Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

ilmu farmasi

Artikel

Biopharmaceutics of Topical Ophthalmic Suspension:

Pentingnya Viskositas dan Ukuran Partikel dalam Penyerapan
Mata Indometasin
Elisa Toropainen 1 , Sara J. Fraser-Miller 2, Dunja Novakovic 2, Eva M. Del Amo 1 , Kati-Sisko Vellonen 1, Marika
Ruponen 1, Tapani Viitala 2 , Ossi Korhonen 1, Seppo Auriola 1, Laura Helinen 1, Mika Reinisalo 1 ,
Unni Tengvall 1, Stephanie Choi 3, Mohammad Absar 3,4, Clare Strachan 2 dan Arto Urtti 1,5,6,*

----
---
Kutipan: Toropainen, E.; Fraser-
Miller, SJ; Novakovic, D.; Del Amo, EM;
Vellonen, K.-S.; Ruponen, M.; Viitala,
T.; Korhonen, O.; auriola,
S.; Hellenen, L.; dkk. Biopharmaceutics of
Topical Ophthalmic Suspension:
Pentingnya Viskositas dan Ukuran
Partikel dalam Penyerapan Mata dari
Indometasin. Ilmu farmasi 2021, 13, 452.
https://doi.org/10.3390/
1 Sekolah Farmasi, Universitas Finlandia Timur, 70211 Kuopio, Finlandia; elisa.toropainen@uef.fi (ET);
eva.delamo@uef.fi (EMDA); kati-sisko.vellonen@uef.fi (K.-SV); marika.ruponen@uef.fi (MR);
ossi.korhonen@uef.fi (OK); seppo.auriola@uef.fi (SA); laura.hellinen@uef.fi (LH); mika.reinisalo@uef.fi
(MR); unni.tengvall@uef.fi (UT)
2 Program Penelitian Obat, Divisi Kimia dan Teknologi Farmasi, Universitas Helsinki, 00014 Helsinki,
Finlandia; sara.miller@otago.ac.nz (SJF-M.); dunja.novakovic@helsinki.fi (DN); tapani.viitala@helsinki.fi
(TV); clare.strachan@helsinki.fi (CS)
3 Administrasi Makanan dan Obat-obatan, Rockville, MD 20993, AS; Stephanie.Choi@fda.hhs.gov (SC);
abir.absar@astrazeneca.com (MA)
4 AstraZeneca Pharmaceuticals, Rockville, MD 20878, AS
5 Program Penelitian Obat, Divisi Biosains Farmasi, Universitas Helsinki, 00014 Helsinki,
Finlandia
6 Laboratorium Teknologi Biohibrida, Institut Kimia, Universitas Negeri St. Petersburg, 198504
Peterhof, Rusia
* Korespondensi: arto.urtti@uef.fi ; Tel.: +35-840-5402-2279
Abstrak: Tetes mata obat yang sukar larut sering diformulasikan sebagai suspensi. Ketersediaan hayati obat tersuspensi tergantung pada retensi dan
pelarutan partikel obat dalam cairan air mata, tetapi faktor-faktor ini masih kurang dipahami. Kami menyelidiki tujuh suspensi indometasin okular
(suspensi eksperimental dengan dua ukuran partikel dan tiga viskositas, satu suspensi komersial) dalam uji fisik dan biologis. Ukuran partikel median (d
50) kategori suspensi eksperimental adalah 0,37-1,33 dan 3,12-3,50 μm dan tingkat viskositasnya adalah 1,3, 7,0, dan 15 mPa·S. Ukuran partikel yang
lebih kecil memfasilitasi penyerapan okular indometasin ke humor berair kelinci albino. Dalam aqueous humor, nilai AUC dari suspensi indometasin

farmasi13040452 dengan ukuran partikel yang berbeda, tetapi viskositas yang sama, berbeda pada kisaran 1,5 hingga 2,3 kali lipat. Viskositas yang lebih tinggi

meningkatkan penyerapan okular 3,4-4,3 kali lipat untuk suspensi dengan ukuran partikel yang sama. Secara keseluruhan, kisaran bioavailabilitas untuk

Editor Akademik: Francisco suspensi sekitar 8 kali lipat. Instilasi partikel yang lebih besar menghasilkan nilai AUC cairan air mata yang lebih tinggi dari total indometasin

Javier Otero-Espinar (tersuspensi dan terlarut) dibandingkan dengan penerapan partikel yang lebih kecil. Meskipun nilai AUC indometasin total cairan air mata ini, berangsur-

angsur partikel yang lebih besar menghasilkan tingkat AUC indometasin yang lebih kecil dalam humor berair. Hal ini menunjukkan bahwa partikel kecil
Diterima: 17 Maret 2021
menghasilkan konsentrasi indometasin terlarut yang lebih tinggi dalam cairan air mata, sehingga mengarah pada peningkatan bioavailabilitas okular.
Diterima: 24 Maret 2021
Kesimpulan baru ini didukung oleh pemodelan farmakokinetik okular. Baik ukuran partikel dan viskositas memiliki dampak yang signifikan pada
Diterbitkan: 26 Maret 2021
konsentrasi obat dalam cairan air mata dan bioavailabilitas obat mata dari suspensi topikal. Viskositas dan ukuran partikel adalah pemain kunci dalam

interaksi kompleks retensi obat dan pelarutan dalam cairan air mata, sehingga menentukan penyerapan obat okular dan bioekivalensi suspensi okular.
Catatan Penerbit: MDPI tetap netral
Baik ukuran partikel dan viskositas memiliki dampak yang signifikan pada konsentrasi obat dalam cairan air mata dan bioavailabilitas obat mata dari
sehubungan dengan klaim yurisdiksi
suspensi topikal. Viskositas dan ukuran partikel adalah pemain kunci dalam interaksi kompleks retensi obat dan pelarutan dalam cairan air mata,
dalam peta yang diterbitkan dan afiliasi
sehingga menentukan penyerapan obat okular dan bioekivalensi suspensi okular. Baik ukuran partikel dan viskositas memiliki dampak yang signifikan
institusional.
pada konsentrasi obat dalam cairan air mata dan bioavailabilitas obat mata dari suspensi topikal. Viskositas dan ukuran partikel adalah pemain kunci

dalam interaksi kompleks retensi obat dan pelarutan dalam cairan air mata, sehingga menentukan penyerapan obat okular dan bioekivalensi suspensi

okular.

Hak cipta: © 2021 oleh penulis.

Kata kunci: penyerapan okular; indometasin; penangguhan; bioekivalensi; pembubaran; ukuran
Penerima Lisensi MDPI, Basel, Swiss.
Artikel ini adalah artikel akses terbuka partikel; viskositas
yang didistribusikan di bawah syarat
dan ketentuan lisensi Creative
Commons Attribution (CC BY) (https://
creativecommons.org/licenses/by/
4.0/).

far maceutika 2021, 13, 452. https://doi.org/10.3390/pharmaceutics13040452 https://www.mdpi.com/journal/pharmaceutics

Ilmu farmasi 2021, 13, 452 2 dari 13

1. Perkenalan
Tetes mata yang dioleskan adalah bentuk sediaan yang paling umum digunakan dalam
perawatan obat mata. Mereka digunakan dalam pengobatan penyakit segmen anterior, seperti
infeksi, kondisi inflamasi, dan glaukoma. Namun demikian, bioavailabilitas okular obat setelah
pemberian obat tetes mata pada kelinci terbatas pada kurang dari 5% dari dosis yang diberikan,
seringkali kurang dari 1% [1]. Hal ini disebabkan oleh beberapa faktor pembatas: (1) penghalang
permeasi epitel kornea [2]; (2) drainase cepat obat yang ditanamkan dari permukaan mata [3]; dan
(3) absorpsi obat transkonjungtiva yang efektif ke dalam sirkulasi darah sistemik [4,5]. Pada
manusia, kecepatan kedipan dan drainase larutan dari permukaan okular juga cepat dan barrier
kornea rapat, menunjukkan bioavailabilitas okular yang rendah.6]. Pengiriman obat mata topikal
diilustrasikan pada Gambar1.

