginjal yang salah satunya adalah memproduksi eritropoietin
(Thomas et al., 2008 ; Silverstein, 2009).
Eritropoietin berperan dalam merangsang pembentukan eritrosit di
sumsum tulang terutama dalam produksi proeritroblas dari sel punca
hematopoietik di sumsum tulang. Kemudian ketika proeritroblas sudah
terbentuk, eritropoietin akan merangsang pertumbuhan sel-sel tersebut
melewati tahap proeritroblastik. Pada saat tahap proeritroblas, akan terjadi
sintesi hemoglobin yang berlanjut hingga terbentuknya eritrosit matang.
Hemoglobin berperan dalam menghantarkan oksigen ke seluruh jaringan
tubuh (Guyton dan Hall, 2014). Apabila sintesis eritrosit berkurang, maka
akan mengakibatkan terjadinya anemia (Brugnara dan Eckardt, 2011).
Anemia didefinisikan sebagai pengurangan satu atau lebih dari
pengukuran sel darah merah utama; konsentrasi hemoglobin, hematokrit,
atau jumlah sel darah merah (Thomas et al., 2008). Anemia terjadi ketika
kadar hemoglobin <13 g/dL pada pria dengan usia lebih dari 15 tahun dan
<12 g/dL pada wanita dengan usia lebih dari 15 tahun (KDIGO, 2012).
Ekstrak etanol seledri berperan dalam mencegah progresivitas dari
CKD dengan cara menghambat inflamasi dan stress oksidatif. Hal ini
berkaitan dengan kandungan seledri yang memiliki efek antiinflamasi dan
antioksidan. Ekstrak daun seledri mengandung flavonoid, polifenol, tanin,
iridoid, coumarin, saponin, dan asam fenolat (phenolic acids) yang
berperan sebagai anti-oksidan (Yusni dan Puteh, 2014 ; Bananou et al.,

24
2011). Flavonoid dan saponin juga memiliki efek dalam mencegah
inflamasi (Baananou et al., 2012). Apabila progresivitas CKD dihambat,
maka akan mencegah penurunan fungsi ginjal sehingga komplikasi CKD
seperti anemia dapat dicegah (Kazancioğlu, 2013.; Thomas et al., 2008)

25
B. Kerangka Pemikiran Penelitian

5/6 subtotal nephrectomy Ekstrak etanol seledri
Kuersetin
Pengurangan massa ginjal Flavonoid
Tannin
Aktivasi RAAS Asam fenolat
Efek Antioksidan
Coumarin
peningkatan tekanan Aktivasi reseptor
hidrolik dan laju aliran angiotensin II Iridoid
plasma pada kapiler
glomerular yang tersisa
↑ produksi ROS, ↓ Apigenin Flavonoid
fungsi antioksidan
↑ GFR pada nefron Saponin
yang tersisa
Stress oksidatif
hiperfiltrasi
Maladaptasi (kerusakan
endotel glomerulus)
Mikroinflamasi glomerulus
Efek Antiinflamasi
glomerulosklerosis
Hemolisis
proteinuria
Reabsobsi albumin berlebihan Penurunan kadar eritrosit
Inflamasi tubular dan interstitial

Efek Antiinflamasi
Fibrosis tubointerstitial
Penurunan fungsi nefron

Keterangan
Chronic Kidney Disease : Mempengaruhi
: Menghambat
Penurunan sekresi eritropoietin : Variabel yang diteliti
: Zat yang terkandung
Penurunan produksi eritrosit
Penurunan kadar Hb darah
Gambar 2.5 Kerangka Pemikiran Penelitian

26
C. Kerangka Konsep Penelitian
Kontrol sehat (sham operation)
kontrol negatif (tikus model

CKD) tanpa diberi ekstrak
etanol seledri
Kelompok perlakuan 1 (tikus Pengukuran

model CKD diberi ekstrak kadar
etanol seledri dengan dosis 250 hemoglobin
mg/kgBB) tikus putih
(Sprague
Dawley)
Kelompok perlakuan 2 (tikus
model CKD diberi ekstrak
etanol seledri dengan dosis 500
mg/kgBB)
Kelompok perlakuan 3 (tikus

model CKD diberi ekstrak
etanol seledri dengan dosis
1000 mg/kgBB)
Gambar 2.6 Kerangka Konsep Penelitian
D. Hipotesis
Pemberian ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.) dapat mencegah
penurunan kadar hemoglobin tikus putih (Sprague dawley) model chronic
kidney disease.
III. METODE PENELITIAN
A. Materi dan Bahan
1. Hewan Coba
Hewan coba yang digunakan adalah tikus putih (Sparague dawley)
berjumlah 30 ekor dengan umur 2–3 bulan, berat badan 150-300 gram
yang sama dan sehat. Hewan coba diperoleh dari Laboratorium
Farmakologi dan Terapi Universitas Gajah Mada. Hewan dipelihara dalam
lingkungan yang sama yaitu suhu 22 + 3oC dan kelembaban 30%, serta
siklus gelap terang selama 12 jam. Hewan ditempatkan pada kandang
dengan bahan, bentuk, dan ukuran yang sama dan diberi makanan dan
minuman dengan jenis, jumlah, dan komposisi yang sama. Kerancuan
dalam penelitian dikontrol dengan menggunakan kriteria inklusi dan
kriteria eksklusi sebagai berikut:
a. Kriteria Inklusi
1) Usia 2-3 bulan
2) Berat badan tikus 150 - 300 gram (Layal et al, 2012)
3) Jenis kelamin jantan
4) Sehat, aktif, dan tidak memiliki kelainan anatomi (cacat)
b. Kriteria Eksklusi
1) Tikus yang mengalami sakit selama masa aklimatisasi
2) Tikus dengan peningkatan atau penurunan berat badan >10%
antara sebelum dan setelah masa aklimatisasi.
26
2. Alat dan Bahan
a. Alat
1) Kandang hewan coba dengan tempat pakan dan minum berukuran
60 x 30 x 30 cm berbahan stainless steel.
2) Timbangan digital, skala 0-2000 gram merk Sweet Scale Oxone
OX-211 diproduksi oleh PT Oxone Indonesia.
3) Timbangan digital, skala 0,00000-100,0000 gram merk Dragon
303
4) Spidol Snowman Permanent Marker warna hitam
5) Scalpel
6) Pinset
7) Botol air minum
8) Alat sonde oral nomor 18 G stainless steel dengan ball tripped
needle
9) Sarung tangan
10) Spuit Terumo Syringe with needle 3 cc
11) Gelas kimia
12) Labu Erlenmeyer
13) Batang pengaduk
14) Gelar ukur 100 cc
15) Vacuum tube EDTA
16) Rak tabung reaksi
17) Papan lilin
18) Hematology Analyzer Sysmex XP-100
41
b. Bahan
1) Ekstrak etanol seledri yang dibuat di PT Lansida Yogyakarta.
Seledri diperoleh dari desa Pratin, Purbalingga, Jawa Tengah
2) Pelarut CMC (Carboxymethyl Cellulose) 0,5%
3) Aquades
4) Bahan pakan tikus standar 551 (pelet)
5) Obat anestesi ketamin
6) Benang silk 3/0
B. Metode Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan post test only with
control group design. Subjek penelitian yang digunakan ialah tikus putih
(Sparague dawley) sebanyak 30 ekor.
C. Rancangan Percobaan
Pemilihan hewan coba didasarkan pada kriteria inklusi kemudian
dikelompok secara random menggunakan Completed Randomized Design
(CRD) menjadi lima kelompok, yaitu kelompok A, B, C, D, dan E. Hewan coba
diaklimatisasi selama tujuh hari dan ditempatkan pada kandang dengan ukuran
60 x 30 x 30 cm. Tikus diberi perlakuan dengan ketentuan sebagai berikut:
1. Kelompok A, yaitu kelompok dengan sham operation dan diberi CMC
0,5% 14 hari sebelum operasi sampai hari ke-14 setelah operasi.
42
2. Kelompok B, yaitu kelompok yang diinduksi chronic kidney disease
dengan metode 5/6 subtotal nefrektomi dan diberi CMC 0,5%. 14 hari
sebelum operasi sampai hari ke-14 setelah operasi.
3. Kelompok C, yaitu kelompok yang diinduksi chronic kidney disease
dengan metode 5/6 subtotal nefrektomi dan diberi ekstrak seledri dosis 250
mg/kgBB 14 hari sebelum operasi sampai hari ke-14 setelah operasi.
4. Kelompok D, yaitu kelompok yang diinduksi chronic kidney disease
dengan metode 5/6 subtotal nefrektomi dan diberi ekstrak seledri dosis 500
mg/kgBB 14 hari sebelum operasi sampai hari ke-14 setelah operasi.
5. Kelompok E, yaitu kelompok yang diinduksi chronic kidney disease
dengan metode 5/6 subtotal nefrektomi dan diberi ekstrak seledri dosis
1000 mg/kgBB 14 hari sebelum operasi sampai hari ke-14 setelah operasi.
Pada penelitian kali ini dosis ditentukan berdasarkan penelitian
sebelumnya oleh Sukketsiri (2016) mengenai efek ekstrak seledri terhadap
tikus model artritis sebesar 250mg/kgBB, 500mg/kgBB, dan 1000mg/kgBB
per hari. Pemberian dosis dilakukan selama 14 hari sebelum dilakukan
pembedahan dilanjutkan 14 hari setelah pembedahan. Selama proses
perlakuan, berat badan hewan coba selalu ditimbang tiap minggunya untuk
menyesuaikan dosis.
Jumlah minimum hewan coba biasa dihitung menggunakan rumus Federer
yaitu (n-1) (t-1) >15, dengan n adalah jumlah hewan yang diperlukan dan t
adalah jumlah kelompok perlakuan. Penelitian ini membagi hewan coba
menjadi 5 kelompok (2 kelompok kontrol dan 3 kelompok perlakuan),
sehingga perhitungan hewan coba untuk masing-masing kelompok adalah:
43
(t-1)(n-1) > 15
(t-1)(n-1) > 15
(5-1)(n-1) > 15
4(n-1) > 15
4n – 4 > 15
4n > 19
n> 4,75 (dibulatkan menjadi 5)
Setelah dilakukan penghitungan didapatkan umlah minimal hewan coba ialah
5 ekor per kelompok. Namun dengan mempertimbangkan resiko drop out
sebesar 10%, maka digunakan rumus drop out:
r’ = r + 10%r
r’ = 5 + (10% x 5)
r’ = 5 + 0,5
r’ = 5,5 (dibulatkan menjadi 6)
Setelah mempertimbangkan resiko drop out, jumlah hewan coba yang
digunakan ialah 6 ekor per kelompok, sehingga total hewan coba yang
digunakan ialah 30 ekor.
44
D. Variabel yang Diukur
Tabel 3.1 Definisi Operasional Variabel
Variabel Definisi Nilai Skala Data

