PROPOSAL SKRIPSI

FORMULASI GEL NANOSTRUCTURED LIPID

CARRIERS EKSTRAK ASAM KRANJI (Dialium indum L.)
SEBAGAI ANTIOKSIDAN

Diajukan oleh :

Akwila Laurdyna Ervita

NPM: 2015210010

UNIVERSITAS PANCASILA
FAKULTAS FARMASI
JAKARTA
2018
UNIVERSITAS PANCASILA
FAKULTAS FARMASI
JAKARTA

PERSETUJUAN PROPOSAL SKRIPSI

NAMA : AKWILA LAURDYNA ERVITA
NPM : 2015210010
PEMINATAN : FARMASI SAINS DAN TEKNOLOGI
JUDUL : FORMULASI GEL NANOSTRUCTURED LIPID
CARRIERS EKSTRAK ASAM KRANJI (Dialium
indum L.) SEBAGAI ANTIOKSIDAN

Disetujui oleh :
Pembimbing

(Dr. Faizatun, S.Si., M.Si., Apt.)

Tanggal:

ii
 DAFTAR ISI

DAFTAR ISI.............................................................................................................III

DAFTAR TABEL .................................................................................................... VI

DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. VII

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... VIII

BAB I PENDAHULUAN ........................................................................................... 1

A. LATAR BELAKANG ...................................................................................... 1

B. PERUMUSAN MASALAH ............................................................................. 3
C. TUJUAN PENELITIAN ................................................................................... 3
D. MANFAAT PENELITIAN ............................................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................... 4

A. ASAM KRANJI (Dialium indum L.) ................................................................ 4

1. Klasifikasi tanaman asal ............................................................................ 4
2. Nama tanaman ........................................................................................... 4
3. Deskripsi Tanaman.................................................................................... 5
4. Kandungan kimia ...................................................................................... 5
5. Khasiat dan penggunaan ........................................................................... 5
B. RADIKAL BEBAS ........................................................................................... 6
C. ANTIOKSIDAN ............................................................................................... 7
D. KULIT ............................................................................................................... 9
1. Anatomi Kulit ........................................................................................... 9
2. Fisiologi dan Biokimia Kulit................................................................... 12
3. Fungsi Biologik Kulit.............................................................................. 15
4. Warna Kulit ............................................................................................. 16
5. Proses Menua Pada Kulit ........................................................................ 18
E. NANOSTRUCTURED LIPID CARRIERS (NLC) ........................................... 20
1. Pengertian Nanostructured Lipid Carriers ............................................. 20
iii
 2. Struktur Nanostructured Lipid Carriers ................................................. 20
3. Metode Pembuatan .................................................................................. 21
4. Peran NLC dalam Meningkatkan Stabilitas Formulasi Kosmetik .......... 22
5. Formulasi Nanostructured Lipid Carriers .............................................. 25
6. Keunggulan Nanostructured Lipid Carriers ........................................... 30
F. EVAPORASI PELARUT ............................................................................... 32
G. SEDIAAN GEL .............................................................................................. 33
H. UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DENGAN METODE DPPH (1,1-DIFENIL-
2-PIKRILHIDRAZIL) .......................................................................................... 36
I. DATA PREFORMULASI .............................................................................. 38
1. Asam Stearat ........................................................................................... 38
2. Virgin Coconut Oil .................................................................................. 39
3. Carbomer 940 .......................................................................................... 39
4. Tween 80 ................................................................................................. 40
5. Span 80 .................................................................................................... 40
6. Trietanolamin .......................................................................................... 41
7. Propilen glikol ......................................................................................... 41
8. Metil Paraben .......................................................................................... 42
9. Propil Paraben ......................................................................................... 43
10. Air murni ................................................................................................. 44
11. Parfum ..................................................................................................... 44
J. EVALUASI..................................................................................................... 44
1. Evaluasi Nanopartikel (NLC) ................................................................. 44
2. Evaluasi Gel ............................................................................................ 46
K. LANDASAN TEORI ...................................................................................... 47
L. HIPOTESIS ..................................................................................................... 49

BAB III RANCANGAN PENELITIAN................................................................. 50

A. PRINSIP PENELITIAN.................................................................................. 50
B. BAHAN PENELITIAN .................................................................................. 50
C. TEMPAT PENELITIAN ................................................................................ 50

iv
 D. TAHAP PENELITIAN ................................................................................... 51

BAB IV BAHAN, ALAT, DAN METODE PENELITIAN .................................. 54

A. BAHAN .......................................................................................................... 54
B. ALAT .............................................................................................................. 54
C. METODE PENELITIAN ................................................................................ 55
1. Penyediaan Bahan Penelitian .................................................................. 55
2. Determinasi Tanaman ............................................................................. 55
3. Penyediaan simplisia Buah Asam Kranji ................................................ 55
4. Pembuatan Ekstrak Daging Buah Asam Kranji ...................................... 55
5. Karakterisasi Ekstrak Buah Asam Kranji ............................................... 55
6. Penetapan Kadar Flavonoid Total ........................................................... 56
7. Pengujian antioksidan menggunakan metode DPPH .............................. 57
8. Penentuan aktivitas antioksidan ekstrak daging buah Asam Kranji ....... 57
9. Pemeriksaan Bahan Tambahan ............................................................... 59
10. Pembuatan Nanostructured Lipid Carriers (NLC) Ektrak Buah Asam
Kranji Dengan Metode Evaporasi Pelarut............................................... 60
11. Karakterisasi Nanostructured Lipid Carriers (NLC).............................. 61
12. Formulasi Gel NLC Ekstrak Buah Asam Kranji .................................... 61
13. Pembuatan Sediaan Gel NLC Ekstrak Buah Asam Kranji ..................... 62
14. Evaluasi Sediaan Gel............................................................................... 62
15. Analisa Data ............................................................................................ 65

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................... 68

LAMPIRAN .............................................................................................................. 69

v
 DAFTAR TABEL

Tabel II 1. Jenis-Jenis NLC dan Manfaatnya ............................................................. 20

Tabel II 2. Daftar Lipid dan Surfaktan yang digunakan untuk Formulasi NLC ........ 27

Tabel IV 1. Tabel Formula NLC Ekstrak Asam Kranji ............................................. 60

Tabel IV 2. Tabel Formula Gel NLC Ekstrak Asam Kranji ...................................... 61

vi
 DAFTAR GAMBAR

Gambar II 1. Asam Kranji (4) ...................................................................................... 4

Gambar II 2. Diagram Kulit Normal Manusia (16) ..................................................... 9
Gambar II 3. Struktur dari NLC (18) ......................................................................... 21
Gambar II 4. Skema Metode Evaporasi Pelarut (23) ................................................. 33
Gambar II 5. Diphenylpicrylhidrazyl (free radical) (28) ........................................... 36
Gambar II 6. Diphenylpicrylhidrazine (non radical) (28) .......................................... 36

vii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Skema Kerja Penelitian Umum ............................................................. 69

Lampiran 2. Skema Kerja Pembuatan Nanostructured Lipid Carriers (NLC) ekstrak
buah Asam Keranji (Dialium indum L.) ............................................... 70
Lampiran 3. Skema Kerja Pembuatan Gel Nanostructured Lipid Carriers (NLC)
ekstrak buah Asam Keranji (Dialium indum L.) ................................. 71
Lampiran 4. Skema Kerja Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH pada
Vitamin C Sebagai Kontrol Positif ....................................................... 72
Lampiran 5. Pengujian Antioksidan Ekstrak Asam Kranji dan Gel NLC Asam Kranji
.............................................................................................................. 73

viii
 BAB I
PENDAHULUAN

A. LATAR BELAKANG
Tubuh manusia memiliki berbagai cara untuk melakukan proteksi. Pertahanan
pertama yang dimiliki oleh tubuh adalah barier mekanik, dengan adanya kulit.
Kulit merupakan organ yang melapisi seluruh permukaan tubuh makhluk hidup
dan mempunyai fungsi untuk melindungi dari pengaruh luar. Kerusakan pada kulit
akan mengganggu kesehatan maupun penampilan manusia sehingga perlu untuk
dijaga dan dilindungi kesehatannya. Kulit tidak luput dari bahaya lingkungan yang
dapat menghancurkan strukturnya, sebut saja sinar UV yang terkenal sebagai
penyebab utama kerusakan kulit, polusi udara, serangan AC yang rutin, dan lain-
lain. Oleh karena itu diperlukan penangkal ancaman bahaya radikal bebas yang
dapat menimbulkan kerusakan pada kulit (1).
Antioksidan adalah elemen penting dalam mencegah dan mengatasi kerusakan
kulit karena antioksidan merupakan kumpulan komponen atau molekul yang dapat
menangkap dan mencegah radikal bebas serta reactive oxygen species (ROS) yang
dapat menyebabkan kerusakan sel. Tumbuhan dan hewan memelihara sistem
kompleks dari berbagai jenis antioksidan, seperti glutathione, vitamin C, vitamin
A, dan vitamin E serta enzim seperti peroksidase, katalase, superoksida dismutase
dan lain-lain. Tingkat antioksidan yang tidak mencukupi, atau penghambatan
enzim antioksidan menyebabkan stress oksidatif dan dapat merusak atau
membunuh sel (2).
Buah-buahan sudah dikenal memiliki khasiat bagi kesehatan sebagai sumber
antioksidan yang dapat menangkap radikal bebas. Mekanisme sifat antioksidan
dari buah yaitu melalui inisiasi penghambatan dan propagasi rantai putus atau
menekan pembentukan reactive oxygen species (ROS) dengan mengikat ion-ion
logam, mengurangi hidrogen peroksida, dan pendinginan superoksida dan oksigen
singlet (2). Asam kranji (Dialium indum L.) merupakan salah satu buah yang

1
 2

memiliki khasiat sebagai antioksidan karena mengandung senyawa yang memiliki

sifat antioksidan kuat dalam melawan radikal bebas dan mengurangi kerusakan sel,
yaitu flavonoid, polifenol, asam askorbat, beta karoten, lycopene, dan lain-lain.
Menurut Potravinarstvo Slovak Journal of Food Sciences, ekstrak hexana asam
kranji pada konsentrasi 181,62±0,37a µg/ml dapat menghambat 50% aktivitas
radikal bebas, sedangkan pada ekstrak kloroform asam kranji dapat menghambat
50% aktivitas radikal bebas dengan konsentrasi 181,37±2,14a µg/ml.
Untuk tujuan menghambat penuaan dini pada kulit, antioksidan akan lebih baik
bila diformulasikan dalam bentuk sediaan topikal seperti kosmetik dibandingkan
oral, karena zat aktif dapat lebih lama berinteraksi dengan kulit wajah. Pada masa
sekarang ini industri farmasi khususnya kosmetik banyak menggunakan
perkembangan teknologi nanopartikel. Kosmetik merupakan sediaan yang
diaplikasikan pada tubuh manusia untuk membersihkan, mempercantik atau
meningkatkan daya tarik atau penampilan seseorang. Nanopartikel yang biasa
digunakan untuk kosmetik bermacam macam seperti Solid Lipid Nanoparticles
(SLN), Nanostructured Lipid Carriers (NLC), nanopartikel titanium oksida
(TiO2) dan seng oksida (ZnO), nanopartikel silver, nanopartikel kristal,
nanopartikel emas, dan sebagainya. Aplikasi nanopartikel pada sediaan kosmetik
dimaksudkan agar penghantaran bahan aktif kosmetik lebih tepat sasaran karena
ukuran partikelnya yang kecil serta untuk mengurangi efek samping (3).
Pada penelitian ini akan dilakukan ekstraksi dari asam kranji (Dialium indum
L.) dengan cara maserasi kinetik menggunakan cairan penyari etanol 96% untuk
menarik senyawa fenolik yang memiliki aktivitas antioksidan. Pelarut etanol 96 %
adalah senyawa polar yang mudah menguap sehingga baik digunakan sebagai
pelarut ekstrak.
Kemudian ekstrak asam kranji tersebut dibuat ke dalam bentuk nanopartikel
dengan menggunakan metode Nanostructured Lipid Carriers (NLC). NLC yang
terbentuk kemudian dikarakterisasi meliputi ukuran partikel, indeks polidipersitas,
potensial zeta, dan morfologi nanopartikel, setelah itu diformulasikan menjadi
sediaan gel sehingga diperoleh sediaan yang baik secara fisik dan kimia serta dapat
memberikan perlindungan pada kulit.
 3

B. PERUMUSAN MASALAH
Asam kranji (Dialium indum L.) memiliki khasiat sebagai antioksidan karena
mengandung senyawa yang memiliki sifat antioksidan kuat dalam melawan
radikal bebas dan mengurangi kerusakan sel, yaitu flavonoid, polifenol, asam
askorbat, beta karoten, lycopene, dan lain-lain. Oleh karena itu dilakukan
pembuatan NLC asam kranji yang memenuhi karakterisasi dan membuatnya ke
dalam sediaan gel yang memenuhi parameter mutu fisik. Atas paparan tersebut,
perumusan masalah yakni :
1. Apakah ekstrak etanol 96% buah asam kranji dapat dibuat nanopartikel
menggunakan sistem Nanostructured Lipid Carriers (NLC) yang memenuhi
karakterisasi dan menunjukkan aktivitas antioksidan?
2. Apakah Nanostructured Lipid Carriers (NLC) yang mengandung asam kranji
dapat diformulasikan ke dalam sediaan gel yang memenuhi persyaratan mutu
fisik maupun kimia serta masih menunjukkan aktivitas antioksidan?

C. TUJUAN PENELITIAN
1. Mengetahui apakah ektrak etanol 96% buah asam kranji dapat dibuat menjadi
Nanostructured Lipid Carriers (NLC) yang memenuhi karakterisasi dan
menunjukkan aktivitas antioksidan.
2. Mengetahui apakah Nanostructured Lipid Carriers (NLC) ekstrak asam kranji
dapat diformulasikan ke dalam sediaan gel yang memenuhi persyaratan mutu
fisik maupun kimia serta menunjukkan aktivitas antioksidan.

D. MANFAAT PENELITIAN
Hasil penelitian formulasi Nanostructured Lipid Carriers (NLC) ekstrak buah
asam kranji (Dialium indum L.) dalam sediaan gel ini diharapkan dapat memberi
informasi yang jelas demi kepentingan ilmu pengetahuan dalam penggunaan dan
pengembangan bahan alam ekstrak buah kranji menjadi bentuk sediaan kosmetik
yang mudah digunakan serta bermanfaat sebagai antioksidan.
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

A. ASAM KRANJI (Dialium indum L.)

Gambar II 1. Asam Kranji (4)

1. Klasifikasi tanaman asal (5)

Divisi : Spermatophyta
Sub divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Bangsa : Fabaceae
Suku : Resales
Marga : Dialium
Jenis : Dialium indum L.
2. Nama tanaman (6, 7)
Nama Tumbuhan : Asam kranji
Nama Daerah
Sunda : Ki pranji
Aceh : Ceuradieh
Madura : Karanjhi
Kalimantan : Keranji madu

4
 5

Nama Asing
Malaysia : Keranji
Thailand : Luk yee, Yee
Inggris : Velvet tamarind, Tamarind plum
Afrika : Icheku, nchichi, awin, tsamiyar kurm
3. Deskripsi Tanaman (5)
Habitus : Tinggi pohon sedang sampai dengan sangat tinggi (mencapai
40 m) dengan kayu yang sangat keras dan kompak.
Batang : Tegak, bulat, percabangan simpodial, berduri, putih kotor.
Daun : Majemuk, duduk berseling, menyirip genap, terdiri dari 4
helai daun, lonjong, ujung dan pangkal tumpul, panjang 2-4
cm, lebar 1 - 2 cm, tepi rata, pertulangan menyirip, tipis,
hijau.
Bunga : Majemuk, bentuk malai, di ujung cabang atau di ketiak daun,
tangkai silindris, benang sari dan putik halus, kuning,
mahkota putih kekuningan.
Buah : Polong, panjang 7-15 cm, masih muda hijau setelah tua
merah kehijauan.
Biji : Bulat pipih, memiliki selaput biji berwarna putih, permukaan
licin, hitam.
Akar : Tunggang, putih kotor.
4. Kandungan kimia (6, 7)
Dari segi kimia, buah Dialium indum L. Mengandung saponin, flavonoida,
polifenol, vitamin C, beta karoten, dan lycopene.
5. Khasiat dan penggunaan (5)
Dialium indum L. Banyak digunakan sebagai pengasam makanan di daerah
Kalimantan. Daging buah berkhasiat sebagai obat sariawan, gusi berdarah dan
sakit diare, sedangkan rebusan daunnya untuk mencuci besi yang berkarat,
selain itu dipercaya dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah. Buah
Dialium indum L. dimakan di Nigeria karena memiliki rasa yang menyegarkan
dan enak.
 6

B. RADIKAL BEBAS
Radikal bebas dapat diartikan sebagai salah satu produk reaksi kimia dalam tubuh
yang sangat reaktif dan mengandung elektron tak berpasangan sehingga sebagian
besar bersifat tidak stabil (8).
Kondisi tersebut membuat radikal bebas memiliki reaktivitas yang sangat
tinggi, mampu bereaksi dengan protein, lipid, karbohidrat, atau asam
deoksiribonukleat (DNA) sehingga terjadi perubahan struktur dan fungsi sel.
Radikal bebas mencari reaksi-reaksi agar dapat memperoleh kembali elektron
berpasangannya. Dalam rangka mendapatkan stabilitas kimia, radikal bebas tidak
dapat mempertahankan bentuk asli dalam waktu lama dan segera berikatan dengan
bahan sekitarnya (9).
Radikal bebas akan menyerang molekul stabil yang terdekat dan mengambil
elektron, zat yang terambil elektronnya akan menjadi radikal bebas juga sehingga
akan memulai suatu reaksi berantai yang akhirnya akan terjadi kerusakan pada sel
tersebut (9).
Reaksi ini dapat berakhir jika ada molekul yang memberikan elektron yang
dibutuhkan oleh radikal bebas tersebut atau dua buah gugus radikal bebas yang
membentuk ikatan non-radikal. Mekanisme reaksi pembentukan radikal bebas
dibagi menjadi 3 tahapan reaksi, yaitu : (10, 11)
1. Inisiasi (Permulaan terbentuknya radikal bebas)
Tahap inisiasi merupakan tahap awal pembentukan radikal-radikal bebas
dengan pembelahan homolitik sehingga masing-masing atom terpisah dengan
membawa satu elektron. Terlepas dari itu, inisiasi dapat terbentuk secara
spontan atau karena pengaruh panas/cahaya. Selain itu juga radikal bebas dapat
terbentuk melalui transfer satu elektron (dengan melepas dan menerima
elektron).
2. Propagasi (Serangkaian reaksi yang berkembang atas timbulnya radikal bebas)
Setelah terbentuk radikal bebas dengan kereaktifan yang tinggi yang kemudian
dapat bereaksi dengan setiap spesies yang ditemukan. Pada tahap ini akan
terbentuk radikal bebas yang baru, karena radikal bebas yang dihasilkan pada
tahap awal bereaksi dengan molekul lain. Selanjutnya radikal bebas baru
 7

tersebut dapat pula bereaksi dengan molekul atau radikal bebas yang lain. Oleh
karena itu dalam proses propagasi dikatakan terjadi reaksi berantai. Apabila
radikal bebasnya sangat reaktif, misalnya radikal alkil, maka terjadi rantai yang
panjang karena melibatkan sejumlah besar molekul. Apabila radikal bebasnya
kereaktifannya rendah, maka kemampuannya bereaksi rendah sekali, sehingga
rantai yang terjadi pendek, bahkan mungkin tidak terjadi rantai.
3. Terminasi (Inaktivasi radikal bebas oleh antioksidan endogen atau eksogen
maupun enzim superoksida dismutase)
Langkah berikutnya adalah destruksi radikal bebas atau langkah terminasi,
yang ditandai oleh kombinasi radikal bebas yang sama ataupun yang
berbeda,dan langkah ini mengakhiri reaksi radikal bebas.