Gambar 1. Ilustrasi pemberian obat mata topikal dan farmakokinetik.

Konsentrasi obat dalam larutan tetes mata mata biasanya dalam kisaran 0,1% sampai
4%, tetapi konsentrasi obat tersebut dalam larutan sulit dicapai untuk obat hidrofobik, dan
oleh karena itu banyak formulasi obat tetes mata topikal adalah suspensi. Meskipun suspensi
oftalmik biasanya digunakan, sifat biofarmasinya kurang dipahami. Sangat sedikit studi
sistematis yang melibatkan suspensi okular telah diterbitkan, dan beberapa studi berasal dari
tahun 1980-an dan 1990-an.7–12]. Laporan penting ini menunjukkan bahwa ukuran partikel
mempengaruhi penyerapan okular deksametason.7] dan fluorometolon [8] dari suspensi
yang ditanamkan secara topikal pada kelinci. Peningkatan penyerapan obat dari partikel
berukuran nano juga telah diamati [13–18]. Studi-studi ini menunjukkan bahwa pembubaran
partikel tersuspensi berperan dalam penyerapan obat mata.
Dampak biofarmasi dan interaksi faktor formulasi, seperti viskositas dan ukuran
partikel, belum diselidiki atau dimodelkan secara sistematis. Di mata, faktor-faktor ini
mungkin memiliki dampak yang signifikan pada penyerapan obat mata karena volume tetes
mata yang khas (30-50μL) jauh lebih besar dari volume normal cairan lakrimal yang disangga
lemah (7 μL) [19]. Oleh karena itu, kemungkinan fitur formulasi (pH, viskositas, eksipien) dari
obat tetes mata menentukan kondisi fisik-kimia pada permukaan mata dan, oleh karena itu,
secara signifikan mempengaruhi penyerapan obat dari suspensi mata topikal.
Penting untuk membangun pemahaman yang lebih baik tentang penghantaran obat
dari suspensi mata. Memahami faktor biofarmasi kritis dari suspensi topikal okular akan
membantu dalam desain formulasi yang dioptimalkan untuk obat yang sukar larut. Di sisi
lain, pemahaman tentang suspensi harus mendorong pedoman peraturan untuk suspensi
okular generik bioekivalen, sehingga menghindari studi farmakokinetik yang mahal dan
memakan waktu. Pengambilan sampel aqueous humor dari pasien yang menjalani operasi
katarak direkomendasikan oleh FDA untuk menyelidiki bioekivalensi suspensi kortikosteroid [
20].
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 3 dari 13

Kami menyelidiki tujuh suspensi indometasin (satu komersial dan enam formulasi
eksperimental) menggunakan metode karakterisasi fisik dan studi penyerapan obat
okular in vivo pada kelinci. Model simulasi kinetik digunakan untuk membantu
interpretasi data.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

bahan: Satu suspensi indometasin komersial (Indom® 0,5%) dan enam suspensi uji
(INDO1, INDO2, INDO3, INDO4, INDO5, INDO6) dengan 0,5% indometasin diselidiki.
Indo® Suspensi 0,5% (Alfa Intes, Lot. 4115 Exp. 08.2017) dibeli dari Casoria, Italia.
Eksipien dari Indo® 0,5% termasuk hidroksipropil metilselulosa (HPMC) 4000, natrium
dihidrogen fosfat dihidrat, dinatrium fosfat dodekahidrat, natrium klorida, dinatrium
edetat, metilparaben, propilparaben, dan air murni. Konsentrasi eksipien dianalisis
dengan UPLC (lihat Bahan Tambahan).

Indometasin kelas farmasi dari Orion Pharma (Espoo, Finlandia) digunakan untuk
menyiapkan enam suspensi uji (INDO1-INDO6). HPMC E5 diperoleh dari Dow Chemicals
(Dow Chemicals, Midland, MI, USA), HPMC 4000 diperoleh dari Sigma-Aldrich (Sigma-
Aldrich, St. Louis, MO, USA), sedangkan HPMC K35M (Benecel™) ramah diberikan oleh
Ashland (Ashland, Covington, KY, USA). Sodium dihydrogen phosphate, disodium
phosphate, sodium chloride, ethylenediaminetetra acetic acid (EDTA), methylparaben,
dan propylparaben adalah kelas USP (jika ada) dan diperoleh dari Sigma-Aldrich (Sigma-
Aldrich, St. Louis, MO, USA). Air deionisasi adalah kelas Milli-Q.
Persiapan suspensi: Formulasi uji (INDO1-INDO6) berbeda dalam hal viskositas dan
ukuran partikel, menurut Tabel 1. Viskositas divariasikan dengan menggunakan nilai yang
berbeda dari HPMC, untuk mendapatkan rendah (≈1,3 mPa·s, HPMC E) (IND01 dan IND04),
sedang (≈7 mPa·s, HPMC 4000) (IND02 dan IND05), dan tinggi (15 mPa·s, formulasi viskositas
HPMC K35M) (IND03 dan IND06). Selain itu, suspensi uji memiliki ukuran partikel kecil (IND01-
IND03) atau besar (IND04-IND06) yang diperoleh dengan penggilingan basah. Meja2 berisi
ringkasan bahan dan konsentrasi masing-masing untuk masing-masing suspensi uji (50 mL).

Tabel 1. Kondisi persiapan untuk formulasi indometasin.

Sampel Ukuran partikel Parameter Penggilingan * Viskositas Viskositas yang Dihitung (mPa·S)

INDO1 Kecil Enam siklus pada 700 rpm dengan mutiara 1 mm Rendah ≈1.3 (HPMC E5)
INDO2 Kecil Enam siklus pada 700 rpm dengan mutiara 1 mm Sedang ≈7 (HPMC 4000)
INDO3 Kecil Enam siklus pada 700 rpm dengan mutiara 1 mm Tinggi ≈15 (HPMC K35M)
INDO4 Besar Satu siklus pada 1000 rpm dengan mutiara 5 mm Rendah ≈1.3 (HPMC E5)
INDO5 Besar Satu siklus pada 1000 rpm dengan mutiara 5 mm Sedang ≈7 (HPMC 4000)
INDO6 Besar Satu siklus pada 1000 rpm dengan mutiara 5 mm Tinggi ≈15 (HPMC K35M)
* setiap formulasi uji dengan ukuran partikel kecil (IND01-IND03) atau besar (IND04-IND06) disiapkan secara terpisah menggunakan kondisi penggilingan
yang sama.

Meja 2. Formulasi uji indometasin.