Operasional
Ekstrak etanol Ekstrak etanol 250 mg/kgBB Kategorik-
seledri seledri diperoleh 500 mg/kgBB Ordinal
(variabel melalui teknik 1000 mg/kgBB
bebas) maserasi dengan
menggunakan
pelarut etanol 96%.
Kadar dinyatakan
dalam mg/kgBB.
Kadar Kadar hemoglobin mg/dL Numerik – rasio
hemoglobin diukur dengan
tikus putih menggunakan
(Sprague hematology
dawley) model analyzer.
Chronc Kdney
Disease
(Variabel
terikat)
E. Cara Mengukur Variabel
Cara pengukuran variabel bebas berupa ekstrak etanol seledri diukur
dengan menggunakan gelas ukur. Variabel terikat berupa kadar hemoglobin
berasal dari sampel darah tikus putih pada 5 kelompok. Sampel darah diambil
sebanyak 2 cc melalui sinus retro-orbitalis, kemudian dimasukkan ke dalam
tabun vacuum tube EDTA. Sampel darah kemudian dibawa ke laboratorium
BIOFIT untuk dilakukan pengukuran kadar hemoglobin.
45
F. Tata Urutan Kerja
1. Persiapan hewan coba
Hewan coba ditimbang kemudian dipilih tikus putih dengan berat
antara 190-210 gram, kemudian dikelompokkan secara acak menjadi 5
kelompok, yaitu kelompok A sebagai kontrol sehat, kelompok B sebagai
kontrol negatif, serta kelompok C, D, dan E sebagai kelompok perlakuan.
Masing-masing kelompok berisi 6 ekor tikus putih (Sprague dawley).
Setelah dikelompokkan, hewan coba diberi label dengan cara sebagai
berikut:
a. Kelompok A : Hewan coba diberi 1 titik hitam pada pangkal ekor.
b. Kelompok B : Hewan coba diberi 2 titik hitam pada pangkal ekor.
c. Kelompok C : Hewan coba diberi 3 titik hitam pada pangkal ekor.
d. Kelompok D : Hewan coba diberi 4 titik hitam pada pangkal ekor.
e. Kelompok E : Hewan coba diberi 5 titik hitam pada pangkal ekor.
2. Aklimatisasi
Sebelum diberikan perlakuan, hewan coba diaklimatisasikan dalam
kandang berukuran 60 x 30 x 30 cm selama 7 hari sebelum perlakuan.
Selama perlakuan diberi makanan dan minuman yang cukup sesuai
standar.
3. Pembuatan ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.)
Pembuatan ekstrak seledri (Apium graveolens L.) dengan pelarut
etanol 96% melalui tahapan sebagai berikut:
a. Bahan dicuci menggunakan air mengalir untuk menghilangkan
kotoran setelah dimaserasi.
46
b. Seledri (Apium graveolens L.) dijemur selama + 2 hari hingga daun
kering seperti keripik.
c. Pengovenan seledri (Apium graveolens L.) pada suhu 50+1 oC.
d. Simplisia seledri (Apium graveolens L.) dijadikan serbuk
menggunakan grinde.
e. Serbuk kering seledri (Apium graveolens L.) seberat 500 gram
dimaserasi dalam 2 liter etanol 96%, kemudian didiamkan 24 jam.
f. Bahan ekstrak didiamkan kembali selama 24 jam, dilanjutkan
penyaringan, dan diperas sebanyak 2 kali.
g. Hasil penyaringan yang pertama dicampur dengan hasil penyaringan
yang kedua.
h. Sari etanol 96% pada hasil pencampuran antara penyaringan akan
diuapkan diatas penangas air dan dianginkan menggunakan kipas
angin hingga diperoleh ekstrak seledri (Apium graveolens L.) yang
murni
4. Perlakuan hewan coba
a. Setelah semua hewan coba ditimbang berat badannya kemudian
dikelompokkan dalam 5 kandang terpisah dan diberi label sesuai
kelompok perlakuan.
b. Pemberian perlakuan hewan coba pada tiap kelompok dilakukan
berdasarkan aturan sebagai berikut:
1) Kelompok A diberi 3 ml larutan CMC 0,5% secara peroral selama
14 hari, kemudian dilakukan pembedahan tanpa dilakukan 5/6
47
subtotal nephrectomy (sham operation), dilanjutkan pemberian
larutan CMC 0,5% sampai hari ke-14 setelah pembedahan.
2) Kelompok B diberi 3 ml larutan CMC 0,5% secara peroral selama
14 hari, kemudian dilakukan 5/6 subtotal nephrectomy,
dilanjutkan pemberiatan larutan CMC 0,5% sampai hari ke-14
setelah pembedahan.
3) Kelompok C diberi ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.)
dosis 250mg/kgBB yang dilarutkan dalam pelarut CMC 0,5%
secara peroral selama 14 hari, kemudian dilakukan 5/6 subtotal
nephrectomy, dilanjutkan pemberiatan ekstrak etanol seledri
sampai hari ke-14 setelah pembedahan.
4) Kelompok D diberi ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.)
dosis 500mg/kgBB yang dilarutkan dalam pelarut CMC 0,5%
nephrectomy, dilanjutkan pemberiatan ekstrak etanol seledri
5) Kelompok E diberi ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.)
dosis 1000g/kgBB yang dilarutkan dalam pelarut CMC 0,5%
nephrectomy, dilanjutkan pemberian ekstrak etanol seledri
48
5. Pembentukan Tikus Model Chronic Kidney Disease (CKD)
Induksi CKD pada tikus putih (Sprague dawley) dilakukan dengan
teknik 5/6 subtotal nephrectomy. Induksi CKD dilakukan pada kelompok
B, C, D, dan E. Tikus diberi anestesi menggunakan ketamin dengan dosis
100mg/kgBB secara intramuskular. Prosedur 5/6 subtotal nephrectomy
dilakukan dengan melakukan unilateral nephrectomy pada ginjal kanan,
kemudian menghilangkan jaringan ginjal kiri melalui polar excision.
Prosedur unilateral nephrectomy yaitu dengan melakukan insisi pada regio
lumbal (flank) dengan menggunakan scalpel untuk menyediakan akses ke
ginjal. Pembuluh darah ginjal (pediculus renalis) dan ureter diligasi
menggunakan benang silk 3/0. Ginjal kanan diangkat, dilanjutkan dengan
pengangkatan jaringan ginjal kiri dengan melakukan insisi pada polus
superior dan inferior, luka bekas pemotongan polus superior dan inferior
didep menggunakan kasa untuk menghentikan perdarahan. Bila
perdarahan sudah berhenti kemudian diberi betadin. Daerah tempat insisi
dijahit kembali menggunakan benang silk 3/0 dan hewan coba dibiarkan
sadar. Apabila hewan coba telah pulih maka akan ditempatkan ke kandang
(Koppen et al., 2013 ; Gava et al., 2012).
6. Pengambilan sampel
Semua hewan coba (kelompok A, B, C, D dan E) diambil darahnya melalui
sinus retro-orbitalis. Darah diambil sebanyak 2 cc dan disimpan di dalam
vacuum tube EDTA.
49
7. Terminasi hewan coba
Hewan coba diterminasi dengan cara dislokasi servikal setelah dilakukan
pengambilan sampel.
8. Pengukuran kadar hemoglobin
Pengukuran kadar hemoglobin dilakukan di Laboratorium BIOFIT
Purwokerto dengan menggunakan Hematology Analyzer SYSMEX XP-
100.
9. Dokumentasi
Dokumentasi data dan foto terkait proses penelitian dari pengambilan
bahan dan pembuatan ekstrak seledri, persiapan dan perlakuan hewan
coba, serta pengambilan sampel dan pemeriksaan kadar hemoglobin tikus
putih.
10. Pengolahan dan analisis data
Pengolahan dan analisis data hasil penelitian dilakukan dengan
menggunakan perangkat lunak statistik.
50
Aklimatisasi selama 7 hari
Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok

A B C D E
Diberi 3 ml CMC 0,5% Diberi ekstrak etanol seledri selama 14 hari

selama 14 hari
Dosis 250 Dosis 500 Dosis 1000

mg/kgBB mg/kgBB mg/kgBB
Sham Pembuatan model CKD dengan 5/6 subtotal nephrectomy

operation pada hari ke-15
Diberi 3 ml CMC 0,5% Diberi ekstrak etanol seledri selama 14 hari

selama 14 hari pasca pasca operasi
operasi
Dosis 250 Dosis 500 Dosis 1000

mg/kgBB mg/kgBB mg/kgBB
Pengambilan sampel darah sebanyak 2 cc melalui sinus retroorbital
Terminasi hewan coba
Pengukuran kadar haemoglobin
Pengolahan dan analisis data
Gambar 3.1 Tata Urutan Kerja
51
G. Analisis Data
1. Analisis Univariat
Analisis univariat dilakukan dengan penyusunan statistik deskriptif
terhadap variabel-variabel yang diukur. Analisis data pada penelitian ini
dilakukan secara kuantitatif terhadap hasil pengamatan, yaitu kadar
hemoglobin terhadap variabel bebas ekstrak etanol seledri. Hasil analisis
dicantumkan dalam bentuk rerata (mean), modus, median, dan simpang
baku (Dahlan, 2014).
2. Analisis Bivariat
Sebelum analisis bivariat, penilaian distribusi data dilakukan dengan
uji Saphiro Wilk karena sampel berjumlah 30 ekor tikus (<50 sampel data)
dan kemudian dilanjutkan dengan pemeriksaan varian data menggunakan
Levene test (Dahlan, 2014).
Analisis bivariat dilakukan untuk mengetahui efek pemberian ekstrak
etanol seledri terhadap kadar hemoglobin tikus putih. Uji bivariat
dilakukan dengan menggunakan uji parametrik One Way ANOVA
(ANOVA satu arah) apabila memenuhi asumsi, yaitu distribusi data
normal pada uji Saphiro Wilk dan/atau varian data homogen pada uji
Levene Test (p>0,05). Apabila data yang didapat dinyatakan bermakna
(p<0,05), maka dilanjutkan dengan uji post hoc LSD (Dahlan, 2014).
Apabila distribusi data tidak normal dan/atau varian data tidak
homogen (p<0,05), maka dilakukan transformasi data. Jika transformasi
data dinyatakan gagal, maka selanjutnya dilakukan uji alternatif non
parametrik yaitu uji Kruskal-Wallis. Apabila uji Kruskal-Wallis
52
dinyatakan bermakna (p<0,05), dilanjutkan dengan uji Post Hoc untuk uji
Kruskal-Wallis, yaitu Mann-Whitney (Dahlan, 2014).
53
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian ekstrak etanol
seledri (Apium graveolens L.) dalam mencegah penurunan kadar hemoglobin
tikus putih (Sprague dawley) model chronic kidney disease (CKD). Penelitian
ini dilaksanakan di Laboratorium Farmakologi, Fakultas Kedokteran,
Universitas Jenderal Soedirman selama 37 hari, yang terdiri dari 7 hari
akimatisasi dan 30 hari perlakuan, darikurang lebih 2 bulan yaitu bulan Mei –
Julni 2018.
Hewan coba yang digunakan ialah tikus putih (Sprague dawley) jantan
yang dipilih berdasarkan kriteria inklusi dan kemudian dikelompok secara
random menggunakan Completed Randomized Design (CRD) menjadi lima
kelompok, yaitu kelompok A, B, C, D, dan E. Kelompok A yaitu kelompok
dengan sham operation dan diberi CMC 0,5%,. Kelompok B (kontrol sakit)
yaitu yang diinduksi chronic kidney disease (CKD) dan diberi CMC 0,5%.
Kelompok C yaitu kelompok yang diinduksi CKD dan diberi ekstrak etanol
seledri 250 mg/kgBB. Kelompok D yaitu kelompok yang diinduksi CKD dan
diberi ekstrak etanol seledri 500 mg/kgBB. Kelompok E yaitu kelompok yang
diinduksi CKD dan diberi ekstrak etanol seledri 1000 mg/kgBB. Masing-
masing kelompok berisi 5 hewan coba, sehingga terdapat total 25 hewan coba.
Kriteria tikus putih (Sprague dawley) yang digunakan merupakan tikus jantan,
dengan usia 2-3 bulan, dan berat badan 150-300gram250gram.
54
Setelah aklimatisasi, selama 14 hari hewan coba diberi CMC 0,5 % bagi
kelompok A dan B serta ekstrak seledri bagi kelompok C, D, dan E. Kemudian
hewan coba kelompok B, C, D, dan E dibedah dan dilakukan 5/6 subtotal
nephrectomy sebagai induksi CKD. Setelah itu dilanjutkan kembali pemberian
CMC 0,5 % bagi kelompok A dan B serta ekstrak seledri bagi kelompok C, D,
dan E selama 14 hari pasca operasi. Pada hari ke-15 pasca operasi, dilakukan
pengambilan sampel darah dari hewan coba melalui sinus retroorbital sebanyak
2 cc. Kemudian sampel darah dibawa ke Laboratorium Biofit untuk dilakukan
pengukuran kadar hemoglobin.
1. Berat Badan Tikus
Pengukuran berat badan tikus (Sprague dawley) dilakukan sebelum masa
aklimatisasi dan kemudian dilakukan setiap minggu hingga minggu akhir
penelitian. Hal ini dilakukan supaya dapat menyesuaikan dosis pemberian
ektrak etanol seledri (Apium graveolens L.) agar tidak terjadi kelebihan
atau kekurangan dosis. Selain itu, pengukuran berat badan pada sebelum
aklimatisasi bertujuan untuk mengelompokkan hewan coba ke dalam
kriteria inklusi dan eksklusi.
Data rerata berat badan tikus masing-masing kelompok dapat dilihat
pada gambar 4.1.
55
Rata-Rata Berat Badan Tikus (Sprague dawley)
300
250
Berat badan tikus
200
150
100
50
0
Aklimatisasi Minggu ke-1 Minggu ke-2 Minggu ke-3 Minggu ke-4
A 170 190 185 204 199
B 186 188 200 194 188
C 192 227 230 248 209
D 201 206 215 198 205
E 204 200 182 172 192
Gambar 4.1 Rata-Rata Berat Badan Tikus (Sprague dawley)