C. ANTIOKSIDAN
Antioksidan adalah elemen penting dalam mencegah dan mengatasi kerusakan
kulit karena antioksidan merupakan kumpulan komponen atau molekul yang dapat
menangkap dan mencegah radikal bebas serta reactive oxygen species (ROS) yang
dapat menyebabkan kerusakan sel. Tumbuhan dan hewan memelihara sistem
kompleks dari berbagai jenis antioksidan, seperti glutathione, vitamin C, vitamin
A, dan vitamin E serta enzim seperti peroksidase, katalase, superoksida dismutase
dan lain-lain. Tingkat antioksidan yang tidak mencukupi, atau penghambatan
enzim antioksidan menyebabkan stress oksidatif dan dapat merusak atau
membunuh sel. (2)
Secara alami, tubuh manusia sudah memproduksi antioksidan untuk
mengimbangi jumlah oksidan yang masuk kedalam tubuh namun dikarenakan
jumlah oksidan yang masuk melebihi batas kemampuan yang bisa diterima oleh
antioksidan alami tubuh maka diperlukan antioksidan lain yang berasal dari luar
(12).
Antioksidan yang berasal dari luar tubuh dapat diperoleh dalam bentuk sintetik
maupun yang berasal dari bahan alam. Antioksidan sintetik yang sudah banyak
digunakan seperti buthylated hydroxytoluene (BHT), buthylated hidroksianisol
(BHA), dan ters-buthyl hidroquinone (TBHQ) secara efektif dipercaya dapat
 8

menghambat oksidasi. Namun, penggunaan antioksidan sintetik dibatasi oleh

aturan pemerintah karena penggunaan yang melebihi batas dapat menyebabkan
racun dalam tubuh dan bersifat karsinogenik sehingga dibutuhkan alternatif
antioksidan lain yang aman untuk digunakan. Salah satu sumber potensial
antioksidan alami adalah tumbuhan (12).
Fungsi utama antioksidan adalah memperkecil terjadinya proses oksidasi dari
lemak dan minyak, memperkecil terjadinya proses kerusakan dalam makanan,
memperpanjang masa pemakaian dalam industri makanan, meningkatkan stabilitas
lemak yang terkandung dalam makanan serta mencegah hilangnya kualitas sensori
dan nutrisi (13).
Antioksidan berdasarkan mekanisme reaksinya dibagi menjadi tiga macam,
yaitu antioksidan primer, antioksidan sekunder dan antioksidan tersier:
1. Antioksidan Primer
Antioksidan primer merupakan zat atau senyawa yang dapat menghentikan
reaksi berantai pembentukan radikal bebas yang melepaskan hidrogen.
Antioksidan primer dapat berasal dari alam atau sintetis. Contoh antioksidan
primer adalah Butylated hidroxytoluene (BHT) (14).
Reaksi antioksidan primer terjadi pemutusan rantai radikal bebas yang
sangat reaktif, kemudian diubah menjadi senyawa stabil atau tidak reaktif.
Antioksidan ini dapat berperan sebagai donor hidrogen atau CB-D (Chain
breaking donor) dan dapat berperan sebagai akseptor elektron atau CB-A
(Chain breaking acceptor) (15).
2. Antioksidan Sekunder
Antioksiden sekunder disebut juga antioksidan eksogeneus atau non enzimatis.
Antioksidan ini menghambat pembentukan senyawa oksigen reatif dengan cara
pengelatan metal, atau dirusak pembentukannya. Prinsip kerja sistem
antioksidan non enzimatis yaitu dengan cara memotong reaksi oksidasi
berantai dari radikal bebas atau dengan menangkap radikal tersebut, sehingga
radikal bebas tidak akan bereaksi dengan komponen seluler. Antioksidan
sekunder di antaranya adalah vitamin E, vitamin C, beta karoten, flavonoid,
asam lipoat, asam urat, bilirubin, melatonin dan sebagainya (14).
 9

3. Antioksidan Tersier
Kelompok antioksidan tersier meliputi sistem enzim DNA-Repair dan
metionin sulfoksida reduktase. Enzim-enzim ini berperan dalam perbaikan
biomolekuler yang rusak akibat reaktivitas radikal bebas. Kerusakan DNA
yang terinduksi senyawa radikal bebas dicirikan oleh rusaknya Single dan
Double strand baik gugus non-basa maupun basa (14).

D. KULIT
Kulit merupakan organ yang membungkus seluruh permukaan luar tubuh sekaligus
merupakan organ terberat dan terbesar dari tubuh manusia yang meliputi 16% berat
tubuh. Pada orang dewasa, sekitar 2,7 hingga 3,6 kg berat tubuhnya merupakan
kulit dengan luas sekitar 1,5-1,9 meter persegi. Kulit terdiri dari jutaan sel kulit
yang dapat mengalami kematian dan selanjutnya digantikan dengan sel kulit hidup
yang baru tumbuh.

Gambar II 2. Diagram Kulit Normal Manusia (16)

1. Anatomi Kulit
Kulit terdiri dari tiga lapisan utama yaitu epidermis (lapisan bagian luar tipis),
dermis (lapisan tengah) dan subkutan (lapisan paling dalam) (1).
 10

a. Epidermis
Lapisan epidermis terdiri dari lima lapisan (dari lapisan yang paling atas
sampai yang terdalam). Lapisan epidermis tebalnya 75-150 μm, kecuali
pada telapak tangan dan kaki yang berukuran lebih tebal. Telapak tangan
dan telapak kaki mempunyai kulit yang lebih tebal daripada bagian tubuh
yang lain disebabkan oleh adanya lapisan corneum di tempat itu. Hal ini
penting karena kulit di bagian tubuh ini lebih sering mengalami gesekan
dibanding tubuh bagian lain (1). Dari sudut kosmetik, epidermis
merupakan bagian kulit yang menarik karena kosmetik dipakai pada
epidermis itu. Meskipun ada beberapa jenis kosmetik yang digunakan
sampai dermis, namun tetap penampilan epidermis yang menjadi tujuan
utama. Para ahli histologi membagi epidermis dari bagian terluar hingga
kedalam menjadi 5 lapisan, yakni: (17)
1) Lapisan Tanduk (stratum corneum) terdiri atas beberapa lapis sel yang
pipih, mati, tidak memiliki inti, tidak mengalami proses metabolisme,
tidak berwarna, dan sangat sedikit mengandung air. Lapisan ini
sebagian besar terdiri atas keratin, jenis protein yang tidak larut dalam
air, dan sangat resisten terhadap bahan-bahan kimia. Hal ini berkaitan
dengan fungsi kulit untuk memproteksi tubuh dari pengaruh luar.
Secara alami, sel-sel yang sudah mati di permukaan kulit akan
melepaskan diri untuk beregenerasi. Permukaan stratum corneum
dilapisi oleh suatu lapisan pelindung lembab tipis yang bersifat asam,
disebut Mantel Asam Kulit.
2) Lapisan Jernih (stratum lucidum) terletak tepat di bawah stratum
corneum, merupakan lapisan yang tipis, jernih, mengandung eleidin,
sangat tampak jelas pada telapak tangan dan telapak kaki. Antara
stratum lucidum dan stratum granulosum terdapat lapisan keratin tipis
yang disebut rein’s barrier (Szakall) yang tidak bias ditembus
(impermeable).
3) Lapisan Berbutir-butir (stratum granulosum) tersusun oleh sel-sel
keratinosit yang berbentuk poligonal, berbutir kasar, berinti
 11

mengkerut. Stoughton menemukan bahwa di dalam butiran

keratohyalin itu terdapat bahan logam, khususnya tembaga yang
menjadi katalisator proses pertandukan kulit.
4) Lapisan Malphigi (stratum spinosum atau malphigi layer) memiliki
sel yang berbentuk kubus dan seperti berduri. Intinya besar dan oval.
Setiap sel berisi filamen-filamen kecil yang terdiri atas serabut
protein. Cairan limfe masih ditemukan mengitari sel-sel dalam lapisan
malphigi ini.
5) Lapisan Basal (stratum germinativum atau membran basalis) adalah
lapisan terbawah epidermis. Di dalam stratum germinativum juga
terdapat sel-sel melanosit, yaitu sel-sel yang tidak mengalami
keratinisasi dan fungsinya hanya membentuk pigmen melanin dan
memberikannya kepada sel-sel keratinosit melalui dendrit-dendritnya.
Satu sel melanosit melayani sekitar 36 sel keratinosit. Kesatuan ini
diberi nama unit melanin epidermal.
b. Dermis
Ketebalan dermis bervariasi di berbagai tempat tubuh, biasanya 1-4 mm.
Dermis merupakan jaringan metabolik aktif, mengandung kolagen, elastin,
sel saraf, pembuluh darah dan jaringan limfatik. Juga terdapat kelenjar
ekrin, apokrin dan sebaseus di samping folikel rambut. (1) Berbeda dengan
epidermis yang tersusun oleh sel-sel dalam berbagai bentuk dan keadaan,
dermis terutama terdiri dari bahan dasar serabut kolagen dan elastin, yang
berada di dalam substansi dasar yang bersifat koloid dan terbuat dari
gelatin mukopolisakarida. Serabut kolagen dapat mencapai 72 persen dari
keseluruhan berat kulit manusia bebas lemak (17).
Di dalam dermis terdapat adneska-adneska kulit seperti folikel rambut,
papila rambut, kelenjar keringat, saluran keringat, kelenjar sebasea, otot
penegak rambut, ujung pembuluh darah dan ujung saraf, juga sebagian
serabut lemak yang terdapat pada lapisan lemak bawah kulit
(subkutis/hipodermis) (17).
 12

c. Sub-kutan (Hipodermis)
Terletak di bawah dermis, terdiri dari jaringan ikat dan lemak.

2. Fisiologi dan Biokimia Kulit

a. Pernapasan Kulit
Sama halnya dengan jaringan pada bagian tubuh lainnya, kulit juga
bernafas (respirasi), menyerap oksigen dan mengeluarkan karbondioksida.
Namun, respirasi kulit sangatlah lemah. Kulit lebih banyak menyerap
oksigen yang diambil aliran darah, dan hanya sebagian kecil yang diambil
langsung dari lingkungan luar (udara). Begitu pula dengan karbondioksida
yang dikeluarkan, lebih banyak melalui aliran darah dibandingkan dengan
yang ditembuskan langsung ke udara (17).
Menurut Burton (1959), pengambilan oksigen dari udara oleh kulit
sangat berguna, bahkan sangat penting bagi metabolisme di dalam sel-sel
kulit. Penyerapan oksigen itu penting, namun pengeluaran atau
pembuangan karbondioksida tidak kalah pentingnya, karena jika
karbondioksida menumpuk di dalam kulit, ia akan menghambat
pembelahan (regenerasi) sel-sel kulit (17).
b. Mantel Asam Kulit
Marchionini (1929) menemukan bahwa stratum corneum dilapisi oleh
suatu lapisan tipis lembab yang bersifat asam, sehingga ia menamakannya
sebagai “mantel asam kulit” (Sauremantel) (17).
Tingkat keasamannya (pH) umumnya berkisar antara 4,5 - 6,5 sehingga
bersifat asam lemah. Lapisan “mantel asam” kulit terbentuk dari
kombinasi asam-asam karboksilat organic (asam laktat, asam pirolidon
karboksilat, asam urokanat, dan lain-lain) yang membentuk garam dengan
ion-ion natrium, kalium, ammonium, dan lain-lain, serta dari hasil ekskresi
kelenjar sebasea, kelenjar keringat, dan asam amino dari reruntuhan
keratin sel kulit yang sudah mati di permukaan kulit (17).
c. Fungsi Mantel Asam Kulit
Ada tiga fungsi pokok “mantel asam” kulit, yaitu :
 13

1) Sebagai penyangga (buffer) yang berusaha menetralisir bahan kimia

yang terlalu asam atau terlalu alkalis yang masuk ke kulit.
2) Membunuh dengan sifat asamnya atau setidaknya menekan
pertumbuhan mikroorganisme yang membahayakan kulit.
3) Dengan sifat lembabnya sedikit banyak mencegah kekeringan kulit.
Fungsi “mantel asam” kulit cukup penting bagi perlindungan kulit,
sehingga ia disebut “the first line barrier of skin” (perlindungan pertama
kulit). Yang lebih berperan dalam fungsi “mantel asam” kulit bukan pada
segi keasamannya, meskipun ini penting dalam mencegah infeksi
mikroorganisme karena umumnya mikroorganisme tidak tahan dalam
lingkungan yang bersifat asam, tetapi lebih pada susunan bahan-bahannya,
terutama pada susunan asam-asamnya. Semakin alkalis atau semakin asam
bahan yang mengenai kulit, semakin sulit untuk menetralisirnya dan kulit
akan menjadi lelah karenanya. Kulit dapat menjadi kering, pecah pecah,
sensitive, dan mudah terkena infeksi.
Karena itu hendaknya pH kosmetik diusahakan sama atau sedekat
mungkin dengan pH fisiologis “mantel asam” kulit, yaitu antara 4,5 – 6,5.
Kosmetik demikian disebut kosmetik dengan “pH-balanced”.
d. Mantel Lemak Kulit
Sebum dipermukaan kulit merupakan lapisan lemak yang sebagian besar
berasal dari kelenjar sebasea dan sebagian kecil berasal dari lemak sel-sel
epidermis, disebut “mantel lemak” kulit, yang terdiri atas trigliserida,
asam-asam lemak, squalene, wax, kolesterol dan ester-esternya, fosfoliida,
dan paraffin.
e. Sistem Pengaturan Air Kulit
Permeabilitas kulit terhadap air sangat terbatas. Barrier yang mengatur
keluarnya air dari kulit dan masuknya air ke dalam kulit tidak terletak
langsung di bawah permukaan kulit, tetapi ada di bawah lapisan stratum
corneum yang diberi nama barrier Rein (Blank,1953).
Untuk fungsi fisiologisnya, kulit memerlukan lemak dan air, keduanya
berhubungan secara erat. Lapisan lemak di permukaan kulit dan bahan-
 14

bahan dalam stratum corneum yang bersifat higroskopis, dapat menyerap

air, dan berada dalam hubungan fungsional, disebut Natural Moisturizing
Factor (NMF). Kemampuan stratum corneum untuk mengikat air sangat
penting bagi fleksibilitas dan kelenturan kulit.
Hubungan antara pelembab larut air dan lemak adalah pelarutan lemak
(degreasing) dari stratum corneum akan menyebabkan hilangnya
pelembab. Lemak memperlambat penguapan air. Sebum akan sangat
penting dalam permeabilitas dan penyimpanan air dalam sel. Lapisan
sebum mencegah kerusakan kulit akibat atmosfir, penguapan air, dan
pengeringan kulit. Air di stratum corneum akan cepat menguap jika lapisan
sebum ini hilang. Gloor (1981) menyatakan, jumlah dan komposisi lemak
permukaan kulit sangat menentukan kelembaban stratum corneum (17).
f. Permeabilitas dan Penetrasi Kulit
Reaksi positif kulit terhadap pemakaian kosmetik merupakan hal yang
sangat diinginkan oleh pembuat dan pemakai kosmetik. Untuk dapat
memberikan reaksi, kulit harus sedikit banyak dipenetrasi oleh kosmetik.
Griesemer (1962) memperkirakan berbagai cara penetrasi yang
mungkin ke dalam kulit, yaitu :
1) Lewat antara sel-sel stratum corneum
2) Melalui dinding saluran folikel rambut
3) Melalui kelenjar keringat
4) Melalui kelenjar sebasea
5) Menembus sel-sel stratum corneum
Beberapa factor di kulit yang mempengaruhi penetrasi adalah
kelembaban kulit, keadaan kulit: apakah normal atau mengalami
modifikasi, apakah kulit gundul atau banyak rambutnya, usia, jenis
kelamin, dan kecepatan metabolisme bahan itu di dalam kulit.
Faktor-faktor yang berpengaruh pada bahan yang dikenakan pada
kulit, antara lain :
1) Besar kecilnya molekul bahan
2) Daya larut bahan dalam lemak maupun air
 15

3) Apakah berbasis lemak atau berbasis garam

4) Tingkat keasaman (pH) dari bahan
5) Kecepatan pemberian bahan pada kulit
Bahan yang berbasis lemak lebih mudah mempenetrasi kulit daripada
yang berbasis garam atau yang lainnya. Angka keasaman yang tinggi
(alkalis), terutama jika pH 11 keatas, akan memperbesar daya penetrasi
karena kulit akan diperlunak. Kulit yang megalami luka, keratolisis,
hiperaemia, kehilangan lemak, akan semakin mudah dipenetrasi oleh
bahan kosmetik.