Komponen Formulasi Peran Konsentrasi

Indometasin
Bahan aktif farmasi 0,5 berat%
(pra-giling ke ukuran partikel tertentu)
HPMC Bahan pembasah dan penambah viskositas 0,3 berat%
Natrium dihidrogen fosfat, dinatrium fosfat Agen penyangga 78,16 dan 9,84 mM
Natrium klorida Agen pengatur tonisitas 35 mM
EDTA agen chelating 0,05%
Metilparaben Pengawet 0,0205%
propilparaben Pengawet 0,026%
Air deionisasi Kendaraan berair iklan 50 mL
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 4 dari 13

Penggilingan basah: Penggilingan basah dilakukan menggunakan penggilingan Pulverisette 7 (Fritsch,

Idar-Oberstein, Jerman) yang dilengkapi dengan mangkuk zirkonium oksida 45 mL dan 70 g mutiara
berdiameter 1 atau 5 mm. Indometasin mikron (2 g) digiling dalam larutan stabilizer (10 mL) dengan mutiara
berdiameter 1 mm pada 700 rpm selama 6× Siklus 3 menit dengan jeda pendinginan 15 menit untuk
menghasilkan partikel kecil dengan diameter sekitar 600 nm. Partikel yang lebih besar dihasilkan dengan
penggilingan dengan mutiara berdiameter 5 mm untuk satu siklus pada 1000 rpm. HPMC 4000 (0,5 wt.%)
digunakan sebagai penstabil. Obat dan larutan penstabil keduanya ditambahkan ke dalam mangkuk
penggilingan sebelum penggilingan dimulai. Komponen formulasi yang tersisa (seperti yang ditunjukkan pada
Tabel2), bersama dengan 1,5 g suspensi giling, ditambahkan ke larutan HPMC yang telah dilarutkan dengan
kadar yang telah ditentukan sebelumnya. Formulasi dengan ukuran partikel yang sama (INDO1-INDO3 dan
IND04-IND06) dibuat secara terpisah dengan menggunakan kondisi penggilingan yang sama.
pH dan kapasitas buffer: pH diukur menggunakan pH meter Fieldlab dengan probe
Schott Blueline 16pH. Sistem dikalibrasi dengan larutan buffer pH 4 dan 7. Kapasitas
buffer suspensi komersial diukur (dalam kombinasi dengan pH) untuk menentukan
konsentrasi buffer dalam suspensi komersial. Kapasitas penyangga (β) berhubungan
dengan perubahan jumlah mol asam atau basa (dn) dan perubahan pH yang terkait (
dpH) untuk 1 L ekivalen larutan: β = dn/dpH.
PH 2 mL suspensi komersial diukur sebelum dan sesudah penambahan 500 μL
natrium hidroksida (0,104 mol/L) ke dalam suspensi Indo.
Osmolalitas: Osmolalitas suspensi okular diukur menggunakan autoosmometer
osmostat OM-6020 (Daiichi Kagaku, Kyoto, Jepang). Osmometer dikalibrasi dengan air
Milli-Q dan larutan standar 300 dan 1000 mOsm/kg.
Viskositas: Viskositas suspensi Indom diukur menggunakan rheometer AR2000
(instrumen TA, New Castle, DE, USA), yang dikontrol menggunakan perangkat lunak
Rheology Advantage. Pengaturan cangkir dan rotor digunakan, terdiri dari cangkir standar
dengan rotor DIN (instrumen TA, New Castle, DE, USA). Viskositas INDO1-6 diperkirakan
berdasarkan spesifikasi grade HPMC.
Difraksi serbuk sinar-X: Difraksi serbuk sinar-X (XRPD) untuk konfirmasi bentuk padat
dilakukan menggunakan sistem XRD penemuan D8 (Bruker Optik, Ettlingen, Jerman).
Konfigurasi sisi primer terdiri dari tabung-Cu, WL = 1,54 ; celah bermotor (variabel); dan 2,5◦
sol aksial. Konfigurasi sisi sekunder termasuk 3◦ celah anti-hamburan, 2,5◦ soller aksial, filter
Ni 0,02 mm, dan detektor LYNXEYE (Bruker, Karlsruhe, Jerman) dalam mode 1D, terbuka
penuh (192 celah). Untuk bubuk curah digunakan pemegang sampel standar. Parameter
untuk serbuk curah terdiri dari kisaran sudut 3◦ ke 41◦, ukuran langkah 0,0161◦, dan waktu/
langkah 0,36 detik untuk memberikan waktu pengukuran total 15 menit. Celah divariasikan
antara 12 dan 22 mm berdasarkan ukuran permukaan sampel yang halus. Partikel dari
suspensi diukur menggunakan pemegang sampel tanpa latar belakang. Celah variabel diatur
ke 4 mm.
Distribusi ukuran partikel: Difraksi sinar laser untuk ukuran partikel dilakukan dengan
pengaturan Mastersizer 2000 termasuk attachment Hydro 2000s (Malvern Instruments Ltd.,
Worchestershire, UK). Latar belakang dikumpulkan menggunakan air Milli-Q. Larutan diukur
diencerkan dalam air Milli-Q (~200 mL) hingga konsentrasi yang memberikan tingkat respons
yang sesuai. Hasilnya dihitung berdasarkan indeks bias default (n = 1.52). Lima atau 10
pengukuran dikumpulkan dan dirata-ratakan. Kecepatan pompa/pengaduk 2975 rpm
digunakan untuk mengaduk sampel selama pengukuran.
Eksperimen penyerapan indometasin: Kelinci albino Selandia Baru (berat 2,5–3,0 kg)
digunakan dalam percobaan. Kelinci ditangani sesuai dengan pernyataan Animals in Research
Committee of ARVO (Association for Research in Vision and Ophthalmology, Rockville, Maryland,
MD, USA). Semua eksperimen hewan telah disetujui oleh Dewan Eksperimen Hewan nasional
Finlandia (Eläinkoelautakunta, ELLA; lisensi ESAVI/8893/04.10.07/2014). Hewan-hewan itu disimpan
di unit rumah konvensional yang melibatkan suhu, kelembaban, dan siklus terang/gelap 12/12
jam. Hewan-hewan itu hidup dengan pola makan normal, dan mereka ditempatkan dengan bebas
di lantai di kamar-kamar hewan. Indometasin untuk-
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 5 dari 13

mulations (INDO1, INDO2, INDO3, INDO4, INDO5, INDO6, Indo) diuji in vivo pada kelinci
untuk kinetika dalam cairan air mata, kornea, dan aqueous humor.
Pengumpulan sampel cairan air mata: Suspensi oftalmik diberikan ke limbus kornea-
sklera atas mata kelinci (25 μL/mata; n = 8–12; konsentrasi indometasin 0,5%). Sampel cairan
air mata 1μL diambil dari setiap mata dengan mikrokapiler sekali pakai (Microcaps,
Drummond Scientific, Broomall, PA, USA) pada titik waktu 1, 3, 5, 10, 20, 30, 60, dan 120
menit setelah berangsur-angsur, dan sampel segera diambil didinginkan di atas es setelah
penyimpanan di -80 ◦C sampai analisis lebih lanjut.
Koleksi sampel aqueous humor dan kornea: Suspensi indometasin diberikan ke limbus
kornea-sklera atas mata kelinci (25 μL/mata; n = 5 mata). Hewan dikorbankan pada waktu
yang ditentukan (15, 30, 60, 90, 120 dan 240 menit) setelah berangsur-angsur dengan
menyuntikkan pentobarbital dosis mematikan (Mebunat dokter hewan 60 mg/mL; Orion
Pharma) ke dalam vena telinga marginal. Mata diberi enukleasi, aqueous humor diambil dari
bilik mata depan dan jaringan kornea dibedah dan ditimbang. Sampel kornea diencerkan
1:10 dengan natrium klorida 0,9% dan dihomogenisasi menggunakan Ultra-Turrax®. Humor
berair dan sampel kornea dibekukan dalam nitrogen cair dan disimpan di-80 ◦C sebelum
analisis.
Kuantifikasi indometasin dalam sampel biologis: Sampel cairan air mata dicairkan di atas es
selama 10 menit setelah 1 menit berputar pada 13.000 rpm (4 ◦C). Sampel diencerkan dengan 50%
asetonitril yang mengandung standar internal (indomethacin-d4) pada konsentrasi 20 ng/mL.
Pengenceran kurva standar (0,5-500 ng/mL; tiga paralel) dibuat menggunakan larutan stok
indometasin (1 mg/mL; 50% asetonitril) dengan standar internal. Kontrol kualitas disiapkan dalam
sampel cairan air mata kosong yang diencerkan.
Humor berair dan sampel kornea yang dicairkan diencerkan 1:5 dalam larutan
natrium klorida 0,9%. Sampel encer 150μL dan standar internal (15 ng/mL) 10 μL dipipet
ke dalam botol kaca untuk ekstraksi obat. Sampel divorteks, dan 1 mL metil tersier butil
eter (MTBE) ditambahkan ke setiap sampel. Sampel dikocok dengan kuat selama 10
menit, dan fase dibiarkan terpisah selama 15 menit pada suhu kamar. Fase organik yang
mengandung indometasin yang diekstraksi dipindahkan ke botol kaca baru dan
diuapkan dalam centrifuge vakum. Residu kering dilarutkan dalam 50μL dari 30%
asetonitril. Kurva standar (0,02-500 ng/mL) dibuat dalam natrium klorida 0,9%, dan
ekstraksi MTBE dilakukan seperti dijelaskan di atas.
Analisis kuantitatif dilakukan dengan menggunakan LC-MS/MS, yang melibatkan
kromatografi cair seri Agilent 1290 dan spektrometer massa triple-quadrupole Agilent 6495
(Agilent Technologies, Inc., Santa Clara, CA, USA) dengan ionisasi elektrospray. Pemisahan
dilakukan dengan kolom Poroshell 120 SB-C18 (2.1× 50mm, 2,7 μm, Agilent, Santa Clara, CA,
USA) dan kolom pelindung Poroshell 120 SB-C18 (2.1 × 5mm, 2,7 μm, tangkas). Kolom
dipertahankan pada 50◦C. Fase gerak biner dengan elusi gradien digunakan (A: 0,1% asam
format dalam mQ-H2HAI; B: 100% metanol). Gradien dilakukan sebagai berikut: 40% fase
gerak B ditingkatkan menjadi 100% B dalam 5 menit, dijaga konstan selama 0,5 menit,
kemudian 100% B diturunkan menjadi 40% B dalam 0,1 menit dan dijaga konstan selama 1,4
menit Total waktu berjalan adalah 7 menit, laju alir 0,3 mL/menit, dan volume injeksi 2μL.
Parameter MS/MS disajikan pada Tabel 3.

