08.

20 |

Nama : Hery Rudiyansyah

Kelas : 1reguler

NIM : 12340019

Hari/Tanggal : Rabu/26 September 2012

Materi : Pembuatan larutan cat gram A,B,C,dan D

Tujuan : Mengetahui komposisi dan cara pembuatan cat gram A, B, C, dan D.

Prinsip kerja :

 1.Cat Gram A: Penimbangan-Penggerusan-Pelarutan-Penyaringan-Penempata-

Pelabelan-Penyimpanan.
 1.Cat Gram B: Penimbangan-Penggerusan-Pelarutan-Penyaringan-Penempata-
Pelabelan-Penyimpanan.
 1.Cat Gram C: pengukuran-Penempata-Pelabelan-Penyimpanan.
 1.Cat Gram D: Penimbangan-Penggerusan-Pelarutan-Penyaringan-Penempata-
Pelabelan-Penyimpanan.

Dasar Teori:

1. Cat Gram A

Berwarna ungu karena mngandung kristal violet. Cat gram A merupakan cat primer
yang akan memberikan warna mikroorganisme target.Semua mikroorganisme akan
berwarna ungu sesuai cat warna cat gram A.

Koposisi:

         Kristal violet                : 2 gram

         Alkohol 95%               : 20 ml

         Aquadest                     : 80 ml

         Amonium oksalat         : 0,8 gram

2. Cat Gram B
Cat gram B berwarna coklat. Cat ini merupakan cat mordan, yaitu cat/ bahan kimia
yang berfungsi memfiksasi cat primer yang diserap mikroorganisme target.
Pengikatan warna oleh bakteri akan lebih baik (lebih kuat) .
 Komposisi cat gram B :

         Iodium              :1 gram

         Kalium iodida   : 2 gram

         Aquadest          : 300ml

3. Cat gram C
Cat gram ini tidak berwarna / bening. Berfungsi untk melunturkan warna cat
sebelumnya .akibat pemberian warna tersebut           :

a.      Mikroorganisme (bakteri) akan tetap berwarna ungu, karena tahan terhadap
alkohol, ikatan antar cat dengan bakteri tidak dilunturkan dengan alkohol.bakteri yang
demikian dinamakan bakteri gram positif

b.      Mikroorganisme akan tidak berwarna, karena tidak tahan terhadap alkohol. Ikatan
antara cat dengan bakteri dilunturkan oleh alkohol. Bakteri yang bersifat demikian
dinamakan bakteri gram negatif.

Komposisi cat gram C :

         Aceton             : 50 ml

         Alkohol 95%    : 50 ml

4. Cat Gram D
Merupakan cat skunder atau kontras. Cat ini berwarna merah berfungsi sebagai
pemberi warna mikroorganisme non target.Cat Skunder mempunyai spektrum warna
yang  berbeda dari cat primer.
Akibat pemberian cat gram D            :

a. Bakteri gram positif akan tetap berwarna ungu karena tidak jenuh mengikuti
cat gram A sehingga tidak mampu lagi mengikat cat gram D.
b. Bakteri gram negatif berwarna merah karena cat sebelumnya telah dilunturkan
oleh cat gram C, maka akan mampu mengikat cat gram D.

Komposisi cat gram D :

         Safranin O                   : 0,25 gram

         Alkohol 95%                : 10 ml

         Aquadest                     : 90 ml

Alat dan bahan            :

 1.      Alat      :
a. Gelar beaker
b.   Corong
c. Gelas ukur mortar
d. Stampler
e.  Kertas saring
f. Kertas timbang
g. Label
h. Neraca
2. Bahan  :
a. Safranin O
b. Aceton
c. Alkohol 95%
d. Aquadest
e. Kalium iodide
f. Iodium
g. Kristal violet
h. Amonium oksalat

Cara Kerja       :
1.Cat Gram A

          Disiapkan alat dan bahan

          Tobang kristal violet sebanyak 2 gram menggunakan kertas timbang pada neraca
          Amonium oksalat di timbang sebanya 0,8 gram
          Kristal violet dan amonium oksalat di campur ke dalam mortir dan dihaluskan
menggunakan stampler
          Tambahkan 80 ml aquadest dan 20 ml alkohol 95% kedalam mortir
          Aduk hingga merata
           Masukkan larutan ke dalam botol reagen menggunakan corong yang telah
dilapisi kertas saring
          Tutup, beri label, dan simpan botil reagen
          Keringkan kertas saring
          Setelelah proses selesai, cuci alat-alat yang telah dipakai dan simpan kembali

2.Cat Gram B

          Disiapkan alat dan bahan

          Timbang sebanya 1 gram iodium menggunakan neraca yang telah dilapisi kertas
timbang
          Timbang sebanyak 2 gram kalium iodida menggunakan neraca yang telah dilapisi
kertas timbang
          Campurkan iodium dan kalium iodida ke dalam mortir dan haluskan
menggunakan stampler
          Tambahkan 300 ml aquadest ke dalam mortir
          Aduk hinggal merat
          Masukkan larutan ke dalam botol reagen menggunakn corng yang telah di lapisi
kertas saring
           Tutup, beri label, dan simpan botol reagen
          Keiringkan kertas saring
          Setelah selesai proses, cuci alat-alat yang telah dipakai dan simpan kembali

3.Cat Gram C

          Disiapkan alat dan bahan

          Ukur lah sebanya 50 ml aceton menggunakan gelas ukur
          Ukurlah sebanyak 50 ml alkohol 95% menggunakan gelas ukur
          Campurkan keduanya kedalam botol reagen menggunakan corong
          Tutup, beri label, dan simpan botol reagen
          Setelah selesai proses, cuci alat-alat yang telah dipakai dan simpan kembali

4.Cat Gram D

          Disiapkan alat dan bahan

          Timbang 0,25 gram safranin O menggunakan neraca yang telah dilapisi kertas
timbang
          Masukkan safranin ke dalam mortir dan haluskan menggunakan stampler
          Tambahkan 10 ml alkohol 95% dan 90 ml aquadest ke dalam mortir
          Aduk hingga merata
          Masukkan larutan kedalam botol reagen menggunakan corong yang telah dilapisi
kertas saring.
          Tutup, beri label, dan simpan botol reagen.
          Keringkan kertas saring
          Setelah selesai proses, cuci alat-alat yang telah dipakai dan simpan kembali.

Hasil Pengamatan       :

Kesimpulan                 :

 1.      Cat gram A berwarna ungu karena mengandung kristal violet

 2.      Cat Gram B berwarna coklat karena mengandung iodium
 3.      Cat gram C tidak berwarna/bening
 4.      Cat Gram D berwarna merah karena mengandung safranin O

Daftar Pustaka                        :

                                                                                    Bandarlampung, 26 september 2012

Pembimbing                                                                            Praktikan
(Misbahul Huda, S.Si, M.Kes)                                                      (Hery Rudiyansyah)