Keterangan : Kelompok A/sham control: kelompok dengan sham operation dan diberi
CMC 0,5%; Kelompok B/kontrol sakit: dibuat model CKD dan diberi CMC 0,5%;
Kelompok C: dibuat model CKD dan diberi ekstrak etanol seledri 250 mg/kgBB;
Kelompok D: dibuat model CKD dan diberi ekstrak etanol seledri 500 mg/kgBB;
Kelompok E: dibuat model CKD dan diberi ekstrak etanol seledri 1000 mg/kgBB.
(Sumber : data primer yang diolah)
Setelah masa aklimatisasi hewan coba tampak sehat. Selama
perlakuan berlangsung dilakukan pengamatan terhadap perilaku dan
kondisi fisik hewan coba dan didapatkan bahwa keadaan umum dan
tingkah laku hewan coba dalam batas normal. Selama perilaku tidak teradi
perubahan perilaku atau kelainan system motoric seperti tegang, kejang,
maupun bersikap agresif. Bulu hewan coba tidak rontok ataupun berubah
menjadi lebih kasar. Nafsu makan hewan coba masih tetap terkontrol
selama penelitian.
Berat badan tikus kelompok A mengalami peningkatan sejak masa
aklimatisasi yaitu 170 gram menjadi 204 gram pada minggu ke-3,
meskipun mengalami sedikiti penurunan pada minggu ke-4. Kelompok B
mengalami peningkatan berat badan sejak masa aklimatisasi namun mulai
56
mngalami penurunan pada minggu ke-3. Kelompok C mengalami
peningkatan erat badan sampai minggu ke-3 tetapi mengalami penurunan
pad aminggu ke-4. Berat badan tikus pada Kelompok D mengalami
pengingkatan hingga minggu ke-2 namun pada minggu ke-3 mengalami
penurunan dan meningkat kembali pada minggu ke-4. Sementaea pada
kelompok E terjadi penurunan berat badan pada minggu ke-2 sampai
minggu ke-4.
2. Kadar Hemoglobin
a. Analisis univariat
Hasil analisis univariat dengan menghitung rerata (mean), nilai
minimum, nilai maksimum, dan simpang baku (standard deviation)
dari kadar hemoglobin tikus tiap kelompok disajikan dalam bentuk
Tabel 4.1
Tabel 4.1 Hasil Analisis Univariat kadar hemoglobin pada tikus
Ke- N Nilai Nilai Median Rerata Standar Formatted Table

lom- minimum maksimum deviasi
pok
A 5 8,00 13,00 10,00 10,82 1,93
B 5 9,40 10,90 10,00 10,04 0,63
C 5 8,90 10,90 10,60 10,2 0,85
D 5 8,20 12,20 9,70 10,12 1,55
E 5 9,90 11,00 10,40 10,06 0,43
Valid 5
Keterangan : Kelompok A/sham control: kelompok dengan sham operation dan
diberi CMC 0,5%; Kelompok B/kontrol sakit: dibuat model CKD dan diberi CMC
0,5%; Kelompok C: dibuat model CKD dan diberi ekstrak etanol seledri 250
mg/kgBB; Kelompok D: dibuat model CKD dan diberi ekstrak etanol seledri 500
mg/kgBB; Kelompok E: dibuat model CKD dan diberi ekstrak etanol seledri 1000
mg/kgBB. (Sumber : data primer yang diolah)
57
Dari hasil univariat kadar haemoglobin yang ditampilkan pada
tabel 4.1, secara univariat nilai minimum kadar hemoglobin per
kelompok yang terendah ialah kelompok A, disusul dengan kelompok
D, C, B, dan E. Kemudian nilai maksimum kadar hemoglobin per
kelompok yang terendah ialah kelompok B yang jumlahnya sama
dengan kelompok C, disusul dengan kelompok E, D, dan A. Rerata
kelompok kadar hemoglobin yang memiliki nilai terendah terletak
pada kelompok B, kemudian disusul dengan keompok E, D, C, dan A.
Standar deviasi kadar hemoglobin per kelompok dari hasil terendah
sampai tertinggi secara berurutan yaitu kelompok E, B, C, D, dan E.
Data rerata kadar hemoglobin disajikan dalam bentuk diagram pada
Gambar 4.2.
58
11
10.82
10.8
10.6
Kadar hemoglobin
10.4
10.2
10.2 10.12
10.04 10.06
10
9.8
9.6
A B C D E
Kelompok
Error bars 95% CI
Gambar 4.2 Rerata Kadar Hemoglobin

b. Analisis bivariat
Hasil uji normalitas data rerata kadar hemoglobin menggunakan
uji Saphiro-Wilk menunjukkan 5 kelompok memiliki data terdistribusi
normal (p>0,05). Kemudian pada uji homogenitas data menggunakan
Levene test didapatkan data homogen (p>0,05). Data rerata kadar
hemoglobin terdistribusi normal dan homogen, sehingga memenuhi
syarat uji parametrik One Way ANOVA. Hasil uji One Way ANOVA
terhadap kadar hemoglobin menunjukkan nilai 0,849 (p>0,05). Hal ini
59
menunjukkan bahwa tidak terdapat adanya perbedaan rerata kadar
hemoglobin yang bermakna pada minimal dua kelompok data.
Dikarenakan tidak ada perbedaan rerata yang bermakna pada uji One
Way ANOVA, uji post hoc tidak dilakukan. Hasil uji One Way
ANOVA kadar hemoglobin disajikan dalam Tabel 4.2.
Tabel 4.2 Hasil Uji One Way ANOVA terhadap kadar hemoglobin
Kelompok N Mean ± Standar p value Keterangan