Tabel 3. Parameter MS/MS dari analisis indometasin. Modus ion positif digunakan dalam ionisasi elestrospray (ESI).

Menggabungkan ESI Ion Prekursor Produk Ion 1 CE (eV) Produk Ion 2 CE (eV) Standar Internal
Indometasin + 358.01 138.9 17 110.9 49 Indometasin-d4
Indometasin-d4 + 364.01 143 16 /

Perhitungan dan simulasi farmakokinetik: Parameter farmakokinetik indometasin dalam

cairan air mata, kornea, dan aqueous humor dihitung menggunakan analisis data non-
kompartemen (perangkat lunak Phoenix, versi 6.3, Pharsight Inc., St. Louis, MO, USA). Dampak laju
disolusi dan retensi prekorneal dari suspensi indometasin pada penyerapan okular
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 6 dari 13

disimulasikan dengan perangkat lunak STELLA Professional (v. 10, ISEE Systems, Lebanon,
NH, USA). Laju disolusi hipotetis dalam kondisi wastafel (0 hingga 0,08 mnt-1) digunakan
dalam simulasi pada waktu = 0, dan setelah itu laju disolusi in vivo bergantung pada
kelarutan indometasin dan konsentrasi terlarutnya dalam cairan lakrimal (untuk model, lihat
Gambar S6). Laju disolusi ditentukan dengan persamaan: A× K (SC)/C, di mana A adalah sisa
indometasin yang tidak larut, K adalah konstanta laju disolusi orde pertama dalam kondisi
wastafel, S adalah kelarutan indometasin dalam air, dan C adalah konsentrasi simulasi
indometasin dalam cairan air mata. Hilangnya obat bebas dari cairan air mata didasarkan
pada faktor klirens yang diketahui untuk molekul kecil [1,4,21], sedangkan retensi partikel
tersuspensi dalam cairan air mata divariasikan menggunakan tingkat eliminasi orde pertama
dalam kisaran 0,05 hingga 0,3 menit.-1 (sesuai dengan waktu paruh 2,3-14 menit). Nilai
molekul kecil yang khas untuk permeasi kornea, volume distribusi di bilik mata depan, dan
eliminasi dari bilik mata depan digunakan untuk indometasin (Tabel S2).

3. Hasil
3.1. Karakterisasi Fisik dan Kimia Suspensi
Ukuran partikel, viskositas, pH, dan osmolalitas suspensi satu uji (INDO5)
disesuaikan agar mirip dengan produk komersial Indo® (Meja 4). Kapasitas buffer Indo®
adalah sekitar 0,020, yang sesuai dengan konsentrasi komponen penyangga 78,2 mM
natrium dihidrogen fosfat dan 9,8 mM dinatrium fosfat. Konsentrasi EDTA (500μg/mL),
metilparaben (205 μg/mL), dan propilparaben (260 μg/mL) dalam Indom diukur dengan
kromatografi cair ultra-kinerja (UPLC) (lihat Bahan Tambahan).

Tabel 4. Sifat fisik dan kimia suspensi.

Ukuran partikel

sampel e
Difraksi Cahaya Laser SEM Viskositas yang Dihitung Osmolalitas
pH
(mPa·S) (mOsm/kg)
D10 (μM) D20 (μM) D50 D80 D90 Rentang Penglihatan (μM)
(μM) (μM) (μM)
INDO1 0.19 0,22 0.43 2.48 5.90 0,1–2 ≈1.3 (HPMC E5) 241 5.80
INDO2 0,29 0,45 1.33 7.30 14.00 0,1–3 ≈7 (HPMC 4000) 239 5.90
INDO3 0.18 0,22 0.37 3.28 12.81 0,1–4 ≈15 (HPMC K35M) 239 5.84
INDO4 0,69 1.22 3.23 5.56 7.21 0,4–4 ≈1.3 (HPMC E5) 241 5.82
INDO5 0,74 1.50 3.50 6.03 7.40 0,4–3 ≈7 (HPMC 4000) 242 5.89
INDO6 0,80 1.32 3.12 6.40 9.42 0,4–4 ≈15 (HPMC K35M) 236 5.91
Indo® 0,90 2.75 5.48 9.06 11.40 0,5–5 (massal), 20–50 (sedikit) ≈7 (diukur) 232 5.90

Pengukuran partikel dengan laser light diffraction (LLD) menunjukkan bahwa kondisi milling yang
berbeda menghasilkan dua kelompok suspensi yang berbeda dengan partikel yang lebih kecil (INDO1-INDO3)
dengan diameter median (d50) dari 0,37-1,33 μm dan partikel yang lebih besar (INDO4-INDO6) dengan d50
dari 3,12–3,50 μm (Tabel 4; Gambar S3). Penangguhan komersial (Indom®) memiliki iklan50 dari
5,48 μM. Scanning electron microscopy (SEM) gambar dari partikel suspensi ditunjukkan pada
Gambar S1 dan S2. Rentang ukuran partikel yang diamati secara visual dalam gambar SEM
sebagian besar mirip dengan yang diukur dengan LLD. Namun, LLD menunjukkan adanya
beberapa partikel yang lebih besar yang tidak diamati dengan SEM. Hal ini dapat dikaitkan dengan
dua faktor; pertama, jumlah partikel yang diperiksa dengan SEM jauh lebih kecil daripada LLD,
membuat sub-sampling lebih menjadi masalah, dan kedua, LLD melaporkan distribusi
berdasarkan distribusi volume yang condong ke ukuran partikel yang lebih besar.
Viskositas Indo® suspensi adalah 7 mPa·S. Suspensi uji dengan viskositas sedang
(INDO2, INDO5) dirancang untuk memiliki viskositas yang mirip dengan Indo2®
penangguhan. Formulasi viskositas rendah (INDO1, INDO4) memiliki viskositas terhitung 1,3
mPa·s, dan formulasi viskositas tinggi (INDO3, INDO6) memiliki viskositas terhitung 15 mPa·
stabil 4).
Hasil XRPD mengkonfirmasi bahwa bubuk indometasin mentah dan Indom® suspensi memiliki
bentuk polimorfik (Gambar S4). Selama pengembangan metode, juga dikonfirmasi bahwa
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 7 dari 13

penggilingan tidak menyebabkan perubahan keadaan padat, dan dengan demikian suspensi uji juga mengandung γ
membentuk.