3. Fungsi Biologik Kulit

a. Proteksi
Serabut elastis yang terdapat pada dermis serta jaringan lemak subkutan
berfungsi mencegah trauma mekanik langsung terhadap interior tubuh.
Lapisan tanduk dan mantel lemak kulit menjaga kadar air tubuh dengan
cara mencegah masuknya air dari luar tubuh dan mencegah penguapan air,
selain itu juga berfungsi sebagai barrier terhadap racun dari luar. Mantel
asam kulit dapat mencegah pertumbuhan bakteri di kulit (17).
b. Thermoregulasi
Kulit mengatur temperatur tubuh melalui mekanisme dilatasi dan
konstriksi pembuluh kapiler dan melalui perspirasi, yang keduanya
dipengaruhi saraf otonom. Pada saat temperatur badan menurun terjadi
vasokontriksi, sedangkan pada saat temperatur badan meningkat terjadi
vasodilatasi untuk meningkatkan pembuangan panas (17).
c. Persepsi Sensoris
Kulit bertanggung jawab sebagai indera terhadap rangsangan dari luar
berupa tekanan, raba, suhu dan nyeri melalui beberapa reseptor seperti
Benda Meissner, Diskus Merkell dan Korpuskulum Golgi sebagai raba,
Korpuskulum Pacini sebagai reseptor tekanan, Korpuskulum Ruffini dan
Benda Krauss sebagai reseptor suhu dan Nervus End Plate sebagai reseptor
nyeri (17).
 16

d. Absorbsi
Beberapa bahan dapat diabsorbsi kulit masuk ke dalam tubuh melalui dua
jalur yaitu melalui epidermis dan melalui kelenjar sebasea. Material yang
mudah larut dalam lemak lebih mudah diabsorbsi disbanding air dan
material yang larut dalam air (17).
e. Fungsi Lain
Kulit dapat menggambarkan status emosional seseorang dengan memerah,
memucat maupun kontraksi otot penegak rambut (17).

4. Warna Kulit
a. Warna Kulit
Warna kulit terutama ditentukan oleh oxyhemoglobin yang berwarna
merah, hemogoblin tereduksi yang berwarna merah kebiruan, melanin
yang berwarna coklat, keratohyalin yang memberikan penampakan opaque
pada kulit, serta lapisan stratum corneum yang memiliki warna putih
kekuningn atau keabu-abuan. Kurang penting adalah carotene, suatu
pigmen warna kuning yang sedikit sekali jumlah dan efeknya, serta eleidin
dalam stratum lucidum yang hanya terlihat pada kulit yang menebal dari
telapak kaki bagian tumit (17).
Dari semua bahan-bahan pembangun warna kulit itu, yang paling
menentukan warna kulit adalah pigmen melanin. Jumlah, tipe, ukuran, dan
distribusi pigmen melanin ini akan menentukan variasi warna kulit
berbagai golongan ras/bangsa di dunia (17).
b. Mekanisme Pigmentasi
Proses pembentukan pigmen melanin terjadi pada butir-butir melanosome
yang dihasilkan oleh sel-sel melanosit yang terdapat diantara sel-sel basal
keratinosit di dalam lapisan basal (stratum germinativum). Melalui juluran
lengan-lengannya yang dinamakan dendrit, melanosit memberikan
melanosom kepada sejumlah sel-sel keratinosit di sekelilingnya (17).
 17

Pembentukan melanosome di dalam melanosit melalui 4 fase, yaitu:

(17)
Fase I : Permulaan pembentukan melanosom dari matriks protein
tirosinase, diliputi membran dan berbentuk vesikula bulat.
Fase II : Disebut pre-melanosom, pembentukan lebih sempurna, belum
terjadi adanya pembentukan melanin.
Fase III : Mulai nampak adanya deposit melanin di dalam membran
vesikula. Disini mulai terjadi melanisasi melanosom.
Fase IV : Deposit melanin memenuhi melanosom yang merupakan
partikel-partikel padat dan berbentuk sama.
Proses melanisasi melanosom terjadi di fase III dan IV sebelum
melanosom diekskresikan ke keratinosit. Melanosom di dalam keratinosit
akhirnya mengalami degradasi. Melanosom yang terbentuk dari gabungan
bebrapa partikel dan besarnya kurang dari mikron akan mengalami
degradasi. Ini terdapat pada ras Eropa dan Indian Amerika. Melanosom
yang besarnya lebih dari 1 mili dan tunggal, tidak mengalami degradasi,
misalnya terdapat pada ras Negro dan Aborigin. Ukuran melanosom
dipengaruhi oleh factor genetic dan non-genetik misalnya penyinaran oleh
sinar matahari (ultraviolet) (17).
c. Intensitas Warna Kulit
Intensitas warna kulit secara fundamental ditentukan oleh: (17)
1) Jumlah melanosom yang terdapat di dalam keratinosit dan melanosit,
2) Kecepatan melanogenesis di dalam melanosit,
3) Kecepatan transfer di dalam populasi keratinosit.
Oleh karena itu dikenal 2 macam warna kulit (17).
1) Warna kulit konstitutif, yaitu secara genetik diturunkan tanpa
dipengaruhi faktor sinar ultraviolet dan hormone, dan
2) Warna kulit fakultatif, yaitu warna kulit akibat pengaruh sinar
ultraviolet dan hormon. Warna ini jelas tampak pada bagian badan yang
tidak tertutup pakaian.
Hormon-hormon yang berpengaruh antara lain: (17)
 18

1) Melanin Stimulating Hormon (MSH), yang pemberiannya

menyebabkan hiperpigmentasi pada kulit.
2) Estrogen dan progesterone, yang antara lain waktu hamil menyebabkan
pigmentasi pada putting susu dan sekitarnya.
3) Glutathion (GSH), yang merupakan inhibitor terhadap melanogenesis.
d. Sinar Matahari dan Melanogenesis
Bila terjadi penyinaran kulit oleh sinar matahari, maka terjadi reaksi
fisiologis kulit sebagai berikut. Kulit yang terpapar sinar matahari selama
antara 6-20 menit akan menghasilkan eritema yang cepat atau lambat
menimbulkan pencoklatan kulit (tanning). Hal ini disebabkan oleh sinar
ultraviolet A (UV-A) dengan panjang gelombang 290-320 nm dan sinar
yang terlihat (visible light) dengan panjang gelombang 320-700 nm (17).
Tanning cepat tampak jelas 1 jam setelah kulit terpapar matahari dan
kemudian akan hilang kembali dalam waktu 4 jam. Hal ini mungkin
disebabkan oleh reaksi oksidasi dari radikal bebas semiquinone yang tidak
stabil di dalam melanin sehingga tidak tampak adanya pembentukan
melanosom baru. Reaksi serupa juga terjadi pada sunburn (290-320 nm).
Hal ini disebabkan oleh pembentukan melanosom-melanosom baru secara
perlahan dan baru terlihat dalam waktu 72 jam (17).
Sinar ultraviolet gelombang agak panjang serta sinar yang dapat dilihat,
antara 320-700 nm, merupakan penyebab melanogenesis, tetapi
gelombang-gelombang lebih pendek (290-320 nm) masih merupakan
inisiator paling efektif untuk melanogenesis (17).
Efek negatif sinar matahari terhadap kulit dapat dihindari jika kulit
dilindungi dengan menggunakan kosmetik pelindung kulit yang disebut
tabir surya (17).

5. Proses Menua Pada Kulit

Proses penuaan pada kulit dapat tampak dari kerutan dan keriput pada kulit
atau kemunginan lainnya disbanding ketika masih muda (17).
 19

Perubahan akibat proses penuaan yang terjadi pada kulit dapat dibagi atas
perubahan anatomis, fisiologis, serta kimiawi. Beberapa perubahan anatomis
dapat terlihat langsung, seperti hilangnya elastisitas dan fleksibilitas kulit yang
menyebabkan timbulnya kerut dan keriput, berkurangnya jumlah rambut di
kepala walaupun pada wanita justru sering tumbuh kumis atau rambut panjang
di leher atau di pipi, hiperpigmentasi dan tumor kulit terutama pada usia 40
tahun ke atas akibat terlalu lama terpapar sinar matahari, penebalan kulit,
epidermis kering dan pecah-pecah, perubahan pada bentuk kuku dan rambut,
dan sebagainya (17).
Banyak faktor dari luar yang mempengaruhi penuaan kulit, tetapi yang
terkuat adalah sinar matahari, khususnya sinar UV yang terdapat di dalam sinar
matahari (17).
Secara histologis dan fisiologis, pada kulit yang sudah menua ditemukan
antara lain hal-hal berikut: (17)
1) Kulit menjadi kering karena menurunnya fungsi kelenjar minyak kulit
(kelenjar sebasea),
2) Berkurangnya kadar air kulit dan mengeringnya serabut kolagen dan
elastin akibat menurunnya hormon-hormon kelamin,
3) Menurunnya kecepatan metabolisme sel basal dan melambatnya proses
keratinisasi, mengakibatkan regenerasi sel-sel epidermis menjadi lambat.
Pada kulit tua ditemukan defisiensi banyak vitamin, antara lain vitamin C,
biotin, vitamin K, asam panthotenat, pyridoxine, asam nikotinat, citrus
bioflavonoid, dan lain-lain. Kekurangan vitamin K antara lain menyebabkan
telanglectasia (pecahnya pembuluh darah kulit yang terlihat seperti sarang
laba-laba). Untuk memperlambat proses penuaan kulit tersebut, defisiensi
vitamin perlu dicegah atau diperbaiki dengan menggunakan produk kosmetik
seperti kosmetik pelembab, kosmetik yang mengandung kolagen, vitamin,
allantoin, ekstrak placenta, dan sebagainya. Dalam hal ini, pemakaian kosmetik
tabir surya yang melindungi kulit dari sinar matahari juga sangat penting (17).
 20

E. NANOSTRUCTURED LIPID CARRIERS (NLC)

1. Pengertian Nanostructured Lipid Carriers
Nanostructured Lipid Carriers (NLC) adalah nanopartikel lipid yang
dimodifikasi di mana fase lipidik mengandung lipid padat (lemak) dan cairan
lipid (minyak) pada suhu kamar. NLC dapat diproduksi dalam skala besar
karena dalam sistem penghantaran NLC memiliki dampak besar pada
pengembangan bentuk sediaan farmasi baru dan dalam produk kosmetik. NLC
telah ditunjukkan untuk menunjukkan perilaku pelepasan terkontrol untuk
berbagai bahan aktif seperti ascorbyl palmitate, clotrimazole, ketoconazole,
tabir surya dan agen antijamur lainnya. Jenis-jenis NLC dengan semua manfaat
atas semua sistem pembawa koloid lainnya disebutkan dalam tabel berikut:
(18)
Tabel II 1. Jenis-Jenis NLC dan Manfaatnya

Liposom Nanoemulsi Mikroemulsi

 Biaya mahal  Ostwald ripening  Tingginya
 Muatan obat rendah  Flokulasi konsentrasi dari
 Kebocoran obat  Permeabilitas surfaktan
 Pelepasan cepat membrane  Rentan terhadap
 Pelepasan obat disintegrasi pada
 Creaming perubahan kondisi

 Agregasi partikel lingkungan

2. Struktur Nanostructured Lipid Carriers

NLC utamanya memiliki tiga jenis struktur yang dikembangkan sesuai dengan
komposisi formulasi dan parameter produksi (18).
1) Inmperfect Type
Jarak antara rantai asam lemak gliserida dan ketidaksempurnaan umum
dalam kristal adalah untuk tujuan akomodasi obat yang baik.
 21

Ketidaksempurnaan ini mengakomodir obat dalam bentuk molekul dan

meningkatkan, muatan obat.
2) Amorphous Type
Proses kristal itu sendiri menyebabkan pengusiran obat dan membentuk
NLC dalam bentuk amorf. Ini dapat diproduksi dengan menggunakan lipid
khusus seperti isopropil miristat.
3) Multiple Type
Dalam matriks padat ini dari nanopartikel lipid mengandung nanopartikel
cair kecil dari minyak. Kompartemen nanopartikel ini dikelilingi oleh
matriks lipid padat sehingga memungkinkan pelepasan terkontrol.

Gambar II 3. Struktur dari NLC (18)

3. Metode Pembuatan
Banyak metode yang berbeda telah dijelaskan dalam literatur untuk pembuatan
nanopartikel lipid, terutama SLN. Metode homogenisasi panas dan dingin,
teknik mikroemulsi, metode evaporasi emulsifikasi pelarut, metode difusi
emulsifikasi pelarut, metode injeksi pelarut atau metode penggantian pelarut,
teknik fase inversi, metode emulsi ganda, teknik membran kontraktor. Di
antara teknik-teknik ini, metode homogenisasi panas dan dingin, serta metode
evaporasi emulsifikasi pelarut memiliki potensi untuk menghasilkan NLC.
1) Metode Homogenisasi Panas
 22

Dalam pendekatan ini, obat awalnya dilarutkan dalam campuran lipid

leleh. Kemudian lelehan lipid terdispersi dalam larutan emulsifier encer
pada suhu yang sama dengan pengadukan berkecepatan tinggi. Emulsi
panas yang diperoleh selanjutnya dapat dihomogenisasi pada suhu yang
sama dengan alat homogenizer, jet ultrasonik intensitas tinggi atau
microfludizer, untuk menghasilkan nanoemulsi panas. Selanjutnya, NLC
dihasilkan dengan mendinginkan nanoemulsi panas dalam air dingin pada
suhu kamar (19).
2) Metode Homogenisasi Dingin
Dalam metode ini, setelah obat dilarutkan dalam campuran lipid leleh,
lipid dalam jumlah besar didinginkan dengan cepat. Selanjutnya campuran
lipid tersebut digiling untuk membentuk mikropartikel lipid, misalnya ball
mill yang memberi peringatan bahwa selama proses penggilingan suhu
tidak melebihi suhu lipid dengan titik leleh terendah. Mikropartikel
kemudian didispersikan dalam larutan emulsifier dingin dan selanjutnya
dihomogenisasi untuk menghasilkan nanopartikel lipid yang baik (20).
3) Metode Evaporasi Emulsifikasi Pelarut
Dalam metode ini, lipid dan obat dilarutkan dalam pelarut organik yang
larut dalam air dengan titik didih rendah. Larutan kemudian diemulsikan
dalam larutan emulsifier encer. Setelah penguapan pelarut di bawah
tekanan yang berkurang, nanopartikel organik terbentuk (20, 21).

4. Peran NLC dalam Meningkatkan Stabilitas Formulasi Kosmetik

1) Vitamin C
Vitamin C telah digunakan dalam preparasi farmasi dan kosmetik selama
bertahun-tahun. Dalam beberapa situasi, tubuh tidak dapat menghasilkan
jumlah antioksidan yang cukup, sehingga perlu untuk melengkapi
antioksidan baik dengan rute topikal maupun oral. Masalah utama yang
terkait dengan lapisan ozon adalah penipisan di atmosfer jadi; radiasi dari
matahari yaitu, UVA & UVB mencapai bumi dengan sangat cepat dalam
jumlah yang lebih tinggi. Dengan adanya radiasi ini, orang-orang di bumi
 23

rentan terhadap berbagai masalah yang berhubungan dengan kulit seperti

kanker kulit, kerut, kekeringan, dan kelainan pigmen berbintik-bintik.
Sehingga untuk mengatasi gangguan tersebut, kulit yang terkait perlu
memiliki antioksidan seperti vitamin C atau ascorbyl palmitate. Dalam
jenis antioksidan seperti itu, ketidakstabilan adalah kelemahan utama
karena vitamin C memiliki kecenderungan untuk mengalami oksidasi dan
juga teraktivasi ketika terekspos ke air. Vitamin C memiliki sifat hidrofilik
yang membatasi penetrasinya pada kulit, serta ketika digunakan sebagai
produk jadi, Vitamin C memiliki waktu paruh yang singkat. Untuk
meningkatkan stabilitas, lebih mudah untuk menggunakan bentuk
liposoluble (ascorbyl-6- palmitate, tetra-isopalmitoyl ascorbic acid dll)
sehingga lebih baik dalam menyiapkan NLC yang pada akhirnya
meningkatkan penetrasi sehingga penetrasi produk jadi ke kulit menjadi
lebih mudah pula (18).
2) Feniletil Resorsinol
Phenylethyl Resorcinol (4- (1-phenylethyl) 1, 3-Benzenediol, PR) adalah
agen pencerah baru yang memiliki kemampuan untuk menghambat
aktivitas tirosinase oleh Schmaus. Tirosinase ditemukan di hampir semua
jenis organisme yang memainkan peran penting dalam biosintesis pigmen.
Pada mamalia, tirosinase mengkatalisis oksidasi L-tirosin dan L-dopa
untuk membentuk melanin yang menentukan warna kulit dan rambut
mamalia. Menurut berbagai penyelidikan, kesimpulan yang dibuat bahwa
Phenylethyl Resorcinol adalah salah satu agen pencerah paling ampuh
yang pernah dilaporkan. Tetapi memiliki masalah aplikasi tertentu seperti
ketidakstabilan cahayanya, kelarutan air yang buruk yang mempengaruhi
penyerapan dan karena stabilitas foto rendah mungkin tidak efektif bila
diterapkan secara topikal. Untuk mengatasi masalah stabilitas dan
penyerapan ini, sangat bermanfaat untuk menyiapkan Nanostructured
Lipid Carriers, generasi kedua nanopartikel lipid. Ketika NLC dari
Feniletil Resorsinol terbentuk, NLC tersebur menunjukkan peningkatan
fotostabilitas serta bioavailabilitas (18).
 24