deviasi
A 5 10,82 ± 1,93
B 5 10,04 ± 0,63 Tidak ada
C 5 10,2 ± 0,85 perbedaan
0,849
D 5 10,12 ± 1,55 bermakna
E 5 10,06 ± 0,43
Valid 5
60
B. Pembahasan
Berdasarkan data penelitian, kadar hemoglobin menunjukkan distribusi
data hasil penelitian normal. Hal ini disebabkan semua nilai central tendency
(mean, median, dan modus) berhimpit secara statistik, sehingga distribusi data
mendekati kurva distribusi normal (Dahlan, 2012). Uji one way ANOVA
menunjukkan data yang diperoleh secara statistik tidak signifikan dengan nilai
p=0,849 (p>0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan
signifikan pada rerata kadar hemoglobin dari kelima kelompok.
Rerata kadar hemoglobin kelompok A dan B menunjukkan bahwa
kelompok B (tikus model CKD) memiliki kadar hemoglobin yang lebih rendah
dibandingkan dengan kelompok A (tikus sehat). Walaupun secara analisis
statistik perbedaannya tidak signifikan, namun terdapat kecenderungan kadar
hemoglobin yang menurun pada kelompok B. Penurunan kadar hemoglobin
pada kelompok B diakibatkan oleh terjadinya proses stress oksidatif dan
inflamasi pada CKD.
Pada penelitian ini induksi CKD menggunakan 5/6 subtotal nephrectomy
dimana sebagian besar ginjal diambil. Pada tahap awal proses CKD, akan
terjadi penyesuaian/adaptasi dari nefron yang tersisa. Hal ini menyebabkan
hiperfiltrasi dan hipertrofi dari ginjal yang diikuti peningkatan tekanan kapiler
dan aliran darah glomerulus. Hiperfiltrasi ini juga dipengaruhi oleh adanya
aktivasi dari Renin Angiotensin Alosteron System (RAAS). Dengan aktivas
RAAS, maka reseptor angiotensin II tipe 1 juga teraktivasi. Hal ini akan
merangsang terjadinya stress oksidatif karena ketidakseimbangan antara
produksi Reactive Oxygen Spesies (ROS) dan kapasitas antioksidan yang
61
terganggu (Yamaguchi et al., 2015 ; Thomas et al., 2008). ROS dapat
mempengaruhi fungsi sel dan merusak protein, lipid, dan asam nukleat, serta
dapat menghambat aktivitas enzimatik pada respirasi seluler (Modaresi et al.,
2015). Proses adaptasi yang gagal selanjutnya akan mengakibatkan terjadinya
inflamasi pada glomerulus dan tubulus yang pada akhirnya menyebabkan
sklerosis glomerulus dan atrofi tubular. Atrofi tubular akan menimbulkan
fibrosis tubulointerstisial, sehingga terjadi penurunan fungsi nefron yang
progresif. Hal ini akan mengurangi fungsi dari ginjal yang salah satunya adalah
memproduksi eritropoietin (Thomas et al., 2008 ; Silverstein, 2009).
Eritropoietin berperan dalam merangsang pembentukan eritrosit di
sumsum tulang terutama dalam produksi proeritroblas dari sel punca
hematopoietik di sumsum tulang. Kemudian ketika proeritroblas sudah
terbentuk, eritropoietin akan merangsang pertumbuhan sel-sel tersebut
melewati tahap proeritroblastik. Pada saat tahap proeritroblas, akan terjadi
sintesis hemoglobin yang berlanjut hingga terbentuknya eritrosit matang.
Hemoglobin merupakan substansi yang terkandung dalam eritrosit yang
berperan dalam menghantarkan oksigen ke seluruh jaringan tubuh (Guyton dan
Hall, 2014). Apabila sintesis eritrosit berkurang, maka akan mengakibatkan
terjadinya anemia yang ditandai dengan penurunan kadar hemoglobin
(Brugnara dan Eckardt, 2011).
Perbedaan yang tidak signifikan antara kadar hemoglobin kelompok A dan
B dapat terjadi akibat progresivitas CKD yang masih belum lama berlangsung
sehingga belum mencapai penurunan kadar haemoglobin yang signifikan..
Menurut penelitian Sun et al. (2013), pada tikus model CKD dengan induksi
62
adenine, kadar eritropoietin mulai menurun pada minggu pertama induksi
CKD, namun kadar hemoglobin baru menurun secara signifikan pada minggu
keempat.
Rerata kadar hemoglobin kelompok C, D, dan E (tikus model CKD yang
diberi ekstrak etanol seledri) cenderung lebih tinggi dibandingkan dengan
kelompok B (tikus model CKD tanpa diberi ekstak etanol seledri). Hal ini
menunjukkan adanya fungsi zat aktif seledri dalam mencegah penurunan kadar
haemoglobin meskipun dalam hasil penelitian ini tidaklah signifikan. Seledri
memiliki kandungan zat aktif yang memiliki sifat antioksidan (flavonoid,
polifenol, tanin, iridoid, coumarin, saponin, dan asam fenolat) dan
antiinflamasi (flavonoid dan saponin) sehingga dapat mencegah progresivitas Commented [E2]: Zat yang mana saja yang berperan, dan
bgmn mekanismenya
CKD dengan cara menghambat inflamasi dan stress oksidatif yang terjadi
(Yusni dan Puteh, 2014 ; Bananou et al., 2011). Apabila progresivitas CKD
dihambat, maka akan mencegah penurunan fungsi ginjal sehingga komplikasi
CKD seperti anemia dapat dicegah (Kazancioğlu, 2013.; Thomas et al., 2008).
Meskipun perbedaan rerata kadar hemoglobin antara kelompok C, D, dan
E tidaklah tidak signifikan, diantara 3 kelompok tersebut didapatkan bahwa
kelompok C yang diberikan ekstrak etanol seledri dengan dosis 250
mg/kgBB/hari memiliki rerata kadar hemoglobin yang paling tinggi
dilanjutkan dengan kelompok D (diberi ekstrak etanol seledri 500 mg/kgBB)
lalu kelompok E (diberi ekstrak etanol seledri 1000 mg/kgBB/hari). Hal ini
menunjukkan bahwa dosis ekstrak etanol seledri yang efeknya paling baik
terhadap kadar hemoglobin ialah dosis 250 mg/kgBB/hari dengan
kecenderungan semakin tinggi dosisnya makan akan semakin berkurang efek
63
dari ekstrak etanol seledri tersebut dalam mencegah penurunan kadar
hemoglobin.
Anemia pada CKD tidak hanya dilihat dari kadar hemoglobin saja, akan
tetapi dari jumlah eritrosit dan hematokrit darah. Hal ini dikarenakan pada
dasarnya eritropoietin merangsang pembentukan eritrosit di dalam tubuh yang
kemudian akan mempengaruhi kadar hemoglobin dan hematokrit di darah.
Oleh karena itu, Selain kadar hemoglobin, jumlah eritrosit dan hematokrit yang
menurun juga terjadi pada anemia (US Department of Health and Human
Service, 2011). Pada penelitian ini, jumlah eritrosit dan kadar hematokrit pada
hewan coba disajikan dalam gambar 4.3.
64
Jumlah Eritrosit pada Tikus Putih (Sprague Dawley)
7 6.402
6 5.75
5 4.494
Jumlah eritrosit
4.184 4.316
4
0
A B C D E
Kelompok
Error bars 95% CI
Kadar Hematokrit pada Tikus Putih (Sprague Dawley)