3.2. Penyerapan Indometasin ke Mata Kelinci

Konsentrasi indometasin dipantau dalam cairan air mata setelah pemberian topikal
suspensi mata ke mata kelinci. Jelas bahwa ukuran partikel dan viskositas memiliki
dampak pada konsentrasi indometasin dalam cairan air mata.2, kiri). Peningkatan
viskositas dalam suspensi memperpanjang retensi obat dalam cairan air mata,
sedangkan ukuran partikel yang lebih kecil menurunkan retensi indometasin dalam
cairan air mata.2, tengah, kanan).

Gambar 2. Kiri. Konsentrasi rata-rata indometasin dalam cairan air mata kelinci setelah pemberian suspensi (Indom®, INDO1-
INDO6). Tengah. Konsentrasi indometasin (rata-rata± SEM) dalam cairan air mata setelah pemberian partikel kecil seperti
suspensi rendah (INDO1), sedang (INDO2), dan viskositas tinggi (INDO3). Benar. Konsentrasi indometasin (rata-rata± SEM)
dalam cairan air mata setelah pemberian partikel besar seperti suspensi rendah (INDO4), sedang (INDO5), dan viskositas tinggi
(INDO6).

Data dianalisis lebih lanjut untuk menghitung nilai AUC dalam cairan air mata, berdasarkan
konsentrasi rata-rata indometasin dari waktu ke waktu (Tabel 5). AUC meningkat 3,5-4,0 kali lipat dengan
meningkatkan viskositas suspensi pada ukuran partikel yang sama. Peningkatan lipat serupa dalam nilai
AUC pada peningkatan viskositas terlihat untuk partikel kecil dan partikel besar. Konsentrasi pada 1
menit (C1 menit) meningkat 2,4-4,0 kali dengan meningkatnya viskositas tetes mata, tetapi pada ukuran
partikel yang sama, dalam cairan lakrimal. Konsentrasi indometasin dalam cairan air mata (AUC, C1 menit)
lebih kecil setelah pemberian partikel kecil (INDO1-3) dibandingkan setelah penerapan partikel yang
lebih besar (INDO4-6) pada viskositas yang sama.

Tabel 5. Analisis farmakokinetik konsentrasi indometasin dalam cairan air mata. AUC adalah luas daerah di bawah
kurva sampai tak terhingga.

AUC C1 menit
Perumusan CV% CV%
(min × μg/mL) (μg/mL)

Indo® 6312 25 216 33

INDO1 1299 15 63 19
INDO2 4379 17 238 20
INDO3 5197 17 299 20
INDO4 6718 20 400 24
INDO5 10.849 19 445 24
INDO6 23.517 11 1480 13

Konsentrasi indometasin dalam humor berair kelinci disajikan pada Gambar 3. Ukuran
partikel dan viskositas berpengaruh terhadap konsentrasi indometasin. Viskositas suspensi yang
meningkat (INDO3 > INDO2 > INDO1; INDO6 > INDO5 > INDO4) pada kategori ukuran partikel
yang sama meningkatkan permeasi obat ke aqueous humor baik untuk ukuran kecil maupun
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 8 dari 13

partikel besar (Gambar 3). Penyerapan indometasin ke aqueous humor (AUC) setelah berangsur-angsur
partikel kecil lebih tinggi daripada setelah partikel yang lebih besar dengan viskositas yang sama (Tabel6
). Peningkatan viskositas meningkatkan bioavailabilitas okular sebanyak 3-4 kali untuk partikel kecil dan
besar (Tabel6). Aplikasi topikal IND05 dan Indo® menghasilkan pengiriman obat yang mirip dengan
humor berair (Gambar 3, Meja 6). Tren serupa seperti pada humor berair juga terlihat pada tingkat obat
kornea (Gambar S5).

Gambar 3. Konsentrasi indometasin dalam humor berair kelinci setelah pemberian suspensi topikal. Hasilnya mewakili
mean± nilai SEM kecil (Kiri) dan partikel besar (Benar) suspensi. Suspensi indometasin komersial (Indom®) termasuk
dalam kedua gambar untuk referensi.

Tabel 6. Parameter farmakokinetik indometasin topikal diterapkan dalam humor berair kelinci. AUC adalah luas daerah di bawah kurva
sampai tak terhingga.

AUC0–4j AUC Waktu Paruh Terminal

Perumusan Cmaksimal Tmaksimal

(min × μg/mL) (min × μg/mL) (μg/mL) (menit) (menit)

Indo® 45.9 52.1 0,012 78 402

INDO1 82.0 89.7 0,008 59 636
INDO2 94.9 104.7 0,009 63 654
INDO3 204.9 301.6 0,032 127 13.826
INDO4 35.5 39.2 0,010 59 256
INDO5 57.5 67.8 0,015 76 422
INDO6 126.3 166.2 0,024 107 744

Angka 4 memplot dampak viskositas dan ukuran partikel pada nilai AUC dalam humor berair
kelinci. Nilai AUC meningkat dengan penurunan ukuran partikel dalam aqueous humor, sedangkan
peningkatan viskositas meningkatkan nilai AUC dalam aqueous humor. Secara keseluruhan, kisaran
ketersediaan hayati okular (AUC) sekitar 8 kali lipat untuk AUC, dan Cmaksimal menunjukkan rentang 4 kali
lipat (Gambar 4).
Dibandingkan dengan partikel yang lebih besar, ukuran partikel yang lebih kecil
menghasilkan konsentrasi indometasin yang lebih tinggi di kornea (Gambar S5) dan humor berair
(Gambar 3), meskipun nilai AUC indometasin dalam cairan lakrimal lebih rendah untuk partikel
kecil daripada partikel besar (Gambar 5). Ukuran partikel yang lebih kecil menghasilkan
peningkatan pengiriman indometasin ke aqueous humor ketika dinormalisasi dengan nilai AUC
dalam cairan air mata (Gambar4).
farmasi 13

Gambar 4. Kiri: Farmakokinetik indometasin okular pada kelinci. Nilai AUC untuk konsentrasi rata-rata indometasin dalam humor berair
(lingkaran) dan cairan air mata (segitiga) ditampilkan. Simbol yang jelas menggambarkan data dari kecil (ukuran rata-rata 0,4–1,3μm) partikel
suspensi, dan simbol yang diisi adalah untuk partikel besar (ukuran rata-rata 3.1–3.5 μm) pada tiga tingkat viskositas yang berbeda (x-sumbu).
Benar: Plot AUC dalam humor berair vs. AUC dalam cairan air mata. Simbol yang diisi adalah untuk partikel yang lebih besar (ukuran rata-rata 3.1–
3.5μm) dan simbol yang jelas untuk partikel yang lebih kecil (ukuran rata-rata 0,4–1,3 μM). Indo termasuk sebagai formulasi viskositas sedang
dengan partikel besar di kedua gambar.

Gambar 5. Simulasi AUC0–4j nilai-nilai dalam humor berair kelinci sebagai fungsi dari konstanta laju disolusi pada kondisi tenggelam.
Batang mewakili rentang AUC experimental eksperimental0–4j nilai pada kelinci setelah penanaman partikel suspensi besar (biru) dan
kecil (merah).