3) Lutein
Lutein adalah satu dari 20 karotenoid yang ditemukan di tubuh manusia.
Lutein juga merupakan pigmen larut lemak yang terdapat dalam berbagai
sayuran (misalnya bayam, kale) & kuning telur. Lutein memainkan peran
penting dalam kulit, dimana berfungsi untuk menjaga kulit agar tetap sehat
dengan mengurangi gangguan yang diinduksi UV seperti eritema dan
peradangan. Lutein berperan sebagai agen pelindung untuk kanker kulit,
juga merupakan filter cahaya biru. Lutein adalah molekul sensitif panas
yang memiliki kemungkinan degradasi ketika kontak dengan suhu tinggi.
Untuk mengatasi kelemahan utama ini, disarankan untuk menggunakan
NLC dari Lutein yang disiapkan dengan carnauba wax lipid yang
ditemukan untuk menunjukkan termostabilitas tertinggi dalam
peningkatan suhu (850°C) (18).
4) Lycopene
Lycopene adalah salah satu antioksidan yang paling kuat yang umunya
terdapat dalam tomat, semangka dan buah anggur merah muda.
Antioksidan ini memiliki kelarutan dalam air yang sangat rendah, masalah
stabilitas, dan tidak mudah berdifusi melalui epidermis ketika dioleskan.
Untuk itu, pilihan yang menarik adalah pemanfaatan nanopartikel lipid
untuk penghantaran Lycopene pada kulit. Karena NLC melindungi obat-
obatan yang labil secara kimia dari degradasi, NLC akhirnya memberikan
pelepasan berkelanjutan dari obat aktif yang dimuat. Jadi, ketika NLC
terbentuk, stabilitas kimia Lycopene meningkat dan di sisi lain degradasi
Lycopene terhambat ketika telah disimpan pada suhu rendah (18).
5) α-tocopherol
Saat ini terkait dengan penipisan lapisan ozon, penggunaan tabir surya
merupakan hal yang wajib untuk tujuan perlindungan kulit dari efek
berbahaya dari radiasi UV. Dalam produk kosmetik, α-tokoferol
digunakan sebagai antioksidan yang juga memiliki kemampuan untuk
mengurangi kerusakan kulit yang disebabkan oleh radiasi UV. Sebagian
besar sunscreen yang melindungi terhadap sinar UVA didasarkan pada
 25

filter organik UVA butyl-methoxydibenzoylmethane (BMDBM). Tetapi

filter ini memiliki masalah ketidakstabilan cahaya, sehingga untuk
mengatasi kekurangan stabilitas ini perlu mengenkapsulasi α-tocopherol
& BMDBM bersama-sama ke dalam nanopartikel berbasis lipid.
Enkapsulasi ini terbukti efektif dalam stabilisasi cahaya dari filter UVA
yang tidak stabil yang dienkapsulasi ke dalam NLC yang terkena radiasi
UV (18).

5. Formulasi Nanostructured Lipid Carriers

1) Komposisi
NLC terdiri dari campuran campuran lemak padat dan cair dan dalam fase
cair dengan surfaktan atau campuran surfaktan. Umumnya, lipid padat dan
lipid cair dicampur dalam perbandingan 70:30 hingga perbandingan
99,9:0,1. Konsentrasi surfaktan biasanya berkisar 1,5% - 5% (b / v).
Lipid yang digunakan dalam NLC harus biokompatibel, mudah terurai,
stabil secara kimia, dan harus bebas dari segala jenis efek beracun. Lipid
untuk formulasi NLC dipilih berdasarkan potensi kelarutan obat karena
kapasitas kelarutan obat menentukan jumlah obat yang akan terperangkap
dalam formulasi NLC. Studi kompatibilitas antara lipid dan obat-obatan
juga diperlukan untuk produksi NLC yang stabil. Karena beberapa
kombinasi lipid menunjukkan pemisahan fase, maka kombinasi yang
menunjukkan tidak ada pemisahan sampai 24 jam setelah pencampuran
harus dipilih untuk memformulasikan NLC yang stabil. Konsentrasi lipid
cair selalu penting dalam memodulasi ukuran partikel dan laju pelepasan
serta mengurangi tegangan permukaan dan viskositas sistem, selain itu
menyebabkan partikel NLC menjadi ukuran yang lebih kecil, yang pada
gilirannya memberikan luas permukaan yang tinggi dan mempromosikan
pelepasan obat kumulatif dengan persen yang lebih tinggi. Jumlah total
matriks lipid juga sangat mempengaruhi ukuran partikel dan efisiensi
penjebakan obat pada NLC. Ketika matriks lipid total meningkat, ukuran
partikel NLC yang lebih besar diperoleh dengan peningkatan efisiensi
 26

penjebakan obat. Viskositas yang lebih tinggi dari sistem menghasilkan

pertumbuhan dalam ukuran partikel, sedangkan pengurangan
kecenderungan pelepasan obat karena mengandung lipid yang lebih tinggi
menghasilkan efisiensi jebakan yang lebih tinggi. Jadi pemilihan
kandungan lipid yang optimal sangat penting, sementara memformulasikan
NLC memiliki karakteristik yang sangat baik (22).
Penggunaan surfaktan dalam formulasi NLC sangat penting untuk
mendispersikan satu fase yang tidak dapat bercampur dengan fase lainnya
selama proses fabrikasi. Surfaktan juga mencegah agregasi partikel NLC
dengan membentuk lapisan di atas permukaannya dan dengan demikian
memberikan stabilitas jangka panjang. Surfaktan juga seharusnya
menyebabkan partikel ke dalam ukuran kecil, mengurangi tegangan
antarmuka antara dua fase, pelarut lipid dan air, yang pada gilirannya
meningkatkan luas permukaan tetesan lipid sehingga menghasilkan
partikel yang lebih kecil. Jenis dan konsentrasi surfaktan juga
mempengaruhi profil kinetika pelepasan dan efisiensi penjebakan. Hal ini
terkait dengan fakta bahwa surfaktan mengurangi ketegangan antarmuka
sampai konsentrasi tertentu dimana lapisan partikel yang berlebihan
mengurangi potensi zeta yang menyebabkan aglomerasi partikel. Oleh
karena itu pemilihan surfaktan dan konsentrasinya adalah parameter
penting selama formulasi NLC. Surfaktan sangat penting untuk
mengembangkan sistem pengiriman NLC yang efektif yang memiliki
ukuran partikel terkontrol, distribusi ukuran yang sempit, dan menjamin
pelepasan obat yang lebih dapat diprediksi dan spesifik (22).
 27

Tabel II 2. Daftar Lipid dan Surfaktan yang digunakan untuk Formulasi NLC

2) Metode Preparasi
Berbagai metode yang digunakan untuk produksi SLN juga dapat
digunakan untuk produksi NLC. Terdapat metode yang paling umum
digunakan untuk produksi NLC, yaitu: (22)
a. Homogenisasi dengan Tekanan Tinggi
NLC disiapkan dengan teknik homogenisasi tekanan tinggi. Metode ini
memanfaatkan pemanasan fase lipid (campuran lipid padat dan cair)
paling sedikit 10°C di atas titik leburnya dan kemudian
menambahkannya ke larutan surfaktan yang dipanaskan pada suhu
yang sama dengan menggunakan pengaduk berkecepatan tinggi.
Campuran yang terbentuk dilewatkan melalui homogenizer bertekanan
tinggi pada kondisi optimum homogenisasi. Tekanan 500 bar dan dua
atau tiga siklus homogenisasi merupakan kondisi produksi umum.
Rekristalisasi lipid mengarah ke pembentukan NLC setelah
 28

mendinginkan nanodispersi panas ke suhu kamar dengan menempatkan

dalam penangas es. Untuk produksi NLC yang mengandung obat, obat
ini dilarutkan baik dalam lipid cair panas atau fase berair tergantung
pada kelarutan obat. NLC dapat disiapkan dalam skala besar
menggunakan teknik ini.
Teknik homogenisasi tekanan tinggi bisa menjadi homogenisasi
tekanan tinggi panas atau homogenisasi tekanan tinggi dingin. Dalam
teknik homogenisasi tekanan tinggi panas, prosesnya dilakukan pada
suhu di atas titik leleh dari lipid/lemak. Fase lipid dan fasa cair
disiapkan secara terpisah. Di sini, fase lipid terdiri dari campuran lipid
cair dan padat, sedangkan fase cair mengandung air suling ganda dan
surfaktan hidrofilik. Untuk jangka waktu tertentu, kedua fase
dipanaskan secara terpisah pada suhu tinggi. Kemudian fase cair
ditambahkan ke fase lipid dan dicampur dengan baik. Campuran
tersebut kemudian dihomogenisasi ketika dilewatkan melalui
homogenizer geser tinggi. Untuk mendapatkan partikel dalam ukuran
kecil dan seragam, campuran tersebut disonikasi menggunakan air
mandi atau sonicator tipe probe. Satu-satunya kelemahan dari metode
ini adalah degradasi pada obat yang tidak tahan panas. Dengan
demikian diperlukan proses yang lebih baik untuk meminimalkan
ketidakstabilan kimia.
Dalam teknik homogenisasi tekanan tinggi dingin, lelehan lipid
didinginkan dan lipid padat digiling ke mikropartikel lipid.
Mikropartikel kemudian terdispersi dalam larutan permukaan dingin
untuk membentuk presuspensi. Proses homogenisasi pada suspensi
dilakukan pada suhu kamar atau di bawah suhu kamar. Gaya geser
menyebabkan terputusnya mikropartikel secara langsung ke NLC.
Metode ini menghindari pelelehan lipid, oleh karena itu meminimalkan
hilangnya obat hidrofilik ke fase cair. Metode ini membutuhkan kontrol
semua parameter sehingga ukuran partikel mungkin tidak mencapai
rentang nanosized karena kurangnya perlakuan panas.
 29

b. Ultrasonikasi
NLC juga dapat disiapkan melalui ultrasonikasi. Dalam metode ini, pre-
emulsi diperoleh melalui dispersi fase lelehan lemak/lipid (lipid padat
dan lipid cair) dalam larutan surfaktan menggunakan pengaduk
berkecepatan tinggi. Nanoemulsi ultrasonik yang diperoleh kemudian
didinginkan hingga suhu kamar, menghasilkan persiapan NLC (22).
c. Metode Difusi Solven
Metode difusi solven digunakan sebagai metode produksi alternatif
untuk menyiapkan NLC dalam kondisi ringan. Seperti disebutkan
sebelumnya, NLC yang dihasilkan melalui metode homogenisasi
tekanan tinggi menunjukkan pelepasan obat secara tiba-tiba. Hal ini
terkait dengan peningkatan suhu yang digunakan dan konsentrasi tinggi
surfaktan yang digunakan. Tekanan homogenisasi yang tinggi juga
menyebabkan koalesensi partikel. Metode difusi solven mudah dan
tidak menggunakan peralatan khusus apa pun. Fase lipid, campuran
lipid padat dan cairan lipid, dan obat-obatan dilarutkan ke dalam fase
organik pada 50°C. Larutan organik yang dihasilkan kemudian
didispersikan dengan cepat ke dalam larutan cair asam yang
mengandung zat pendispersi, yaitu polivinil alkohol, di bawah agitasi
mekanik. Agregasi nanopartikel diperoleh ketika nilai pH fase cair
asam disesuaikan menjadi 1,2 dengan penambahan 0,1 M asam
hidroklorat. Sistem yang tersebar kemudian disentrifugasi dengan
kecepatan tinggi dan kemudian dilepaskan kembali dalam air suling.
Dispersi yang diperoleh dikeringkan dengan liofilisasi. Namun
kekurangan dari metode ini adalah kebutuhan untuk menggunakan
pelarut organik (22).
 30

6. Keunggulan Nanostructured Lipid Carriers

Sebagai pembawa obat baru, NLC menawarkan keuntungan yang berbeda
dalam hal peningkatan penjebakan obat (drug entrapment), berbagai modulasi
untuk pelepasan obat, stabilitas jangka panjang, dan penggunaan konsentrasi
surfaktan minimum dengan peningkatan jebakan obat-obatan. Semua ini
dibahas secara rinci, yaitu sebagai berikut: (22)
1) Peningkatan Kapasitas Pemuatan Obat
Selama produksi SLN, konsentrasi obat-obatan dalam lelehan lipid tetap
lebih tinggi daripada formulasi SLN akhir. Dengan demikian konsentrasi
obat yang lebih tinggi dalam lelehan lipid seharusnya menyebabkan
pelepasan obat yang segera selama proses pendinginan. Tetapi kasusnya
berbeda untuk NLC. Dalam NLC, bagian nano minyak hadir dalam matriks
padat lipid, yang menawarkan kemungkinan peningkatan peluang
kelarutan pada obat-obatan dibandingan lelehan lemak padat, sehingga
meningkatkan kapasitas total pemuatan obat. Akibatnya, keberadaan
kandungan lipid cair dalam komposisi NLC sangat meningkatkan efisiensi
jebakan obat. Hal ini dicapai karena lipid cair menyebabkan beberapa
kerusakan kristal pada lipid/lemak padat dan dengan demikian
ketidaksempurnaan dalam matriks kristal yang sangat teratur berlangsung
menyediakan ruang yang cukup untuk sejumlah besar obat yang akan
dimuat (22).
2) Modulasi Profil Pelepasan Obat
NLC diharapkan menunjukkan profil pelepasan obat bifasik, yaitu
pelepasan awal obat yang diikuti dengan pelepasan berkelanjutan pada
tingkat yang konstan. Lipid cair yang terletak di lapisan luar nanopartikel
seharusnya membentuk drug-enriched casing. Pada tahap awal, hal ini
menyebabkan pelepasan obat secara tiba-tiba. Lapisan luar yang diperkaya
dengan lipid cair menawarkan peningkatan minyak untuk melarutkan obat-
obatan hidrofobik yang lebih besar. Dengan demikian peningkatan
konsentrasi obat yang meningkat dilarutkan dan dimuat serta kemudian
secara tiba-tiba dilepaskan melalui difusi obat atau erosi matriks. Fase
 31

pelepasan obat awal yang tiba-tiba dan cepat diikuti oleh pelepasan yang
berkelanjutan dengan laju konstan dari inti lipid padat. Karena pelepasan
obat dari NLC merupakan fungsi dari komposisi matriks lipid, maka pola
pelepasan obat dapat ditingkatkan dan dimodulasi dengan memvariasikan
jumlah kandungan lipid cair sehubungan dengan lipid padat (22).
3) Stabilitas Obat Jangka Panjang Selama Penyimpanan
Gagasan NLC berasal dari fakta bahwa kristalisasi lipid menyebabkan
pelepasan obat. Jadi, lipid semacam ini digunakan dalam NLC yang padat,
tetapi tidak mengalami kristalisasi. Dengan menggunakan campuran
khusus yang terdiri dari lipid padat dan lipid cair, partikel-partikel memadat
setelah pendinginan tetapi tidak mengkristal. Kurangnya kristalinitas tidak
hanya mempengaruhi ukuran partikel, efisiensi penjebakan, dan
karakteristik pelepasan obat in vitro, namun lipid cair yang tertanam di
dalam lipid padat di NLC juga mencegah masalah stabilitas jangka panjang
yang timbul dari fenomena polimorfisme. Lipid cair memainkan peran
penting dalam mencegah kristalisasi. Ketika kristalisasi terjadi karena
supersaturasi, lipid cair seharusnya menyebabkan kondisi subsaturasi dari
lipid padat, sehingga menurunkan kristalisasi (22).
4) Penurunan penggunaan Konsentrasi Surfaktan
NLC merupakan pembawa nano yang unik karena dapat distabilkan
menggunakan konsentrasi surfaktan minimum yang mungkin bersamaan
dengan peningkatan efisiensi jebakan dan profil pelepasan obat yang
diinginkan. Bahkan NLC yang sangat stabil yang menarik obat lipofilik
dapat diperoleh dengan menggunakan konsentrasi surfaktan 0,5%-1%.
Menariknya, surfaktan yang tersedia semuanya diterima dalam hal
penstabilan NLC. Sebagai perbandingan, rentang penerimaan surfaktan
untuk emulsi lipid dan formulasi lainnya sangat sempit. Jadi, NLC adalah
pendekatan formulasi yang lebih disukai daripada emulsi lipid dimana
konsentrasi yang lebih tinggi dan rentang seleksi surfaktan yang sempit
merupakan masalah yang menjadi perhatian (22).
 32