40 36.62
35 33.1
30
25.72 25.9
Kadar hematokrit
25.42
25
20
15
10
0
A B C D E
Kelompok
Error bars 95% CI
Gambar 4.3 Jumlah Eritrosit dan Kadar Hematokrit Tikus putih (Sprague
dawley)
65
Dari hasil pengukuran jumlah eritrosit dan kadar hematokrit, didapatkan
bahwa hasilnya sejalan dengan kadar hemoglobin dimana pada tikus putih
model CKD (kelompok B) memiliki rerata jumlah eritrosit dan kadar
hematokrit lebih rendah dibandingkan dengan tikus sehat (kelompok A) dan
tikus putih model CKD yang diberikan ekstrak seledri (kelompok C, D, dan E).
Sama seperti rerata kadar hemoglobin, jumlah eritrosit dan kadar hematokrit
tertinggi ialah kelompok C, yang diberi ekstrak etanol seledri 250
mg/kgBB/hari. Kemudian semakin tinggi dosis ekstrak etanol seledri yang
diberikan (500 mg/kgBB/hari dan 1000 mg/kgBB/hari) rerata kadar eritrosit
dan hematokrit semakin menurun. Commented [E3]: Ditambahkan penjelasan hasil analisis
bivariatnya, apakah signifikan ketika dibandingkan.
Pada pasien dengan penyakit ginjal seperti CKD, seledri tidak boleh
diberikan dengan dosis terlalu tinggi karena dapat menimbulkan efek yang
kurang baik (Yaser et al., 2014). Seledri mengandung flavonoid dan fenol yang
memiliki efek diuretik yang seharusnya dapat meningkatkan eGFR (Tandi et
al., 2017). Namun, diuretik memiliki efek yang kurang baik karena dapat Commented [E4]: Selain dari mekanisme ini, tambahkan
menisme lain dari flavonoid terhadap kadar Hb, atau
menurunkan eGFR pada pasien CKD (Khan et al., 2016). Zat pada seledri parameter anemia lain seperti eritrosit dan hematokrit
Penurunan eGFR mencerminkan penurunan dari fungsi ginjal sehingga seiring
dengan penurunan eGFR maka sintesis hormone eritropoietin juga semakin
menurun (Singh, 2008). Oleh karena itu, pada penelitian ini didapatkan bahwa
pada dosis 500 mg/kgBB/hari dan 1000 mg/kgBB/hari merupakan dosis yang
terlalu tinggi sehingga efek yang diberikan dalam mencegah penurunan kadar
hemoglobin, erirosit, dan hematokrit menurun jika dibandingkan dengan dosis
250 mg/kgBB/hari.
66
Keterbatasan penelitian ini adalah pengukuran kadar hemoglobin
dilakukan dalam waktu yang terlalu cepat sehingga hasil yang didapatkan
belum signifikan. Selain itu, Penelitian ini menggunakan metode post test only
wih control group design sehingga tidak dapat membandingkan kadar
hemoglobin sebelum dan sesudah perlakuan.
67
KESIMPULAN DAN SARAN
A. KESIMPULAN
1. Pemberian ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.) tidak dapat
mencegah penurunan kadar hemoglobin tikus putih (Sprague dawley)
model chronic kidney diseaseCKD secara seginifikan.
2. Pemberian ekstrak etanol seledri dengan dosis 250 mg/kgBB memiliki
efek tertinggi dalam mencegah penurunan rerata kadar hemoglobin.
B. SARAN
1. Dalam penelitian selanjutnya mengenai efek pemberian ekstrak etanol
seledri (Apium graveolens L.) dalam mencegah penurunan kadar
hemoglobin tikus putih (Sprague dawley) model chronic kidney
diseaseCKD, pengukuran kadar hemoglobin sebaiknya dilakukan dalam
jangka waktu yang lebih lama yaitu minimal 4 minggu setelah tikus dibuat
model CKD.
2. Efek pemberian ekstrak etanol seledri (Apium graveolens L.) dalam
mencegah penurunan kadar eritrosit dan hematokrit tikus putih (Sprague
dawley) model chronic kidney disease dapat dijadikan pertimbangan untuk
penelitian selanjutnya.
68
DAFTAR PUSTAKA
Arisandi R., A. Sukohar. 2016. Seledri (Apium graveolens L.) sebagai Agen
Kemopreventif bagi Kanker. Majority. 5(2) : 95-100.
Asgary, S., G.H. Naderi, N. Askari. 2005. Protective Effect of Flavonoids Against
Red Blood Cell Hemolysis by Free Radicals. Experimental & Clinical
Cardiology. 10(2) : 88-90.
Ayu, N.P., K. Suega, G.K. Widiana. 2010. Hubungan Antara Beberapa Parameter
Anemia dan Laju Filtrasi Glomerulus Pada Penyakit Ginjal Kronik
Pradialisis. Jurnal Penyakit Dalam. 11(3) : 140-148.
Azalea, M., T.M. Andayani, Satibi. 2016. Analisis Biaya Pengobatan Penyakit
Ginjal Kronis Rawat Inap Dengan Hemodialisis di Rumah Sakit. Jurnal
Manajemen dan Pelayanan Farmasi. 141-150.
Baananou, S. et al. 2012. Anti-inflammatory and Analgesic Activities of Tunisian

Apium graveolens L. Leaves Extracts in Rats. Journal of Biologically Active
Products from Nature. 2(4) : 225-331.
Baananou, S., B. Ibtissem, A. Mahmoud, K. Boukef, N.A. Boughattas. Antioxidant

Activity of Apium graveolens Extracts. Journal of Biologically Active
Products from Nature. 340 – 343.
Banerjee, A., A. Kunwarb, B. Mishrab, K.I. Priyadarsinib. 2008. Concentration

Dependent Antioxidant/Pro-Oxidant Activity of Curcumin Studies from
AAPH Induced hemolysis of RBCs. Chemico-Biological Interactions. 174
: 134–139.
Bello, A.K. et al. 2017. Complications of Chronic Kidney Disease: Current State,
Knowledge Gaps, and Strategy for Action. Kidney International
Supplements. 7 : 122–129.
Beloborodova, N., I. Bairamov, A. Olenin, V. Shubina, V. Teplova, N. Fedotcheva.

2012. Effect Of Phenolic Acids Of Microbial Origin On Production Of
Reactive Oxygen Species In Mitochondria And Neutrophils. Journal of
Biomedical Science. 19(89) : 1-9.
Brugnara, C., K.U. Eckardt . 2011. Hematologic aspects of kidney disease.

Saunders, Philadelphia.
Cachofeiro, V., M. Goicochea, S.G.D. Vinusa, P. Oubina, V. Lahera, J. Luno. 2008.

Oxidative stress and inflammation, a link between chronic kidney disease
and cardiovascular disease. Kidney International. 54-59.
69
69
Dahlan, M.S. 2014. Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan : Deskriptif,

Bivariat, dan Multivariat, Dilengkapi Aplikasi Menggunakan SPSS.
Epidemiologi Indonesia, Jakarta.
Danang, B.G. 2014. Hubungan Ekspresi Endothelin-1 dengan Glomerulosklerosis

pada Model 5/6 Nefrektomi Subtotal di Mencit. Skripsi. Fakultas
Kedokteran. Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta.
Dewi, K. 2010. Efek Ekstrak Etanol Seledri (Apium graveolens L.) Terhadap
Tekanan Darah Pria Dewasa. Jurnal Medika Planta. 1(2) : 27-34.
Dewi. E.K.M., D.K. Walanda, S.M. Sabang. 2016. Pengaruh Ekstrak Seledri
(Apium graveolens L.) Terhadap Kelarutan Kalsium dalam Batu Ginjal.
Jurnal Akademika Kimia. 5(3) : 127-132.
Gava, A.L., F.P.S. Freitas, C.M. Balarini, E.C. Vasquez, S.S. Meyrelles. 2012.
Effects of 5/6 Nephrectomy on Renal Function and Blood Pressure In Mice.
International Journal Physiology Pathophysiology Pharmacology. 4(3) :
167-173.
Guyton, A.C. dan J.E. Hall. 2014. Buku ajar Fisiologi Kedokteran. Elsevier,
Singapura.
Kasper, D.L. et al. 2015. Harrison’s Internal Medicine Principal of Internal

Medicine 19th Edition. McGraw-Hill Education, New York.
Kazancioğlu, R. 2013. Risk factors for chronic kidney disease: an update. Kidney
International Supplements. 3(4) : 368–371.
Kementrian Kesehatan RI. 2013. Riset Kesehatan Daerah 2013 (online). Diakses
12 Maret 2018.
Kementrian Kesehatan RI. 2017. InfoDATIN : Situasi Penyakit Ginjal Kronis. Pusat
Data dan Informasi Kementrian Kesehatan RI, Departemen Kesehatan,
Jakarta.
Khan, Y.H. et al. 2016. Chronic Kidney Disease, Fluid Overload and Diuretics: A
Complicated Triangle. PLOS ONE. 11(7) : 1–13.
Kidney Disease: Improving Global Outcomes (KDIGO) Anemia Work Group.

2012. KDIGO Clinical Practice Guideline for Anemia in Chronic Kidney
Disease. Kidney International Supplements. 2(4) : 279–335.
Kontogiorgis, C.A., Y. Xu, D. Hadjipavloulitina, Y. Luo. 2007. Coumarin

Derivatives Protection Against ROS Production in Cellular Models of Aβ
Toxicities. Free Radical Research. 41(10) : 1168-1180.
70
Kooti ,W., dan N. Daraei. 2017. A Review of The Antioxidant Activity of Celery
(Apium graveolens L.). Journal of Evidence-Based Complementary &
Alternative Medicine. 22(4) : 1029-1034.
Koppen, A.V., M.C. Verhaar, L.G. Bongartz, J.A. Joles. 2013. 5/6th Nephrectomy
in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to
Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat. Journal of Visualized
Experiments. 1-8.
Lansdown, R.V. 2013. Apium graveolens. The IUCN Red List of Threatened
Species.
Layal, K., I.S. Perdhana, M. Louisa, A. Estuningtyas, V. Soetikno. 2017. The

Effects of Quercetin on Oxidative Stress and Fibrosis Markers in Chronic
Kidney Disease Rat Model. Medical Journal of Indonesia. 26(3) : 169-176.
Lee, Y., J.C. Jung, Z. Ali, I.A. Khan, S. Oh. 2012. Anti-Inflammatory Effect of
Triterpene Saponins Isolated from Blue Cohosh (Caulophyllum
thalictroides). Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine.
1-8.
Liu, X., J. Wang. 2011. Anti-Inflammatory Effects of Iridoid Glycosides Fraction

of Folium Syringae Leaves on TNBS-Induced Colitis in Rats. Journal
Ethnopharmacology. 133(2) : 780-787.
Mardiana, L., et al. 2012. Daun Ajaib Tumpas Penyakit. Penebar Swadaya, Jakarta.
Modaresi, A., M. Nafar, Z. Sahrei. 2015. Oxidative Stress in Chronic Kidney

Disease. Iranian journal of kidney diseases. 9(3) : 165-179.
National Institute of Health. 2011. Chronic Kidney Disease (Online). Diakses 25

Maret 2018.
Perez-Cano, F.J. and C. Margarida. 2016. Flavonoids, Inflammation and Immune

System. Nutrients. 8 : 659.
Perhimpunan Nefrologi Indonesia. 2015. 8th Report of Indonesian Renal Registry

(online). Diakses 12 Maret 2018.
Pramono, S. 2004. Efek Antiinflamasi Beberapa Tumbuhan Umbelliferae. Hayati.