3.3. Simulasi Farmakokinetik

Meningkatkan retensi partikel dalam cairan air mata (laju eliminasi: 0,05–0,3 menit-1 dalam cairan
air mata) meningkatkan simulasi AUC dalam aqueous humor sekitar 4 kali lipat, sedangkan
meningkatkan laju disolusi pada kondisi sink (dari 0,01 menjadi 0,08 menit-1) meningkatkan AUC dalam
aqueous humor sekitar 2 kali lipat (Gambar 5). Nilai AUC yang disimulasikan dan diamati dari Tabel6
berada dalam kisaran yang sama (Gambar 5). Dalam kasus simulasi dengan faktor lakrimasi yang
diinduksi, kadar AUC dalam aqueous humor setelah pemberian suspensi partikel kecil berada dalam
kisaran nilai AUC yang disimulasikan pada laju disolusi tinggi (≈0,08 menit-1), sedangkan nilai AUC
suspensi partikel besar lebih cocok dengan nilai simulasi untuk pelarutan lambat. Tanpa lakrimasi yang
diinduksi, nilai AUC yang disimulasikan meningkat menjadi sekitar 1,5 kali lipat tingkat yang lebih tinggi
(Gambar5).

4. Diskusi
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa viskositas suspensi oftalmik memiliki dampak yang
jelas pada penyerapan indometasin okular. Meningkatkan viskositas dari 1,3 menjadi 15 mPa
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 10 dari 13

menghasilkan sekitar 4 kali lipat peningkatan penyerapan okular (yaitu, AUC dalam humor berair).
Dengan demikian, viskositas harus menjadi pertimbangan penting ketika suspensi oftalmik
diformulasikan. Studi sebelumnya menunjukkan bahwa viskositas yang lebih tinggi meningkatkan
penyerapan obat mata dari larutan tetes mata.22,23] dan suspensi budesonida [9]. Di sisi lain,
diketahui bahwa peningkatan viskositas meningkatkan ketebalan lapisan air yang tidak diaduk di
sekitar partikel obat.24], tetapi faktor ini harus menurunkan laju disolusi dan mengurangi
penyerapan obat. Jadi, penebalan lapisan air yang tidak diaduk di sekitar partikel suspensi tidak
penting secara in vivo, dan dampak viskositas pada retensi obat pada permukaan mata
merupakan faktor dominan. Perlu dicatat bahwa sifat aliran reologi berdampak pada penyerapan
obat mata. Hal ini relevan jika polimer dengan reologi non-Newtonian dan karakteristik
penyebaran pseudoplastik pada permukaan mata digunakan (misalnya, karboksimetilselulosa,
hidroksipropilselulosa) [25]. Rupanya, viskositas tetes mata yang lebih tinggi mampu
mempertahankan partikel suspensi dan larutan dalam cairan air mata, seperti yang ditunjukkan
pada data cairan air mata konsentrasi indometasin (Tabel5). Penting untuk dicatat bahwa sampel
kapiler cairan air mata termasuk indometasin terlarut dan tidak larut.
Ukuran partikel yang lebih kecil dalam suspensi menghasilkan peningkatan rasio permukaan
terhadap volume dan pembubaran obat lebih cepat. Dalam kasus indometasin, pembubaran lebih cepat
dari partikel yang lebih kecil menyebabkan penyerapan obat mata yang lebih tinggi; suspensi dengan
ukuran partikel kecil (0,4–1,3μm) menunjukkan pengiriman obat sekitar dua kali lebih tinggi ke humor
berair dibandingkan dengan partikel besar (3,1–3,5 μm) suspensi. Menariknya, suspensi dengan partikel
indometasin kecil sebenarnya dihilangkan lebih cepat dari cairan air mata daripada partikel yang lebih
besar, karena nilai AUC dalam cairan air mata menurun dengan ukuran partikel yang lebih kecil (Gambar
2). Meskipun eliminasi lakrimal lebih cepat dan AUC lebih rendah dalam cairan air mata, suspensi partikel
kecil menghasilkan peningkatan penyerapan obat ke dalam mata (Gambar4). Hubungan yang identik
antara nilai AUC dalam cairan air mata dan dalam aqueous humor harus dilihat jika fraksi obat terlarut
dalam cairan air mata identik pada kedua kasus. Dibandingkan dengan partikel yang lebih besar,
proporsi yang lebih tinggi dari indometasin larut dalam cairan air mata setelah penerapan partikel kecil,
sehingga menyebabkan peningkatan penyerapan obat mata. Dengan demikian, retensi suspensi dalam
cairan air mata tidak berkorelasi secara linier dengan penyerapan obat (Gambar ).5).
Simulasi farmakokinetik dilakukan untuk menyelidiki dampak pelarutan partikel dalam
penyerapan indometasin okular. Karena nilai parameter yang tepat untuk indometasin tidak
tersedia, kami menggunakan nilai parameter yang diharapkan untuk indometasin (pembersihan
nonproduktif dari cairan lakrimal dengan dan tanpa induksi lakrimasi, pembersihan dari cairan
lakrimal ke kornea, pembersihan dari aqueous humor) (Gambar S6, Tabel S2 ). Simulasi
indometasin AUC dalam aqueous humor pada berbagai waktu retensi dan laju disolusi partikel
tersuspensi menghasilkan hasil yang realistis yang sesuai dengan pengamatan eksperimental,
terutama ketika induksi lakrimasi dimasukkan dalam model (Gambar4). Simulasi mengungkapkan
beberapa aspek menarik. Pertama, peningkatan laju disolusi obat menghasilkan bioavailabilitas
okular yang lebih tinggi, tetapi peningkatannya tidak linier, menunjukkan bahwa kondisi sink
mungkin tidak berlaku dalam cairan lakrimal. Kedua, peningkatan retensi partikel pada permukaan
okular menghasilkan AUC yang lebih tinggi dalam humor aquos, tetapi peningkatan ini juga non-
linear (sekitar 4 kali lipat peningkatan AUC, sedangkan konstanta laju eliminasi bervariasi pada
kisaran 6 kali lipat) . Simulasi sebelumnya juga menyarankan perilaku non-linier dari suspensi
deksametason mata [26]. Kami tidak tahu bioavailabilitas absolut indometasin dalam humor akuos
karena pembersihan intrakameral indometasin tidak diketahui. Namun, kemungkinan
pembersihan intracameral indometasin berada dalam kisaran nilai yang dilaporkan baru-baru ini
(6,4 hingga 32μL/mnt) untuk molekul kecil yang disuntikkan secara intrakameral [27]. Dengan nilai-
nilai ini kita dapat memperkirakan bahwa bioavailabilitas okular suspensi indometasin dengan
partikel yang lebih kecil dan lebih besar adalah 0,4-1,3% dan 0,2-0,7%, masing-masing.

Simulasi kami menunjukkan bahwa konsentrasi indometasin terlarut dalam cairan lakrimal pada
laju disolusi 0,1-0,8 menit-1 berada di kisaran 3 hingga 20 dan 10 hingga 23 μg/mL pada tingkat
penghilangan partikel 0,05 dan 0,3 menit-1, masing-masing. Karena kelarutan indometasin dalam air
pada pH netral adalah 43μg/mL, kami menyimpulkan bahwa pembubaran tersuspensi
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 11 dari 13