F. EVAPORASI PELARUT
Pemilihan metode pembuatan nanopartikel bergantung dengan karakter
fisikokimia dari polimer dan obat yang akan dimasukkan. Adapun metode yang
paling banyak digunakan adalah metode emulsi ganda dan evaporasi pelarut.
Evaporasi pelarut merupakan salah satu metode yang paling sering digunakan
untuk preparasi nanopartikel. Dalam metode ini, larutan polimer disiapkan dalam
pelarut yang mudah menguap dan emulsi yang telah diformulasikan.
Di masa lalu, polimer preformed diklorometana dan kloroform banyak
digunakan, namun sekarang diganti dengan etil asetat yang memiliki profil
toksikologi yang lebih baik. Emulsi tersebut kemudian diubah menjadi suspensi
nanopartikel pada penguapan pelarut untuk polimer, yang diperbolehkan untuk
menyebar melalui fase kontinyu emulsi. Dalam metode konvensional, dua strategi
utama yang digunakan untuk pembentukan emulsi, preparasi single-emulsi,
misalnya, minyak dalam air (o/w) atau double-emulsi, misalnya, (air dalam
minyak)-dalam-air, (w/o)/w.
Metode ini memanfaatkan high-speed homogenisasi atau ultrasonikasi, diikuti
oleh penguapan pelarut, baik dengan pengadukan magnetik terus menerus pada
suhu kamar atau pada tekanan rendah. Partikel nano dikumpulkan oleh
ultrasentrifugasi dan dicuci dengan air suling untuk menghilangkan residu
stabilizer atau obat bebas dan dilyophilisasi untuk penyimpanan.
Disiapkan PLGA nanopartikel sekitar 200 nm dengan memanfaatkan
diklorometana 1,0% (b/v) sebagai pelarut dan PVA atau Span 40 sebagai
stabilizing agent. Atau bisa juga dengan disiapkan PLGA nanopartikel dengan
ukuran partikel 60-200 nm dengan menggunakan diklorometana dan aseton (8:2,
v/v) sebagai sistem pelarut dan PVA sebagai stabilizing agent.
Ukuran partikel yang dihasilkan dipengaruhi oleh jenis dan konsentrasi
stabilizing agent, kecepatan homogenizer dan konsentrasi polimer. Untuk
menghasilkan ukuran partikel kecil, sering digunakan homogenisasi berkecepatan
tinggi atau ultrasonikasi.
Polimer yang digunakan dalam metode ini adalah PLA, PLGA, EC, selulosa
asetat ftalat, Poli (β - kaprolakton)\(PCL), Poli (β-hidroksibutirat) (PHB). (23, 24)
 33

Gambar II 4. Skema Metode Evaporasi Pelarut (23)

G. SEDIAAN GEL
USP 24 dan NF 19 mendefinisikan gel sebagai sistem semisolida, baik berupa
suspensi yang dibangun oleh partikel anorganik halus (kecil) maupun molekul
organik besar yang diinterpenetrasikan dengan cairan. Apabila massa gel terdiri
atas suatu jaringan partikel halus diskrit, maka gel tersebut diklasifikasikan
sebagai sistem 2 fasa. Gel satu fasa terdiri atas makromolekul organik yang
terdistribusi secara uniform pada keseluruhan cairan sedemikian rupa sehingga
tidak terdapat batasan yang tampak di antara di antara makromolekul terdispersi
dan cairan (25).
Gel fasa tunggal dan jeli dapat digambarkan sebagai jaringan 3 dimensi yang
terbentuk dengan penambahan makromolekul, seperti protein, polisakarida, dan
makromolekul sintetik, terhadap cairan yang sesuai. Dalam farmasi umumnya
cairan berupa air dan larutan hidroalkoholik. Banyak gel polimer menunjukkan
reversibilitas di antara keadaan gel dan sol yang merupakan fasa cairan
mengandung makromolekul terdispersi atau melarut. Hanya saja pembentukan
beberapa gel polimer bersifat ireversibel karena rantainya terikat secara kovalen.
Jaringan 3 dimesi yang dibentuk oleh gel 2 fasa dan jeli dibentuk oleh beberapa
lempung koloidal anorganik (25).
 34

Pembentukan gel anorganik ini bersifat reversible. Gel biasanya dianggap lebih
rigid dari jeli karena gel mengandung lebih banyak ikatan kovalen sambung silang,
ikatan fisika lebih banyak atau secara sederhana kurang cair (25).
Polimer pembentuk gel menunjukkan seperangkat rigiditas, diawali dengan
suatu sol dan meningkat rigiditasnya menjadi musilago, jeli, gel dan hydrogel. Gel
farmasi dapat dikategorikan berdasarkan jaringan mikrostrukturnya, yaitu: (25)
1. Struktur terikat secara kovalen
Jaringan polimer yang terikat secara kovalen dengan struktur sempurna tidak
teratur, merupakan sistem ireversibel. Karena matriks gel yang dihasilkan
sering sangat kaku, gel ini diklasifikasikan sebagai “hidrogel”.
2. Struktur ikatan secara fisika
Jaringan polimer yang terikat secara fisika tidak teratur, akan tetapi pada
beberapa lokasi teratur, merupakan sistem yang reversibel, faktor seperti
temperatur dan ion tambahan, dapat menginduksi transisi diantara fasa sol dan
gel. Bentuk gel ini terutama dibentuk oleh polimer organik alam (protein dan
polisakarida) dan turunan semisintetik selulosa. Beberapa gel sintetik polimer
hidrofil juga termasuk dalam kelompok ini.
3. Struktur gel yang teratur baik
Termasuk gel mesofasa yang dibentuk oleh lempeng organik. Pada kondisi
yang sesuai, disperse dalam air dari beberapa silika, alumina, dan lempung
(clay) membentuk gel kaku atau lyogel. Apabila lempung yang termasuk kelas
smectic, seperti bentonite, alumunium silikat, hektorit, dan laponite, berkontak
dengan air, secara spontan lempung akan mengalami pemelaran osmotik untuk
menghasilkan suatu gel partikel lempung berbentuk lempeng yang berasosiasi
secara teratur.
Gel merupakan suatu sistem semi solida, baik berupa suspensi yang dibangun
oleh partikel anorganik halus (kecil) maupun molekul organik besar yang
terpenetrasi dengan cairan. Dalam penggunaannya, gel memiliki beberapa
keunggulan seperti penampilan sediaan yang jernih, tidak menyumbat pori-pori
dan menyediakan ruang pernapasan bagi pori-pori, mudah dicuci dengan air,
kemampuan menyebarnya yang baik sehingga mudah diaplikasikan secara
 35

topikal, dan keuntungan utamanya yaitu efek pendinginan pada saat diaplikasikan
pada kulit (26).
1. Berdasarkan fase koloidalnya gel dibedakan menjadi 2 golongan: (26)
a. Gel satu fase
Gel ini terbentuk dari makromolekul organic yang tersebar merata dalan
suatu cairan hingga tidak terlihat ikatan antara molekul makro yang
terdispersi dan cairan.
b. Gel dua fase
Gel yang tersusun dari kelompok-kelompok kecil dan berbeda. Gel ini juga
dapat disebut dengan magma.

2. Berdasarkan jenis pelarutnya, gel dibagi menjadi 3 golongan: (26)

a. Aquoeus
Gel yang mengandung air dalam jumlah yang banyak dan biasa
diformulasikan dengan polimer yang larut dalam air. Golongan ini
biasanya terdiri dari turunan selulosa (HPMC, NaCMC).
b. Hydrogel
Gel dengan bahan dasar air yang mengandung polimer hidrofil yang tidak
laru air. Saat didispersikan dalam air, polimer ini akan mengembang dan
menyerap air. Golongan ini terdiri dari polivinilalkohol, polivinilpirolidon.
c. Organogel
Gel yang menggunakan pelarut organik sebagai fase pendispersi.
Golongan ini terdiri dari polietilen dan alumunium stearat.

3. Karakteristik Gel (26)

a. Swelling
Pertambahan volume atau sediaan gel yang mengembang dapat terjadi
akibat sifat komponen penyusunnya yang dapat menyerap larutan.
Pertambahan volume pada gel dapat terjadi secara tidak sempurna akibat
adanya ikatan silang antar polimer yang terjadi dalam matriks gel sehingga
 36

kelarutan komponen gel berkurang. Interaksi antara gel dengan pelarut

dapat terjadi akibat penetrasi pelarut ke dalam matriks gel.
b. Sinersis
Sinersis dapat terjadi pada hydrogel dan organogel. Kontraksi yang terjadi
didalam gel menyebabkan cairan yang terjerat keluar dan berada di
permukaan gel. Mekanisme terjadinya kontraksi berhubungan dengan fase
relaksasi akibat adanya tekanan elastis pada pembentukan gel dimana
tekanan yang elastis mendorong pembentukan masa gel yang stabil.
Adanya perubahan pada masa gel akibat kontraksi menyebabkan jarak
antar matriks berubah, dan cairan akan menuju permukaan.
c. Rheologi
Sediaan gel memiliki sifat aliran pseudoplastis yang khas akibat flokulasi
gelling agent dan padatan yang terdispersi sehingga menunjukkan
penurunan viskositas dan peningkatan laju aliran.

H. UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DENGAN METODE DPPH (1,1-difenil-

2-pikrilhidrazil)
DPPH adalah suatu senyawa organik yang mengandung nitrogen tidak stabil
dengan absorbansi kuat pada panjang gelombang maksimum 517 nm dan berwarna
ungu gelap. Setelah bereaksi dengan senyawa antioksidan, DPPH akan tereduksi
dan warnanya akan berubah menjadi kuning (27).

Gambar II 5. Diphenylpicrylhidrazyl Gambar II 6. Diphenylpicrylhidrazine

(free radical) (28) (non radical) (28)
 37

Molekul 1,1-difenil-2-pikril hidrazil (α, α-difenil-β-picrylhydrazyl) (Gambar

II.5) dicirikan sebagai radikal bebas yang stabil berdasarkan delokalisasi elektron
cadangan atas molekul sebagai utuh, sehingga molekul tidak mengalami dimerise,
seperti halnya dengan sebagian besar radikal bebas lainnya, delokalisasi juga
menghasilkan warna violet yang pekat, ditandai oleh pita absorpsi dalam larutan
etanol yang berpusat pada sekitar 520 nm (28).
Ketika suatu larutan DPPH dicampur dengan suatu zat yang dapat
menyumbangkan atom hidrogen, maka akan memunculkan bentuk yang tereduksi
(Gambar II.6) dengan hilangnya warna violet ini (meskipun akan ada harapan
untuk menjadi warna kuning pucat yang tersisa dari grup picryl masih ada).
Mewakili radikal DPPH oleh dan molekul donor oleh AH, reaksi utamanya adalah

di mana ZH adalah bentuk tereduksi dan bebas rasial yang dihasilkan pada langkah
pertama ini. Radikal yang terakhir ini kemudian akan mengalami reaksi lebih lanjut
yang mengontrol keseluruhan stoikiometri, yaitu, jumlah molekul DPPH dikurangi
(decolorised) oleh satu molekul reduktan (28).
Reaksi tersebut dimaksudkan untuk menyediakan hubungan dengan reaksi
yang terjadi dalam sistem pengoksidasi, seperti autoksidasi lipid atau zat tak jenuh
lainnya; molekul DPPH dengan demikian dimaksudkan untuk mewakili radikal
bebas yang terbentuk dalam sistem yang aktivitasnya harus ditekan oleh zat AH
(28).
Metode dengan pereaksi DPPH ini merupakan metode yang cepat, mudah, dan
peka untuk digunakan sebagai metode uji aktivitas peredaman radikal bebas.
Selain itu metode DPPH ini dapat digunakan pada sampel yang kecil atau sedikit.
DPPH juga merupakan radikal bebas yang stabil dapat digunakan untuk
menentukan sifat aktivitas peredaman radikal bebas suatu ekstrak (29).
Metode uji aktivitas peredaman radikal bebas DPPH secara kualitatif dilakukan
dengan cara menyemprotkan senyawa radikal bebas DPPH ini pada pelat KLT.
Bercak kuning pada latar ungu menunjukkan adanya aktivitas peredaman radikal
bebas (14).
 38

Metode uji aktivitas peredaman radikal bebas DPPH secara kuantitatif dapat
ditentukan harga IC50 berdasarkan grafik regresi linier yang diperoleh. IC50
merupakan suatu parameter dalam penentuan aktivitas antioksidan, berupa
konsentrasi zat antioksidan yang efektif untuk menghambat 50% aktivitas radikal
bebas DPPH. Nilai IC50 diambil dari persamaan grafik regresi linier antara persen
inhibisi berdasarkan absorbansi sampel dengan blanko yang diukur dengan
spektrofotometer cahaya tampak pada panjang gelombang 517 nm (28).

I. DATA PREFORMULASI
1. Asam Stearat

Sinonim : Acidium stearicum, cetylacetic acid, crodacid

Nama Kimia : Octadecanoic acid
Rumus Molekul : C18H36O2
Bobot Molekul : 284,47
Pemerian : Bentuk padat, putih atau putih kekuningan, gak mengkilat,
kristal padat atau putih kekuningan. Sedikit berbau
(dengan batas bau 20 ppm) dan rasa seperti lilin.
Kelarutan : Mudah larut dalam benzene, larut dalam etanol 95%,
praktis tidak laut dalam air.
Nilai HLB : 15
Suhu Lebur : 69 - 70°C
Kegunaan : Lipid carrier
Konsentrasi : 1-20% (oinment dan krim)
Stabilitas : Asam stearat tidak dapat bercampur dengan sebagian
besar logam hidroksida dan dengan basa, bahan pereduksi
dan bahan-bahan pengoksida.
 39

2. Virgin Coconut Oil

Sinonim : Copra Oil, Oleum cocois
Nama Kimia : Coconut Oil
Pemerian : Cairan jernih, tidak berwarna atau kuning pucat, bau khas,
dan tidak tengik.
Kelarutan : Sangat mudah larut dalam eter P dan kloroform P. Pada
suhu 60°C, mudah larut dalam etanol 96% P, kurang larut
pada suhu yang lebih rendah.
Titik Leleh : 23 – 26°C
Konsentrasi : 50 – 70 %
HLB Butuh : 14,7
Kegunaan : Lipid carrier
Stabilitas : Pada udara terbuka minyak dapat teroksidasi
Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat, terlindung dari cahaya

3. Carbomer 940
Sinonim : Acrypol; Acritamer; Acrylic polimer; Carbomera
carbopol; Carboxy polymethylene
Bobot Molekul : 7 x 105 – 4 x 109 g/mol
Pemerian : Bentuk serbuk higroskopis, putih, halus, bau khas
Kelarutan : Larut dalam air, setelah dinetralkan larut dalam etanol
(95%) dan gliserin.
Kegunaan : Gelling agent
pH : 2,5 – 3,0
Inkompatibilitas : Fenol, asam kuat, elektrolit level tinggi, dan Na benzoat
Konsentrasi : Sebagai bahan pembentuk gel masker 0,5% – 0,2%
Karbomer adalah salah satu jenis polimer hidrofilik yang banyak
digunakan dalam berbagai bidang khususnya bidang kimia, farmasi, dan
kesehatan. Karbomer merupakan polimer yang memiliki permeabilitas oksigen
 40

yang baik, tidak bersifat imunogenik, dan memiliki sifat sebagai pengemulsi
serta dapat melembabkan.

4. Tween 80
Pemerian : Cairan kental seperti minyak; jernih, kuning; bau asam
lemah, khas.
Kelarutan : Mudah larut dalam air, dalam etanol 95% P, dalam etil
asetat P dan dalam methanol P, sukar larut dalam paraffin
cair P dan dalam minyak kapas P.
Stabilitas : Stabil dalam elektronik, asam lemah dan basa.
Inkompatibel : Menyebabkan diskolorasi terutama dengan fenol, tannin.
Aktivitas mikroba berkurang.
Kegunaan : Surfaktan nonionik
Konsentrasi : m/a : 1-15%, a/m : 1-10%
HLB : 15

5. Span 80
Pemerian : Cairan seperti minyak, jernih berwarna kuning muda
hingga coklat muda, bau khas lemah.
Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air, tetapi terdispersi dalam air,
larut dalam alcohol, mudah larut dalam minyak.
Stabilitas : Stabil pada basa lemah dan asam lemah juga larutan
elektrolit, dapat membentuk sabun pada basa kuat.
Kegunaan : Surfaktan nonionik
Konsentrasi : m/a : 1-15%, a/m : 1-10%
Penyimpanan : Disimpan ditempat tertutup rapat, sejuk, dan kering.
HLB : 4,3
 41

6. Trietanolamin

Sinonim : Trietilamin; Trihidroksi trietilamin

Nama Kimia : 2,2’2’’-Nitrilotrietanol
Rumus Molekul : C6H15NO3
Bobot Molekul : 149,19
Jarak Lebur : 20°C - 21°C
HLB : 12,0
Pemerian : Cairan agak higroskopik, kental, jernih, tidak berwarna
hingga kuning muda, bau amoniak
Kelarutan : Mudah larut dalam air dan etanol (95%) P, metanol,
aseton, larut dalam kloroform P
pH : 10,5
Kegunaan : Agen pengalkalisasi
Konsentrasi : 2-4%
Inkompatibilitas : Bereaksi dengan asam mineral membentuk garam kristal
dan ester, asam mineral, tembaga, tionil klorida
Stabilitas : Stabil bila disimpan pada temperatut diatas 15°C
Viskositas : 590 mPa s (590 cP) pada suhu 30°C

7. Propilen glikol

Nama kimia : 1,2-dihidroksipropan, 1,2-propanadiol

Rumus molekul : C3H8O2
Bobot molekul : 76,09
 42

Pemerian : Cairan jernih, kental tidak berwarna, praktis tidak berbau,

rasa khas, higroskopis
Kelarutan : Dapat bercampur dengn air, aseton, etanol 96%, gliserin
dan kloroform
Bobot jenis : 1,038 g/cm3 pada suhu 20 derajat
pH : 3,0-6,0
Kegunaan : Kosurfaktan, pelembab (humektan), pengawet
Konsentrasi : 15% sebagai pelembab, 15%-30% sebagai pengawet, 5%-
80% sebagai solven dan kosolven pda sediaan topikal
Stabilitas : Propilen glikol stabil pada suhu dingin pada wadah yang
tertutup baik, tetapi pada temperatur tingi akan teroksidasi
membentuk produk seperti propionaldehid, asam laktat,
asam piruvat dan asam asetat. Secara kimia propilen glikol
stabil saat dicampur dengan etanol (95%), gliserin atau
air.
Inkompatibilitas : Dengan larutan pengoksidasi seperti potassium
permanganate.
Penyimpanan : Propilen glikol bersifat higroskopik, sehingga harus
disimpan pada wadah yang tertutup baik, terlindung dari
cahaya, di tempat sejuk dan kering.