12(1) : 7-10.
Ruiz, S., P.E. Pergola, R.A. Zager, N.D. Vaziri. 2013.Targeting the Transcription
Factor Nrf2 to Ameliorate Oxidative Stress and Inflammation in Chronic
Kidney Disease. Kidney International. 83(6) : 1029–1041.
71
Rusdiana, T. 2018. Telaah Tanaman Seledri (Apium graveolens L.) Sebagai

Sumber Bahan Alam Berpotensi Tinggi Dalam Upaya Promotif Kesehatan.
Indonesia Natural Research Pharmaceutical Journal. 3(1) : 1-8.
Sherwood, L. 2014. Fisiologi Manusia dari Sel ke Sistem. Terjemahan oleh Brahm
U. 2014. Penebit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Silverstein, D. M. 2009. Inflammation in Chronic Kidney Disease: Role in The
Progression of Renal and Cardiovascular Disease. Pediatric Nephrology. 24
(8) : 1445–1452.
Singh, A. K. 2008. Anemia of Chronic Kidney Disease. Clinical Journal of the

American Society of Nephrology. 3 : 3-6.
Sowbhagya, H. B, 2014. Chemistry, Technology, and Nutraceutical Functions of

Celery (Apium graveolens L.): An Overview. Critical Reviews in Food
Science and Nutrition. 54 : 389–398.
Stauffer, M.E., T. Fan. 2014. Prevalence of Anemia in Chronic Kidney Disease in

The United States. PLOS One. 9(1) : 1-4.
Sukketsiri, W., N. Choosri, S. Tanasawet, P. Chonpathompikunlert. 2016. Apium

graveolens Extract Attenuates Adjuvant Induced Arthritis by Reducing
Oxidative Stress. Journal of Food Biochemistry. 41(1).
Sun, C.C. et al. 2013. A Hepcidin Lowering Agent Mobilizes Iron for Incorporation
into Red Blood Cells in An Adenine-Induced Kidney Disease Model of
Anemia In Rats, Nephrology Dialysis Transplantation. 28(7) : 1733–1743.
Suwira, K. 2009. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Pusat Penerbitan Ilmu Penyakit
Dalam Diponegoro, Jakarta.
Tandi, M., A. Mongan, dan F. Manopo. 2014. Hubungan Antara Derajat Penyakit
Ginjal Kronik Dengan Nilai Agregasi Trombosit Di RSUP Prof. Dr. R.D.
Kandou Manado. Jurnal e-Biomedik. 2(2) : 509-513.
Tandi, J., Ayu W., dan Asrifa. 2017. Efek Ekstrak Etanol Daun Gendola Merah
(Basella alba L.) terhadap Kadar Kreatinin, Ureum dan Deskripsi Histologis
Tubulus Ginjal Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus) Diabetes yang
Diinduksi Streptozotocin. Jurnal Farmasi Galenika. 3(2) : 93-102.
Thomas, R., A. Kanso, J.R. Sedor. 2008. Chronic Kidney Disease and Its
Complications. Primary Care. 35(2) : 1-15.
Yamaguchi, J., T. Tanaka, M. Nangaku. 2015. Recent Advances in Understanding

of Chronic Kidney Disease. F1000 Research. 4 : 1-9.
Yao Y., W. Sang, M. Zhou, G. Ren. 2010. Phenolic Composition and Antioxidant
Activities of 11 Celery Cultivars. Journal Food Science. 75(1) : 9-13.
72
Yaser, A.J. et al. 2014. Chemical Composition, Phytochemical Constituents and

Antioxidant Activities of The Seeds Extract of Apiumgraveoleus L From
Yemen. Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical
Sciences. 5(1) : 1074–1087.
Zhang, Y. dan A. R. Kompa. 2014. A Practical Guide to Subtotal Nephrectomy in

The Rat with Subsequent Methodology for Assessing Renal and Cardiac
Function. Asian Pacific Society of Nephrology. 19 : 552-561.
73
74
Lampiran 1 Prosedur 5/6 Subtotal Nephrectomy (Koppen et al., 2013 ; Gava et al.,
2012)
Desinfeksi alas operasi dengan alkohol
Anestesi tikus dengan ketamin 100 mg/kgBB intramuskular
6. Cukur
Ethicalrambut
Approval
tikus di regio flank kanan dan kiri lalu didesinfeksi dengan alkohol
Insisi pada regio Flank secara vertikal dengan ukuran 1-1,5 cm, diseksi bagian
otot punggung untuk membuka akses ke ginjal
Ginjal kanan Ginjal kiri
Ligasi Pembuluh darah ginjal Eksisi polus superior dan inferior

(pediculus renalis) dan ureter ginjal
menggunakan benang silk 3/0
Dep perdarahan dengan kassa

Nefrektomi unilateral pada ginjal betadine hingga perdarahan berhenti
kanan, yaitu diambil satu ginjal utuh
Daerah tempat insisi dijahit kembali dengan benang silk 3/0

75
Lampiran 2 Kandungan Ekstrak Etanol Seledri

76
Lampiran 3 Ethical Approval

77
Lampiran 4 Data Berat Badan Hewan Coba
Tikus Aklimatisasi Minggu I Minggu II

A1 175 190 200
A2 175 200 200
A3 175 180 200
A4 150 180 180
A5 175 180 180
B1 200 200 175
B2 175 200 220
B3 200 180 250
B4 175 180 240
B5 200 180 250
C1 200 200 250
C2 175 200 200
C3 175 200 250
C4 200 200 250
C5 175 200 200
D1 200 200 250
D2 250 210 270
D3 200 180 250
D4 220 200 270
D5 150 180 200
E1 250 200 220
E2 170 180 175
E3 200 200 200
E4 200 180 250
E5 175 180 200
78
Lampiran 5 Kadar Hemoglobin Tikus Setelah Perlakuan
Kelompok Hemoglobin (mg/dl)

A1 8
A2 13
A A3 9,9
A4 11,8
A5 11,4
B1 9,5
B2 9,4
B B3 13,3
B4 12,3
B5 10,4
C1 10,6
C2 8,9
C C3 10,8
C4 10,9
C5 9,8
D1 8,2
D2 11,1
D D3 9,4
D4 12,2
D5 9,7
E1 9,9
E2 11
E E3 9,3
E4 8,9
E5 10,6
79
Lampiran 6 Data Rerata dan Hasil Analisis Statistik Kadar Hemoglobin
A. Analisis Univariat Kadar Hemoglobin Darah Tikus Putih
Case Processing Summary