partikel dipengaruhi oleh obat terlarut dalam cairan air mata dan kondisi wastafel mungkin tidak
berlaku secara in vivo. Publikasi sebelumnya menunjukkan bahwa hanya sebagian kecil dari
partikel fluorometholon yang larut setelah pemberian topikal pada mata kelinci.8,10,28]. Kita
dapat mencapai kesimpulan ini karena AUC dalam humor akuos hanya meningkat≈2-4 kali lipat
dengan suspensi dibandingkan dengan larutan fluorometolone, meskipun dosis obat dalam
suspensi (25 μg) adalah 67 kali lebih tinggi daripada dalam larutan (0,375 μG). Oleh karena itu, tes
disolusi in vitro melebih-lebihkan laju disolusi partikel suspensi, dan metode disolusi yang lebih
realistis meniru pembersihan obat dari cairan air mata mungkin memberikan estimasi yang lebih
akurat dari pembubaran obat pada permukaan mata.
Bioekivalensi suspensi okular tidak terbukti dengan sendirinya, bahkan jika suspensi memiliki
komposisi serupa. Distribusi ukuran partikel dapat bervariasi karena pemrosesan suspensi, dan ini
menyebabkan perubahan disolusi obat dan absorpsi obat mata. Di sini kami menunjukkan bahwa
ukuran partikel memang memiliki pengaruh terhadap penyerapan obat dari suspensi dengan
viskositas yang sama (Gambar3). Demikian pula, perbedaan viskositas menyebabkan perubahan
penyerapan indometasin dari suspensi dengan ukuran partikel yang sama (Gambar ).3). Kisaran
yang dapat diterima untuk laju disolusi dan viskositas tergantung pada sensitivitas absorpsi obat
mata terhadap parameter ini. Biasanya, nilai AUC produk generik harus berada dalam kisaran 80%
hingga 125% dari nilai originator [29,30]. Perubahan ukuran partikel dan viskositas suspensi pada
penelitian ini menghasilkan perubahan nilai AUC yang lebih besar, namun simulasi pada Gambar4
memberikan beberapa petunjuk tentang sensitivitas AUC terhadap laju disolusi dalam kondisi sink.
Misalnya, jika kita mempertimbangkan formulasi viskositas sedang dan laju disolusi 0,04 menit-1,
tampaknya laju disolusi 0,03–0,06 menit-1 menghasilkan nilai AUC rata-rata dalam batas
bioekivalensi. Pertimbangan teoretis ini, bagaimanapun, tidak memperhitungkan faktor
variabilitas antar mata pelajaran yang penting [20]. Variabilitas klinis juga dipengaruhi oleh laju
sedimentasi suspensi. Pasien harus mengocok botol suspensi sebelum pemberian tetes mata,
tetapi waktu antara pengocokan, dan pemberian dapat bervariasi serta tingkat sedimentasi.
Dalam penelitian ini, suspensi ditanamkan segera setelah dikocok untuk meminimalkan dampak
sedimentasi.

5. Kesimpulan
Sifat biofarmasi dari suspensi okular topikal masih kurang dipahami. Di sini, kami
menunjukkan bahwa ukuran partikel dan viskositas suspensi indometasin mempengaruhi
ketersediaan hayati okular pada kisaran 8 kali lipat. Peningkatan viskositas meningkatkan
penyerapan indometasin okular 2,5-3,5 kali lipat untuk suspensi dengan ukuran partikel yang
sama, sementara ukuran partikel yang lebih kecil meningkatkan penyerapan dari suspensi
equiviscous 1,6-2,3 kali lipat. Hebatnya, total konsentrasi indometasin dalam cairan air mata
terputus dari ketersediaan hayati okular, karena suspensi dengan partikel yang lebih besar
memiliki nilai AUC yang lebih tinggi dalam cairan air mata daripada suspensi partikel kecil.
Data dan simulasi ini menunjukkan bahwa hanya sebagian kecil dari partikel tersuspensi
yang larut dalam cairan air mata, dan pelarutan memiliki dampak signifikan pada
bioavailabilitas obat mata.

Bahan Tambahan: Berikut ini tersedia secara online di https://www.mdpi.com/article/10 . 3390/

farmasi13040452/s1, Gambar S1: Gambar SEM suspensi uji INDO1-INDO3 pada perbesaran
berbeda, Gambar S2: Gambar SEM suspensi INDO4-INDO6 pada perbesaran berbeda, Gambar S3:
Distribusi ukuran partikel suspensi indometasin, Gambar S4: Difraktogram yang dihitung untuk
dan bentuk indometasin dibandingkan dengan difraktogram terukur untuk indometasin padat dan
Indom® padat dari suspensi, Gambar S5: Konsentrasi indometasin dalam kornea kelinci setelah
pemberian suspensi topikal, Gambar S6: Struktur model simulasi, Tabel S1: Parameter gradien fase
gerak yang digunakan untuk UPLC suspensi komersial, Tabel S2: Farmakokinetik parameter
simulasi.
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 12 dari 13

Kontribusi Penulis: Metodologi, ET, EMDA, K.-SV, OK, SA, LH, MR (Mika Reinisalo), UT, SJF-M., DN
dan TV; analisis formal, ET, EMDA, K.-SV, SA, UT, SJF-M. dan DN; penyidikan, ET, EMDA, K.-SV, MR
(Mika Reinisalo), OK, SA, LH, MR (Marika Ruponen), UT, SJF-M., DN dan TV; sumber daya, MA, SC, CS
dan AU; kurasi data, ET, EMDA, K.-SV,
SA, SJF-M. dan DN; menulis—persiapan draf asli, AU; menulis—meninjau dan mengedit,
ET, EMDA, SA, SJF-M., MR (Marika Ruponen), DN, SC, MA dan CS; pengawasan, MA,
SC, SA, CS dan AU; akuisisi pendanaan, CS dan AU Semua penulis telah membaca dan menyetujui
versi naskah yang diterbitkan.

Pendanaan: Administrasi Makanan dan Obat AS (FDA) memberikan U01FD005180. Biocenter Finland dan
Biocenter Kuopio mendukung laboratorium Kuopio LC/MS.

Pernyataan Dewan Peninjau Kelembagaan: Penelitian dilakukan sesuai dengan pedoman

Deklarasi Helsinki, dan disetujui untuk eksperimen di Universitas Finlandia Timur oleh Komite Etika
(kode protokol (nomor lisensi ESAVI/8621/04.10.07/2017, 13 Desember 2017)). Semua percobaan
hewan dilakukan oleh personel yang berwenang.

Pernyataan Persetujuan yang Diinformasikan: Tak dapat diterapkan.

Pernyataan Ketersediaan Data: Data terkandung dalam artikel dan Materi Tambahan. Data tambahan
yang disajikan dalam penelitian ini tersedia atas permintaan dari penulis.

Ucapan terima kasih: Food and Drug Administration (FDA) AS mendukung penelitian ini (Grant
U01FD005180). Ashland diakui telah memberi kami sampel gratis HPMC K35M.

Konflik kepentingan: MA adalah karyawan AstraZeneca Pharmaceuticals. Perusahaan tidak memiliki peran
dalam desain penelitian; dalam pengumpulan, analisis, atau interpretasi data; dalam penulisan naskah, dan
dalam keputusan untuk mempublikasikan hasilnya. Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Referensi
1. Urtti, A.; Pipkin, JD; Rok, GS; Sendo, T.; Finne, U.; Repta, AJ Mengontrol perangkat pengiriman obat untuk studi okular eksperimental dengan
timolol. 2. Penyerapan okular dan sistemik pada kelinci.Int. J. Farmasi.1990, 61, 241–249. [CrossRef]
2. Huang, HS; Schoenwald, RD; Lach, JL Permeasi kornea dari agen beta-blocking II: Penilaian kontribusi penghalang.J. Farmasi. Sci.
1983, 72, 1272–1279.
3. Lee, VHL; Robinson, JR Evaluasi mekanistik dan kuantitatif disposisi pilokarpin prekorneal pada kelinci albino.J. Farmasi. Sci.1979,
68, 673–684. [CrossRef]
4. Thombre, AG; Himmelstein, KJ Evaluasi kuantitatif pilocarpine topikal diterapkan di daerah prekorneal.J. Farmasi. Sci.1984, 73,
219–222. [CrossRef]
5. Urtti, A.; Salminen, L.; Miinalainen, O. Penyerapan sistemik pilocarpine okular dimodifikasi oleh matriks polimer.Int. J. Farmasi. 1985, 23,
147-161. [CrossRef]
6. Darah Sejati, JH; Rossomondo, RM; Carlton, WH; Wilson, LA Waktu kontak kornea kendaraan oftalmik.Lengkungan. Oftalmol. 1975
, 93, 127-130. [CrossRef] [PubMed]
7. Schoenwald, RD; Stewart, P. Pengaruh ukuran partikel pada bioavailabilitas oftalmik suspensi deksametason pada kelinci.J.
Farmasi. Sci.1980, 69, 391–394. [CrossRef] [PubMed]
8. Sieg, JW; Robinson, JR Studi mekanistik pada permeasi transkorneal dari fluorometolone.J. Farmasi. Sci.1981, 70, 1026–1029. [
CrossRef]
9. Vooturi, S.; Bourne, D.; Panda, JJ; Choi, S.; Kim, H.; Yandrapu, SK; Kompella, UB Pengaruh ukuran partikel dan viskositas suspensi
pada bioavailabilitas okular topikal budesonide, kortikosteroid.J. Okul. Farmasi. Ada.2020, 36, 404–409. [CrossRef]
10. Hui, HW; Robinson, JR Pengaruh laju disolusi partikel pada bioavailabilitas obat mata.J. Farmasi. Sci.1986, 75, 280–287. [CrossRef]