8. Metil Paraben

Nama lain : Nipagin, metil4-hidroksibenzoat

Rumus molekul : C8H8O3
 43

Bobot molekul : 152,15

Pemerian : Serbuk kristal putih atau tidak berwarna, tidak berbau atau
hampir tidak berbau dan sedikit menimbulkan rasa
terbakar
Kelarutan : Larut dalam eanol, propilen glikol, praktis tidak larut
dalam minyak, sukar larut dalam air, tidak larut dan agak
sukar larut dalam air suhu 80℃
Kegunaan : Antimikroba
Konsentrasi : 0,02%-0,3%
Stabilitas : Stabil dalam larutan pH 3-6 pada suhu kamar, tahan
terhadap pemanasan hingga 120℃

9. Propil Paraben

Nama lain : Nipasol, propil 4-hidroksibenzoat

Rumus molekul : C10H12O3
Bobot molekul : 180,20
Pemerian : Serbuk atau kristal putih, tidak berbau, tidak berasa
Kelarutan : Larut dalam etanol 96% dan propilen glik, sangat sukar
larut dalam minyak mineral, sukar larut dalam air bersuhu
80℃
Kegunaan : Antimikiroba
Konsentrasi : 0,01%-0.6%
Stabilitas : Stabil dalam larutan pH 3-6 pada suhu kamar, tahan
terhadap pemanasan hingga 120℃
 44

10. Air murni

Sinonim : Purified Water
Rumus molekul : H2O
Bobot molekul : 18,02
Pemerian : Cairan jernih tidak berwarna, tidak berbau dan tidak
mempunyai rasa
Kelarutan : Bercampur dengan pelarut polar
Kegunaan : Pelarut
pH : 5,0-7,0
Stabilitas : Secara kimiawi stabil pada semua suasana

11. Parfum
Pemerian : Cairan kuning, jernih, transparan dan berbau khas.
Kelarutan : Larut dalam fase minyak dan air.
Kegunaan : Sebagai pewangi pada cream dan gel.
Penyimpanan : Disimpan ditempat yang tertutup rapat, sejuk dan
terlindung dari cahaya

J. EVALUASI
1. Evaluasi Nanopartikel (NLC) (24)
Setelah persiapan nanopartikel, penting untuk memastikan bahwa partikel yang
diperoleh memiliki sifat yang diinginkan dan cocok untuk pemberian. Berbagai
parameter termasuk dalam karakterisasi SLN seperti analisis ukuran partikel,
potensial zeta, scanning electron microscopy, indeks polidispersitas, dan
pemindaian diferensial kolorimetri dan pelepasan obat dan stabilitas obat.
a. Ukuran Partikel
Dalam menentukan ukuran partikel pada NLC digunakan laser diffraction
dan photon correlation spectroscopy (PCS). Teknik PCS dikenal juga
sebagai teknik DLS. Dilakukan pengukuran berdasarkan fluktuasi
intensitas cahaya yang tersebar yang disebabkan oleh pergerakan partikel
dan dapat digunakan untuk mengukur hingga 3 μm, dan pada ukuran
 45

partikel yang lebih besar dilakukan pengukuran dengan fraksi laser.

Penentuan ukuran partikel berdasarkan pada ketergantungan dari sudut
difraksi pada jari-jari partikel sehingga jenis lipid, rasio lipid, dan surfaktan
sangat berpengaruh. Apabila digunakan konsentrasi tinggi surfaktan,
diperoleh struktur yang lebih kaku dan partikel dengan ukuran lebih kecil.
Ukuran partikel yang memenuhi rentang nanopartikel adalah 10 – 1000nm.
b. Potensial Zeta
Pengukuran potensial zeta berfungsi untuk menentukan muatan pada
pemukaan nanopartikel dalam larutan koloidal. Potensial zeta menyatakan
derajat tolak-menolak antar partikel terdispersi dengan muatan sejenis dan
saling berdekatan. Semakin besar ikatan tolak-menolak antara partikel
maka semakin kecil kemungkinan partikel saling bergabung dan
membentuk agregat. Nilai potensial zeta yang lebih besar dari 30 mV
menandakan stabilitas fisik dan elektrostatik yang baik.
c. Indeks polidispersitas
Nilai indeks polidispersitas (PDI) menunjukka distribusi ukuran partikel
dengan rentang nilai dari 0 – 1. Apabila sebuah nanopartikel memiliki nilai
PDI yang mendekati 0 maka, dispersi ukuran partikel adalah homogen.
Apabila nilai PDI dalam batas rentang 0,5 – 1 maka disperse ukuran
partikel adalah heterogen. PDI dengan nilai lebih dari 1 menunjukkan
distribusi ukuran partikel yang sangat luas dan dapat mengandung partikel
besar atau agregat yag kemudian secara perlahan akan mengalami
sedimentasi.
d. Scanning Electron Microscopy (SEM)
Scanning electron microscopy (SEM) merupakan alat yang digunakan
untuk memperoleh informasi tentang ukuran nanopartikel, distribusi
ukuran partikel, dan karakterisasi fisik atau struktur internal nanopartikel,
baik digunakan untuk informasi morfologi karena memiliki resolusi tinggi
dan akan menyediakan gambar dua dimensi.
 46

e. Difraksi sinar X
Sinar X digunakan dalam difraksi dengan panjang gelombang antara 0,5 –
2,5 A, dimana pada panjang gelombang cahaya tampak mencapai hingga
6000A, spectrum sinar X terletak pada spectrum sinar gamma dan sinar
UV. Teknik difraksi sinar X merupakan metode yang dianggap lebih
mudah untuk mendapatkan informasi struktur kristal, karakterissi sidik jari
material kristal, dan penentuan strukturnya sehigga dapat diketahui jumlah
fase kristal yang terkandung. Sinar X difraksikan oleh kristal seperti cahaya
tampak yang didispersikan menjadi spectrum warna oleh rulled grating
(kepingan gelas dengan garis sejajar yang sama). Hal ini disebabkan sinar
X mempunyai panjang gelombang yang hampir sama dengan jarak antara
atom atau molekul kristal. Pola difraksi sinar X pada kristal datar,
memungkinkan untuk menentukan jarak dari berbagai lempengan krisis
kristal.
f. Differential Scanning Colorimetry (DSC)
Pemindaian kolorimetri diferensial (DSC) dan diffractometry serbuk X-ray
dilakukan untuk menentukan derajat kristalinitas dalam dispersi partikel.
Dalam proses preparasi, sampel DSC dipanaskan dari 25-85 ˚C dan
didinginkan pada 85-20 ˚C di bawah nitrogen cair. DSC juga digunakan
untuk menentukan sifat dan spesiasi kristalinitas dalam nanopartikel
melalui pengukuran suhu kaca dan titik leleh.
2. Evaluasi Gel
Evaluasi gel terbagi menjadi 2, yaitu evaluasi parameter fisik dan kimia.
Evaluasi parameter fisik dilakukan dengan capa pengujian organoleptik,
viskositas, dan sifat alir yang disesuaikan pada rentang suhu selama
penyimpanan dan penggunan sediaan. Sedangkan evaluasi parameter kimia
ditentukan melalui pengukuran pH sediaan gel pada rentang suhu selama
penyimpana dan penggunaan sediaan.
 47

K. LANDASAN TEORI
Pada penelitian ini digunakan buah asam kranji (Dialium indum L.) untuk
dimanfaatkan kandungan antioksidannya karena mengandung senyawa yang
memiliki sifat antioksidan kuat dalam melawan radikal bebas dan mengurangi
kerusakan sel, yaitu flavonoid, polifenol, asam askorbat, beta karoten, lycopene,
dan lain-lain (6).
Untuk meningkatkan keefektifan antioksidan dari buah asam kranji, ekstrak
buah asam kranji diformulasikan dalam bentuk kosmetik sediaan topikal, yaitu gel
dengan menggunakan teknologi nanopartikel. Aplikasi nanopartikel pada sediaan
kosmetik dimaksudkan agar penghantaran bahan aktif kosmetik lebih tepat sasaran
karena ukuran partikelnya yang kecil serta untuk mengurangi efek samping (3).
Sistem penghantaran nanopartikel dipilih dengan tujuan memperoleh ukuran
partikel yang kecil dalam upaya meningkatkan proses absorbsi dan penetrasi bahan
aktif dari sediaan ke dalam kulit. Pemanfaatan nanopartikel pada formulasi sediaan
ini menggunakan tipe NLC (Nanostructured Lipid Carrier) yang memiliki
kemampuan penjerapan lipofilik dan hidrofilik pada matriks yang baik, dan
meningkatkan kapasitas muat obat, namun menghasilkan viskositas yang rendah
sehingga nanopartikel diformulasikan ke dalam sediaan semi solid seperti gel
untuk meningkatkan viskositas agar tercapai konsistensi yang ideal untuk aplikasi
topikal dan meningkatkan stabilitas nanopartikel itu sendiri. Metode yang
digunakan adalah metode evaporasi pelarut karena berdasarkan penelitian yang
telah dilakukan sebelumnya, metode ini menghasilkan ukuran partikel dan indeks
polidispersitas yang paling baik.
Dalam penelitian ini akan dilakukan ekstraksi dari asam kranji (Dialium indum
L.) dengan cara maserasi kinetik menggunakan cairan penyari etanol 96% untuk
menarik senyawa fenolik yang memiliki aktivitas antioksidan. Kemudian ekstrak
asam kranji tersebut dibuat ke dalam bentuk nanopartikel dengan menggunakan
metode Nanostructured Lipid Carriers (NLC). NLC yang terbentuk kemudian
dikarakterisasi meliputi ukuran partikel, indeks polidipersitas, potensial zeta, dan
morfologi nanopartikel, setelah itu diformulasikan menjadi sediaan gel hingga
diperoleh sediaan yang baik secara fisik dan kimia serta dapat memberikan
 48

perlindungan pada kulit. Etanol 96% dipilih sebagai pelarut karena mengalami
evaporasi secara sempurna sehingga tidak meninggalkan jejak etanol pada ekstrak
yang dapat bersifat toksik apabila digunakan pada manusia.
Sistem Nanostructured Lipid Carriers (NLC) menggunakan mix lipid yang
terdiri dari lipid padat dan lipid cair yang distabilkan oleh satu atau dua surfaktan
yang membentuk matrik inti yang cair. Lipid cair yang digunakan adalah virgin
coconut oil yang kaya dengan Vitamin E sehingga dapat menutrisi dan
melembabkan kulit, merupakan antioksidan alami untuk kulit, tidak bersifat toksik,
dan tidak menyebabkan iritasi pada kulit dan mata, sesuai dengan penelitian
sebelumnya. Selain itu virgin coconut oil juga digunakan karena banyak
mengandung asam laurat yang merupakan asam lemak jenuh rantai sedang
sehingga dalam suhu yang panas lebih tidak mudah teroksidasi seperti olive oil.
Sebagai lipid padat, digunakan asam stearat karena sifat biokompabilitasnya yang
baik dengan jaringan manusia, toksisitasnya yang rendah bila dibandingkan
dengan bahan sintesis, dan bersifat netral pada cairan fisiologis.
Selain mix lipid pada NLC juga ditambahkan emulsifier agent berupa
surfaktan. Surfaktan yang digunakan berasal dari golongan polisorbat (Tween 80)
dan sorbitan monoester (Span 80). Tween 80 digunakan karena memiliki aktivitas
yang tinggi pada permukaan dan toksisitasnya rendah. Span 80 digunakan karena
memiliki HLB yang rendah dan merupakan golongan sorbitan monoester yang
sering digunakan. Kombinasi keduanya digunakan untuk mendispersikan dua fase
yang tak campur dan mencegah agregasi partikel untuk meningkatkan stabilitas.
Carbomer 940 dipilih sebagai gelling agent karena kemampuannya
membentuk gel pada konsentrasi rendah, dapat terdispersi dengan baik, parikel-
partikelnya mudah terbasahi, dan memiliki kejernihan yang baik serta mampu
melembabkan kulit.
Penambahan TEA sebagai alkalizing agent bertujuan untuk menetralkan sifat
asam dari karbomer sehingga memenuhi persyaratan pH kulit (4,5 – 6,5) serta
dapat membentuk sediaan gel yang jernih. Propilen glikol berfungsi sebagai
humektan untuk menjaga kelembaban kulit serta mencegah produk gel menjadi
kering karena dapat memberikan efek moisturization serta mengurangi rasa
 49

lengket pada permukaan kulit. Metil paraben dan propil paraben digunakan sebagai
pengawet.

L. HIPOTESIS
1. Ekstrak etanol 96% buah asam kranji dapat diformulasikan menjadi sediaan
gel Nanostructured Lipid Carriers yang jernih dan stabil secara termodinamika
2. Nanostructured Lipid Carriers ekstrak buah asam kranji dapat memiliki
aktivitas antioksidan
3. Formulasi gel Nanostructured Lipid Carriers ekstrak asam kranji dapat
memenuhi persyaratan secara fisika dan kimia dan memiliki aktivitas
antioksidan.
 50

BAB III
RANCANGAN PENELITIAN

A. PRINSIP PENELITIAN
Penelitian diawali dari pengumpulan bahan penelitian hingga diperoleh ekstrak
kental buah asam keranji yang diperoleh melalui proses ekstraksi menggunakan
etanol 96%. Ekstrak kental yang didapatkan kemudian dilakukan penapisan
fitokimia dan uji aktivitas antioksidan. Ekstrak kental yang memiliki aktivitas
antioksidan kemudian dilakukan pemeriksaan parameter mutu dan penetapan
kadar flavonoid total. Ekstrak kental selanjutnya dibuat Nanostructured Lipid
Carriers (NLC). NLC yang terbentuk dikarakterisasi meliputi ukuran partikel,
indeks polidispersitas, zeta potensial, dan morfologi nanopartikel dengan Scanning
electron microscopy (SEM) pada NLC ekstrak buah asam keranji dan uji aktivitas
antioksidan. NLC ekstrak buah asam keranji tersebut kemudian dibuat menjadi
sediaan gel. Sediaan gel NLC ekstrak buah asam keranji yang dihasilkan dilakukan
uji aktivitas antioksidan dengan metode peredaman radikal bebas menggunakan
DPPH dan didapatkan IC50.

B. BAHAN PENELITIAN
Bahan yang digunakan untuk penelitian ini adalah buah asam kranji (Dialium
indum L.) yang diperoleh dari Kompliment, Serang, Banten.

C. TEMPAT PENELITIAN
1. Laboratorium Teknologi Bahan Alam Fakultas Farmasi Universitas Pancasila,
Jakarta Selatan.
2. Laboratorium Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Pancasila, Jakarta Selatan.
3. Laboratorium Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Pancasila, Jakarta
Selatan.
 51

4. Laboratorium Teknologi Formulasi Semi Padat dan Cair Fakultas Farmasi

Universitas Pancasila, Jakarta Selatan.
5. Laboratorium Teknologi Farmasi Sediaan Padat Fakultas Farmasi Universitas
Pancasila, Jakarta Selatan.

D. TAHAP PENELITIAN
1. Pengumpulan dan Penyediaan Bahan Penelitian
Bahan utama yang digunakan adalah buah Asam Kranji (Dialium indum L.)
yang berasal dari Serang, Banten.
2. Determinasi Tanaman Dialium indum L.
Determinasi Asam Kranji (Dialium indum L.) dilakukan di Herbarium
Bogorinese, Puslitbang, LIPI, Bogor.
3. Penyiapan Simplisia
Penyediaan simplisia buah Asam Kranji (Dialium indum L.) dilakukan dengan
cara membuka cangkang kulit buah Dialium indum L., lalu bagian buah dari
tanaman Dialium indum L. dibersihkan dari kotoran yang melekat, setelah itu
dihancurkan menggunakan blender laboratorium. Buah Dialim indum L. yang
telah dihaluskan kemudian dikeringkan di udara sampai berat konstan di
tempat berventilasi pada suhu sekitar 30 ± 2° C, bentuk bubuk halus yang
diperoleh disimpan pada suhu sedang sampai digunakan lebih lanjut.
4. Pembuatan Ekstrak Buah Asam Keranji
Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi. Sebanyak 150 g buah asam kranji
yang telah dihaluskan dimasukkan ke dalam toples kaca lalu ditambahkan 500
mL pelarut etanol 96% hingga sampel terendam semuanya. Maserasi selama
3x24 jam, disaring kemudian dilakukan remaserasi. Filtrat diuapkan untuk
menghilangkan pelarutnya menggunakan rotary vakum evaporator hingga
diperoleh ekstrak kental.
5. Pemeriksaan Parameter Mutu Ekstrak Buah Asam Keranji
Karakteristik meliputi pemeriksaan organoleptik, ketercampuran ekstrak
dengan pelarut, kadar air dan pH.
 52

6. Penetapan Kadar Flavonoid Total

Penetapan kadar flavonoid total untuk memberikan informasi kadar falvonoid
yang terkandung didalam ekstrak. Metode analisis yang biasa digunakan
adalah dengan metode spektrofotometri.
7. Pengujian Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol 96% Buah Asam
Keranji
8. Pemeriksaan Bahan Tambahan
Pemeriksaan bahan tambahan NLC dan gel NLC yang terdiri dari asam stearat,
Virgin Coconut Oil, carbomer 940, tween 80, span 80, trietanolamin, propilen
glikol, metal paraben, propil paraben, dan air murni dilakukan pemeriksaan
berdasarkan yang tertera pada masing-masing bahan.
9. Pembuatan Nanostructured Lipid Carriers (NLC) Ekstrak Etanol 96%
Buah Asam Keranji
Pembuatan Nanostructured Lipid Carriers (NLC) ekstrak etanol buah asam
kranji dengan metode evaporasi pelarut.
10. Karakterisasi Nanopartikel Ekstrak Buah Asam Keranji
Karakterisasi meliputi ukuran partikel, zeta potensial, indeks polidispersitas,
morfologi nanopartikel dengan Scanning Electron Microscopy (SEM), pola
difraksi sinar X, dan pemindaian kolorimetri diferensial (DSC).
11. Pengujian Sisa Pelarut Aseton
12. Pembuatan Sediaan Gel
Pembuatan sediaan gel dari ekstrak NLC Dialium indum L. dengan
mencampurkan ekstrak NLC Dialium indum L. dengan basis gel.
13. Evaluasi Parameter Mutu Fisik dan Kimia Gel
a. Evaluasi parameter mutu fisik sediaan meliputi :
1) Evaluasi organoleptik : warna, bau dan tekstur.
2) Evaluasi homogenitas gel dengan menggunakan kaca objek.
3) Evaluasi viskositas dan sifat alir dengan menggunakan viskometer
Brookfield tipe VR.
b. Evaluasi parameter mutu kimia sediaan
Evaluasi pH sediaan gel dengan menggunakan pH meter.
 53

14. Uji Aktifitas Antioksidan Sediaan Gel

15. Analisis data
Hasil analisis menggunakan analisis varian (ANOVA) satu arah dengan
konvidensi 95% atau P=0,05.
 54

BAB IV
BAHAN, ALAT, DAN METODE PENELITIAN

A. BAHAN
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah asam keranji (buah
Dialium indum L.) (Serang), etanol 96%, asam stearat, Virgin Coconut Oil,
carbomer 940, tween 80, span 80, trietanolamin, propilen glikol, metil paraben,
propil paraben, air murni, dan parfum.