Cases
Valid Missing Total
Kelompok N Percent N Percent N Percent
Hemoglobin A 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%
B 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%
C 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%
D 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%
E 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%
Descriptives
Std.
Kelompok Statistic Error
Hemoglobin A Mean 10.8200 .86163
95% Confidence Lower 8.4277
Interval for Mean Bound
Upper 13.2123
Bound
5% Trimmed Mean 10.8556
Median 11.4000
Variance 3.712
Std. Deviation 1.92666
Minimum 8.00
Maximum 13.00
Range 5.00
Interquartile Range 3.45
Skewness -.682 .913
Kurtosis -.055 2.000
B Mean 10.0400 .28036
Upper 10.8184
Bound
80
Median 10.0000
Variance .393
Std. Deviation .62690
Minimum 9.40
Maximum 10.90
Range 1.50
Skewness .445 .913
Kurtosis -1.391 2.000
C Mean 10.2000 .37815
Upper 11.2499
Bound
Median 10.6000
Variance .715
Minimum 8.90
Maximum 10.90
Range 2.00
Skewness -1.129 .913
Kurtosis .013 2.000
D Mean 10.1200 .69527
Upper 12.0504
Bound
Median 9.7000
Variance 2.417
Std. Deviation 1.55467
Minimum 8.20
Maximum 12.20
Range 4.00
81

Skewness .268 .913
Kurtosis -.826 2.000
E Mean 10.0600 .34438
Upper 11.0162
Bound
Median 10.1000
Variance .593
Minimum 8.90
Maximum 11.00
Range 2.10
Skewness -.634 .913
Kurtosis 1.261 2.000
82
B. Analisis Bivariat Kadar Hemoglobin Tikus Putih
1. Uji Normalitas (Shapiro-Wilk)
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Kelompok Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Hemoglobin A .218 5 .200* .963 5 .830
B .205 5 .200* .938 5 .651
C .282 5 .200* .863 5 .238
D .206 5 .200* .974 5 .901
*
E .218 5 .200 .969 5 .872
*. This is a lower bound of the true significance.
a. Lilliefors Significance Correction
2. Tes Homogenitas (Levene Test)
Test of Homogeneity of Variances

Hemoglobin
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
2.633 4 20 .065
3. One Way ANOVA
ANOVA
Hemoglobin
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between 2.122 4 .531 .339 .849
Groups
Within 31.320 20 1.566
Groups
Total 33.442 24
83
Lampiran 7 Jumlah Eritrosit tikus setelah perlakuan
Kelompok Eritrosit (x10/ul)

A1 6,37
A2 7,81
A A3 3,08
A4 6,86
A5 4,63
B1 3,41
B2 2,89
B B3 4,41
B4 4,88
B5 5,33
C1 5,87
C2 6,92
C C3 7,32
C4 7,06
C5 4,84
D1 4,02
D2 3,62
D D3 3,28
D4 6,68
D5 4,87
E1 4,06
E2 4,14
E E3 3,91
E4 4,98
E5 4,49
84
Lampiran 8 Rerata Kadar Hematokrit tikus setelah perlakuan

Kelompok Hematokrit (%)
A1 31,1
A2 47
A A3 19,7
A4 41,4
A5 26,3
B1 21,9
B2 18
B B3 27,1
B4 28,8
B5 32,8
C1 41,1
C2 34,2
C C3 41,3
C4 38,2
C5 28,3
D1 22,6
D2 21,2
D D3 18,9
D4 38,9
D5 27,9
E1 24
E2 23,6
E E3 24,1
E4 28
E5 27,4
85
Lampiran 9 Dokumentasi Penelitian
Pemberian ekstrak etanol seledri dengan menggunakan sonde lambung
Anestesi melalui intramuscular sbelum tikus dioperasi

86
Pencukuran rambut pada bagian yang hendak dilakukan insisi
5/6 Subtotal nephrectomy

87
Pengambilan sampel darah melalui sinus retroorbital
Terminasi hewan coba dengan metode dislokasi servikal

SKRIPSI AJENG SEKAR Dipake

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

SKRIPSI AJENG SEKAR Dipake

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

SKRIPSI

EFEK PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL SELEDRI (Apium graveolens L.)

KEMENTERIAN RISET, TEKNOLOGI, DAN PENDIDIKAN TINGGI

EFEK PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL SELEDRI (Apium graveolens L.)

Untuk memenuhi salah satu persyaratan memperoleh gelar

Disetujui dan disahkan

dr. Afifah, M.Sc Dr. dr. Eman Sutrisna, M.Kes

Dekan Fakultas Kedokteran Ketua Jurusan Kedokteran

Saya yang bertanda tangan di bawah ini:

Purwokerto, November 2018

Ajeng Sekar Kirana

Ajeng Sekar Kirana1, Afifah2, Khusnul Muflikhah3

Latar Belakang: Chronic Kidney Disease (CKD) didefinisikan sebagaiadalah

Ajeng Sekar Kirana1, Afifah2, Khusnul Muflikhah3

Background: Chronic Kidney Disease (CKD) is defined as kidney damage and /

Keywords: Celery, Apium graveolens L., haemoglobin, chronic kidney disease

DAFTAR TABEL ................................................................................................ x

II. TINJAUAN PUSTAKA

III. METODE PENELITIAN

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

V. KESIMPULAN DAN SARAN

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 68

Tabel 1.1 Keaslian Penelitian........................................................................... 6

Gambar 2.1 Seledri........................................................................................... 8

Lampiran 1 Prosedur 5/6 Subtotal Nefrektomi ............................................... 74

Chronic Kidney Disease (CKD) didefinisikan sebagai kerusakan ginjal

dan/atau penurunan Glomerular Filtration Rate (GFR) kurang dari

60mL/min/1,73 m2 selama minimal 3 bulan (KDIGO, 2012). CKD adalah

suatu proses patofisiologis dengan etiologi beragam yang menyebabkan

penurunan fungsi ginjal yang progresif (Tandi et al., 2014).

CKD merupakan masalah kesehatan masyarakat global dengan

yang tinggi. Di Indonesia, perawatan penyakit ginjal merupakan ranking

kedua pembiayaan terbesar dari BPJS kesehatan setelah penyakit jantung.

(Kementrian Kesehatan RI, 2017). Rata-rata biaya riil pengobatan CKD

dengan hemodialisis sebesar ialah Rp23.732.520,00 ± Rp19.142.379,00 per

Renal Data System, di Amerika Serikat prevalensi CKD meningkat 20-25%

setiap tahun (Tandi et al., 2014). RISKESDAS (2013) menyatakan bahwa

prevalensi CKD berdasarkan diagnosis dokter di Indonesia sebesar 0,2%. Di

Indonesia pada tahun 2015, pasien pengguna hemodialisis yang terdiagnosis

CKD ialah sebanyak 18.613 pasien (PERNEFRI, 2015).

Proses awal terjadinya CKD bergantung pada penyakit yang

mendasarinya, namun dalam progresivitasnya kurang lebih hampir sama

hipertensi, diabetes mellitus,

hiperlipidemia, obesitas, ataupun kebiasaan merokok (Kazancioğlu, 2013).

Progresivitas CKD berawal dari berkurangnya massa ginjal atau

berkurangnya nefron ginjal yang fungsional (Kasper et al., 2015 ; Thomas et

berfungsi sehingga akan terjadi hiperfiltrasi. Tekanan glomerular yang tinggi

secara terus menerus akibat hiperfiltrasi menyebabkan terjadinya proses

maladaptasi berupa kerusakan pada endotel glomerulus. Kemudian akan

juga stress oksidatif yang pada akhirnya mengakibatkan sklerosis glomerulus

dan fibrosis tubulointerstisial (Thomas et al., 2008). Apabila terjadi

kerusakan pada ginjal, maka akan mengakibatkan gangguan pada fungsi

ginjal, salah satunya adalah pembentukan hormon eritropoietin. Akibatnya

menyebabkan anemia (Brugnara dan Eckardt, 2011).

Anemia merupakan komplikasi yang sering terjadi pada CKD (Singh,

2008). Di Amerika Serikat, prevalensi anemia pada CKD ialah 15,4%.

Prevalensi anemia meningkat seiring dengan meningkatnya tahap CKD, yaitu

dengan gangguan kognitif, gangguan tidur, komorbiditas kardiovaskular, dan

mortalitas yang tinggi. Anemia juga mengakibatkan menurunnya kualitas

hidup karena dapat menyebabkan lemah, lesu, menurunnya produktivitas, dan

pengobatan juga lebih tinggi dibandingkan pasien CKD tanpa anemia

(Staufer dan Fan, 2014).

tahun (KDIGO,2012). Pada CKD sering kali terdapat penurunan kadar