11. Johansen, S.; Prause, JU; Rask-Pedersen, E. Perbandingan bioavailabilitas pada kelinci setelah aplikasi okular tunggal prednisolon asetat
yang diformulasikan sebagai gel dengan viskositas tinggi dan sebagai suspensi berair.Acta Oftalmol. Pindai.1996, 74, 253–258. [
CrossRef] [PubMed]
12. Calvo, P.; Alonso, MJ; Vila-Jato, JL; Robinson, JR Peningkatan bioavailabilitas okular indometasin oleh pembawa obat okular baru.
J. Farmasi. Farmasi.1996, 48, 1147–1152. [CrossRef] [PubMed]
13. Mulai, B.; Ortiz, T.; Perez-Aranda, M.; Martinez, G.; Merinero, M.; Arguelles-Arias, M.; Alcudia, A. nanopartikel Polimer untuk pengiriman
obat: Perkembangan terkini dan prospek masa depan.bahan nano 2020, 10, 1403. [CrossRef]
14. Hany, SM; Ali, AB; York, P.; Ahmad, MA; Ali, C.; Blagden, N. Hidrokortison nanosuspensions untuk pengiriman mata: Sebuah studi
perbandingan antara nanopresipitasi mikofluida dan penggilingan basah.J. Kontrol. Melepaskan2011, 149, 175-181.
15. Luschmanna, C.; Hermann, W.; Strauß, O.; Luschmann, K.; Goepferich, A. Sistem pengiriman okular untuk obat yang sukar larut: Evaluasi
in-vivo.Int. J. Farmasi.2013, 455, 331–337. [CrossRef]
Ilmu farmasi 2021, 13, 452 13 dari 13

16. Sheppard, JD; Kokrum, PC; Keadilan, A.; Jasek, MC Farmakokinetik in vivo larutan tetes mata bromfenac 0,075%, larutan tetes
mata Bromfenac 0,07%, dan suspensi tetes mata Nepafenac/Amfenac 0,3% pada kelinci.Oftalmol. Ada.2018, 7, 157–165. [
CrossRef]
17. Zhou, X.; Li, X.; Xu, J.; Cheng, Y.; Cao, tetes mata suspensi mikroagregat siklodekstrin F. Latanoprost untuk meningkatkan bioavailabilitas
dan stabilitas.eur. J. Farmasi. Sci.2021, 160, 105758. [CrossRef]
18. Baba, K.; Hasyida, N.; Tujikawa, M.; Quantock, AJ; Nishida, K. Generasi tetes mata fluorometolone nanocrystal, metabolismenya
menjadi dihydrofluorometolone dan penetrasi ke mata kelinci.Int. J. Farmasi.2021, 592, 120067. [CrossRef]
19. Maurice, DM; Mishima, S. Farmakokinetik okular. DiFarmakologi Mata: Buku Pegangan Farmakologi Eksperimental; sear,
ML, Ed.; Springer: Berlin/Heidelberg, Jerman, 1984; Jilid 69, hlm. 19–116.
20. Harigaya, Y.; Jiang, X.; Zhang, H.; Chandaroy, P.; Tingkat, EM; Pan, Y. Metode studi bioekivalensi dengan titik akhir farmakokinetik
untuk suspensi kortikosteroid mata topikal dan efek demografi subjek.Farmasi. Res.2018, 36, 13. [CrossRef]

21. Ramsay, E.; del Amo, E.; Toropainen, E.; Tengvall-Unadike, U.; Ranta, Wakil Presiden; Urtti, A.; Ruponen, M. Permeabilitas obat kornea
dan konjungtiva: Perbandingan sistematis dan dampak farmakokinetik pada mata.eur. J. Farmasi. Sci.2018, 119, 83–89. [CrossRef] [
PubMed]
22. Chrai, SS; Robinson, evaluasi JR Ocular kendaraan metilselulosa pada kelinci albino.J. Farmasi. Sci.1974, 63, 1218–1223. [CrossRef
]
23. Saettone, MF; Giannaccini, B.; Teneggi, A.; Savigni, P.; Tellini, G. Efek kendaraan pada bioavailabilitas oftalmik: Pengaruh polimer yang
berbeda pada aktivitas pilocarpine pada kelinci dan manusia.J. Farmasi. farmasi.1982, 34, 464–466. [CrossRef]
24. Sinko, PJ Farmasi Fisik dan Ilmu Farmasi Martin: Prinsip Kimia Fisik dan Biofarmasi dalam Ilmu Farmasi; Lippincott Williams &
Wilkins: London, Inggris, 2016.
25. Saettone, MF; Giannaccini, B.; Ravecca, S.; La Marca, F.; Tota, G. Polimer efek pada okular bioavailabilitas—Pengaruh kendaraan
cair yang berbeda pada respon midriatik tropicamide pada manusia dan kelinci.Int. J. Farmasi.1984, 20, 187–202. [CrossRef]

26. Le Merdy, M.; Kipas angin, J.; Bolger, MB; Lukacova, V.; Menara, J.; Tsakalazou, E.; Patel, V.; Xu, L.; Stewart, S.; Chockalingam, A.; dkk.
Penerapan pemodelan dan simulasi penyerapan okular mekanistik untuk memahami dampak sifat formulasi pada bioavailabilitas
oftalmik pada kelinci: Studi kasus menggunakan suspensi deksametason.AAPS J. 2019, 21, 65. [CrossRef]
27. Fayaaz, A.; Ranta, V.; Toropainen, E.; Vellonen, KS; D'Amico Ricci, G.; Reinisalo, M.; Heikkinen, EM; Gardner, saya.; Urtti, A.; Jamei,
M.; dkk. Farmakokinetik intrakameral okular untuk koktail timolol, betaxolol dan atenolol pada kelinci.mol. Farmasi. 2020, 17,
588–594. [CrossRef]
28. Deng, F.; Ranta, Wakil Presiden; Kidron, H.; Urtti, A. Model farmakokinetik umum untuk larutan dan suspensi obat mata yang diberikan secara
topikal.Farmasi. Res.2016, 33, 2680–2690. [CrossRef]
29. Chambers, WA Obat generik—Apakah benar-benar sama? Oftalmologi 2012, 119, 1095–1096. [CrossRef] [PubMed]
30. Departemen Kesehatan dan Layanan Kemanusiaan Administrasi Makanan dan Obat-obatan. Panduan FDA untuk Industri. Pendekatan
Statistik untuk Membangun Bioekivalensi. Tersedia secara online:https://www.fda.gov/media/70958/download (diakses pada 28
Februari 2001).