B. ALAT
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah wadah kaca (toples),
maserator, ayakan, rotary vacuum evaporator, Particle Size Analizer, Zetasizer
200 (Malvern, UK), Scanning Electron Microscopy (SEM), timbangan analitik
(AND, GR-200), waterbath, lemari pendingin (LG), stirrer (IKA, RW-20), pH
meter (Hanna instrument, HI 2211), Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu, 1800),
oven, cawan penguap (China), alat-alat gelas, tabung reaksi (Pyrex), alat-alat
volumetrik, pipet tetes, alat ukur kemampuan menyebar, kaca objek, cover glass,
jangka sorong, alumunium foil, kertas saring, kapas, plastic wrap, tissue, vortex
(Maxi Mix® II tipe M37600), Viskometer Brookfield RV.
 55

C. METODE PENELITIAN
1. Penyediaan Bahan Penelitian
Bahan utama yang digunakan adalah buah Asam keranji (Dialium indum L.)
yang diperoleh dari Kompliment, Serang.

2. Determinasi Tanaman
Buah Asam keranji (Dialium indum L.) di determinasi di Herbarium
Borgoriense, Puslitbang, LIPI, Bogor.

3. Penyediaan simplisia Buah Asam Keranji

Penyediaan simplisia buah Asam Keranji (Dialium indum L.) dilakukan
dengan cara membuka cangkang kulit buah Dialium indum L., lalu bagian
buah dari tanaman Dialium indum L. dibersihkan dari kotoran yang melekat,
setelah itu dihancurkan menggunakan blender laboratorium. Buah Dialim
indum L. yang telah dihaluskan kemudian dikeringkan di udara sampai berat
konstan di tempat berventilasi pada suhu sekitar 30 ± 2 ° C, bentuk bubuk
halus yang diperoleh disimpan pada suhu sedang sampai digunakan lebih
lanjut.

4. Pembuatan Ekstrak Buah Asam Keranji

Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi. Sebanyak 150 g daging buah asam
keranji dimasukkan ke dalam toples kaca lalu ditambahkan 500 mL pelarut
etanol 96% hingga sampel terendam semuanya. Maserasi selama 3x24 jam
kemudian disaring, kemudian lakukan remaserasi. Filtrat diuapkan untuk
menghilangkan pelarutnya menggunakan rotary vakum evaporator hingga
diperoleh ekstrak kental.

5. Karakterisasi Ekstrak Buah Asam Keranji

a. Organoleptik : meliputi warna, bau, dan bentuk dari ekstrak.
b. Uji ketercampuran pelarut
 56

Uji ketercampuran dilakukan dengan melarutkan 1 gram ekstrak buah

asam keranji dengan 10 mL air suling, 10 mL etanol 96%, 10 mL
propilenglikol.

c. Pemeriksaan pH
Pemeriksaan pH dilakukan dengan menggunakan pH meter.
Dilakukan dengan cara sebagai berikut :
1) pH meter dikalibrasi dengan larutan pH 7,0 (dapar fosfat ekimolal)
dan pH 4,0 (dapar kalium biftalat).
2) Ditimbang ekstrak kental buah asam keranji sebanyak lebih kurang
0,1 gram, dilarutkan dalam 100 mL air suling pH 7,0 (1000 bpj)
3) Elektroda pH meter dicelupkan sehingga ujung elektroda tercelup
semua ke dalam larutan ekstrak asam keranji (supernatan) dan angka
digital menjadi stabil (tanda ready) siap untuk dibaca.
4) pH dicatat.

d. Kadar air
Penetapan kadar air dilakukan dengan alat Karl Fischer, dimasukkan
sejumlah ± 50 mg bahan. Kadar air akan terdeteksi oleh alat dan pereaksi
Karl Fischer.

6. Penetapan Kadar Flavonoid Total

a. Pereaksi
Larutan HMT : Larutan heksametilentetramin 0,5% b/v
Larutan asam asetat glacial 5% v/v dalam methanol P
Larutan alumunium klorida : Larutan alumunium klorida 2% dalam asam
asetat glacial P
b. Metode
Larutan uji : Ditimbang seksama sejumlah 200 mg simplisia atau ekstrak
yang setara dengan 200 mg serbuk simplisia, dimasukkan ke dalam labu
alas bulat, ditambahkan berturut-turut 1 mL larutan HMT, 20 mL aseton
 57

P dan 2 mL larutan asam klorida P, direfluks selama 30 menit, disaring

dan dicampur filtrat ke dalam labu tentukur 100 mL. Direfluks kembali
residu dengan 20 mL aseton P selama 30 menit, disaring dan dicampur
filtrat ke dalam labu tentuur 100 mL. Ditambahkan aseton P sampai tanda.
Dipipet 20 mL ke dalam corong pisah, ditambahkan 20 mL air dan
diekstraksi 3 kali, tiap kali menggunakan 15 mL etil asetat P. Dimasukkan
fase etil asetat dalam labu tentukur 50 mL ditambahkan etil asetat P
sampai tanda.
Eceran larutan uji : Pipet 10 mL larutan uji ke dalam labu tentukur 25
mL, ditambahkan larutan asam asetat glacial 5% v/v dalam methanol P
sampai tanda.
Larutan uji dengan latutan alumunium klorida : Pipet 10 mL larutan uji
ke dalam labu tentukur 25 mL, ditambahkan 1 mL larutan alumunium
klorida dan methanol sampai tanda.
Larutan pembanding tanpa larutan alumunium klorida : Larutan
pembanding flavonoid 0,1 % dalam etil asetat P. Dibuat pengenceran
hingga diperoleh serapan yang endekati serapan larutan uji.

7. Pengujian antioksidan menggunakan metode DPPH

Pengujian aktivitas antioksidan pada Ekstrak daging buah asam Kranji
(Dialium indum L.) dilakukan berdasarkan prosedur Molyneux (2004),
Rahmawan (2013) dan Ahmad et al (2012).

8. Penentuan aktivitas antioksidan ekstrak daging buah Asam Keranji

a. Optimasi panjang gelombang maksimum
Dipipet 1 mL larutan DPPH, dilarutkan menggunakan metanol pro analisis
pada labu tentukur 5 mL, inkubasi selama 30 menit pada inkubator bersuhu
37°C. Ukur menggunakan Spektrofotometri UV-Vis pada panjang
gelombang yang memberikan serapan maksimum.
b. Optimasi waktu inkubasi
 58

Dipipet larutan sampel sebanyak 10 µL, ditambahkan 1 mL larutan DPPH

dilarutkan menggunakan metanol pro analisis pada labu tentukur 5 mL,
inkubasi selama 20-40 menit pada inkubator bersuhu 37°C. Ukur
menggunakan Spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang yang
memberikan serapan maksimum. Pengukuran dilakukan untuk
mengetahui waktu inkubasi yang memberikan serapan terbaik.
c. Pembuatan larutan DPPH (0,4 mM)
DPPH ditimbang lebih kurang 4 mg (BM = 394,32), lalu dilarutkan dengan
metanol pro analisis dalam labu tentukur 25 mL sampai batas tanda,
ditempatkan di botol gelap. Wadah dilindungi dari cahaya dengan melapisi
menggunakan kertas alumunium. Larutan dibuat setiap kali pemakaian.
d. Pembuatan larutan blangko
Dipipet 1 mL larutan DPPH (0,4 mM) kedalam tabung reaksi yang telah
ditara 5 mL, lalu ditambahkan metanol hingga tanda, kemudian
dihomogenkan. Mulut tabung ditutup alumunium foil.
e. Pembuatan larutan uji
Sampel ekstrak daging buah (pulp) asam Kranji (Dialium indum L.)
ditimbang sebanyak 10 mg lalu dilarutkan dalam metanol pro analisis
sambil diaduk dan dihomogenkan ad 10,0 mL, larutan ini merupakan
larutan induk (1000 bpj). Setelah itu, dilakukan pengenceran, masing-
masing larutan induk dipipet sebanyak 375, 500, 625, 750, dan 875 μL ke
dalam tabung reaksi yang telah ditara 5,0 mL. Kedalam masing-masing
tabung ditambahkan 1,0 mL larutan DPPH dan ditambahkan dengan
metanol pro analisis sampai tanda lalu dihomogenkan, sehingga
didapatkan kosentrasi sampel 75, 100, 125, 150, dan 175 μg/mL.
Pembuatan larutan uji dilakukan sebanyak tiga kali (triplo).
f. Pembuatan larutan vitamin C sebagai kontrol positif
Vitamin C ditimbang saksama lebih kurang 10 mg vitamin C dan
dilarutkan dalam metanol pro analisis sampai 10,0 mL sehingga diperoleh
larutan induk 1000 bpj. Larutan tersebut merupakan larutan induk. Lalu
larutan tersebut dipipet dan ditambahkan metanol pro analisis sampai
 59

tanda hingga didapatkan konsentrasi akhir 1 bpj, 2 bpj, 3 bpj, 4 bpj, dan 5
bpj yang selanjutnya digunakan dalam pengukuran aktivitas antioksidan.
Pembuatan kontrol positif vitamin C dilakukan sebanyak tiga kali (triplo).
g. Pengukuran serapan
Masing-masing larutan didiamkan selama 35 menit pada suhu 37°C
terlindung dari cahaya. Lakukan pengukuran serapan pada panjang
gelombang 516,5 nm menggunakan Spektrofotometri UV-Vis.
Pengukuran dilakukan sebanyak tiga kali, prosedur yang sama juga
dilakukan terhadap pembanding.
h. Perhitungan
i. Presentasi inhibisi terhadap radikal bebas DPPH dari masing-masing
konsentrasi larutan sampel dapat dihitung dengan rumus:
𝐴−𝐵
% inhibisi = 𝑥 100
𝐴

Keterangan :
A = Serapan kontrol (pelarut + DPPH)
B = Serapan larutan uji (pelarut + DPPH + sampel)
Nilai IC50 (Inhibitor Consentration 50%) menyatakan besarnya
konsentrasi larutan sampel (daging buah asam ataupun antioksidan
pembanding kuersetin) yang dapat meredam radikal bebas DPPH sebesar
50%. Dihitung dengan menggunakan persamaan regresi persentase
inhibisi (Ahmad, et al., 2012). Diperoleh dari kurva hubungan antara
konsentrasi (sebagai sumbu x) dan % inhibisi (sebagai sumbu y),
kemudian dimasukkan ke persamaan y = a + bx, dimana nilai y = 50 dan
nilai x akan menunjukkan nilai IC50.

9. Pemeriksaan Bahan Tambahan

Pemeriksaan bahan tambahan NLC dan gel NLC yang terdiri dari asam
stearat, Carbomer 940, Trietanolamin, Metilparaben, Propilparaben,
Propilenglikol, Parfum, dan Air murni dilakukan pemeriksaan berdasarkan
yang tertera pada masing-masing bahan.
 60

10. Pembuatan Nanostructured Lipid Carriers (NLC) Ektrak Buah Asam

Keranji Dengan Metode Evaporasi Pelarut

Tabel IV 1. Tabel Formula NLC Ekstrak Asam Kranji

(%b/v)
BAHAN
Formula

Ekstrak etanol 96% Buah Asam x

Keranji
Asam stearat 1

Virgin coconut oil 1

Tween 80 7

Span 80 7

Aseton 7

Air Murni Ad 80 ml

Ket :
x = IC50 x blabla
Ditimbang bahan-bahan yang akan digunakan. Dilebur lemak padat (asam
stearat), minyak lemak (Virgin Coconut Oil) di atas waterbath pada suhu 85ºC,
ditambahkan ekstrak etanol 96% buah Dialium indum yang telah dilarutkan
dengan aseton (massa 1). Dipanaskan air murni dan surfaktan (Tween 80) pada
suhu 85ºC (massa 2). Dimasukkan massa 1 ke dalam campuran massa 2
dengan dihomogenkan menggunakan magnetik stirrer pada kecepatan 600
rpm. Dihomogenkan kembali dengan ultra turrax pada kecepatan 24.000 rpm
selama 15 menit dan dijaga pada suhu 60ºC, kemudian hasil nanopartikel
didinginkan dengan air pada suhu 2-5ºC sambil diultra turrax dan dihasilkan
nanopartikel. Nanopartikel yang terbentuk kemudian dilakukan karakterisasi
Nanostructured Lipid Carriers (NLC).
 61

11. Karakterisasi Nanostructured Lipid Carriers (NLC)

a. Ukuran partikel dan Indeks polidispersitas
Ukuran partikel dan Indeks polidispersitas menggunakan Particle Size
Analyzer (PSA). Analisis ukuran partikel dilakukan dengan teknik
Dynamic Light Scattering (DLS) menggunakan alat Malvern. Sebelum
pengukuran sejumlah 2 tetes sampel NLC diencerkan dengan 20 mL air
suling untuk mengahsilkan intensitas hamburan yang sesuai. Dynamic
Light Scattering (DLS) menghasilkan diameter hidrodinamis (diameter
rata-rata, z-average) dan indeks polidispersitas sebagai tolak ukur dalam
distribusi ukuran partikel. Diameter rata-rata dan indeks polidispersitas
sampel yang di teliti diperoleh dari rata-rata tiga pengukuran pada sudut
173° dalam sel polystyrene plastik sekali pakai diameter 10 mm, semua
percobaan dilakukan pada suhu 25°C.
b. Zeta potensial
Zeta potensial menggunakan zetasize dispersi NLC ditentukan oleh
pengukuran mobilitas elektroforesis. Sejumlah sediaan sampel NLC
dimasukan ke dalam kuvet khusus yang terdapat elektroda (2 tetes sampel
NLC ditambahkan 20 mL air suling) lalu zeta potensial dari NLC diukur
dengan menggunakan Zetasizer 2000 (Malvern, UK)
c. Morfologi Partikel dengan Scanning Electron Microscopy (SEM).
Sebanyak 10µ sampel diteteskan diatas grid tembaga kemudian
ditambahkan 10µ uranil asetat dan dikeringkan pada suhu ruang selama 15
menit. Dilakukan identifikasi morfologi nanopartikel dengan SEM.

12. Formulasi Gel NLC Ekstrak Buah Asam Keranji

Tabel IV 2. Tabel Formula Gel NLC Ekstrak Asam Kranji

Bobot % (b/v)
Bahan

NLC Ekstrak Etanol 96% 80

Buah Asam Keranji
 62

Carbomer 940 0,3

Trietanolamin 0,3

Propileneglikol 5

Metil paraben 0,01

Propilparaben 0,01
Parfum 0,1
Air murni Ad 100 mL

13. Pembuatan Sediaan Gel NLC Ekstrak Buah Asam Keranji

a. Ditimbang bahan-bahan yang akan digunakan (Karbomer 940,
trietanolamin, propilenglikol, metil paraben, propil paraben, dan NLC
ekstrak buah asam keranji).
b. Didispersikan Carbomer 940 kedalam air murni sebanyak 30 kali dari
bobotnya. Ditambahkan sedikit demi sedikit trietanolamin sambil
dihomogenkan dengan homogenizer sampai terbentuk basis gel (massa
1).
c. Ditambahkan NLC ekstrak buah asam keranji sedikit demi sedikit
kedalam massa 1.
d. Ditambahkan propilenglikol, metil paraben, propil paraben, air murni
yang tersisa, dan parfum kemudian dihomogenkan dengan magnetic
stirrer dengan kecepatan 300 rpm dan selama 15 menit merujuk pada
penelitian sebelumnya.

14. Evaluasi Sediaan Gel

a. Evaluasi fisik meliputi :
1) Pemeriksaan organoleptik
Pemeriksaan organoleptik sediaan meliputi warna, bau, dan tekstur
diamati secara visual selama penyimpanan.
2) Pemeriksaan homogenitas gel
 63

Sediaan gel bisa dilihat homogenitasnya dengan cara sediaan serum

tersebut dioleskan di atas kaca objek dikatupkan dengan kaca objek
lain, lalu diamati apakah serum yang dibuat homogen atau tidak.
3) Pemeriksaan viskositas dan sifat alir
Pemeriksaan viskositas dilakukan dengan menggunakan
viskometer Stormer. Sejumlah gel dimasukkan dalam wadah
dengan batas yang ditentukan lalu wadah diputar dengan kecepatan,
kemudian letakkan beban dimulai dari beban yang paling kecil.
Dihitung waktu yang dibutuhkan hingga 50 putaran, jika waktu
yang dibutuhkan kurang dari 30 detik maka putaran dinaikkan
menjadi 100 apabila waktu yang dibutuhkan lebih dari 60 detik
maka beban ditambahkan. Untuk menentukan sifat alir dilakukan
dengan menaikkan 3 titik beban dan 2 titik beban turun. Sifat alir
ditentukan dengan menghubungkan beban (g) dengan rpm sesuai
dengan data yang diperoleh kemudian diplotkan pada kertas grafik
antara beban (x) dan kecepatan rpm (y) kemudian ditentukan sifat
alirnya.
Viskositas dapat dihitung dengan menggunakan rumus :
Viskositas (η) : skala x factor perkalian(cPs)
Gaya (F) : skala x Kv (dyne/cm2)
Diketahui Kv : 7.187,00 (dyne/cm2)
b. Evaluasi kimia : Pemeriksaan pH
Pemeriksaan pH dilakukan dengan menggunakan pH meter :
1) pH meter dikalibrasi dengan menggunakan larutan dapar pH 7
(dapar fosfat ekimolal) dan pH 4 (dapar kalium biftalat).
2) Disiapkan gel yang akan diperiksa.
3) pH meter yang telah dicuci dan dibilas dengan air suling sedemikian
rupa, dicelupkan ke dalam sediaan serum yang akan diuji sehingga
ujung elektroda pengukuran tercelup semua dan angka digital
menjadi stabil untuk dibaca, kemudian pH yang didapat dicatat.
 64

c. Uji aktivitas antioksidan sediaan gel dengan metode peredaman radikal

bebas DPPH (1,1-difenil-2-pikrihidrazil)
1) Pembuatan larutan DPPH (0,4 mM)
DPPH ditimbang lebih kurang 4 mg (BM = 394,32), lalu dilarutkan
dengan metanol pro analisis dalam labu tentukur 25 mL sampai batas
tanda, ditempatkan di botol gelap. Wadah dilindungi dari cahaya
dengan melapisi menggunakan kertas alumunium. Larutan dibuat
setiap kali pemakaian.
2) Pembuatan larutan blangko
Dipipet 1 mL larutan DPPH (0,4 mM) kedalam tabung reaksi yang
telah ditara 5 mL, lalu ditambahkan metanol hingga tanda, kemudian
dihomogenkan. Mulut tabung ditutup alumunium foil.
3) Pembuatan larutan uji
Ditimbang saksama setara 10 mg sediaan gel ekstrak buah asam
Kranji (Dialium indum L.) kemudiaan dilarutkan dalam metanol pro
analisis sambil diaduk dan dihomogenkan ad 10,0 mL, larutan ini
merupakan larutan induk (1000 bpj). Setelah itu, dilakukan
pengenceran, masing-masing larutan induk dipipet sebanyak 500,
750, 1000, 1250, dan 1500 μL ke dalam tabung reaksi yang telah
ditara 5,0 mL. Kedalam masing-masing tabung ditambahkan 1,0 mL
larutan DPPH dan ditambahkan dengan metanol pro analisis sampai
tanda lalu dihomogenkan, sehingga didapatkan kosentrasi sampel
100, 150, 200, 250, dan 300 μg/mL. Pembuatan larutan uji dilakukan
sebanyak tiga kali (triplo).
4) Pengukuran serapan sediaan
Masing-masing larutan didiamkan selama 35 menit pada suhu 37°C
terlindung dari cahaya. Lakukan pengukuran serapan pada panjang
gelombang 516,5 nm menggunakan Spektrofotometri UV-Vis.
5) Perhitungan
Presentasi inhibisi terhadap radikal bebas DPPH dari masing-masing
konsentrasi larutan sampel dapat dihitung dengan rumus:
 65

𝐴−𝐵
% inhibisi = 𝑥 100
𝐴

Keterangan :
A = Serapan kontrol (pelarut + DPPH)
B = Serapan larutan uji (pelarut + DPPH + sampel)
Nilai IC50 (Inhibitor Consentration 50%) menyatakan besarnya
konsentrasi larutan sampel (daging buah asam ataupun antioksidan
pembanding kuersetin) yang dapat meredam radikal bebas DPPH
sebesar 50%. Dihitung dengan menggunakan persamaan regresi
persentase inhibisi (Ahmad, et al., 2012). Diperoleh dari kurva
hubungan antara konsentrasi (sebagai sumbu x) dan % inhibisi
(sebagai sumbu y), kemudian dimasukkan ke persamaan y = a + bx,
dimana nilai y = 50 dan nilai x akan menunjukkan nilai IC50.

15. Analisa Data

Hasil evaluasi mutu fisik dilakukan analisis dengan menggunakan analisa
variansi (ANOVA) satu arah denagn taraf nyata p = 0,05.
a. Hipotesis nol (H0) : tidak ada perbedaan bermakna
b. Hipotesis alternatif (H1) : ada perbedaan bermakna
Langkah berikutnya adalah dengan menghitung nilai P-value yang
kemudian dibandingkan dengan P tabel yang mempunyai konvidensi 95%
atau P=0,005. Jika P-value > P tabel, maka H0 ditolak apabila H1 diterima
yang berarti menunjukkan terdapat perbedaan bermakna. Jika P-value < P
tabel, maka H0 diterima dan H1 ditolak yang berarti menunjukkan tidak ada
perbedaan bermakna.
 66

BAB V
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Penyediaan Bahan Penelitian

1. Determinasi Tanaman
Determinasi Asam Keranji (Dialium indum L.) dilakukan di Herbarium
Borgoriense, Puslitbang, LIPI, Bogor dapat dilihat pada lampiran … . Hasil
determinasi menunjukkan bahwa tanaman yang digunakan sebagai bahan
penelitian adalah Asam Kranji (Dialium indum L.)
2. Penyediaan Simplisia Buah Asam Keranji
3. Pembuatan Ekstrak Daging Buah Asam Keranji
Proses ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi kinetik pada suhu
kamar menggunakan pelarut etanol 96%. Dengan ditimbangnya serbuk
Dialium indum L. sebanyak 686,9979 gram yang kemudian dimaserasi
kinetik dengan etanol 96%. Dilakukan remaserasi sebanyak enam kali dengan
total pelarut etanol 96% sebanyak 7,45 liter. Maserat yang didapat kemudian
dipekatkan dengan menggunakan vakum rotavapor dengan suhu ±40ºC,
kecepatan 35 rpm dan tekanan vakum 175 mmHg. Hasil ekstraksi yang
diperoleh dapat dilihat pada table V.1 dan perhitungan hasil ekstrak Dialium
indum L. dapat dilihat pada lampiran 14.
Tabel V.1 Hasil ekstraksi, DER-native, dan rendemen
Berat simplisia Jumlah ekstrak
DER-native Rendemen(%)
(g) (g)

686,9979 84,3909 5,98 16,73

Metode ekstraksi dengan cara maserasi kinetic dipilih karena metode

ini mudah dan sederhana, selain itu juga aman bagi senyawa metabolit
sekunder yang tidak tahan panas karena dilakukan pada suhu kamar. Etanol
96% digunakan karena merupakan pelarut polar yang baik untuk menarik
senyawa metabolit sekunder yang bersifat polar dalam Dialium indum L.,
 67

selain itu etanol 96% juga lebih mudah untuk di evaporasi sehingga mudah
didapatkan ekstrak kental.

4. Karakterisasi Ekstrak Buah Asam Keranji

a. Organoleptik
b. Uji ketercampuran pelarut
c. Pemeriksaan pH
d. Kadar air
5. Penetapan Kadar Flavonoid Total
Penetapan kadar flavonoid total dilakukan di Laboratorium Kimia
Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Pasca Panen Bogor. Hasil
penetapan kadar flavonoid total dapat dilihat lampiran ….. Hasil penetapan
kadar flavonoid total menunjukkan bahwa kadar flavonoid total yang
terkandung dalam ekstrak Asam Keranji adalah sebesar …. %.
6. Pengujian Antioksidan menggunakan Metode DPPH
7. Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daging Buah Asam Keranji
B. Pemeriksaan Bahan Tambahan
C. Karakterisasi Nanostructured Lipid Carriers (NLC)
D. Formulasi Gel NLC Ekstrak Buah Asam Keranji
E. Pembuatan Sediaan Gel NLC Ekstrak Buah Asam Keranji
F. Evaluasi Sediaan Gel
G. Analisa Data
 68

DAFTAR PUSTAKA

1. Sari, Ayu Nirmala. Antioksidan Alternatif untuk Menangkal Bahaya Radikal

Bebas pada Kulit. Elkawnie: Journal of Islamic Science and Technology Vol. 1,
No. 1, Juni 2015.
2. Efrilia Tanjung, Muhammad Hafidz MS, Iskandar Thalib, Eko Suhartono.
Evaluation of Antioxidant Activity of Some Selected Tropical Fruits in South
Kalimantan, Indonesia. The Journal of Tropical Life Science Vol. 4, No. 3, pp.
210-215, November, 2014.
3. Latarissa, Irma Rahayu, dan Patihul Husni. Review Artikel: Aplikasi Teknologi
Nanopartikel Pada Sediaan Kosmetik. Farmaka: Suplemen Volume 14, Nomor 1.
4. https://dubaibiznis.weebly.com/store/p1/Asam_Keranji_(Per_Kg).html diakses
pada tanggal 12 Desember 2018 pukul 01.11 WIB
5. www.warintek.hol.es/artikel/ttg_tanaman_obat/depkes/buku4/4-029.pdf diakses
pada tanggal 5 Oktober 2018 pukul 20.39
6. http://www.asianplant.net/Fabaceae/Dialium_indum.htm diakses pada tanggal 5
Oktober 2018 pukul 20.57
7. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. 1997. Inventaris Tanaman Obat
Indonesia IV. Jakarta: Departemen Kesehatan.
8. Widodo, M.A. 1997. Xenobiotik dan Radikal Bebas pada Patogenesa Penyakit
Paru. Di dalam Soeatmaji J.W. et. al. Proceedings Simposium Radikal Bebas dan
Patogenesa Penyakit. Malang: Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya.
9. Droge W. 2002. Free Radicals in the Physiological Control of Cell Function.
NCBI. 82(1):47-95.
10. Kartika, Profil Kimiawi dari Formulasi Ekstrak Meniran, Kunyit, dan Temulawak
Berdasarkan Aktivitas Antioksidan Terbaik. skripsi, (Bogor : Institut Pertanian
Bogor, 2010) hlm.13.
11. Boer, Y. 2000. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Buah Kandis (Garcinia
parvifolia Miq). Jurnal Matematika dan IPA 1. (1): 26-33.
 69

12. Wulansari, Anisa Nur. Alternatif Cantigi Ungu (Vaccinium varingiaefolium)

sebagai Antioksidan Alami. Farmaka: Suplemen Volume 16, Nomor 2.
13. Azwin Apriandi, Aktivitas Antioksidan dan Komponen Bioaktif Keong Ipong-
Ipong (Fasciolaria salmo), skripsi, (Bogor : Institut Pertanian Bogor, 2011) hlm.18.
14. Winarsi, Hery. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta:
Kanisius. Hal. 79-81 ; 189-90.
15. Triyem, Aktivitas Antioksidan dari Kulit Batang Manggis Hutan (Garcinia cf.
bancana Miq), tesis, (Jakarta: Universitas Indonesia, 2010), hlm. 21.
16. Rieger, Martin M. 2000. Harry’s Cosmeticology Eight Edition. New York:
Chemical Publishing Co Inc.
17. Tranggono, Retno Iswari dan Fatma Latifah. 2007. Buku Pegangan Ilmu
Pengetahuan Kosmetik. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama.
18. Shailesh L. Patwekar, et al. Nanostructured Lipid Carriers in Stability
Improvement for Cosmetic Nanoparticles. International Journal of Pharmacy and
Pharmaceutical Research. Vol. 6, Issue. 1, April 2016.
19. Severino, P., Santana, M. H. A., & Souto, E. B. 2012. Optimizing SLN and NLC

by 22 full factorial design: Effect of homogenization technique. Materials Science

and Engineering: C, 32 (6), 1375–1379.
20. Fardin Tamjidi, Mohammad Shahedi, Jaleh Varshosaz, Ali Nasirpour.
Nanostructured lipid carriers (NLC): A potential delivery system for bioactive food
molecules Innovative Food Science and Emerging Technologies 19 (2013) 29–43.
21. Hu, F. Q., Yuan, H., Zhang, H. H., & Fang, M. (2002). Preparation of solid lipid
nanoparticles with clobetasol propionate by a novel solvent diffusion method in
aqueous system and physicochemical characterization. International Journal of
Pharmaceutics, 239(1–2), 121–128.
22. Shah MR, Imran M, Ullah S. Lipid-based Nanocarriers for Drug Delivery and
Diagnosis. Elsevier. 2017.
23. Yadav, Hemant K.S., Nagavarma B V N, Ayaz A, Vasudha L.S., Shivakumar H.G,
(Review Article) Different Techniques For Preparation Of Polymeric
Nanoparticles, Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, Vol. 5,
Suppl 3. 2012. h.16-23.
 70

24. Pal, Sovan Lal, Utpal Jana, dkk. Nanoparticle: An overview of preparation and
characterization, Journal of Applied Pharmaceutical Science 01 (06); 2011. h. 228-
234.
25. Agoes, Goeswin. 2012. Sediaan Farmasi Likuida-Semisolida. Bandung: Penerbit
ITB.
26. Kaur LP, Guleri KT. Topical Gel: A recent approach for novel drug delivery. Asian
J Bio Phar Sci. 2013;3(17). h.1-5.
27. Kikuzaki, H., Hisamoto, M., Hirose, K., Akiyama, K., and Taniguchi, H., 2002,
Antioxidants Properties of Ferulic Acid and Its Related Compound, J.Agric.Food
Chem, 50, 2161-2168.
28. Molyneux, P. 2003. The use of the stable free radikal diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH) for estimating antioxidant activity. Journal Science of Technology. 26 (2):
211-219.
29. Hanani, E, Mun’im A, Sekarini, R, dan Wiryowidagdo, S. Uji aktivitas antioksidan
beberapa spons laut dari kepulauan Seribu, Jurnal Bahan Alam Indonesia, vol 5,
no.1 Jan 2006 (in Press).
 LAMPIRAN
Lampiran 1. Skema Kerja Penelitian Umum
Bahan Tambahan

Serbuk Dialium indum L. Formulasi Formulasi

NLC basis gel

Uji aktivitas
Pembuatan ekstrak
antioksidan

Karakteristik awal Ekstrak

nanopartikel
1. Ukuran
Pembuatan NLC ekstrak
partikel
Dialium indum L.
2. Zeta potensial Optimasi

3. Indeks
Formulasi sediaan gel
polidispersitas
NLC ekstrak Dialium
4. Morfologi Uji aktivitas
indum L.
nanopartikel antioksidan
5. Pola difraksi Evaluasi fisik
sinar X Sediaan gel NLC
1. Pemeriksaan
6. Pemindaian ekstrak Dialium
organoleptik (warna,
kolorimetri indum L.
bau, dan kejernihan)
diferensial 2. Pemeriksaan
(DSC) homogenitas
Pengemasan
3. Pemeriksaan
viskositas dan sifat
alir

Evaluasi kimia : uji pH

69
 Lampiran 2. Skema Kerja Pembuatan Nanostructured Lipid Carriers (NLC)
ekstrak buah Asam Keranji (Dialium indum L.)

PEMBAWA EMULGATOR
(Lemak padat dan Lemak Cair)

OPTIMASI

Pembuatan Nanostructured Lipid

Ekstrak Buah Asam
Carriers (NLC) dengan metode
Kranji (Dialium indum L.)
evaporasi pelarut

Nanostructured Lipid Carriers

(NLC)

Karakteristik
1. Ukuran partikel
2. Zeta potensial
3. Indeks polidispersitas
4. Morfologi nanopartikel
5. Pola difraksi sinar X
6. Pemindaian kolorimetri diferensial (DSC)

Nanostructured Lipid Carriers

(NLC) Ekstrak Buah Asam
Kranji (Dialium indum L.)

70
Lampiran 3. Skema Kerja Pembuatan Gel Nanostructured Lipid Carriers (NLC)
ekstrak buah Asam Keranji (Dialium indum L.)

Nanostructured Lipid Carriers (NLC) Ekstrak

Buah Asam Kranji (Dialium indum L.)

Formulasi Gel

Pembuatan gel dengan

gelling agent Carbomer 940

Evaluasi Sediaan Gel Nanostructured Lipid Carriers (NLC) Ekstrak

Buah Asam Kranji (Dialium indum L.) secara Fisika maupun Kimia

Evaluasi fisik
1. Pemeriksaan organoleptik
(warna, bau, dan
kejernihan)
2. Pemeriksaan homogenitas
3. Pemeriksaan viskositas
dan sifat alir

Evaluasi kimia : uji pH

Gel

Uji Aktivitas Antioksidan

71
 Lampiran 4. Skema Kerja Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
pada Vitamin C Sebagai Kontrol Positif

Vitamin C BPFI
Ditimbang saksama ± 10 mg,
dilarutkan dalam 10,0 ml metanol pro analisis
Larutan induk vitamin C 1000 bpj

Dipipet

5 μL 10 μL 15 μL 20 μL 25 μL

+ 1,0 mL larutan DPPH 0,4 mM

+ metanol pro analisis hingga 5,0 mL

1 bpj 2 bpj 3 bpj 4 bpj 5 bpj

Diinkubasi pada 37 ºC sesuai OT & diukur pada λmaks

Serapan

% Peredaman radikal bebas

y = a + bx

IC50

72
 Lampiran 5. Pengujian Antioksidan Ekstrak Asam Kranji dan Gel NLC Asam
Kranji

Ekstrak kental Gel NLC ekstrak buah asam

(etanol 96%) kranji (Dialium indum L.)

Ditimbang 10 mg Ditimbang setara dengan

ekstrak, dilarutkan dalam 10 mg, dilarutkan dalam
10 mL metanol p.a 10 mL metanol p.a

Larutan uji 1000 bpj Larutan uji 1000 bpj

Dipipet Dipipet

375 500 625 750 875 500 750 1000 1250 1500
µl µl µl µl µl µl µl µl µl µl

Ditambahkan I mL DPPH dan ditambahkan metanol ad 5 mL

75 100 125 150 175 100 150 200 250 300

ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm

Di inkubasi selama 35 menit

Diukur serapan pada panjang gelombang 516,5 nm

Hitung % inhibisi (hambatan)

73